一種難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法
【專利摘要】本方法屬于藥物制備領(lǐng)域，特別涉及一種難溶性藥物脂質(zhì)體的制備方法。本發(fā)明采用分開制備不帶藥物的空白脂質(zhì)體，與藥物懸浮液或藥物溶液，隨后在一定溫度、一定轉(zhuǎn)速條件下混合空白脂質(zhì)體與藥物，經(jīng)此方法制得難溶性藥物脂質(zhì)體，其包封率≥90%，平均粒徑≤150nm。本發(fā)明采用常規(guī)工藝設(shè)備，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，方法工藝簡單、成本低，解決了難溶性藥物脂質(zhì)體難于工業(yè)化的技術(shù)難題。
【專利說明】一種難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本方法屬于藥物制劑工藝領(lǐng)域，特別涉及一種難溶性藥物脂質(zhì)體制劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]脂質(zhì)體(Iiposome)是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中，脂質(zhì)體疏水尾部伸向空氣，攪動(dòng)后形成雙層脂分子的球形脂質(zhì)體，直徑25~1000nm不等。脂質(zhì)體可用于轉(zhuǎn)基因，或制備的藥物，利用脂質(zhì)體可以和細(xì)胞膜融合的特點(diǎn)，將藥物送入細(xì)胞內(nèi)部生物學(xué)定義:當(dāng)兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時(shí)，分子的疏水尾部傾向于聚集在一起，避開水相，而親水頭部暴露在水相，形成具有雙分子層結(jié)構(gòu)的的封閉囊泡，稱為脂質(zhì)體。
[0003]脂質(zhì)體是一種含磷脂組分的微粒，可作為難溶性藥物的載體，是一種新型藥物制劑。含藥脂質(zhì)體經(jīng)靜脈給藥后，主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，改變被包封藥物的體內(nèi)分布，從而提高藥物的治療指數(shù)，可減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。[0004]脂質(zhì)體按結(jié)構(gòu)和粒徑可分為:單室脂質(zhì)體、多室脂質(zhì)體；脂質(zhì)體按性能可分為:一般脂質(zhì)體(包括上述單室脂質(zhì)體、多室脂質(zhì)體和多相脂質(zhì)體等)、特殊性能脂質(zhì)體、熱敏脂質(zhì)體、pH敏感脂質(zhì)體、超聲波敏感脂質(zhì)體、光敏脂質(zhì)體和磁性脂質(zhì)體等；脂質(zhì)體按荷電性可分為:中性脂質(zhì)體、負(fù)電性脂質(zhì)體、正電性脂質(zhì)體。
[0005]到本專利申請為止，國內(nèi)外研究(專利CN101385715B、CN101507708B、CN1092044C、CN1236771C、CN100356919C)難溶性藥物制成脂質(zhì)體的方法基本所謂的被動(dòng)載藥方式，即都是將難溶性藥物與磷脂混合在一起，然后成膜，擠壓最終制成脂質(zhì)體。為了使最終產(chǎn)品的粒徑符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，需要多次擠壓，在此過程中容易導(dǎo)致藥物的降解、雜質(zhì)超標(biāo)。一般來說這種工藝所得到的產(chǎn)品包封率都不是太高；而且成膜工藝難以控制，使得工業(yè)化成為困難。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是:現(xiàn)有技術(shù)中，采用被動(dòng)載藥方式，制備難溶性藥物脂質(zhì)體時(shí)，包封率低，工藝復(fù)雜且難以控制。
[0007]為解決這一技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
[0008]本發(fā)明首次采用主動(dòng)載藥的方式對難溶性藥物進(jìn)行包封，本發(fā)明預(yù)先制備不含活性物的空白脂質(zhì)體，然后再制備難溶性藥物的懸浮液或溶液，在一定溫度和攪拌速率下將兩者混合，混合體系由渾濁狀轉(zhuǎn)變成透明或半透明狀即成。
[0009]這里所說的難溶性藥物為，在100g水中溶解度低于0.1g的藥物，包括阿德福韋酯、多西他賽、喜樹堿、甲基多巴、雙香豆素、安魯米特、紫杉醇、安妥明、硝苯地平、甲苯磺丁脲、降糖靈、利福霉素、硫唑嘌啉、依托泊甙、灰黃霉素、法莫替丁，環(huán)胞素、甲氨喋呤、伊曲康唑、潘生丁、6-巰基嘌呤、胺碘酮、兩性霉素B等。
[0010]上述方法包括以下步驟:[0011]A、制備空白脂質(zhì)體，并將空白脂質(zhì)體的平均粒徑控制在納米尺寸；
[0012]B、制備難溶性藥物溶液，或制備難溶性藥物的懸浮液；
[0013]C、將步驟A中得到的空白脂質(zhì)體，與步驟B中得到的難溶性藥物懸浮液或溶液混合，制得含藥脂質(zhì)體。
[0014]步驟A中，空白脂質(zhì)體的制備方法，包括薄膜超聲法、注入法、逆向蒸發(fā)法、熔融法、冷凍干燥法、超聲分散法、多相制備法等，
[0015]具體地說:步驟A中，磷脂和附加劑，在熱熔條件或加有機(jī)溶劑條件下制備空白脂質(zhì)體，經(jīng)緩沖液水化，通過機(jī)械方法將空白脂質(zhì)體平均粒徑控制在納米尺寸(優(yōu)選平均粒徑在150nm以下)，其中磷脂按重量百分比占體系的0.1~50%，
[0016]其中，附加劑包括，膽固醇、維生素E、十八胺、磷酸二鯨蠟脂、大豆油、莧生油或橄欖油等；磷脂包括天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂或其混合物，例如磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、二月桂磷脂酰膽堿、二肉豆蘧酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂酸、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、卵磷脂、大豆磷脂、天然或合成的腦憐脂、心憐脂等。
[0017]步驟B中，將難溶性藥物分散于有機(jī)溶劑或緩沖液中，通過機(jī)械方法控制藥物顆粒為細(xì)粉末狀態(tài)(優(yōu)選平均粒徑在5 μ m以下)。
[0018]上述內(nèi)容中，步驟A或步驟B中，空白脂質(zhì)體、難溶性藥物懸浮液或溶液制備中，所述的機(jī)械方法，包括球磨法、氣流粉碎法、高速剪切法、高壓均質(zhì)法、高壓擠出法；
[0019]步驟A或步驟 B中，緩沖液可用單糖、雙糖、多糖或其混合物配制來保護(hù)脂質(zhì)體，同時(shí)還可以添加其他緩沖離子對、抗氧劑、表面活性劑來增強(qiáng)難溶性藥物分散性和脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，如含有組氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、甘露醇、蔗糖、乳糖、葡萄糖、海藻糖、阿拉伯膠、木糖醇、山梨醇、果糖中一種或幾種的緩沖溶液；表面活性劑為聚氧乙烯類非離子表面活性劑、泊洛沙類非離子型表面活性劑、芳澤類聚氧乙烯型非離子表面活性劑或其混合物，
[0020]步驟A或步驟B中，機(jī)溶劑選自，乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、叔丁醇、氯仿、二氯甲烷、二甲亞砜、甲酰胺中一種或幾種的混合物。
[0021]本發(fā)明步驟C中反應(yīng)溫度范圍是O~100°C，攪拌轉(zhuǎn)速為O~50000rpm，步驟C所得載藥脂質(zhì)體中可能存在部分有機(jī)溶劑，本發(fā)明采用交叉切向流技術(shù)置換原載藥脂質(zhì)體溶液。成品中有機(jī)溶劑的殘留量控制在5% (重量分?jǐn)?shù))以下。
[0022]本發(fā)明最后制得的成品脂質(zhì)體制劑，經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾除菌，包裝或冷凍保存。
[0023]大概的制備工藝流程圖如附圖1所示，本發(fā)明依據(jù)上圖事宜，優(yōu)選采用乙醇注入制備空白脂質(zhì)體后，通過高壓微射流將脂質(zhì)體粒徑降低至150nm以下，便于工業(yè)化除菌，備用。將難溶性藥物通過有機(jī)溶劑溶解或?qū)㈦y溶性藥物分散于含有表面活性劑的緩沖液中，形成平均粒徑低于5μ m的混懸液。將上述兩種溶液按比例混合，攪拌，待體系由渾濁變成半透明或透明液時(shí)，停止攪拌，無菌過濾、灌裝保存或凍干保存。
[0024]本發(fā)明優(yōu)選注入法制備空白脂質(zhì)體因?yàn)橛邢铝性?可工業(yè)化，乙醇有機(jī)溶劑對環(huán)境、對人體毒性較低；乙醇注入法制得脂質(zhì)體后乙醇去除工藝可靠。
[0025]本發(fā)明的有益效果在于:
[0026]難溶性藥物制成懸浮液或溶液后，物理性質(zhì)有較大的改變，一旦加入空白脂質(zhì)體內(nèi)后，難溶性藥物顆粒，更容易進(jìn)入脂質(zhì)體，同時(shí)脂質(zhì)體磷脂膜的流動(dòng)性，使得難溶顆粒能夠更好進(jìn)入脂質(zhì)體膜層或內(nèi)部，從而達(dá)到高于90%的包封率。形成難溶性藥物也用“主動(dòng)載藥”方式進(jìn)行全封。
[0027]本發(fā)明首次采用主動(dòng)載藥的方式對難溶性藥物進(jìn)行包封，在脂質(zhì)體與藥物混合后，無需再次通過高壓剪切技術(shù)即可形成可以通過無菌過濾的脂質(zhì)體制劑。將解決脂質(zhì)體生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵問題:多次擠壓導(dǎo)致藥物降解、雜質(zhì)超標(biāo)等問題；可實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體制劑大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)，同時(shí)避免使用更多的有機(jī)溶劑。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0028]圖1是本發(fā)明的工藝流程圖。
[0029]圖2是實(shí)施例1中，空白脂質(zhì)體的粒徑圖。
[0030]圖3是實(shí)施例1中，包裹有紫杉醇的脂質(zhì)體的粒徑圖。
[0031]圖4是實(shí)施例1中，凍干復(fù)融后，紫杉醇脂質(zhì)體粒徑圖。
[0032]圖5是對比實(shí)施例1中，凍干復(fù)融后，紫杉醇脂質(zhì)體粒徑圖。
[0033]圖6是對比實(shí)施例2中，凍干復(fù)融后，兩性霉素B脂質(zhì)體粒徑圖。
【具體實(shí)施方式】
[0034]以下實(shí)施例中所涉及到的，脂質(zhì)體中藥物含量采用HPLC法測定；粒徑采用激光儀測定；包封率測試方法如下:
[0035]柱活化:取凝膠柱G50輕敲讓填料至管底，去紅色帽蓋并放入2ml離心管中，加入500 μ I水，30min后以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，棄濾液后，再加入500 μ I水，15min后以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，棄濾液后加0.9%氯化鈉溶液500 μ I以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，棄濾液，再離心5min，更換離心管備用。
[0036]取樣品適量，加水制成每Iml溶液中含紫杉醇為2mg的懸浮液。
[0037]精密量取懸浮液200 μ I至活化好的凝膠柱上，等10分鐘后，以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，再加入500 μ I水于凝膠柱上以8000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，合并濾液至IOml容量瓶中，用醋酸:甲醇(1:200)洗滌離心管3次并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，加用醋酸:甲醇(1:200)溶解后轉(zhuǎn)移溶解并定容至刻度，搖勻，采用HPLC法測定，精密量取10 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，峰面積記為Αβ--。
[0038]上述凝膠柱再依次以25%乙醇2ml、50%乙醇2ml、無水乙醇4ml分次離心洗脫,洗脫液全部轉(zhuǎn)移至另一 IOml容量瓶中，無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，采用HPLC法測定，精密量取10 μ I注入液相色譜儀,記錄色譜圖，峰面積記為K.。
[0039]精密量取懸浮液200 μ I至IOml容量瓶中，加醋酸:甲醇(1:200)稀釋至刻度，搖勻，照含量測定項(xiàng)下的色譜方法，精密量取10 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖，峰面積記
為A總藥物。
[0040]按照公式計(jì)算包封率和柱回收率:
[0041]
包封率%=-包土寸謝勿-1 Q0O/
包封藥物+游離藥物
[0042]
【權(quán)利要求】
1.一種難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的方法為，預(yù)先制備空白脂質(zhì)體，然后再制備難溶性藥物的懸浮液或溶液，將兩者混合，混合體系由渾濁狀轉(zhuǎn)變成透明或半透明狀即成。
2.如權(quán)利要求1中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的方法包括以下步驟: A、制備空白脂質(zhì)體,并將空白脂質(zhì)體的平均粒徑控制在納米尺寸； B、制備難溶性藥物溶液，或制備難溶性藥物的懸浮液； C、將步驟A中得到的空白脂質(zhì)體，與步驟B中得到的難溶性藥物懸浮液或溶液混合，制得含藥脂質(zhì)體。
3.如權(quán)利要求2中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:步驟A中，磷脂和附加劑，在熱熔條件或加有機(jī)溶劑條件下制備空白脂質(zhì)體，經(jīng)緩沖液水化，通過機(jī)械方法將空白脂質(zhì)體平均粒徑控制在納米尺寸。
4.如權(quán)利要求2中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:步驟B中，將難溶性藥物分散于有機(jī)溶劑或緩沖液中，通過機(jī)械方法控制藥物顆粒為細(xì)粉末狀態(tài)。
5.如權(quán)利要求2中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:步驟A中，通過機(jī)械方法，將空白脂質(zhì)體的平均粒徑控制在150nm以下；步驟B中，通過機(jī)械方法，將難溶藥物顆粒的平均粒徑控制在5 μ m以下。
6.如權(quán)利要求1中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的難溶性藥物為，在100g水中溶解度低于0.1g的藥物。`
7.如權(quán)利要求6中所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的難溶性藥物包括，阿德福韋酯、多西他賽、喜樹堿、甲基多巴、雙香豆素、安魯米特、紫杉醇、安妥明、硝苯地平、甲苯磺丁脲、降糖靈、利福霉素、硫唑嘌啉、依托泊甙、灰黃霉素、法莫替丁，環(huán)胞素、甲氨喋呤、伊曲康唑、潘生丁、6-巰基嘌呤、胺碘酮、兩性霉素B。
8.如權(quán)利要求3、4、5任一項(xiàng)所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:空白脂質(zhì)體、難溶性藥物懸浮液或溶液制備中，所述的機(jī)械方法，包括球磨法、氣流粉碎法、高速剪切法、高壓均質(zhì)法、高壓擠出法。
9.如權(quán)利要求3或4所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的緩沖液為，含有組氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、甘露醇、蔗糖、乳糖、葡萄糖、海藻糖、阿拉伯膠、木糖醇、山梨醇、果糖中一種或幾種的緩沖溶液。
10.如權(quán)利要求3或4所述的難溶性藥物脂質(zhì)體制備方法，其特征在于:所述的機(jī)溶劑選自，乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、異丙醇、叔丁醇、氯仿、二氯甲烷、二甲亞砜、甲酰胺中一種或幾種的混合物。
【文檔編號(hào)】A61K9/127GK103622911SQ201310585359
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月19日
【發(fā)明者】賀明, 朱瑤俊, 周鋼, 賀欣 申請人:常州金遠(yuǎn)藥業(yè)制造有限公司