雄參半，將其隨機(jī)劃分為5個(gè)組，1個(gè)空白組和3個(gè)試驗(yàn)組，將藥物混入 家兔的飼料中對(duì)4組試驗(yàn)組進(jìn)行喂食。實(shí)驗(yàn)一組喂食臨床日常劑量的1倍，試驗(yàn)二組喂食 臨床劑量的4倍，試驗(yàn)三組喂食臨床劑量的8倍。用藥進(jìn)行30天，通過(guò)比較用藥前、用藥30 天、以及停藥30天后的家兔的行為、精神狀態(tài)、糞便等變化，來(lái)進(jìn)行藥物的毒性檢測(cè)。通過(guò) 對(duì)試驗(yàn)組的家兔觀察，喂藥后的家兔，在行為、精神狀態(tài)以及糞便等方面，與未投藥的家兔， 無(wú)任何區(qū)別。因此，該藥物長(zhǎng)期服用，不具有蓄積毒性，不會(huì)在體內(nèi)淤積毒素。
[0077] 實(shí)施例8動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
[0078] 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：昆明小鼠，雄性，體重18~20g。
[0079]實(shí)驗(yàn)用藥：本發(fā)明實(shí)施例1提供的散劑1;卵清蛋白OVA購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；氫 氧化鋁購(gòu)自廣東光華化學(xué)廠有限公司；鹽酸小檗堿片購(gòu)自廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司。
[0080] 實(shí)驗(yàn)器材：醫(yī)用超聲霧化器；日本OlympusBH22型顯微鏡；SartoriusCP22?型 電子天平。
[0081] 動(dòng)物分組：將32只健康的昆明小鼠隨機(jī)分成空白對(duì)照組、哮喘組、中藥治療組和 西藥治療組，每組8只。
[0082] 哮喘模型復(fù)制：哮喘組、中藥治療組和西藥治療組于實(shí)驗(yàn)第1、3、5、7、9、11、13d腹 腔注射0VA10yg和氫氧化鋁IOmg(混合于0. 2mL生理鹽水中）致敏，第21d起將小鼠置于 自制霧化吸入箱中，予1%OVA生理鹽水霧化吸入30min，每日1次，連續(xù)7d。
[0083] 正常組：分別于實(shí)驗(yàn)第1、3、5、7、9、11、13(1腹腔注入0.9%生理鹽水0.21^，第21(1 始用〇.9%生理鹽水霧化吸入3〇1^11，連續(xù)7(1。
[0084] 造模成功的指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)中觀察小鼠反應(yīng)，出現(xiàn)呼吸急促、發(fā)出哮鳴音、腹肌抽搐、大 小便失禁、不停的撓鼻子、煩躁不安等為陽(yáng)性反應(yīng)。
[0085] 給藥方式：正常組：造模成功后的第3d開(kāi)始，用0.9%生理鹽水0.5mL灌胃，每日 1次，連續(xù)7d;
[0086] 哮喘組：造模成功后的第3d開(kāi)始，用0.9%生理鹽水0.5mL灌胃，每日1次，連續(xù) 7d;中藥治療組：造模成功后的第3d開(kāi)始，將實(shí)施例1制備的散劑1溶解在水中，配置成2g/ ml的溶液，灌胃小鼠，每次0. 5ml每日1次，連續(xù)7d;西藥治療組：造模成功后的第3d開(kāi)始， 用0.Olmg鹽酸小檗堿片（強(qiáng)的松）溶于0. 5mL生理鹽水進(jìn)行灌胃，每日1次，連續(xù)7d。
[0087] 樣本采集與檢測(cè)：末次霧化刺激16h后，停止給水和食物，并且更換鼠籠里的木 肩。24h后對(duì)小鼠進(jìn)行尾靜脈采血、涂片，并進(jìn)行白細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)，記錄相應(yīng)數(shù)據(jù)。同樣， 于治療后的24h后對(duì)小鼠進(jìn)行第二次的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。
[0088] 霧化過(guò)程中，記錄各組小鼠治療前后哮喘發(fā)作的潛伏期。
[0089] 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本研宄結(jié)果均采用SPSS13. 0與DPS7. 0統(tǒng)計(jì)軟件聯(lián)合分析，對(duì)所得數(shù) 據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)，P<0. 05表明組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
[0090] 實(shí)驗(yàn)過(guò)程小鼠的主要癥狀及體征
[0091] 霧化攻擊過(guò)程中觀察小鼠出現(xiàn)呼吸急促、發(fā)出哮鳴音、大小便失禁、煩躁不安、抽 搐以及不停的撓鼻子等癥狀，但停止霧化后癥狀逐漸的恢復(fù)正常。治療后，小鼠對(duì)于致敏原 的耐受力與治療前相比較有明顯的增強(qiáng)。
[0092] 結(jié)果
[0093] 中藥制劑對(duì)小鼠嗜酸性粒細(xì)胞的影響，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0094] 表1各組哮喘小鼠治療前后的嗜酸性粒細(xì)胞的比較±S；)
[0095]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于治療支氣管哮喘的中藥制劑，其特征在于：原料藥包括虎杖、荊芥、板藍(lán) 根、川谷根、麻黃、款冬花、三白草、牛蒡子、前胡、白術(shù)、明黨參、鴨拓草、知母、天冬、紅豆蔻、 地柏枝、云苔草、白側(cè)耳、扶?；ā⑻訁?、黃精和防風(fēng)。
2. 如權(quán)利要求1所述的中藥制劑，其特征在于：各原料藥的重量分別為虎杖35g~ 45g、荊芥15g~25g、板藍(lán)根55g~65g、川谷根20g~30g、麻黃15g~25g、款冬花15g~ 25g、三白草20g~30g、牛蒡子20g~30g、前胡30g~40g、白術(shù)25g~35g、明黨參20g~ 30g、鴨拓草15g~25g、知母25g~35g、天冬30g~40g、紅豆蔻10g~20g、地柏枝10g~ 20g、云苔草25g~35g、白側(cè)耳20g~30g、扶?；?5g~25g、太子參25g~35g、黃精30g~ 40g和防風(fēng)15g~25g。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的中藥制劑，其特征在于：各原料藥的重量分別為虎杖38g~ 42g、荊芥18g~22g、板藍(lán)根58g~62g、川谷根23g~27g、麻黃18g~22g、款冬花18g~ 22g、三白草23g~27g、牛蒡子23g~27g、前胡33g~37g、白術(shù)28g~32g、明黨參23g~ 27g、鴨拓草18g~22g、知母28g~32g、天冬33g~37g、紅豆蔻13g~17g、地柏枝13g~ 17g、云苔草28g~32g、白側(cè)耳23g~27g、扶?；?8g~22g、太子參28g~32g、黃精33g~ 37g和防風(fēng)18g~22g。
4. 如權(quán)利要求1至3所述的中藥制劑，其特征在于：各原料藥的重量分別為虎杖40g、 荊芥20g、板藍(lán)根60g、川谷根25g、麻黃20g、款冬花20g、三白草25g、牛蒡子25g、前胡35g、 白術(shù)30g、明黨參25g、鴨拓草20g、知母30g、天冬35g、紅豆蔻15g、地柏枝15g、云苔草30g、 白側(cè)耳25g、扶?；?0g、太子參30g、黃精35g和防風(fēng)20g。
5. 如權(quán)利要求1至4所述的中藥制劑，其特征在于：所述中藥制劑制備成口服液和散 劑。
6. 權(quán)利要求1至5所述用于治療支氣管哮喘的中藥制劑的制備方法，當(dāng)所制備的中藥 制劑為口服液時(shí)，包括： 第一步，按上述重量選取虎杖、板藍(lán)根、川谷根、三白草、牛蒡子、前胡、鴨拓草、知母、天 冬、地柏枝、白側(cè)耳、扶?；ê头里L(fēng)分別粉碎成40目粉末，攪拌混合均勻，形成混合物，將混 合物裝入滲漉筒中，每lkg混合物加醇濃度為75 %~85 %的乙醇3kg~5kg，常溫下浸泡5 小時(shí)~8小時(shí)，調(diào)節(jié)滲漉筒閥門，使乙醇藥液慢慢滴出，滴出速度為每分鐘2~4mL，前50ml 不接收，隨后開(kāi)始收集滴出液，滴出液由無(wú)色逐漸變?yōu)辄S色，隨后又逐漸變?yōu)闊o(wú)色，待完全 成為無(wú)色不再收集滴出液，濃縮，除去部分乙醇溶劑，獲得相對(duì)密度1. 20~1. 30 (60°C )的 清膏； 第二步，將余下組分按照重量稱取，分別粉碎成40目的粉末，攪拌混合均勻，形成混合 物，加入相對(duì)于混合物質(zhì)量6~8倍的水，用體積濃度為5%的鹽酸調(diào)節(jié)水的pH值為2~3， 浸泡1小時(shí)~2小時(shí)，隨后煎煮3小時(shí)~5小時(shí)，煎煮液過(guò)濾，濾渣再次加入相對(duì)于混合物質(zhì) 量4~6倍的水，煎煮3小時(shí)~5小時(shí)，煎煮液過(guò)濾，將煎煮液合并，用質(zhì)量百分濃度為20% 氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至6~7,獲得提取液，提取液濃縮為相對(duì)密度為1. 10~1. 20 (60°C ) 的清膏； 第三步，將第一步和第二步獲得清膏混合，加入醇濃度為95 %的乙醇至醇含量達(dá)到 60%，在0°C冷藏12小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮回收乙醇，獲得干膏體，粉碎，干燥，獲得粉 末，取500g粉末，加入500ml蒸餾水溶解，隨后加入蔗糖50g，尼泊金乙酯5g，攪拌溶解均 勻，在0°C~4°C的條件下靜置24h，過(guò)濾，經(jīng)紫外線消毒殺菌，分裝入瓶，每瓶50ml。
7.權(quán)利要求1至5所述用于治療支氣管哮喘的中藥制劑的制備方法，當(dāng)所制備的中藥 制劑為散劑時(shí)，包括： 第一步，按上述重量選取虎杖、板藍(lán)根、川谷根、三白草、牛蒡子、前胡、鴨拓草、知母、天 冬、地柏枝、白側(cè)耳、扶?；ê头里L(fēng)分別粉碎成40目粉末，攪拌混合均勻，形成混合物，將混 合物裝入滲漉筒中，每lkg混合物加醇濃度為75 %~85 %的乙醇3kg~5kg，常溫下浸泡5 小時(shí)~8小時(shí)，調(diào)節(jié)滲漉筒閥門，使乙醇藥液慢慢滴出，滴出速度為每分鐘2~4mL，前50ml 不接收，隨后開(kāi)始收集滴出液，滴出液由無(wú)色逐漸變?yōu)辄S色，隨后又逐漸變?yōu)闊o(wú)色，待完全 成為無(wú)色不再收集滴出液，濃縮，除去部分乙醇溶劑，獲得相對(duì)密度1. 20~1. 30 (60°C )的 清膏； 第二步，將余下組分按照重量稱取，分別粉碎成40目的粉末，攪拌混合均勻，形成混合 物，加入相對(duì)于混合物質(zhì)量6~8倍的水，用體積濃度為5%的鹽酸調(diào)節(jié)水的pH值為2~3， 浸泡1小時(shí)~2小時(shí)，隨后煎煮3小時(shí)~5小時(shí)，煎煮液過(guò)濾，濾渣再次加入相對(duì)于混合物質(zhì) 量4~6倍的水，煎煮3小時(shí)~5小時(shí)，煎煮液過(guò)濾，將煎煮液合并，用質(zhì)量百分濃度為20% 氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至6~7,獲得提取液，提取液濃縮為相對(duì)密度為1. 10~1. 20 (60°C ) 的清膏； 第三步，將第一步和第二步獲得清膏混合，加入醇濃度為95 %的乙醇至醇含量達(dá)到 60%，在0°C冷藏12小時(shí)，過(guò)濾，濾液減壓濃縮回收乙醇，獲得干膏體，粉碎，干燥，獲得粉 末，取500g粉末，加入500g的淀粉，攪拌混合均勻，獲得散劑。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于治療支氣管哮喘的中藥制劑，其原料藥包括虎杖、荊芥、板藍(lán)根、川谷根、麻黃、款冬花、三白草、牛蒡子、前胡、白術(shù)、明黨參、鴨拓草、知母、天冬、紅豆蔻、地柏枝、云苔草、白側(cè)耳、扶桑花、太子參、黃精和防風(fēng)。該中藥制劑可有效降低炎性介質(zhì)的釋放、緩解氣道高反應(yīng)性，從而顯著改善患者癥狀，減輕哮喘發(fā)作程度，減少發(fā)作次數(shù)，是一種有效、安全、方便、副反應(yīng)小的支氣管哮喘治療方法。
【IPC分類】A61K36-9062, A61P11-06
【公開(kāi)號(hào)】CN104623482
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510067967
【發(fā)明人】王健秀, 王君, 何亞萍, 韓萍
【申請(qǐng)人】王健秀
【公開(kāi)日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2015年2月9日