一種硫酸乙酰肝素十糖及其制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種硫酸乙酰肝素十糖及其制備方法，該硫酸乙酰肝素十糖能夠抑制癌細胞增殖活性,可以用于制備抗腫瘤藥物。本發(fā)明所述硫酸乙酰肝素十糖（HS10-11）結構序列如下。
【專利說明】一種硫酸乙酰肝素十糖及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種硫酸乙酰肝素十糖，其制備方法，及使用該硫酸乙酰肝素十糖在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]硫酸乙酰硫酸乙酰肝素(heparan sulfate, HS)是一類具電負性的線性多糖,在生物體內與核心蛋白連結形成硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)結構，其主要由不同硫酸基取代的β-1，4-葡萄糖醛酸(GlcA)和α-1，4-#-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)組成，此外還有(1-1，4-艾杜糖醛酸(1(1^)。研究發(fā)現，HS參與了機體的多種生理過程，在抗腫瘤、抗炎、抗病毒和防治阿爾茨海默病等方面顯現出了廣闊的應用前
旦
[0003]由于HS結構的復雜多樣性，人們對其發(fā)揮藥理活性的具體結構及其作用機制，還未完全了解透徹，還需要對HS中的各糖鏈進行精細分離和藥效研究。不同聚合度的HS寡糖可由化學、酶法等降解得到。目前，已有一些HS寡糖類似物具有抗腫瘤活性，例如SST0001、P1-88、PG454等具有抑制乙酰肝素酶的活性，該酶在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中有促進腫瘤轉移和血管生成的作用。
[0004]本發(fā)明用肝素酶II降解豬腸來源的HS，采用凝膠滲透色譜與強陰離子交換色譜法對HS寡糖混合物進行分離，制備了一種HS十糖，并對其抑制肝癌細胞增殖活性進行了研究，為其更深入的構效關系研究和寡糖藥物的開發(fā)奠定了重要的基礎，具有潛在的應用價值。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明公開了一種硫酸乙酰肝素十糖HSich11，其結構式如下:
【權利要求】
1.一種硫酸乙酰肝素十糖HSich11,其結構序列如下:
2.—種權利要求1的硫酸乙酰肝素十糖的制備方法: 步驟1:將HS用肝素酶II降解，加酶量為1.5 mU/mg~2.5 mU/mg，在4°C~37°C酶解8h~24 h，10 KDa超濾后得到低聚HS寡糖混合物； 步驟2:步驟I中得到的低聚HS寡糖混合物用柱層析法分離，分離后獲得二、四、六、八、十和十二糖及較高聚合度的HS寡糖； 步驟3:步驟2中得到的HS十糖用陰離子交換色譜法分離，收集液濃縮脫鹽后得到一種HS十糖。
3.根據權利要求2的方法，其中所述步驟I的肝素酶II的加酶量為2.0mU/mg，在37°C酶解24 ho
4.根據權利要求2的方法，其中所述步驟2的低聚HS寡糖混合物用0.2mol.L-1NH4HCO3作為流動相，在Bio-Gel P-1O凝膠層析柱上分離。
5.根據權利要求2的方法，其中所述步驟3的HS十糖在CarboPacPAl色譜柱上進行分離。
6.權利要求1所述的硫酸乙酰肝素十糖在制備抗腫瘤藥物中的應用。
7.—種藥物組合物，其中含有權利要求1的硫酸乙酰肝素十糖及藥學上可接受的載體。
【文檔編號】A61P35/00GK103788232SQ201310714017
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2013年12月23日 優(yōu)先權日:2013年12月23日
【發(fā)明者】張紫恒, 張攀, 馬小來, 李鋰 申請人:深圳市海普瑞藥業(yè)股份有限公司