專利名稱：口服藥物牛滕多糖的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從中草藥中藥物技術(shù)的領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種從中藥牛膝中提取牛膝多糖的方法。
中藥牛膝是一種傳統(tǒng)的中藥，具有“補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，止腰膝酸麻”和“活血化瘀、補(bǔ)腎填精、治療風(fēng)濕”的功效。雖然曾報(bào)導(dǎo)了牛膝中的無(wú)機(jī)組份(J.Pharm.Soc.Japan，48，1098，1928)，含有齊墩果酸(J.IndianChem.Soc，35，529，1958)、三萜皂甙(Arch.pharm.，289，162，1956)、脫皮甾酮(Ecdysterone)和因鬧考甾酮(Experientia，27，504，1971;醫(yī)學(xué)中央雜志(日)，259，68，1970)。但關(guān)于牛膝多糖還罕見(jiàn)報(bào)導(dǎo)，田庚元等首次報(bào)導(dǎo)了從中藥牛膝中提取牛膝多糖(Achyranthespolysauharide)的方法(CN88105524.7)，將生藥牛膝的浸泡液用有機(jī)溶劑進(jìn)行二級(jí)分級(jí)沉淀制得粗牛膝多糖產(chǎn)物，再經(jīng)精制獲精制品，適用于注射用藥，具有顯著增強(qiáng)免疫功能、保護(hù)肝臟、抑制腫瘤生長(zhǎng)和具有顯著增強(qiáng)機(jī)體免疫的功能。但是最大限度地從牛膝中提取具有免疫活性的牛膝多糖的簡(jiǎn)便生產(chǎn)方法仍是重要的課題。
本發(fā)明目的是提供一種方法簡(jiǎn)便、產(chǎn)率高和適用于工業(yè)化的牛膝多糖的生產(chǎn)方法。同時(shí)，由于口服用藥劑量通常比注射的劑量要大得多，所以提高產(chǎn)率，簡(jiǎn)化方法以適應(yīng)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)需要。
本發(fā)明的方法是將生藥牛膝洗滌、干燥、用水浸泡，最好維持一定的pH值以提高浸出率，浸泡液可采用透析、離心分離法進(jìn)行提取，濃縮干燥后即得口服牛膝多糖。
本發(fā)明的方法進(jìn)一步描述是將生藥牛膝洗滌，干燥，為提高浸出率，最好再經(jīng)切片或粉碎，然后用二倍或二倍重量以上的水浸泡，所述的水最好是無(wú)離子水，如蒸餾水、離子交換水等。水用量過(guò)低將影響產(chǎn)率，而水用量過(guò)高將造成原料、時(shí)間、或能源的浪費(fèi)，所以推薦重量比是牛膝∶水＝1∶2-10。浸泡液最好用堿或堿的水溶液調(diào)節(jié)pH至6.0-8.0，以提高浸出率，所述的堿最好是一價(jià)金屬離子的氫氧化物、氧化物、碳酸鹽和醋酸鹽，以及氫氧化銨。浸泡時(shí)間等于或大于10小時(shí)，而以10-72小時(shí)為宜，更短的浸泡時(shí)間將影響浸出率，當(dāng)然可以采用更長(zhǎng)的浸泡時(shí)間，這對(duì)浸出率無(wú)影響。浸泡后過(guò)濾，濾去殘?jiān)瑸V液用對(duì)流水進(jìn)行透析，透析時(shí)間等于或大于16小時(shí)，推薦透析時(shí)間為16-72小時(shí)。透析時(shí)間太短，則小分子物質(zhì)殘留量多，影響產(chǎn)品的質(zhì)量，但透析時(shí)間太長(zhǎng)，則會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)率降低。透析后離心除去不溶物，上清液干燥或先濃縮再干燥獲牛膝多糖。
本發(fā)明方法中所述的透析最好采用透析膜、透析袋及超濾膜等。透析膜等的孔徑最好控制在分子量1000以下。
本發(fā)明方法中所述的干燥、濃縮，最好在等于或小于60℃時(shí)進(jìn)行，以便保持產(chǎn)物的生物活性。推薦采用低溫真空濃縮或冷凍干燥。
用本發(fā)明方法獲得的口服牛膝多糖，其外觀為微黃色疏松固體，具有水溶性好，數(shù)均分子量小于3000，比旋度為負(fù)值，由葡萄糖和甘露糖所組成，其克分子比為1.0∶0.5～0.7。
用本發(fā)明方法獲得的口服牛膝多糖，口服LD50大于20克/公斤，給大鼠以極限劑量5克/公斤連續(xù)口服3個(gè)月，也無(wú)毒付作用。藥理研究表明它具有明顯的增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的作用;它能升高血清溶血素和脾臟內(nèi)抗體形成細(xì)胞數(shù)，提高血清免疫球蛋白IgG水平，激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，增加血清補(bǔ)體C3的含量，促進(jìn)白細(xì)胞介素-1和白細(xì)胞介素-2的生成，增強(qiáng)T細(xì)胞和B細(xì)胞的免疫功能，還能使肝細(xì)胞膜、對(duì)抗脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成，此外還能抑制小鼠S-180肉瘤的生長(zhǎng)。因此可長(zhǎng)期服用，作為治療腫瘤和肝炎等疾病的免疫藥物，也可以作為抗衰老保健藥品。具有分子量小，水溶性好，人體易吸收等特點(diǎn)。
用本發(fā)明方法2可獲得的口服牛膝多糖，而且工藝簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高，得到的牛膝多糖可達(dá)到生藥的8-10%，適宜工業(yè)生產(chǎn)。
為了對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，提供下述實(shí)施例加以說(shuō)明實(shí)施例1將生藥牛膝2公斤洗凈、干燥、切成片狀，然后用1000毫升蒸餾水浸泡，并用1N碳酸鈉溶液不斷調(diào)節(jié)浸泡液pH，保持中性，浸泡30小時(shí)后，濾去殘?jiān)?，濾液用透析紙包扎后對(duì)水進(jìn)行透析50小時(shí)，然后離心除去不溶物，上清液經(jīng)濃縮后可直接真空干燥或冷凍干燥，即得口服用牛膝多糖約180克。元素分析結(jié)果不含氮、磷和硫。用原子吸收分光光度法測(cè)定結(jié)果也不含Hg、Pb、As、Cd等重金屬離子。
本方法所得牛膝多糖在遠(yuǎn)紫外區(qū)202nm有一吸收峰，比旋度為負(fù)值、紅外光譜表明在810cm-1，870cm-1和930cm-1處有特征吸收，其中890cm-1和870cm-1為甘露糖特征吸收，930cm-1為D-吡喃葡萄糖環(huán)的振動(dòng)吸收。核磁共振1H-NMR質(zhì)子信號(hào)集中在3.0-5.0ppm處，只在5.30ppm處有一小峰，13C-NMR在104.2-105.2ppm處有6個(gè)峰。
實(shí)施例2將1公斤生藥牛膝粉，用3公斤離子交換水浸泡，并用氫氧化銨調(diào)節(jié)浸泡液pH至7.8，浸泡20小時(shí)后濾去殘?jiān)?，濾液置于透析袋內(nèi)用對(duì)流水進(jìn)行透析，透析時(shí)間25小時(shí)，離心后取上清液干燥獲牛膝多糖80克。
權(quán)利要求
1.一種從生藥牛滕中生產(chǎn)口服藥物牛滕多糖的生產(chǎn)方法，包括生藥洗滌、干燥、浸泡、透析、離心和濃縮干燥，其特征是將干燥后的生藥牛滕經(jīng)切片或粉碎，用二倍或二倍以上重量的水浸泡，浸泡液用堿或堿的水溶液調(diào)節(jié)pH至6.0-8.0，浸泡時(shí)間等于或大于10小時(shí)，過(guò)濾，濾液用對(duì)流水進(jìn)行透析，透析時(shí)間等于或大于16小時(shí)，透析后離心，取上清液干燥或先濃縮再干燥。
2.如權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是所述的干燥后的生藥牛膝不經(jīng)切片或粉碎。
3.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是生藥牛膝與浸泡水的重量比是牛膝∶水＝1∶2-10。
4.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是所述的堿是一價(jià)金屬離子的氫氧化物、氧化物、碳酸鹽、醋酸鹽及氫氧化銨。
5.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是水浸泡時(shí)間為10-72小時(shí)。
6.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是所述的浸泡用的水是無(wú)離子水。
7.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是透析時(shí)間為16-72小時(shí)。
8.如權(quán)利要求1和2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是透析時(shí)用透析膜、透析袋及超濾膜，其孔徑最好控制在分子量1000以下。
9.如權(quán)利要求1和2所述的口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是透析后的上清液的干燥或濃縮的溫度是等于或小于60℃時(shí)進(jìn)行，最好采用低溫真空濃縮或冷凍干燥。
10.如權(quán)利要求1、2所述的生產(chǎn)口服藥物牛膝多糖的生產(chǎn)方法，其特征是不用所述的堿或堿的水溶液調(diào)節(jié)浸泡液的pH。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從中藥牛膝中提取牛膝多糖的方法，包括將生藥牛膝洗滌、干燥、用水浸泡、透析、離心和濃縮干燥。用本方法生產(chǎn)的牛膝多糖數(shù)均分子量小于30000，無(wú)毒副作用，可用于醫(yī)治腫瘤、肝炎等疾病，還具有免疫功能，可作為抗衰老保健藥物。用本發(fā)明方法生產(chǎn)牛膝多糖，不僅產(chǎn)率高，而且工藝簡(jiǎn)便，適宜工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/715GK1038818SQ8910449
公開(kāi)日1990年1月17日 申請(qǐng)日期1989年6月27日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月27日
發(fā)明者田庚元 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所