棉酚的一種新應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，涉及棉酚的一種新應(yīng)用，尤其涉及棉酚在制備治療血吸蟲(chóng) 病的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 血吸蟲(chóng)病是由裂體吸蟲(chóng)屬血吸蟲(chóng)引起的一種慢性寄生蟲(chóng)病，主要流行于亞、非、拉 美的74個(gè)國(guó)家，估計(jì)目前有6. 52億人口受威脅，1. 93億感染者，有癥狀病例1. 2億。
[0003] 世界上共有埃及血吸蟲(chóng)、曼氏血吸蟲(chóng)、日本血吸蟲(chóng)、間插血吸蟲(chóng)、湄公血吸蟲(chóng)、馬來(lái) 血吸蟲(chóng)等6種寄生于人體的血吸蟲(chóng)。其中的日本血吸蟲(chóng)病目前主要流行于中國(guó)、菲律賓和 印度尼西亞，其傳播環(huán)節(jié)多、流行因素復(fù)雜，是所有人體血吸蟲(chóng)病中對(duì)健康危害最嚴(yán)重的血 吸蟲(chóng)病。
[0004] 日本血吸蟲(chóng)寄生在人或宿主動(dòng)物的血管內(nèi)，所產(chǎn)蟲(chóng)卵由糞便排出，在水中孵化出 毛蝴，感染中間宿主釘螺，在釘螺體內(nèi)發(fā)育成熟后大量逸放出尾蝴，尾蝴鉆入人或動(dòng)物宿 主，又發(fā)育成為成蟲(chóng)，交配產(chǎn)卵，引起病害。其中，可感染并傳播日本血吸蟲(chóng)的動(dòng)物宿主有 牛、豬、羊等40多種哺乳動(dòng)物。血吸蟲(chóng)病有急性、慢性之分。急性血吸蟲(chóng)病是在大量感染尾 蝴的情況下發(fā)生的，病人發(fā)病迅猛，可在短期內(nèi)發(fā)展成為晚期或直接進(jìn)入衰竭狀態(tài)，導(dǎo)致死 亡。慢性血吸蟲(chóng)病一般發(fā)展較慢，早期對(duì)體力有不同程度的影響，進(jìn)入晚期后則出現(xiàn)腹水、 巨脾、侏儒等癥，患者勞動(dòng)力喪失，甚至造成死亡。
[0005] 吡喹酮為吡嗪啉化合物，無(wú)色無(wú)臭結(jié)晶粉末。微溶于乙醇，不溶于水。對(duì)幼蟲(chóng)、童 蟲(chóng)及成蟲(chóng)均有殺滅作用。口服后容易從腸道吸收，于5/2小時(shí)左右血濃度達(dá)最高峰。體內(nèi) 分布以肝臟濃度最高，代謝產(chǎn)物于24小時(shí)內(nèi)從尿中排出。目前所用國(guó)產(chǎn)普通片和腸溶片， 各含藥物〇. 2及0. 05g。對(duì)急性血吸蟲(chóng)病臨床治療總藥量為120mg/kg，兒童為140mg/kg， 分4~6日服，每日2~3次，治愈率100%。對(duì)慢性與晚期病人，一療程總劑量成人60mg/ kg，兒童70mg/kg，分1~2日服每日3次。副作用少而輕，可有頭昏、乏力、出汗輕度腹疼 等。本藥具有高效，低毒、療程短的優(yōu)點(diǎn)，是目前用于抗血吸蟲(chóng)病的臨床一線(xiàn)藥物。
[0006] 棉酚是錦葵科植物草棉、樹(shù)棉或陸地棉成熟種子、根皮中提取的一種多元酚類(lèi)物 質(zhì)，最初是作為一種男性抗生育物質(zhì)被識(shí)別出來(lái)的，已被用作有效的男性避孕藥多年。它有 幾個(gè)臨床應(yīng)用前景；抗錐體蟲(chóng)，抗瘧疾，抗腫瘤和抗病毒、抑制包裹病毒，包括HIV。臨床試 驗(yàn)表明，棉酚作為腎上腺、前列腺癌和乳腺癌、膠質(zhì)瘤、子宮內(nèi)膜異位癥及子宮肌瘤等的治 療藥物也是有前途的（Hanetal，1987)。最近有證據(jù)表明，它可以影響細(xì)胞周期分布和細(xì) 胞周期調(diào)控因子，如人類(lèi)乳腺腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞周期蛋白Dl和Rb。但目前尚未見(jiàn)棉酚對(duì)血 吸蟲(chóng)具有殺傷作用的任何報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是提供棉酚的一種新應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0009] 棉酚在制備治療血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。
[0010] 棉酸優(yōu)選在制備治療感染日本血吸蟲(chóng)（Schistosomajaponicum)、曼氏血吸蟲(chóng) (S.mansoni)、埃及血吸蟲(chóng)（S.haematobium)、間插血吸蟲(chóng)（S.intercalatum)、湄公血吸蟲(chóng) (S.mekongi)或馬來(lái)血吸蟲(chóng)（S.malayensis)引起的血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。
[0011] 所述的棉酚選自棉酚或其對(duì)映體、外消旋混合物，或其與可藥用酸或堿的加成鹽； 所述的可藥用酸優(yōu)選醋酸，所述的可藥用堿優(yōu)選苯胺。
[0012] 有益效果：
[0013] 本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了棉酸具備殺殺滅日本血吸蟲(chóng)（Schistosomajaponicum)、曼氏 血吸蟲(chóng)（S.mansoni)、埃及血吸蟲(chóng)（S.haematobium)、間插血吸蟲(chóng)（S.intercalatum)、湄公 血吸蟲(chóng)（S.mekongi)或馬來(lái)血吸蟲(chóng)（S.malayensis)等各種血吸蟲(chóng)的活性，可以用于制備治 療血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 實(shí)施例1
[0015] 取500g棉仁，用2000ml濃度為70% (v/v)的丙酮在40°C下浸泡提取50min。然 后過(guò)濾，收集液體，并在40°C下真空濃縮至原體積的1/3。按照1:1的體積比加入冰醋酸， 室溫下置暗處?kù)o置結(jié)晶過(guò)夜。第二天過(guò)濾，置暗處晾干，得到2. 39g醋酸棉酚粗品。
[0016] 2g醋酸棉酚粗品，用40ml丙酮溶解，濾除不溶性雜質(zhì)，然后加入40ml冰醋酸，室溫 下置暗處?kù)o置結(jié)晶過(guò)夜，得到亮黃色針狀結(jié)晶。過(guò)濾，置暗處晾干，得到1.51g醋酸棉酚晶 體純品。
[0017] 經(jīng)HPLC-MS檢驗(yàn)，棉酚的純度達(dá)到99%以上。
[0018] 實(shí)施例2
[0019]將Img醋酸棉酚和吡喹酮分別溶于0? 4ml二甲亞砜（DMSO)，然后加入RPMI1640 溶媒，制備10, 25, 50, 100yM的醋酸棉酚溶液和吡喹酮溶液。
[0020] 取自小鼠（C57BL/6,雌性，22-24g，每只采集50尾血吸蟲(chóng)）的日本血吸蟲(chóng)幼蟲(chóng)用 pH被20mM的HEPES維持在7. 5并添加有青霉素（100UI/mL)，鏈霉素（lOOmg/mL)和10 %的 小牛血清（FBS，Gibco)的RPMI1640溶媒洗滌。洗滌后將血吸蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到24-孔培養(yǎng)板上，每 孔8-15尾成蟲(chóng)。每孔中添加2mL洗滌溶媒。然后將成蟲(chóng)在37°C，含有5%CO2的潮濕空氣 中，培養(yǎng)30至60min。然后加入不同濃度的醋酸棉酚（10, 25, 50, 100yM)溶液?？瞻讓?duì)照 組血吸蟲(chóng)用相同體積的RPMI1640溶媒或DMSO處理，陽(yáng)性對(duì)照組血吸蟲(chóng)用10, 25, 50, 100yM 的吡喹酮處理。寄生蟲(chóng)的活力，體態(tài)的變化和寄生蟲(chóng)的存活分別在24、48和72hrs時(shí)用倒 置顯微鏡（Leica，德國(guó)）觀察監(jiān)視。寄生蟲(chóng)的死亡的定義為連續(xù)觀察2min未見(jiàn)有活動(dòng)能 力，在加上形態(tài)學(xué)和體態(tài)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表1。
[0021] 表1各種化合物對(duì)體外培養(yǎng)的日本血吸蟲(chóng)的殺傷作用
[0022]
[0024] 注：1640為不加任何藥物的陰性對(duì)照；I%DMSO為加入最大濃度藥物時(shí)的DMSO濃 度；PZQ為吡喹酮在不同濃度時(shí)對(duì)成蟲(chóng)的殺傷作用，作為陽(yáng)性對(duì)照。
[0025] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，棉酚具有非常好的抗血吸蟲(chóng)活性。IOyM的醋酸棉酚72hrs內(nèi)的 日本血吸蟲(chóng)的殺滅率為50%，25yM的醋酸棉酚48hrs內(nèi)的日本血吸蟲(chóng)的殺滅率為100%， 50yM的醋酸棉酚24hrs內(nèi)的日本血吸蟲(chóng)的殺滅率為100%。相比之下，10-50yM的吡喹酮 72hrs內(nèi)的日本血吸蟲(chóng)的殺滅率僅為50% -66. 7%。說(shuō)明棉酚是比吡喹酮更有效的日本血 吸蟲(chóng)殺滅劑。
[0026] 實(shí)施例3
[0027] 按照實(shí)施例2的方法，考察實(shí)施例1制備的醋酸棉酚對(duì)曼氏血吸蟲(chóng)（S.mansoni)、 埃及血吸蟲(chóng)（S.haematobium)、間插血吸蟲(chóng)（S.intercalatum)、湄公血吸蟲(chóng)（S.mekongi)和 馬來(lái)血吸蟲(chóng)（S.malayensis)的活性，其中醋酸棉酸和吡喹酮的溶液的濃度均為50liM，每 組吸血蟲(chóng)條數(shù)為8條，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0028] 表 2
[0029]
[0031] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，棉酸對(duì)曼氏血吸蟲(chóng)（S.mansoni)、埃及血吸蟲(chóng)（S.haematobium)、 間插血吸蟲(chóng)（S.intercalatum)、湄公血吸蟲(chóng)（S.mekongi)和馬來(lái)血吸蟲(chóng)（S.malayensis)均 具有非常好的抗血吸蟲(chóng)活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 棉酚在制備治療血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于棉酚在制備治療感染日本血吸蟲(chóng) (Schistosoma japonicum)、曼氏血吸蟲(chóng)（S.mansoni)、埃及血吸蟲(chóng)（S. haematobium)、間插 血吸蟲(chóng)（S. intercalatum)、湄公血吸蟲(chóng)（S.mekongi)或馬來(lái)血吸蟲(chóng)（S.malayensis)引起的 血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述的棉酚選自棉酚或其對(duì)映體、外消 旋混合物，或其與可藥用酸或堿的加成鹽。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的可藥用酸為醋酸，可藥用堿為苯胺。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，涉及棉酚的一種新應(yīng)用，尤其涉及棉酚在制備治療血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了棉酚具備殺滅日本血吸蟲(chóng)(Schistosoma？japonicum)、曼氏血吸蟲(chóng)(S.mansoni)、埃及血吸蟲(chóng)(S.haematobium)、間插血吸蟲(chóng)(S.intercalatum)、湄公血吸蟲(chóng)(S.mekongi)或馬來(lái)血吸蟲(chóng)(S.malayensis)等各種血吸蟲(chóng)的活性，可以用于制備治療血吸蟲(chóng)病的藥物中的應(yīng)用。
【IPC分類(lèi)】A61K31/11, A61P33/12
【公開(kāi)號(hào)】CN105030741
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510397930
【發(fā)明人】湯魯宏, 余傳信, 楊菲菲
【申請(qǐng)人】江南大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年11月11日
【申請(qǐng)日】2015年7月8日