專利名稱：轉運活性成分通過屏障的制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及活性成分以非常小的液滴形式給藥的新制劑，該液滴可懸浮于液體介質中，具有一種由一個或多個分子層組成的類膜外層，含有一種活性成分并特別適合于轉運活性成分通過屏障，例如皮膚、粘膜、器官等中的天然滲透性屏障和細孔。
另外，本發(fā)明還涉及這種制劑的生產方法，尤其是活性成分的非侵襲性給藥制劑的生產方法。
活性成分的給藥經常受限于諸如皮膚的天然屏障，它們阻礙活性成分的充分引入。這是因為它們對于活性成分來說沒有足夠的滲透性。例如，由于皮膚的滲透性屏障，目前的大多數治療藥劑必須通過口服或胃腸外(靜注、肌注、腹膜內注射)給藥。氣霧劑的肺內和鼻內應用、直腸栓劑的應用、凝膠的粘膜應用、眼用制劑等僅作用于某些位置，并且不帶任何活性成分。由于表皮蠟層的存在，活性成分引入植物組織要經受更大的限制。
適于透過這種滲透性屏障的活性成分制劑的非侵襲性給藥在許多情況下是有優(yōu)勢的。例如在人和動物中，這種制劑的經皮給藥可保護所給的活性成分不在胃腸道中分解，并可使此劑在體內的分布得到改進；它可影響此藥的藥物動力學，并形成一種常見而簡單的非侵襲性治療(Karzel，K.，Liedtke，R.K.(1989)藥物研究(Arzneim.Forsch./Drug Res.)39，1487-1491)。在植物中，提高通過或進入表皮的滲透性，可降低所要獲得效果的活性成分的濃度，另外還可明顯降低環(huán)境污染(Price，C.E.(1981)，植物表皮(D.F.Cutler，K.L.Alvin，C.E.Price出版)，學報，紐約，237-252頁)。
已經頻繁地討論了通過適宜的方法來影響皮膚的滲透性(參見，例如Karzel和Liedtke，同上，)。尤其值得提及的是例如噴射注射(Siddiqui&Chien(1987)Crit.Rev.Ther.Drug.Carrier，Syst.3，195-208)、電場的應用(Burnette&Ongpipattanakul(1987)J.Pharm.Sci.76，765-773)或諸如溶劑或表面活性劑等化學添加劑的應用。例如Aungst等的著作中列出了許多非活性成分，用它們進行試驗以提高一種水溶性活性成分(Nolaxon)進入皮膚的滲透性(1986，Int.J.Pharm.33，225-234)。
眾所周知的提高活性成分滲透過皮膚或粘膜的方法是基于滲透增強劑的應用。這種滲透增強劑含有非離子物質(長鏈醇、表面活性劑、兩性離子磷脂)、陰離子物質(特別是脂肪酸)、陽離子長鏈胺、亞砜、以及各種氨基衍生物和兩性氨基乙酸酯和甜菜堿。然而活性成分滲透入皮膚的難題尚未解決或者還沒有得到滿意的解決。
Price的著作(1981，同上，)中總結了這些方法，它們已應用于提高活性成分通過植物表皮的滲透性。
這些先前專用的滲透增強劑提高了通過皮膚或粘膜的滲透性屏障的能力，這是因為它們可增強屏障中類脂部分的流動性。應用化學滲透增強劑時，先前通常是將它們簡單地加入含有活性成分的混合物中；添加劑有時也僅應用于人的皮膚，尤其是以有機溶液的形式。此給藥形式與前面研究討論的添加劑作用的原理有關。通常假定一方面此藥劑滲透性的提高是基于皮膚的軟化(流化作用)(Golden等(1987)J.Pharm.Sci.76，25-28)。一般來說，皮膚的軟化與皮膚表面及其保護性屏障的性質的破壞有關，因而這是不能接受的。另一方面，可以看到某些活性成分是以與添加劑形成低分子量復合體的形式滲透過皮膚的(Green等(1988)Int.J.Pharm.48，103-111)。
到目前為止，離開這些概念(諸如類脂懸浮液的表皮應用)尚未提出多少改進的建議。這些懸浮液典型地包含許多囊或O/W或W/O乳化劑。
基于一種類脂-脂質體(Patel，Bioch.Soc.Trans.，609th Meeting，13，513-517，1985，Mezei，M.Top.Pharm.Sci.(Proc.45Th Int.Congr.Pharm.Sci.F.I.P.)345-58 Elsevier，Amsterdam，1985)的載體，其經皮應用主要影響活性成分的動力學，幾位作者已在理論上進行了討論。也討論了常規(guī)類脂囊的應用，此囊如果要通過皮膚也是非常不完全，如本專利申請所示。因此，脂質體、niosomes或其它常規(guī)類脂囊限于皮膚的外層使用。
從某種相同的意義上來說，日本專利申請JP61/271204 A2(86/271204)是通過將氫醌葡糖苷醛用作一種原料而應用脂質體，此原料可增加活性成分的穩(wěn)定性。
WO87/1938 A1中提出以“經皮小片”的形式應用帶有活性成分的類脂囊，同時還應用一種膠凝劑。通過這種方法，可能會延長作用時間；但是活性成分的滲透力幾乎沒有提高。通過將大量的促進滲透的聚乙二醇和脂肪酸與類脂囊一起應用，Gesztes和Mezei(1988，Anesth.Analg.67，1079-1081)用含利多卡因的載體成功地達到局部止痛，然而這只是在閉合應用數小時后產生，并僅在小的范圍內。
另外還發(fā)現了適于滲透入或滲透過滲透性屏障的載體制劑。例如，通過應用一種特殊制劑可能第一次引人注目地超過了Gesztes和Mezei的結果，它含有濾過的、含洗滌劑的類脂囊(脂質體)，其所要求的最佳類脂/表面活性劑的含量為1-40/1，而實際上通常為4/1。
而且還認識到，為了能滲透過屏障的細孔(諸如皮膚的細孔)，所有這些載體有充足的彈性，適于滲透入和滲透過滲透性屏障。特別的是，如果載體在應用之后在滲透性屏障上形成一種梯度，那么在這種情況下，他們傾向于自發(fā)地透過滲透性屏障。在DE 41 07 152和DE 41 07 153專利申請中第一次描述了載體，即下面提到的轉運體(transfersomes)；它們用于將活性成分運輸過幾乎所有滲透性屏障。
轉運體在幾種基本特性方面與前面所述用于表面的脂質體不同，也與其它載體不同。通常轉運體比常規(guī)膠束狀載體制劑大得多，因此有不同的擴散規(guī)律。例如，滲透性不是驅動壓力的線性函數，這是脂質體的情況，在轉運體情況中，與脂質體或其它已知相似載體系統(tǒng)相反，其滲透力隨著壓力的增加呈不相稱或非線性增加。而且通過轉運體而引入細孔的物質在人體中可發(fā)揮的生物學或治療潛力幾乎為可獲得的最大潛力的100％。例如，超過50％且經常超過90％的活性成分可規(guī)則地到達人體的目標位置，它們已被經皮應用并包裹于轉運體中。這些轉運體含有一種活性物質，它相當于含量的至多99mol％，至少此物質的0.1mol％，通過它可獲得此滴的加溶點，這些轉運體描述于EP91114163和PCT/EP91/01596中。
邊界活性物質的含量可使轉運體達到加溶極限的最佳近似值(該活性物質可使轉運體完全不穩(wěn)定)，以致于它們有足夠的彈性而能滲透過屏障的細孔，諸如皮膚中的那些細孔。因此邊界活性物質的含量被認為是轉運體滲透力的決定條件，其滲透力大于脂質體或已知相似的載體的滲透力。
對于這種有滲透力的高品位制劑的配方，現在非常需要它不限于所指定的含量范圍。
因此提出用于活性成分給藥的轉運體是本發(fā)明的一個目的，此轉運體或沒有加溶點，或遠離加溶點，并且可以將活性成分快速而有效地轉運過屏障和細孔。
另外本發(fā)明的一個目的是使轉運體可用于將活性成分轉運通過人、動物和植物的屏障，這種轉運體可提高活性成分在作用位點的效力。
而且本發(fā)明的一個目的是提出制備這種轉運活性成分轉運體的一種方法。
獨立權利要求的突出特征用來達到此發(fā)明目的。
其優(yōu)越性顯示于從屬權利要求中。
令人驚喜地是發(fā)現還可以形成轉運體制劑，它適于將至少一種活性成分給藥或轉運進入和通過諸如皮膚等的天然屏障和細孔，尤其是用于醫(yī)學和生物學，而且它為液滴狀，此液滴可懸浮于一種液體介質中，并提供一種有一層或多層兩親載體物質的類膜外層，此載體物質含有至少兩種兩親成分，這些成分在物理和/或化學上不同，并在轉運體的懸浮介質(通常為水)中的溶解性也不同，如果它們加溶成分的含量低于這些物質含量的0.1mol％，其系數至少為10，由此達到此包裹液滴的加溶點，或者選擇兩親成分使其不管濃度是多少，所有的包裹液滴都不存在加溶。
本發(fā)明的制劑，即下面再次提到的轉運體，可由任意具有足夠不同溶解性的兩親成分制備。如果懸浮介質中轉運體的單個載體成分的溶解度相差的系數至少為10(和至多為107)，那么此條件就得到了滿足。滿足此條件可確保在一種梯度(象皮膚一樣的完整天然屏障)的影響下，所得轉運體的類膜外層的可變形性得到提高。此特性可使本發(fā)明的轉運體滲透過任何滲透性屏障中的細孔。
本發(fā)明制劑滲透過細孔的滲透力至少是基本無阻礙的滲透小分子的滲透力的0.001％，優(yōu)選大于0.1％。
據目前所知(但不被限于理論性的科學定義)，用于此處的溶解度的概念涉及所謂的真溶液。不論如何，當達到一個極限濃度，可觀察到溶解度的極限，它通過沉淀形成、結晶形成、懸浮體形成或者通過諸如膠束的分子聚集體的形成來確定。對于自聚集分子，溶解度極限典型地相當于臨界自聚集濃度(CAC)。對于分子形成膠束，溶解度極限典型地相當于臨界膠束濃度(CMC)。
本發(fā)明的轉運體明顯與前面所述的轉運體不同。特別是本發(fā)明所用轉運體與可由任何成分結合、不管其加溶能力如何而形成的已知轉運體不同。
而且，本發(fā)明的轉運體的穩(wěn)定性更好于已知轉運體(見專利申請WO92703122和EP475160)，因為這種轉運體組合物遠離加溶點。
附

圖1顯示在接近本技術領域中所述的轉運體加溶點方面(然而并未達到此加溶點)，在一屏障中滲透阻力的下降為邊界活性物質濃度的函數。
附圖2顯示在接近理論加溶點(實際未達到此點)方面，對于本發(fā)明轉運體而言，在一屏障中滲透阻力的下降是該成分濃度的函數。
附圖2清楚地表明，對于本發(fā)明轉運體的成分系統(tǒng)，不存在加溶點，或者當達到最大滲透力時，離加溶點尚遠。
因此本發(fā)明轉運體為轉運各種活性成分進入或通過滲透性屏障打開了一個良好、一致而常用的途徑。這種新發(fā)現的活性成分的載體適用于人和獸醫(yī)學、皮膚病學、化妝、生物學、生物工藝學、農業(yè)工藝學和其它方面。
另外此轉運體在一種梯度的作用下滲透或擴散過和/或進入滲透性屏障的能力很突出，因此可轉運原料，特別是活性成分。根據其曲線是非線性的，可容易地認識并定量測定此能力。在此曲線中將滲透力繪制成梯度的函數。
按照本發(fā)明，這種轉運體由幾種至許多種分子組成，它們在物理化學上、物理上、熱力學上形成一個單元，并且通常是呈函數關系。此轉運體的最佳大小是屏障特性的函數。這依賴于轉運體的極性(親水性)、流動性(動力學)和電荷，以及轉運體的彈性(表面)。轉運體的大小優(yōu)選在10至10,000nm之間。
按照本發(fā)明，用于皮膚病學的轉運體的大小優(yōu)選為50至10,000nm，通常為75至400nm，并且特別優(yōu)選為100至200nm。
對于應用于植物，通常可取的轉運體相當小，主要地其直徑小于500nm。
此制劑液滴(轉運體)的囊半徑大約是25至500，優(yōu)選50至200，特別優(yōu)選是80至180nm。
對于任何兩親原料的本發(fā)明轉運體，優(yōu)選水溶性在10-10M至10-6M的一種或多種成分和水溶性在10-6M至10-3M的一種或多種成分結合?；蛘?，可結合的兩親成分也可在其HLB值的基礎上彼此分配，此兩親成分HLB值之差優(yōu)選至多為10，通常為2至7，特別優(yōu)選為3至5。
本發(fā)明轉運體的滲透力可通過測量而確定，在測量中將轉運體與參比顆?；蚍肿舆M行比較。所用參比顆粒明顯小于屏障中的細孔，因此具有最大的滲透力。優(yōu)選地，當一種試驗屏障本身是測定點時，轉運體通過此屏障的滲透率(P轉運體)與比較原料的滲透率P參比(諸如水)的差異不應當超過系數10-5至10-3。如果需要原料比較均勻和緩慢地轉運過此屏障，所給的比率應當在10-4至1之間。當P轉運體/P參比大于10-2時，滲透力最大。此數據涉及系數大于2而小于4的大于細孔的轉運體。增加載體和細孔之間的大小差異，即系數大于4時，P轉運體/P參比值相應地變小。
此申請的轉運體可由一個或幾個成分組成。最常用一種基本物質的混合物。適宜的基本物質含有類脂和其它兩親物質，以及親水液體；這些物質可以特定的比率與活性成分分子混合，這比率依賴于物質的選擇和它們的絕對濃度。
通常此制劑含有至少兩種不同溶解度的兩親成分，以形成一種包繞大量親水液滴的類膜外層，活性成分含于類膜外層(例如一種雙膜)和/或親水液體中。也可在活性成分和載體之間發(fā)生聯系，至少部分僅在轉運體樣液滴形成之后發(fā)生。
如果此轉運體本身無足夠的可變形性且要通過添加邊界活性原料而獲得滲透力，這些原料的濃度相當于小于此量的0.1mol％，此量對于加溶轉運體是需要的，或者在實際的有關濃度范圍中此加溶是完全不能獲得的。
本發(fā)明轉運體可用于轉運活性成分通過幾乎任意滲透屏障，例如可用于藥物的經皮給藥。它們可轉運水溶性、兩親性或脂溶性制劑，并且依賴它們的組合、所用的量和它們的形式，可獲得不同的滲透深度。這種用轉運體制成一種載體的特性可通過含磷脂的囊以及通過其它兩親聚集體獲得。例如，憑借這種轉運體不僅可將大部分活性成分分子轉運入此屏障(例如皮膚中)，而且還可通過此屏障，隨后還可成為系統(tǒng)性活性。例如，轉運體可轉運多肽分子通過皮膚，其有效性是先前在促進滲透的無結構物質幫助下的1000倍。
定義類脂按本發(fā)明的意思，類脂是其性能象或類似脂肪的任何物質。通常它有一個擴展的非極性基團(鏈，X)，并且一般也有一個水溶性、極性親水部分--端基(Y)，而且具有基本式1。
X-Yn(1)在此n等于或大于0。n＝0的類脂稱為非極性類脂，n≥1的類脂稱為極性類脂。在這種意義上來說，通?？蓪⑺袃捎H物質諸如甘油酯、甘油磷脂、甘油膦基脂、甘油膦酰基脂、硫苷脂、鞘脂類、類異戊二烯脂、類固醇或固醇和含糖類的脂類看作類脂。
例如一種磷脂為式2的化合物R-CH2-CHR2-CR3H-POOn-O-R4·G+(2)在此n和R4由式2確定，R1、R2不能是氫、OH或短鏈烷基，R3通常為氫或OH。而且R4為一個被三短鏈烷基銨基取代的短鏈烷基，諸如三甲銨基，或者為一個氨基取代短鏈烷基，諸如2-三甲銨基乙基(膽堿基)。
優(yōu)選類脂為式2的一種物質，其中n＝1，R1和R2為羥?；?，R3為氫，R4為2-三甲銨基乙基(后者相當于磷脂酰膽堿端基)、2-二甲銨基乙基、2-甲銨基乙基或2-氨基乙基(相當于磷脂酰乙醇胺端基)。
例如，這種類脂是一種天然卵磷脂，它稱為卵磷脂。它可從蛋(富含花生四烯酸)、大豆(富含C18鏈)、椰子(富含飽和鏈)、橄欖(富含單不飽和鏈)、藏紅花(紅花)和向日葵(富含n-6亞油酸)、亞麻子(富含n-3亞油酸)、鯨脂肪(富含單不飽和n-3鏈)、櫻草或櫻草屬(富含n-3鏈)中獲得。通常天然磷脂酰乙醇胺優(yōu)選于蛋或大豆。
而且，合成磷脂酰膽堿(式2中的R4相當于2-三甲銨基乙基)、合成磷脂酰乙醇胺(R4為2-氨基乙基)、合成磷脂酸(R4為一個質子)或其酯(例如R4相當于一個短鏈烷基，諸如甲基或乙基)、合成磷脂酰絲氨酸(R4為L-或D-絲氨酸)、或者諸如磷脂酰磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油(R4為L-或D-甘油)的合成磷脂酰(聚)醇都可優(yōu)選作類脂，其中R1和R2是完全相同的酸基，諸如月桂?；?、油酰基、linoyl、亞油酰基或花生?；T如二月桂?；⑹孽；?、二棕櫚酰基、二硬脂?；?、二花生?；?、二油酸?；?、dilinoyl、dilinolenyl、二亞麻?；ilinolinoyl、dilininolenoyl或二花生?；字Ｄ憠A或乙醇胺，或各種酰基，諸如R1＝棕櫚酰基和R4＝油?；?諸如1-棕櫚?；?2-油酰基-3-甘油磷酰膽堿)，或者各種羥?；?，諸如R1＝羥基棕櫚?；蚏4＝油?；取６?，R1可代表鏈烯基，R2代表相同的羥烷基，諸如十四烷羥基或十六烷羥基，例如在二十四烷基或二十六烷基磷脂酰膽堿或乙醇胺中；R1可代表鏈烯基，R2代表羥?；T如縮醛磷脂(R4為三甲銨基乙基)；或者R1可為酰基，諸如月桂酰基、十四酰基或棕櫚?；琑2可代表羥基，例如在天然或合成溶血卵磷脂或溶血磷脂酰甘油或溶血磷脂酰乙醇胺，諸如1-十四酰基或1-棕櫚?；苎蚜字?磷脂酰乙醇胺；通常R3代表氫。
式2的類脂也是一種符合本發(fā)明的適宜的類脂。在式2中，n＝1，R1為鏈烯基，R2為酰胺基，R3為氫，R4代表2-三甲銨基乙基(膽堿基)。這種類脂已知為鞘磷脂。
另外，適宜的類脂為一種溶血磷脂酰膽堿類似物(諸如1-月桂酰-1，3-二羥基丙烷-3-磷?；憠A)、一種單酸甘油酯(諸如一油精或單甘油三肉豆蔻酸酯)、一種腦苷、N-脂?；拾贝季奂禾酋ァ⒘蜍罩?、鞘氨醇縮醛磷脂、神經節(jié)苷脂，或一種甘油酯，它在3位上不含自由或酯化磷?；蜢⒒?。例如，這種甘油酯為含任意酰基或鏈烯基的二?；视王セ?-鏈烯基-1-羥基-2-酰基甘油酯，其中3-羥基可被一種稱為糖基的基團醚化，例如被半乳糖基，諸如單半乳糖甘油。
也可憑借生化的方法由天然或合成前體形成具有所需端基或鏈基特性的類脂，例如憑借磷脂酶(諸如磷脂酶A1、A2、B和C，特別是D)、去飽和酶、伸長酶、?；D移酶等。
另外，適宜的類脂為任意包含于生物膜中的類脂，并且此類脂可通過非極性有機溶劑(諸如氯仿)將其提取。除了已提到的類脂，這種類脂也包括例如，類固醇(諸如雌二醇)或固醇(諸如膽固醇、β-谷甾醇、鏈甾醇、7-酮-膽固醇或β-膽甾烷醇)、脂溶性維生素(諸如視黃素)、維生素(諸如維生素A1或A2、維生素E、諸如維生素K1或K2的維生素K或維生素D1或D3)等。
低溶性兩親成分包含或優(yōu)選包含一種合成類脂，諸如肉豆蔻腦酰、棕櫚油酰、巖芹酰、petroselaidyl、油酰、反油酰、順式或反式11-十八碳烯酰、亞油酰、亞麻酰、linolaidyl、十八烷四烯酰(octadecatetraenoyl)、二十碳-11-烯酰、二十烷酰、二十碳二烯酰、二十碳三烯酰、花生酰、順式或反式二十二烷酰、二十二烷二烯酰、二十二烷三烯酰、二十二烷四烯酰、月桂酰、十三烷酰、肉豆蔻酰、十五烷酰、棕櫚酰、十七酰、硬脂?；蚴捧?、甘油磷脂或相應的帶支鏈的衍生物，或一種相應的二烴基或鞘氨醇衍生物、糖脂或其它二?；蚨榛愔?。
通常高溶性兩親成分由上面列舉的低溶性成分衍生而來，并且為了增加溶解度，與丁酰、戊酰、己酰、庚酰、辛酰、壬酰、癸酰或十一酰取代基或幾種相互獨立的所選的取代基，或者與可提高溶解度的不同原料進行取代和/或配合和/或締合。
更適宜的類脂為一種二酰基或二烷基甘油磷酰乙醇胺偶氮聚羥乙烯衍生物、一種二癸酰磷脂酰膽堿或一種二酰基磷基寡麥芽糖酰胺。
按照本發(fā)明，在極性原料中溶解度小或者至少局部小的任意其它物質(諸如一種聚或寡氨基酸)被看作是一種類脂。
所有的表面活性劑和不對稱且兩親的分子或聚合物(諸如某些寡糖和多糖、寡肽和多肽、寡核苷酸和多核苷酸)、許多醇或這些分子的衍生物都屬于此范疇。
此“溶劑”、表面活性劑、類脂或活性成分的極性依賴于各個分子有效的相對親水性/疏水性。但是，它也依賴于其它系統(tǒng)成分的選擇和系統(tǒng)中的邊界條件(溫度、鹽含量、PH等)。官能基團諸如疏水基中的雙鍵可減弱此基團的疏水性能，可提高其極性；疏水基中取代基的擴大或龐大的取代基可降低物質的極性，諸如在芳香基中。端基中的帶電基團或高極性基團，當疏水鏈保持相同時，它通常使分子具有較高的極性和溶解度。親脂和/或兩親系統(tǒng)成分之間的直鍵具有相反的作用。
特別地，EP專利申請475160中列舉用作邊界活性物質的所有化合物均適宜用作高極性物質。在此明確地參考此專利申請的說明書。
活性成分本發(fā)明轉運體適宜于大多數不同活性成分的給藥，特別是，例如用于治療目的的。例如本發(fā)明制劑可含有(特別是)EP專利申請475160中列舉的所有活性成分。
而且本發(fā)明制劑可含有腎上腺皮質抑制劑、β-抑腎上腺素劑、雄激素或抗雄激素劑、抗寄生物劑、同化劑、麻醉劑、止痛劑、回蘇劑、抗變應性劑、抗心律失常劑、抗動脈硬化劑、抗氣喘劑和/或支氣管痙攣解痙劑、抗菌劑、抗抑郁劑和/或抗精神病劑、抗糖尿病劑、解毒劑、止吐劑、抗癲癇劑、抗纖溶劑、抗驚厥劑或抗膽堿能劑、酶、輔酶或相應的抑制劑、抗組胺劑、抗高血壓藥、生物活性抑制劑、抗低血壓藥、抗凝劑、抗真菌劑或抗肌無力劑、抗帕金森病或阿耳茨海默病的活性成分、消炎劑、解熱劑或抗風濕劑、防腐劑、呼吸壯神或興奮劑、支氣管松解劑、強心劑或化療劑、冠脈擴張劑、細胞抑制劑、利尿劑、神經節(jié)阻滯劑、糖皮質激素、流感的治療劑、止血劑、安眠劑、免疫球蛋白或片段或不同的免疫或受體物質、生物活性碳水化合物(衍生物)、避孕藥、偏頭痛劑、鹽皮質激素、嗎啡對抗劑、肌松劑、麻醉劑、神經或CNS治療劑、核苷酸或聚核苷酸、精神抑制藥、神經類介質或相應的對抗劑、肽(衍生物)、眼藥、擬(副)交感神經藥或抗(副)交感神經藥、蛋白(衍生物)、銀屑病/神經性皮炎藥、擴瞳劑、情緒提高劑、鼻科用藥、睡眠頓服劑或其對抗劑、鎮(zhèn)靜劑、解痙劑、結核菌抑制劑或泌尿科藥、血管收縮或擴張劑、病毒抑制劑或傷口愈合劑或幾種這樣的藥，它們均可作為活性成分。
該活性成分優(yōu)選為非甾族抗炎藥，諸如雙氯滅痛、布洛芬或其鋰、鈉、鉀、銫、銣、銨、一甲酯、二甲酯、三甲銨或乙銨鹽。
而且本發(fā)明制劑可含有用于生物的生長調節(jié)物質、生物殺傷劑諸如殺蟲劑、農藥、除草劑、殺真菌劑或誘惑物，特別是信息素，它們均可用作活性成分。
用作較低極性的成分，本發(fā)明制劑可含有一種生理上相容的類脂，它們優(yōu)先選自磷脂類，并且尤其是磷脂酰膽堿類；該活性成分，例如布洛芬、雙氯滅痛或其鹽，它們是有較高溶解度的成分，可任選加或不加其它活性成分，其加入量可低于10％(重量比)，此基于該制劑總的組成，而較高溶解度成分的濃度典型地在0.01％至15％(重量比)之間，優(yōu)選在0.1％至10％(重量比)之間，特別優(yōu)選在0.5％至3％(重量比)之間，并且總類脂濃度在0.005％至40％(重量比)之間，優(yōu)選在0.5％至15％(重量比)之間，尤其在1％至10％(重量比)之間。
另外，本發(fā)明制劑可含有稠度調節(jié)劑(諸如水凝膠)、抗氧化劑(諸如丙丁酚、生育酚、BHT、抗壞血酸、去鐵敏)和/或穩(wěn)定劑(諸如苯酚、甲苯酚、苯甲醇)等。
除非另作特殊說明，所有提到的物質含一個或多個手性碳原子的表面活性劑、類脂、活性成分或添加劑可用作外消旋混合物，或可用作旋光純的對映體。
作用原理在滲透屏障的條件下，活性成分的轉運可通過那些轉運體完成，它們需滿足下面的基本標準-轉運體應體現或建立一種梯度，這種梯度將它們引入或越過屏障，例如從身體表面進入皮膚和至皮膚下、從葉子表面進入葉子內部、從屏障的一邊至另一邊；-轉運體在屏障中的耐滲透與驅動力相比應盡可能?。?在沒有丟失以無控制方式包含的活性成分的同時，轉運體應當能滲透進入和/或通過此屏障。
而且，轉運體應當允許活性成分的分布和效果以及作用的過程是可控制的時間的函數。如果需要，它們也應能夠將原料帶進此屏障的深度并越過此屏障，并且/或者可催化這樣一種轉運。然后，但不是最后，此轉運體應當可影響作用的范圍和深度，以及在適當的條件下，可影響它所到達或治療的細胞、組織部分、器官或系統(tǒng)部分的性質。
首先考慮生物應用的化學梯度。特別適宜的是物理化學梯度，諸如(脫水)水合壓力(濕氣梯度)或應用位點和作用位點間的濃度差；而且電場或磁場，以及熱梯度在這方面也是有用的。對于技術上的應用，所用的靜水壓或存在的壓力差也是重要的。
為了滿足第二個條件，轉運體在微觀上必須充分地為“液體”，即它們必須有足夠高的機械彈性和可變形性，以及足夠低的粘性；只有這樣它們才可通過滲透性屏障內的細孔。
很明顯，滲透阻力隨載體的大小而下降。但是其驅動力通常也依賴于載體的大?。蝗绻藟毫εc大小無關，此驅動力典型地隨大小而下降。由于此原因，轉運系數不是大小的簡單的函數，并且通常有一個最大值，這依賴于載體和活性成分的選擇。
另外載體物質、活性成分和添加劑的選擇，以及所用載體的量或濃度也起一定的作用。通常低劑量可治療表面。同時，低水溶性物質通常留在滲透性屏障的非極性區(qū)(例如表皮的膜)。容易溶解的活性成分易于擴散出載體，它可與載體中的活性成分之間有一個分布差異。對于這種原料，轉運體膜的滲透性也是重要的。趨于穿透載體而進入屏障的物質可導致局部可變的載體成分等。在任何應用之前應當考慮這些關系。在尋求使簡單的載體囊變成轉運體的條件時，可應用下面憑經驗而得的方法
-開始將兩個或多個兩親成分結合，這些成分在轉運體所需的懸浮介質中的溶解度不同，通常為水或一種不同的極性一般含水的介質，其系數為10至107，優(yōu)選102至106，尤其優(yōu)選103至105，較低溶解性的成分的溶解度為10-10至10-6，較高溶解性的成分的溶解度為10-6至10-3M。如果從一般常用的參考文件中不知道相應成分的溶解度，那么可通過例如測定飽和極限的常用方法進行測定。
-下一步，選用系統(tǒng)中載體組成或各成分的濃度，以便使此囊足夠穩(wěn)定，而且有足夠的可變形性，因而具有適當的滲透力。在此申請中，可將穩(wěn)定性理解為機械“內聚力”，而且物質含量，特別是載體組合中的活性成分的含量在轉運過程中無變化，或者無明顯變化，特別是在滲透的過程中。所尋求的最佳狀況依賴于所選的成分。
-最后，考慮到應用方法和所針對的目的而使系統(tǒng)參數最佳化。為了獲得快速的作用，需要高滲透力；為了獲得活性成分緩慢的釋放，屏障的逐漸滲透和膜滲透性相應地調節(jié)是有利的；為了使作用較深，建議應用高劑量；為了使分布盡可能的廣泛，載體濃度不應太高。
-調節(jié)兩親成分的含量，以便使轉運體制劑滲透過細孔的能力至少為小分子(例如水)滲透力的0.001％?？赏ㄟ^檢測而確定本發(fā)明轉運體的滲透力，在檢測中將轉運體與參比顆粒或分子進行比較。所用的參比顆粒明顯小于屏障中的細孔，因而有最大的滲透力。優(yōu)選地，當屏障本身為測定位點時，轉運體通過實驗屏障的滲透率(P轉運體)與比較原料(諸如水)的滲透率(P參比)之差應當不大于10-5至10-1的系數。
在本申請中討論用作類脂囊的載體的轉運體的相關特性。通過實施例，大多數例子將磷脂作為載體。然而一般有效性的結論并不限制于這類載體或這些分子。類脂囊實例僅僅用來說明所需要的滲透過滲透性屏障的特性，例如這種屏障為皮膚。這種特性也可使載體轉運過動物或人表皮、粘膜、植物表皮、無機膜等。
轉運體自發(fā)滲透過角質微粒層中的“孔”的可能原因是這些孔的一邊為含水層，即皮下組織；轉運體的這種滲透是由滲透壓引起的。但或者也可另外運用外部壓力，諸如靜水壓或電滲壓。
依賴于囊的數量，在經皮應用后類脂囊可到達盡可能遠的皮下組織。依賴于大小、載體或藥劑的組成和配方，此活性成分可局部釋放、在鄰近蓄積或通過淋巴或血管移動并分布至全身。
生產后或使用前馬上調節(jié)此制劑的PH值有時是適宜的。此調節(jié)用以防止在原始PH條件下系統(tǒng)組成的破壞和/或活性成分載體的破壞，并且可確保此制劑的生理相容性。為了進行中和，根據作用的目的和位置，通常應用生理上相容的酸或堿和PH為3至12的緩沖液，優(yōu)選PH為5至9，尤其優(yōu)選6至8。例如，生理上相容的酸是稀釋含水無機酸(諸如稀釋鹽酸、硫酸或磷酸)，或者有機酸(諸如鏈烷羧酸，如乙酸)；生理上相容的堿為稀釋氫氧化鈉溶液、電離磷酸等。
一般使制備溫度適應于所用的物質，而且通常含水制劑的溫度在0℃至95℃之間。優(yōu)選溫度在18℃至70℃之間；對于帶流體鏈的類脂，其溫度優(yōu)選在15℃至55℃之間，而且對于帶有序鏈的類脂，其溫度優(yōu)選在45℃至60℃之間。其它溫度范圍對于非水系統(tǒng)或制劑是可能的，這種系統(tǒng)或制劑含有冷卻或加熱防腐劑，或者它們當場制備。
如果系統(tǒng)成分的敏感性需要，可將此制劑冷藏儲存(例如在4℃)。同時也可在惰性氣體(諸如氮氣)的環(huán)境下制備和儲存這些制劑。通過應用不含重鍵的物質，以及通過干燥和應用干燥物質(此物質僅在作用點溶解而起作用)可進一步延長外層的壽命。特別地，可在應用前不久通過濃縮或冷凍干燥而制備此轉運體樣液滴。
在大多數情況中是在室溫下應用此載體。在較低溫度或較高溫度下應用是完全可能的，與合成物質一起在更高溫度下應用也是可能的。
通過提供機械能、熱能、化學能或電能，可生產轉運體懸浮液。例如可通過均化或攪拌制備此轉運體。
通過過濾可產生轉運體樣的小滴?？捎糜诖四康牡倪^濾原料的孔的大小應當為0.01至0.8μm，優(yōu)選0.05至0.3μm，特別是0.08至0.15μm。任選地，將幾個濾器進行串聯。
可提前或在當時制備這些制劑，例如，如P4026833.0-43中所述，或者通過手冊《脂質體》(G.Gregoriadis，CRC出版社，Boca Raton，FL，1至3卷，1987)、《用作藥物載體的脂質體》(G.Gregoriadis，John Wiley和Sons出版，紐約，1988)或實驗室手冊《脂質體-一種實踐方法》(R.New，牛津出版社，1989)中的幾個實例進行制備。如果需要，可在應用前立即稀釋或濃縮活性成分懸浮液(例如通過超離心法或超濾作用)，或者與更多的添加劑混合。然而為了達到這一目的，必須排除或顧及到可使載體滲透性發(fā)生改變的條件的可能性。
本申請的轉運體適宜用作諸如脂溶性生物活性成分、治療劑和毒藥等親脂原料的載體；這些轉運體與兩親、水溶性物質一起應用也有很大的實際價值，特別是當它們的分子量大于1000時。
而且這些轉運體可穩(wěn)定水解敏感物質，并可促進樣品中藥劑和在可能的作用點的分布，也可確保更有利于活性成分短暫的作用過程。組成轉運體的基本物質本身就具有很有效的作用。然而最重要的特性是可使原料轉運進入和通過滲透性屏障。
根據本發(fā)明，所述的制劑最好在滲透性屏障或其附近的局部應用。在皮膚或植物表皮的應用應當特別有利。(同時，它們也適宜于口服(o.p.)或胃腸外應用(i.v.、i.m.或i.p.)，特別是在選擇轉運體的組成使之在應用位點的損失不大時。)這些物質或成分可優(yōu)選在應用點分解、特別快地吸收或者稀釋。根據用途，它們在以后的應用中特別有價值。
在醫(yī)療領域，優(yōu)選每cm2的皮膚表面應用最多50mg的載體物質，通常為最多10mg，尤其優(yōu)選低于2.5mg或者甚至低于1mg；最佳量依賴于載體組成、所針對的作用的深度或持續(xù)時間，以及應用位點。在農業(yè)技術領域，典型的應用量較低，并且通常低于0.1G/m2。
特別是應用于人或動物皮膚的兩親物質的總量是轉運體的0.01至40％(重量比)，優(yōu)選為0.1至15％(重量比)，而且尤其優(yōu)選為1至10％(重量比)。
對于植物上的應用，兩親物質的總量為0.000001至10％(重量比)，優(yōu)選為0.001至1％(重量比)，并且尤其優(yōu)選為0.01至0.1％(重量比)。
按照本發(fā)明，根據應用的目標，此制劑還可含有適宜的一定濃度的溶劑，這由相應的物理相容性(在所謂的最佳值無加溶或無改變)、化學相容性(對穩(wěn)定性無影響)、生物或生理相容性(幾乎沒有不好的副作用)確定。
優(yōu)選地考慮非取代或取代烴，諸如鹵化、脂族、環(huán)脂族、芳香或芳香脂族烴(諸如苯、甲苯、二氯甲烷或氯仿)；醇類，諸如甲醇或乙醇、丁醇、丙醇、戊醇、己醇或庚醇、二羥丙烷、1，2，3，4-丁四醇；低分子量鏈烷烴羧酸酯，諸如烷基乙酸酯；醚，諸如二乙基醚、二氧雜環(huán)己烷或四氫呋喃；或者這些溶劑的混合物。
除了上面提到的以外，適用于本申請的類脂和磷脂的綜述包含在《磷脂的形成和功能》(Ansell和Hawthorne和Dawson出版)、Gunston所著的《脂肪酸及其甘油酯在化學和生物化學中的應用》和其它綜述著作中。這些考慮到的類脂和表面活性劑，以及其它邊界活性原料，還有它們的制造品都是已知的。年刊《McCutcheon’s Emulsifiers&Detegents》中全面詳述了市售的極性類脂，以及生產廠商借以銷售的商標，此書由糖果制造出版公司(Manufacturing Confectioner Publishing Co.)出版。例如《DeutschenArzneibuch》(德國藥典)(和各個《Rote Liste》每年的版本)中按一個主題列出了藥物可接受的活性成分，而且在英國藥典、歐洲藥典、意大利藥典、日本藥典、荷蘭藥典、Helvetica藥典、法國藥典、美國藥典、美國NF等中也列出了這些活性成分。在第3版《酶》卷(M.Dixon and E.C.Webb，Academic，San Diego，1979)中詳細列出了適用于本發(fā)明的酶，在《酶學方法》系列叢書中可見到主題的新進展?！锻庠茨卦谏飳W和醫(yī)學中的特性、功能和應用》(I.E.Liener，N.Sharon，I.T.Goldstein，Eds.，Academic，Orlando，1986)書中及主題技術出版物中描述了認糖蛋白，此蛋白在本發(fā)明中是有益的?！掇r藥手冊》(C.R.Worthing，S.B.Walter，Eds.，British CropProtection Counil，Worcestershire，England，1986，例如第8版)和《Wirkstoffein Pflanzenschutz und Schii dlingsbekampfung》(《植物保護和害蟲控制中的活性成分》)中列舉了農業(yè)技術中有益的物質，后者由Industrie-VerbandAgrar(法蘭克福)出版?！禠inscott’s Directory》目錄中列舉了市售的抗體，《腦肽》(D.T.Krieger，M.J.Brownstein，J.B.Martin，Eds.，John Wiley，New York，1983)、相應的增補卷(諸如1987年卷)和其它技術出版物中列舉了最重要的神經肽。
《脂質體技術》(Gregoriadis，Ed.，CRC Press)或在舊的參考著作中，諸如《免疫生物學中的脂質體》(Tom&Six，Eds.，Elsevier)、《生物系統(tǒng)中的脂質體》(Gregoriadis&Allison，Eds.，Willey)、《藥物靶位》(Gregoriadis&Senior&Trouet，Plenum)等，以及相關專利文獻中描述了脂質體的生產方法，此方法也主要適用于轉運體的生產。
可以通過過濾來確定轉運體的穩(wěn)定性和滲透力，如需要可加壓過濾、通過細孔過濾器或通過其它控制機械旋轉、剪切或粉碎進行。
下列實施例用來說明本發(fā)明而非限制本發(fā)明。所給溫度用℃表示，載體大小用納米表示，壓力用帕斯卡表示，其它量用通用國際單位表示。
除非另有說明，比例是指摩爾比，百分數是指摩爾百分數，而測定溫度是在21℃左右。
實施例1-4組成0-500mg 來源于大豆的磷脂酰膽堿CMC＝10-7M(大約98％PC＝SPC)0-500mg 二硬脂酸甘油磷酰乙醇胺疊氮基聚氧乙烯(5000)CMC＝10-5M4.50ml 緩沖液，pH7.3制備制備SPC(分子量假設為800Da)和增加0、30和40摩爾百分比數量的DSPE-PEG(分子量假設為5800Da)的混合物以及不含任何SPC的純DSPE-PEG脂質體。然后，將所得的混合物溶于氯仿/甲醇溶液。此后，將類脂溶液倒入圓底燒瓶。在旋轉蒸發(fā)器中去除溶劑后，一層類脂薄膜殘留在燒瓶壁的后部。在真空(10Pa)下進一步干燥此膜，然后通過加入緩沖液將其水化并通過機械攪拌懸浮。得到一種混濁懸浮液，通常情況下，此懸浮液是非常粘的，通過動態(tài)光散射方法和顯微術方法確定所得懸浮液中顆粒的大小。在所有情況下，所觀察的顆粒大小均大于0.5μm。因此，對于此所研究的混合物來講，用動態(tài)光散射方法可將膠束的形成以及隨之發(fā)生的加溶排除在外。
用相似方法，從一種純的磷脂酰膽堿中制備用于對比實驗的脂質體。
載體滲透力的確定在一種外部壓力下，將載體懸浮液通過有人工滲透屏障的細孔，用體積或重量確定單位時間內通過細孔的物質的量。如下所示，可以從總面積(物質的使用面積)、(推動)壓力、滲透時間和滲透量計算懸浮液在所研究的系統(tǒng)中的滲透力(P)
分別在幾種壓力下重復測定?？梢詮睦鐧C械應力或壓力函數的測定結果中計算出滲透力的相對依賴性，它是載體可變形性的測量標準。對于一種含有純SPC的含水1％溶液，在0.3MPa壓力下，其數值近似地＞0.01μL/MPa/s/cm2(叁見附圖3)。
為了保證兩種類脂以液相存在，如此實驗系列的滲透力的測定在62℃下完成。
實施例1-4的一系列測定結果，顯示于表1中。表1顯示，隨著推動壓力的增加，滲透力大大增加，但是這種增加是非線性的，并且在高液滴負荷(0.7MPa)下的滲透力高于在較低負荷(0.3MPa)下產生的滲透力幾個等級。但是，(在一種不同判據的意義上說)，這樣一種顯著的非線性關系只有轉運體產生，脂質體并未產生。從附圖3中可以明確地看出脂質體滲透力的值低于轉運體幾個等級。轉運體和脂質體之間的滲透力差別明顯地顯示出轉運體的滲透力比脂質體的滲透力顯著增加。
表1樣品最終量值描述 壓力 滲透力 最初尺寸(MPa) (μl/MPa/sec/cm2) (nm) (nm)SPC/DSPE-PEG 0.7 22.3225.7 92.570/30摩爾％ 0.6 18.7 94.510％類脂溶液 0.5 10.9 96.1再水化 0.4 2.896.1樣品 0.3 0.007 100.5SPC/DSPE-PEG 0.7 12.2217.3 96.360/40摩爾％ 0.6 13.2 100.710％類脂溶液 0.5 12.2 120
再水化 0.4 3.39 99.1實施例5-6組成410.05mg，809.25mg 來源于大豆的磷脂酰膽堿(純度大于95％)CMC＝10-7M289.95mg，190.75mg 二癸酰磷脂酰膽堿CMC≈10-67ml，10ml緩沖液，pH7.3制備選擇相應的類脂量使最終制劑中所含的兩種類脂成分的摩爾比為1∶1或3∶1。稱重適當的磷脂加入50ml的圓底燒瓶，在每種情況下都溶入1ml1∶1氯仿/甲醇溶液。去掉旋轉蒸發(fā)器中的溶劑后，得到一種如實施例1-4中所述膜的懸浮液，此膜含有平均半徑約為450nm的載體。
載體滲透力的確定用實施例1-4中所述的方法確定載體的滲透力。相應的結果顯示于附圖4中。它們表明由于一種濃縮作用，加入二癸酰磷脂酰膽堿顯著地增加了載體的滲透力，特別是在高壓力下。由SPC和二癸酰磷脂酰膽堿以1∶1的摩爾比組成的載體(摩爾比為3∶1的載體除外)與由純SPC組成的脂質體相比，滲透力顯著提高。
所測定的實施例5-6的載體的滲透力的數值，總結于表2中。
含純二癸酰磷脂酰膽堿的10％懸浮液是乳混濁，此懸浮液含有平均直徑為700±150nm的載體，形成一種沉積物。此特性明顯地顯示出無論是它自己還是與SPC結合，在相關濃度范圍內類脂均不能加溶。
表2樣品描述 核的直徑壓力 滲透力(nm) (MPa)樣品3∶1 50 0.9 0.00039100 0.5 0.00830.6 0.0210.7 0.040.8 0.050.9 0.066樣品1∶1 50 0.9 0.16100 0.5 0.0520.0210.6 0.120.170.7 0.270.220.8 0.760.690.9 0.660.60實施例7345.6mg來源于大豆的磷脂酰膽堿(純度大于95%，PC)CMC＝10-7M154.4mg二硬脂酸磷麥芽糖酰胺CMC＝10-5M4.5ml 緩沖液，pH7.3
按照實施例5-6所述的方法，以3∶1的摩爾比制備SPC/DSPE麥芽糖酰胺懸浮液。所得的載體具有特別好的滲透力。為了確定滲透力，在每次測定前后，測定載體的量值。測定證明在任何時間載體均無加溶作用。
在0.4MPa壓力(對照實施例5-6)、52℃溫度下，確定載體的滲透力。在此壓力下，觀察載體通過人工滲透屏障的滲透力是很好的。所加入的類脂(糖脂)不能加溶磷脂。通過動態(tài)光散射和光顯微鏡對懸浮液的研究沒有發(fā)現加溶(膠束)相的存在。透過人工滲透屏障后顆粒的最終大小隨推動壓力而變化(0.3-0.9MPa；壓力增加，大小有減小的趨勢)，在98和81nm之間。
純糖脂不能溶解或形成膠束懸浮液；而能形成載體懸浮液。為證明這一點，進行一種實驗，確定水介質中DSPE的滲透性。為此目的，用水稀釋類脂懸浮液。因為由此提高了濃度梯度，水可以進入囊。直接的結果是平均囊半徑有一定增加。另一方面，沒有內部容積的顆粒(例如混合膠束)在具有可比性的實驗條件下，不能改變其大小。
實施例8-17組成203-86.5μl 來源于大豆的磷脂酰膽堿(呈一種1∶1重量/體積SPC純乙醇溶液)CMC(水中)≈10-7M9.04-61.4mg 雙氯滅痛，溶解度≤10-5M1ml 磷酸鹽緩沖液(公稱)pH6.5用實施例1-4中所述的方法以4∶1-1∶4的摩爾比制備載體，作為SPC/雙氯滅痛混合物。
將如此獲得的混合物暴露于超聲源，直至樣品宏觀上透亮(接近4分鐘)。然后，將此溶液以15,000rpm離心15分鐘。所得的1∶1-1∶4的溶液不清亮(附圖5)；而呈乳色。另一方面，4∶1、3∶1和2∶1的混合物顯示出明顯的沉積物。放置5分鐘后，1∶2、1∶3和1∶4的混合物形成片狀沉淀，其他的懸浮液也變混濁(表3)。甚至在用HCl將PH值調整到7-7.2之間，制劑仍顯示出這種特性。
載體滲透力的確定如在前實施例所述確定載體的滲透力，它是載體可變性的測定標準。15mg/ml、20mg/ml和25mg/ml雙氯滅痛混合物，在0.3MPa(推動壓力)下，可以得到下列的滲透值(P)6×10-11m/Pa/s、10-10m/Pa/s和2.5×10-10m/Pa/s。
將這些數值與已知轉運體在相似條件(SPC/NaChol 3/1M/M；2重量％3×10-10m/Pa/s)下測定所獲得的數值相比較。這證實了雖然它們不能在任何時間或任何濃度下加溶，但是適宜組成的SPC/雙氯滅痛混合物具有非常高的滲透力和隨之而來的極度的可變形性。
表3用HCl將pH值調整到7-7.2之間，并用超聲處理混合物。超聲處理后1∶1.0輕微混濁1∶1.2混濁，液體，溶液中的晶體大約每視野20個1∶1.4混濁，液體，溶液中的晶體大約每視野20個1∶1.6混濁，液體，晶體稍微增大1∶1.8混濁，粘滯，晶體聚集成球1∶2.0混濁，粘滯，非常多的晶體1∶2.2混濁，粘滯，非常多非常大的晶體實施例18-25組成
475-325mg 來源于大豆的磷脂酰膽堿CMC≈10-7M25-175mg布洛芬，溶解度≤5×10-5M5ml 緩沖液，pH6.5制備如實施例1-4所述制備，不同的只是在混合物懸浮之后通過加入10MNaOH將pH調整至7。在每種情況下，用遞增量的布洛芬和遞減量的SPC(分一級為25mg的幾級)制備5ml含布洛芬的轉運體，總的類脂濃度為10％。
所獲得懸浮液的顯微鏡檢查樣品1無晶體，非常大的載體，樣品2無晶體，非常大的載體，樣品3僅僅在背景中閃爍，樣品4很偶然的小晶體，樣品5無晶體，液滴，樣品6顯著的晶體，樣品7液滴，分離非常大的晶體，載體滲透力的確定如在前實施例所述進行載體滲透力的確定。測定的結果顯示于附圖6和附圖7中。磷脂和所研究的活性成分的混合物顯示出典型的轉運體的特性，特別是在每ml 35mg布洛芬或以上的濃度范圍內。載體中布洛芬的濃度不能產生加溶作用。
對比實施例A-E對比實施例A(EP-A0211647的實施例2)
組成120mg二棕櫚磷脂酰膽堿(DPPC)24mg油酸20mg精氨酸60mlPBS(在200ml蒸餾水中溶解1片)稱(120.0mg)DPPC和24.1mg油酸入100ml燒杯中。接下來，混合這兩種試劑。將磷酸緩沖鹽(PBS)片完全溶解于200ml蒸餾水中以獲得10ml(PBS)緩沖液。然后，將(20mg)精氨酸溶于60ml pH為7.46的PBS，并加入類脂混合物。所獲得的溶液在40℃-45℃下加熱30分鐘并勻化。
對比實施例B(EP-A0280492的實施例9)組成270mg 二棕櫚磷脂酰膽堿(DPPC)30mgDSPC60mg1-十八磺酸(ODS)將(270.05mg)DPPC、30.1mg DSPC和60.1mg 1-十八磺酸(ODS)溶于1∶1氯仿/甲醇。樣品在旋轉蒸發(fā)器中蒸發(fā)干燥2小時。接下來，在真空下繼續(xù)干燥1小時。殘余物用10ml PBS再水化。將混合物加熱至60℃并進行勻化。然后，將樣品在超聲下暴露5分鐘。
對比實施例C(WO88/07632的實施例7)組成400mgSetacin F特種膏(十二烷基磺基磺酸二鈉)580mg氫化PC(PHPC)
200mg敏樂定乙酸鹽緩沖液pH5.5稱(400mg)Setacin F特種膏、580.03mg PHPC和200.03mg敏樂定入燒杯，溶于1∶1氯仿/甲醇然后移入圓底燒瓶。在旋轉蒸發(fā)器中濃縮類脂混合物2.5小時。接下來，在真空下完全干燥。在50℃的溫水浴中搖動樣品然后用10ml乙酸鹽緩沖液再水化。樣品完全溶入溶液后，將溶液在水浴搖動器中放置1小時。
加入1mg去鐵敏作為抗氧化劑。然后通過加入1滴10mM HCl將溶液的pH值調整為大約7.24。通過在溫度為35℃的水浴中攪拌使溶液在宏觀上勻化。
對比實施例D(EP-A0220797的實施例4)組成400mg純的氫化大豆卵磷脂40mg HCO-60(乙氧氫化蓖麻油)100mg維生素E9.46ml 雙重蒸餾水稱(400.04mg)多烯卵磷脂膽堿90H(氫化大豆卵磷脂)、40mgEmulginHRE60(乙氧氫化蓖麻油)和100.11mg維生素E入100ml燒杯，并加入9.46ml雙重蒸餾水。將樣品攪拌45分鐘，直至幾乎完全溶解。然后將類脂溶液在79℃超聲下暴露10分鐘。再次攪拌樣品并在56℃超聲下暴露10分鐘，以使其完全溶解。
對比實施例E(EP-A0102324的實施例2)組成300mgSPC150mg十八烷基三甲基溴化銨
2550μ1蒸餾水稱(300mg)SPC和150mg十八烷基三甲基溴化銨入100ml燒杯，并溶于1ml 1∶1氯仿/甲醇。
在真空下蒸發(fā)樣品至干燥。通過加入蒸餾水制備1％溶液。將所獲得的溶液攪拌15分鐘。
除非另有說明，對比實施例A-E中的樣品均按照所標明說明書中直接給出的方法制備。
在附圖8中，對比實施例A-E和本發(fā)明的布洛芬/SPC轉運體(0.9MPa恒壓下)的滲透力以柱狀圖表的形式表示。從此柱狀圖表(附圖8)中可以明顯地看出在較高壓力下(0.9MPa)，對比實施例A-E組合物的滲透力明顯地低于本發(fā)明轉運體的滲透力。
權利要求
1.以液滴形式應用、給予或轉運至少一種活性成分特別是為藥物和生物的目的而進入和通過屏障和細孔例如皮膚或類似物的制劑，此液滴可以懸浮于一種液體介質并且提供一個由一層或幾層兩親載體物質組成的類膜外層，此載體物質含有至少兩種物理化學上不同的成分，其特征在于提供至少兩種成分，這兩種成分在制劑的懸浮介質通常為水中具有不同的溶解度，其系數至少為10，以這些物質的含量為基準，其中加溶成分的含量小于0.1摩爾百分數，由此達到此包裹液滴的加溶點，或者達不到此加溶點。
2.如權利要求1的制劑，其特征在于無論濃度是多少，兩親成分不加溶。
3.如權利要求1和2的制劑，其特征在于一種或多種可溶性較大成分的溶解度，特別是水溶解度，至少為10-3-10-6M，一種或多種可溶性較小成分的溶解度，特別是水溶解度，至少為10-6-10-10M。
4.如權利要求1至3中任一的制劑，其特征在于一種或多種可溶性較大成分的溶解度與一種或多種可溶性較小成分的溶解度的差異約在10-107之間，優(yōu)選約在102-106之間，特別優(yōu)選約在103-105之間。
5.如權利要求1至4中的一種制劑，其特征在于此制劑滲透過細孔的滲透力至少是小分子滲透力的0.001％，優(yōu)選為0.1％，此滲透基本無阻礙。
6.如權利要求1至5中的一種制劑，其特征在于轉運體的滲透力與參比顆粒的滲透力之比P(轉運體)/P(參比)明顯小于屏障中的細孔，此叁比顆粒例如水，當屏障本身是測定點時，此比在10-5至1之間，優(yōu)選在10-4至1之間，特別優(yōu)選在10-2至1之間。
7.如權利要求1至6中的一種制劑，其特征在于此制劑含有至少兩種不同溶解度的兩親成分，以形成一種載體物質和/或一種約為一液滴量的親水液體的類膜外層，其中活性成分含于類膜外層中或上的載體物質中，和/或親水液體中。
8.如權利要求1至7中的一種制劑，其特征在于包裹液滴的囊半徑是大約25至500nm，優(yōu)選大約50至200nm，特別優(yōu)選大約80至100nm。
9.如權利要求1至8中的一種制劑，其特征在于外層是雙層的。
10.如權利要求1至9中的一種制劑，其特征在于一個或多個兩親成分含有生理上可耐受的不同極性的類脂和/或一種或多種活性成分。
11.如權利要求1至10中的一種制劑，其特征在于兩親物質含有一種生物來源的類脂或一種相應的合成類脂，或者一種這些類脂的衍生物，特別是二?；蚨榛视土柞Ｒ掖及放嫉哿u乙烯衍生物、二癸酰磷脂酰膽堿或二?；谆邀溠刻酋０?、甘油酯、甘油磷脂、類異戊二烯脂、鞘脂類、類固醇、固醇、一種含硫或含烴類脂，或者一種可形成穩(wěn)定結構諸如雙層的不同的類脂，優(yōu)選含有一種半質子化液體脂肪酸，特別是磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、鞘磷脂、鞘氨醇磷脂、糖鞘脂，例如腦苷脂、N-脂?；拾贝季奂禾酋?、硫苷脂、鞘氨醇縮醛磷脂、神經節(jié)苷脂或其它糖脂，或者一種合成類脂，優(yōu)選二油酸?；ilinolyl、dilinolenyl、二亞麻酰基、dilinolinoyl或二花生?；⒍鹿瘐；?、十四?；?、二棕櫚?；?、二硬脂?；字蛞环N相應的二烷基或鞘氨醇衍生物、糖脂或其它相同鏈或混合鏈?；愔蛲榛愔?。
12.如權利要求1至11中的一種制劑，其特征在于低溶性兩親成分含有一種合成類脂，優(yōu)選肉豆蔻腦酰、棕櫚油酰、巖芹酰、petroselaidyl、油酰、反油酰、順式或反式11-十八碳烯酰、亞油酰、亞麻酰、linolaidyl、十八烷四烯酰、二十碳-11-烯酰、二十烷酰、二十碳二烯酰、二十碳三烯酰、花生酰、順式或反式二十二烷酰、二十二烷二烯酰、二十二烷三烯酰、二十二烷四烯酰、已?；⒃鹿瘐?、十三烷酰、肉豆蔻酰、十五烷酰、棕櫚酰、十七酰、硬脂?；蚴捧?、甘油磷脂或相應的支鏈衍生物，或一種相應的鞘氨醇衍生物、糖脂或不同的?；愔蛲榛愔桓呷苄詢捎H成分由上面列舉的任一種低溶性成分衍生而來，并且為了增加溶解度，與丁酰、戊酰、己酰、庚酰、辛酰、壬酰、癸酰、十二烷或十一酰取代基或一種相應的單不飽和或多不飽和或其支鏈取代基或者幾種相互獨立的選擇取代基，和/或者與可提高溶解度的不同原料進行取代和/或配合和/或締合。
13.如權利要求1至12中的一種制劑，其特征在于應用于人或動物皮膚的兩親物質的總量是轉運體的0.01至40重量％，優(yōu)選為0.1至15重量％，而且尤其優(yōu)選為1至10重量％。
14.如權利要求1至13中的一種制劑，其特征在于應用于植物的兩親物質的總量為0.000001至10重量％，優(yōu)選為0.001至1重量％，并且尤其優(yōu)選為0.01至0.1重量％。
15.如權利要求1至14中的一種制劑，其特征在于它含有的活性成分為腎上腺皮質抑制劑、β-抑腎上腺素劑、雄激素或抗雄激素劑、抗寄生物劑、同化劑、麻醉劑、止痛劑、回蘇劑、抗變應性劑、抗心律失常劑、抗動脈硬化劑、抗氣喘劑和/或支氣管痙攣解痙劑、抗菌劑、抗抑郁劑和/或抗精神病劑、抗糖尿病劑、解毒劑、止吐劑、抗癲癇劑、抗纖溶劑、抗驚厥劑或抗膽堿能劑、酶、輔酶或相應的抑制劑、抗組胺劑、抗高血壓藥、生物活性抑制劑、抗低血壓藥、抗凝劑、抗真菌劑或抗肌無力劑、抗帕金森病或阿耳茨海默病的活性成分、消炎劑、解熱劑或抗風濕劑、防腐劑、呼吸興奮劑、支氣管松解劑、強心劑或化療劑、冠脈擴張劑、細胞抑制劑、利尿劑、神經節(jié)阻滯劑、糖皮質激素、流感的治療劑、止血劑、安眠劑、免疫球蛋白或片段或不同的免疫或受體物質、生物活性碳水化合物(衍生物)、避孕藥、偏頭痛劑、鹽皮質激素、嗎啡對抗劑、肌松劑、麻醉劑、神經或CNS治療劑、核苷酸或聚核苷酸、精神抑制藥、神經類介質或相應的對抗劑、肽(衍生物)、眼藥、擬(副)交感神經藥或抗(副)交感神經藥、蛋白(衍生物)、銀屑病/神經性皮炎藥、擴瞳劑、情緒提高劑、鼻科用藥、睡眠頓服劑或其對抗劑、鎮(zhèn)靜劑、解痙劑、結核菌抑制劑或泌尿科藥、血管收縮或擴張劑、病毒抑制劑或傷口愈合劑或幾種這樣的藥劑，尤其是雙氯滅痛或布洛芬。
16.如權利要求1至15中的一種制劑，其特征在于活性成分為非甾族抗炎藥，包括雙氯滅痛、布洛芬或其鋰、鈉、鉀、銫、銣、銨、一甲酯、二甲酯、三甲銨或乙銨鹽。
17.如權利要求1至16中的一種制劑，其特征在于較低極性成分含有生理上相容的類脂，優(yōu)選自磷脂類，并且尤其優(yōu)選自磷脂酰膽堿類，而且活性成分為溶解性較高的成分，其加入的量可任意為低于10重量％，此基于較高溶解度成分的制劑的總的組成和較高溶解度成分的濃度，此濃度一般地為0.01重量％至15重量％，優(yōu)選0.1重量％至10重量％，特別優(yōu)選0.5重量％至3重量％，并且總類脂濃度為0.005重量％至40重量％，優(yōu)選0.5重量％至15重量％，尤其為1重量％至10重量％。
18.如權利要求1至17中的一種制劑，其特征在于此制劑含有諸如水凝膠的稠度調節(jié)劑，諸如丙丁酚、生育酚、BHT、抗壞血酸、去鐵敏的抗氧化劑和/或諸如苯酚、甲苯酚、苯甲醇等的穩(wěn)定劑。
19.如權利要求1至18中的一種制劑，其特征在于活性成分為用于生物的生長調節(jié)物質。
20.如權利要求1至18中的一種制劑，其特征在于活性成分有生物殺傷特性，特別是殺蟲劑、農藥、除草劑、殺真菌劑。
21.如權利要求1至18中的一種制劑，其特征在于活性成分為一種誘惑物，特別是一種信息素。
22.一種生產以液滴形式應用、給藥或轉運至少一種活性成分進入和通過屏障和細孔例如皮膚或類似物的制劑的方法，此制劑特別是為藥物和生物的目的，此液滴可以懸浮于一種液體介質并且提供一個由一層或幾層兩親載體物質組成的類膜外層，此載體物質含有至少兩種物理化學上不同的成分，此制劑的特征是提供至少兩種成分，這兩種成分在制劑的懸浮介質通常為水中具有不同的溶解度，其系數至少為10，以這些物質的含量為基準，其中加溶成分的含量小于0.1摩爾百分數，由此達到此包裹液滴的加溶點，或者在實際相關的范圍內達不到此加溶點，而且調節(jié)兩親成分的含量，以使此制劑通過細孔的滲透力至少是小分子如水的滲透力的0.001％。
23.如權利要求22的方法，其特征在于調節(jié)兩親成分的含量，以使當屏障本身為測定點時，與參比顆粒的滲透力之比在10-5至1之間，優(yōu)選在10-4至1之間，特別優(yōu)選在10-2至1之間，此參比顆粒遠小于屏障如水中的細孔。
24.如權利要求22和23的方法，其特征在于通過過濾來確定穩(wěn)定性和滲透力，任選在加壓過濾、通過細孔過濾器或通過其它控制機械旋轉、剪切或粉碎下進行。
25.如權利要求22至24中的一種方法，其特征在于將生產一種轉運體樣制劑的物質混合物過濾、超聲處理、攪拌、搖動或接受其它機械粉碎作用。
26.如權利要求22至25中的一種方法，其特征在于形成此制劑的轉運體樣液滴是由至少兩種不同極性的兩親成分、至少一種極性液體和至少一種活性成分生成的。
27.如權利要求22至26中的一種方法，其特征在于形成此制劑的轉運體樣液滴是由至少兩種不同極性的兩親成分和至少一種極性液體生成的，其中兩親成分含有或包含活性成分。
28.如權利要求22至27中的一種方法，其特征在于在每種情況中的兩親成分和親水物質分別與活性成分混合，并可選擇性地形成溶液，然后這些混合物或溶液結合為一種混合物，在其中特別是通過機械能而生成液滴。
29.如權利要求22至28中的一種方法，其特征在于兩親成分與一種極性溶液結合，或者按這種方式，或者溶解在一種生理相容的溶劑或溶解介質中，這種介質可與一種或多種極性液體相溶。
30.如權利要求22至29中的一種方法，其特征在于通過攪拌、通過反相蒸發(fā)、通過一種注射法或透析法、通過諸如搖動、攪拌、均化、超聲、摩擦、冷凍或熔化、加熱或冷卻或高壓或低壓過濾的電、熱或機械應力生成包裹液滴。
31.如權利要求22至30中的一種方法，其特征在于通過過濾生成包裹液滴，過濾材料的孔的大小為0.01至0.8μm，尤其為0.05至0.3μm，優(yōu)選為0.08至0.15μm，還可選擇性地將幾個濾器串聯。
32.如權利要求22至31中的一種方法，其特征在于液滴形成后，載體和活性成分之間至少部分地形成了締合。
33.如權利要求22至32中的一種方法，其特征在于在應用前不久由一種液縮物或凍干物制備包裹液滴。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種以小滴(特別是液滴)形式應用一種活性成分的制劑。該制劑具有至少一層或多層兩親分子或一種兩親物質的類膜外層,特別用于轉運一種活性物質進入和通過天然屏障和細孔(例如皮膚等類似物)。該制劑無加溶點,或者其組成在最大滲透力時遠離加溶點。該制劑至少含兩種成分,它們在該制劑的懸浮劑(通常為水)中的溶解度不同,其系數至少為10。
文檔編號A61K9/127GK1234736SQ96180473
公開日1999年11月10日 申請日期1996年10月17日 優(yōu)先權日1994年12月30日
發(fā)明者格雷戈爾·塞夫克 申請人:伊迪亞創(chuàng)新植皮有限責任公司