本發(fā)明涉及中藥的炮制方法，具體涉及五味子的炮制方法。
背景技術：
：五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果實。習稱“北五味子”。秋季果實成熟時采摘，曬干或蒸后曬干，除去果梗和雜質。具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心的功效。用于治療久嗽虛喘，夢遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗盜汗，津傷口渴，內熱消渴，心悸失眠等癥狀。五味子為中醫(yī)臨床上的常用中藥，藥用價值高。五味子常見炮制品種有醋五味子、酒五味子、蜜五味子。傳統(tǒng)理論認為五味子“入補藥熟用,入嗽藥生用”,即五味子是“生熟異用”的。五味子現(xiàn)代常見的炮制方法為醋蒸、酒蒸、蜜炙,炮制程度一般要求根據(jù)蒸制的顏色(紫黑色或黑褐色)。在《本草從新》和《醫(yī)家四要》中提出：“酒蜜拌蒸，曬干，焙”。酒性行散，用以制五味子可防其斂邪，蜂蜜甘潤，用以炮制五味子可使其具有潤肺止咳作用。用酒蜜制五味子，能使五味子斂肺氣而無留邪之慮，溫肺氣兼有潤肺之功。因此，蜜酒合制通過黃酒和煉蜜兩種輔料合用，體現(xiàn)兩者共用的優(yōu)勢。但是，采用傳統(tǒng)的酒蜜制方法，炮制時間太長，質量也不能得到保證，需要改進。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種五味子的炮制方法。一種酒蜜五味子的炮制方法，包括如下步驟：(1)取五味子，加入酒蜜混合物，密閉悶潤；(2)在105℃～115℃下燉制1～2h后，放涼，干燥，即可。步驟(1)中，五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果實。步驟(1)中，酒蜜混合物中，酒與蜜的比例為1:1。步驟(1)中，酒蜜混合物的加入量為五味子重量的20～30％；優(yōu)選酒蜜混合物的加入量為五味子重量的20％。步驟(1)中，密閉悶潤的時間為20h。步驟(2)中，燉制的溫度是110℃。步驟(2)中，燉制的時間為2小時。步驟(2)中，干燥是50～70℃下干燥6～9h。優(yōu)選地，干燥是70℃下干燥6h。本發(fā)明還提供了前述方法制備得到的酒蜜五味子。綜上，本發(fā)明方法制備得到酒蜜五味子，黑潤度好，有效成分含量高，藥效優(yōu)且工藝步驟簡單，處理時間短，成本低，工業(yè)應用前景優(yōu)良。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。附圖說明圖1工藝1制備的五味子的外觀圖片圖2工藝2制備的五味子的外觀圖片圖3工藝3制備的五味子的外觀圖片圖4工藝4制備的五味子的外觀圖片圖5工藝5制備的五味子的外觀圖片圖6工藝6制備的五味子的外觀圖片圖7工藝7制備的五味子的外觀圖片圖8工藝8制備的五味子的外觀圖片圖9工藝9制備的五味子的外觀圖片圖10工藝10制備的五味子的外觀圖片具體實施方式實施例1本發(fā)明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量30％的酒蜜混合物(酒與蜜的比例為1:1)，密閉悶潤20小時，于110℃用流通蒸汽加熱燉制2小時，取出，放涼，70℃下干燥6h。實施例2本發(fā)明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量20％的酒蜜混合物(酒與蜜的比例為1:1)，密閉悶潤，于105℃用流通蒸汽加熱燉制1小時，取出，放涼，50℃下干燥9h。實施例3本發(fā)明酒蜜五味子的炮制方法取五味子，加五味子重量25％的酒蜜混合物(酒與蜜的比例為1:1)，密閉悶潤，于115℃用流通蒸汽加熱燉制1.5小時，取出，放涼，60℃下干燥8h。以下通過實驗例的方式來說明本發(fā)明的有益效果：實驗例1五味子炮制方法1.實驗材料1.1實驗儀器DSX-280B型手提式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠)；CG-1.0純蒸汽滅菌柜(張家港市神農藥機有限公司)；臥式圓形壓力蒸汽滅菌器(江陰濱江醫(yī)療設備有限公司)；PS-80超聲波清洗機(深圳市潔康洗凈電器有限公司)；JP-350A-8型高速多功能粉碎機(上海冰都電器有限公司)；RJ-TGL-16C型高速離心機(無錫瑞江分析儀器有限公司)；UPH-I-10T優(yōu)普超純水器(成都超純科技有限公司)；RE2000B旋轉蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；BS200S電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)；SHB-Ⅲ循環(huán)水真空泵(鞏義市予華儀器有限責任公司)；島津LC-20A系列高效液相色譜儀；YP30002電子天平(上海越平科學儀器有限公司)。1.2試劑試藥Fisher色譜級乙腈，水(UP水)，氨水等為分析純。五味子藥材購于成都荷花池中藥材專業(yè)市場，經成都中醫(yī)藥大學藥學院中藥標本中心盧先明教授鑒定，為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果實。習稱“北五味子”。同時按照《中國藥典》2015年版一部五味子項下進行全檢，符合相關規(guī)定。五味子醇甲對照品購買于成都普菲德生物技術有限公司(HPLC≥98.0％，批號：150130)。小試用黃酒(紹興雕花酒)，購于會稽山紹興酒股份有限公司，符合GB/T17946的規(guī)定；中試用黃酒，購于四川省儀隴銀明黃酒有限責任公司；蜂蜜(已煉制)，購于成都市若康蜂業(yè)有限公司，符合“GB14963-2011食品安全國家標準蜂蜜”的規(guī)定。止咳丸(昆明中藥廠有限公司，國藥準字Z53021162，批號：521335，有效期至2020年11月)。1.3實驗動物KM小鼠，SPF級，體重18～22g，雌雄各半，由成都達碩生物科技有限公司提供。質量合格證：SCXK(川)2013-24號。2.實驗場所小試工藝研究及動物試驗在成都中醫(yī)藥大學藥學院中藥炮制實驗室(國家中醫(yī)藥管理局科研三級實驗室)完成，中試(加壓燉制)工藝研究在成都信立邦生物制藥有限公司(2批)及成都合迅醫(yī)藥技術有限公司(3批)完成。3.方法與結果3.1五味子酒蜜潤制工藝研究稱取黃酒、煉蜜適當，分別配制成質量比1:1、2:1、1:2的混合液體，稱取凈五味子約20g，3份，置500ml燒杯中，分別加入上述3種混合液體約50g浸泡，密閉，置陰涼處。因為煉蜜比較黏稠，不宜滲透進入藥物內部，故潤制時間相對較長，一般在15～17小時以上。不同時間倒出多余的液體輔料，將五味子表面用濾紙擦干，精密稱重。結果見表1。表1五味子酒蜜潤制工藝測定結果注：在20小時后，五味子重量出現(xiàn)一定的波動，可能與溫度、表面覆蓋的輔料量有關，具體原因有待進一步考察。從表1可見，五味子酒蜜潤制時飽和率為18.8％～24.1％，煉蜜比例越多，浸潤越難，潤制的飽和時間約為20小時。3.2五味子加壓酒蜜燉工藝研究考查五味子加壓酒燉工藝的溫度、時間、輔料比例、輔料用量等因素，關于因素水平選擇與實驗安排分析如下：3.2.1因素水平的選擇選取燉制溫度、燉制時間、酒蜜比例、酒蜜用量作為篩選因素。在密閉的蒸制壓力容器內，燉制溫度與壓力直接相關，考慮到大生產時壓力容器的選擇，燉制溫度選擇為105～115℃。加壓燉制時間可比常壓燉制時間顯著縮短，設定為1～3小時。白酒和煉蜜的比例為2:1、1:1、1:2。設定酒蜜的用量為五味子重量的為20％～40％。此外，潤制時間不作為篩選因素，考慮到大生產可行性和藥物充分吸收潤透，結合前期進行的潤制工藝篩選參數(shù)，確定潤制時間為20小時。見表2。表2因素水平表3.2.2試驗安排表10次試驗安排見表3，每次投料100g。表3五味子加壓酒蜜燉試驗安排表3.2.3評價指標的確定選擇飲片外觀性狀、內在成分含量和對氨水刺激性咳嗽小鼠的保護作用3項綜合加權評分作為評價指標。3.2.3.1外觀性狀五味子的外觀性狀為：本品呈不規(guī)則的球形或扁球形，直徑5～8mm。表面紅色、紫紅色或暗紅色，皺縮，顯油潤；有的表面呈黑紅色或出現(xiàn)“白霜”。果肉柔軟，種子1～2，腎形，表面棕黃色，有光澤，種皮薄而脆。果肉氣微，味酸；種子破碎后，有香氣，味辛、微苦。五味子加壓燉制時，表面顏色變成黑褐色，可根據(jù)整體色澤的黑潤程度設計外觀性狀評分，整體加權評分滿分為10分。3.2.3.2內在成分的含量《中國藥典》2015年版規(guī)定了五味子含量限度控制，含五味子醇甲(C24H32O7)不得少于0.40％，整體加權評分滿分為30分。3.2.3.3對氨水刺激性咳嗽小鼠的保護作用考慮到中藥炮制加熱過程中，藥物的內在成分可能存在著含量下降或轉化的現(xiàn)象，而本品炮制的目的主要是用于增強斂肺潤肺止咳的功效，故在整體加權評分考慮更多的是為藥效學指標的評價，以對氨水刺激性咳嗽小鼠的保護作用為評價指標，整體加權評分滿分為60分。3.2.4試驗方法和結果3.2.4.1外觀性狀采用是五味子加壓燉制后(未干燥)的外觀性狀評價，可以直接評價不同參數(shù)下五味子加壓燉制后的基本情況，進行評分。詳見表4。表4五味子加壓燉制試驗樣品性狀評分注：以顏色最黑的2號試驗樣品定為滿分10分，其余為相對評分。3.2.4.2內在成分含量測定按照《中國藥典》2015年版第一部五味子項下含量測定進行。(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(65：35)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應不低于2000。(2)對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得。(3)供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約0.25g，精密稱定，置20ml量瓶中，加甲醇約18ml，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)20分鐘，取出，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，即得。(5)結果含量測定結果見表5。表5五味子加壓燉制試驗樣品含量測定及評分結果注：五味子醇甲含量評分以試驗2、試驗6的樣品含量最高定為30分。反映五味子以木質素類為主的內在成分含量控制指標，整體加權評分滿分為30分。以10次試驗樣品中，含量最高樣品為滿分，其他樣品為相對分值。3.2.4.3對氨水刺激性咳嗽小鼠的保護作用(1)氨水刺激性致咳嗽小鼠模型的原理小鼠吸入刺激性化學物質(如氨水等)的氣霧后，刺激呼吸道感受器，反射性地引起咳嗽。凡有止咳化痰功能，能抑制咳嗽中樞或降低呼吸道感受器敏感性的藥物，均有止咳作用。(2)給藥劑量計算《中國藥典》2015年版規(guī)定成人1日服用五味子為2～6g，最大為6g，成人體重按50kg計算。小鼠等效劑量為成人10倍，高劑量組為成人20倍，本實驗五味子給藥統(tǒng)一按高劑量給予。即0.12g生藥/kg×20＝2.4g生藥/kg,小鼠給藥體積按0.4ml/20g計算，需要0.12g生藥/ml的藥液。制備方法：取五味子飲片12g，第一次加水100ml，煎煮(電熱套加熱回流)1小時；第二次加水100ml，煎煮(電熱套加熱回流)1小時。200目濾布濾過，合并濾液，減壓濃縮到100ml，即得。陽性藥物止咳丸，按照成人1日最大劑量的等效劑量配制，即取6丸，研磨成非常細粉末，用純化水50ml溶解，配制成穩(wěn)定的混懸液(0.02g/ml)。(3)動物分組實驗一：取健康SPF級KM小鼠108只，稱重，按體重、性別隨機分為11組(按照上述分組方案)，每組10只。①模型對照組；②酒蜜燉五味子1號樣品組；③酒蜜燉五味子2號樣品組；④酒蜜燉五味子3號樣品組；⑤酒蜜燉五味子4號樣品組；⑥酒蜜燉五味子5號樣品組；⑦酒蜜燉五味子6號樣品組；⑧酒蜜燉五味子7號樣品組；⑨酒蜜燉五味子8號樣品組；⑩酒蜜燉五味子9號樣品組；止咳丸組。實驗二：取健康SPF級KM小鼠20只，稱重，按體重、性別隨機分為2組，每組10只。①模型對照組；②酒蜜燉五味子10號樣品組。(4)給藥方案和檢測實驗一：動物常規(guī)飼養(yǎng)3天后，其中第①組給予純化水，第②～⑩組給予相應的五味子藥液(0.1g生藥/ml)，第組給予止咳丸藥液(0.02g/ml)，各組給藥容量均為0.4ml/20g體重，連續(xù)灌胃7天。實驗二：動物常規(guī)飼養(yǎng)3天后，其中第①組給予純化水，第②組給予相應的五味子藥液(0.1g生藥/ml)，各組給藥容量均為0.4ml/20g體重，連續(xù)灌胃7天。將500ml的燒杯倒置在桌上，將小鼠放入。用移液槍吸取0.2ml濃氨水注入50mg棉球中，將棉球放入燒杯中，2分鐘后取出棉球。觀察小鼠：自棉球放入后，第一次出現(xiàn)咳嗽的時間；記錄棉球取出后2分鐘內小鼠的咳嗽次數(shù)。(5)統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)用表示，用SPSS20.0軟件統(tǒng)計，進行完全隨機設計資料的方差分析和多重比較的統(tǒng)計分析，滿足正態(tài)性和方差齊性采用Dunnett檢驗，否則采用TamhaneˊsT2或數(shù)據(jù)變換后檢驗。(6)試驗結果加壓酒蜜燉五味子試驗樣品對氨水刺激性咳嗽小鼠的影響，結果見表6。表6-1加壓酒蜜燉五味子試驗樣品對氨水刺激性咳嗽小鼠模型的影響注：(1)各給藥組與模型對照組對比，*P<0.05，**P<0.01。(2)括號中數(shù)值是各給藥組與模型對照組比較的變化率。從表6-1可見，酒蜜燉五味子1～9號樣品組，與模型對照組比較，其首次咳嗽時間(秒鐘)有延長的趨勢，P均>0.05，分別增加25.9％、8.7％、20.4％、20.1％、10.2％、22.1％、16.8％、23.2％、11.4％。酒蜜燉五味子1～9號樣品組，與模型對照組比較，2分鐘內咳嗽次數(shù)(次)，其中2號、4號樣品顯著性減少，P均<0.01，分別減少29.7％和30.9％；其中5號、6號、9號樣品顯著性減少，P均<0.05，分別減少25.7％、22.9％和27.3％；其中1號、3號、7號、8號樣品有減少的趨勢，P均>0.05，分別減少12.1％、11.2％、8.0％和15.7％。止咳丸組，與模型對照組比較，其首次咳嗽時間(秒鐘)有延長的趨勢，P>0.05，增加29.7％；2分鐘內咳嗽次數(shù)(次)，顯著性減少，P<0.01，減少31.7％。表6-2最佳工藝A2B2C2D1制備的酒蜜蒸五味子對氨水刺激性咳嗽小鼠模型的影響注：(1)給藥組與模型對照組對比，*P<0.05，**P<0.01。(2)括號中數(shù)值是給藥組與模型對照組比較的變化率。反映五味子止咳作用的指標，整體加權評分滿分為60分。以6-1和6-2次試驗樣品中，即酒蜜燉五味子10號樣品組2分鐘內咳嗽次數(shù)降低率最好的樣品為滿分，其他樣品為相對分值。結果見表7。表7加壓酒蜜燉五味子試驗樣品止咳作用評分試驗號2分鐘內咳嗽次數(shù)降低率(％)評分112.121.7229.753.4311.220.1430.955.5525.746.2622.941.178.014.4815.728.2927.349.1133.460注：以止咳作用最好的試驗4樣品，評分最高定為60分。3.2.4.4試驗總體評分將外觀性狀、內在成分含量、止咳作用三者的評分，進行綜合，得到試驗總體評分，結果見表8和表9。表8加壓酒蜜燉五味子試驗結果結果分析：在本發(fā)明工藝條件(燉制溫度為105～110℃，燉制時間為1～2h，酒蜜的比例為1:1，酒蜜的用量為20～30％)下，可以制備得到性質優(yōu)良的五味子；優(yōu)選地的工藝為：取凈五味子，加30％的酒蜜(1:1)輔料，密閉悶潤20小時，待液體輔料基本被吸凈，置加壓蒸制容器內，于110℃用流通蒸汽加熱燉制2小時，取出，放涼。而采用本發(fā)明工藝參數(shù)之外的條件，則難以制備得到性質優(yōu)良的五味子。3.3干燥工藝3.3.1方法、取凈五味子300g，按照加壓酒蜜燉五味子優(yōu)化工藝制備，樣品平均分成3份，置烘箱中，分別考察在50℃、60℃、70℃，干燥不同時間(1、2、3、4、5、6、7、8、9小時)的樣品情況，評價指標為水分含量及有效成分的含量。3.3.2結果結果見表9。表9加壓酒蜜燉五味子干燥工藝性狀評價結果取外觀性狀符合要求的干燥樣品，即50℃干燥9小時樣品(編號50-1、50-2)、60℃干燥7小時樣品(編號60-1、60-2)、70℃干燥6小時樣品(編號70-1、70-2)進行水分、含量測定研究，結果見表10。表10加壓酒蜜燉五味子干燥工藝水分、含量測定評價結果從表11可見，50℃干燥9小時樣品、60℃干燥7小時樣品、70℃干燥6小時樣品，3者在水分、五味子醇甲含量上無顯著的區(qū)別，從節(jié)約生產時間看，將加壓酒蜜燉五味子干燥工藝確定為70℃干燥6小時。3.4加壓酒蜜燉五味子中試工藝研究在成都信立邦生物制藥有限公司完成加壓酒蜜燉五味子中試2批，每批約15kg，燉制設備為CG-1.0純蒸汽滅菌柜(張家港市神農藥機有限公司)，于110℃用流通蒸汽加熱燉制2.5小時；干燥設備為多功能烘焙機，干燥參數(shù)為：鋪料厚度1～2cm，70℃干燥8小時。在成都合迅醫(yī)藥技術有限公司完成加壓酒蜜燉五味子中試3批，每批約15kg，燉制設備為臥式圓形壓力蒸汽滅菌器(江陰濱江醫(yī)療設備有限公司)，于110℃用流通蒸汽加熱燉制2小時；干燥設備為多功能烘焙機，干燥參數(shù)為：鋪料厚度1～2cm，70℃干燥8小時。結果見表11。表11加壓酒蜜燉五味子中試工藝研究從表11可見，完成的11批加壓酒蜜燉五味子中試表明，本工藝合理、穩(wěn)定可行。實驗結果說明，采用本發(fā)明炮制工藝可以制備得到外觀優(yōu)良、有效成分含量高、降糖功效好的五味子，而采用本發(fā)明范圍以外的工藝則無法制備得到性質優(yōu)良的五味子。綜上，本發(fā)明方法可以制備得到性質優(yōu)良的五味子，且工藝步驟簡單，處理時間短，成本低，工業(yè)應用前景優(yōu)良。當前第1頁1 2 3