專利名稱：一種營養(yǎng)保健液——酶解卵白蛋白溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用酶法水介蛋白質(zhì)的產(chǎn)品及方法。
蛋是人體日常所需的食物之一，卵白蛋白是蛋中的一種透明帶粘性和流動液體，每只蛋平均含蛋白質(zhì)10克、脂肪0.1克、醣1.2克、鈣0.059克、磷0.016克、微量鐵及維生素A、微量核黃素，生理應(yīng)用價值很高的肽、氨基酸組成，它具有促進(jìn)生長、修補(bǔ)細(xì)胞等功用。卵白蛋白是白蛋白的一種，而白蛋白是一種十分重要的蛋白質(zhì)，其主要功能是維持血漿膠體滲透壓和增加血容量，白蛋白廣泛存在于動物的血清中，例牛血清白蛋白已廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)，而人血清白蛋白是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)其含量為3.8-4.8%，臨床上用于治療低白蛋白癥，用于嚴(yán)重肝臟疾病及由低白蛋白引起的水腫和腹水，它還能激活酶和保護(hù)酶活力，大約5克白蛋白液就相當(dāng)于100ml血漿或250ml全血，所以它是一種較貴重的血制品，根據(jù)測定發(fā)現(xiàn)卵白蛋白和人體血清白蛋白的氨基酸組成成分極為相似(表1)。卵白蛋白分子量約為37000-49000，由于分子量大不能直接被機(jī)體和皮膚吸收，必須先將它水介成氨基酸和多肽才被機(jī)體吸收。氨基酸和多肽對人體具有各種生理功能，可用它耒治療各種疾病，例如天門冬氨酸能治療肝臟疾病，而它的鉀鹽、鎂鹽有降壓和利尿作用，谷氨酸用于婦科的功能性子宮出血，精氨酸可治療男性不育癥，賴氨酸、維生素C鹽是一種食欲增進(jìn)劑，組氨酸有抗?jié)兒痛俦? 卵白蛋白與血清白蛋白氨基酸的百分組成氨基酸 卵白蛋白 血清白蛋白精氨酸 5.9 6.0組氨酸 2.6 4.8賴氨酸 6.5 12.7酪氨酸 3.7 5.5色氨酸 1.2 1.0苯丙氨酸 7.7 7.0胱氨酸 2.8 6.5蛋氨酸 5.3 1.3蘇氨酸 4.0 7.1絲氨酸 8.2 7.0亮氨酸 9.9 12.0異亮氨酸 7.0 3.0纈氨酸 8.8 6.0谷氨酸 16.5 17.0天門冬氨酸 9.3 10.3甘氨酸 3.1 2.0丙氨酸 6.7 6.2脯氨酸 3.8 5.1羥脯氨酸 0 0氮 15.76 16.0硫 1.83 1.8
進(jìn)細(xì)胞再生作用，胱氨酸可治療脫發(fā)并可預(yù)防早衰，半胱氨酸有介毒作用，可防止肝壞死、抗放射作用，亮氨酸可促進(jìn)生長、促進(jìn)胃液分泌、酪氨酸可參加體內(nèi)的甲狀腺素、腎上腺素的合成。
具有生理作用的多肽如治療侏儒癥的生長激素、抗衰老和補(bǔ)償免疫缺損的胸腺素，具有鎮(zhèn)痛作用的腦啡肽。在現(xiàn)有的技術(shù)中常采用酸或鹼的方法耒水介白蛋白，往往會發(fā)生水介后氨基酸被全部或部分的破壞，例如用酸水介白蛋白時常造成絲氨酸、酪氨酸、蘇氨酸的部分破壞，色氨酸全部破壞，當(dāng)用鹼水介時可引起精氨酸及胱氨酸的部分及全部破壞，影響氨基酸的利用，無論用酸水介或鹼水介都增加了分離純化工作的難度并造成環(huán)境污染。
本發(fā)明目的是尋找一種天然活性物資，使原耒分子量較大的、不易被人體直接吸收的卵白蛋白，水介成一種含有易被人體吸收的多肽和氨基酸的卵白蛋白溶液，且成本低、無毒副作用，作為營養(yǎng)液、化妝品廣泛使用。
本發(fā)明通過下列步驟完成以卵白蛋白作為原料(食品級)，用木瓜蛋白酶(藥用級，海南七指嶺木瓜酶廠)作為水介酶、加入蒸餾水、鹽酸半胱氨酸，加畢后攪拌充分混勻在溫度為30-45℃，PH3-8進(jìn)行酶介，酶介時間4-8小時，仃止反應(yīng)水介完畢，再加溫至沸、離心除去未酶介的卵白蛋白滓渣，得上清液，測定含氮量，再加入千分子零點(diǎn)七的亞硫酸氫鈉[(A、R.上海試劑四廠XKB-001-0804-148Ⅱ)]分裝，濕熱滅菌清毒即成卵白蛋白酶介溶液。
采用木瓜酶酶介卵白蛋白產(chǎn)生的物質(zhì)穩(wěn)定，所含氨基酸、多肽不被破壞。酶介白蛋白有八肽物質(zhì)，分子量約為960左右，另外還表2 卵白蛋白酶介溶液中氨基酸含量天門冬氨酸 1.14mg蘇氨酸 0.68mg絲氨酸 1.17mg谷氨酸 1.14mg甘氨酸 0.29mg丙氨酸 0.86mg胱氨酸 3.17mg纈氨酸 1.23mg異亮氨酸 2.68mg亮氨酸 0.34mg酪氨酸 1.44mg苯丙氨酸 2.65mg組氨酸 0.36mg賴氨酸 0.43mg精氨酸 4.80mg氨基酸總量 65.90mg/ml蛋白質(zhì)含量 7.94g/ml
有一個大的肽基其分子量約為6×104。小肽和氨基酸混合物它在機(jī)體內(nèi)的吸收率和速度都比單純氨基酸佳，在正常情況下，單純氨基酸被吸收后，在機(jī)體內(nèi)還要根據(jù)需要新組合成肽和蛋白質(zhì)，而小肽和氨基酸混合物可省去一部分重新組合過程，因此它們的生效價高于純氨基酸經(jīng)測定其氨基酸含量(mg/ml)在表2中顯示，而它的分子量測定約為960左右。
卵白蛋白酶介溶液組成成分既穩(wěn)定又天然平衡。它的理化標(biāo)準(zhǔn)如下指標(biāo) 要求外觀 白色或淡黃色溶液味覺 微酸、略有苦味含氮量(%) 含氮量≥0.48PH 5.0±0.5細(xì)菌總數(shù)(個/ml) ≤100個/ml大腸菌群(個/ml) ≤3個/ml致病菌(系指沙門氏菌) 無汞mg/kg ≤0.05砷mg/kg ≤0.5鉛mg/kg ≤1.0卵白蛋白經(jīng)木瓜蛋白酶水介后，生成氨基酸和多肽物質(zhì)經(jīng)小鼠飼養(yǎng)試驗(yàn)表明小鼠毛色光滑，體重增加較快，根據(jù)上海藥品檢驗(yàn)所對藥品毒性試驗(yàn)要求對卵白蛋白酶介溶液進(jìn)行急性毒性和LD50試驗(yàn)如下用昆明雜種小白鼠體重20g，雌雄各半，每組10只，共分為二組實(shí)驗(yàn)組，為用一劑量組，本試驗(yàn)觀察七天，以最大耐受量灌胃給藥1ml/只，相當(dāng)于50mg/kg，每日灌胃二次，連續(xù)3天，灌后觀察小白鼠的毛色、活動狀態(tài)等項(xiàng)目，活動極好、毛色光滑、發(fā)亮，食胃旺盛。
本發(fā)明采用木瓜蛋白酶進(jìn)行卵白蛋白的酶介。它的酶介條件溫和，酶介后便于處理，酶介的組分穩(wěn)定，便于控制，木瓜蛋白酶價廉，降低了生產(chǎn)成本。
木瓜蛋白酶本身是作為食品添加劑廣泛使用，如美國Adoph生產(chǎn)的“嫩肉粉”就是用木瓜蛋白酶作為食品添加劑，木瓜蛋白酶還可以作為藥用，木瓜蛋白酶十分安全，其ADI不需特殊規(guī)定，木瓜蛋白酶的LD50為12.5g/kg，屬於無毒級。
下面用實(shí)施例更詳細(xì)地說明本發(fā)明，應(yīng)理介為實(shí)施例在任何方面不對本發(fā)明范圍限制。
實(shí)施例稱取卵白蛋白10kg(卵白蛋白由新鮮雞、鴨蛋中取出)、10克木瓜蛋白酶(藥用級，海南七指嶺木瓜酶廠)加入12kg蒸餾水，加入鹽酸半胱氨酸1克，攪拌充分混和均勻后，在溫度為40℃±1℃，PH7±1反應(yīng)8小時，仃止反應(yīng)，水介完畢，熱溫至沸，離心除去未酶介的卵白蛋白滓渣，上清液測含氮量1.27g/ml，再加入亞硫酸氫鈉千分之零點(diǎn)七，分裝、高壓滅菌清毒，得酶介卵白蛋白溶液。
經(jīng)測定氨基酸含量如下分析前處理0.4ml+0.4ml 6%磺基水楊酸離心樣品濃度上清液稀釋100倍樣品分析時用量0.05毫升測定結(jié)果(毫克量/每毫升)(以下數(shù)據(jù)為樣品分析時用量中的各氨基酸的含量) 此液含有18種氨基酸含量為76mg/ml
權(quán)利要求
1.一種酶介卵白蛋白溶液組成其特征在于氨基酸的含量為(mg/ml) 氨基酸總量為60-76mg/ml分子量約800-960。
2.根據(jù)權(quán)利1所述的酶介卵白蛋白溶液制備方法包括A以卵白蛋白、木瓜蛋白酶、蒸餾水、鹽酸半胱氨酸作為原料攪拌充分混和。B在一定溫度、適合PH下進(jìn)行酶介。C酶介畢加熱除去未酶介的卵白蛋白滓渣。D酶介后的卵白蛋白溶液消毒
3.根據(jù)權(quán)利2所述的酶介卵白蛋白溶液制備的方法其特征在于用木瓜蛋白酶水介卵白蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利2所述的酶介卵白蛋白溶液制備方法其特征在于酶介溫度為30-45℃。
5.根據(jù)權(quán)利2所述的酶介卵白蛋白溶液制備方法其特征在于適合PH為PH3-PH8。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶介卵白蛋白溶液其特征在于可作營養(yǎng)保健液或化妝品原料。
全文摘要
本發(fā)明涉及酶解卵白蛋白的方法及產(chǎn)品，采用木瓜蛋白酶在一定反應(yīng)條件下對卵白蛋白進(jìn)行酶解，經(jīng)處理后產(chǎn)生酶解卵白蛋白溶液。酶解后的卵白蛋白溶液具有人體必須的易吸收的氨基酸及多肽。它可作為人的營養(yǎng)保健液和化妝品原料。
文檔編號A61K35/54GK1101377SQ9311257
公開日1995年4月12日 申請日期1993年10月7日 優(yōu)先權(quán)日1993年10月7日
發(fā)明者黃永昌, 王定恩 申請人:上海益人生化技術(shù)開發(fā)有限公司