專利名稱：一種營養(yǎng)液的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于工業(yè)發(fā)酵的一種方法，特別是關(guān)于利用微桿菌屬的人工誘變菌株-一個命名為851R菌的新菌株作為生產(chǎn)菌株以大豆為主要原料進行工業(yè)發(fā)酵來生產(chǎn)單細胞蛋白營養(yǎng)液的方法。
在當(dāng)今世界，人們通過各種嘗試如采用生物發(fā)酵方法生產(chǎn)單細胞蛋白取得成功。楊振華利用抗氨固氮菌生產(chǎn)富硒單細胞蛋白、維生素E和菌肥的方法(中國發(fā)明專利861004901988.1.)是通過培育一種具有抗氨固氮能力的固氮菌將空氣中的氮通過常規(guī)的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)方法生產(chǎn)出富硒、鋅和多種維生素的單細胞蛋白。
本發(fā)明的目的是通過培育出的一種851R菌及設(shè)計出適合于該菌生長的以大豆為主要原料的培養(yǎng)基，以達到用851R菌作為生產(chǎn)菌株，運用常規(guī)的工業(yè)發(fā)酵的生產(chǎn)方法生產(chǎn)出851R型超級營養(yǎng)液。大豆是蛋白質(zhì)豐富的食物，但由于大豆中含有蛋白酶抑制劑，所以大豆蛋白很難被人體全部吸收，然而，大豆蛋白經(jīng)過851R菌利用后，轉(zhuǎn)化為單細胞蛋白營養(yǎng)液，不但成為易被人體吸收的蛋白源，而且該營養(yǎng)液具有健全中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機體免疫功能、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的功效，該營養(yǎng)液對癌細胞的生長有某些抑制作用。
本發(fā)明所涉及的微生物是微桿菌屬的變異菌851R菌株，其主要特征為革蘭氏陽性菌，不運動，屬氧化型，在牛奶中加熱到63℃30分鐘，或在牛奶中加熱至72℃經(jīng)15分鐘仍能生存，菌體呈桂紅色或橘紅色，但在38℃左右，菌體顏色變成粉紅色，40℃時變成無色。該菌株具有R片段，運用DNA分子雜交技術(shù)可檢測出851R菌中R片段的存在(該菌種已送交武漢中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號為CCTCCNo.89048)。
在本發(fā)明所設(shè)計或使用的含氮源培養(yǎng)基中，用851R菌作為生產(chǎn)菌種，可生產(chǎn)出富含多糖、多肽、多種微量元素及維生素的單細胞蛋白營養(yǎng)液。該營養(yǎng)液中含有二十余種氨基酸。每100毫升這種營養(yǎng)液中含有氨基酸593～4172毫克，維生素E0.3～1.0mg，維生素B20.1～0.3mg，維生素PP0.5～1.0mg，硒1.0～5.0ppm，鋅10～20ppm，鉬5.0～10ppm，鈷5.0～10ppm，錳5.0～15ppm，銅3.0～10ppm，鐵50～150ppm等。
本發(fā)明所設(shè)計及使用的培養(yǎng)基為1.含氮源培養(yǎng)基大豆粉5～10%或豆?jié){(以大豆量計)5～20%或各種豆餅、葵花籽餅5～10%酵母膏(或酵母粉、蛋白胨、牛肉膏)0.02～0.5%碳酸鈣0.05～0.5%磷酸氫二鉀0.02～0.2%硫酸鎂0.01～0.08%氯化鈉0.01～0.08%鉬酸鈉5.0～50ppm亞硒酸鈉1.5～10ppm硫酸鋅2.5～50ppm氯化鈷2.5～20ppm2.淀粉培養(yǎng)基干淀粉1～2%含有淀粉的新鮮物質(zhì)(甘薯，馬鈴薯等)10～20%或含有淀粉的干物質(zhì)(玉米粉等)1～10%酵母膏0.04～0.08%磷酸氫二鉀0.05～0.1%
硫酸鎂0.02～0.04%氯化鈉0.02～0.04%鉬酸鈉10～20ppm硼酸10～20ppm亞硒酸鈉5～20ppm硫酸鋅5～20ppm氯化鈷5～20ppm以上兩種培養(yǎng)基中還可以適量的增加其他人體必需的微量元素及苯甲酸或苯甲酸鈉。
該菌種可以用發(fā)酵罐進行通氣培養(yǎng)，這種罐為一般發(fā)酵工業(yè)中常用的發(fā)酵罐，它帶有攪拌和通氣裝置?？梢砸佬枰獙λ囵B(yǎng)的培養(yǎng)物進行攪拌，使其所處的條件一致，也可以按需要通入經(jīng)過濾的無菌空氣，以滿足細菌等微生物在發(fā)酵過程中對氧氣的需要。將851R菌作為生產(chǎn)菌株，經(jīng)過在種子培養(yǎng)基(本發(fā)明所設(shè)計和/或使用的培養(yǎng)基)中繁殖。即由小種、中種到大種的繁殖培養(yǎng)，再接種到裝有預(yù)先經(jīng)過消毒滅菌的生產(chǎn)用培養(yǎng)基(本發(fā)明所設(shè)計和/或使用的培養(yǎng)基)中培養(yǎng)36～64小時，在培養(yǎng)過程中通入過濾的無菌空氣，通氣量為1∶0.5～1.0，攪拌速度180～260轉(zhuǎn)/分，培養(yǎng)溫度28～40℃，培養(yǎng)結(jié)束后經(jīng)高溫滅菌收獲培養(yǎng)液。培養(yǎng)液可直接分裝而成產(chǎn)品，也可按其需要用不同的方法制成各種系列產(chǎn)品，如培養(yǎng)液經(jīng)離心沉淀制成851可樂飲料，培養(yǎng)液經(jīng)濃縮制成851營養(yǎng)精，培養(yǎng)液經(jīng)烘干或噴霧干燥成粉劑，進而制成膠囊或片劑。培養(yǎng)液還可直接代替水或雞蛋加入面粉而制成面包、餅干等食品，培養(yǎng)液亦可用于化妝品的生產(chǎn)。
實施例1在2.5噸發(fā)酵罐中培養(yǎng)，種子罐為0.5噸，投料量為40%。采用5%黃豆粉培養(yǎng)基，其中黃豆粉含量為5.0%，酵母膏0.04%，磷酸氫二鉀0.05%，硫酸鎂0.02%，碳酸鈣0.02%，氯化鈉0.02%，鉬酸鈉10ppm，亞硒酸鈉2.5ppm，硫酸鋅10ppm，氯化鈷2.5ppm，及水。接菌量按1%，種子罐為2立升，菌齡為24小時，(小種→中種→大種，培養(yǎng)24小時作為種子培養(yǎng)物)培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度260轉(zhuǎn)/分，通氣量1∶0.8。種子在種子罐中培養(yǎng)結(jié)束后接入2.5噸大罐，培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度260轉(zhuǎn)/分，通氣量1∶0.8，培養(yǎng)45小時結(jié)束培養(yǎng)。終止培養(yǎng)后采用高溫滅菌，培養(yǎng)液經(jīng)流水線裝瓶，再經(jīng)高溫高壓滅菌即成為產(chǎn)品，每100毫升培養(yǎng)液中，干物質(zhì)含量為3.7%蛋白質(zhì)含量為2.06%，脂肪含量0.23%，碳水化合物為0.75%及維生素、無機鹽等詳見下表實施例2在8噸發(fā)酵罐中培養(yǎng)，投料量為40%，即培養(yǎng)基量為3.2噸。采用10%黃豆粉培養(yǎng)基，其中黃豆粉含量為320kg，酵母膏1.28kg，磷酸氫二鉀1.6kg，硫酸鎂640g，碳酸鈣640g，氯化鈉640g，鉬酸鈉32g，亞硒酸鈉8g，硫酸鋅32g，氯化鈷8g，及水。接菌量按1%，菌齡為24小時，(小種→中種→大種，培養(yǎng)24小時作為種子培養(yǎng)物)培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度220轉(zhuǎn)/分，通氣量1∶0.8。種子在種子罐中培養(yǎng)結(jié)束后接射8噸大罐，培養(yǎng)溫度30℃，攪拌速度220轉(zhuǎn)/分，通氣量1∶0.8，培養(yǎng)48小時結(jié)束培養(yǎng)。終止培養(yǎng)后采用高溫滅菌，培養(yǎng)液經(jīng)流水線裝瓶，再經(jīng)高溫高壓滅菌即成為產(chǎn)品，每100毫升培養(yǎng)液中含有天冬氨酸543mg，谷氨酸710mg，絲氨酸160mg，甘氨酸280mg，組氨酸65mg，精氨酸226mg，蘇氨酸232mg，丙氨酸359mg，脯氨酸126mg，酪氨酸101mg，纈氨酸283mg，蛋氨酸53mg，異亮氨酸282mg，亮氨酸309mg，苯丙氨酸148mg，賴氨酸212mg，光氨酸38mg，總計為4127mg。
851R培養(yǎng)液(上清)檢測結(jié)果報告表
權(quán)利要求
1.一種利用細菌生產(chǎn)單細胞蛋白營養(yǎng)液的工業(yè)生產(chǎn)方法，其特征是采用經(jīng)人工誘變處理微桿菌而得到的一株命名為851R的菌株(CCTCC89048)作為生產(chǎn)菌株，在本發(fā)明所設(shè)計的以大豆為主的含氮源培養(yǎng)基或本發(fā)明所使用的淀粉培養(yǎng)基中發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)培養(yǎng)液，還包括用烘干法由培養(yǎng)液提取單細胞蛋白、用濃縮法精制培養(yǎng)液的方法。
2.如權(quán)利要求1所說的以大豆為主得含氮源培養(yǎng)基，其特征在于含有大豆粉5～10%，或豆?jié){(以大豆量計)5～20%，或各種豆餅、葵花籽餅5～10%，酵母膏(或酵母粉、蛋白胨、牛肉膏)0.02～0.5%，碳酸鈣0.05～0.5%，磷酸氫二鉀0.02～0.2%，硫酸鎂0.01～0.08%，氯化鈉0.01～0.08%，鉬酸鈉5～50ppm，亞硒酸鈉1.5～10PPM，硫酸鋅2.5～50PPM，氯化鈷2.5～20PPM，還可以加入適量人體所需的其他微量元素及苯甲酸或苯甲酸鈉。
全文摘要
應(yīng)用人工誘變技術(shù)培育出一株851R菌株，用該組菌作為生產(chǎn)菌株，在本發(fā)明所設(shè)計和使用的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可分別生產(chǎn)出富硒、鋅、鈣、多糖、多肽及多種維生素的單細胞蛋白的營養(yǎng)液，該營養(yǎng)液對人類防癌延壽具有進一步的開發(fā)利用價值。
文檔編號A61P7/00GK1042376SQ8910461
公開日1990年5月23日 申請日期1989年7月11日 優(yōu)先權(quán)日1989年7月11日
發(fā)明者楊振華 申請人:楊振華