本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體是一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液。
背景技術(shù)：
口腔致病菌可引起多種口腔炎癥性疾?。耗壳?，我國人均患齲率約為40%，其中，兒童患齲率約為80%，青年人患齲率約為70%，老年人患齲率約為52%；牙齦炎和牙周炎患病率為70%，單靠門診治療難以完成。這些疾病都是多因素引起的細(xì)菌性疾病，其致病菌是人口腔中的常在菌，在健康狀態(tài)時各微生物在種類和數(shù)量上構(gòu)成一定的生理構(gòu)比。當(dāng)菌群失調(diào)時某種致病性較強(qiáng)的病菌過度繁衍引起疾病。長期使用廣譜抗菌素和化學(xué)合成藥在清除致病菌的同時將破壞口腔的微生態(tài)平衡。找出預(yù)防控制這些疾病的有效措施是當(dāng)前的緊迫任務(wù)。開發(fā)能控制而不是消滅致病菌或消除特異致病機(jī)制的藥物具有重要意義。因此若研制出一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液，既能質(zhì)量可控、效果好且穩(wěn)定，將深受口腔問題困擾患者的歡迎，必將具有很大的市場潛力。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液；
一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料藥制成：苦參5-20份，甘草5-20份，銀花5-20份，連翹5-20份，桔梗5-20份，葛根10-30份，桂枝3-12份，白芍10-25份，川芎5-20份，延胡索5-20份，羌活5-20份，黃芩5-20份，當(dāng)歸5-20份，雞血藤5-20份，穿山甲5-10份；
所述的一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料藥制成：苦參10份，甘草10份，銀花10份，連翹10份，桔梗10份，葛根20份，桂枝6份，白芍15份，川芎12份，延胡索12份，羌活10份，黃芩9份，當(dāng)歸12份，雞血藤10份，穿山甲3份；
所述的一種具有抗菌作用的中藥組合口漱液，其特征在于其由以下重量份數(shù)的原料藥制成有以下配伍組方：
1）苦參5-20份，甘草5-20份；清熱解毒?？鄥⒖嗪?，清熱燥濕，甘草甘平，解毒力專，二藥合用清熱解毒效果頗佳?，F(xiàn)代藥理研究表明苦參與甘草均具有良好的抗炎作用，臨床上可用于口腔炎癥、咽炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等諸多炎癥性疾病的治療；
2）苦參5-20份，甘草5-20份，銀花5-20份，連翹5-20份；清熱解毒，疏散風(fēng)熱。苦參清熱燥濕，甘草解毒，金銀花、連翹清熱解毒力強(qiáng)，同時又具有疏散風(fēng)熱的效果，四藥合用共奏疏風(fēng)散熱解毒之功。臨床上多用于治療外感風(fēng)熱引發(fā)的急性咽喉炎等疾?。?/p>
3）苦參5-20份，甘草5-20份，桔梗5-20份；清熱解毒，利咽?？鄥⑶鍩嵩餄?，甘草解毒，桔梗為肺部之引經(jīng)藥，具有宣肺利咽之功效，三藥合用清熱解毒利咽。臨床上多用于咽喉炎的治療；
4）苦參5-20份，甘草5-20份，葛根10-30份；清熱解毒，解痙。苦參清熱燥濕，甘草解毒，葛根甘涼，清熱舒痙，三藥合用清熱解毒止痙。臨床上可用于解除由高熱炎癥性疾病所引發(fā)痙攣的配合性治療；
5）苦參5-20份，甘草5-20份，桂枝3-12份，白芍10-25份；清熱解毒，疏解風(fēng)寒?？鄥⑶鍩嵩餄瘢什萁舛?，桂枝解肌發(fā)汗力強(qiáng)，長于發(fā)散風(fēng)寒，桂枝甘草合用辛甘化陽，白芍甘草合用酸甘化陰，白芍倍于桂枝，柔肝止痛功效佳，諸藥合用，共奏清熱解毒，疏解風(fēng)寒之功。臨床上多用于治療外感風(fēng)寒引發(fā)的急性咽喉炎等疾?。?/p>
6）苦參5-20份，甘草5-20份，川芎5-20份，延胡索5-20份；清熱解毒，止痛?？鄥⑶鍩嵩餄?，甘草解毒，川芎辛溫，既能活血化瘀，又能行氣止痛，與延胡索配伍，行氣活血止痛力倍增，諸藥合用清熱解毒，活血止痛。臨床上多用于解除炎癥性疾病引發(fā)的疼痛；
7）苦參5-20份，甘草5-20份，羌活5-20份，黃芩5-20份；清熱解毒，祛濕?？鄥⑶鍩嵩餄瘢什萁舛?，黃芩清熱燥濕力強(qiáng)，羌活解表散寒，祛風(fēng)勝濕，諸藥合用清熱燥濕解毒。臨床上多用于風(fēng)濕性疾病、口腔炎癥等炎癥性疾病的治療；
8）苦參5-20份，甘草5-20份，當(dāng)歸5-20份，雞血藤5-20份，穿山甲5-10份；清熱解毒，散瘀結(jié)?？鄥⑶鍩嵩餄?，甘草解毒，當(dāng)歸、雞血藤活血補(bǔ)血，穿山甲破血消徵，諸藥合用共奏清熱解毒，活血化瘀之功。臨床上可用于慢性咽炎的治療；
9）苦參5-20份，甘草5-20份，銀花5-20份，連翹5-20份，桔梗5-20份，葛根10-30份，白芍5-20份，川芎5-20份，延胡索5-20份，當(dāng)歸5-20份，穿山甲5-10份；清熱解毒，活血化淤，散結(jié)止痛?？鄥⑶鍩嵩餄窠舛?，銀花、連翹、桔梗清熱解毒利咽，當(dāng)歸、川芎、延胡索、穿山甲行氣活血散結(jié)，配伍白芍、葛根以斂陰生津，柔肝止痛，防當(dāng)歸、川芎、延胡索耗氣傷陰，甘草解毒并調(diào)和諸藥，諸藥合用共奏清熱解毒，活血化瘀，散結(jié)止痛之功。臨床上可用于急慢性咽喉炎及口腔炎癥等炎癥性疾病的治療；
所述的中藥組合口漱液，其特征在于包括以下步驟：
1）將藥材的中藥飲片用打粉機(jī)打碎，過篩，按下述方法進(jìn)行乙醇回流提取，料液比：1:8～15，提取次數(shù)：1～3次，乙醇濃度：50～90%，提取時間：0.5～2h/次，提取溫度：60～90℃；提取液加入蛋白糖，加蒸餾水，包裝即成；
2）將步驟1）得到的產(chǎn)品，進(jìn)行高效液相色譜法質(zhì)量控制；
3）本發(fā)明的中藥組合口漱液具有清熱解毒、抗口腔、上呼吸道繼發(fā)感染有關(guān)的細(xì)菌。適用于牙齦炎、牙周炎、口臭、口糜、口瘡、咽炎、口腔潰瘍等患者?？谑淮?0ml，每次5～10min，一日3～5次，7天為一個療程。孕婦慎用；
本發(fā)明口漱液與苦參口漱液、清熱解毒口服液相比具有明顯的抗菌作用，其對不同細(xì)菌的最低抑菌濃度低，尤其是對大腸桿菌、流感桿菌、金黃色葡萄球菌等抗菌作用明顯優(yōu)于苦參口漱液、清熱解毒口服液。體外實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明口漱液對臨床上常見的致病菌均有明顯抑制作用，表明本發(fā)明口漱液具有廣譜抗菌作用；
下面將結(jié)合附圖、實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
附圖說明
圖1：高效液相色譜圖（a空白對照，b混合標(biāo)準(zhǔn)品，c本發(fā)明口漱液樣品；1苦參堿出峰時間為5.3min，2甘草苷出峰時間為22.8min）。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
原料藥配方：苦參10g，甘草10g；
制備方法：將兩種藥材的中藥飲片用打粉機(jī)打碎，過40目篩，按下述方法進(jìn)行乙醇回流提取，料液比：1：10，提取次數(shù)：2次，乙醇濃度：70%，提取時間：1h/次，提取溫度：80℃；提取液90ml加入蛋白糖0.5g，加蒸餾水調(diào)整成100ml，包裝即成；
實(shí)施例1的質(zhì)量控制
儀器：agilent1200高效液相色譜儀，agilent色譜工作站，電子天平（梅特勒xp105），超純水儀（明澈-d24uv）；
試藥與對照品：苦參堿對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為：88g9-p747）、甘草苷對照品（寶雞市辰光生物科技有限公司，批號為：20150919），本發(fā)明口漱液；甲醇、乙腈、磷酸均為色譜純，水為超純水；
色譜條件：色譜柱為xtimate-c18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動相a：磷酸鹽緩沖液（3.402mg磷酸二氫鉀溶于1000ml水中），流動相b：甲醇；按下述比例進(jìn)行梯度洗脫：a：0～5min（85%），5～17min（85%～55%），17～50min（55%）；流速1.0ml·min-1，檢測波長220nm，柱溫為25℃，進(jìn)樣量為10μl；
對照品溶液：精密稱取苦參堿對照品5mg，甘草苷對照品2mg分別置10ml量瓶中，加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成標(biāo)準(zhǔn)品母液；分別精密量取苦參堿、甘草苷母液各1ml，置10ml量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得苦參堿為0.05mg·ml-1及甘草苷為0.02mg·ml-1的混合對照品溶液。溶劑：磷酸鹽緩沖液:甲醇（85:15）；
供試品溶液：取本發(fā)明口漱液1ml于10ml容量瓶中，加溶劑至刻度，搖勻，離心，取上清液過微孔濾膜即得；
質(zhì)量控制方法學(xué)考察方法與結(jié)果
線性關(guān)系：分別精密稱取苦參堿和甘草苷對照品適量，用少量甲醇溶解，并用溶劑稀釋制成苦參堿濃度1mg·ml-1、甘草苷濃度1mg·ml-1的線性貯備液。分別取苦參堿貯備液稀釋成0.005、0.02、0.04、0.06、0.09、0.12mg·ml-1，甘草苷貯備液稀釋成0.002、0.01、0.05、0.10、0.15、0.20mg·ml-1，按照本文色譜條件進(jìn)樣測定。以苦參堿峰面積對相應(yīng)測定濃度進(jìn)行線性回歸分析，苦參堿的線性回歸方程為：y=5835.4x-12.256，r2=0.9997。結(jié)果表明，苦參堿在0.005～0.12mg·ml-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系；以甘草苷峰面積對相應(yīng)測定濃度進(jìn)行線性回歸分析，甘草苷的線性回歸方程為：y=23308x-46.385，r2=0.9991。結(jié)果表明，甘草苷在0.005～0.12mg·ml-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。當(dāng)信噪比(s/n)為10時，得到苦參堿、甘草苷最低定量限分別為5μg·ml-1和5μg·ml-1；
精密度試驗(yàn)：精密稱取上述苦參堿甘草苷混合對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣五次，進(jìn)樣量10μl，記錄峰面積，結(jié)果顯示苦參堿峰面積的rsd為0.44%，甘草苷峰面積的rsd為0.43%，表明本方法進(jìn)樣精密度良好；
穩(wěn)定性試驗(yàn)：取上述苦參堿甘草苷混合對照品溶液，分別在0、2、4、8、12h進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，結(jié)果苦參堿峰面積的rsd為0.86%，甘草苷峰面積的rsd為0.86%，表明苦參堿甘草苷的溶液至少在12h內(nèi)穩(wěn)定；
重現(xiàn)性試驗(yàn)：精密移取同一本發(fā)明口漱液樣品1ml于10ml容量瓶中，共5份，平行制備5份供試品溶液，分別測定，記錄色譜圖，結(jié)果苦參堿含量的rsd為1.44%，甘草苷含量的rsd為2.76%，表明本方法的重現(xiàn)性良好；
回收率試驗(yàn)：精密量取本發(fā)明口漱液5ml，共5份，分別至10ml容量瓶中，加入等量的苦參堿甘草苷標(biāo)準(zhǔn)品，用溶劑稀釋至刻度，按本文色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算回收率。結(jié)果苦參堿的平均回收率為0.88%（rsd=0.51%，n=5），甘草苷的平均回收率為0.96%（rsd=0.61%，n=5），表明本方法具有良好的準(zhǔn)確性；
本發(fā)明口漱液檢測結(jié)果：采用以上實(shí)驗(yàn)方法測得本發(fā)明口漱液中苦參堿的含量為0.234mg/ml，甘草苷的含量為0.873mg/ml；
本發(fā)明口漱液質(zhì)量控制結(jié)果圖1，本方法檢測本發(fā)明口漱液中的苦參堿和甘草苷出峰良好，分離度高，有較高的精密度和準(zhǔn)確性，可用于本發(fā)明口漱液的質(zhì)量控制；
實(shí)施例1的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
（一）實(shí)驗(yàn)材料
菌種：金黃色葡萄球菌，6538；大腸桿菌，25922atcc；肺炎雙球菌，31230；流感桿菌，970717；痢疾桿菌，51309；乙型溶血性鏈球菌，32172；肺炎克雷伯氏菌，46114；以上菌種來源于北京中國生物制品檢定所，由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)部醫(yī)學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室尹秀提供；
培養(yǎng)基：血平板；mh培養(yǎng)基；普通肉湯；普通平板；
藥物：本發(fā)明口漱液：由浙江中醫(yī)藥大學(xué)生物與制藥工程研究所提供，批號：201501101?？鄥⒖谑海赫憬嗅t(yī)藥大學(xué)生物與制藥工程研究所提供，批號：201501101。清熱解毒口服液：浙衛(wèi)藥準(zhǔn)字（1996）第072401號，浙江英特制藥有限公司生產(chǎn)，批號：2014021,具有清熱毒功效，用于流感、上呼吸道等感染。青霉素鈉：冀衛(wèi)藥準(zhǔn)字（1995）第000004號，華北制藥股份有限公司；
（二）方法與結(jié)果
1.含藥平板制備
在50ml大試管內(nèi)用倍比稀釋法分別均將苦參口漱液、本發(fā)明口漱液用80℃mh瓊脂培養(yǎng)基稀釋成0.500、0.250、0.125、0.063、0.031、0.016、0.008、0.004g/ml含藥液化培養(yǎng)基，每管15ml，待冷卻至45℃后每管加1ml新鮮兔血，混勻倒入9cm無菌平板中，最后制成平板含藥量為0.468、0.234、0.117、0.059、0.029、0.015、0.008、0.004g/ml；以同樣方法將清熱解毒口服液制成含新鮮兔血的mh平板（大試管內(nèi)加14mlmh瓊脂），其含藥量為0.500、0.250、0.125、0.063、0.031、0.016、0.008、0.004ml/ml；另將青霉素鈉用生理鹽水稀釋成1：100及1：10，然后各取1ml加入15ml（含1ml新鮮兔血）的mh瓊脂中，倒入9cm無菌平板中；
2.菌種接種
將不同的含藥平板、mh平板、mh血平板用記號筆劃成8個大小一致區(qū)域并編號，然后每一區(qū)域按順序用劃線法接種含105/ml下列菌液（已經(jīng)培養(yǎng)18小時）：大腸桿菌、肺炎球菌、流感桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、乙型鏈球菌、痢疾桿菌、生理鹽水。置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，觀察細(xì)菌生長情況，確定各藥對不同細(xì)菌的最低抑菌濃度（mic）。結(jié)果見表1-4；
表1本發(fā)明口漱液體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2苦參口漱液體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表3清熱解毒口服液體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表4青霉素體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果
從上表可見，本發(fā)明口漱液對各菌的mic明顯低于苦參口漱液和清熱解毒口服液，抗菌作用明顯優(yōu)于苦參口漱液和清熱解毒口服液，但不及青霉素；
（三）結(jié)論：本發(fā)明口漱液與苦參口漱液、清熱解毒口服液相比具有明顯的抗菌作用，其mic低，尤其是對大腸桿菌、流感桿菌、金黃色葡萄球菌等抗菌作用明顯優(yōu)于苦參口漱液、清熱解毒口服液。體外實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明口漱液對臨床上常見的致病菌均有明顯抑制作用，表明本發(fā)明口漱液具有廣譜抗菌作用；
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換或改進(jìn)等，均包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。