潤膚劑組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及潤膚劑組合物，特別是用于局部用途的潤膚劑組合物，其包含水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士林和液體石蠟的組合作為活性成分。本發(fā)明還涉及所述潤膚劑組合物在制備用于治療與如特應性皮炎、魚鱗病和牛皮癬的某些皮膚病相關的干燥皮膚癥狀的藥物中的用途；在制備用于治療小淺表燒傷的藥物中的用途；以及在制備用于預防和/或治療和/或減少在經(jīng)受特應性皮炎的患者中所觀察到的濕疹發(fā)作的頻率和強度的藥物中的用途。
【專利說明】[0001] 本申請是申請?zhí)枮?00980117470· 3,申請日為2009年5月18日，發(fā)明名稱為"潤 膚劑組合物"的中國專利申請的分案申請。 潤膚劑組合物

【技術領域】
[0002] 本發(fā)明涉及與受感染皮膚的屏障作用相關的病理和癥狀的治療領域。

【背景技術】
[0003] 表皮為不斷進行更新的外胚層源的復層上皮。
[0004] 其保護身體不受脫水、機械應力和某些致病攻擊的影響。
[0005] 其由數(shù)種細胞類型組成：90%以上的角質化細胞，以及朗氏細胞、默克爾細胞和黑 素細胞。
[0006]不同形態(tài)性質和細胞組成的數(shù)個層由內(nèi)向外可分為：基底層（其為細胞層，它的 角質化細胞具有非常強的增生能力，這確保了表皮的自我更新），接著為上基底層（顆粒 層、表皮生發(fā)層），最后為角質層（SC)。
[0007] 皮膚的基本功能之一是通過一方面防止來自環(huán)境的真菌、細菌和變應原滲入表 皮，另一方面防止脫水而確保身體與外部介質間的屏障。
[0008] 屏障作用的質量在人體的活體內(nèi)通過測量不顯性水丟失和水合率進行評價，以及 在老鼠內(nèi)通過測量由于脫水導致的胚胎死亡、對染料的皮膚滲透性或體重的下降而進行評 價。
[0009] 細胞外脂類粘固劑的完整性，以及角質層的所有細胞單元，和角質化細胞增生與 分化之間的平衡對于維持表皮的功能性屏障作用是必須的。
[0010] pH梯度調節(jié)各種酶的活性，因此有助于屏障的平衡。
[0011] 通過調節(jié)顆粒層中片狀體的分泌物，鈣離子濃度影響角質層的細胞外粘固劑的 組成并因而影響表皮屏障的平衡（Lee等人的Calcium and potassium are important regulators of barrier homeostasis in murine epidermis, J.Clin Invest,89, 530-538,1992)。
[0012] 水分梯度（其由在表皮的可見層中的70%變化至在SC的底層中的30%變化 至在表皮的最外細胞層中的15% ) (Warner等人，Electron probe analysis of human skin:determination of the water concentration profile,J.Invest Dermatol,90, 218-224,1988)的存在表明一些水保留在顆粒層與角質層的接合處。
[0013] 在角質層中的水的作用之一為使得酶水解反應能夠發(fā)生，所述酶水解反應對于皮 膚的彈性和正常表皮脫落是必須的。如果在SC中存在的水的量降至臨界閾值以下，酶反應 被中斷，從而導致角化細胞的粘附以及細胞在皮膚的表面上的積聚。這產(chǎn)生可見的千燥外 觀，且皮膚發(fā)癢、脫皮和剝落。
[0014] 皮膚水合在于兩種現(xiàn)象：自循環(huán)血液通過經(jīng)表皮流動提供水以及保留表皮水（該 表皮水發(fā)揮皮膚屏障作用）。然而，針對水分流失的屏障不是絕對的。在外部介質與內(nèi)部介 質之間通過角質層的水分交換的正常移動稱為TEWL(經(jīng)表皮水分流失），并構成不顯性水 丟失的一部分。
[0015] 在人群中最普遍的大多數(shù)皮膚病變中，皮膚屏障作用受到影響，并經(jīng)常伴隨著炎 性成分（牛皮癬、特應性皮炎、魚鱗病、皮膚干燥等）。皮膚屏障作用也在許多與時間（皮膚 老化）相關或者與環(huán)境攻擊（紫外線、濕度水平、污染、灼傷）相關的生理癥狀中受到影響。
[0016] 屏障作用的破壞（慢性或急性的）使得身體對外部攻擊和脫水更敏感。其與剝落 紊亂以及增殖相關（Jackson 等人，Pathobiology of the stratum corneum, West J. Med, 158,279-285,1993)。
[0017] 專利申請FR 2S47467涉及氧固醇7 a -羥化酶的至少一種活性調節(jié)劑在制備用于 預防和/或治療影響皮膚屏障的正常功能的皮膚和/或粘膜的病癥的化妝品組合物中的用 途。
[0018] 專利申請FR 2 831 443涉及銀杏或齊墩果樹的至少一種提取物在制備用于改進 皮膚的屏障作用的組合物中的用途。
[0019] 專利申請FR 2 905 857涉及包含角豆樹果肉的提取物的組合物用于保濕和/或 保護皮膚免于干燥的用途。
[0020] 需要治療與受影響的皮膚的屏障作用相關的病理和癥狀。
[0021] 以令人驚奇且出乎意料的方式，發(fā)明人注意到水包油或油包水乳液形式的丙三 醇、凡士林和液體石蠟的組合可治療皮膚干燥癥狀。
[0022] 發(fā)明人證明該組合將皮膚屏障恢復至保護和功能狀態(tài)。發(fā)明人通過使用誘導性皮 膚脫水的活體外皮膚模型評價了該組合的水合活性以及由此帶來的皮膚屏障作用的改進。 而且，發(fā)明人通過定量PCR和免疫組織化學觀察到在表皮屏障作用的體內(nèi)平衡中潛在涉及 的分子表皮標記的表達。
[0023] 發(fā)明人還通過原位酶譜法追蹤了絲氨酸蛋白酶的活性并使用熒光探針追蹤了皮 膚屏障的功能性。結果表明水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士林和液體石蠟的組合 恢復了絲氨酸蛋白酶的活性并抑制了應力誘發(fā)的炎癥。
[0024] 發(fā)明人還證明在該組合中選擇特定的凡士林特別有利于獲得以上結果。作為閉塞 劑和潤膚劑的凡士林在組合物中特別重要。實際上，通過在皮膚上形成保護性薄膜，其有助 于補償受影響的屏障作用的不足。在皮膚上形成的薄膜的質量非常強烈地取決于在制備中 使用的凡士林的流變學性能。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0025] 因此，本發(fā)明的一個目的為用于局部用途的組合物，該組合物包含水包油或油包 水乳液形式的丙三醇、凡士林和液體石蠟的組合作為活性成分。
[0026] 在本發(fā)明的上下文中，"活性組合"是指水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士 林和液體石蠟的組合。
[0027] 有利地，丙三醇、凡士林和液體石蠟具有根據(jù)"歐洲藥典"（第6版）所記載和規(guī)定 的標準。
[0028] 有利地，活性組合的凡士林具有35°C至70°C，優(yōu)選51°C至57°C，且在特別優(yōu)選的 方式中為大約54?的滴點。滴點根據(jù)在"歐洲藥典"（第6版）中所述的2. 2. 17方法測量。
[0029] 有利地，活性組合的凡士林具有1751/lOmm至1951/lOmra，優(yōu)選大約1851/lOmm的 稠度（在25°C下錐體針入度）。
[0030] 有利地，活性組合的凡士林具有在100°C下4cSt至5cSt，優(yōu)選在100°C下大約 4.8cSt的粘度。
[0031] 有利地，活性組合的凡士林的500MHz碳-13 (13C) NMR波譜譜圖包含在24. 55ppm處 的峰，所述峰的面積相對于1 %四甲基硅烷（TMS)對照樣為4至8。
[0032] 在本發(fā)明的組合物中，活性組合的存在比例以組合物的總重量計為10重量％至 50重量％，優(yōu)選20重量％至30重量％ ;丙三醇濃度以組合物的總重量計為5重量％至30 重量％，優(yōu)選10重量％至20重量％，在特別優(yōu)選的方式中為大約15重量％;凡士林濃度以 組合物的總重量計為3重量％至20重量％，優(yōu)選5重量％至10重量％，在特別優(yōu)選的方式 中為大約8重量％ ;且液體石蠟濃度以組合物的總重量計為〇. 5重量％至5重量％，優(yōu)選1 重量％至3重量％，在特別優(yōu)選的方式中為大約2重量％。
[0033] 在水相中，水以組合物的總重量計為30重量％至80重量％。
[0034] 有利地，本發(fā)明的組合物由以組合物的總重量計大約15重量％的丙三醇、大約8 重量％的凡士林和大約2重量％的液體石錯組成。
[0035] 本發(fā)明的皮膚病學組合物進一步包含常規(guī)的皮膚病學可相容賦形劑。
[0036] 本發(fā)明的皮膚病學組合物可以油包水（W/0)或水包油（0/W)乳液的形式，多乳液 形式，如水包油包水（W/0/W)形式或油包水包油（0/W/0)乳液形式，或者以水分散體或脂分 散體、凝膠或氣溶膠形式制得。
[0037] 皮膚病學可相容的賦形劑可以為本領域技術人員公知的任何賦形劑，從而獲得乳 膏、洗劑、凝膠、軟膏、乳液、微乳劑、噴霧劑等形式的用于局部施用的組合物。 t〇〇38] 本發(fā)明的組合物可特別地包含添加劑和制劑助劑，如乳化劑、增稠劑、膠凝劑、水 固定劑、鋪展劑、穩(wěn)定劑、染料、香料和防腐劑。
[0039] 合適的乳化劑包括硬脂酸、三乙醇胺和PEG-40-硬脂酸酯。
[0040] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計大約5重量％的乳化劑。
[0041] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計1重量％至5重量％，優(yōu)選大約 3重量％的硬脂酸。
[0042] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計0重量％至2重量!^，優(yōu)選大約 0.5重量％的三乙醇胺。 '
[0043] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計0重量％至2重量％，優(yōu)選大約 〇· 5重量％的PEG-40-硬脂酸酯。
[0044] 合適的增稠劑包括單硬脂酸甘油酯和PEG600。
[0045] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物具有以組合物總重量計大約5重量％的增稠劑。
[0046] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計2重量％至10重量％，優(yōu)選大 約5重量％的單硬脂酸甘油酯。
[0047] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計2重量％至10重量％，優(yōu)選大 約 5 重量 ％&PEG600。
[0048] 合適的防腐劑包括對羥苯甲酸丙酯和氯甲酚。
[0049] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物具有以組合物總重量計大約0· 1重量％的防腐劑。
[0050] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計〇. 05重量％至1重量％，優(yōu)選 大約〇· 1重量％的對輕苯甲酸丙酯。
[0051] 合適的鋪展劑包括二甲聚硅氧烷和聚二甲基環(huán)硅氧烷。
[0052] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物具有以組合物總重量計大約2重量％的鋪展劑。
[0053] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計〇. 2重量％至2重量％，優(yōu)選大 約0. 5重量％的二甲聚硅氧烷。
[0054] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計1重量％至3重量％，優(yōu)選大約 2. 5重量％的聚二甲基環(huán)硅氧烷。
[0055] 合適的水固定劑包括聚乙二醇，優(yōu)選聚乙二醇600。
[0056] 優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物具有以組合物總重量計大約8重量％的水固定劑。
[0057] 有利地，本發(fā)明的組合物具有以組合物的總重量計2重量％至10重量％，優(yōu)選大 約5重量％的聚乙二醇。
[0058] 用于乳液的水相的水可以為蒸餾水或者具有美膚性質的熱水。
[0059] 有利地，本發(fā)明的組合物由如下組成：
[0060] -大約15%的丙三醇，
[0061] -大約8 %的凡士林，
[0062] -大約2%的液體石蠟，以及作為賦形劑的如下組分：
[0063] -大約1 %至5%的硬脂酸，
[0064] -大約2%至10%的單硬脂酸甘油酯，
[0065] -大約1%至3%的聚二甲基環(huán)硅氧烷，
[0066] -大約0· 2%至2%的二甲聚硅氧烷，
[0067] -大約2 %至10 %的聚乙二醇600，
[0068] -大約0 %至2 %的三乙醇胺，
[0069] -大約0.05%至1 %的對羥苯甲酸丙酯，
[0070] -水直至 100%。
[0071]本發(fā)明的再一目的為本發(fā)明的組合物在制備用于治療與如特應性皮炎、魚鱗病和 牛皮癬的某些皮膚病相關的干燥皮膚癥狀的藥物中的用途。
[0072] 本發(fā)明的另一目的為本發(fā)明的組合物在制備用于治療小淺表燒傷的藥物中的用 途。
[0073]本發(fā)明的又一個目的為本發(fā)明的組合物在制備用于預防和/或治療和/或減少在 經(jīng)受特應性皮炎的患者中所觀察到的濕疹發(fā)作的頻率和強度的藥物中的用途。
[0074] 通過以下實施例闡明本發(fā)明。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0075] 圖1為Syntadex A凡士林（Synth6al)以及組合物A的5克樣品的500MHz 碳-13NMR波譜。

【具體實施方式】
[0076] 實施例
[0077] 實施例1 :制劑
[0078] 組合物A
[0079] -15克的丙三醇，
[0080] _8克的凡士林，
[0081] _2克的液體石蠟，
[0082] -0· 5克的三乙醇胺，
[0083] -以及作為賦形劑的如下組分：硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、聚二甲基環(huán)硅氧烷、二 甲聚硅氧烷、聚乙二醇（PEG)600、對羥苯甲酸丙酯，
[0084] -水直至100克。
[0085] 組合物A'
[0086] -15克的丙三醇，
[0087] _8克的凡士林，
[0088] _2克的液體石蠟，
[0089] -1. 5克的硬脂酸，
[0090] -5克的單硬脂酸甘油酯，
[0091] -1.5克的聚二甲基環(huán)硅氧烷，
[0092] -0· 5克的二甲聚硅氧烷，
[0093] -5克的聚乙二醇600，
[0094] -0· 15克的三乙醇胺，
[0095] -0· 1克的對羥苯甲酸丙酯，
[0096] -水直至100克。
[0097] 組合物B
[0098] -15克的丙三醇，
[0099] -8克的凡士林，
[0100] -2克的液體石蠟，
[0101] -0· 5克的PEG-40-硬脂酸酯，
[0102] -以及作為賦形劑的如下組分：硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、聚二甲基環(huán)硅氧烷、二 甲聚硅氧烷、聚乙二醇600、氯甲酚，
[0103] -水直至100克。
[0104] 組合物B'
[0105] -15克的丙三醇，
[0106] _8克的凡士林，
[0107] _2克的液體石蠟，
[0108] _3克的硬脂酸，
[0109] -5克的單硬脂酸甘油酯，
[0110] _2克的聚二甲基環(huán)硅氧烷，
[0111] -〇. 5克的二甲聚硅氧烷，
[0112] -0.1克的三乙醇胺，
[0113] -3克的聚乙二醇600，
[0114] -0· 5克的PEG-40-硬脂酸酯，
[0115] -〇· 075克的氯甲酚，
[0116]-水直至100克。
[0117]實施例2 :對誘導性皮膚脫水的調節(jié)的分析
[0118]在此，我們通過使用誘導性皮膚脫水的活體外皮膚模型評價了組合物A的水合活 性以及由此帶來的皮膚屏障作用的改進。
[0119]我們通過定量PCR和免疫組織化學觀察了微分分子表皮標記的表達。
[0120]我們還通過原位酶譜法追蹤了絲氨酸蛋白酶的活性并通過西式印跡法追蹤了角 膜橋粒蛋白的降解。
[0121]皮膚屏障的功能通過使用熒光探針進行分析。
[0122] 材料和方法
[0123] 1、組織模型
[0124] 1、皮膚移植物的制備
[0125] ^實驗室從整形外科（乳腺減少）的操作廢料中回收皮膚樣品。這些樣品的使用落 入法國高等教育和研究部規(guī)定的"Pierre Fabre組的研究方案所需的人體元件的保存和 制備活動的聲明"（"the declaration of an activity for preserving and preparing elements of the human body for the needs of a research program of the Pierre Fabre group"）的范圍。
[0126] 將這些樣品在PBS浴中洗滌10次，然后用沖壓機切出2厘米直徑的圓盤。將皮膚 移植物在培養(yǎng)皿中的網(wǎng)格上展開，并將1厘米直徑的環(huán)嵌入皮膚以界定治療區(qū)域。
[0127] 2、模型的動力學
[0128]對于誘導性脫水模型，皮膚在無蓋的盤中在細胞培養(yǎng)罩下干燥2小時，然后將皮 膚置于保溫箱中，在有或無活性組合的情況下局部治療2小時。在封閉的培養(yǎng)皿中，脫水應 激的陰性對照樣進行相同的動力學。
[0129] 3、用于分析的樣品
[0130] 在治療之后，取樣2個直徑為6毫米的活組織用于RNA表達分析，將一個直徑為4 毫米的活組織封裝在Tissue %k?樹脂（Sakura Finetek)塊中用于組織學。為了分析蛋 白質，將皮膚暴露于60°C水浴中的熱沖擊5分鐘，然后暴露于4°C浴的熱沖擊2分鐘，從而 從真皮分離表皮。
[0131] 在進行分析之前，活組織和表皮在液氮中冷凍，并在-80°C下存儲。
[0132] II、通過定量PCR分析轉錄組
[0133] 皮膚活組織在用液氮預冷卻的研缽中破碎，RNA根據(jù)制造商的推薦使用越廣 試劑盒（QIAGEN)提取。然后使用 Bioanalyzer 2100? (Agilent Technologies)在 RNA6000Nano 片上測定RNA。使用寡dT引物，通過采用Access RT-PCR Core Rgttgeirts?試劑盒（Promega)進行的酶反向轉錄反應自1微克RNA獲取cDNA。根據(jù) 40個循環(huán)的方案（其包括在95°C下變性（I5秒）和在60°C下伸展（1分鐘）），通過在配備 PCR Super Green Mix 試劑盒（Biorad)的 iCycler (Biorad)熒光熱循 環(huán)器上的定量PCR分析基因表達水平。使用iCycler軟件，一個接一個循環(huán)地觀察到正比 于熒光發(fā)射（設置的S￥KR? Green)的PCR產(chǎn)品的積聚。
[0134] iCycler版本3. 1分析軟件傳送CT (循環(huán)閾值）的原始值，自該循環(huán)起cDNA放大 開始。使用程序Genorm版本3. 4平行分析數(shù)個參照基因的表達，這使得有可能從各樣品中 選擇最穩(wěn)定的參照基因。然后使用該基因作為參照，通過計算ACT二（C T目標基因）_(CT對 照基因）來歸一化結果。
[0135] 然后計算相比于對應的對照條件的每個治療的誘導因子（IF)。IF = 2_δλ<：τ，其中 Δ ACT =(治療ACT)-(對照ACT)。對來自5個不同個體的五個試驗評價mRNA表達兩 次。當相比于對照樣的誘導因子為2以上時，認為基因表達受到誘導，當其為〇. 5以下時， 認為表達被抑制。通過用下式計算的抑制百分數(shù)來評價活性成分對在模型中引起的應激反 應的影響：
[0136] (應激反應抑制％ ) = 100*(((應激的IF)_(無應激的對照IF))_((治療的 IF)-(無應激的對照IF)))八（應激的IF)-(無應激的對照IF))。
[0137] 與研究模型相比，"無應激的對照"條件對應于無干燥的對照；"應激的"條件對應 于干燥2小時然后在對照條件下（即無局部治療）度過另外2小時的皮膚活組織；最后， "治療的"條件為進行2小時干燥接著用潤膚劑局部治療2小時的皮膚。
[0138] III、通過西式印跡法分析蛋白表達
[0139] 治療的表皮在用液氮冷卻的研缽中破碎，并在RIPA溶解緩沖液（5〇mM Tris-HCl pH8 ;150mM NaCl ;1 % Triton X-100 ;1 % Na+-去氧膽酸鹽；0· 1 % SDS ;5mM EDTA ;100mM DTT;蛋白酶抑制劑的混合物（P8340,SIGMA))中提取蛋白質。
[0140] 然后通過DC-DC蛋白質測定（Biorad)法測定蛋白質，并通過西式印跡法分析蛋白 質。對于每個條件，將25微克至40微克的總蛋白質沉積在7. 5%聚丙烯酰胺Tris-Glycine 凝膠上。使用Mini Protean II系統(tǒng)（Biorad)通過電泳法分離蛋白質混合物，并將蛋白 質轉移至PVDF膜（Hybond-P，Amersham)。通過特異性抗體和ECL+試劑盒（Amersham)顯 現(xiàn)目標蛋白質。在相比于β-肌動蛋白（參照蛋白質）歸一化之后，使用Image Master TotalLab版本1. 11軟件（Amersham)計算蛋白質的量和降解形式的比例。
[0141] IV、組織學技術
[0142] 采用cryotome (Leica CM3050S)將皮膚活組織切成厚度為5微米的切塊，并將其 沉積在觀察載玻片（Starfrost? )上。
[0143] 1、免疫組織化學
[0144] 在通過免疫化學標記進行分析之前，將冷凍活組織在20°C下的丙酮中固定10分 鐘，然后在PBS中再水合。在固定和再水合之后，皮膚切塊用3%的BSA溶液進行飽和，并用 針對目標蛋白質的初級抗體培養(yǎng)1小時。接著，皮膚切塊用與Alexa-488或Alexa-555熒 光染料結合的第二抗體培養(yǎng)1小時，最后固定在包含DAPI的Mowiol中以染色細胞核。
[0145] 2、原位酶譜法
[0146] 在-20°C下的丙酮中固定1〇分鐘之后，切塊在洗滌液（在水中的1% Tween20)中 沖洗，并用包含與熒光團結合的目標酶的特異性底物（二級的）的溶液在37?下培養(yǎng)2小 時。當酶為活性時，熒光團被分開，釋放可在顯微鏡下觀察到的熒光信號。然后在落射熒光 顯微鏡（Nikon Eclipse50i)下或者在Zeiss AxiovertlOO反相同焦點顯微鏡下觀察標記 的載玻片。
[0147] 3、熒光探針
[0148] 在脫水治療之后，使用在HBSS緩沖液中的ImM莖光黃碳酰肼鋰鹽熒光探針 (Invitrogen)，在37°C下在保溫箱中培養(yǎng)皮膚移植物另外1小時。然后在P1BSS浴中沖 洗皮膚1分鐘，接著取樣直徑為4毫米的活組織，將其封裝在Tissue海k?樹脂（Sakura Finetek)中（Matsuki等人，1998)。然后切開皮膚，細胞核用DAPI染色，如上所述在熒光顯 微鏡下在450納米波長下觀察載玻片。
[0149] 結果
[0150] I、由誘導干燥導致的屏障作用破裂模型
[0151 ] 1、通過熒光探針測量皮膚滲透性
[0152] 第一分析為研究皮膚屏障作用中的基本功能參數(shù)：表皮上層的滲透性。在干燥實 驗之后使用熒光探針（莖光黃）的皮膚培養(yǎng)使得有可能表征皮膚滲透性的轉變。在對照條 件下，標記非常弱和淺；探針較少穿透角質層，并在沖洗過程中被消除。在千燥2小時之后， 標記可在角質層的較深層中觀察到。千燥使得皮膚更具有滲透性，其屏障作用被破壞。在 干燥兩小時后采用組合物A的局部治療恢復了 SC相對于探針的不可滲透性；標記再次變得 弱和淺，如同在對照條件下。由此可以得出結論：水合治療對于干燥皮膚以及對于皮膚屏障 作用具有修復效果，這可在組織模型上觀察到。
[0153] 2、對轉錄組和蛋白質組的調節(jié)的影響
[0154] 在干燥模型的不同應激或治療條件下，通過定量PCR測量在表皮屏障作用的體內(nèi) 平衡中潛在涉及的不同基因的表達。免疫組織化學的分析顯示了某些蛋白質表達的重組 (就定位而言，例如牢固結合）。角膜橋粒蛋白的降解通過西式印跡法分析。
[0155]將使用這些不同方法研究的目標根據(jù)其生理學作用進行歸類（參見表1)。該研究 的目的是觀察可見的應激反應以及由于組合物A的局部施用帶來的應激效果的修正。
[0156] 進行的工作還表明某些目標的不同調節(jié)水平。因此需注意的是對表皮脫落酶不是 在轉錄水平上進行調節(jié)，而是更特別地在它們的活性水平上進行調節(jié)（參見結果3)。
[0157] 表1 :在千燥模型中研究的目標和藥理反應的匯總
[0158] Y =是，目標在模型中反應；
[0159] N =否，目標在模型中不反應。
[0160]

【權利要求】
I. 一種用于局部用途的組合物，其包含水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士林和 液體石蠟的組合作為活性成分。 2_根據(jù)權利要求1所述的組合物，其中所述凡士林的500MHz碳-13NMR波譜譜圖包含 在24. 55ppm處的峰，所述峰的面積相對于1 %四甲基硅烷（TMS)對照樣為4至8。
3. 根據(jù)權利要求1或2所述的組合物,其中所述凡士林具有51?至57°C，特別是54°C 的滴點。
4. 根據(jù)前述權利要求任意項所述的組合物，其中所述凡士林具有1751/lOmm至 1951/lOmm的稠度（在25°C下錐體針入度）。
5. 根據(jù)權利要求4所述的組合物，其中所述凡士林具有大約1851/lOmm的稠度（在 25°C下錐體針入度）。
6. 根據(jù)前述權利要求任意項所述的組合物，其中所述凡士林在100°C下具有4cSt至 5cSt的粘度。
7. 根據(jù)權利要求6所述的組合物，其中所述凡士林在l〇〇°C下具有大約4. 8cSt的粘 度。
8. 根據(jù)前述權利要求任意項所述的組合物，其包含大約15%的丙三醇、大約8%的凡 士林和大約2%的液體石蠟。
9. 根據(jù)前述權利要求任意項所述的組合物，其包含選自硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、 聚二甲基環(huán)硅氧烷、二甲聚硅氧烷、聚乙二醇600、三乙醇胺、對羥苯甲酸丙酯、氯甲酚、 PEG-40-硬脂酸酯、蒸饋水的一種或多種賦形劑。
10. 如前述權利要求任意項所述的組合物在制備用于治療如特應性皮炎、魚鱗病和牛 皮癬的某些皮膚病的皮膚千燥癥狀的藥物中的用途。 II. 如權利要求1至9中任意項所述的組合物在制備用于治療小淺表燒傷的藥物中的 用途。 I2·如權利要求1至9中任意項所述的組合物在制備用于預防和/或治療和/或減少 在經(jīng)受特應性皮炎的患者中所觀察到的濕疹發(fā)作的頻率和強度的藥物中的用途。 I3·滴點為51°C至57°C的凡士林在制備用于局部用途的組合物中的用途，所述組合物 包含水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士林和液體石蠟的組合作為活性成分。
14.凡士林在制備用于局部用途的組合物中的用途，所述凡士林的5〇〇MHz碳-13麗尺波 譜譜圖包含在24· 55ppm處的峰，所述峰的面積相對于1 %四甲基硅院（TMS)對照樣為4至 8,所述組合物包含水包油或油包水乳液形式的丙三醇、凡士林和液體石錯的組合作為活性 成分。
【文檔編號】A61P17/00GK104189005SQ201410366515
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2009年5月18日 優(yōu)先權日:2008年5月16日
【發(fā)明者】P·法夫雷, C·普日貝爾斯基, J-F·科爾多利安尼, M·科佩茨 申請人:皮埃爾·法布爾皮膚化妝品公司