具有PEG干擾素α-2b的穩(wěn)定的藥物組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明提供了包括PEG-干擾素a -2b的穩(wěn)定的藥物組合物。本發(fā)明還提供了制 備該組合物的方法、該組合物的給藥方法和包括該組合物的試劑盒。
【背景技術】
[0002] 干擾素為真核細胞響應病菌（如細菌、病毒或寄生蟲）的感染而分泌的細胞因 子。因此，這些蛋白質類對各種感染（主要是病毒感染和增殖異常，如癌癥）具有治療潛力 (Pfeffer 等，1998Cancer Research 58, 2489-2499) 〇
[0003] 人干擾素基于其細胞來源和抗原性分為3類：α -干擾素（白細胞）、β -干擾 素（成纖維細胞）和γ-干擾素 （Β細胞）（US 7632491)。重組α干擾素在超過二十年以 前首次被US FDA批準用于治療多毛細胞白血病。從那以后，不同類型重組干擾素是市售 的，用于治療很多疾病，如慢性丙型肝炎、惡性黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤等（PfefTer等， 1998Cancer Research58, 2489-2499 和 Wang 等，2002Advanced Drug Delivery Reviews 54,547-570)〇
[0004] 然而，與很多其他腸胃外給藥蛋白質類類似，其使用由于抗原性（導致形成中和 抗體）和短的藥理學半衰期（因此導致給藥重復的劑量以實現(xiàn)期望的血濃度）具有一些限 制（US6180096)。該問題可通過將這些蛋白質與聚合物（如聚乙二醇（PEG))共軛來克服。 PEG為非免疫原性和無毒的聚合物。此外，其溶于水和多種有機溶劑。當?shù)鞍踪|與PEG部 分化學地共軛時，該蛋白質的溶解性提高（US 700314)。聚乙二醇化可提高分子的藥物代 謝動力學性質，產生熱和物理穩(wěn)定性，抗酶降解，和延長體內循環(huán)半衰期（由于從身體的清 除減少）。然而，PEG分子的合適尺寸、蛋白質-PEG比和聚乙二醇化工藝參數(shù)的選擇對聚乙 二醇化工藝和獲得生物活性蛋白質分子是重要的（Bailon等，1998Pharm. Sci. Technology Today，第 1 卷，第 8 期，352-356)。
[0005] 該共軛物的穩(wěn)定性可通過合適的組合物來獲得，該組合物可使共軛蛋白質保持為 穩(wěn)定形式且通過如冷凍干燥/凍干法的技術將水從組合物中除去（US20100074865)。
[0006] 美國專利No. US 5730969公開了一種蛋白質組合物，該蛋白質組合物包括有效穩(wěn) 定量的環(huán)糊精。
[0007] 美國專利 No. US7846427、US6180096、US6250469、US5766582 和 US7632491 公開了 包括PEG-干擾素的藥物組合物。
[0008] PCT 申請 WO 2010064258、WO 200135987、W02008062481 和 W02004096263 公開了 干擾素組合物。
[0009] 本發(fā)明涉及一種包括聚乙二醇干擾素a -2b共軛物的穩(wěn)定組合物。

【發(fā)明內容】

[0010] 在一個實施例中，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物包括生物活 性的PEG-干擾素 a -2b (PEG-IFN a -2b)和冷凍保護劑，該冷凍保護劑選自由2-羥基丙基 β-環(huán)糊精（HPBCD)、三氯蔗糖和聚乙烯吡咯酮4000 (PVP 4000)構成的組。
[0011] 在另一實施例中，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物包括 PEG-IFNa -2b、冷凍保護劑和緩沖劑，該冷凍保護劑選自由HPB⑶、三氯蔗糖和PVP 4000構 成的組。
[0012] 在再另一實施例中，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物的pH在 4. 0至8. 0范圍內，該藥物組合物包括PEG-IFN a -2b、冷凍保護劑和緩沖劑，該冷凍保護劑 選自由HPBCD、三氯蔗糖和PVP 4000構成的組，且該緩沖劑選自由磷酸鈉或磷酸鉀、檸檬酸 鹽、左旋組氨酸和左旋精氨酸鹽酸鹽和其組合構成的組。
[0013] 在再另一實施例中，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物進一步包 括一種或多種表面活性劑。
[0014] 在再另一實施例中，本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物進一步任 選地包括一種或多種張度劑以保持該藥物組合物的張度。
[0015] 在再另一實施例中，本發(fā)明涉及一種制備本發(fā)明的穩(wěn)定的藥物組合物的方法。
[0016] 在再另一實施例中，本發(fā)明涉及一種使用本發(fā)明的穩(wěn)定的藥物組合物治療人體疾 病的方法。該疾病可為丙型肝炎、乙型肝炎或黑素瘤（包括完全淋巴結切除術的確定性外 科手術切除術的84天內的顯微鏡下或肉眼可見的淋巴結轉移）。
[0017] 以下提出的本發(fā)明的一個或多個實施例的細節(jié)本身僅為說明性的且不用于限制 本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的其他特征、目的和優(yōu)點將從說明書和權利要求書中變得明顯。
【具體實施方式】
[0018] 本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的藥物組合物，該藥物組合物包括PEG-IFNa -2b和冷凍 保護劑，該冷凍保護劑選自由HPBCD、三氯蔗糖和PVP 4000構成的組。更特別地，該穩(wěn)定的 藥物組合物為無菌的且準備用于腸胃外給藥。
[0019] 本發(fā)明的藥物組合物包括純化PEG-IFNa -2b和冷凍保護劑、緩沖劑、表面活性 劑、張度改性劑和其適當組合的其他賦形劑，該冷凍保護劑選自由HPBCD、三氯蔗糖和PVP 4000構成的組。
[0020] 本發(fā)明的穩(wěn)定的藥物組合物包裝在小瓶、預裝注射器或藥管中。優(yōu)選的包裝為小 瓶。
[0021] 在本發(fā)明的實施例中，使用由使用大腸桿菌細胞的重組DNA技術獲得的PEG12qqc^ 擾素 PEG-IFNa -2b。PEG-IFNa -2b 的濃度為 0· 03mg/ml 至 2mg/ml。
[0022] 在本發(fā)明的另一實施例中，PEG-IFN a -2b組合物包括冷凍保護劑，該冷凍保護劑 選自由HPB⑶、三氯蔗糖和PVP 4000構成的組。冷凍保護劑的濃度為約10至250mg/ml。
[0023] 在本發(fā)明的再另一實施例中，緩沖劑選自由磷酸鹽-檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩 沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、組氨酸乙酸鹽、組氨酸-組氨酸鹽酸鹽、左旋組氨酸、左旋精氨酸鹽 酸鹽、碳酸氫鹽緩沖劑、琥珀酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、Tris緩沖劑（三羥甲基氨基甲 烷緩沖劑）（單獨或組合）構成的組。本發(fā)明的優(yōu)選緩沖劑為磷酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖 劑、磷酸鹽-檸檬酸鹽緩沖劑、左旋組氨酸或左旋精氨酸鹽酸鹽。溶液中的緩沖劑的濃度為 5mM至lOOmM，單獨緩沖劑組分的摩爾濃度在ImM與IOOmM之間的范圍內。
[0024] 在本發(fā)明的再另一實施例中，本發(fā)明的緩沖劑體系將組合物的pH保持在4. 0至 8.0范圍內。優(yōu)選的pH為6.4至7.2。
[0025] 在本發(fā)明的再另一實施例中，表面活性劑選自由基于聚山梨醇酯的非離子型表面 活性劑、十二烷基硫酸鹽（SDS)、卵磷脂（單獨或組合）構成的組。另外，聚山梨醇酯選自聚 山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。優(yōu)選的表面活性劑為聚山梨醇酯80。表面活性劑的濃度為 約 0· 01 至 1.0 mg/ml。
[0026] 在本發(fā)明的再另一實施例中，穩(wěn)定的凍干組合物任選地包括腸胃外可接受的張度 劑。張度劑選自由鹽類（例如氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣）和糖類（例如甘露醇、蔗糖、葡萄糖 等等）和/或氨基酸類（例如精氨酸、半胱氨酸、組氨酸等等）構成的組。優(yōu)選的張度劑為 氯化鈉和甘露醇。更優(yōu)選的張度劑為氯化鈉。氯化鈉的優(yōu)選范圍為〇至9mg/ml。
[0027] 本發(fā)明還可進一步包括其他藥學上穩(wěn)定的賦形劑，諸如防腐劑、抗螯合劑。賦形劑 可選自包括糖類（選自包括甘露醇、半乳糖和麥芽糖的組）、EDTA、尿素、苯酚、間苯甲酚、對 苯甲酚、鄰苯甲酚的組。
[0028] 在一個實施例中，本發(fā)明為在復水劑（reconstituting a