一種含有檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種含有檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物，該藥物對于潰瘍性結(jié)腸炎具有治療效果，通過實(shí)驗(yàn)證明檸檬苦素在治療潰瘍性結(jié)腸炎方面有顯著的療效，劑型為片劑、膠囊、糖漿、口服液、注射液等，本發(fā)明采用檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎具有無任何毒性、副作用少、療效顯著、無禁忌癥及不良反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，其有效率可以達(dá)到97.5%，可以長期服用，并公開了制備方法和用途。
【專利說明】一種含有檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種含有檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,簡稱UC)是以腹灣、粘液膿血便、腹痛、里急后重等為主要癥狀，以結(jié)腸粘膜慢性炎癥和潰瘍形成為病理特點(diǎn)的一種消化道疾病。該病在歐美發(fā)達(dá)地區(qū)發(fā)病率較高，約為10萬分之18，而亞洲地區(qū)，尤其是日本在70年代以后隨著經(jīng)濟(jì)的復(fù)蘇，其發(fā)病率迅速增長，60-70年代曾創(chuàng)下發(fā)病率增加15倍以上的歷史。在我國，近年來由于生活水平的不斷提高，飲食結(jié)構(gòu)、生活習(xí)慣的改變，加之檢查診斷技術(shù)的提高，發(fā)病率亦呈逐年上升趨勢。由于本病治愈難度大，且又常易復(fù)發(fā)，并與結(jié)腸癌的發(fā)病存在一定的關(guān)系，因此被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。
[0003]目前尚無特效治療，常用的西藥有柳氮磺胺吡啶或其有效成份5-氨基水楊酸，腎上腺皮質(zhì)激素及免疫抑制劑(硫唑嘌吟、6-巰基嘌吟、甲氨喋吟等)，甲硝唑等。近年來不少學(xué)者采用5-氨基水楊酸肛栓或局部藥物灌腸，由于局部藥物濃度較高，并維持時(shí)間較久，使療效明顯提高，而全身不良反應(yīng)降低，具有作用直接、療效迅速等優(yōu)勢，被國內(nèi)臨床治療UC廣泛采用。
[0004]檸檬苦素(Limonin，LM)最早發(fā)現(xiàn)于1989年并在日本專利一號372132文獻(xiàn)中公開。檸檬苦素具有抗腫瘤和抗癌作用，同時(shí)還具有鎮(zhèn)痛和消炎等作用。對此，中國專利001306227公開的“一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝”和中國專利001062859公開的“從蕓香科果實(shí)中提取檸檬苦素的方法”中均有說明。但是，到目前為止，還未見應(yīng)用檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]發(fā)明目的:提供一種含有檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006]技術(shù)方案:
[0007]檸檬苦素在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎藥物中的應(yīng)用。
[0008]檸檬苦素作為唯一原料藥在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎藥物中的應(yīng)用。
[0009]上述應(yīng)用中所述藥物的劑型為片劑、膠囊、糖漿、口服液、注射液。
[0010]上述應(yīng)用中所述藥物的劑型中含有輔料，輔料為糊精、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、微晶纖維素、甘露糖、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、生理鹽水和甜菊苷的一種或幾種。
[0011]上述應(yīng)用中片劑是由檸檬苦素、乳糖、淀粉、低取代輕丙基纖維素、淀粉漿所組成，各成份的重量配比為:[0012]朽1檬苦素5~50份
[0013]乳糖20~45份
[0014]淀粉50~65份
[0015]低取代經(jīng)丙基纖維素3~6份
[0016]5%的淀粉漿5~20份。
[0017]制備方法:按上述重量配比稱取檸檬苦素、乳糖、淀粉和低取代輕丙基纖維素，充分混勻，加淀粉漿(5%)適量制成適宜軟材，過60目篩制粒，60~70°C干燥，40目篩整粒，混合均勻，壓片，即得片劑成品。
[0018]上述應(yīng)用中膠囊劑是由檸檬苦素、乳糖、淀粉、低取代輕丙基纖維素、淀粉漿所組成，各成份的重量配比為:
[0019]檸檬苦素30~100份
[0020]乳糖2O~45份
[0021]淀粉50~65份
[0022]低取代經(jīng)丙基纖維素3~6份
[0023]5%的淀粉漿5~20份。
[0024]制備方法:按上述重量配比稱取檸檬苦素、乳糖、淀粉和低取代輕丙基纖維素，充分混勻，加淀粉漿(5%)適量制成適宜軟材，過60目篩制粒，60~70°C干燥，40目篩整粒，混合均勻，套膠囊即得成品。
[0025]上述應(yīng)用中糖漿劑是由檸檬苦素、蒸餾水和單糖漿所組成，各成份的重量配比為:
[0026]朽1檬苦素5~50份
[0027]蒸餾水180~200份
[0028]單糖漿750~850份。
[0029]制備方法:按上述重量配比稱取檸檬苦素，溶于蒸餾水，加單糖漿即得成品。
[0030]上述應(yīng)用中口服液是由檸檬苦素、蔗糖、蒸餾水所組成，各成份的重量配比為:
[0031]朽1檬苦素5~50份
[0032]蔗糖10~20份
[0033]蒸餾水950~1000份。
[0034]制備方法:按上述重量配比稱取檸檬苦素，溶于蒸餾水，加蔗糖即得口服液成品。
[0035]上述應(yīng)用中注射劑是由檸檬苦素和生理鹽水所組成，各成份的重量配比為:
[0036]朽1檬苦素30~100份
[0037]生理鹽水900~1000份。
[0038]制備方法:按上述重量配比稱取檸檬苦素，溶于生理鹽水并稀釋，即得注射液成品O
[0039]有益效果:
[0040]一、為了探索檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的有效性及安全性，使用檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎40例，試驗(yàn)情況如下:
[0041]1、研究方法:采用開放、自身對照研究，收集2012年就診于本院的潰瘍性結(jié)腸炎病例共40例，年齡29~56歲，平均(45.61 ±9.72)歲。[0042]2、藥物及使用方法:按照實(shí)施例2的方法制備檸檬苦素膠囊劑，每粒含檸檬苦素30mgo藥品使用方法:每天一粒，連服12周。西藥對照組:美沙拉嗪緩釋顆粒(5-ASA)(商品名:艾迪莎)法國愛的發(fā)制藥，0.5g/袋，4g每天。
[0043]3、診斷標(biāo)準(zhǔn):參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中“中藥新藥治療慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的臨床研究指導(dǎo)原則”。
[0044]4、入選病例:
[0045]I)符合潰瘍性結(jié)腸炎西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)且病情分期為活動期的患者。
[0046]2)臨床嚴(yán)重程度為中度、重度。
[0047]3)符合中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)。
[0048]年齡在18~65歲之間，性別不限。
[0049]5、療效判定標(biāo)準(zhǔn):
[0050][I]臨床療效:總Sutherland評分從基線水平降低3分或30%以上，同時(shí)伴有出血亞評分降低I分以上或直腸出血亞評分的絕對分為O分或I分。
[0051][2]臨床緩解-- 總Sutherland評分為2分或更低。
[0052][3]粘膜愈合Sutherland評分內(nèi)鏡亞評分的絕對分為O分或I分。
[0053][4]結(jié)腸鏡檢查Baron分級標(biāo)準(zhǔn)
[0054]O級:正常黏膜圖像；
[0055]I級:輕度病變(血管紋理模糊，黏膜充血，但無出血)；
[0056]II級:中度病變(黏膜呈顆粒樣變化，有中度接觸性出血)；
[0057]III級:重度病變(明顯潰瘍形成并自發(fā)性出血)。
[0058][5]黏膜組織學(xué)檢查分級標(biāo)準(zhǔn)[7]
[0059]O級:黏膜固有層無中性白細(xì)胞浸潤；
[0060]I級:固有層有少量中性白細(xì)胞(< 10個(gè)/HP)浸潤，累及少量隱窩；
[0061]II級:固有層有明顯中性白細(xì)胞(10~50個(gè)/HP)浸潤，累及50%以上隱窩；
[0062]III級:固有層有大量中性白細(xì)胞(> 50個(gè)/HP)浸潤，伴隱窩膿腫；
[0063]IV級:固有層有明顯急性炎癥伴潰瘍形成。
[0064][6]證候療效評定標(biāo)準(zhǔn)
[0065]療效指數(shù)=(療前積分-療后積分)+療前積分X 100 %
[0066]①臨床緩解:用藥前、服藥后，癥狀和體征明顯改善(療效指數(shù)≥95% )；
[0067]②顯效:服藥后，癥狀和體征明顯改善(70%≤療效指數(shù)< 95% );
[0068]③有效:服藥后，癥狀和體征有改善(30%≤療效指數(shù)< 70% );
[0069]④無效:服藥后，癥狀和體征無明顯減輕或加重者(療效指數(shù)< 30% )
[0070]6、治療結(jié)果:
[0071](I)治療后腹瀉停止率:
[0072]檸檬苦素膠囊劑治療2，4,8, 12周后腹瀉停止率分別為54%，73%, 86%, 97%
[0073](2)治療后膿血便或血便消退率:
[0074]檸檬苦素膠囊劑治療2，4，8，12周后膿血便或血便消退率分別為45%, 62%, 81%, 93%
[0075](3)治療后腹痛消失率:[0076]檸檬苦素膠囊劑治療2，4,8, 12周后腹痛消失率分別為61%，78%, 89%, 97%
[0077](4)治療后腹脹消失率:
[0078]檸檬苦素膠囊劑治療2，4，8，12周后腹脹消失率分別為67%，83%, 91%, 100%
[0079](5)不良反應(yīng):
[0080]檸檬苦素膠囊劑治療期間未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)。
[0081]7、臨床結(jié)果:40人中，痊愈35例，痊愈率87.5%，有效39例，有效率(含痊愈)97.5%，無效I例，無效率為0.25%。對照組美沙拉嗪緩釋顆粒的有效率為89.6%。
[0082]8、結(jié)論:本發(fā)明檸檬苦素對潰瘍性結(jié)腸炎病人具有良好的治療作用。
[0083]檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎急性發(fā)作療效顯著且無任何不良反應(yīng)，值得進(jìn)一步研究。與現(xiàn)有的治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物相比，本發(fā)明采用檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎具有下列優(yōu)點(diǎn):由于檸檬苦素是由純天然產(chǎn)品提取而成的，無任何毒性、副作用少、無禁忌癥及不良反應(yīng)。檸檬苦素具有口服效果好、質(zhì)量穩(wěn)定的特點(diǎn)，便于服用和貯存。采用檸檬苦素治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效顯著。安全可靠，可以長期服用。由于實(shí)驗(yàn)表明口服檸檬苦素后，在人體和動物體腸道內(nèi)檸檬苦素的含量較高，且檸檬苦素具有鎮(zhèn)痛和消炎等作用，檸檬苦素具有治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用。
[0084]二、檸檬苦素在治療潰瘍性結(jié)腸炎時(shí)，其藥理作用主要體現(xiàn)在:
[0085]1、抗炎作用:按照實(shí)施例2的方法制備檸檬苦素膠囊劑，每粒30mg。取小鼠50只，體重18-22g，雌雄各半，隨機(jī)分成5組，每組10只，實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對照組(0.5%CMC)，阿司匹林組(300mg/kg),朽1 檬苦素(Limonin, LM)高劑量組(100mg/kg),朽1 檬苦素(Limonin, LM)中劑量組(50mg/kg),朽1檬苦素(Limonin, LM)低劑量組(25mg/kg)。連續(xù)灌胃給藥7天,每天I次，每次0.5mL/20g，末次給藥后lh，用二甲苯(0.05ml/只)涂于右耳致炎，2h后處死，用直徑9_打孔器取左右耳同部位耳片，稱重，以左右耳片重量差為腫脹度，并計(jì)算腫脹抑制率，經(jīng)t檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，與空白對照組相比，檸檬苦素(100，50mg/kg，ig)對由二甲苯引起的小鼠耳腫脹有顯著的抑制作用(P〈0.01)；
[0086]取雄性SD大鼠40只，體重(100-140 )g，隨機(jī)分5組，每組8只，實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對照組(CMC), ASP 組(200mg/kg)，檸檬苦素(Limonin, LM)高、中、低劑量組(36，18，9mg/kg)。在各鼠右后足踝關(guān)節(jié)處劃線，測右后足正常踝關(guān)節(jié)周長(mm)，灌胃給藥一次(與臨床用藥途徑一致)，給藥體積為lml/100g。灌胃給藥后0.5h于右后足跖腱膜下注射0.5%角叉菜膠(0.1ml/只)，此后每Ih測踝關(guān)節(jié)周長一次，連續(xù)測4h，以致炎前后的踝關(guān)節(jié)周長差為腫脹度，進(jìn)行t檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,朽1檬苦素(36,18mg/kg)在致炎后3h內(nèi)對由角叉菜膠致引起的大鼠足跖腫脹有顯著地抑制作用(P〈0.01，p〈0.05)；
[0087]取雄性SD大鼠40只，體重(130-160) g，隨機(jī)分5組，每組8只，實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對照組，阿司匹林(200mg/kg),朽1檬苦素(Limonin,LM)高、中、低劑量組(36,18,9mg/kg)。在乙醚淺麻醉下腹部去毛消毒，腹部切口，將兩個(gè)滅菌棉球分別植入大鼠兩側(cè)腋窩部皮下。手術(shù)當(dāng)天開始給藥，連續(xù)灌胃給藥一周，每天一次，給藥體積為lml/100g。第8天頸椎脫白處死，取出棉球，在60°C烤箱放置12小時(shí)后稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫凈重，并計(jì)算肉芽腫抑制率。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，檸檬苦素(36，18mg/kg)對肉芽組織增生有顯著地抑制作用(ρ〈0.01，ρ〈0.05)； [0088]2、促進(jìn)組織修復(fù):按照實(shí)施例2的方法制備檸檬苦素膠囊劑，每粒30mg。檸檬苦素可以使創(chuàng)面中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、纖維連接蛋白的含量明顯增高，促進(jìn)創(chuàng)面組織的愈合。
[0089]3、抗菌作用:按照實(shí)施例2的方法制備檸檬苦素膠囊劑，每粒30mg。檸檬苦素體外抗菌試驗(yàn)，試驗(yàn)中所使用的培養(yǎng)基為通用的MH培養(yǎng)基。對營養(yǎng)要求較高的菌株如肺炎雙球菌等須加入5%的脫脂羊血(固體瓊脂培養(yǎng)基)或羊血清(液體培養(yǎng)基)。采用瓊脂雙倍稀釋法測定最低抑菌濃度(MIC)。精密定量量取試驗(yàn)樣品，用適量無菌生理鹽水進(jìn)行倍比稀釋，使各藥液成一系列濃度梯度。然后取各梯度藥液2ml，分別加入到無菌平皿中，再加入已滅菌融化的保溫于55°C水浴中的MH培養(yǎng)基，立即充分混勻，冷凝后待用。同時(shí)設(shè)空白對照，只加入的瓊脂培養(yǎng)基。將已預(yù)先活化的各試驗(yàn)菌株分別接種到2ml培養(yǎng)液中，37°C培養(yǎng)過夜，再用相應(yīng)的培養(yǎng)液作適當(dāng)?shù)南♂??？刂凭簼舛确椒?用分光光度計(jì)測定培養(yǎng)液的光密度，然后作適當(dāng)?shù)南♂?，然后用多點(diǎn)接種儀點(diǎn)種各試驗(yàn)菌于各含藥的MH培養(yǎng)基平板上，空白對照同時(shí)進(jìn)行。37°C，培養(yǎng)24小時(shí)，觀察并記錄各菌的MIC值，并計(jì)算MIC5tl和MIC9(I。體外抗菌實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，朽1檬苦素體外對試驗(yàn)菌株除了綠膿桿菌外，均有一定的抗菌活性，其中對金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、嗜血流感桿菌的抗菌活性略強(qiáng)。
【具體實(shí)施方式】
[0090]以下通過實(shí)施例形式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0091]1、制備實(shí)施例
[0092]實(shí)施例1:用檸檬苦素制成片劑，其處方如下(1000片量):
[0093]`
【權(quán)利要求】
1.檸檬苦素在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎藥物中的應(yīng)用。
2.檸檬苦素作為唯一原料藥在制備治療潰瘍性結(jié)腸炎藥物中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物的劑型為片劑、膠囊、糖漿、口服液、注射液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物的劑型中含有輔料，輔料為糊精、乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、微晶纖維素、甘露糖、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、生理鹽水和甜菊苷的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于片劑是由檸檬苦素、乳糖、淀粉、低取代輕丙基纖維素、淀粉漿所組成，各成份的重量配比為: 朽1檬苦素5~50份 乳糖20~45份 淀粉50~65份 低取代經(jīng)丙基纖維素3~6份 5%的淀粉漿5~20份。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于膠囊劑是由檸檬苦素、乳糖、淀粉、低取代輕丙基纖維素、淀粉漿所組成，各成份的重量配比為: 朽1檬苦素30~100份 乳糖20~45份 淀粉50~65份 低取代經(jīng)丙基纖維素3~6份 5%的淀粉漿5~20份。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于糖漿劑是由檸檬苦素、蒸餾水和單糖漿所組成，各成份的重量配比為: 朽1檬苦素5~50份 蒸懼水180~200份 單糖漿750~850份。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于口服液是由檸檬苦素、蔗糖、蒸餾水所組成，各成份的重量配比為: 朽1檬苦素5~50份 蔗糖10~20份 蒸懼水950~1000份。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于注射劑是由檸檬苦素和生理鹽水所組成，各成份的重量配比為: 朽1檬苦素30~100份 生理鹽水900~1000份。
【文檔編號】A61P29/00GK103705525SQ201410005038
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2014年1月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月6日
【發(fā)明者】劉史佳, 居文政, 張農(nóng)山 申請人:江蘇省中醫(yī)院