甘草酸提取物在制備治療牙齦炎藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及甘草酸提取物在制備治療牙齦炎藥物中的 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 甘草是豆科植物甘草、脹果甘草、或者光果甘草的干燥根莖，是臨床常用的中草藥 品種。
[0003] 甘草性甘、平，具有補(bǔ)脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥之功效。
[0004] 甘草含有多種化學(xué)成分，主要成分有甘草酸、甘草甙等。甘草的化學(xué)組成極為復(fù) 雜，目前為止從甘草中分離出的化合物有甘草甜素、甘草次酸、甘草甙、異甘草甙、新甘草 甙、新異甘草甙、甘草素、異甘草素以及甘草西定、甘草醇、異甘草醇、7-甲基香豆精、傘形花 內(nèi)酯等數(shù)十種化合物，但這些成分和數(shù)量通常會隨甘草的種類、種植區(qū)域、采收時間等因素 的不同而異。大量的研宄表明，甘草甜素和黃酮類物質(zhì)是甘草中最重要的生理活性物質(zhì)，主 要存在于甘草根表皮以內(nèi)的部分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一種甘草提取物，所述的甘草提取物是將甘草粉打粉后，在70%的 乙醇溶劑中超聲處理60分鐘得到，超聲功率為80W，超聲頻率為30kHz。
[0006] 優(yōu)選地，甘草粉與乙醇溶劑的料液比為1:10 (m/v)。
[0007] 同時，本發(fā)明還公開了甘草提取物中甘草酸含量的測定方法，所述的測定方法是 用紫外分光光度法檢測其在252波長處的吸收峰，并通過甘草酸標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，從 而獲得甘草提取物中甘草酸的含量。
[0008] 進(jìn)一步地，我們還公開了所述的甘草酸提取物在抗輻射中藥組合物中的應(yīng)用，所 述的抗輻射中藥組合物還包括分別與甘草提取物等質(zhì)量的黃芪、茉莉花、玫瑰花、白菊花。
[0009] 同時，我們還公開了所述的甘草酸提取物在制備治療牙齦炎藥物中的應(yīng)用。
[0010] 進(jìn)一步地，在制備治療牙齦炎藥物時，還包括與甘草提取物等質(zhì)量的鮮車前草和 鮮薄荷。
[0011] 更進(jìn)一步地，在制備治療牙齦炎藥物時，還包括有與甘草提取物等質(zhì)量的綠皮鴨 蛋。
[0012] 一種抗輻射中藥組合物的制備方法，包括如下步驟： 按照前述的方法通過超聲波提取甘草，獲得甘草提取物，將提取物減壓濃縮形成浸膏， 然后將黃芪用70%乙醇浸提24小時后，濃縮形成黃芪浸膏，將甘草浸膏、黃芪浸膏、茉莉花、 玫瑰花、白菊花共沸回流，過濾，得到抗輻射中藥組合物。
[0013] 一種治療牙齦炎藥物的制備方法，包括如下步驟： 按照前述的方法通過超聲波提取甘草，獲得甘草提取物，將提取物減壓濃縮形成浸膏， 然后將甘草浸膏與鮮車前草共沸回流，過濾，取過濾液，鮮薄荷加入過濾液中，蒸餾，收集蒸 餾液，即為治療牙齦炎藥物。
[0014] 本發(fā)明不僅公開了一種工藝簡單、產(chǎn)品純度高、易于工業(yè)化推廣的甘草提取工藝， 同時還給出了這一工藝所得產(chǎn)品的藥物用途，具有很好的市場價值。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 實(shí)施例1試驗用甘草中甘草酸的含量測定 精密稱取甘草酸標(biāo)準(zhǔn)品0. 0230g，用50%乙醇水溶液溶解，制得濃度為0. 23mg/mL的標(biāo) 準(zhǔn)品溶液。
[0016] 分別精密量取0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1.Oml標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用50%乙醇水溶液稀釋至 10mL，檢測其在252nm處吸光度，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線： y = Zt913s?UCTO。
[0017] 實(shí)施例2超聲波提取條件的考察 2. 1超聲波功率的考察 甘草粉與乙醇以Ig:l〇ml的比例浸泡，分別選用不同的超聲功率提取60分鐘，將處理 后的溶液抽濾。
[0018] 按照實(shí)施例1中的方法獲得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘 草酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率與超聲波功率的關(guān)系見圖1。
[0019] 2. 2超聲時間的條件考察 甘草粉過20目篩，超聲波功率為80W，料液比為1:10,浸泡至藥材全部浸濕后，分別超 聲處理30分鐘、40分鐘、50分鐘、60分鐘、70分鐘、80分鐘，將超聲處理后的溶液抽濾。
[0020] 照實(shí)施例1中的方法獲得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘草 酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率與時間的關(guān)系見圖2。
[0021] 2. 3超聲波處理溶劑的考察 甘草粉過20目篩，超聲波功率為80W，料液比為1:10,分別用不同濃度的乙醇溶液浸泡 至藥材全部浸濕后，進(jìn)一步繼續(xù)超聲處理，將超聲處理后的溶液抽濾。
[0022] 照實(shí)施例1中的方法獲得甘草提取物中的甘草酸含量，利用甘草提取物中的甘草 酸和甘草中的甘草酸比值，得到提取率，提取率與溶劑濃度的關(guān)系見圖3。
[0023] 2. 4超聲波處理綜合條件的正交實(shí)驗 影響因素及水平見表1 :
正交實(shí)驗結(jié)果見表2 :
[0024] 因此，確定最佳提取工藝為：所述的甘草提取物是將甘草粉打粉后，在70%的乙醇 溶劑中超聲處理60分鐘得到，超聲功率為80W，超聲頻率為30kHz。
[0025] 優(yōu)選地，甘草粉與乙醇溶劑的料液比為1:10 (m/v)。
[0026] 實(shí)施例3 將甘草粉打粉后，過20目篩，在70%的乙醇溶劑中超聲處理60分鐘得到，超聲功率為 80W，超聲頻率為30kHz，甘草粉與乙醇溶劑的料液比為1:10 (m/v)。制得甘草提取物。
[0027] 實(shí)施例4 按照實(shí)施例3的方法通過超聲波提取甘草，獲得甘草提取物，將提取物減壓濃縮形成 浸膏，然后將黃芪用70%乙醇浸提24小時后，濃縮形成黃芪浸膏，將甘草浸膏、黃芪浸膏、茉 莉花、玫瑰花、白菊花共沸回流，過濾，得到抗輻射中藥組合物。
[0028] 實(shí)施例5 選用體重18-22g雄性C57小鼠40只。小鼠飼養(yǎng)環(huán)境溫度21°C±2°C，相 濕度50% ±10%，12小時燈光12小時黑暗，預(yù)養(yǎng)3天，隨機(jī)分為3組，即正常組， 輻射組，實(shí)驗組(選用實(shí)施例4中所得的中藥組合物)，每組10只。60C〇y射線一次性全 身均勻照射，照射劑量為7. 5Gy，劑量率為213. 16cGy/min，照后立即灌胃給藥，正常組和照 射組給予等體積蒸餾水，中藥組合物組50mg/kg，連續(xù)給藥5天，連續(xù)觀察小鼠30天。
[0029] 結(jié)果：含有甘草提取物的中藥組合物提高小鼠存活率30%，延長平均存活時間， 差異極顯著，且存活小鼠狀態(tài)良好。
[0030] 實(shí)施例5 按照實(shí)施例3的方法通過超聲波提取甘草，獲得甘草提取物，將提取物減壓濃縮形成 浸膏，然后將甘草浸膏與鮮車前草共沸回流，過濾，取過濾液，鮮薄荷加入過濾液中，蒸餾， 收集蒸餾液，即為治療牙齦炎藥物。
[0031] 實(shí)施例6 在麻醉狀態(tài)下，選擇菌斑評分在2-4 (菌斑面積裝電腦25%~75%以上的面頰側(cè)牙齒表 面)，牙齦炎評分在1-3 (輕微或中等牙齦炎）的比格犬12只，隨機(jī)分為實(shí)驗組和對照組，每 組6只。將動物麻醉后，對其第三白齒處的牙齦炎和牙結(jié)石評分，用菌斑液顯色后對菌斑評 分。
[0032] 同時在其左上側(cè)的第三前臼齒的前庭區(qū)域切取3mm的齒齦組織進(jìn)行HE染色，在光 鏡下對炎性滲透評分。
[0033] 牙齦炎的評分等級為： 0 :沒有牙齦炎 1:非常輕微牙齦炎(紅腫，碰觸不出血)， 2 :輕微牙齦炎(紅腫，碰觸延遲出血)， 3 :中等牙齦炎(紅腫，碰觸后立即出血)， 4 :嚴(yán)重牙齦炎(潰瘍，自發(fā)性出血)。
[0034] 牙結(jié)石的評分等級根據(jù)牙結(jié)石占面頰側(cè)牙齒表面的面積分級， 0:0% 1 ：< 25%, 2:25-49%, 3:50-74%, 4 ：> 75%〇
[0035] 炎性滲透評分： 〇 :有散在的慢性炎細(xì)胞單個或者小堆的排列在上皮細(xì)胞表面， 1 :在上皮細(xì)胞的旁邊有稀疏但連接成帶的炎細(xì)胞聚集， 2 :在上皮細(xì)胞周圍大量滲透的炎細(xì)胞取代了正常的牙銀纖維， 3 :在組織中廣泛，大量聚集的炎細(xì)胞取代了大多數(shù)的牙齦纖維。
[0036] 然后分別用浸潤有實(shí)施例5中治療牙齦炎藥物的棉球覆蓋動物唇側(cè)和面積ace的 牙齒和齒齦，生理鹽水做對照，每次10秒鐘，每天兩次，持續(xù)14天。第15天再次將動物麻 醉，并對其菌斑、牙齦炎和牙結(jié)石評分，同時在其右上側(cè)的第三前白齒的前庭區(qū)域切取3mm 的齒齦組織進(jìn)行HE染色，在光鏡下對炎性滲透評分。
[0037] 結(jié)果表明經(jīng)過治療后，菌斑和牙齦炎癥狀評分在實(shí)驗組顯著降低，p< 0. 05,對照 組無顯著差異，P> 0. 1，具體結(jié)果見表3。
[0038]表 3:
【主權(quán)項】
1. 甘草酸提取物在制備治療牙齦炎藥物中的應(yīng)用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征是，還包括與甘草提取物等質(zhì)量的鮮車前草和 鮮薄荷。
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及甘草酸提取物在制備治療牙齦炎藥物中的應(yīng)用，還包括與甘草提取物等質(zhì)量的鮮車前草和鮮薄荷。本發(fā)明不僅公開了一種工藝簡單、產(chǎn)品純度高、易于工業(yè)化推廣的甘草提取工藝，同時還給出了這一工藝所得產(chǎn)品的藥物用途，具有很好的市場價值。
【IPC分類】A61K35/57, A61K36/738, A61K36/484, A61K36/68, A61P39/00, A61P1/02, G01N21/33
【公開號】CN104887746
【申請?zhí)枴緾N201510276984
【發(fā)明人】蔡永柱
【申請人】蔡永柱
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年5月27日