SorCS1在治療肥胖癥及超重中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及SorCS1樣藥劑，包括SorCS1、編碼SorCS1及其片段的表達的核酸分子以及含有所述核酸的載體，以及表達SorCS1和所述片段的細胞，用于降低食欲，和/或促進減重和/或治療肥胖癥和/或增加代謝和/或增加產(chǎn)熱，和/或將白色脂肪轉化為褐色脂肪的方法。
【專利說明】SorCSI在治療肥胖癥及超重中的應用
[0001] 本申請主張2012年4月17日遞交的丹麥專利申請No. PA 201270191的優(yōu)先權。 將該申請和本申請中引用的所有文獻全部引入作為參考。

【技術領域】
[0002] 本發(fā)明涉及通過給予SorCSl，優(yōu)選SorCSl多肽及其可溶性片段和變體來降低食 欲、抑制饑餓和/或治療肥胖癥的方法。

【背景技術】
[0003] 肥胖癥是身體脂肪已積累到可能對健康產(chǎn)生不利影響的程度的醫(yī)學狀況。在臨床 上，世界衛(wèi)生組織（WHO)將肥胖癥定義為身體質量指數(shù)（BMI)超過30。在肥胖人群中，可 以基于肥胖癥的嚴重性定義出三個不同的子類，I級肥胖癥（BMI 30. 0-34. 9)，II級肥胖癥 (BMI 35. 0-39. 9)和III級肥胖癥（BMI超過40)，這也是對公共健康行動的漸增問題。據(jù) 估計，丹麥全體成年人中高達15%罹患肥胖癥（BMI>30)。
[0004] 肥胖癥的不良后果是負面的社會形象、心血管疾病和2型糖尿?。―arvall et al. , Eur J Vase Endovasc Surg 2007, Haslam&James, Lancet 2005, Vernochet et al·, FEBS J 2009, Yusuf et al·, Lancet 2004)，以及某些癌癥（Roberts et al·, Annu Rev Med 2009)。除這些不利影響外，肥胖癥也與一些其他的合并癥如精神紊亂和神經(jīng)紊亂相關 聯(lián)（Beydoun et al.，Obes Rev 2008, Harney et al.，Pain Med 2007)〇
[0005] 目前，肥胖癥是全球范圍內(nèi)造成疾病負擔的最重要的危險因素，并且在美國是繼 吸煙后第二大可預防的死亡成因 （Mokdad et al.，JAMA 2004)。2005年，11億成年人和 10%的兒童被歸類為超重或肥胖癥（Haslam&James，Lancet 2005)。在歐洲，肥胖癥的發(fā) 病率在不斷增加，并可能甚至更嚴重；兒童肥胖癥變得越來越普遍（Livingstone, Public Health Nutr 2011)〇
[0006] 目前的肥胖癥治療包括飲食改變、運動和活動、行為改變、處方減肥藥和減肥 手術。在售和在研發(fā)中的減肥藥包括旨在減少胃腸（GI)道（Orlistat)或各種方式吸 收來限制食物攝入量和抑制饑餓感的分子（Phentermine、Pramlintide、Exenatide、 Liraglutide)。然而，只有Orlistat和Phentermine被批準作為減肥藥銷售。 Orlistat(Xenical)通過抑制胰脂肪酶來減少腸道對脂肪的吸收。使用Orlistat的一些 副作用包括頻繁的油性排便（脂肪瀉）。但是，如果飲食中的脂肪減少，通常癥狀會改善。 Orlistat開始時只是可售處方藥，在2007年2月美國FDA批準柜臺出售。Phentermine 是一種苯乙胺類的精神興奮藥，藥理學與安非他明類似。它被批準作為食欲抑制劑，在短 期使用并配合運動、飲食和行為改變時幫助肥胖癥患者減重。Pramlintide(Symlin)是激 素 Amylin的合成類似物，Amylin是正常人響應于進食而由胰腺分泌的。除其他的作用外， Amylin還延緩胃排空并促進飽腹感。許多糖尿病人缺乏Amylin。Symlin只被批準與胰島 素一起用于1型和2型糖尿病人。然而，目前正在非糖尿病人中檢測Symlin對于肥胖癥的 治療。Exenatide(Byetta)是激素 GLP-I的長效類似物，其是腸響應于食物的存在而分泌 的。除其他作用外，GLP-I還延緩胃排空并促進飽腹感。一些肥胖癥的人都缺乏GLP-1，并 且節(jié)食進一步降低GLP-1。Byetta目前市售用于2型糖尿病的治療。有些，但不是所有的 患者發(fā)現(xiàn)，他們服用Byetta時大量減重。然而，Byetta僅被批準并推薦用于2型糖尿病患 者。Liraglutide(Victoza)是一種長效胰高血糖素樣肽-I(GLP-I)類似物。除其他作用 夕卜，Victoza增加胰島素分泌、延緩胃排空并抑制餐后胰高血糖素分泌。Victoza目前市售 用于2型糖尿病的治療。有些患者發(fā)現(xiàn)，他們服用Victoza時大量減重。然而，Victoza只 被批準并推薦用于2型糖尿病的治療。
[0007] 減肥手術包括胃旁路手術、腹腔鏡可調(diào)節(jié)胃束帶術（LAGB)、胃袖狀切除和十二指 腸轉位術。
[0008] VpslOp-域（VpslOp-D)受體家族包括受體分選蛋白（Sortilin)、SorLA、 SorCSl、SorCS2和SorCS3。它們都是1型跨膜受體，具有與VpslOp高度序列同一性的 N端VpslOp-域的特征性結構特征，VpslOp是酵母中的一種分選蛋白（10)。最近的研 宄結果顯示，分選蛋白和SorLA作為神經(jīng)元存活和死亡的調(diào)控物發(fā)揮著重要的作用（11， 12, WO 2004/056385, WO 2008/074329)。令人感興趣的是，分選蛋白也與調(diào)節(jié)葡萄糖攝取 的胰島素相關，因為它可促進葡萄糖轉運體GLUT4從細胞內(nèi)室向血漿膜轉移（13,14, WO 2010/142296)。
[0009] SorCSl是一種受體，其除了其他組織外，在腦、胰腺、脂肪組織和肌肉中表 達。遺傳研宄表明，SORCSl基因在人類（Nat Genet. 2006Jun ;38 (6) : 688-93)，大鼠 (Genetics. 2006Nov ; 174 (3) : 1565-72)和小鼠（Diabetes. 2007Jul ;56 (7) : 1922-9)中的基 因多態(tài)性與2型糖尿病的發(fā)展風險相關聯(lián)。
[0010] SorCSl在VpslOp-D受體中是獨特的，因為它以幾種不同的剪接變體存在，表示為 SorCSl-a、b、c、c+和d，它們編碼相同的細胞外和跨膜部分，以及不同長度和序列的細胞質 域（10，11)。已經(jīng)證明，除了神經(jīng)系統(tǒng)以外，SorCSl還在脂肪組織、骨骼肌和胰腺的β細胞 中表達（W0 2010/142296)。
[0011] 還已證明（W0 2010/142296)，SorCSl可以結合胰島素受體（IR)并穩(wěn)定其在肌肉 和脂肪組織中的表達，因此確保了對胰島素的應答能力。支持這一觀點的是，用SorCSl的 胞外域（可溶性SorCSl)進行處理造成db/db小鼠（肥胖癥依賴的2型糖尿病小鼠）中血 漿葡萄糖和胰島素水平都明顯降低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] SorCSl是哺乳動物VpslOp-域（VpslOp-D)受體家族的五個成員之一，該受體家族 還包括分選蛋白、SorLA、SorCS2和SorCS3。SorCSl在VpslOp-D受體中是獨特的，因為它 以幾種不同的剪接變體存在。
[0013] 本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)向受試者給予SorCSl，并且特別是SorCSl多肽的胞外 結構域（可溶性SorCSl或sSorCSl)造成被治療的受試者顯著減重。
[0014] 因此，本發(fā)明的一個目的是提供能夠降低食欲，和/或抑制饑餓和/或增加對饑餓 的抑制，和/或增加預期消耗的減少和/或增加食欲的降低，和/或增加飽腹感和/或治療 肥胖癥和/或促進減重，和/或增加代謝，和/或將白色脂肪轉化為褐色脂肪的方法和藥 劑。后者造成接受SorCSl治療的受試者的產(chǎn)熱增加。因此，本發(fā)明還涉及增加受試者產(chǎn)熱 的方法。
[0015] 因此，在一個主要方面，本發(fā)明的涉及選自下組的藥劑：
[0016] a) 一種分離的多肽，包括：
[0017] i) SEQ ID NO : 15的氨基酸序列；或
[0018] ii)i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO :15 具有至少60%的序列同一性，
[0019] 至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與 SEQ ID NO :15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性，
[0020] b)編碼如在a)中所限定的多肽的核酸序列；
[0021] c)包含如在b)中所限定的核酸分子的載體，
[0022] d)轉化或轉導有b)的核酸或c)的載體的分離的宿主細胞，在用于降低食欲，和/ 或用于促進減重和/或治療肥胖癥和/或增加代謝，和/或增加產(chǎn)熱，和/或將白色脂肪轉 化為褐色脂肪的方法中使用。
[0023] 本發(fā)明的藥劑可以適合遞送至受試者的方式來配制。因此，在一個方面，本發(fā)明涉 及一種包括本文上述定義的藥劑的藥物組合物。在一個方面，本發(fā)明涉及包含所述藥物組 合物以及使用說明（如向受試者給藥的說明書）的試劑盒。
[0024] 發(fā)明詳細說明
[0025] 定義
[0026] 除非特別說明，本文使用的所有技術和科學術語都具有本發(fā)明所屬領域技術人員 所理解的常用含義。為了理解本發(fā)明，對以下術語進行解釋。
[0027] 酷化:如本文使用的術語"酷化"或"酷化基團"是指R-(C = 0)-基團，其中R是選 自直鏈或支鏈，飽和或不飽和碳鏈，任選地包括一個或多個0、N、S或P，如直鏈或支鏈的烷 烴羧酸。合適的?；鶊F的各種實例描述于W02006/037810、W000/34331、W02006/097537、 W02011/080103。特別是，合適的酰化基團的實例具有結構CH3 (CH2) nCO-，其中η為4-40,例 如8-22,例如選自下組的?；鶊F：
[0028] CH3 (CH2) 8C0-、CH3 (CH2) 9C0-、CH3 (CH2) 1(IC0-、CH3 (CH2) UC0-、CH3 (CH2) 12C0-、 CH3 (CH2) 13C0-、CH3 (CH2) 14C0-、CH3 (CH2) 15C0-、CH3 (CH2) 16C0-、CH3 (CH2) #0-、CH3 (CH2) 18C0-、 CH3(CH2) 19C0-、CH3(CH2)2QC〇-、CH 3(CH2)21CO-和 CH3(CH2)22C〇-。合適的?；鶊F的進一步 的實例具有結構HOOC-(CH 2)nCO-,其中η是4-40,例如12至20,典型地，HOOC-(CH2) 14C0-、 HOOC- (CH2) 15C0-、H00C- (CH2) 16C0-、H00C- (CH2) 17C0-和 HOOC- (CH2) 18C0-。酰化基團的進一步 實例也參見US5, 905, 140。
[0029] 佐逝:與施予的免疫原決定簇/抗原混合，增強或者改變對所述決定簇的免疫反 應的任意物質。
[0030] 親和力:大多數(shù)配體與它們的結合位點的相互作用可以根據(jù)結合親和力來描述。 一般來說，高親和力配體結合是由在配體與它的受體之間較大的分子間力而產(chǎn)生的，而低 親和力配體結合涉及在配體與它的受體之間有較小的分子間力。一般來說，高親和力結合 與低親和力結合相比，配體在它的受體結合位點處有更長的保留時間。當某些結合能可以 用于引起受體的構象變化時，配體與受體的高親和力結合通常在生理學上是很重要的，導 致了相關離子通道或酶的行為發(fā)生改變。
[0031] 可以與受體結合、改變受體功能并引發(fā)生理反應的配體被稱為該受體的激動劑。 與受體結合的激動劑可以根據(jù)引發(fā)生理反應的程度以及產(chǎn)生該生理反應所需的激動劑的 濃度來描述。高親和力配體結合意味著相對低濃度的配體就足以最大地占據(jù)配體結合位點 并引發(fā)生理反應。低親和力結合意味著需要相對高濃度的配體才能最大地占據(jù)結合位點并 達到對該配體的最大生理反應。配體結合通常根據(jù)一半受體結合位點被占據(jù)時的配體濃度 來表征，稱為解離常數(shù)（k d)。親和力也指受體與它們的配體（例如抗體與它的抗原）之間 的結合強度。
[0032] 激動劑:激動劑是能夠增加或影響受體活性的化合物。具體地，VpslOp域受體激 動劑是能夠結合VpslOp域受體的一個或多個結合位點，從而引發(fā)與給定的內(nèi)源性激動劑 配體化合物相同生理反應的化合物。
[0033] 拮抗劑:拮抗劑在本申請中與抑制劑同義。拮抗劑是能夠降低效應體（如受體） 活性的化合物。具體地，VpslOp域受體詰抗劑是能夠結合VpslOp域受體的一個或多個結 合位點，從而抑制另一種配體的結合并因此抑制生理反應的化合物。
[0034] 抗述:本文所指的術語"抗體"包括整個抗體和任意抗原結合片段（即"抗原結合 部分"）或其單鏈。
[0035] 多克隆抗體：多克隆抗體是識別給定的特異性抗原的抗體分子的混合物，因此多 克隆抗體可識別所述抗原內(nèi)的不同表位。
[0036] 芳香基:術語"芳香基"或"芳基"表示單或多環(huán)芳香碳水化合物基團。
[0037] 結合位點:本文使用的術語"結合位點"或"結合口袋"，指分子或分子復合體因其 形狀而有利地與另一種分子、分子復合體、化學實體或化合物相聯(lián)系的區(qū)域。如本文所述， 口袋包括至少一個深腔和可選的一個淺腔。
[0038] 牛物活件劑或牛物活件的或牛物活件:本f所用的術語指本申請中可伸用的具有 本發(fā)明的治療或其他用途的任何化合物或物質的作用。
[0039] 靜電相互作用:本文使用的術語"靜電相互作用"指當帶相反電荷的成分相互吸引 時，帶電成分、分子或離子之間由于吸引力而發(fā)生的任意相互作用。實施例包括但不限于： 離子相互作用、共價相互作用、離子和偶極（離子和極性分子）之間的相互作用，兩個偶極 (極性分子的部分電荷）之間的相互作用，氫鍵和London分散鍵（可極化分子的誘導偶 極）。因此，例如，"離子相互作用"或"靜電相互作用"是指第一、正電荷分子與第二、負電 荷分子之間的吸引。例如，離子或者靜電相互作用包括負電荷生物活性劑之間的吸引。
[0040] Fc片段:如本文所使用的術語"哺乳動物抗體的Fc片段"是指恒定區(qū)，即哺乳動物 抗體或其片段的Fc片段，其中這樣的哺乳動物抗體可選自來自哺乳動物，如靈長類動物， 如人類，猩猩或猿類；馬科動物，如馬的IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。哺乳動物抗體的典型的 Fc片段是人抗體的重組Fc片段，例如人IgG抗體的重組Fc片段。
[0041 ] 在本文的上下文，如本文使用的術語"哺乳動物抗體的Fc片段的變體"或"Fc變 體"（在整個本說明書中可互換使用）指哺乳動物抗體的Fc片段，其中Fc片段的一個或多 個氨基酸殘基，如1-10個氨基酸殘基已被其它的氨基酸殘基取代和/或其中一個或多個氨 基酸殘基，如1-10個氨基酸殘基已被從Fc片段刪除和/或其中一個或多個氨基酸殘基，如 1-10個氨基酸殘基已被添加到Fc片段和/或其中在Fc片段中的一個或多個氨基酸殘基， 如1-10個氨基酸殘基已被修飾。這樣的氨基酸殘基的添加或刪除可以例如發(fā)生在Fc片段 的N-末端和/或Fe片段的C-末端。天然的指沒有被人類修飾的Fe片段。W096/32478描 述了示例性的Fe變體。因此，在一個實施方式中，術語"Fc變體"包括了由非人的天然Fe 人源化的分子或序列。此外，天然的Fe包括可被除去的位點，因為它們提供了本發(fā)明的融 合分子不需要的結構特征或生物活性。
[0042] 丑段:本發(fā)明的多肽片段包括它的任意功能等同物，在一個實施方式中可包括氨 基酸序列的少于500個氨基酸殘基，例如少于450個氨基酸殘基，例如少于400個氨基酸殘 基，例如少于350個氨基酸殘基，例如少于300個氨基酸殘基，例如少于250個氨基酸殘基， 例如少于240個氨基酸殘基，例如少于225個氨基酸殘基，例如少于200個氨基酸殘基，例 如少于180個氨基酸殘基，例如少于160個氨基酸殘基，例如少于150個氨基酸殘基，例如 少于140個氨基酸殘基，例如少于130個氨基酸殘基，例如少于120個氨基酸殘基，例如少 于110個氨基酸殘基，例如少于100個氨基酸殘基，例如少于90個氨基酸殘基，例如少于 85個氨基酸殘基，例如少于80個氨基酸殘基，例如少于75個氨基酸殘基，例如少于70個 氨基酸殘基，例如少于65個氨基酸殘基，例如少于60個氨基酸殘基，例如少于55個氨基酸 殘基，例如少于50個氨基酸殘基，例如少于45個氨基酸殘基，例如少于40個氨基酸殘基， 例如35個氨基酸殘基，例如30個氨基酸殘基，例如25個氨基酸殘基，例如20個氨基酸殘 基，例如15個氨基酸殘基，例如10個氨基酸殘基，例如5個連續(xù)的氨基酸殘基；所述氨基酸 序列選自：SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、 23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和 64,或者與所述序列至少 70% (例如，至少85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的變體。此外，本發(fā)明的多肽片段 包括它們的任意功能的等同物，在一種實施方式中可包括氨基酸序列的5個以上氨基酸殘 基，例如10個以上氨基酸殘基，例如15個以上氨基酸殘基，例如20個以上氨基酸殘基，例 如25個以上氨基酸殘基，例如50個以上氨基酸殘基，例如75個以上氨基酸殘基，例如100 個以上氨基酸殘基，例如125個以上氨基酸殘基，例如150個以上氨基酸殘基，例如175個 以上氨基酸殘基，例如200個以上氨基酸殘基，例如225個以上氨基酸殘基，例如250個以 上氨基酸殘基，例如275個以上氨基酸殘基，例如300個以上氨基酸殘基，例如325個以上 氨基酸殘基，例如350個以上氨基酸殘基，例如375個以上氨基酸殘基，例如400個以上氨 基酸殘基，例如425個以上氨基酸殘基，例如450個以上氨基酸殘基，例如475個以上氨基 酸殘基，例如500個以上氨基酸殘基，例如525個以上氨基酸殘基，例如550個以上氨基酸 殘基，例如575個以上氨基酸殘基，例如600個以上氨基酸殘基，例如625個以上氨基酸殘 基，例如650個以上氨基酸殘基，例如675個以上氨基酸殘基，例如700個以上氨基酸殘基； 所述氨基酸序列選自：SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、 45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和 64,或者與所述序列 至少60%(例如至少65%、70%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或至少99%)同一性 的變體?；钚云蔚膶嵗ㄏ率鲆环N或多種：SEQ ID NO:Iaa 103-124、SEQ ID NO:Iaa 125-143,SEQ ID NO ：Iaa 144-162,SEQ ID NO ：Iaa 197-218,SEQ ID N0：laa 391-409,SEQ ID N0:laa 661-684、SEQ ID N0:laa 763-783 或 SEQ ID N0:laa 859-876。所述片段長度 可以是5至500個氨基酸，例如5至400、10至300、20至250、15至50、5至15、7至15、10 至25、10至20以及7至25個氨基酸長度。
[0043] 功能等同物:根據(jù)一種優(yōu)詵實施方式，本發(fā)明中使用的"功能等同物"是通過參考 序列的預定片段的相應功能來確立的。
[0044] SorCSl多肽或其片段的功能等同物或變體可理解為：隨著插入、缺失和替代（包 括保守替代）的數(shù)目與范圍增大，表現(xiàn)出氨基酸序列分別逐步與優(yōu)選的預定SorCSl多肽或 SorCSl片段序列不同，但仍保持本申請中SorCSl多肽的生物活性。這種區(qū)別可通過優(yōu)選的 預定序列與片段或功能等同物之間同一性的降低來衡量。
[0045] 如果含有功能類似的氨基酸側鏈的殘基被替代，通過一個或多個氨基酸殘基的替 代而獲得的功能變體可能更好地表現(xiàn)出某些形式或程度的天然SorCSl活性，只是同源性 較小。在這方面，功能相似是指側鏈的主要特征，如疏水性、堿性、中性或酸性，或者是否存 在立體位阻。因此，本發(fā)明的一種實施方式中，同一性的程度并不是衡量一個片段是否是本 發(fā)明的優(yōu)選預定片段的變體或功能等同物的主要量度。
[0046] 除了在優(yōu)選的預定SorCSl多肽或其片段的任意位置引入保守替代外，還可以在 這種SorCSl多肽或其片段的任意一個或多個位置中引入非保守替代。
[0047] 導致形成SorCSl多肽或其片段的功能等同物片段的非保守取代會例如i)極性顯 著不同，例如，帶有非極性側鏈的殘基（Ala、Leu、Pro、Trp、Val、lie、Leu、Phe或Met)替代 帶極性側鏈的殘基，如Gly、Ser、Thr、Cys、Tyr、Asn或Gln，或帶電荷氨基酸，如Asp、Glu、 Arg或Lys ;或者帶電荷或者極性的殘基替代非極性的殘基；和/或ii)對多肽骨架定向的 影響顯著不同，例如Pro或Gly被另一種殘基替代；和/或iii)電荷顯著不同，例如，負電 荷殘基如Glu或Asp替代正電荷殘基如Lys、His或Arg(反之亦然）；和/或iv)空間位阻 顯著不同，例如，大體積的殘基如His、Trp、Phe或Tyr替代具有一種小側鏈的殘基如Ala、 Gly或Ser (反之亦然）。
[0048] 在一種優(yōu)選實施方式中，基于疏水性和親水性數(shù)值以及氨基酸側鏈替代的相對相 似度，包括電荷、大小等，通過氨基酸替代得到變體。考慮到上述不同特征的示范性氨基酸 替代對本領域技術人員來說是已知的，包括：精氨酸和賴氨酸；谷氨酸和天冬氨酸；絲氨酸 和蘇氨酸；谷氨酸和天冬酰胺；以及纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。
[0049] 優(yōu)選的預定SorCSl多肽或其片段的突變可以通過進行氨基酸插入來實現(xiàn)，通常 約為1至10個氨基酸殘基的級別，優(yōu)選1至5個氨基酸殘基；或者通過缺失約1至10個殘 基，例如約2至5個殘基來實現(xiàn)。
[0050] 在一種實施方式中，結合位點1、2或3的配體是通過自動化合成而合成的寡肽?？?以采用任意商業(yè)可得的固相技術，例如Merrifield固相合成法，其中氨基酸按順序添加到 增長的氨基酸鏈（參見 Merrif ield, J. Am. Chem. Soc. 85:2149-2146, 1963)。
[0051] 多肽自動化合成設備可以從供應商商業(yè)獲得，如Applied Biosystems Inc (Foster City, Calif)，通常可根據(jù)制造商的說明書進行操作。固相合成可以將所需的 替代氨基酸加入到本發(fā)明SorCSl的任意片段中?？梢岳斫獾氖牵娲?、缺失、插入或其任意 亞組合可以相結合以獲得最終序列的功能等同物。插入應該理解為包括氨基端和/或羧基 端的融合，例如與疏水性或免疫原性蛋白或載體融合，例如所述載體為任意多肽或能夠發(fā) 揮載體作用的框架結構。
[0052] 低聚體也在本發(fā)明中提供并屬于本發(fā)明的范圍，低聚體包括本發(fā)明分選蛋白抑制 劑片段的二聚體，包括同型二聚體和異質二聚體。SorCSl多肽和片段及其功能等同物和變 體可以與其他氨基酸序列或者與天然分選蛋白抑制劑序列生成為同型二聚體和異質二聚 體。異質二聚體包括含有免疫反應活性的分選蛋白抑制片段和不需要具有或顯示任何生物 活性的分選蛋白抑制片段的二聚體。
[0053] SorCSl多肽或其片段和變體可以在體外和體內(nèi)合成。體外合成的方法是眾所周知 的，適合或適于在體內(nèi)合成分選蛋白抑制劑的方法也是現(xiàn)有技術中已有描述的。當體內(nèi)合 成時，宿主細胞用含有編碼分選蛋白肽抑制劑或其片段的DNA的載體進行轉化。載體定義 為一種可復制的核酸結構。載體用于調(diào)節(jié)SorCSl多肽和/或片段或變體的表達。表達載 體是可復制的DNA結構，其中可以在體內(nèi)表達的編碼預定分選蛋白抑制片段或其任意功能 等同物的核酸序列可操作地與適宜的控制序列連接，該控制序列能夠影響所述片段或等同 物在適宜宿主內(nèi)的表達。這種控制序列是本領域眾所周知的。原核細胞和真核細胞都可以 用于合成配體。
[0054] 然而，源自多細胞生物體的細胞的培養(yǎng)物代表著優(yōu)選的宿主細胞。原則上，任意 較高級的真核細胞培養(yǎng)物都是可行的，無論是脊椎動物還是無脊椎動物培養(yǎng)物。有用的宿 主細胞系的實施例是VERO和HeLa細胞，中國倉鼠卵巢（CHO)細胞系和WI38、BHK、C0S-7、 293和MDCK細胞系。優(yōu)選的宿主細胞是已經(jīng)知曉的合成內(nèi)源性分選蛋白抑制劑的真核細 胞。這種宿主細胞的培養(yǎng)物可以被分離并用作片段的源，或者用于治療的治療性方法中，包 括旨在促進或抑制生長狀態(tài)的治療性方法，或者用于在人或動物體上實施的診斷方法中。
[0055] 體外/體內(nèi):該術語按照它們通常的含義使用。
[0056] -種物質、化合物或生物分子，例如蛋白質，包括受體；它能夠與（第二）生 物分子結合并形成復合體以發(fā)揮生物用途。狹義上，配體是一種信號引發(fā)分子，通過分子間 作用力如離子鍵、氫鍵或范德華力與目標蛋白的位點結合。對接（結合）通常是可逆的（解 離）。配體與它的目標分子之間的實際不可逆的共價鍵合在生物系統(tǒng)內(nèi)是很少見的。與金 屬有機和無機化學中的意義相反，在血紅蛋白中，無論配體是否實際地結合在金屬位點上 都沒有關系。與受體結合的配體可改變受體蛋白的化學構象，即受體蛋白的三維形狀。受體 蛋白的構象狀態(tài)決定受體的功能狀態(tài)。結合的趨勢或者強度稱為親和力。配體包括底物、 抑制劑、激活劑、非自身受體、共受體和神經(jīng)傳遞素。
[0057] 接頭:如本文所使用的術語"接頭"是指使SorCSl劑和綴合于SorCSl的藥學上 可接受的分子分離，并導致半衰期增加（例如血漿半衰期增加）的共價鍵或多官能基團 (moiety)(如雙官能基團）。
[0058] 聚合物:如本文所使用的術語"聚合物"是指由兩種或更多種單體的共價連接形成 的分子，其中沒有任何單體是氨基酸殘基，除非該聚合物是人白蛋白或另一種豐富的血漿 蛋白。該術語"聚合物"可以與術語"聚合物分子"互換使用。該術語意在覆蓋通過體外糖 基化所結合的碳水化合物分子。將通過體內(nèi)糖基化（如N-或0-糖基化）所結合的碳水化 合物分子（如下面進一步描述的）在此統(tǒng)稱為"寡糖基團"。除非對聚合物分子的數(shù)目有明 確指示，否則本發(fā)明中每提及"聚合物"，"聚合物分子"，"所述聚合物"或"所述聚合物分子" 應指一種或多種聚合物分子。聚合物可以是水溶性的或水不溶性的聚合物，如PEG基團。 PEG基團可具有選自500Da到200. OOODa的范圍的平均尺寸，例如從500Da至100. OOODa， 例如從2000Da至50. OOODa。這樣的PEG分子可以獲自例如Shearwater Inc。
[0059] 藥物劑:術語"藥物劑"或者"藥品"或者"藥物"指本發(fā)明具有治療或預防用途的 任意物質，該物質可以用于治療（包括預防、診斷、緩解或者治愈）患者的弊病、痛苦、病癥、 疾病或傷害。治療上有用的遺傳決定簇、肽、多肽以及多核苷酸都屬于術語藥劑或藥品的含 義。根據(jù)該定義，"治療劑"、"藥物劑"、或"藥品"或者"藥物"是一類生物活性物質。
[0060] 藥物組合物:或者藥品、藥物或者藥劑指在適當?shù)厥┯杌颊邥r，能夠誘導所需的治 療效果的任意化學或生物物質、化合物或組分。某些藥品以一種非活性的形式銷售，其在體 內(nèi)轉化成具有藥理活性的代謝物。為此，術語"藥劑組合物"和"藥品"優(yōu)選地包括本身活 性物質、或者非活性藥品和活性代謝物。
[0061] 純化抗述:術語"純化抗體"是這樣的抗體，其重量的至少60%不含有與它天然 相關的多肽及天然有機分子。優(yōu)選地，制劑包括至少75%重量百分比的抗體，更優(yōu)選至少 90 %重量百分比，最優(yōu)選至少99 %重量百分比。
[0062] 序列同一性:如本文所使用的術語"序列同一性"或"相同的"指通過比較序列 來確定的兩個或更多個蛋白質的序列之間的關系。兩個序列之間的同一性百分比的確 定可以使用數(shù)學算法來完成。用于比較兩個序列的數(shù)學算法的優(yōu)選但非限制性的實例是 Karlin 和 Altschul 算法（1990)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268,在 Karlin and Altschul (1993)Proc. Natl. Acad Sci. USA 90:5873-5877 中進行了修改。這樣的算法被整 合到 Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410 的 BLASTN 和 BLASTP 程序中。
[0063] 為了表征同一性，將目的序列進行比對，從而獲得最高順序的同源性（匹配）。 根據(jù)這些一般原則，兩個核酸序列的"同一性百分比"可利用從美國國家生物技術信息 中心（NCBI)網(wǎng)站（http://www. ncbi. nlm. nih. gov)上獲得的 BLASTN 算法[Tatiana A.Tatusova, Thomas L. Madden:Blast 2sequences-a new tool for comparing protein and nucleotide sequences ;FEMS Microbiol. Lett. 1999174247-250]，并使用本文建議的 默認設置（即匹配獎勵=I ;錯配罰分=-2 ;鏈選擇=兩條鏈；空位=5 ;空位延伸=2 ;空 位罰分x_dropofT = 50 ;預期=10 ;字長=11 ;過濾）進行測定。BLASTN算法測定在兩個 比對的核苷酸序列之間一系列重疊的序列同一性％。
[0064] 用于序列比較的數(shù)學算法的另一個優(yōu)選但非限制性的實例是CLUSTAL W(l. 7) 比對算法（Thompson, J. D.，Higgins, D. G. and Gibson, Τ· J. (1994) CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, positions-specific gap penalties and weight matrix choice. Nucleic Acids Research, 22:4673-4680. )。CLUSTAL W 能夠被用于優(yōu)選使用 BL0SUM62 評分矩陣的 多重序列比對。當計算序列同一性時，CLUSTAL W包括由參照序列的長度比對所產(chǎn)生的任 何空位。因此，在圖2中，雖然參照序列（hMETRNL)僅僅長311個氨基酸，但具有空位的比 對序列的總長度為322。序列同一性是通過將匹配數(shù)除以具有空位的比對序列的長度來計 算的。
[0065] 高水平的序列同一性表示第一序列源自第二序列的可能性。氨基酸序列同一性要 求兩個比對序列間相同的氨基酸序列。因此，與參照序列共享70%的氨基酸同一性的候選 序列要求在比對后，候選序列中的70%的氨基酸與參照序列中的相應氨基酸是相同的。
[0066] 追癥:本文使用的術語"治療"指涉及治療的方法，對包括人和動物體在內(nèi)的個體 的臨床狀況的外科診療。治療可以是緩解、治愈或預防，即減低精神和行為的癥狀。
[0067] 變體:本文使用的術語"變體"指氨基酸序列變體，所述變體優(yōu)選地與任意的預定 序列具有至少60%同一 1性，例如至少63%同一1性，例如至少66%同一1性，例如至少70%同 一性，例如至少72%序列同一性，例如至少75%序列同一性，例如至少80%序列同一性，例 如至少85%序列同一性，例如至少90%序列同一性，例如至少91 %序列同一性，例如至少 92%序列同一性，例如至少93%序列同一性，例如至少94%序列同一性，例如至少95%序 列同一性，例如至少96%序列同一性，例如至少97%序列同一性，例如至少98%序列同一 性，例如至少99%序列同一性。
[0068] 表達迪上週:一種導致基因，優(yōu)選地為內(nèi)源性基因，表達增加的過程。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0069] 圖 l:SorCSl 的比對
[0070] 源自人類（Homo sapiens)、黑渥渥（Pan troglodytes)、牛（Bos Taurus)、小鼠 (Mus musculus)、大鼠 （Rattus norvegicus)、狗（Canis lupus familiaris)和雞（Gallus gallus)的SorCSl序列比對。序列同一"性如表2所示。
[0071] 表2 :人SorCSl的序列同一性
[0072]

【權利要求】
1. 一種選自下組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ; 15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞， 在用于降低食欲，和/或治療肥胖癥和/或促進減重和/或增加代謝，和/或增加產(chǎn)熱， 和/或將白色脂肪轉化為褐色脂肪的方法中的應用。
2. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述藥劑是多膚，其中所述多膚是包括選自SEQ ID NO ;15、5、1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、 55、56、57、58、59、60、61、62、63和64的氨基酸序列的生物活性序列變體。
3. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述藥劑是多膚，其中所述多膚是具有選自SEQ ID NO ;15、5、1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、 55、56、57、58、59、60、61、62、63和64的氨基酸序列的生物活性序列變體。
4. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述多膚是選自SEQ ID N0;15、5、l、2、3、4、6、7、 8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和64的序列的天然發(fā)生的等位基因變體。
5. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述多膚包括選自SEQ ID N0;15、5、63、62、21、 27、33、37、39、43、47、51的可溶性SorCSl的氨基酸序列。
6. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚是其中所述的變體多膚，其中 在選擇的序列中指定的任意氨基酸被改變W提供保守性替代，前提是不超過200個氨基酸 被如此改變。
7. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚是其中所述的變體多膚，其中 在選擇的序列中指定的任意氨基酸被改變W提供保守性替代，前提是不超過100個氨基酸 被如此改變。
8. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚是其中所述的變體多膚，其中 在選擇的序列中指定的任意氨基酸被改變W提供保守性替代，前提是不超過50個氨基酸 被如此改變。
9. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚是其中所述的變體多膚，其中 在選擇的序列中指定的任意氨基酸被改變W提供保守性替代，前提是不超過25個氨基酸 被如此改變。
10. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚與選自SEQ ID N0;15、5、 1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、55、56、57、58、 59、60、61、62、63和64組成組的氨基酸序列具有至少65%，更優(yōu)選至少70%，更優(yōu)選至少 75 %，優(yōu)選至少80 %，更優(yōu)選至少85 %，更優(yōu)選至少90 %，更優(yōu)選至少91 %，更優(yōu)選至少 92 %，更優(yōu)選至少93 %，更優(yōu)選至少94 %，更優(yōu)選至少95 %，更優(yōu)選至少96 %，更優(yōu)選至少 97%，更優(yōu)選至少98%，更優(yōu)選至少99%的序列同一性。
11. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑是多膚，其中所述多膚選自 沈QID側；1、2、3、4、6、7、8、9、11、12、13、14、61和62組成組。
12. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚選自SEQ ID NO;16、17、18、 19、20、22、26、28、29、30、31 和 32 組成組。
13. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑是選自SEQ ID NO;61、62、63 和64組成組的多膚。
14. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑是選自SEQ ID NO;55、56、57、 58、59和60組成組的多膚。
15. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑是選自SEQ ID NO ;62和64組 成組的多膚。
16. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述藥劑是生物活性片段，其中所述片段包含選 自由沈Q ID NO ;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、 50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63和64組成組的氨基酸序列中任一種的小 于500個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于450個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于400個連續(xù)氨基酸殘 基，例如少于350個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于300個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于250個連 續(xù)氨基酸殘基，例如少于240個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于225個連續(xù)氨基酸殘基，例如少 于200個連續(xù)氨基酸殘基，例如小于180個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于160個連續(xù)氨基酸殘 基，例如少于150個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于140個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于130個連 續(xù)氨基酸殘基，例如少于120個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于110個連續(xù)氨基酸殘基，例如少 于100個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于90個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于85個連續(xù)氨基酸殘 基，例如少于80個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于75個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于70個連續(xù)氨 基酸殘基，例如少于65個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于60個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于55個 連續(xù)氨基酸殘基，例如少于50個連續(xù)氨基酸殘基，例如少于45個連續(xù)氨基酸殘基，例如少 于40個連續(xù)氨基酸殘基，如35個連續(xù)氨基酸殘基，例如30個連續(xù)氨基酸殘基，如25個連 續(xù)的氨基酸殘基，如20個連續(xù)氨基酸殘基，例如15個連續(xù)的氨基酸殘基。
17. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述藥劑是生物活性片段，其中所述片段包含選 自由沈Q ID NO ;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、 50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63和64組成組的氨基酸序列中任一種的至 少15個連續(xù)氨基酸殘基，如大于20個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過25個連續(xù)氨基酸殘基，例 如大于50個連續(xù)氨基酸殘基，如超過75個連續(xù)氨基酸殘基，例如多于100個連續(xù)氨基酸殘 基，如大于125個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過150個連續(xù)氨基酸殘基，如大于175個連續(xù)氨 基酸殘基，例如超過200個連續(xù)氨基酸殘基，如大于225個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過250 個連續(xù)氨基酸殘基，如大于275個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過300個連續(xù)氨基酸殘基，如大 于325個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過350個連續(xù)氨基酸殘基，如大于375個連續(xù)氨基酸殘 基，例如超過400個連續(xù)氨基酸殘基，如大于425個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過450個連續(xù) 氨基酸殘基，如超過475個連續(xù)連續(xù)氨基酸殘基，例如大于500個連續(xù)氨基酸殘基，如大于 525個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過550個連續(xù)氨基酸殘基，如大于575個連續(xù)氨基酸氨基酸 殘基，例如大于600個連續(xù)氨基酸殘基，如大于625個連續(xù)氨基酸殘基，例如超過650個連 續(xù)氨基酸殘基，如大于675個連續(xù)氨基酸殘基，如大于700個連續(xù)氨基酸殘基。
18. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚是被糖基化的。
19. 根據(jù)權利要求18所述的藥劑，其中所述多膚在對應于SEQ ID NO;l的氨基酸位置 184、352、433、765、776、816、847、908和929的一或多個天冬酷胺氨基酸殘基被N糖基化。
20. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚包括下述序列中的一種或多 種： 沈Q ID NO ;laa 103-124 沈Q ID NO ;laa 125-143 沈Q ID NO ;laa 144-162 沈Q ID NO ;laa 197-218 沈Q ID NO ;laa 391-409 沈Q ID NO ;laa 661-684 沈Q ID NO ;laa 763-783 沈Q ID NO ;laa 859-876。
21. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中信號膚被異源信號膚取代。
22. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚能夠形成至少一個分子內(nèi)脫 氨酸橋。
23. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，包括通過至少一個分子內(nèi)脫氨酸橋連接的 所述多膚的二聚體。
24. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述多膚進一步包括親和標簽，例如多 聚組氨酸標簽、GST標簽、HA標簽、Flag標簽、C-myc標簽、服V標簽、V5標簽、麥芽糖結合蛋 白標簽、纖維素結合域標簽。
25. 根據(jù)權利要求1的藥劑，其中所述載體進一步包括有效地與所述核酸序列連接的 啟動子。
26. 根據(jù)權利要求25所述的藥劑，其中所述啟動子選自CMV、人化iC、RSV、Tet-可調(diào)控 啟動子、]?〇-]\〇^￥-1；11?、]\^1、6。-1〇、口〇6。0和〔3瓶11。
27. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述載體選自源自逆轉錄病毒科家族的載體，包 括慢病毒、HIV、SIV、FIV、EAIV、CIV。
28. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述載體選自腺相關病毒、腺病毒、甲病毒、桿狀 病毒、單純瘤疹病毒、冠狀病毒、牛乳頭狀瘤病毒、M〇-MLV、
29. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述載體是腺相關病毒AAV。
30. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述宿主細胞選自釀酒酵母、大腸桿菌、曲霉和 昆蟲細胞如Sf9昆蟲細胞。
31. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述宿主細胞選自人、貓科、豬、猿類、犬科、小鼠 和大鼠細胞的哺乳動物細胞。
32. 根據(jù)權利要求31所述的藥劑，其中所述哺乳動物細胞選自肌肉細胞、肝細胞、脂肪 細胞和膜腺細胞、如a細胞、0細胞和5細胞。
33. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述宿主細胞選自CHO、CH0-K1、肥I193T、 肥K293、COS、PC12、HiB5、RN33b 和 BHK 細胞。
34. 根據(jù)權利要求1所述的藥劑，其中所述受試者沒有罹患膜島素抵抗和/或2型糖尿 病。
35. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑被化學修飾W在給予患者時 增加半衰期，特別是其血漿半衰期。
36. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑被化學修飾W在給予患者時 增加半衰期，特別是其血漿半衰期。
37. 根據(jù)前面任一項權利要求所述的藥劑，其中所述藥劑進一步包括與所述藥劑綴合 的基團，由此產(chǎn)生基團-綴合藥劑。
38. 根據(jù)權利要求37所述的藥劑，其中所述基團-綴合藥劑的血漿和/或血清半衰期 大于非基團-綴合藥劑的血漿和/或血清半衰期。
39. 根據(jù)權利要求37所述的藥劑，其中所述基團促進跨血腦屏障的運輸。
40. 根據(jù)權利要求37所述的藥劑，其中所述基團是來自駱駝科動物物種的抗體，例如 來自單峰駱駝、駱駝、美洲駝、羊駝、駝馬、或原駝的重組或天然的單鏈抗體。
41. 根據(jù)權利要求37-40中任一項所述的藥劑，其中綴合于所述藥劑的基團是選自白 蛋白、脂肪酸、聚己二醇（PEG)、酷化基團、抗體和抗體片段組成組中的基團的一種或多種。
42. 根據(jù)權利要求37-41中任一項所述的藥劑，其中所述藥劑與所述基團通過接頭彼 此綴合。
43. 根據(jù)權利要求37-41中任一項所述的藥劑，其中一個W上的基團綴合于所述藥劑。
44. 根據(jù)權利要求42和43中任一項所述的藥劑，其中所述接頭是具有選自SEQ ID NO ; 65、66、67、68和69的氨基酸序列的膚。
45. -種藥物組合物，包括前面任一項權利要求所述的藥劑。
46. 根據(jù)權利要求45所述的藥物組合物，進一步包括藥學上可接受的載體。
47. 根據(jù)權利要求45和46中任一項所述的藥物組合物，其中所述組合物的抑為抑4 和抑10之間。
48. 根據(jù)權利要求45-47中任一項所述的藥物組合物，其中所述組合物配置成胃腸外 給藥。
49. 根據(jù)權利要求45-47中任一項所述的藥物組合物，其中所述組合物配置成口服給 藥。
50. 根據(jù)權利要求48所述的藥物組合物，其中所述胃腸外給藥是通過注射。
51. 根據(jù)權利要求48和49中任一項所述的藥物組合物，其中所述給藥是靜脈內(nèi)、肌肉 內(nèi)、脊柱內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、推注或連續(xù)給藥。
52. 根據(jù)權利要求45至51中任一項所述的藥物組合物，其中所述給藥W 30分鐘至24 小時的間隔進行，例如W 1至6小時的間隔，例如一天S次。
53. 根據(jù)權利要求45至52中任一項所述的藥物組合物，其中治療的持續(xù)期為6至72 小時。
54. 根據(jù)權利要求45至52中任一項所述的藥物組合物，其中治療的持續(xù)期為24小時 至7天。
55. 根據(jù)權利要求45至52中任一項所述的藥物組合物，其中治療的持續(xù)期為4天至 150 天。
56. 根據(jù)權利要求45至52中任一項所述的藥物組合物，其中治療的持續(xù)期為終生。
57. 根據(jù)權利要求35至43中任一項所述的藥物組合物，其中活性成分的劑量為每kg 體重10 y g至500mg之間，例如每kg體重50 y g至250mg之間。
58. -種試劑盒，包括根據(jù)權利要求45至57中任一項所述的藥物組合物，W及使用說 明書。
59. -種選自下組的藥劑； a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ;15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞， 在制備用于降低食欲，和/或用于促進減重和/或增加代謝，和/或增加產(chǎn)熱，和/或 將白色脂肪轉化為褐色脂肪的的藥物中的應用。
60. -種用于降低食欲，和/或促進減重和/或增加代謝，和/或增加產(chǎn)熱，和/或將白 色脂肪轉化為褐色脂肪的方法，所述方法包括向有需要的受試者給予治療有效量的選自下 組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ;15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
61. -種治療肥胖癥的方法，所述方法包括向有需要的受試者給予治療有效量的選自 下組的藥劑： a)分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ;15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b)編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
62. -種增加代謝的方法，所述方法包括向有需要的受試者給予治療有效量的選自下 組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ; 15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
63. -種增加哺乳動物產(chǎn)熱的方法，所述方法包括向哺乳動物給予治療有效量的選自 下組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ;15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
64. -種將白色脂肪轉化為褐色脂肪的體內(nèi)方法，所述方法包括向哺乳動物給予治療 有效量的選自下組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQ ID NO ; 15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
65.-種將白色脂肪轉化為褐色脂肪的體外方法，所述方法包括向使細胞接觸有效量 的選自下組的藥劑： a) 分離的多膚，包括： USEQIDNO;15的氨基酸序列；或 ii)i)的氨基酸序列的生物活性序列變體，其中，所述變體與所述SEQIDNO;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一項的至少15個連續(xù)氨基酸的生物學活性片段，所述片段與SEQID NO; 15在至少15個氨基酸的重疊范圍內(nèi)具有至少60%的序列同一性， b) 編碼在a)中所限定的多膚的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的載體， d)轉化或轉導有b)的核酸或C)的載體的分離的宿主細胞。
【文檔編號】A61K38/17GK104470532SQ201380032064
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2013年4月17日 優(yōu)先權日:2012年4月17日
【發(fā)明者】K-M·彼澤森, A·尼克爾, M·F·科爾比 申請人:奧胡斯大學