本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種人參皂苷Rh2酯(Rh2-O)脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術(shù)：
人參皂苷分離于人參的根部，是人參最主要的活性成分。研究表明人參皂苷具有多種藥理學(xué)活性，可調(diào)節(jié)多種疾病的發(fā)生發(fā)展，如癌癥、高血壓及動(dòng)脈粥樣硬化等。然而，天然的人參皂苷吸收差，并且在消化中降解迅速。人參皂苷經(jīng)口服后大部分會(huì)在人小腸內(nèi)被代謝，另有一小部分人參皂苷會(huì)吸收進(jìn)入人肝臟內(nèi)進(jìn)行代謝，隨膽汁排出體外，只有極少量的人參皂苷在肝臟內(nèi)與體內(nèi)的脂肪酸酯化形成脂肪酸衍生物能夠較長(zhǎng)時(shí)間地留在體內(nèi)，進(jìn)而吸收進(jìn)入血液循環(huán)被人體利用產(chǎn)生藥理活性，可以說(shuō)人參皂苷在人體內(nèi)的生物利用率很低。
人參皂苷較低的口服生物利用率可能與其自身較高的極性和較差的膜滲透性有關(guān)。因此我們對(duì)低活性，生物利用率較差的人參皂苷的結(jié)構(gòu)進(jìn)行有目的的修飾，合成獲得膜滲透性較好的人參皂苷Rh2酯，制成脂質(zhì)體提高其在體內(nèi)的生物活性和生物利用率。
脂質(zhì)體是由磷脂等雙親性分子自組裝形成的具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊泡，每個(gè)囊泡含有一個(gè)或多個(gè)親水相和疏水相。由于磷脂類分子的雙親特性，脂質(zhì)體可以包封多種物質(zhì)，包括水溶性、脂溶性和兩親性的藥物或功能化合物，脂質(zhì)體在醫(yī)藥行業(yè)應(yīng)用廣泛，由于其具有靶向性、緩釋效果、低毒副作用等特點(diǎn)。脂質(zhì)體主要作為藥物和活性物質(zhì)的載體在醫(yī)藥行業(yè)使用，運(yùn)送抗癌藥物、激素類藥物等物質(zhì)。
中國(guó)專利文獻(xiàn)CN105603036A公開(kāi)了一種通過(guò)菌種培養(yǎng)、選取原料、生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化、壓濾、滅菌、干燥生產(chǎn)具有療效高、純度高、吸收好的人參皂苷Rh2的方法。
中國(guó)專利文獻(xiàn)CN104561219A公開(kāi)了一種通過(guò)米曲霉的糖基水解酶為催化劑選擇性催化水解人參皂苷Rg3，以制備在人參中含量稀少且具有更高藥理作用的人參皂苷Rh2的方法，該方法具有高選擇性、高轉(zhuǎn)化率、反應(yīng)條件溫和等優(yōu)點(diǎn)。
中國(guó)專利文獻(xiàn)CN105287611A公開(kāi)了一種人參皂苷Rh2在抑制Treg細(xì)胞中的應(yīng)用，證明了人參皂苷Rh2還能夠通過(guò)抑制Treg細(xì)胞,從而改善人體內(nèi)T細(xì)胞的平衡,進(jìn)一步加強(qiáng)自身免疫功能,從而達(dá)到抗腫瘤或改善免疫缺陷性疾病的效果。
通過(guò)上述公開(kāi)文獻(xiàn)可以看出，目前多數(shù)都在研究人參皂苷Rh2的生產(chǎn)方法及其在細(xì)胞中的應(yīng)用，然而人參皂苷Rh2本身生物利用度低。因此，本研究合成膜滲透性較好的人參皂苷Rh2酯，制成脂質(zhì)體提高其在體內(nèi)的生物活性和生物利用率。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)上述問(wèn)題中存在的不足，提供一種人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體的制備方法，為人參皂苷Rh2酯的進(jìn)一步研究及其應(yīng)用奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明所述的一種人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，以人參皂苷Rh2酯為活性成分，卵磷脂、膽固醇為膜材，采用乙醇注入法制備而成。
所述的人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，其特征在于按質(zhì)量百分比，人參皂苷Rh2酯的用量為0.2-0.7%；卵磷脂的用量為5-10%；膽固醇的用量為1-2%。
本發(fā)明所述的人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述的制備方法如下。
按上述比例稱取人參皂苷Rh2酯、卵磷脂、膽固醇，加入無(wú)水乙醇在50-55℃水浴至溶，邊攪拌邊注入0.01-0.02M的磷酸緩沖液中，45-50℃水化20-25min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，超聲25-35min，得到人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，充入N2密封，置于冰箱冷藏保存，備用。
本發(fā)明所述的卵磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、雙硬脂酰卵磷脂、磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺中的一種或兩種以上。
本發(fā)明所述的膽固醇選自糖皮質(zhì)激素、鹽皮質(zhì)激素、維生素D、膽汁酸中的一種或兩種以上。
本發(fā)明的人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體在制備注射劑或能接受的劑型的制劑中的應(yīng)用。
所述注射劑制備方法如下：稱取人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體100份，將脂質(zhì)體置于擠出器中通過(guò)0.1-0.2μm擠出膜擠出，制得脂質(zhì)體溶液，加入海藻糖10%，乙二胺四醋酸二鈉0.05%攪拌使其溶解，余量用注射用水定容，用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至6.6-7.0，再經(jīng)0.22μm的膜過(guò)濾，無(wú)菌灌裝在安培瓶中，在121℃蒸汽滅菌15分鐘，制得小容量注射劑。
本發(fā)明的一種人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，其包封率為75.3-85.7%。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于采用乙醇注入法生產(chǎn)人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，不僅制備工藝簡(jiǎn)單，安全性高，而且具有靶向性、緩釋性、生物利用度高的特征。
具體實(shí)施方式
為了便于本領(lǐng)域技術(shù)人員的理解，下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步的說(shuō)明，實(shí)施方式提及的內(nèi)容并非對(duì)本發(fā)明的限定。
實(shí)施例1。
稱取人參皂苷Rh2酯6mg、卵磷脂50mg、膽固醇10mg，加入無(wú)水乙醇10ml在50℃水浴至溶，邊攪拌邊注入15ml 0.02M的磷酸緩沖液水化介質(zhì)中，45℃水化20min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，超聲30min，功率100%，得到人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，充入N2密封，置于冰箱冷藏保存。
實(shí)施例2。
稱取人參皂苷Rh2酯9mg、卵磷脂75mg、膽固醇15mg，加入無(wú)水乙醇15ml在45℃水浴至溶，邊攪拌邊注入20ml 0.02M的磷酸緩沖液水化介質(zhì)中，50℃水化25min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，超聲25min，功率90%，得到人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，充入N2密封，置于冰箱冷藏保存。
實(shí)施例3。
稱取人參皂苷Rh2酯21mg、卵磷脂175mg、膽固醇35mg，加入無(wú)水乙醇10ml在50℃水浴至溶，邊攪拌邊注入15ml 0.02M的磷酸緩沖液水化介質(zhì)中，45℃水化20min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，超聲30min，功率100%，得到人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體，充入N2密封，置于冰箱冷藏保存。
實(shí)施例4。
稱取人參皂苷Rh2酯脂質(zhì)體100份，將脂質(zhì)體置于擠出器中通過(guò)0.2μm擠出膜擠出，制得脂質(zhì)體溶液，加入海藻糖10g，乙二胺四醋酸二鈉0.05g攪拌使其溶解，用注射用水定容至100ml，用鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH至6.8，再經(jīng)0.22μm的膜過(guò)濾，無(wú)菌灌裝在安培瓶中，在121℃蒸汽滅菌15分鐘，制得小容量注射劑。