本發(fā)明涉及靈芝在制藥及功能性食品和保健食品領(lǐng)域中的應(yīng)用，尤其涉及一種桑黃靈芝粉及其制備方法。
背景技術(shù)：
：免疫是機(jī)體對(duì)入侵異物的識(shí)別、排除和消滅的過程。機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能即識(shí)別自己排斥異己，具有免疫防御、免疫穩(wěn)定、免疫監(jiān)視三大功能。如果機(jī)體的免疫防御功能過高就會(huì)出現(xiàn)組織的病理性損害（如變態(tài)反應(yīng)），功能不足輕則容易發(fā)生感染，重則出現(xiàn)免疫缺陷性疾?。ㄈ绨滩。?；如果免疫穩(wěn)定功能失常，將會(huì)發(fā)生自身免疫病(如肝臟疾患)；如果免疫監(jiān)視的功能低下，則易使細(xì)胞發(fā)生突變導(dǎo)致癌癥發(fā)生(如肺癌等)。免疫力是人體自身的防御機(jī)制，是人體識(shí)別的消滅外來侵入的任何異物（病毒、細(xì)菌等），處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細(xì)胞以及識(shí)別和處理體內(nèi)突變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的能力。免疫低下的身體易被感染或患癌癥，導(dǎo)致機(jī)體體質(zhì)虛弱、營養(yǎng)不良、精神萎靡、疲乏無力、食欲降低、睡眠障礙等表現(xiàn)，且生病后很難恢復(fù)，長期如此還會(huì)誘發(fā)重大疾病。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，許多中藥具有提高機(jī)體免疫力的作用。破壁靈芝孢子粉主要化學(xué)成分為多糖類和三萜類，三萜類成分復(fù)雜，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂、抗氧化和抗衰老等藥理作用，靈芝三萜具有抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、保肝、抗腫瘤和抗艾滋病毒等藥理活性。桑黃，是一種真菌，因寄生于桑樹而得名。子實(shí)體無柄，菌蓋扁半球形或馬蹄形，木質(zhì)，淺肝褐色至暗灰色或黑色。在楊、柳、樺、櫟等樹干上也有生長。據(jù)分析，桑黃的成分極其復(fù)雜，除含大量多糖類物質(zhì)外，還含β葡聚糖、幾丁質(zhì)（殼聚糖）、雜多糖（果膠、半纖維素、多糖醛酸等膳食纖維）等成分，在腸道中有促進(jìn)有害物質(zhì)及膽固醇排泄的作用。此外，桑黃還具有抗衰老、降低膽固醇、護(hù)肝和抗肝硬化等藥理作用，而這些藥理作用恰恰是備受制藥界青睞的。蟲草花，蟲草真菌，是人工栽培的蛹蟲草子實(shí)體干品，顏色橙黃至橘紅、具有獨(dú)特的香味。蟲草花并非花，是人工培養(yǎng)的蟲草子實(shí)體，培養(yǎng)基是仿造天然蟲草所含的各種養(yǎng)分，包括谷物類、豆類、蛋奶類等，屬于一種真菌類。為了跟冬蟲草區(qū)別開來，聰明的商家起了一個(gè)美麗的名字，把它叫做蟲草花。蟲草花功效作用主治：性平、味甘，具有補(bǔ)肺腎、止咳嗽、益虛損、養(yǎng)精氣之功能。猴頭菇，又叫猴頭菌，只因外形酷似猴頭而得名。具有養(yǎng)胃和中的功效，用于胃、十二指腸潰瘍及慢性胃炎的治療。另外，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和藥理學(xué)的很多研究對(duì)猴頭菇多糖的藥用功效概括為提高免疫力、抗腫瘤、抗衰老、降血脂等多種生理功能?，F(xiàn)有的桑黃靈芝類桑黃靈芝粉，內(nèi)容物多為將桑黃和/或靈芝直接粉碎后的桑黃靈芝細(xì)粉，又或民間常規(guī)煮食，由于其有效成分難以完全溶解被機(jī)體吸收利用，生物利用度低、效果不好。同樣，未見破壁靈芝孢子粉、桑黃提取物、蟲草花提取物以及猴頭菇提取物聯(lián)用于提高機(jī)體免疫力的保健品或藥物的報(bào)道。將幾味天然藥物配伍使用，能否發(fā)揮原有藥效或藥效發(fā)生怎樣的改變，對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，均是難以預(yù)料的。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：鑒于上述不足，本發(fā)明的目的在于提供一種有效成分含量高，口服后易于吸收利用、具有增強(qiáng)免疫力的桑黃靈芝粉及其制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案，本發(fā)明各組分的用量也是經(jīng)過發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在下述重量范圍內(nèi)制備出的桑黃靈芝粉均具有很好的療效：一種桑黃靈芝粉，其原料由如下重量配比的組分組成：破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉8-12份、桑黃提取物4-6份、蟲草花提取物4-6份、猴頭菇提取物4-6份。進(jìn)一步的，所述桑黃靈芝粉是由下述原料藥按重量份配比制成：破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉10份、桑黃提取物5份、蟲草花提取物5份、猴頭菇提取物5份。上述各原料均為藥食同源材料，即可作為藥物或保健品使用，亦可作為食品使用。所述的桑黃靈芝粉，是由破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉、桑黃提取物、蟲草花提取物、猴頭菇提取物為活性成分，加上藥學(xué)上常用的輔料或輔助性成分制備而成的經(jīng)口給藥劑型。所述劑型選自口服液、飲料、顆粒劑、粉劑、丸劑、片劑、茶劑或膠囊劑。一種桑黃靈芝粉的制備方法包括以下步驟：（1）桑黃提取物的制備：取桑黃，粉碎，用飲用水浸泡0.5-1小時(shí)，然后加入桑黃重量0.4-1.0%的纖維素酶，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.0-6.5，超聲輔助酶解15-45min；酶解反應(yīng)后將料液升溫至90-110℃，滅酶1-5分鐘，過濾，濾液備用；將所得的濾渣用乙醇溶液提取兩次：加熱至微沸，回流提取1-2小時(shí)；過濾，減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液；合并上述酶解濾液與濃縮液，然后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，即得桑黃提取物；（2）蟲草花提取物的制備：取蟲草花，用10倍重量的75-90%的乙醇溶液中浸漬60-90min，在40-45℃的條件下以3000-4000W的功率超聲提取30-40min后過濾；濾渣再用10倍重量的60-75%的乙醇溶液超聲提取，條件同上，過濾，合并兩次濾液備用，濾液濃縮后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，得蟲草花提取物；（3）猴頭菇提取物的制備：取猴頭菇，粉碎，加10倍量75-90%乙醇，100℃回流提取3次，提取時(shí)間10-30min，合并提取液；離心，棄殘?jiān)?，得上清液；聚酰胺樹脂吸附：柱高與直徑比20，去離子水洗滌0.5h；去離子水和80%乙醇洗脫，流速6ml/min，收集乙醇洗脫液，濃縮后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，得猴頭菇提取物；（4）按配方量混合破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉、桑黃提取物、蟲草花提取物以及猴頭菇提取物，加上藥學(xué)上常用的輔料或輔助性成分制備粉劑即可。上述劑型可制備為粉劑。本發(fā)明還提供了上述桑黃靈芝粉在制備增強(qiáng)免疫力的藥物中的用途。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明通過獨(dú)特的提取工藝最大限度的提取出桑黃、蟲草花、猴頭菇中的有效活性成分，如多糖、萜類等活性成分，最大限度地發(fā)揮桑黃、蟲草花、猴頭菇的藥效或保健功效，提高了生物利用度，相應(yīng)降低了桑黃、蟲草花、猴頭菇原生藥材的用量。本發(fā)明的另一重要意義在于，對(duì)于某些異常珍貴的中藥，將藥材通過獨(dú)特的提取工藝，制成提取物用于制備高含量的劑型，可以使現(xiàn)代劑型有效地模擬中醫(yī)傳統(tǒng)湯藥，有利于推動(dòng)中藥現(xiàn)代化發(fā)展。研究表明，本發(fā)明組合物具有增強(qiáng)免疫力功效，且本發(fā)明組合物配伍精當(dāng)，發(fā)揮了協(xié)同作用，藥效活性明顯優(yōu)于各單味原料。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其他多種形式的修改、替換或變更。具體實(shí)施方式下面我們將結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述。實(shí)施例1桑黃靈芝粉：（1）桑黃提取物的制備：取桑黃，粉碎，用飲用水浸泡1小時(shí)，然后加入桑黃重量1.0%的纖維素酶，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至6.0，超聲輔助酶解45min；酶解反應(yīng)后將料液升溫至100℃，滅酶5分鐘，過濾，濾液備用；將所得的濾渣用乙醇溶液提取兩次：加熱至微沸，回流提取2小時(shí)；過濾，減壓濃縮回收乙醇，得濃縮液；合并上述酶解濾液與濃縮液，然后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，即得桑黃提取物；（2）蟲草花提取物的制備：取蟲草花，用10倍重量的75%的乙醇溶液中浸漬70min，在45℃的條件下以4000W的功率超聲提取40min后過濾；濾渣再用10倍重量的75%的乙醇溶液超聲提取，條件同上，過濾，合并兩次濾液備用，濾液濃縮后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，得蟲草花提取物；（3）猴頭菇提取物的制備：取猴頭菇，粉碎，加10倍量75%乙醇，100℃回流提取3次，提取時(shí)間30min，合并提取液；離心，棄殘?jiān)?，得上清液；聚酰胺樹脂吸附：柱高與直徑比20，去離子水洗滌0.5h；去離子水和80%乙醇洗脫，流速6ml/min，收集乙醇洗脫液，濃縮后真空冷凍干燥、粉碎過100目篩，得猴頭菇提取物；（4）按重量份配比計(jì)：取2份破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉、1份桑黃提取物、1份蟲草花提取物以及1份猴頭菇提取物，然后與糊精制成粉劑。每克粉劑中含有破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉100mg、桑黃提取物50mg、蟲草花提取物50mg以及猴頭菇提取物50mg，每天2g，一天一次，溫水送服。實(shí)施例2桑黃靈芝粉：制備方法同實(shí)施例1，只是破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉、桑黃提取物、蟲草花提取物、猴頭菇提取物的用量比為4:3:3:3。實(shí)施例3桑黃靈芝粉：制備方法同實(shí)施例1，只是破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉、桑黃提取物、蟲草花提取物、猴頭菇提取物的用量比的用量比為3:1:1:1。以下通過具體藥效學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明具有增強(qiáng)免疫力功效的有益效果。試驗(yàn)例：1.試驗(yàn)材料：藥品：桑黃靈芝粉：實(shí)施例1所制備的桑黃靈芝粉（每克粉劑中含有破壁靈芝孢子粉100mg、桑黃提取物50mg、蟲草花提取物50mg以及猴頭菇提取物50mg）。單味破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉粉劑：參照實(shí)施例1制備方法，每克粉劑相當(dāng)于含破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉250mg。單味桑黃提取物粉劑：參照實(shí)施例1制備方法，每克粉劑相當(dāng)于含桑黃提取物250mg。單味蟲草花提取物粉劑：參照實(shí)施例1制備方法，每克粉劑相當(dāng)于含蟲草花提取物250mg。單味猴頭菇提取物粉劑：參照實(shí)施例1制備方法，每克粉劑相當(dāng)于含猴頭菇提取物250mg。動(dòng)物分組：小鼠210只，隨機(jī)分為7組；正常對(duì)照組（下稱對(duì)照組）：灌服生理鹽水0.5ml/只，連續(xù)7d；環(huán)磷酰胺模型組（下稱模型組）：灌服生理鹽水0.5ml/只，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d；靈芝組：灌服單味破壁率達(dá)98%的靈芝孢子粉粉劑混懸液40mg/kgBW，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d；桑黃組：灌服單味桑黃提取物粉劑混懸液40mg/kgBW，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d；蟲草花組：灌服單味蟲草花提取物粉劑混懸液40mg/kgBW，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d；猴頭菇組：灌服單味猴頭菇提取物粉劑混懸液40mg/kgBW，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d；復(fù)方組：灌服桑黃靈芝粉混懸液40mg/kgBW，連續(xù)7d，于灌服第3天，腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg體重，連續(xù)2d。2小鼠免疫器官指數(shù)的測定給藥結(jié)束后稱小鼠體重，頸椎脫臼處死小鼠，稱其脾臟、胸腺濕重，計(jì)算脾指數(shù)和胸腺指數(shù):脾指數(shù)＝脾重量(mg)/體重(g)胸腺指數(shù)＝胸腺重量(mg)/體重(g)3單核巨噬細(xì)胞吞噬功能(碳粒廓清速率)的測定各組末次給藥后1h，稱體重，各鼠均按0.1ml/10g劑量由尾靜脈注入印度墨汁(以生理鹽水按1：5稀釋)，注射后分別在1min(t1)和5min(t2)從小鼠眼眶靜脈叢取血20μl，溶于2.0ml濃度0.1％Na2CO3溶液中，搖勻，放置20min后于680nm處測其吸光度值(A)，以濃度0.1％Na2CO3溶液作空白對(duì)照，將小鼠處死后取肝臟和脾臟，用濾紙吸干血跡后稱重，根據(jù)公式計(jì)算廓清指數(shù)K值和校正廓清指數(shù)α值。計(jì)算公式:K＝(logA1-logA2)/(t2-t1)α＝K1/3х體重/(肝重+脾重)4小鼠血清溶血素的檢測給藥第3天，每鼠腹腔注射2％SRBC0.2ml致敏，并繼續(xù)給藥。致敏后第4天于末次給藥后90min取小鼠眼球血，靜置1h，2000r/min離心10min，取上層血清20μl，用NS稀釋500倍，取該血清樣1ml作為補(bǔ)體，37℃溫浴1h，反應(yīng)結(jié)束，將反應(yīng)管立即移入冰浴中，以終止反應(yīng)，以2000r/min離心10min，取1ml上清液盛于含3ml都氏試劑的試管搖勻，放置10min后于540nm測其吸光度值(A)。計(jì)算小鼠的半數(shù)溶血值(HC50)。樣品HC50＝(樣品的吸光度值/SRBC半數(shù)溶血時(shí)的吸光度值)х稀釋倍數(shù)5數(shù)據(jù)處理利用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，顯著性分析采用單因素方差分析和多重比較。6結(jié)果及分析表1對(duì)小鼠免疫活性影響試驗(yàn)結(jié)果組別脾臟指數(shù)胸腺指數(shù)廓清指數(shù)（K）吞噬指數(shù)（α）半數(shù)溶血值（HC50）對(duì)照組5.05±0.383.50±0.570.0232±0.00484.89±0.51102.96±10.38模型組4.12±0.341.85±0.410.0153±0.00514.10±0.4980.07±11.43靈芝組4.56±0.352.81±0.480.0195±0.524.32±0.5099.03±11.25桑黃組4.25±0.412.33±0.510.0171±0.00454.13±0.4882.01±10.98蟲草花組4.51±0.442.77±0.490.0189±0.00474.27±0.4998.99±11.58猴頭菇組4.23±0.392.01±0.520.0159±0.00504.12±0.5280.56±10.31復(fù)方組5.21±0.423.31±0.470.0243±0.00514.91±0.48108.00±12.02注P<0.05；由表1結(jié)果可知，正常小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺后，可顯著降低小鼠脾臟和胸腺的重量,與正常對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，說明免疫抑制模型建立成功；猴頭菇組各指標(biāo)與模型組相比差異不大，說明猴頭菇組免疫增強(qiáng)作用較弱；靈芝組和蟲草花組胸腺指數(shù)、廓清指數(shù)吞噬指數(shù)、半數(shù)溶血值顯著高于模型組(P<0.05)，但與正常組相比還存在差異，但其免疫增強(qiáng)作用強(qiáng)于桑黃組；相比之下，本發(fā)明桑黃靈芝粉（復(fù)方組）能明顯提高免疫抑制小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、半數(shù)溶血值、吞噬指數(shù)、廓清指數(shù)等指標(biāo)，與模型組相比差異顯著(P<0.05)，小鼠各項(xiàng)指標(biāo)基本恢復(fù)至正常水平，療效優(yōu)于靈芝、桑黃、蟲草花、猴頭菇等單味藥粉組，證明本發(fā)明桑黃靈芝粉能提高免疫抑制小鼠的免疫活性,可對(duì)抗環(huán)磷酰胺引起的免疫抑制，療效優(yōu)于組方中各單味藥組，說明本發(fā)明藥物組合物，通過四味不同中藥的相互配伍，符合中醫(yī)藥理論，發(fā)揮了協(xié)同增效作用，獲得了更為理想的增強(qiáng)免疫力的功效。當(dāng)前第1頁1 2 3