專利名稱：包括一種阿片樣物質(zhì)鎮(zhèn)痛劑和一種nmda拮抗劑的局部給藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由單純一種N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑或與經(jīng)阿片受體發(fā)揮外周鎮(zhèn)痛作用的鎮(zhèn)痛藥組合的局部給藥組合物，以及所述局部給藥組合物用于治療疼痛且對(duì)鎮(zhèn)痛藥不產(chǎn)生/或產(chǎn)生最低程度耐受的用途。
背景技術(shù)：
嗎啡是μ阿片樣受體的強(qiáng)激動(dòng)劑，有重要的中樞作用位點(diǎn)(Reisine和Pasternak,1996)。外周機(jī)制也已見報(bào)道，其重要性也逐漸被人們所理解(Stein等，1995；Barber和Gottschlich,1992；Joris等，1987；Junien和Wettstein,1992)。在臨床治療疼痛中，外周鎮(zhèn)痛藥有很多潛在的優(yōu)點(diǎn)，尤其是控制如便秘和鎮(zhèn)靜等全身用藥時(shí)出現(xiàn)的典型的副作用。在尾巴局部給藥時(shí)，嗎啡和其它的阿片樣物質(zhì)是有效的鎮(zhèn)痛藥，既有單獨(dú)的外周作用又有中樞部位的協(xié)同作用(Kolesnikov等，1996)。在許多方面，這些研究與臨床觀察相似(Stein,1993；Dahl等，1990；Dalsgaard等，1994；Heard等，1992；Joris等，1987；Khoury等，1992；Mays等，1987；Raja等，1992)。系統(tǒng)性嗎啡耐受也涉及外周機(jī)制(Kolesnikov等，1996)。早期的研究報(bào)道系統(tǒng)性嗎啡耐受不改變對(duì)嗎啡脊柱或棘上給藥的敏感性(Roerig等，1984)。雖然我們也發(fā)現(xiàn)，在嗎啡長(zhǎng)期給藥后，脊柱或棘上給藥其效力仍未改變，但是可見到外周效力顯著降低(Kolesnikov等，1996)。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及用于提供局部給藥的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑來獲得比利用一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥更有效的外周鎮(zhèn)痛效果以及用于抑制對(duì)鎮(zhèn)痛藥耐受和/或逆轉(zhuǎn)耐受的方法和組合物。
本發(fā)明提供了一種局部給藥組合物，其包括單獨(dú)或與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥聯(lián)合應(yīng)用的N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑以及可藥用的局部賦形劑。
本發(fā)明還涉及向一種哺乳動(dòng)物提供鎮(zhèn)痛作用的方法，其包括全身或局部施與通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥，而且其中在局部向哺乳動(dòng)物應(yīng)用減少耐受或抑制耐受的劑量的至少一種N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑之前、同時(shí)或之后施與鎮(zhèn)痛藥。
本發(fā)明還涉及在用通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥治療的哺乳動(dòng)物中逆轉(zhuǎn)耐受的方法，其包括局部應(yīng)用可有效逆轉(zhuǎn)耐受之劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
本發(fā)明還提供了一種減少耐受或抑制耐受的藥用鎮(zhèn)痛藥藥劑盒，其包括(A)一種局部或全身給藥的藥物組合物，其包括至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥；(B)一種局部給藥的藥物組合物，其包括至少一種減少耐受或抑制耐受的N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑。
附圖簡(jiǎn)述

圖1a和1b小鼠局部應(yīng)用阿片樣物質(zhì)痛覺缺失1a)各組小鼠分別用嗎啡(15mM；n=20)、DAMGO(2mM；n=10)或M6G(20mM；n=10)局部暴露2分鐘后，用甩尾法檢測(cè)痛覺。
1b)如在方法部分所述，對(duì)局部用藥1分鐘的各種指定化合物繪制劑量效應(yīng)曲線。藥物的每個(gè)劑量組至少有10只小鼠。
圖2a和2b阿片樣物質(zhì)拮抗劑對(duì)局部μ痛覺缺失的作用2a)各組小鼠(n≥10)接受嗎啡(15mM)、DAMGO(2mM)或M6G(20mM)單純局部給藥1分鐘，或在鎮(zhèn)痛激動(dòng)劑應(yīng)用前20分鐘，在小鼠背部皮下注射納洛酮(1mg/kg，皮下注射)。納洛酮，一種μ受體拮抗劑，可以顯著降低小鼠對(duì)所有激動(dòng)劑的反應(yīng)。
2b)各組小鼠(n≥10)只接受嗎啡(15mM)或DAMGO(2mM)或M6G(20mM)局部給藥1分鐘，或在鎮(zhèn)痛激動(dòng)劑應(yīng)用前20分鐘，在小鼠背部皮下注射3-甲氧納曲酮(3-MeONtx；0.25mg/kg，皮下注射)。3-MeONtx僅顯著降低小鼠對(duì)M6G的反應(yīng)。
圖3a和3b嗎啡的局部用藥與全身或脊柱用藥的相互作用3a)各組小鼠(n≥10)只接受嗎啡局部給藥(15mM；2分鐘)，或者聯(lián)合脊柱(100ng，鞘內(nèi)注射)或全身給藥(1mg/kg，皮下注射)。單純嗎啡脊柱用藥未產(chǎn)生可觀察到的效果，全身用藥只有10％產(chǎn)生反應(yīng)。在30分鐘時(shí)，嗎啡單純局部用藥的效應(yīng)消失，而聯(lián)合用藥的效應(yīng)則顯著增加。
3b)左圖各組小鼠(n≥10)分別用嗎啡單純局部給藥(15mM；2分鐘)、單純脊柱給藥(100ng，鞘內(nèi)注射)或兩種途徑聯(lián)合給藥。在給藥l0分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。在該時(shí)間點(diǎn)，單純局部給藥有30％產(chǎn)生效應(yīng)。聯(lián)合給藥組的效應(yīng)顯著高于兩個(gè)途徑單獨(dú)給藥產(chǎn)生的效應(yīng)的總和。右圖各組小鼠(n≥10)分別用嗎啡單純局部給藥(15mM)、單純?nèi)斫o藥(1mg/kg，皮下注射)或兩種途徑聯(lián)合給藥。在給藥30分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。在該時(shí)間點(diǎn)，單純局部給藥無可觀察的效應(yīng)。聯(lián)合給藥組的效應(yīng)顯著高于兩個(gè)途徑單獨(dú)給藥產(chǎn)生的效應(yīng)的總和。
圖4嗎啡全身和局部用藥的耐受性各組小鼠(n≥10)分別接受嗎啡全身給藥(5mg/kg，皮下注射)或局部給藥(15mM；1分鐘)。在第1、2及3天，單純DMSO給藥沒有可觀察到的反應(yīng)。在第3夭，全身用藥組的反應(yīng)顯著高于局部用藥組。
圖5嗎啡與DAMGO和M6G間的交叉耐受各組小鼠(n≥10)每天接受嗎啡(5mg/kg，皮下注射)或生理鹽水，共5天。在第6天，對(duì)小鼠在局部暴露于嗎啡(15mM)、M6G(20mM)或DAMGO(2mM)1分鐘后進(jìn)行測(cè)試。在長(zhǎng)期嗎啡治療后，對(duì)嗎啡和DAMGO的反應(yīng)顯著下降(p＜0.01)。對(duì)M6G的反應(yīng)沒有變化。
圖6a,6b和6cMK801對(duì)嗎啡局部給藥耐受性的影響6a)各組小鼠(n≥10)接受嗎啡單純局部給藥(15mM；1分鐘)或聯(lián)合MK801的局部給藥(3mM)、全身給藥(0.1mg/kg，皮下注射)或鞘內(nèi)給藥(1μg，鞘內(nèi)注射)。在三天后，對(duì)單純嗎啡的反應(yīng)消失(p＜0.01)。對(duì)聯(lián)合MK801鞘內(nèi)給藥的嗎啡的反應(yīng)也消失(p＜0.01)。嗎啡聯(lián)合MK801全身或局部給藥在5天內(nèi)基本沒有變化。
6b)各組小鼠(n≥10)接受嗎啡單純局部給藥(15mM；1分鐘)、單純MK801(3mM)局部給藥，或嗎啡(15mM)局部給藥與指定濃度(0.15,0.3或3mM)的MK801局部給藥聯(lián)合應(yīng)用。三天后，對(duì)單純嗎啡的反應(yīng)消失(p＜0.01)。兩個(gè)較高的MK801劑量阻止反應(yīng)性的消失(p＜0.01)，而最低劑量的MK801產(chǎn)生中等程度的反應(yīng)。
6c)各組小鼠(n≥10)接受單純嗎啡局部給藥(15mM；1分鐘)3天。第4天起，它們接受嗎啡和0.3或3.0mM濃度的MK801聯(lián)合局部給藥。嗎啡和MK801聯(lián)合局部給藥逆轉(zhuǎn)已產(chǎn)生的耐受(p＜0.01)。
圖7a和b氯胺酮對(duì)嗎啡局部耐受性的效應(yīng)7a各組小鼠(n=20)每天用單純嗎啡(實(shí)心圓)局部給藥或與3.6mM(三角形)及36mM(空心圓)氯胺酮聯(lián)合給藥治療1次，連續(xù)3天。在這個(gè)模型中單純氯胺酮(36mM)給藥不產(chǎn)生明顯的鎮(zhèn)痛作用。三天后，對(duì)單純嗎啡的反應(yīng)消失(p＜0.001)。低劑量氯胺酮(3.6mM)顯著減緩3天后嗎啡鎮(zhèn)痛效應(yīng)的消失(p＜0.05)。高劑量氯胺酮(36mM)阻止耐受的產(chǎn)生高達(dá)6天(p＜0.0001)。
7b．各組小鼠(n=20)接受單純嗎啡(15mM)(實(shí)心圓)局部給藥2天。第3天起，兩組小鼠每天接受聯(lián)合3.6mM(三角形)或36mM(正方形)濃度的氧胺酮的嗎啡給藥，直至第6天。高濃度的氯胺酮(36mM)可以完全恢復(fù)嗎啡的鎮(zhèn)痛作用(p＜0.0001)。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了一種局部應(yīng)用的藥物組合物，其僅包括至少一種N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑或還聯(lián)合了至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥，以及可藥用的局部賦形劑。
在本發(fā)明中應(yīng)用的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑包括，但不限于，嗎啡喃，例如右美沙酚((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)和右啡烷(+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)、MK801((5R,10S)-(+)-5-甲基-10,11-二氫-5H-二苯并[a,d]環(huán)庚烯-5,10-亞胺氫化馬來酸)、氯胺酮(2-(2-氯苯基)-2-(甲氨基)-環(huán)己酮)，吡咯并喹啉醌和順-4-(膦酰甲基)-2-哌啶-羧酸、美金剛(3,5-二甲基-9-鹽酸金剛烷胺)，它們的混合物及其可藥用的鹽類等。除了右啡烷，許多現(xiàn)有NMDA受體拮抗劑由于極強(qiáng)的致神經(jīng)錯(cuò)亂副作用，在臨床上不適合于全身用藥。然而，在本發(fā)明中這些NMDA受體拮抗劑可以用于局部制劑。局部應(yīng)用這些NMDA受體拮抗劑可以干擾并減輕對(duì)鎮(zhèn)痛藥產(chǎn)生耐受性，而不產(chǎn)生副作用。可用于局部制劑的NMDA受體拮抗劑包括，但不限于，MK801、嗎啡喃、氯胺酮、美金剛、右啡烷、它們的混合物及其可藥用的鹽類、吡咯并喹啉醌、順-4-(膦酰甲基)-2-哌啶-羧酸、其混合物及其可藥用的鹽類等。
在本發(fā)明中可以應(yīng)用的鎮(zhèn)痛藥是那些通過至少一種阿片受體的激活而提供鎮(zhèn)痛作用的鎮(zhèn)痛藥。可以被本發(fā)明的鎮(zhèn)痛組分激活的阿片受體包括，但不限于，δ阿片受體、χ阿片受體和μ阿片受體之任一或組合。鎮(zhèn)痛藥包括，但不限于，阿片、阿片衍生物及合成的阿片類物質(zhì)、內(nèi)源性或合成的阿片肽，如腦啡肽、內(nèi)啡肽及其可藥用的鹽類。具體的實(shí)例包括乙基嗎啡、氫嗎啡酮、嗎啡、可待因、二氫羥嗎啡酮、[D-Ala2,MePhe4,Glycol)5]內(nèi)啡肽(DAMGO)、丙氧酚、叔丁啡、羥考酮、氫嗎啡酮、氫嗎啡、芬太尼、舒芬太尼、戊唑辛、納布啡、納洛酚、海洛因、左啡諾、左洛啡烷、美沙酮、哌替啶、可卡因、二氫可待因、氫可酮、納美酚、納洛酮、納曲酮、布托啡諾及可藥用的鹽等。
本發(fā)明的局部藥物組合物進(jìn)一步還可選擇包括一種局部麻醉藥，其包括，但不限于，利多卡因、丁哌卡因、甲哌卡因、羅哌卡因、丁卡因、苯唑卡因等。
如本文中所用的，可以從本發(fā)明的治療方法獲益的哺乳動(dòng)物是任何需要治療疼痛的溫血?jiǎng)游铩２溉閯?dòng)物包括，但不限于，人、靈長(zhǎng)類動(dòng)物、狗、貓、嚙齒類動(dòng)物、馬、牛、羊等。將鎮(zhèn)痛藥提供給需要緩解疼痛的哺乳動(dòng)物。疼痛可以是急性疼痛也可以是慢性疼痛。需要止痛治療的疾病和狀況包括，但不限于，創(chuàng)傷、截肢、神經(jīng)病、纖維肌瘤、燒傷、擦傷、感染、劃傷、割裂傷等。
本發(fā)明提供用于減輕或預(yù)防與施與麻醉鎮(zhèn)痛藥相關(guān)的耐受性產(chǎn)生的方法。相應(yīng)地，可以以有效減輕或預(yù)防耐受性產(chǎn)生的劑量施與NMDA受體拮抗劑。如本文中所用的，術(shù)語(yǔ)預(yù)防耐受、抑制耐受或逆轉(zhuǎn)耐受的劑量是有效維持和/或恢復(fù)，或至少部分恢復(fù)麻醉鎮(zhèn)痛藥鎮(zhèn)痛效果的NMDA受體拮抗劑的量。
在對(duì)哺乳動(dòng)物提供外周鎮(zhèn)痛作用的方法中，在局部施與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥之前、同時(shí)或之后，局部施與減輕或預(yù)防耐受劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
在為哺乳動(dòng)物提供鎮(zhèn)痛作用的方法的一個(gè)實(shí)施方案中，在阿片鎮(zhèn)痛藥嗎啡局部用藥之前、同時(shí)或之后，局部應(yīng)用減輕或抑制耐受的劑量的NMDA受體拮抗劑氯胺酮。
在另一個(gè)為哺乳動(dòng)物提供鎮(zhèn)痛作用的方法的實(shí)施方案中，在阿片鎮(zhèn)痛藥嗎啡局部用藥之前、同時(shí)或之后，局部應(yīng)用抑制或逆轉(zhuǎn)耐受的劑量的NMDA受體拮抗劑右美沙芬。
本發(fā)明的局部藥物組合物是以單個(gè)劑量單位的方式應(yīng)用的，其包括NMDA受體拮抗劑的單獨(dú)使用，或與有效劑量的鎮(zhèn)痛藥的局部制劑聯(lián)合使用。
在藥物組合物中局部NMDA受體拮抗劑的含量在混合物中占重量的大約0.1％至大約5％，但根據(jù)所用的特殊拮抗劑和待施與哺乳動(dòng)物的特殊鎮(zhèn)痛藥不同，其數(shù)量可以變化。局部NMDA受體拮抗劑的含量使提供有效的鎮(zhèn)痛作用所需的鎮(zhèn)痛藥的濃度降低。例如，當(dāng)與局部NMDA受體拮抗劑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，對(duì)于鎮(zhèn)痛藥的局部施藥，鎮(zhèn)痛藥的含量可以占重量的大約1％到大約10％；對(duì)于鎮(zhèn)痛藥的全身用藥，其量可以在大約0.1到大約0.2mg/kg體重的范圍內(nèi)；對(duì)于鎮(zhèn)痛藥的鞘內(nèi)給藥，其量可以在大約1-5mg的范圍內(nèi)。
局部組合物的具體劑量可以為，例如每天2-3次，或者任何時(shí)間段，只要在接受通過一種阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥的哺乳動(dòng)物中足以預(yù)防、抑制或逆轉(zhuǎn)耐受性。
局部藥物組合物可以與可藥用的賦形劑，如蘆薈油、丙二醇、DMSO、卵磷脂堿等配制成水溶液、洗劑、凝膠、乳膏、粘性膜等。如在本發(fā)明中所用的DMSO不會(huì)引起治療劑的全身吸收。凝膠賦形劑可以包括一種或多種如下的物質(zhì)凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、蜂蠟、礦物油、稀釋液如水和乙醇、乳化劑和穩(wěn)定劑。
懸液可含有與如懸浮劑，分散劑或潤(rùn)濕劑等可藥用賦形劑相混合的組合物，其中懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤(rùn)濕劑，如天然存在的磷脂例如卵磷脂、或者烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或者氧化乙烯與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物例如十七乙烯氧基鯨蠟醇，或者氧化乙烯與由脂肪酸和己糖醇衍生的偏脂的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或者氧化乙烯與由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏脂的縮合物例如聚氧乙烯山梨聚糖單油酸酯。此類懸液還可以含有一種或多種防腐劑，如乙基或n-丙基-p-羥基安息香酸。
加水后適合于配制成懸液的可分散粉末和顆粒與分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑以及一種或多種防腐劑混合制成組合物。適宜的分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑已經(jīng)由上述的那些舉例說明。
本發(fā)明中的組合物或其主要活性成分可以被制成本領(lǐng)域熟知的控釋劑型。
本發(fā)明的局部制劑可作用于外周的阿片受體而起到治療作用，并且不需要將局部制劑中的活性成分傳遞至中樞(腦和脊髓)的阿片受體。在治療的哺乳動(dòng)物中，本發(fā)明的局部制劑只在局部釋放活性成分，并不需要制劑中的活性成分進(jìn)入全身。
藥物組合物的局部用藥可以通過利用溶液、凝膠、洗劑、油膏、乳液或其他用來在局部位點(diǎn)傳遞治療劑的載體來完成。一種應(yīng)用方式是將組合物噴灑在需要治療的區(qū)域。在另一個(gè)實(shí)施方案中，持續(xù)釋放局部制劑的貼劑也可以用來施與局部治療劑。貼劑可以是在本領(lǐng)域中熟知的貯器及有孔膜或固體基質(zhì)?；钚砸蜃涌梢栽诜植加谡麄€(gè)可滲透的粘附層的大量微囊中。
在另一個(gè)對(duì)已存在鎮(zhèn)痛藥耐受性的哺乳動(dòng)物提供鎮(zhèn)痛作用的方法的實(shí)施方案中，在局部或全身應(yīng)用了至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥的同時(shí)或之后，局部施與逆轉(zhuǎn)耐受的劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
用于局部施藥的NMDA受體拮抗劑的藥物組合物還可以與至少一種局部或全身應(yīng)用的包括通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥的藥物組合物一起以藥劑盒的形式提供。
本發(fā)明還包括一種給哺乳動(dòng)物止痛的方法，其包括在全身或鞘內(nèi)給藥至少一種鎮(zhèn)痛藥之前、同時(shí)或之后局部施與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥。局部用藥與全身或鞘內(nèi)用藥的組合，在局部給予低劑量鎮(zhèn)痛藥和全身或鞘內(nèi)給予低劑量的鎮(zhèn)痛藥時(shí)就可以起到有效的治療性鎮(zhèn)痛作用，同時(shí)降低鎮(zhèn)痛藥的有害副作用。在聯(lián)合治療中所用劑量低于單獨(dú)使用其中任何一種鎮(zhèn)痛藥達(dá)到治療水平的鎮(zhèn)痛作用所需的劑量。用于聯(lián)合止痛治療的藥物組合物中，局部鎮(zhèn)痛藥的含量占重量的大約1％至大約10％。用于聯(lián)合止痛治療的藥物組合物中，全身鎮(zhèn)痛藥的給藥量在大約0.1至大約0.2mg/kg體重的范圍內(nèi)。局部鎮(zhèn)痛藥與鞘內(nèi)給藥聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，鞘內(nèi)鎮(zhèn)痛藥的藥量是大約1到大約5毫克。該療法可通過施與減輕耐受或預(yù)防耐受的劑量的至少一種局部NMDA受體拮抗劑進(jìn)行補(bǔ)充。局部NMDA受體拮抗劑的含量可以占制劑重量的大約0.1％至大約5％。
在一個(gè)對(duì)哺乳動(dòng)物進(jìn)行鎮(zhèn)痛的方法的實(shí)施方案中，在全身或鞘內(nèi)施與嗎啡之前、同時(shí)或之后局部施與嗎啡。
前面對(duì)具體實(shí)施方案的描述，充分揭示了本發(fā)明的一般本質(zhì)，以至于通過應(yīng)用現(xiàn)有知識(shí)，其他人為了各種應(yīng)用可以很容易地調(diào)整和/或修改這些具體的實(shí)施方案而不違背一般概念，因此這樣的修改和調(diào)整也應(yīng)包括在所公開實(shí)施方案的等價(jià)含義和范圍內(nèi)。
所有在此提及的參考文獻(xiàn)和專利都合并在參考文獻(xiàn)中。
實(shí)施例1材料和方法將雄性Crl:CD-l(ICR)BR小鼠(25-30g；Charles River BreedingLaboratories,Bloomington,MA)飼養(yǎng)于12小時(shí)明/暗交替及自由攝食和飲水的環(huán)境中。將小鼠分成每組5只分別飼養(yǎng)直至測(cè)試。[125I]NaI(1680Ci/mmol)購(gòu)自New England Nuclear(Boston,MA)。嗎啡、嗎啡-6β-葡糖苷酸(M6G)和[D-Ala2,MePhe4,Gly(ol)5]內(nèi)啡肽(DAMGO)由國(guó)家藥物濫用研究所研究技術(shù)部(Research Technologies Branch of National Institute on DrugAbuse)(Rockville,MD)惠贈(zèng)。MK801購(gòu)自Research Biochemicals,Inc.(Natick,MA)。
全身用藥在背部肩胛中部皮下(s.c.)注射給藥。如先前所報(bào)道的(Kolesnikov等，1996)，腦室內(nèi)給藥(i.c.v.)和鞘內(nèi)給藥分別于檢測(cè)前30和15分鐘在輕度氟烷麻醉下進(jìn)行。在前囪點(diǎn)尾部2毫米和側(cè)部2毫米處i.c.v.注射，注射深度為3毫米，而鞘內(nèi)注射通過腰椎穿刺進(jìn)行。將小鼠尾浸潤(rùn)在含有指定藥物的二甲基亞砜(DMSO)溶液中對(duì)尾巴局部給藥。將尾的遠(yuǎn)端部分(3cm)浸沒在DMSO溶液中1分鐘。然后除非有其他說明，在藥物浸沒的尾巴區(qū)域確定甩尾的反應(yīng)時(shí)間。為了確保局部效應(yīng)，在未暴露于藥物溶液的尾巴近側(cè)區(qū)域也進(jìn)行測(cè)試。
用先前報(bào)道的方法通過甩尾實(shí)驗(yàn)評(píng)估止痛效應(yīng)(Kolesnikov等，1996)。將小鼠尾暴露于聚焦的光束，并確定暴露的反應(yīng)時(shí)間?；€反應(yīng)時(shí)間的范圍是2.5至3.5秒。采用10秒為最長(zhǎng)的截止反應(yīng)時(shí)間以便將止痛小鼠的組織損傷降到最低。在全身用藥后30分鐘、i.c.v.或i.t.注射后15分鐘或尾局部用藥停止后立即進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)每個(gè)小鼠將鎮(zhèn)痛或止痛作用的全或無地定義為甩尾反應(yīng)時(shí)間，其至少是基線反應(yīng)時(shí)間的2倍。用Fisher精確檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。ED50值用先前報(bào)道的Bliss程序確定(Pick等，1993)。為了確證局部作用，在所有的研究中，我們均檢測(cè)了小鼠尾浸沒于DMSO的區(qū)域以及未暴露于藥物溶液的更近側(cè)節(jié)段。來自尾巴未暴露部分的甩尾反應(yīng)時(shí)間與基線反應(yīng)時(shí)間相似。在該模型中，DMSO本身沒有活性。檢測(cè)暴露或未暴露于DMSO的尾部區(qū)域顯示在兩個(gè)區(qū)域中鎮(zhèn)痛效應(yīng)沒有顯著差異。
利用氯胺T法以克分子數(shù)相等的[125I]NaI與嗎啡或與DAMGO在室溫下合成[125I]嗎啡和[125I]DAMGO。1分鐘后，用焦亞硫酸鈉終止反應(yīng)，用C18-反相SepPak將放射標(biāo)記的阿片樣物質(zhì)與未反應(yīng)的Na125I分離(Chien等，1997)。未從非碘化的前體中將放射性標(biāo)記的化合物進(jìn)一步分離。
實(shí)施例2局部嗎啡和DAMGO止痛作用我們的早期研究證實(shí)，在尾部皮下給藥時(shí)，嗎啡有強(qiáng)的局部鎮(zhèn)痛活性(Kolesnikov等，1996)。當(dāng)局部給藥時(shí)，嗎啡也是一種強(qiáng)的鎮(zhèn)痛藥。對(duì)嗎啡溶液(7.5mM)的鎮(zhèn)痛反應(yīng)隨時(shí)間而逐漸增加，從30秒后的僅為25％至1分鐘后的50％，以及2分鐘后的80％(資料未示)。起效非常迅速。小鼠尾離開阿片樣物質(zhì)溶液后1分鐘內(nèi)即可檢測(cè)到止痛效應(yīng)，1分鐘為所檢測(cè)的最短時(shí)間(圖1a)。然而，嗎啡反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短，通常持續(xù)不到30分鐘。固定暴露時(shí)間，嗎啡有劑量依賴效應(yīng)(圖1b；表1)。在μ阿片肽DAMGO的DMSO溶液中，也可觀察到相似的結(jié)果，其鎮(zhèn)痛效應(yīng)是嗎啡的5倍多(圖1b；表1)。
表1局部阿片樣物質(zhì)在CD-1小鼠中的鎮(zhèn)痛活性
在甩尾實(shí)驗(yàn)中用藥物的至少3個(gè)劑量組小鼠(n=10-20/劑)確定具有95％可信區(qū)間的鎮(zhèn)痛藥的ED50值。如在“方法”中所述，對(duì)所有的藥物局部給藥1分鐘。M6G和DAMGO的比率是以嗎啡為對(duì)照確定的。
除了較強(qiáng)的效應(yīng)，DAMGO還有較長(zhǎng)的作用時(shí)間，幾乎持續(xù)1小時(shí)(圖1a)。與嗎啡相似，在離開DMSO溶液后可立即觀察到DAMGO的峰作用。這些止痛效應(yīng)容易被全身給藥的納洛酮(1mg/kg s.c.)逆轉(zhuǎn)，證實(shí)了阿片樣物質(zhì)的選擇性作用(圖2a)。此外，在未暴露于阿片樣物質(zhì)溶液的尾巴的近側(cè)部分未觀察到這些藥物的鎮(zhèn)痛效應(yīng)。
為了進(jìn)一步證實(shí)該方法的選擇性，在浸泡于含有[I125]嗎啡或[I125]DAMGO的溶液后，我們觀察了放射活性的分布(表2)。尾巴暴露于所述溶液的區(qū)域有高水平的放射活性。未直接暴露于所述溶液的近側(cè)部分的放射活性水平為直接浸沒于所述溶液中的遠(yuǎn)側(cè)尾端放射活性的不到1％。此外，在血液、腦和脊髓中無可檢測(cè)到的放射活性。
表2局部給藥后[I125]DAMGO的分布
將遠(yuǎn)側(cè)尾端(4-4.5cm)浸沒于[I125]標(biāo)記的嗎啡或DAMGO(100μCi/ml)的DMSO溶液中，并暴露3分鐘。對(duì)腦、脊髓、血液標(biāo)本以及來自小鼠尾巴暴露和未暴露部分的片段在暴露后5分鐘內(nèi)取材、稱重并直接在Packard5500γ分光計(jì)上計(jì)數(shù)。未暴露區(qū)域距暴露區(qū)域不到1厘米。放射活性用每克組織的cpm(cpm/g)表示。結(jié)果以檢測(cè)每個(gè)放射標(biāo)記藥物的三個(gè)動(dòng)物的均值±s.e.m.表示。
實(shí)施例3局部嗎啡-6β-葡糖苷酸的鎮(zhèn)痛作用通過尾部皮下注射局部施與的嗎啡-6β-葡糖苷酸(M6G)是鎮(zhèn)痛藥，但是在10或30μg的劑量有30％的上限效應(yīng)(資料未示)。在局部示例中，M6G產(chǎn)生完全的鎮(zhèn)痛效應(yīng)，且在離開藥物溶液后立即產(chǎn)生峰效應(yīng)(圖1a)，其效力同嗎啡相似(圖1b；表1)。與嗎啡相似，近側(cè)尾段沒有產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效應(yīng)，而且M6G的效應(yīng)容易被全身給藥的納洛酮逆轉(zhuǎn)(圖2a)。局部給藥后，M6G作用的持續(xù)時(shí)間與DAMGO相似，長(zhǎng)于嗎啡(圖1a)。選擇性M6G拮抗劑3-甲氧納曲酮(3MeONtx)(Brown等，1997)也顯著降低M6G的反應(yīng)(圖2b)。相反，同樣的3MeONtx劑量沒有抗嗎啡或DAMGO的止痛作用的活性(圖2b)。除了支持3MeONtx對(duì)M6G受體的選擇性外，這些觀察結(jié)果強(qiáng)烈支持存在功能性外周M6G受體。
實(shí)施例4外周/中樞協(xié)同作用我們實(shí)驗(yàn)室的前期工作表明在外周和中樞嗎啡系統(tǒng)存在有效的協(xié)同作用。在局部給藥后，我們也檢測(cè)了這些相互作用。在局部，嗎啡的作用迅速散失，從1分鐘時(shí)的80％下降到10分鐘時(shí)的30％，在30分鐘時(shí)，未見到止痛效應(yīng)。鞘內(nèi)或皮下給與嗎啡的最小活性劑量可以顯著提高局部嗎啡的反應(yīng)(圖3)。在超過30分鐘的時(shí)間點(diǎn)，這一作用非常明顯，在這一時(shí)間點(diǎn)單純的局部嗎啡作用完全喪失。在這些長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)，聯(lián)合給藥的止痛效應(yīng)明顯大于它們的累加作用(圖3b)。
我們隨后觀察了固定劑量的局部嗎啡對(duì)脊柱或全身給藥的嗎啡的ED50值的影響(表3)。
表3嗎啡局部給藥對(duì)嗎啡全身或脊柱給藥的止痛效應(yīng)的影響
對(duì)嗎啡單純?nèi)斫o藥或聯(lián)合一定劑量嗎啡(15mM)的局部給藥確定了ED50值及其95％可信區(qū)間。檢測(cè)是在治療30分鐘后進(jìn)行的，在該時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)不到嗎啡單純局部給藥的效應(yīng)。對(duì)嗎啡單純鞘內(nèi)給藥或聯(lián)合一定劑量(15mM)的局部給藥確定了ED50值及其95％可信區(qū)間。檢測(cè)是在治療15分鐘后進(jìn)行的，在該時(shí)間點(diǎn)嗎啡單純局部給藥僅有有限的(15％)反應(yīng)。
即使在測(cè)試的時(shí)間點(diǎn)(30分鐘)單純局部給藥的嗎啡沒有活性，嗎啡局部給藥使嗎啡全身給藥的鎮(zhèn)痛效力增加幾乎7倍。局部給藥的嗎啡也將嗎啡鞘內(nèi)給藥的效力增加幾乎12倍。因而，這些結(jié)果支持早期的關(guān)于外周和中樞嗎啡鎮(zhèn)痛系統(tǒng)間相互增強(qiáng)的推論。
實(shí)施例5
外周嗎啡耐受嗎啡全身給藥后，外周系統(tǒng)在耐受產(chǎn)生中很重要(Kolesinkov等，1996)。尾巴浸潤(rùn)途徑允許藥物反復(fù)在局部使用，而不造成組織損傷，方便了外周嗎啡耐受的研究。每日嗎啡局部給藥(15mM)，在第三天產(chǎn)生顯著的耐受性(圖4)，將嗎啡的ED50值改變9倍多(表4)。與每天全身給藥相比，局部給藥的耐受性產(chǎn)生得更迅速，程度更深，全身給藥治療5天，嗎啡的劑量-效應(yīng)關(guān)系僅改變2倍。
表4對(duì)嗎啡全身及局部給藥的耐受
在初次給藥的小鼠和長(zhǎng)期接受嗎啡的小鼠中確定全身或局部給藥后嗎啡的ED50值。利用至少三個(gè)劑量的藥物(n=10-20/劑)測(cè)定ED50值及其95％的可信區(qū)間。在全身給藥組中，在檢測(cè)前小鼠每日接受嗎啡給藥(5mg/kg，皮下注射)，連續(xù)4天；而局部給藥組每天用嗎啡溶液(15mM)處理，連續(xù)2天，第三天測(cè)定ED50值。至少用嗎啡的三個(gè)劑量來計(jì)算ED50值。
嗎啡全身給藥的小鼠顯示對(duì)局部給藥的嗎啡以及μ肽DAMGO顯著的耐受性(圖5)。然而，在這些小鼠中，局部M6G的鎮(zhèn)痛活性依然未變，證實(shí)了缺少先前報(bào)道的交叉耐受(Rossi等，1996)。
實(shí)施例6NMDA拮抗劑MK801對(duì)外周嗎啡耐受的阻斷NMDA/一氧化氮級(jí)聯(lián)放大在嗎啡耐受的產(chǎn)生中起重要作用(Kolesnikov等，1993)。阻斷該系統(tǒng)可阻止嗎啡耐受的發(fā)展，且不影響止痛作用。NMDA拮抗劑MK801全身給藥也可以阻止對(duì)嗎啡局部給藥的耐受產(chǎn)生(圖6a)。MK801局部給藥也可以阻斷嗎啡耐受，與全身給藥一樣有效(圖6a)，但是MK801鞘內(nèi)給藥則無效。局部MK801的作用是劑量依賴性的，0.3mM可有效阻斷耐受(圖6b)。
此外，MK801局部給藥可逆轉(zhuǎn)已經(jīng)建立的耐受(圖6c)。小鼠用嗎啡單純局部給藥處理3天后鎮(zhèn)痛效應(yīng)消失。在處理方案中增加MK801，盡管繼續(xù)施與嗎啡，但在隨后兩天恢復(fù)了鎮(zhèn)痛藥的敏感性。較高劑量的MK801比較低劑量的略更有效。首劑后伴隨無效的慢速逆轉(zhuǎn)強(qiáng)烈反駁了嗎啡效力的單純?cè)鰪?qiáng)作用。
實(shí)施例7NMDA受體拮抗劑氯胺酮對(duì)外周嗎啡耐受的阻斷每天嗎啡局部給藥(15mM)可導(dǎo)致耐受，在第三天止痛作用完全消失(圖7A和7B)。NMDA受體拮抗劑氯胺酮全身給藥可阻止局部嗎啡用藥的耐受，但是鞘內(nèi)氯胺酮給藥無效(資料未示)。局部氯胺酮與嗎啡聯(lián)合給藥與全身給藥一樣有效，均以劑量依賴的方式阻斷耐受性(圖7A)。低劑量(3.6mM)延緩耐受的出現(xiàn)，而高劑量(36mM)有效阻斷耐受。在該檢測(cè)中，單純氯胺酮無可檢測(cè)到的作用。
局部氯胺酮還可逆轉(zhuǎn)已經(jīng)建立的耐受(圖7B)。小鼠用一定濃度的嗎啡單獨(dú)局部治療3天后，止痛作用消失。在治療方案中增加氯胺酮，盡管繼續(xù)施與嗎啡，但在隨后的三天恢復(fù)了鎮(zhèn)痛藥的敏感性。
氯胺酮局部給藥的阻止和/或逆轉(zhuǎn)嗎啡耐受的能力提示一個(gè)外周作用機(jī)制，而且與利用dizocilpine(MK801)的上述實(shí)驗(yàn)相似。機(jī)理上，這些觀察結(jié)果與外周耐受由外周NMDA受體介導(dǎo)的可能性一致，所述受體可能位于含阿片樣受體之相同背根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元上。
討論外周阿片樣物質(zhì)的作用在我們理解阿片樣物質(zhì)的作用中變得越來越重要，這由在嗎啡全身給藥的作用中外周和中樞的協(xié)同作用所證實(shí)(Kolesnikov等，1996)。此外，外周作用位點(diǎn)對(duì)全身給藥的耐受的發(fā)展起主要作用。探討外周機(jī)制并不是簡(jiǎn)單的事。早期的研究利用尾部局部注射來檢測(cè)外周機(jī)制。雖然有用，但這種方法有許多缺點(diǎn)，尤其是在反復(fù)給藥觀察時(shí)。為了避免這個(gè)問題，我們發(fā)展了一種局部給藥的方法，這種方法普遍適合于生物堿和肽。尾浸泡技術(shù)有許多優(yōu)點(diǎn)。首先可以反復(fù)治療小鼠，而在注射后不產(chǎn)生組織損傷。此范例是選擇性的針對(duì)局部機(jī)制的。檢測(cè)尾的近側(cè)端沒有發(fā)現(xiàn)任何鎮(zhèn)痛效應(yīng)，證實(shí)了用I125-阿片樣物質(zhì)進(jìn)行的分布研究，此研究證明放射性標(biāo)記物僅定位在被溶液浸潤(rùn)的區(qū)域，而且在血液或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中沒有發(fā)現(xiàn)任何可檢測(cè)到的吸收。同樣重要的是，單純DMSO對(duì)甩尾檢測(cè)沒有影響。推測(cè)該方法并不限于DMSO，其他溶劑或局部膏劑也可以使用。我們沒有預(yù)測(cè)局部肽溶液是否有活性，但是在該范例中許多不同的μ和δ肽是有效的。很明顯，局部給藥方法為這些全身給藥并不非常有效的肽提供了新的臨床應(yīng)用可能性。因而，局部給藥方法為外周阿片樣物質(zhì)機(jī)制的檢測(cè)提供了有效的方法，且可在疼痛治療中作為一種治療方法。
在外周，所有被檢測(cè)的阿片樣物質(zhì)都是有效的鎮(zhèn)痛藥，在這三種中，DAMGO最為有效。嗎啡和M6G相似的外周效力與它們中樞作用相反，在中樞M6G的活性比嗎啡高約100倍多。在所有的實(shí)驗(yàn)中，沒有暴露于阿片樣物質(zhì)溶液的近側(cè)尾段沒有止痛效應(yīng)，證實(shí)了在阿片樣物質(zhì)溶液中浸泡的部位的外周作用位點(diǎn)。這些反應(yīng)容易被納洛酮拮抗。在中樞，3-MeONtx選擇性的逆轉(zhuǎn)M6G的止痛作用，而不影響嗎啡的止痛作用，這與作用的不同受體機(jī)制相一致(Brown等，1997)。3-MeONtx也可以逆轉(zhuǎn)外周M6G的止痛作用，而不影響DAMGO或嗎啡的作用。因而，與中樞一樣，外周M6G止痛作用有相同的拮抗劑選擇性。
先前的研究已經(jīng)證實(shí)了外周和中樞嗎啡作用的協(xié)同作用。本研究證實(shí)了這些早期研究。嗎啡局部給藥與全身或脊柱給藥聯(lián)合應(yīng)用表明可顯著增加效應(yīng)，超過它們相互間簡(jiǎn)單的累加。因而，如果在臨床上將要應(yīng)用阿片樣物質(zhì)局部給藥時(shí)，這些結(jié)果提示與全身給藥聯(lián)合應(yīng)用可能是最有效的。通過降低全身給藥的必需劑量，阿片樣物質(zhì)局部給藥可能大大減少現(xiàn)有與阿片類鎮(zhèn)痛藥相關(guān)的副作用。
嗎啡長(zhǎng)期全身給藥治療會(huì)導(dǎo)致耐受。定位嗎啡耐受的位點(diǎn)是困難的。嗎啡全身給藥耐受的小鼠對(duì)于嗎啡脊柱給藥和棘上給藥顯示正常的敏感性(Roeig等，1984)，但對(duì)外周給藥則不行(Kolesnikov等，1996)。事實(shí)上，在局部嗎啡劑量效應(yīng)曲線中19倍的變化，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了全身給藥后的變化。我們當(dāng)前的研究支持外周位點(diǎn)在嗎啡耐受中的作用。長(zhǎng)期嗎啡局部給藥可非常迅速地產(chǎn)生耐受性，三天便使效應(yīng)降低至檢測(cè)不到的水平，相應(yīng)的劑量效應(yīng)曲線改變9倍多。長(zhǎng)期用DMSO單獨(dú)給藥沒有作用。相同鎮(zhèn)痛劑量全身給藥時(shí)，耐受的發(fā)展速度較慢，程度較低，5天后劑量效應(yīng)曲線僅改變2倍。小鼠的外周嗎啡耐受與DAMGO有交叉耐受，但與M6G沒有。這種交叉耐受的缺失與3-MeONtx選擇性逆轉(zhuǎn)M6G的鎮(zhèn)痛作用一致，也與M6G作用的獨(dú)特受體機(jī)制一致。
N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑或一氧化氮合成酶抑制劑可阻止嗎啡耐受的產(chǎn)生(Trujillo和Akil,1994；Gutstein和Trujllo,1993；Ben-Eliyahu等，1992；Kolesnikov等，1993)。在這些范例中，考慮到耐受中外周阿片類物質(zhì)機(jī)制的重要性，我們觀察了外周NMDA拮抗劑的作用。嗎啡局部用藥的耐受可以被MK801全身給藥或局部給藥有效地阻斷，但脊柱給藥則不能。MK801全身給藥可能會(huì)進(jìn)入到整個(gè)動(dòng)物體內(nèi)，包括外周位點(diǎn)，而鞘內(nèi)給藥將被限制在中樞位點(diǎn)。同樣，氯胺酮局部給藥可阻止和/或逆轉(zhuǎn)嗎啡耐受。因而，在該模型中，只有進(jìn)入到外周位點(diǎn)的治療才是有作用的，提示外周NMDA受體負(fù)責(zé)介導(dǎo)嗎啡局部用藥的耐受。最近的證據(jù)支持在外周皮膚的軸突上存在興奮性氨基酸(EAA)受體(Carlton等，1995；Davidson等，1997；Zhou等，1996)。還需要進(jìn)行另外一些研究以證實(shí)作用位點(diǎn)。然而，局部NMDA拮抗劑的活性為疼痛治療提出了許多臨床可能性。許多現(xiàn)有NMDA受體拮抗劑由于較強(qiáng)致神經(jīng)錯(cuò)亂副作用而不適合于臨床應(yīng)用。將它們的應(yīng)用限制于局部制劑可以提供一種途徑以利用它們干擾耐受的發(fā)展而不產(chǎn)生限制性副作用的能力。
外周阿片樣物質(zhì)顯然在止痛和耐受中起重要作用。阿片樣物質(zhì)局部給藥可單獨(dú)產(chǎn)生止痛作用并且可增加全身給藥的效應(yīng)，這種能力提供了一種新的治療方法，其臨床上可能會(huì)被證明是有效的。局部應(yīng)用的肽的活性進(jìn)一步加強(qiáng)了該方法，因?yàn)樗鼮樵S多高度選擇性藥劑找到了通過非μ阿片受體機(jī)制發(fā)揮作用的應(yīng)用方法。最后，利用外周作用的NMDA拮抗劑阻斷局部給藥的耐受性在臨床治療疼痛中是另一個(gè)另人興奮的進(jìn)展。
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權(quán)利要求
1.一種局部藥物組合物，其包括至少一種N-甲基-D-夭冬氨酸受體拮抗劑和至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥，以及一種可藥用的局部賦形劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的局部藥物組合物，其包括至少一種鎮(zhèn)痛藥，且其中的鎮(zhèn)痛藥選自阿片、阿片衍生物、阿片樣物質(zhì)、腦啡肽、內(nèi)啡肽及合成的阿片肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的局部藥物組合物，其中阿片樣物質(zhì)選自乙基嗎啡、氫嗎啡、嗎啡、羥基二氫嗎啡酮、可待因、左啡諾、羥考酮、戊唑辛、丙氧酚、芬太尼、舒芬太尼、洛芬太尼、嗎啡-6-葡糖苷酸和丁丙諾啡。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的局部藥物組合物，其中腦啡肽選自[D-Ala2,MePhe4,Gly(ol)5]腦啡肽和內(nèi)啡肽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的局部藥物組合物，其中鎮(zhèn)痛藥為嗎啡。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的局部藥物組合物，其中NMDA受體拮抗劑選自右美沙酚、右啡烷、氯胺酮、吡咯并喹啉醌、順-4-(膦酰甲基)-2-哌啶羧酸、MK801、美金剛和它們的混合物及它們的可藥用鹽類。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的局部藥物組合物，其進(jìn)一步包括一種局部麻醉劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的局部藥物組合物，其中局部麻醉藥選自利多卡因、丁哌卡因、甲哌卡因、羅哌卡因、丁卡因和苯唑卡因。
9.一種為哺乳動(dòng)物提供外周鎮(zhèn)痛作用的方法，其包括在局部施與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥之前、同時(shí)或之后局部應(yīng)用減輕或預(yù)防耐受的劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中NMDA受體拮抗劑選自右美沙酚、右啡烷、氯胺酮、吡咯并喹啉醌、順-4-(膦酰甲基)-2-哌啶羧酸、MK801、美金剛和它們的混合物及它們的可藥用鹽類。
11.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中鎮(zhèn)痛藥選自阿片、阿片衍生物、阿片樣物質(zhì)、腦啡肽和內(nèi)啡肽。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中阿片樣物質(zhì)選自乙基嗎啡、氫嗎啡、嗎啡、羥基二氫嗎啡酮、可待因、左啡諾、羥考酮、戊唑辛、丙氧酚、芬太尼、舒芬太尼、洛芬太尼、嗎啡-6-葡糖苷酸和丁丙諾啡。
13.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中腦啡肽選自[D-Ala2,MePhe4,Gly(ol)5]腦啡肽和內(nèi)啡肽。
14.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中NMDA受體拮抗劑的給藥劑量為大約0.1％至大約5％。
15.為已針對(duì)一種鎮(zhèn)痛藥產(chǎn)生耐受性的哺乳動(dòng)物提供鎮(zhèn)痛作用的方法，其包括在局部或全身施與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥的同時(shí)或之后，局部施與有效逆轉(zhuǎn)耐受的劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
16.一種抑制對(duì)鎮(zhèn)痛藥耐受的藥劑盒，其包括(A)一種局部或全身給藥的藥物組合物，其包括至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥；(B)一種局部給藥的藥物組合物，其包括至少一種抑制耐受的NMDA受體拮抗劑。
17.一種為哺乳動(dòng)物的提供鎮(zhèn)痛作用的方法，其包括在全身或鞘內(nèi)施與通過阿片受體發(fā)揮作用的第二種鎮(zhèn)痛藥之前、同時(shí)或之后，局部施與至少一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛藥。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其進(jìn)一步包括局部施與減輕或預(yù)防耐受的劑量的至少一種NMDA受體拮抗劑。
全文摘要
本發(fā)明開發(fā)了一種阿片樣物質(zhì)局部給藥的范例來確定嗎啡的外周鎮(zhèn)痛效應(yīng)。在輻射熱甩尾實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中,嗎啡以及如[D－Ala2,MePhe4,Gly(ol)5]腦啡肽(DAMGO)的肽局部給藥產(chǎn)生有效的劑量效應(yīng)依賴的鎮(zhèn)痛作用。局部給藥可以增強(qiáng)全身給藥的效力,這與先前確定的外周和中樞位點(diǎn)的協(xié)同作用相似。反復(fù)每天局部接觸嗎啡可迅速產(chǎn)生局部耐受。嗎啡局部耐受可以被全身或局部給藥的N－甲基－D－天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑MK801和氯胺酮有效阻斷。NMDA受體拮抗劑可以逆轉(zhuǎn)已存在的嗎啡耐受。局部給藥的NMDA拮抗劑阻斷局部嗎啡耐受的作用說明外周NMDA受體介導(dǎo)局部嗎啡的耐受。嗎啡與[D－Ala2,MePhe4,Gly(ol)5]腦啡肽(DAMGO)有交叉耐受,但與嗎啡－6β－葡糖苷酸沒有交叉耐受,說明有不同的作用機(jī)制。這些結(jié)果對(duì)阿片樣物質(zhì)的臨床設(shè)計(jì)和利用有重要作用。本文描述了產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用但不誘導(dǎo)耐受的局部藥物組合物,其包括一種通過阿片受體發(fā)揮作用的鎮(zhèn)痛劑以及一種NMDA受體拮抗劑。
文檔編號(hào)A61K31/21GK1309562SQ99808693
公開日2001年8月22日 申請(qǐng)日期1999年7月15日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月16日
發(fā)明者尤里·科勒斯尼科夫, 加夫里爾·W·帕斯特納克 申請(qǐng)人:紀(jì)念斯隆-凱特林癌癥中心