本發(fā)明屬于保健食品領域，具體涉及一種具有增強免疫作用的中藥保健食品及其制備方法。
背景技術(shù)：
：免疫力是人體自身的防御機制，是人體識別和消滅外來侵入的任何異物（病毒、細菌等），處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細胞，以及識別和處理體內(nèi)突變細胞和病毒感染細胞的能力，是人體識別和排除“異己”的生理反應。免疫系統(tǒng)由外至里可分為四部分。第一部分是免疫組織，又稱屏障結(jié)構(gòu)，主要包括皮膚、黏膜、血腦屏障和胎盤屏障；第二部分是免疫器官，包括骨髓、胸腺、脾臟、淋巴結(jié)和扁桃體；第三部分是免疫細胞，包括T細胞、B細胞和吞噬細胞等；第四部分軍是免疫分子，主要由抗體組成。免疫功能是靠以上四部分共同協(xié)作來抵抗外來侵入，保護機體不受傷害。其主要有三大功能：第一是防止病原微生物（細菌和病毒等）侵入肌體，減少疾病的發(fā)生；第二是消滅肌體內(nèi)的“異己分子”；第三是自穩(wěn)作用。免疫力低下的主要表現(xiàn)有：易疲勞、容易感染、感冒不斷、腸胃嬌氣、舊病容易復發(fā)等。隨著經(jīng)濟全球化的發(fā)展，激烈競爭的環(huán)境下，人們長期處在巨大的工作和精神壓力之下，神經(jīng)高度緊張、焦慮，免疫力下降，常處于亞健康狀態(tài)。據(jù)數(shù)據(jù)調(diào)查，十個上班族人群中，有9個為亞健康狀態(tài)。此外，人體機能在30歲以后開始逐漸下滑，如果不提前預防和積極干預，周圍環(huán)境、心理因素以及其他因子等，加速機體的免疫力下降。目前，國產(chǎn)保健食品中增強免疫力產(chǎn)品所占份額較大，市場主要以蛋白質(zhì)粉、蟲草、人參、靈芝、蜂王漿以及一些具有補益類的中藥提取物組成，產(chǎn)品種類多，琳瑯滿目，但是質(zhì)量參差不齊。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供了一種具有增強免疫作用的中藥保健食品及其制備方法。本發(fā)明的保健食品由以下重量份數(shù)比例的原料組成：黃芪85～350、牛蒡子40～120、桔梗50～200、枸杞子150～330。本發(fā)明的保健食品優(yōu)選原料用量為：黃芪125、牛蒡子75、桔梗100、枸杞子75。本發(fā)明的保健食品制備方法，其特征是：包括以下步驟：1、取黃芪85～350重量份、牛蒡子40～120重量份、桔梗50～200重量份、枸杞子150～330重量份；2、將步驟1所取的黃芪、牛蒡子、桔梗、枸杞子混合，用10倍重量水加熱提取3次，每次2h；3、將3次提取液過濾，合并，減壓濃縮至相對密度為1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉；4、將浸膏干粉加入藥用輔料，制成常規(guī)的口服劑型。本發(fā)明的積極效果是：加如牛蒡子為主要成分之一，與其余成分協(xié)同增效，提升了與黃芪、桔梗和枸杞子組合物免疫功能。本發(fā)明組合物療效顯著、無副作用，可長期服用，是一種安全有效的增強免疫力的保健食品。本發(fā)明的積極效果是：加如牛蒡子為主要成分之一，與其余成分協(xié)同增效，提升了與黃芪、桔梗和枸杞子組合物免疫功能。本發(fā)明組合物療效顯著、無副作用，可長期服用，是一種安全有效的增強免疫力的保健食品。本發(fā)明是基于：黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。具有補氣升陽，益衛(wèi)固表，托毒生肌，利水退腫之功效。研究表明，黃芪對體液免疫、細胞免疫、非特異性免疫等免疫系統(tǒng)均具有正向調(diào)節(jié)作用（中國新藥雜志，2008年，第17卷，第17期）；黃芪提取物可以增加脾臟、胸腺重量，提高黏膜免疫功能，調(diào)節(jié)與免疫相關的細胞因子含量，提高ＮＫ細胞的殺傷能力，促進巨噬細胞、樹突狀細胞的吞噬作用，增加Ｔ淋巴細胞和Ｂ淋巴細胞數(shù)量及活性，從而使特異性免疫和非特異性免疫具有不同程度的增強（亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012年，第8卷，第7期）；黃芪多糖對免疫功能的調(diào)節(jié)作用不僅在于能夠增強免疫器官和細胞的功能，還能刺激細胞因子的釋放，影響神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡，促進相關基因的合成和表達（食品科學，2013年，第34卷，第11期）。牛蒡子為菊科草本植物牛蒡?qū)倥］虻母稍锍墒旃麑?。研究表明，牛蒡子含有豐富的蛋白質(zhì)、鈣、維生素、胡蘿卜素，這些營養(yǎng)成分可促進新陳代謝，提高人體免疫力，促進新生細胞生長，延緩衰老（中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育，2010年，第8卷，第24期）；牛蒡子可使正常小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率和小鼠的α-醋酸萘酯酶陽性率顯著提高，并可明顯增加抗體生成細胞的形成，增強小鼠巨噬細胞的吞噬功能，牛蒡子能夠增強機休免疫功能（西北藥學，1993年，第8卷，第2期）。牛蒡子苷元可能是通過調(diào)節(jié)免疫應答來對活性巨噬細胞、淋巴細胞包TNF-α、NO產(chǎn)生及淋巴細胞增殖起作用（中國現(xiàn)代藥物應用，2009年，第3卷，第15期）。桔梗為桔?？浦参锝酃５母稍锔?。研究表明，桔梗水提物可以濃度依賴性地刺激巨噬細胞的增殖、吞噬以及NO的產(chǎn)生以增強機體的免疫應答，表明桔梗是潛在的巨噬細胞功能強化劑，具有免疫調(diào)節(jié)作用（中藥藥理與臨床，2013年，第29卷，第2期）；賈林等用藥理實驗證明了桔梗多糖對環(huán)磷酰胺誘導的免疫抑制小鼠具有免疫增強調(diào)節(jié)作用（食品與機械，2012年，第28卷，第3期）；桔梗多糖在體外能夠清除經(jīng)基自由基和超氧陰離子自由基fH，在細胞水平具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用（2012年，中國醫(yī)藥科學，第2卷，第9期）。枸杞子為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實。是滋陰助陽，益精補血的良藥。研究表明，枸杞子中富含枸杞多糖、硒和類胡蘿卜素等抗氧化物質(zhì)，且活性很強，能夠促進生物體內(nèi)巨噬細胞的吞噬功能，具有促進調(diào)節(jié)免疫的功能（黑龍江醫(yī)藥，2013年，第6卷，第26期）；武曉群等用藥理實驗證明，高濃度枸杞子可升高衰老小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，提高免疫球蛋白和C3的含量，而低濃度枸杞子可提高免疫球蛋白的含量，即枸杞子對D-半乳糖致衰小鼠具有免疫調(diào)節(jié)作用（江蘇中醫(yī)藥，2007年，第39卷，第11期）。本發(fā)明的創(chuàng)新之處在于本發(fā)明與市售中藥提取物復配產(chǎn)品相比，是在中醫(yī)理論指導下，通過各藥物間君臣佐使相互配合，協(xié)同增效，經(jīng)藥理實驗證明，效果優(yōu)于市售產(chǎn)品。本發(fā)明的另一創(chuàng)新之處在于方中牛蒡子的使用，經(jīng)藥理實驗證明，本發(fā)明組合物的增免效果要優(yōu)于僅以黃芪、桔梗和枸杞子的組合物，該配方是通過各藥物間的相互協(xié)同作用來增效的，缺一不可。此外，經(jīng)檢索，目前國產(chǎn)保健食品中暫未出現(xiàn)以牛蒡子為原料的產(chǎn)品，而專利檢索除中藥外，未發(fā)現(xiàn)以牛蒡子為原料的保健食品，本方重用牛蒡子，經(jīng)藥理實驗證實，效果顯著。免疫效果實驗受試藥物為本發(fā)明組合物按照實施案例1制備得到；對照藥為參杞黃膠囊，吉林一正藥業(yè)集團有限公司,批號：20151003。實驗動物：SPF級昆明雌性1月齡小鼠18-22g，來源：吉林大學白求恩醫(yī)學院實驗動物中心，合格證號：SCXK(吉)2014-0003。根據(jù)人口服推薦用量，設樣品低、中、高劑量組分別3.35、6.7、13.4g/Kg·BW(分別相當于人體推薦用量的5、10、20倍），一個空白對照組、一個陽性對照組、一個牛蒡子陰性組（處方中不加牛蒡子），共6組，每組10只動物。采取灌胃法，每日灌胃一次，空白對照組灌蒸餾水。各組小鼠連續(xù)給灌胃30d，測定各項指標。對小鼠增強免疫力的作用，本實驗主要測定ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗（MTT法）、小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應（耳腫脹法）、小鼠抗體生成細胞檢測（Jerne改良玻片法）、血清溶血素測定（血凝法）、小鼠碳廓清實驗、腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力以及NK細胞活性測定（乳酸脫氫酶測定法）。免疫分組：每60只小鼠為1組，共6組。免疫Ⅰ組，進行ConA誘導鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗；免疫Ⅱ組，進行遲發(fā)型變態(tài)反應實驗；免疫Ⅲ組，進行體比值測定，血清溶血素測定和抗體生成細胞數(shù)測定；免疫Ⅳ-Ⅵ組，分別進行碳實驗、腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗和NK細胞活性測定。結(jié)果如下：1、對小鼠體重的影響表1免疫Ⅰ組小鼠體重的增長變化（±S）名稱動物數(shù)初始體重/g中期體重/g末期體重/g增重/g高劑量組1020.6±1.231.0±1.042.8±1.522.2±2.0中劑量組1020.2±1.531.3±1.243.7±1.823.5±2.5低劑量組1021.3±1.331.7±1.343.8±1.622.5±2.2空白對照組1020.1±1.331.4±1.342.8±1.822.7±2.3陽性藥物組1020.5±1.232.0±1.043.6±1.423.1±2.5牛蒡子陰性組1020.4±1.331.5±1.243.2±1.522.8±2.2表2免疫Ⅱ組小鼠體重的增長變化（±S）名稱動物數(shù)初始體重/g中期體重/g末期體重/g增重/g高劑量組1021.8±1.330.5±1.343.3±1.621.5±1.8中劑量組1020.4±1.231.6±1.243.4±1.523.0±2.0低劑量組1021.1±1.531.3±1.542.8±1.621.7±2.0空白對照組1020.7±1.231.0±1.242.2±1.621.5±1.8陽性藥物組1020.3±1.331.6±1.342.6±1.522.3±2.0牛蒡子陰性組1021.4±1.231.8±1.243.0±1.621.6±2.2由表1和表2可知，不同免疫組的實驗初期、實驗中期以及實驗末期樣品各劑量組的小鼠體重及試驗期間小鼠的體重增長與陰性對照組比較，均無顯著性差異（P>0.05），結(jié)果表明，該樣品對小鼠的體重增長無明顯影響。2、對小鼠免疫器官臟器/體重比值的影響表3小鼠免疫器官臟器/體重比值（±S）名稱動物數(shù)胸腺/體重/%脾臟/體重/%高劑量組100.228±0.610.45±0.40中劑量組100.218±0.480.41±0.56低劑量組100.215±0.750.44±0.39空白對照組100.207±0.660.46±0.83陽性藥物組100.213±0.580.43±0.62牛蒡子陰性組100.211±0.630.42±0.46由表3可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，與空白對照組比較，各劑量組胸腺、脾臟/體重比值均無顯著差異（P>0.05），表明該組合物對小鼠的免疫器官重量無明顯影響。3、對小鼠細胞免疫的影響表4ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化及小鼠脾遲發(fā)型變態(tài)反應（DTH）實驗結(jié)果（±S）名稱動物數(shù)淋巴細胞增值能力（OD值）左右耳邊重量差值/mg高劑量組100.218±0.063*13.21±1.55#中劑量組100.153±0.07411.13±1.60低劑量組100.148±0.08210.69±1.80空白對照組100.089±0.0779.91±1.30陽性藥物組100.136±0.09912.34±1.50牛蒡子陰性組100.131±0.08510.13±1.60注：*與對照組比較有顯著性差異（P<0.05）；#與對照組比較有極顯著性差異（P<0.01）。由表4可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，?與空白對照組比較，各組小鼠的淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力均高于陰性對照組，其中高劑量組具有顯著性差異（P<0.05），表明該樣品具有促進小鼠淋巴細胞增值、轉(zhuǎn)化能力的作用；?與空白對照組比較，各組小鼠的左右耳片重差值均高于陰性對照組，其中高劑量組具有極顯著性差（P<0.01），表明該樣品具有促進小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應的作用。4、對小鼠體液免疫的影響表5小鼠抗體生成細胞數(shù)和血清溶血素的實驗結(jié)果（±S）名稱動物數(shù)溶血空斑數(shù)（1×10/106脾細胞）抗體積數(shù)高劑量組10262.0±61.2#218.6±13.4*中劑量組10232.0±56.7*206.3±17.6低劑量組10215.0±59.5204.9±11.8空白對照組10167.0±47.3188.5±22.3陽性藥物組10228.0±52.8205.6±16.5牛蒡子陰性組10206.0±48.1195.7±24.2注：*與對照組比較有顯著性差異（P<0.05）；#與對照組比較有極顯著性差異（P<0.01）。由表5可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，?與空白對照組比較，各組小鼠的抗體生成細胞數(shù)均高于陰性對照組，其中高、中劑量組與空白對照組的差異具有顯著性（P<0.01和P<0.05），表明該樣品具有促進小鼠抗體生成細胞增殖的作用；?與空白對照組比較，各組小鼠的抗體積數(shù)均高于陰性對照組，其中高劑量組具有顯著性差（P<0.05），表明該樣品具有提高小鼠血清溶血素水平的作用。5、對小鼠單核-巨噬細胞吞噬功能的影響表6小鼠單核-巨噬細胞碳廓清實驗結(jié)果（±S）名稱動物數(shù)吞噬指數(shù)高劑量組107.34±0.88*中劑量組106.14±1.20低劑量組106.06±1.35空白對照組105.80±1.10陽性藥物組106.12±1.22牛蒡子陰性組105.97±0.90注：*與對照組比較有顯著性差異（P<0.05）；#與對照組比較有極顯著性差異（P<0.01）。由表6可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，與空白對照組比較，各組小鼠的吞噬指數(shù)均高于陰性對照組，其中高劑量組與空白對照組的差異具有顯著性（P<0.05），表明該樣品具有促進小鼠單核-巨噬細胞碳廓清功能的作用。表7小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗結(jié)果（±S）名稱動物數(shù)吞噬率（%）吞噬指數(shù)高劑量組1033.6±2.8*0.56±0.13#中劑量組1031.9±3.40.51±0.08低劑量組1030.7±3.00.49±0.11空白對照組1030.0±2.20.44±0.05陽性藥物組1031.6±3.20.52±0.07牛蒡子陰性組1030.3±3.10.46±0.09注：*與對照組比較有顯著性差異（P<0.05）；#與對照組比較有極顯著性差異（P<0.01）。由表7可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，與空白對照組比較，各組小鼠的腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬率及吞噬指數(shù)均高于陰性對照組，其中高劑量組的吞噬率和吞噬指數(shù)與空白對照組的差異具有顯著性（P<0.05和P<0.01），表明該樣品具有促進小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用。6、對小鼠NK細胞活性的影響表8小鼠NK細胞活性測定結(jié)果（±S）名稱動物數(shù)NK細胞活性（%）NK細胞活性轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)高劑量組1035.31±7.730.612±0.05中劑量組1030.79±8.110.562±0.08低劑量組1029.74±8.250.553±0.12空白對照組1028.18±7.240.542±0.06陽性藥物組1031.27±5.280.566±0.11牛蒡子陰性組1028.56±7.460.547±0.13由表8可知，經(jīng)口給予小鼠不同劑量的受試物30d后，與空白對照組比較，各組小鼠的NK細胞活性均高于空白對照組，但各劑量組與空白對照組的差異無顯著性（P>0.05），表明該組合物對小鼠的NK細胞活性無明顯的提高作用。綜上，本發(fā)明組合物能夠促進小鼠的脾淋巴細胞增殖、轉(zhuǎn)化作用，促進小鼠的抗體生成細胞增殖，提高小鼠的血清溶血素水平，促進小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應及其單核-巨噬細胞的吞噬功能，對小鼠的體重增長、胸腺/體重比值、脾臟/體重比值及其NK細胞活性無明顯影響，由此可判定該組合物具有增強免疫力的作用。此外，通過藥理證明，含有牛蒡子的組合物的增強免疫力作用優(yōu)于不加牛蒡子的組合物，證明牛蒡子在該方中具有重要的增免作用。具體實施方式實施例一：取黃芪3500g、牛蒡子400g、桔梗2000g、枸杞子1500g，用10倍量水加熱提取2h，共三次，濾液合并，減壓濃縮至相對密度為1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，加入白砂糖8800g，混合，70%乙醇制粒，干燥后整粒，分裝，10g/袋，即得?？诜阂蝗?次，2袋/次。實施例二：取黃芪850g、牛蒡子1200g、桔梗500g和枸杞子3300g，用10倍量水加熱提取2h，共三次，濾液合并，減壓濃縮至相對密度為1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，加入白砂糖8800g，混合，70%乙醇制粒，干燥后整粒，分裝，10g/袋，即得。口服：一日2次，2袋/次。實施例三：黃芪1250g、牛蒡子750g、桔梗1000g和枸杞子750g，用10倍量水加熱提取2h，共三次，濾液合并，減壓濃縮至相對密度為1.0-1.1（60℃-65℃）的浸膏，干燥粉碎后得浸膏干粉，用80%乙醇制粒，干燥，整粒，混合，灌裝膠囊，分裝，0.5g/粒，即得?？诜阂蝗?次，3粒/次。當前第1頁1 2 3