本發(fā)明屬于天然藥物領域，特別涉及一種含共軛亞油酸和木犀草素的復方藥物組合物及其用途。
背景技術：
癌癥是嚴重危害人類健康的一大頑癥，現(xiàn)已成為僅次于心血管病的第二大殺手。進入21世紀以來，由于現(xiàn)代工業(yè)化的快速進程，環(huán)境污染等諸多因素導致淋巴細胞系統(tǒng)免疫被破壞而引起淋巴瘤發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，使我們意識到研發(fā)出一種能夠用于防治淋巴瘤的藥物系統(tǒng)顯得非常迫切。
共軛亞油酸(conjugatedlinoleicacid,cla)，主要是從反芻動物脂肪和牛乳中發(fā)現(xiàn)的天然活性物質(zhì)，被認為是由反芻動物瘤胃中的微生物將亞油酸代謝轉(zhuǎn)化而成共軛亞油酸。cla是一組位置和幾何異構(gòu)體的十八碳共軛二烯酸的統(tǒng)稱，是指一類亞油酸的位置和空間共軛二烯異構(gòu)體，其中cis-9，trans-11和trans-10，cis-12異構(gòu)體被認為具有生理活性。cla可形成多種異構(gòu)體。研究證明cla具有多種生理活性,如抗癌、減肥、抗動脈粥樣硬化、控制ⅱ型糖尿病等，尤其是其抗癌效應備受關注(scirep.2016；6:36614.；asianpacjcancerprev.2016；17(7):3395-403.；evidbasedcomplementalternatmed.2013；2013:429393.；foodchem.2012；134(4):1839-46.)。
木犀草素(luteolin，lt)作為一種天然的黃酮類化合物，是一種在各種蔬菜及水果中廣泛分布的天然黃酮類化合物，其化學名為3’，4’，5，7-四羥基黃酮。分子式為c15h10o6。具有抗炎、抗菌、保護心血管、免疫調(diào)節(jié)以及抗腫瘤等藥理學作用。大量關于木犀草素抑制惡性腫瘤增殖的文獻報道表明，lt既可直接作用于腫瘤細胞抑制其生長，誘導細胞凋亡，又可減少腫瘤組織血管的生成，抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移，提高放、化療的療效和化學預防作用，對直結(jié)腸癌細胞、鼻咽癌細胞、前列腺癌細胞、黑色素瘤細胞、人乳腺癌細胞等多種腫瘤細胞均有效，具有很好的廣譜抗癌活性，具有潛在的抗癌藥物價值(nutrcancer.2016；68(5):838-47.；cancerchemotherpharmacol.2017；79(5):1031-1041.；jproteomics.2017apr5.pii:s1874-3919(17)30124-0.；celldeathdis.2017；8(2):e2612.；jcellphysiol.2017；232(2):391-401.；cellphysiolbiochem.2015；37(5):1693-711.)。這將有助于提高化療藥物的效應。
這些為復合lt和cla給藥治療惡性腫瘤淋巴瘤提供了全新的機會。將木犀草素的優(yōu)越抗癌療效與具有良好抗癌活性的天然藥物聯(lián)合協(xié)同治療淋巴瘤等惡性腫瘤，是一個值得關注而又很有潛力的抗腫瘤復合藥物方向。組合木犀草素和天然藥物共軛亞油酸用于惡性腫瘤淋巴瘤的預防和治療作用尚未見相關文獻報道幾乎沒有。
技術實現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術中存在的缺點和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種復方藥物組合物；該復方藥物組合物的活性成分是由共軛亞油酸和木犀草素組成。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述復方藥物組合物的用途；藥理試驗證明該復方藥物組合物具有協(xié)同抗淋巴瘤作用。
本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)：
一種復方藥物組合物，該復方藥物組合物的活性成分是由共軛亞油酸和木犀草素組成。
優(yōu)選的，所述共軛亞油酸和木犀草素的摩爾比為1:1～1:20。
優(yōu)選的，所述共軛亞油酸和木犀草素的摩爾比為1:1～1:10。
該復方藥物組合物還含有藥物上可接受的載體。
該復方藥物組合物由常規(guī)制備工藝制備得到。
上述的一種復方藥物組合物在制備抗淋巴瘤藥物中的用途。
所述抗淋巴瘤藥物可用于包括人在內(nèi)的哺乳動物的淋巴瘤的治療。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有如下突出的優(yōu)點及有益效果：
發(fā)明人在對木犀草素(lt)和共軛亞油酸(cla)配伍藥理活性的研究中發(fā)現(xiàn)，將木犀草素和共軛亞油酸組合給藥，特別是當兩者摩爾比為1:1-1:20配伍時具有很好抗癌細胞的協(xié)同作用；發(fā)明人分別對daudi，raji和bc-3為模型進行體外mtt篩選，發(fā)現(xiàn)其具有很強的抗增殖活性并呈良好的時效與量效關系，結(jié)合經(jīng)典聯(lián)合給藥分析原理(median-effectprinciple)和統(tǒng)計分析，結(jié)果表明其具有協(xié)同作用，尤其是在fa＜0.5時可明顯產(chǎn)生協(xié)同效應抑制三種癌細胞增殖，這說明cla和lt組合物可在低劑量配伍時產(chǎn)生lt或cla單藥高劑量的生物學效應，從而可以大大降低藥物的毒副作用產(chǎn)生，具有良好的臨床用藥開發(fā)前景。同時，等效應劑量評價表明，復合藥物對正常肝細胞l-o2的毒性尚未增加。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
實施例1：daudi、raji和bc-3細胞篩選優(yōu)化木犀草素(lt)和共軛亞油酸(cla)復方藥物組合物。
取對數(shù)生長期的細胞，分別接種3×104個細胞/孔于96孔板上，待生長6小時后，離心棄上清，然后按以下分組給藥：腫瘤細胞設不加藥組和加藥組，其中加藥組設lt和cla單藥組、lt和cla聯(lián)合用藥不同摩爾比例組，每組設4-6個復孔，培養(yǎng)24小時，棄上清，加入100μl含0.5mg/ml的mtt(四氮唑鹽)無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)4小時，加入100μldmso(二甲亞砜)，放置于微型振蕩儀上振蕩10min，再置于酶標儀上570nm處檢測od值。結(jié)果按照以下抑制率公式計算每種情況下腫瘤細胞生長的抑制率，具體結(jié)果見表1。
抑制率＝(1-加藥組od值/對照組od值)
表1為lt和cla單獨和聯(lián)合給藥作用細胞72小時后不同濃度的ic50抑制率。
當cla和lt按摩爾比1:1和1:20配伍組合時的抑制情況。從其中我們可以獲得隨著配伍濃度的增加，其抑制率呈濃度依賴性。其中我們發(fā)現(xiàn)隨著配伍濃度的增加，其抑制率呈濃度依賴性。
表1cla和lt單藥作用72小時ic50(μg/ml)
實施例2：lt和cla聯(lián)合給藥效應分析
以median-effectprinciple(中效原理或chou-talalay聯(lián)合指數(shù)法)為評價基礎，應用combidrug統(tǒng)計軟件繪制劑量-效應曲線及不同效應下的合用指數(shù)曲線(fa-c曲線)，從兩藥合用的效應與合用指數(shù)的關系定量評價兩藥之間是協(xié)同、拮抗或相加關系。具體步驟如下：
藥物作用效應即抑制率(fa)＝1-(試驗組平均od570值/腫瘤細胞空白對照組平均od570)根據(jù)中效方程式fa/fu＝(d/dm)m，兩邊取對數(shù)logfa/fu＝mlogd–mlogdm，設a＝-mlogdm，b＝m，x＝logd，y＝logfa/fu,代入中效方程式得y＝bx–a；其中fa為藥物作用效應，fu＝1–fa，d為藥物濃度，m為斜率，dm為中效濃度，即50％效應時的藥物濃度。依上述公式，計算出兩種抗癌藥單用及合用時各自的中效濃度dm(logdm＝-a/m)，再計算出單用及兩藥合用時在各種效應時所需藥物濃度〔d＝dm(fa/fu)1/m〕，可計算出兩藥合用時在各種效應時的合用指數(shù)〔ci＝d1/dx1+d2/dx2+α(d1d2)/(dx1dx2)，d1、d2為兩藥合用時產(chǎn)生x效應時兩藥各自所需濃度，dx1、dx2為兩藥單獨使用時產(chǎn)生x效應時兩藥各自濃度〕。α＝0為兩種相互排斥性藥物，α＝1為兩種相互非排斥性藥物。因lt與共軛亞油酸作用機制不同，故本實驗中取α＝0。當ci<1，兩藥合用效應為協(xié)同；ci＝1，兩藥合用效應相加；ci>1，兩藥合用效應拮抗。
經(jīng)過軟件分析，本發(fā)明的復方藥物組合物具有良好的協(xié)同作用，具體效應見表2，根據(jù)median-effectprinciple評價效應的原則，即ci指數(shù)<0.1時具有很強的協(xié)同作用(verystrongsynergism)；ci指數(shù)為0.1–0.3時為強協(xié)同效應(strongsynergism)；ci指數(shù)為0.3–0.7具有協(xié)同效應(synergism)；ci指數(shù)為0.7–0.85具有中度協(xié)同效應(moderatesynergism)；ci指數(shù)為0.85–0.90區(qū)間時具有弱協(xié)同效應(slightsynergism)；ci指數(shù)為0.90–1.10區(qū)間時具有近疊加效應(nearlyadditive)；ci指數(shù)>1.10及以上時具有拮抗效應。
表2可見，lt和cla配伍具有協(xié)同效應；尤其是當兩者摩爾比為1:1-20配伍時具有良好的協(xié)同效應，當兩者摩爾比為1:10時協(xié)同效應最強。
表2lt和cla不同配伍組合作用72小時的聯(lián)合指數(shù)ci比較
實施例3：木犀草素(lt)和共軛亞油酸(cla)復方藥物組合物按照以下處方制成片劑：
處方如下：
制備工藝如下：
將藥物和輔料分別過80目篩，將共軛亞油酸與48克微晶纖維素和12克羧甲基淀粉鈉充分混合，10％淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60℃下干燥，得顆粒1。將木犀草素與24克微晶纖維素、15克淀粉和8克羧甲基淀粉鈉充分混合，10％淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60℃下干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混合，16目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，片重500mg。
上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。