腸胃外注射用肽藥物的穩(wěn)定制劑的制作方法
【專利摘要】提供腸胃外注射用肽藥物的穩(wěn)定制劑以及使用這類穩(wěn)定制劑的方法。具體地，本發(fā)明提供腸胃外注射用胰高血糖素的穩(wěn)定制劑以及使用這類胰高血糖素制劑治療低血糖癥，尤其是緊急情況下嚴(yán)重的低血糖癥的方法。
【專利說明】腸胃外注射用肽藥物的穩(wěn)定制劑
[0001]相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002]本申請(qǐng)要求2011年3月10號(hào)提交的名稱為“腸胃外注射用肽藥物的穩(wěn)定制劑”的美國臨時(shí)申請(qǐng)61/451，568號(hào)、2011年4月25號(hào)提交的名稱為“腸胃外注射用肽藥物的穩(wěn)定制劑”的美國臨時(shí)申請(qǐng)61/478，692號(hào)、2011年10月31號(hào)提交的名稱為“用于糖尿病的治療的制劑”的美國臨時(shí)申請(qǐng)61/553，388號(hào)和2012年3月9號(hào)提交的名稱為“用于糖尿病的治療的制劑”的美國臨時(shí)申請(qǐng)61/609，123號(hào)的優(yōu)先權(quán)和利益，所述美國臨時(shí)申請(qǐng)的全部公開內(nèi)容在本文中通過引用并入用于所有目的。
[0003]關(guān)于在聯(lián)邦資助的研究或開發(fā)下完成的發(fā)明權(quán)的聲明不適用
[0004]參考“序列表”、表格或者在光盤上提交的計(jì)算機(jī)程序表附件不適用
發(fā)明領(lǐng)域
[0005]本發(fā)明涉及藥物制劑，更具體地涉及具有改進(jìn)穩(wěn)定性的肽的藥物制劑，以及使用這類藥物制劑治療各種疾病、病癥和病況的方法。
[0006]發(fā)明背景
[0007]糖尿病在現(xiàn)代社會(huì)中是嚴(yán)重的健康問題。胰島素對(duì)于I型和II型糖尿病都是關(guān)鍵的治療劑。過去二十年的研究證實(shí)通過使用胰島素對(duì)葡萄糖的嚴(yán)格代謝控制不僅降低了發(fā)生率，而且延遲患有I型和2型糖尿病的人的并發(fā)癥的發(fā)展。不幸地，實(shí)現(xiàn)嚴(yán)格葡萄糖控制所需要的密集的胰島素治療還與發(fā)展的低血糖癥或“低血糖”顯著增加的風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。
[0008]低血糖癥的癥狀在患者之間有很大不同，但是一般包括震顫、心悸、易激惹、焦慮、神經(jīng)質(zhì)、饑餓、心動(dòng)過速、頭痛和蒼白。一旦血糖恢復(fù)到正常水平，癥狀一般就會(huì)消退。如果低血糖癥沒有逆轉(zhuǎn)，血糖的進(jìn) 一步降低會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)低糖癥狀，例如難以集中精神、口齒不清、視力模糊、體溫降低、行為改變以及如果未治療導(dǎo)致的失去知覺、癲癇和可能死亡相關(guān)的葡萄糖的消耗。
[0009]通常，低血糖癥可以如以下定義為較輕的至中等的低血糖癥或嚴(yán)重的低血糖癥:
[0010]較輕的至中等的低血糖癥:不管癥狀的嚴(yán)重程度患者可以自我治療的發(fā)作，或者其中血糖水平低于70mg/dL (3.9毫摩爾/升)任何無癥狀的血糖測(cè)量。
[0011]嚴(yán)重的低血糖癥:操作上定義為患者不能自我治療而需要外部幫助的低血糖癥的發(fā)作。一般地，神經(jīng)低糖癥狀和認(rèn)知損傷在血糖水平大約為50mg/dL (2.8毫摩爾/升)時(shí)開始。
[0012]較輕至中等的低血糖癥的大部分發(fā)作可以通過攝取快速作用的糖類例如葡萄糖片或食物(果汁、軟飲料或甜的零食)相對(duì)容易地自我治療。按照定義，嚴(yán)重的低血糖癥不能自我治療，從而需要外部介入。如果患者可以吞咽并且是合作的，那么適合使用凝膠劑或產(chǎn)品例如蜂蜜或果凍放置到面頰內(nèi)部。如果患者不能吞咽，那么使用皮下或肌內(nèi)注射的胰高血糖素來治療嚴(yán)重的低血糖癥。
[0013]胰高血糖素是天然存在的29個(gè)氨基酸長并由胰腺的α細(xì)胞分泌的肽激素。胰高血糖素的主要功能是通過糖原分解和糖原異生兩者維持葡萄糖產(chǎn)生，主要由肝介導(dǎo)。胰高血糖素是主要的胰島素反調(diào)節(jié)激素，并用作糖尿病的患者的嚴(yán)重低血糖癥的一線治療劑。
[0014]已經(jīng)進(jìn)行了許多嘗試以開創(chuàng)用于治療緊急情況下的嚴(yán)重低血糖癥的胰高血糖素救護(hù)藥物。當(dāng)前，在美國目前可用的有兩種胰高血糖素試劑盒，由Eli Lilly (GlucagonEmergency Kit)和 Novo Nordisk (GlucaGen ? HypoKit)制造。兩種產(chǎn)品都將冷凍干燥的胰高血糖素的小瓶與預(yù)裝滿水稀釋液的注射器組合。冷凍干燥的胰高血糖素必須采用在緊急情況下難以使用的復(fù)雜步驟來重構(gòu)。這些產(chǎn)品還提供大體積注射，這是因?yàn)橐雀哐撬仉y溶于水。最近，已經(jīng)進(jìn)行嘗試以改進(jìn)胰高血糖素在水溶液中的穩(wěn)定性，以開創(chuàng)更穩(wěn)定的胰高血糖素類似物和/或改進(jìn)經(jīng)粉末注射的胰高血糖素的遞送。
[0015]盡管已經(jīng)取得了一些進(jìn)展，但是仍然需要用于治療緊急情況下的嚴(yán)重低血糖癥的更加用戶友好的胰高血糖素救護(hù)藥物。這種胰高血糖素救護(hù)藥物會(huì)需要由糖尿病患者和/或其照顧者連續(xù)攜帶，從而會(huì)需要在非冷凍溫度(25-30°C )下是長時(shí)間(>2年)穩(wěn)定的。理想地，其還會(huì)需要對(duì)于普通人群易于施用，并且在施用于低血糖癥患者之前不需要過多的處理/重構(gòu)。胰高血糖素救護(hù)藥物還會(huì)需要在一定溫度范圍內(nèi)，包括從0°C至30°C的溫度范圍內(nèi)可以使用。
[0016]發(fā)明概述
[0017]為了解決這樣的需求和其他問題，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素救護(hù)制劑以及使用該穩(wěn)定的胰高血糖素制劑來治療嚴(yán)重的低血糖癥的方法。有利地，在本發(fā)明的制劑中胰高血糖素是穩(wěn)定化的，使得能夠長期存儲(chǔ)和/或長時(shí)間遞送。同樣地，本發(fā)明的胰高血糖素制劑在非冷凍溫度下長時(shí)間穩(wěn)定，易于施用而不需要重構(gòu)，以及在一定溫度范圍內(nèi)，包括從0°C至30°C的溫度范圍內(nèi)可以使用。
[0018]重要地，本發(fā)明的配制技術(shù)可以普遍適用于如胰高血糖素一樣在水環(huán)境中具有差的或有限的穩(wěn)定性和溶解度的許多其他的肽的遞送。實(shí)際上，目前清楚的是利用非質(zhì)子極性溶劑，例如DMSO、NMP,乙酸乙酯或其混合物將肽配制成高濃度的非水溶液對(duì)于這類重要的肽療法是有價(jià)值的遞送平臺(tái)。此外，本發(fā)明的配制技術(shù)可以普遍適用于在同一溶液中兩種或更多種肽的遞送。
[0019]因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，所述制劑包含:(a)肽或其鹽，其中所述肽已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的肽具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和6)非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
[0020]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，所述制劑包含:(a)第一肽或其鹽，其中所述第一肽已經(jīng)在第一非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的第一肽具有約等于所述第一肽在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶；(b)第二肽或其鹽，其中所述第二肽已經(jīng)在第二非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的第二肽具有約等于第二肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶JP(C)非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，其中當(dāng)干燥的第一肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第一肽保持約等于第一肽在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，并且其中當(dāng)干燥的第二肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第二肽保持約等于第二肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 PH記憶。[0021]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，所述制劑包含:肽或其鹽(例如其鹽酸鹽或乙酸鹽)；和非質(zhì)子極性溶劑，其中制劑的水分含量小于5%。
[0022]本文所描述的穩(wěn)定制劑對(duì)在水環(huán)境中具有有限的或差的穩(wěn)定性或溶解度的任何肽的腸胃外注射有用。因此，在一些實(shí)施方案中，肽(第一肽和第二肽的每一種)或其鹽選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素(cholecystikinin)、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽是胰高血糖素或胰高血糖素類似物或胰高血糖素肽模擬物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，肽是甲狀旁腺素。在又一實(shí)施方案中，肽是亮丙瑞林。在再一實(shí)施方案中，肽是格拉默。在又一實(shí)施方案中，第一肽是普蘭林肽，第二肽是胰島素。在再一實(shí)施方案中，第一肽是胰高血糖素，第二肽是艾塞那肽。
[0023]肽(或在制劑包含兩種或更多種肽的實(shí)施方案中的每種肽)與非揮發(fā)性緩沖劑混合并干燥成干燥的肽粉。合適的非揮發(fā)性緩沖劑包括但不限于甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖齊U。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑的混合物。在其中制劑包含兩種或更多 種肽的一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。在其中制劑包含兩種或更多種肽的一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。
[0024]在本發(fā)明的一些制劑中，肽與非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑混合，然后干燥成干燥的肽粉。合適的穩(wěn)定化賦形劑包括但不限于糖、淀粉及其混合物。在一些實(shí)施方案中，糖是海藻糖。在一些實(shí)施方案中，淀粉是羥乙基淀粉(HES)。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑以約 1% (w/v)到約 60% (w/v)、從約 1% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 1% (w/v)到約 40%(w/v)、從約 1% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 1% (w/v)到約 20% (w/v)、從約 5% (w/v)到約60% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 20% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 60% (w/v)、從約 10%(w/v)到約 50% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 30% (w/v)、從約10% (w/v)到約20% (w/v)的量存在于制劑中。在其中制劑包含兩種肽的一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的第一肽和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的第二肽都進(jìn)一步包含穩(wěn)定化賦形劑，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的第一肽的穩(wěn)定化賦形劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的第二肽的穩(wěn)定化賦形劑相同。在其中制劑包含兩種肽的其他實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的第一肽和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的第二肽都進(jìn)一步包含穩(wěn)定化賦形劑，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的第一肽的穩(wěn)定化賦形劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的第二肽的穩(wěn)定化賦形劑不同。
[0025]一旦一種或更多種肽和非揮發(fā)性緩沖劑或者肽、非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑干燥成粉末，干燥的肽粉在非質(zhì)子極性溶劑中溶解或重構(gòu)。非質(zhì)子極性溶劑的實(shí)例包括但不限于以下溶劑:二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)、碳酸丙二醇酯及其混合物。二甲基亞砜(DMS0)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及DMSO、NMP和乙酸乙酯中一種或更多種的混合物是尤其優(yōu)選的非質(zhì)子極性溶劑。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMSO。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMSO和NMP的混合物。在又一優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMSO和乙酸乙酯的混合物。
[0026]在一些實(shí)施方案中，一種或更多種肽在非質(zhì)子極性溶劑(例如二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)、碳酸丙二醇酯或其混合物)的混合物和降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑中重構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，共溶劑使制劑的凝固點(diǎn)降低至少約5°C、至少約10°C、至少約15°C或至少約20°C。在一些實(shí)施方案中，共溶劑使制劑的凝固點(diǎn)降低到約3°C、約2°C、約1°C或約0°C或更低。在一些實(shí)施方案中，共溶劑是極性質(zhì)子溶劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，共溶劑選自乙醇、丙二醇(PG)、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，共溶劑以約10% (w/v)到約50% (w/v)、從約10% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 25% (w/v)、從約 15%(w/v)到約 50% (w/v)、從約 15% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 15% (w/v)到約 30% (w/v)、從約15% (w/v)到約25% (w/v)的量存在于制劑中。
[0027]重要地，本發(fā)明的制劑具有非常少的殘留水分，因此這類制劑中的肽長時(shí)間保持穩(wěn)定。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明制劑的水分含量小于約4%、優(yōu)選小于約3%、優(yōu)選小于約2%，甚至更優(yōu)選小于約1%、優(yōu)選小于約0.5%、優(yōu)選小于約0.25%、優(yōu)選小于約0.2%、優(yōu)選小于約0.15%或優(yōu)選小 于約0.1%。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明制劑的水分含量為從約0.01%到約4%、優(yōu)選從約0.01%到約3%、優(yōu)選從約0.01%到約2%、優(yōu)選從約0.01%到約1%、優(yōu)選從約0.1%到約4%、優(yōu)選從約0.1%到約3%、優(yōu)選從約0.1%到約2%、優(yōu)選從約0.1%到約1%、優(yōu)選從約0.25%到約4%、優(yōu)選從約0.25%到約3%、優(yōu)選從約0.25%到約2%、優(yōu)選從約0.25%到約1%或優(yōu)選從約0.5%到約1%。
[0028]當(dāng)肽與非揮發(fā)性緩沖劑混合時(shí)，非揮發(fā)性緩沖劑選擇為使得肽在水環(huán)境中具有最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解的pH。一旦被干燥,肽就會(huì)具有最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解的PH記憶，并且當(dāng)在非質(zhì)子極性溶劑中溶解或重構(gòu)時(shí)會(huì)保留該pH記憶。同樣地，在優(yōu)選實(shí)施方案中，制劑中的肽會(huì)具有約2.0到約3.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在其他實(shí)施方案中，制劑中的肽會(huì)具有約3.0到約5.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在其他實(shí)施方案中，制劑中的肽會(huì)具有約4.0到約5.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在又一其他實(shí)施方案中,肽會(huì)具有約4.0到約6.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在又一其他實(shí)施方案中，肽會(huì)具有約6.0到約8.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在其中制劑包含兩種肽的一些實(shí)施方案中，第一肽具有約4.0到約6.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解，第二肽具有約1.5到約2.5或約6.0到約8.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在其中制劑包含兩種肽的一些實(shí)施方案中，第一肽具有約3.0到約5.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解，第二肽具有約1.5到約2.5或約6.0到約8.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。在其中制劑包含兩種肽的其他實(shí)施方案中，第一肽具有約2.0到約3.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解，第二肽具有約4.0到約5.0的pH記憶以確保最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解。如何確定用于獲得具有最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解的肽的最佳PH對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)是顯而易見的。[0029]可以在本發(fā)明的穩(wěn)定制劑中配制任何合適劑量的一種或更多種肽。通常地，肽(或在包含兩種或更多種肽的實(shí)施方案中的每種肽)以約0.5mg/mL到約100mg/mL的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，肽以約10mg/mL到約60mg/mL的量存在于制劑中。在其他實(shí)施方案中，肽以約20mg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在再一其他實(shí)施方案中，肽以約5mg/mL到約15mg/mL的量存在于制劑中。在又一其他實(shí)施方案中，肽以約0.5mg/mL到約2mg/mL的量存在于制劑中。在又一其他實(shí)施方案中，肽以約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。此外，肽的劑量可以根據(jù)所用的肽以及待治療的疾病、病況或病癥改變對(duì)技術(shù)人員會(huì)是顯而易見的。
[0030]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑還包含抗氧化劑。在其他實(shí)施方案中，制劑還包含螯合劑。在再一其他實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑還包含防腐劑。
[0031]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種用于治療可以通過對(duì)對(duì)象施用對(duì)治療、減輕或預(yù)防疾病、病癥或病況有效量的如本文所描述的穩(wěn)定肽制劑來治療、減輕或預(yù)防的疾病、病癥或病況的方法。在一些實(shí)施方案中，疾病、病癥或病況是低血糖癥。在其中疾病、病癥或病況是低血糖癥的一些實(shí)施方案中，方法包括施用對(duì)治療低血糖癥有效量的本發(fā)明的穩(wěn)定胰高血糖素制劑。在一些實(shí)施方案中，疾病、病癥或病況是糖尿病。在其中疾病、病癥或病況是糖尿病的一些實(shí)施方案中，方法包括施用對(duì)治療糖尿病有效量的本發(fā)明的穩(wěn)定的胰島素和普蘭林肽制劑。
[0032]在又一方面，本發(fā)明提供一種用于制備腸胃外注射用穩(wěn)定制劑的方法，所述方法包括:將肽和非揮發(fā)性緩沖劑干燥成干燥的肽粉；利用非質(zhì)子極性溶劑重構(gòu)干燥的肽粉，從而制備穩(wěn)定制劑，其中穩(wěn)定制劑的水分含量小于5%。在一些實(shí)施方案中,干燥的肽粉具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶，當(dāng)干燥的肽粉在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽粉保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
[0033]在再一方面，本發(fā)明提供用于治療疾病、病癥或病況的試劑盒，所述試劑盒包括:包含一種或更多種肽或其鹽的穩(wěn)定制劑，其中所述肽已經(jīng)在非揮發(fā)性緩沖劑中干燥，并且其中干燥的肽具有約等于肽 在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和用于對(duì)對(duì)象施用穩(wěn)定制劑的注射器。
[0034]在一些實(shí)施方案中，試劑盒用于治療低血糖癥，穩(wěn)定制劑包含如本文所描述的胰高血糖素制劑。在一些實(shí)施方案中，試劑盒用于治療糖尿病，穩(wěn)定制劑包含如本文所描述的胰島素和普蘭林肽制劑。在一些實(shí)施方案中，注射器是筆注射裝置、自動(dòng)注射器裝置或泵中的一些。在一些實(shí)施方案中，注射器預(yù)裝滿穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，試劑盒還包括說明書，其中所述說明書指導(dǎo)穩(wěn)定制劑的施用以治療有此需要的對(duì)象。
[0035]根據(jù)以下詳細(xì)說明和所附權(quán)利要求，本發(fā)明的其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)是顯而易見的。
[0036]附圖簡述
[0037]圖1示出了注射溶解于DMSO或NMP的冷凍干燥的胰高血糖素-甘氨酸-海藻糖后的血漿胰高血糖素水平。
[0038]圖2示出了注射溶解于DMSO或NMP的冷凍干燥的胰高血糖素-甘氨酸-海藻糖后的血糖水平。[0039]發(fā)明詳述
[0040]1.引言
[0041]肽可以通過許多不同的機(jī)理降解，包括脫酰胺基、氧化、水解、二硫互換和外消旋。此外，水作為塑化劑，其有利于蛋白質(zhì)分子的解折疊和不可逆的分子聚集。因此，為了提供在環(huán)境或生理溫度下隨時(shí)間穩(wěn)定的肽制劑，通常需要非水的或基本上非水的肽制劑。
[0042]將含水肽制劑濃縮成干粉制劑是一種增加藥物肽制劑穩(wěn)定性的方法。例如，肽制劑可以使用各種技術(shù)被干燥，包括噴霧干燥、凍干或冷凍干燥和脫水。通過這樣的技術(shù)獲得的干粉肽制劑顯示出顯著增加的在環(huán)境或甚至生理溫度下隨時(shí)間的穩(wěn)定性。
[0043]本發(fā)明部分地基于穩(wěn)定的肽制劑(例如穩(wěn)定的胰高血糖素救護(hù)制劑)可以通過首先將非揮發(fā)性緩沖劑中的一種或更多種肽(例如胰高血糖素肽)冷凍干燥成干燥的肽粉而容易地制備這一出人意料的發(fā)現(xiàn)。干燥的肽具有在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的PH的限定的“pH記憶”。一旦被干燥，產(chǎn)生的肽粉，例如冷凍干燥的胰高血糖素就溶解于非質(zhì)子極性溶劑中，從而形成穩(wěn)定制劑，其中制劑的水分含量小于5%、優(yōu)選小于4%、小于3%、小于2%、小于1%、小于0.5%、小于0.25%、小于0.15%或小于0.1%。當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，其保持其限定的PH記憶，即當(dāng)在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，肽的pH約等于在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的pH。有利地，一旦制得，制劑(例如胰高血糖素制劑)是長時(shí)間穩(wěn)定的，準(zhǔn)備好使用而不需重構(gòu)，并且在一定的溫度范圍內(nèi)可以使用。
[0044]重要地，本發(fā)明的配制技術(shù)可以普遍適用于如胰高血糖素一樣在水環(huán)境中具有差的或有限的穩(wěn)定性和溶解度的許多其他的肽的遞送。實(shí)際上，目前清楚的是利用非質(zhì)子極性溶劑(例如DMS0、NMP、乙酸乙酯或其混合物)將肽配制成高濃度的非水溶液對(duì)于這類重要的治療劑-治療肽是有非常有價(jià)值的遞送平臺(tái)。本文所描述的穩(wěn)定制劑有利地提高肽藥物的均勻遞送，并且提供額外的貯藏穩(wěn)定性以防止與降解途徑相關(guān)的聚集、氧化和水解。
[0045]在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本文所描述的穩(wěn)定制劑以穩(wěn)定形式長時(shí)間保存肽藥物，例如在足以提供希望 的制劑貯藏壽命而在使用前沒有不可接受程度的治療劑降解的時(shí)間段內(nèi)保存肽藥物。希望的可注射制劑的性質(zhì)是它們是非水的且對(duì)于肽來說是非反應(yīng)性的。在這類實(shí)施方案中，可以直接在注射裝置本身中存儲(chǔ)可注射制劑。
[0046]本發(fā)明的穩(wěn)定的可注射制劑包含必需的遞送劑量的治療肽(例如藥物治療所需的劑量)并優(yōu)選為小體積。例如，在一些實(shí)施方案中，包含治療劑量的肽(例如胰高血糖素)的可注射制劑的體積為至少約1.0微升(是裝填設(shè)備的功能的下限)，更優(yōu)選從約10毫升到約250微升。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，治療劑量的肽以小體積遞送通過在根據(jù)本發(fā)明的用于注射的合適的非質(zhì)子極性溶劑中濃縮穩(wěn)定形式的治療肽(例如胰高血糖素)的劑量來完成。
[0047]此外，本發(fā)明的穩(wěn)定制劑適合于不需要在注射前稀釋地施用。許多目前可用的治療肽和疫苗產(chǎn)品以固體顆粒的形式生產(chǎn)以提高在貨架上時(shí)的穩(wěn)定性。這些制劑在注射前在無菌水中、磷酸緩沖溶液或等滲鹽水中稀釋。比較而言，在本發(fā)明的某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，治療肽使用醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)通常采用的顆粒制備加工技術(shù)(例如噴霧干燥、凍干等)進(jìn)行濃縮以制備用于注射的制劑。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，治療劑量的肽藥物通過將首先已經(jīng)與非揮發(fā)性緩沖劑(和任選的額外的組分，例如穩(wěn)定化賦形劑)一起冷凍干燥的肽分散于具有非常少殘留水分含量的干粉來獲得。一旦制得，干燥的肽粉就溶解于非質(zhì)子極性溶劑，例如DMSO、NMP、乙酸乙酯或這些溶劑的混合物。因此，根據(jù)本發(fā)明的目標(biāo)，本發(fā)明的小體積、穩(wěn)定的制劑被注射、灌輸或者施用到動(dòng)物(例如人類患者)中，而不用如大部分重構(gòu)產(chǎn)品所需要的在注射前首先稀釋制劑。同樣地，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的小體積制劑是可施用的，而不用首先進(jìn)行稀釋或重構(gòu)或冷卻。
[0048]I1.定義
[0049]對(duì)于本公開，以下術(shù)語具有以下意思:
[0050]術(shù)語“治療劑”包含肽化合物連同其可藥用鹽。有用的鹽是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，包括與無機(jī)酸、有機(jī)酸、無機(jī)堿或有機(jī)堿的鹽。本發(fā)明中有用的治療劑是無論單獨(dú)或與其他藥物賦形劑或惰性成分組合，對(duì)人類或動(dòng)物施用后起希望的、有益的并且通常藥理學(xué)效果的那些肽化合物。
[0051]術(shù)語“肽”、“多肽”和/或“肽化合物”是指通過酰胺(CONH)鍵結(jié)合在一起的最多約80個(gè)氨基酸殘基的聚合物。本文公開的任何肽化合物的類似物、衍生物、激動(dòng)劑、拮抗劑和可藥用鹽包括在這些術(shù)語內(nèi)。該術(shù)語還包括具有D-氨基酸、D-或L-構(gòu)型的改性的、衍生化的或非天然存在的氨基酸和/或肽模擬物單元作為其結(jié)構(gòu)的一部分的肽和/或肽化合物。
[0052]術(shù)語“可藥用載體”表示可藥用溶劑、助懸劑或用于遞送本發(fā)明的肽化合物到哺乳動(dòng)物例如動(dòng)物或人類的載劑。在一個(gè)目前優(yōu)選的實(shí)施方案中，可藥用載體是非質(zhì)子極性溶劑。
[0053]術(shù)語“非質(zhì)子極性溶劑”表示不含有酸性氫并且不作為氫鍵供體的極性溶劑。非質(zhì)子極性溶劑的實(shí)例包括但不限于二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)和碳酸丙二醇酯。術(shù)語非質(zhì)子極性溶劑還包含兩種或更多種非質(zhì)子極性溶劑的混合物，例如二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)和碳酸丙二醇酯中的兩種或更多種的混合物。`
[0054]術(shù)語“可藥用”成分、賦形劑或組分是與合理的收益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱的適合對(duì)人類和/或動(dòng)物使用而沒有過度不利的副作用(例如毒性、刺激性和過敏反應(yīng))的成分、賦形劑或組分。
[0055]術(shù)語“化學(xué)穩(wěn)定性”表示關(guān)于治療劑，形成可接受百分比的通過化學(xué)途徑，例如氧化或水解所產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。具體地，如果在預(yù)期的產(chǎn)品儲(chǔ)存溫度(例如室溫)下儲(chǔ)存一年，或者產(chǎn)品在30°C /60%相對(duì)濕度下儲(chǔ)存一年，或者產(chǎn)品在40°C /75%相對(duì)濕度下儲(chǔ)存一個(gè)月，優(yōu)選三個(gè)月后形成不超過約20%的分解產(chǎn)物，那么認(rèn)為制劑是化學(xué)穩(wěn)定的。在一些實(shí)施方案中，化學(xué)穩(wěn)定的制劑具有在預(yù)期的產(chǎn)品儲(chǔ)存溫度下長時(shí)間儲(chǔ)存后所形成的小于20%、小于15%、小于10%、小于5%、小于4%、小于3%、小于2%或小于1%的分解產(chǎn)物。
[0056]術(shù)語“物理穩(wěn)定性”表示關(guān)于治療劑，形成可接受百分比的聚集體(例如二聚體、三聚體和更大形式)。具體地，如果在預(yù)期的產(chǎn)品儲(chǔ)存溫度(例如室溫)下儲(chǔ)存一年，或者產(chǎn)品在30°C /60%相對(duì)濕度下儲(chǔ)存一年，或者產(chǎn)品在40°C /75%相對(duì)濕度下儲(chǔ)存一個(gè)月，優(yōu)選三個(gè)月后形成不超過約15%的聚集體，那么認(rèn)為制劑是物理穩(wěn)定的。在一些實(shí)施方案中，物理穩(wěn)定的制劑具有在預(yù)期的產(chǎn)品儲(chǔ)存溫度下長時(shí)間儲(chǔ)存后所形成的小于20%、小于15%、小于10%、小于5%、小于4%、小于3%、小于2%或小于1%的聚集體。
[0057]術(shù)語“穩(wěn)定制劑”表示在室溫下儲(chǔ)存兩個(gè)月后剩下至少約65%的化學(xué)和物理穩(wěn)定的治療劑。特別優(yōu)選的制劑是其中在這些儲(chǔ)存條件下剩下至少約80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的化學(xué)和物理穩(wěn)定的治療劑的那些。尤其優(yōu)選的穩(wěn)定制劑是在消毒照射(例如Y射線、β射線或電子束)后不表現(xiàn)出降解的那些。
[0058]詞組“基本上由...組成”在本文使用以排除會(huì)明顯改變?cè)~組所指的穩(wěn)定制劑的基本性質(zhì)的任何要素。
[0059]術(shù)語“生物利用度”對(duì)于本發(fā)明限定為從制劑吸收治療劑，例如肽化合物的程度。
[0060]術(shù)語“系統(tǒng)的”表示關(guān)于治療劑，例如肽化合物對(duì)對(duì)象的遞送或施用，治療劑在對(duì)象的血漿中以生物顯著的水平可檢測(cè)的。
[0061]術(shù)語“控制釋放”對(duì)于本發(fā)明限定為治療劑在約一小時(shí)或更長，優(yōu)選12小時(shí)或更長的時(shí)間內(nèi)以使得血液(例如血漿)濃度保持在治療范圍內(nèi)，但是在中毒濃度以下的速度釋放。
[0062]術(shù)語“腸胃外注射”是指治療劑，例如肽化合物通過在動(dòng)物，例如人類的一層或更多層皮膚或粘膜下或者穿過動(dòng)物，例如人類的一層或更多層皮膚或粘膜的注射的施用。標(biāo)準(zhǔn)的腸胃外注射在動(dòng)物，例如人類患者的皮膚內(nèi)、皮下或肌肉內(nèi)的區(qū)域中進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，以深的位置作為目標(biāo)用于如本文所描述的治療劑的注射。
[0063]術(shù)語“治療”是指延遲術(shù)語所適用的疾病或病癥或者這種疾病或病癥的一種或更多種癥狀的發(fā)作，阻止或者逆轉(zhuǎn)術(shù)語所適用的疾病或病癥或者這種疾病或病癥的一種或更多種癥狀的發(fā)展，或者減輕或預(yù)防術(shù)語所適用的疾病或病癥或者這種疾病或病癥的一種或更多種癥狀。
[0064]術(shù)語“患者”、“對(duì)象”或“個(gè)體”可交換地指哺乳動(dòng)物，例如人類或非人類哺乳動(dòng)物，例如靈長類、狗、貓、牛、羊、豬、馬、小鼠、大鼠、倉鼠、兔或豚鼠。
[0065]II1.穩(wěn)定的肽制 劑
[0066]在一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑。有利地，一旦制得，制劑就是長時(shí)間穩(wěn)定的，準(zhǔn)備好使用而不需重構(gòu)，并且在一定的溫度范圍內(nèi)可以使用。此外，本發(fā)明的穩(wěn)定制劑對(duì)在水環(huán)境中具有有限的或差的穩(wěn)定性或溶解度的任何肽的腸胃外注射有用。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑例如通過防止或減少肽的聚集體的形成來增加制劑的肽的物理穩(wěn)定性。
[0067]在一些實(shí)施方案中，制劑包含:(a)肽或其鹽，其中所述肽已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的肽具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和(b)非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
[0068]在一些實(shí)施方案中，制劑包含:(a)第一肽或其鹽，其中所述第一肽已經(jīng)在第一非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的第一肽具有約等于所述第一肽在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶；(b)第二肽或其鹽，其中所述第二肽已經(jīng)在第二非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的第二肽具有約等于第二肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶JP(C)非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，其中當(dāng)干燥的第一肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第一肽保持約等于第一肽在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，并且其中當(dāng)干燥的第二肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第二肽保持約等于第二肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶。[0069]在一些實(shí)施方案中，制劑基本上由以下組分組成:(a)肽或其鹽，其中所述肽已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的肽具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的PH記憶；和(b)非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
[0070]A.肽
[0071]本發(fā)明的穩(wěn)定制劑包含一種、兩種、三種、四種或更多種肽或其鹽、類似物和/或混合物。適合于在本發(fā)明的制劑中使用的肽(以及其鹽)包括但不限于胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、黃體生成素釋放激素(LHRH)激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1),GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。在一些實(shí)施方案中，肽是鹽酸鹽或乙酸鹽。
[0072]在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽是胰高血糖素或胰高血糖素類似物或肽模擬物或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，肽是甲狀旁腺素。在又一實(shí)施方案中，肽是売丙瑞林。在再一實(shí)施方案中，妝是格拉默。在其他實(shí)施方案中，妝是糊精或糊精模擬物(例如普蘭林肽)。在再一其他實(shí)施方案中，肽是胰島素或胰島素類似物(例如Lispro)。在一些實(shí)施方案中，胰島素或胰島素類似物制劑是低鋅的或無鋅的制劑。
[0073]在一些實(shí)施方案中，制劑包含兩種肽，其中第一肽是糊精或糊精模擬物，第二肽是胰島素或胰島素類似物。在一些實(shí)施方案中，第一肽是普蘭林肽，第二肽是胰島素。在一些實(shí)施方案中，第一肽是普蘭林肽，第二肽是低鋅的胰島素制劑或無鋅的胰島素制劑。
[0074]在一些實(shí)施方案中，制劑包含兩種肽，其中第一肽是胰高血糖素，第二肽是胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)或GLP-1類似物或激動(dòng)劑(例如艾塞那肽)。在一些實(shí)施方案中，第一妝是膜聞血糖素，第二妝是GLP-1 ο在一些實(shí)施方案中，第一妝是膜聞血糖素，第二妝是艾塞那肽。
[0075]任何合適劑量的肽都可以利用本發(fā)明的制劑進(jìn)行施用。當(dāng)然，所施用的劑量根據(jù)已知因素改變，例如具體肽、鹽或其組合的藥效動(dòng)力學(xué)特性，對(duì)象的年齡、健康或體重，癥狀的本性和程度，治療劑和患者的代謝特性，同期治療的種類，治療的頻率，或希望的效果。通常地，肽(或其中穩(wěn)定制劑包含兩種或更多種肽的每種肽)以約0.5mg/mL到約100mg/mL (例如約 0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100mg/mL)的量存在于制劑中。
[0076]在一些實(shí)施方案中，肽以約0.5mg/mL到約60mg/mL的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，肽以約lOmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在其他實(shí)施方案中，肽以約20mg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在再一其他實(shí)施方案中，肽以約5mg/mL到約15mg/mL的量存在于所述制劑中。在又一其他實(shí)施方案中，肽以約0.5mg/mL到約2mg/mL的量存在于制劑中。此外，肽的劑量可以根據(jù)所用的肽以及待治療的疾病、病況或病癥改變對(duì)技術(shù)人員會(huì)是顯而易見的。
[0077]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽與非揮發(fā)性緩沖劑和任選的穩(wěn)定化賦形劑混合，然后干燥成干燥的肽粉。在穩(wěn)定制劑包含兩種或更多種肽的實(shí)施方案中，每種肽分別與非揮發(fā)性緩沖劑和任選的穩(wěn)定化賦形劑混合，然后干燥成干燥的肽粉。因?yàn)殡膶?duì)在具有天冬酰胺殘基鍵處水解和蛋氨酸的氧化敏感，所以本發(fā)明的制劑中非揮發(fā)性緩沖劑的使用有益地影響化學(xué)穩(wěn)定性。如以下進(jìn)一步的細(xì)節(jié)中所描述的，當(dāng)在非質(zhì)子極性溶劑中PH是不相關(guān)的時(shí)，在非質(zhì)子極性溶劑中肽的電荷分布會(huì)影響其穩(wěn)定性。在非質(zhì)子極性溶劑中肽的電荷分布會(huì)是先前在其中干燥肽的水溶液的PH的函數(shù)，即在非質(zhì)子極性溶劑中溶解或重構(gòu)后有“pH記憶”。為了獲得溶解于非質(zhì)子極性溶劑中的肽的希望的電荷分布，肽在具有在非質(zhì)子極性溶劑中產(chǎn)生最佳穩(wěn)定性、最佳溶解度和最小降解的PH的緩沖水溶液中被干燥。
[0078]同樣地，在本文所描述的制劑中有用的非揮發(fā)性緩沖劑是對(duì)確立最大穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解的PH有幫助的那些以及對(duì)從干燥的肽粉中除去殘留水分或含水量有幫助的那些。非揮發(fā)性緩沖劑包括不會(huì)以與在干燥/凍干時(shí)的水相似的方式揮發(fā)掉的那些緩沖劑。合適的非揮發(fā)性緩沖劑包括例如甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑或檸檬酸鹽緩沖劑。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑和檸檬酸鹽緩沖劑的混合物。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑的混合物。
[0079]B.穩(wěn)定化賦形劑
[0080]在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本文所描述的制劑可以進(jìn)一步穩(wěn)定化以確保其中并入的肽的穩(wěn)定性。在一些實(shí)施方案中，可注射制劑的穩(wěn)定性通過在干燥肽之前將一種或更多種穩(wěn)定劑或穩(wěn)定化賦形劑包含到制劑內(nèi)來增強(qiáng)。在其他的實(shí)施方案中，可注射制劑的穩(wěn)定性通過在非質(zhì)子極性溶劑中利用穩(wěn)定劑或穩(wěn)定化賦形劑重構(gòu)干燥的肽來增強(qiáng)。
[0081]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑是冷凍保護(hù)劑。如以下實(shí)施例章節(jié)所示，冷凍保護(hù)劑，例如海藻糖的加入保護(hù)本發(fā)明的肽制劑以防與冷凍-解凍循環(huán)相關(guān)的不穩(wěn)定性。此夕卜，本文已經(jīng)示出冷凍保護(hù)劑海藻糖的加入還促進(jìn)冷凍的肽制劑的增強(qiáng)的解凍。該增強(qiáng)的解凍性質(zhì)是出人意料地有利的，特別是在緊急醫(yī)療的情況下，例如嚴(yán)重的低血糖癥發(fā)作，其中本發(fā)明的肽制劑是冷凍的并需要迅速施用。因此，在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，穩(wěn)定制劑具有改進(jìn)的冷凍-解凍穩(wěn)定性、提高的解凍速率和/或改善的解凍形態(tài)。
`[0082]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑選自糖、淀粉、糖醇及其混合物。用于穩(wěn)定化賦形劑的合適的糖的實(shí)例包括但不限于海藻糖、葡萄糖、蔗糖等。用于穩(wěn)定化賦形劑的合適的淀粉的實(shí)例包括但不限于羥乙基淀粉(HES)。用于穩(wěn)定化賦形劑的合適的糖醇的實(shí)例包括但不限于甘露醇和山梨醇。在一些實(shí)施方案中，至少一種穩(wěn)定化賦形劑(例如糖、淀粉、糖醇或其混合物)能夠增強(qiáng)肽在冷凍-解凍過程中的穩(wěn)定性，提高制劑的解凍速率或改善制劑的解凍形態(tài)。
[0083]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑以約1% (w/v)到約60% (w/v)、從約1% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 1% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 1% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 1%(w/v)到約 20% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 60% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 5% (w/v)到約 20% (w/V)、從約 10% (w/v)到約 60% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 10% (w/v)到約40% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 20% (w/v)的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑以約1%、約5%、約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%或約60% (w/v)的量存在于制劑中。
[0084]在包含兩種或更多種肽的制劑中，在一些實(shí)施方案中，每種肽在包含非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑的混合物中被干燥。非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑的混合物對(duì)于每種肽可以是相同的，或者用于干燥每種肽的非揮發(fā)性緩沖劑、穩(wěn)定化賦形劑或非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑兩者可以是不同的。在其他實(shí)施方案中，一些但并非所有的肽可以在包含非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑的混合物中被干燥，而其他的肽可以在不存在穩(wěn)定化賦形劑的非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥。
[0085]在一些實(shí)施方案中，制劑還包含額外的穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑包括例如抗氧化劑、螯合劑和防腐劑。合適的抗氧化劑的實(shí)例包括但不限于抗壞血酸、半胱氨酸、蛋氨酸、單硫代甘油、硫代硫酸鈉、亞硫酸鹽、BHT、BHA、抗壞血酸棕櫚酸酯、沒食子酸丙酯、N-乙?；?L-半胱氨酸(NAC)和維生素E。合適的螯合劑的實(shí)例包括但不限于EDTA、酒石酸及其鹽、甘油和檸檬酸及其鹽。合適的防腐劑的實(shí)例包括但不限于芐醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯及其混合物。
[0086]在一些實(shí)施方案中，制劑還包含穩(wěn)定化多元醇。這樣的制劑和材料例如在美國專利6，290，99和6，331，310號(hào)進(jìn)行描述，所述專利的每一篇你內(nèi)容通過引用并入本文。
[0087]C.干燥的肽的重構(gòu)
[0088]在本發(fā)明的穩(wěn)定制劑中，一旦肽和非揮發(fā)性緩沖劑(和任選的穩(wěn)定化賦形劑)被干燥成粉末，或者其中制劑包含兩種或更多種肽，一旦每種肽和非揮發(fā)性緩沖劑(各自還任選地包含穩(wěn)定化賦形劑)被干燥成粉末，干燥的肽粉在非質(zhì)子極性溶劑中溶解或重構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)、碳酸丙二醇酯及其混合物。在一些實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是二甲基 亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)和碳酸丙二醇酯中的兩種或更多種的混合物。二甲基亞砜(DMS0)、二甲基甲酰胺(DMF)和乙酸乙酯是特別優(yōu)選的非質(zhì)子極性溶劑，其每一種都是生物相容的溶劑。在一些實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是二甲基亞砜(DMS0)。在其他實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是N-甲基吡咯烷酮(NMP)。在其他實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是二甲基亞砜(DMSO)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)的混合物。在再一其他實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是二甲基亞砜(DMSO)和乙酸乙酯的混合物。在一些實(shí)施方案中，干燥的肽粉在“純凈的”，即不含共溶劑的非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，干燥的肽粉在包含非質(zhì)子極性溶劑但不含水作為共溶劑的溶液中重構(gòu)。
[0089]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的至少一種共溶劑。共溶劑是極性質(zhì)子溶劑。在某一實(shí)施方案中，共溶劑選自乙醇、丙二醇(PG)、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，共溶劑是乙醇或丙二醇(PG)。共溶劑可以以約10%(w/v)到約50%(w/v)，例如約 10%、約 15%、約 20%、約 25%、約 30%、約 35%、約 40%、約 45% 或約 50% (w/v)的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，共溶劑以從約10% (w/v)到約50% (w/v)、從約10%(w/v)到約 40% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 30% (w/v)、從約 10% (w/v)到約 25% (w/v)、從約 15% (w/v)到約 50% (w/v)、從約 15% (w/v)到約 40% (w/v)、從約 15% (w/v)到約 30%(w/v)、從約15% (w/v)到約25% (w/v)的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，與不包含共溶劑的其他相同制劑相比，至少一種共溶劑使制劑的凝固點(diǎn)降低至少5°C、至少10°C、至少15°C、至少20°C或更多的溫度。在一些實(shí)施方案中，至少一種共溶劑使制劑的凝固點(diǎn)降低到約3°C、約2°C、約1°C或約0°C或更低。[0090]D.水分含量
[0091]本發(fā)明的制劑具有非常少的殘留水分，因此這類制劑中的肽長時(shí)間保持穩(wěn)定。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的穩(wěn)定制劑具有小于5%的水分含量。在一些實(shí)施方案中，水分含量小于4%、小于3%、小于2%、小于1%、小于0.5%、小于0.4%、小于0.3%、小于0.25%、小于0.2%、小于0.15%、小于0.1%、小于0.075%、小于0.05%、小于0.025%或小于0.01%。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明制劑的水分含量從約0.01%到約5%、從約0.01%到約4%、從約0.01%到約3%、從約0.01%到約2%、從約0.01%到約1.5%或從約0.01%到約1%。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明制劑的水分含量從約0.1%到約5%、從約0.1%到約4%、從約0.1%到約3%、從約0.1%到約2%、從約0.1%到約1.5%或從約0.1%到約1%。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明制劑的水分含量從約0.25%到約5%、從約0.25%到約4%、從約0.25%到約3%、從約0.25%到約2%或從約0.25%到約1.5%。在再一其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，制劑的水分含量從約0.5%到約1%。
[0092]E.pH 記憶
[0093]肽的“pH記憶”是在緩沖水溶液中(例如在非揮發(fā)性緩沖劑中)干燥肽之后產(chǎn)生的電荷分布(質(zhì)子化狀態(tài))。在非常低水分或零水分的非水溶劑中肽的質(zhì)子化狀態(tài)、和由此產(chǎn)生的溶解度和穩(wěn)定性受到干燥前肽的水溶液的PH和所采用的干燥條件的影響。當(dāng)肽在其中酸性和堿性組分都是非揮發(fā)性的緩沖物質(zhì)中被干燥時(shí)，干燥的肽的PH記憶會(huì)約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的pH。參見例如Enzymatic Reactions in Organic Media, Koskinen,A.M.P.和Klibanov, A.M.，eds.，Springer (1996)。此外，在其中干燥肽的緩沖水溶液(例如非揮發(fā)性緩沖劑)的PH可以優(yōu)化以產(chǎn)生用于在干燥的肽之后在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)導(dǎo)致最佳肽穩(wěn)定性、最大溶解度和最小降解的肽的PH記憶。因?yàn)榉琴|(zhì)子極性溶劑沒有可交換的質(zhì)子，所以當(dāng)干燥的肽重構(gòu)到非質(zhì)子極性溶劑中時(shí)，重構(gòu)的制劑會(huì)保持最佳PH記憶的溶解度和穩(wěn)定性特性。
[0094]對(duì)于包含兩種、三種、四種或更多種肽的穩(wěn)定制劑，干燥每種肽以使得其具有為了最大溶解度、最大穩(wěn)定性和最小降解而優(yōu)化了的其自身的pH記憶。在制劑中存在兩種或更多種肽的實(shí)施方案中，第一肽的PH記憶范圍可以與第二肽的pH記憶范圍部分重疊(例如第一肽的PH記憶可以從約4.0到約6.0，第二肽的pH記憶可以從約6.0到約8.0),或第一肽的pH記憶范圍可以不與第二肽的pH記憶范圍重疊(例如第一肽的pH記憶可以從約4.0到約5.0，第二肽的pH記憶可以從約6.0到約8.0)。
[0095]肽的pH記憶可以以幾種方式進(jìn)行測(cè)量。在一個(gè)方法中，肽的pH記憶通過將干燥的肽重構(gòu)到非緩沖的水中并利用PH指示劑，例如pH試紙或校準(zhǔn)的pH電極測(cè)量重構(gòu)的肽的PH來測(cè)量。或者，對(duì)于已經(jīng)在非質(zhì)子極性溶劑(例如DMS0)中重構(gòu)的肽，肽的pH記憶可以通過向非質(zhì)子極性溶劑(例如DMS0)中加入至少20%的水并利用pH指示劑測(cè)量pH來確定。參見例如 Baughman 和 Kreevoy, “Determination of Acidity in80%DimethylSulfoxide-20%ffater, Journal of Physical Chemistry, 78 (4): 421-23 (1974)。非質(zhì)子極性溶劑-水溶液中的pH的測(cè)量可能需要小的校正(即根據(jù)上述的Baughman和Kreevoy不超過0.2pH單位)。
[0096]在一些實(shí)施方案中，當(dāng)肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)肽的pH記憶相對(duì)于在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的PH的偏差在一個(gè)pH單位范圍內(nèi)的情況下，干燥的肽具有約等于在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的PH (因此，例如對(duì)于在在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中pH為3.0的肽，當(dāng)肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，從2.0到4.0的肽的pH記憶會(huì)是在一個(gè)PH單位內(nèi)，從而干燥的肽的pH記憶會(huì)是約等于非揮發(fā)性緩沖劑中肽的pH)。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)肽的pH記憶相對(duì)于在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的PH的偏差在半個(gè)pH單位范圍內(nèi)的情況下，干燥的肽具有約等于在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中肽的PH (因此，例如對(duì)于在在其中干燥肽的非揮發(fā)性緩沖劑中PH為3.0的肽，當(dāng)肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，從2.5到3.5的肽的pH記憶會(huì)是在半個(gè)pH單位內(nèi)，從而干燥的肽的pH記憶會(huì)是約等于非揮發(fā)性緩沖劑中肽的pH)。
[0097]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約1.5到約2.5的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約2.0到約3.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約2.0到約4.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約2.5到約4.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約2.5到約3.5的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約3.0到約5.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約3.0到約4.5的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約4.0到約5.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約4.0到約6.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約6.0到約8.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約6.5到約8.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約6.5到約7.5的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約6.5到約9.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約7.0到約9.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約
7.5到約9.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約8.0到約10.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑的肽具有約8.5到約10.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，肽的pH記憶可以是約1.5、約2.0、約2.5、約3.0、約3.5、約4.0、約4.5、約5.0、約5.5、約 6.0、約 6.5、約 7.0、約 7.5、約 8.0、約 8.5、約 9.0、約 9.5 或約 10.0。
[0098]F.示例性制劑
[0099]在一些具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑包含:胰高血糖素肽或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的胰高血糖素具有從約2.0到約3.0的pH記憶；和選自二甲基亞砜(DMS0)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約2.0到約3.0的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素以從約0.5mg/mL到約100mg/mL或從約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，制劑的水分含量小于約2%、小于約1%、小于約0.5%或小于約0.01%。在一些實(shí)施方案中，制劑的水分含量從約0.01%到約3%。在一些實(shí)施方案中，制劑還包含選自糖(例如海藻糖)、淀粉(例如羥乙基淀粉(HES))及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。穩(wěn)定化賦形劑可以以從約1% (w/v)到約60% (w/v)的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶齊U，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。共溶劑可以以從約10% (w/v)到約50% (w/v)的量存在于制劑中。
[0100]在其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑包含:胰高血糖素或其鹽(或胰高血糖素類似物或肽模擬物)；和選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于3%ο在優(yōu)選的實(shí)施方案中，制劑的水分含量小于2%、小于1%、小于0.5%或小于0.25%。在其他優(yōu)選的實(shí)施方案中，水分含量從0.25%到約3%、優(yōu)選從約0.25%到約2%、更優(yōu)選從約0.25%到約1.5%、更優(yōu)選從約0.25%到約1%、更優(yōu)選從約0.5%到約1%。
[0101]在其他具體的實(shí)施方案中，穩(wěn)定的胰高血糖素制劑還包含非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑，所述穩(wěn)定化賦形劑是糖、淀粉或糖醇。例如，在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含甘氨酸緩沖劑和甘露醇，或者檸檬酸鹽緩沖劑和甘露醇，或者磷酸鹽緩沖劑和甘露醇。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含甘氨酸緩沖劑和海藻糖，或者檸檬酸鹽緩沖劑和海藻糖，或者磷酸鹽緩沖劑和海藻糖。在這些實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑可以是DMS0、NMP、乙酸乙酯或其混合物。例如，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMS0，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMS0，非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑，穩(wěn)定化賦形劑是甘露醇。在另外優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMS0，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑，穩(wěn)定化賦形劑是海藻糖。在再一優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是DMS0，非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑。在再一優(yōu)選的實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是NMP，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑。
[0102]在其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定制劑，所述穩(wěn)定制劑包含:胰高血糖素或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的胰高血糖素具有約等于胰高血糖素在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中的pH，其中干燥的胰高血糖素的pH記憶從約2.0到約3.0 ;和選自二甲基亞砜(DMS0)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于1%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約等于胰高血糖素在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素以從約Img/mL到約50mg/mL的量存 在于制劑中。
[0103]在其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑基本上由以下組分組成:胰高血糖素肽或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的胰高血糖素具有從約2.0到約3.0的pH記憶；和選自二甲基亞砜(DMS0)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約2.0到約3.0的pH記憶。
[0104]在另外其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑基本上由以下組分組成:胰高血糖素肽或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的胰高血糖素具有從約2.0到約3.0的pH記憶；以及非質(zhì)子極性溶劑和降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)及其混合物，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約2.0到約3.0的pH記憶。
[0105]在其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定的胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑基本上由以下組分組成:胰高血糖素肽或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，穩(wěn)定化賦形劑選自糖類(例如海藻糖)、淀粉(例如羥乙基淀粉(HES))及其混合物，并且其中干燥的胰高血糖素具有從約2.0到約3.0的pH記憶；和選自二甲基亞砜(DMS0)、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮(NMP)及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約2.0到約3.0的pH記憶。
[0106]在另外其他具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種穩(wěn)定制劑，所述穩(wěn)定制劑包含:胰島素，其中所述胰島素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第一非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的胰島素具有約等于胰島素在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，其中第一 pH記憶從約1.5到約2.5或從約6.0到約
8.0 ;普蘭林肽，其中所述普蘭林肽已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第二非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的普蘭林肽具有約等于普蘭林肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶，其中第二 pH記憶從約3.0到約5.0或從約4.0到約6.0 ;和選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于1%，其中當(dāng)干燥的胰島素在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰島素保持約等于胰島素在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的pH的第一PH記憶，并且其中當(dāng)干燥的普蘭林肽在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的普蘭林肽保持約等于普蘭林肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二pH記憶。在一些實(shí)施方案中，胰島素和普蘭林肽制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的胰島素和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的普蘭林肽中的一者 或兩者還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。在一些實(shí)施方案中，胰島素和普蘭林肽中的每一者都以從約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約1.5到約2.5。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約6.0到約8.0。在一些實(shí)施方案中，第二 PH記憶從約3.0到約5.0。在一些實(shí)施方案中，第二 pH記憶從約4.0到約6.0。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約1.5到約2.5，并且第二 pH記憶從約3.0到約5.0。
[0107]IV.制備穩(wěn)定的肽制劑的方法
[0108]在又一方面，本發(fā)明提供一種用于制備腸胃外注射用穩(wěn)定制劑的方法。在一些實(shí)施方案中，方法包括:將肽和非揮發(fā)性緩沖劑干燥成干燥的肽粉；利用非質(zhì)子極性溶劑重構(gòu)干燥的肽粉，從而制備穩(wěn)定制劑，其中穩(wěn)定制劑的水分含量小于5%。在一些實(shí)施方案中，干燥的肽粉具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶，當(dāng)干燥的肽粉在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽粉保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
[0109]用于制備穩(wěn)定制劑的方法可以用于配制在水環(huán)境中具有有限的或差的穩(wěn)定性或溶解度的任何肽。適合于在本發(fā)明的制劑中使用的肽(或其鹽)包括但不限于胰高血糖素、胰島素、亮丙瑞林、黃體生成素釋放激素(LHRH)激動(dòng)劑、普蘭林肽、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、芋螺毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽及其類似物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽是胰高血糖素或者胰高血糖素類似物或肽模擬物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，肽是甲狀旁腺素。在又一實(shí)施方案中，肽是亮丙瑞林。在再一實(shí)施方案中，肽是格拉默。
[0110]在一些實(shí)施方案中，兩種、三種、四種或更多種肽配制到穩(wěn)定制劑中。在其中兩種或更多種肽配制到穩(wěn)定制劑中的實(shí)施方案中，每種肽單獨(dú)地用非揮發(fā)性緩沖劑干燥成干燥的肽粉，每種干燥的肽粉具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的pH的pH記憶(即第一肽具有約等于第一肽在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，第二肽具有約等于第二肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二pH記憶)。兩種或更多種干燥的肽粉利用非質(zhì)子極性溶劑重構(gòu)，從而制得穩(wěn)定制劑，其中所述穩(wěn)定制劑的水分含量小于5%，并且當(dāng)干燥的肽粉在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，其中每種干燥的肽粉保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的pH的pH記憶(即當(dāng)干燥的第一肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第一肽保持第一 pH記憶，并且當(dāng)干燥的第二肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的第二肽保持第二 pH記憶)。
[0111]在用于制備穩(wěn)定的肽制劑的方法中，合適的非揮發(fā)性緩沖劑包括例如甘氨酸緩沖齊?、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑或檸檬酸鹽緩沖劑。在一些實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑的混合物。在一些實(shí)施方案中，肽與非揮發(fā)性緩沖劑和穩(wěn)定化賦形劑(例如糖、淀粉或其混合物)兩者混合，然后干燥成干燥的肽粉。在其他實(shí)施方案中，將穩(wěn)定化賦形齊[J(例如糖、淀粉、糖醇或其混合物)添加到在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)的肽。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑以從約1% (w/v)到約60% (w/v)，例如約1%、約5%、約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%或約60% (w/v)的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑是海藻糖。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑是HES。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定化賦形劑`是海藻糖和HES的混合物。
[0112]如上文所解釋的，當(dāng)肽與非揮發(fā)性緩沖劑混合時(shí)，非揮發(fā)性緩沖劑選擇為使得肽在水環(huán)境中具有最大穩(wěn)定性/最小降解的pH。一旦被干燥,肽就會(huì)具有最大穩(wěn)定性/最小降解的PH記憶，并且當(dāng)在非質(zhì)子極性溶劑中溶解或重構(gòu)時(shí)會(huì)保留該pH記憶。同樣地，在一個(gè)實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑的PH使得干燥的肽粉具有約2到約3的pH記憶。在另一個(gè)實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑的PH使得干燥的肽粉具有約4到約6的pH記憶。在又一實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑的PH使得干燥的肽粉具有約4到約5的pH記憶。在又一實(shí)施方案中，非揮發(fā)性緩沖劑的PH使得干燥的肽粉具有約6到約8的pH記憶。
[0113]一旦肽和非揮發(fā)性緩沖劑(和任選的其他組分，例如在干燥前添加到肽和非揮發(fā)性緩沖劑中的穩(wěn)定化賦形劑)被干燥成粉末，干燥的肽粉在如本文所描述的非質(zhì)子極性溶劑(例如二甲基亞砜(DMS0)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物)中溶解或重構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是二甲基亞砜(DMS0)。在其他實(shí)施方案中，非質(zhì)子極性溶劑是N-甲基吡咯烷酮(NMP)。
[0114]在一些實(shí)施方案中，重構(gòu)干燥的肽粉的步驟包括利用包含非質(zhì)子極性溶劑和降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑的混合物稀釋或重構(gòu)干燥的肽。在一些實(shí)施方案中，共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，共溶劑以從約10% (w/v)到約50% (w/V)，例如約10%、約15%、約20%、約25%、約30%、約35%、約40%、約45%或約50% (w/v)的量存在于制劑中。
[0115]本發(fā)明的制劑具有非常少的殘留水分，因此這類制劑中的肽長時(shí)間保持穩(wěn)定。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，通過本發(fā)明的方法制備的穩(wěn)定制劑的水分含量小于4%、小于3%、小于2%、小于1%、小于0.5%、小于0.4%、小于0.3%、小于0.25%、小于0.2%、小于0.15%、小于0.1%、小于0.075%、小于0.05%、小于0.025%或小于0.01%。
[0116]在前述方法中，肽化合物與非揮發(fā)性緩沖劑(以及任選的穩(wěn)定化賦形劑)的干燥使用噴霧干燥技術(shù)、冷凍干燥技術(shù)或凍干技術(shù)來實(shí)現(xiàn)。噴霧干燥技術(shù)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是眾所周知的。噴霧干燥包括溶劑在從液滴揮發(fā)之后包含一種或更多種固體(例如治療劑)的溶液經(jīng)由噴嘴轉(zhuǎn)盤或其他裝置霧化的步驟。生成的粉末的性質(zhì)是包括初始溶質(zhì)濃度、所產(chǎn)生的液滴的尺寸分布和溶質(zhì)移除速率的幾個(gè)變量的函數(shù)。所產(chǎn)生的顆粒根據(jù)溶劑移除的速率和條件可以包括由晶體和/或非晶固體組成的一次顆粒的聚集體。
[0117]用于制備生物大分子，例如蛋白質(zhì)、寡肽、高分子量的多糖和核酸的超細(xì)粉末的噴霧干燥的方法例如在美國專利6，051，256號(hào)中進(jìn)行描述。冷凍干燥程序在本領(lǐng)域中是眾所周知的，并且例如在美國專利4，608，764號(hào)和美國專利4，848，094號(hào)中進(jìn)行描述。噴霧-冷凍干燥的方法例如在美國專利5，208，998號(hào)中進(jìn)行描述。其他噴霧干燥技術(shù)例如在美國專利 6，253，463,6, 001，336,5, 260，306 號(hào)和 PCT 國際公開 W091/16882 和 W096/09814 號(hào)中進(jìn)行描述。
[0118]凍干技術(shù)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是眾所周知的。凍干是產(chǎn)品在冷凍狀態(tài)(真空條件下的冰升華)和在真空條件下(通過微熱干燥)進(jìn)行的脫水技術(shù)。這些條件使產(chǎn)品穩(wěn)定，最小化氧化和其他降解過程。冷凍干燥的條件允許在低溫下實(shí)施方法，因此可以保護(hù)熱不穩(wěn)定的產(chǎn)品。冷凍干燥的步驟包括預(yù)處 理、冷凍、一次干燥和二次干燥。預(yù)處理包括在冷凍之前處理產(chǎn)品的任何方法。這可以包括濃縮產(chǎn)品、制劑修正(即加入組分以增加穩(wěn)定性和/或改進(jìn)加工)、減少高蒸氣壓溶劑或增加表面積。預(yù)處理的方法包括:冷凍濃縮、溶液相濃縮和特別地配制以保持產(chǎn)品外觀或?yàn)榉磻?yīng)性產(chǎn)品提供凍干保護(hù)，并且例如在美國專利6，199，297號(hào)中進(jìn)行描述。“標(biāo)準(zhǔn)的”凍干條件例如在美國專利5，031，336號(hào)和“Freeze Drying ofPharmaceuticals，，(DeLuca,Patrick P., J.Vac.Sc1.Technol.,卷 14，N0.1,1977 年一月 /二月)和“The Lyophilization of Pharmaceuticals:A Literature Review，，(Williams,N.A.和 G.P.Polli, Journal of Parenteral Science and Technology,卷 38, N0.2,1984年三月/四月)中進(jìn)行描述。
[0119]在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，凍干循環(huán)部分地在治療劑制劑的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)以上進(jìn)行以導(dǎo)致團(tuán)快塌陷，從而形成含有殘留水分的致密結(jié)塊。在其他實(shí)施方案中，凍干循環(huán)在玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下實(shí)施，以避免為了獲得顆粒的完全干燥而導(dǎo)致的塌陷。
[0120]V.治療方法
[0121]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供通過對(duì)對(duì)象施用對(duì)治療、減輕或預(yù)防疾病、病癥或病況有效量的如本文所描述的穩(wěn)定制劑來治療疾病或病癥的方法。在一些實(shí)施方案中，待利用本發(fā)明的穩(wěn)定制劑治療的疾病、病癥或病況是糖尿病病癥。糖尿病病癥的實(shí)例包括但不限于I型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病、前驅(qū)糖尿病、高血糖癥、低血糖癥和代謝綜合征。在一些實(shí)施方案中，疾病、病癥或病況是低血糖癥。在一些實(shí)施方案中，疾病、病癥或病況是糖尿病。
[0122]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的治療方法包括通過對(duì)具有低血糖癥的對(duì)象施用對(duì)治療低血糖癥有效量的如本文所描述的穩(wěn)定制劑來治療低血糖癥。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含膜聞血糖素的穩(wěn)定制劑。
[0123]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的治療方法包括通過對(duì)糖尿病患者施用對(duì)治療糖尿病有效量的如本文所描述的穩(wěn)定制劑來治療糖尿病。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含胰島素的穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含普蘭林肽的穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含胰島素和普蘭林肽的穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含艾塞那肽的穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，對(duì)對(duì)象施用包含胰高血糖素和艾塞那肽的穩(wěn)定制劑。
[0124]用于治療疾病、病癥、病況(例如糖尿病病癥、例如低血糖癥或糖尿病)的如本文所描述的肽藥物的施用劑量與本領(lǐng)域技術(shù)人員所實(shí)踐的劑量和計(jì)劃療程一致。在本發(fā)明中所使用的所有藥物試劑的合適劑量的通用指南在前述的Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics,第 11 版,2006 和在 Physicians’DeskReference (PDR)，例如在第 65 版(2011)或第 66 版(2012)，PDR Network, LLC 中提供，其中每一個(gè)都通過引用在此并入本文。用于治療如本文所描述的疾病、病癥或病況的肽藥物的合適劑量會(huì)根據(jù)幾種因素，包括組合物的制劑、患者反應(yīng)、病癥的嚴(yán)重性、對(duì)象的體重和處方醫(yī)師的判斷而變化。有效劑量的所述制劑遞送醫(yī)學(xué)上有效量的肽藥物。劑量可以根據(jù)個(gè)體患者的需要隨著時(shí)間增加或減少。
[0125]有效量或劑量的確定正是在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)，尤其根據(jù)本文所提供的詳細(xì)公開。通常地，遞送這些劑量的制劑可以含有一種、兩種、三種、四種或更多種肽或肽類似物(全體“肽”，除非明確地排除了肽類似物)，其中每種肽以從約0.lmg/mL到最多肽在制劑中的溶解極限的濃 度存在。該濃度優(yōu)選從約lmg/mL到約100mg/mL,例如約lmg/mL、約5mg/mL、約 10mg/mL、約 15mg/mL、約 20mg/mL、約 25mg/mL、約 30mg/mL、約 35mg/mL、約 40mg/mL、約 45mg/mL、約 50mg/mL、約 55mg/mL、約 60mg/mL、約 65mg/mL、約 70mg/mL、約 75mg/mL、約80mg/mL、約 85mg/mL、約 90mg/mL、約 95mg/mL 或約 100mg/mL。
[0126]本發(fā)明的制劑可以用于皮下、皮膚內(nèi)或肌肉內(nèi)的施用(例如通過注射或通過輸注)。在一些實(shí)施方案中，制劑是皮下施用的。
[0127]本公開的制劑使用合適的裝置通過輸注或通過注射來施用。例如，本發(fā)明的制劑可以放置到注射器、筆注射裝置、自動(dòng)注射器裝置或泵裝置內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，注射裝置是多劑量注射器泵裝置或多劑量自動(dòng)注射器裝置。制劑以使得制劑在驅(qū)動(dòng)注射裝置，例如自動(dòng)注射器致動(dòng)時(shí)能夠容易地流出針頭的方式在裝置中呈現(xiàn)，以遞送肽藥物。合適的筆/自動(dòng)注射器裝置包括但不限于由Becton-Dickenson、Swedish Healthcare Limited(SHL Group), YpsoMed Ag等制造的那些筆/自動(dòng)注射裝置。合適的泵裝置包括但不限于由 Tandem Diabetes Care, Inc.、Delsys Pharmaceuticals 等制造的那些栗裝置。
[0128]在一些實(shí)施方案中，提供準(zhǔn)備好在小瓶、灌注器或預(yù)裝滿的注射器中施用的在本發(fā)明的制劑。[0129]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供如本文所描述的穩(wěn)定制劑用于配制用于治療可以利用制劑的肽治療的任何疾病、病癥或病況的藥物的用途。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑用于配制治療糖尿病病癥，例如I型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病、前驅(qū)糖尿病、高血糖癥、低血糖癥或代謝綜合征的藥物。
[0130]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑用于配制用于治療低血糖癥的藥物。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含胰高血糖素或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含胰高血糖素和艾塞那肽。
[0131]在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑用于配制用于治療糖尿病的藥物。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含胰島素。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含艾塞那肽。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含普蘭林肽。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定制劑包含胰島素和普蘭林肽。
[0132]V1.試劑盒
[0133]在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供用于治療如本文所描述的疾病、病癥或病況的試劑盒。在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括:包含一種、兩種、三種、四種或更多種肽或其鹽的穩(wěn)定制齊U，其中所述肽已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的肽具有約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)干燥的肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的肽保持約等于肽在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的PH記憶；和用于對(duì)對(duì)象施用穩(wěn)定制劑的注射器。
[0134]在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括用于在治療對(duì)象的低血糖癥中使用的如本文所描述的穩(wěn)定的胰高血糖素制劑。在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括胰高血糖素制劑，所述胰高血糖素制劑包含:胰高血糖素或其鹽(例如醋酸胰高血糖素)，其中所述胰高血糖素已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的胰高血糖素具有約等于胰高血糖素在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的非揮發(fā)性緩沖劑中的pH，其中干燥的胰高血糖素的pH記憶從約2.0到約3.0 ;和選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混 合 物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于1%，并且其中當(dāng)干燥的胰高血糖素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰高血糖素保持約等于胰高血糖素在非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素制劑還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。在一些實(shí)施方案中，胰高血糖素以從約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。
[0135]在一些實(shí)施方案中，試劑盒包含用于在治療對(duì)象的糖尿病中使用的如本文所描述的穩(wěn)定的胰島素和普蘭林肽制劑。在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括胰島素和普蘭林肽制劑，所述胰島素和普蘭林肽制劑包含:胰島素，其中所述胰島素已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第一非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的胰島素具有約等于胰島素在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，其中第一 pH記憶從約1.5到約2.5或從約6.0到約8.0 ;普蘭林肽，其中所述普蘭林肽已經(jīng)在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第二非揮發(fā)性緩沖劑中被干燥，并且其中干燥的普蘭林肽具有約等于普蘭林肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶，其中第二 pH記憶從約3.0到約5.0或從約4.0到約6.0 ;和選自二甲基亞砜(DMS0)、N_甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑；其中制劑的水分含量小于1%，其中當(dāng)干燥的胰島素在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的胰島素保持約等于胰島素在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的pH的第一 pH記憶，并且其中當(dāng)干燥的普蘭林肽在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，干燥的普蘭林肽保持約等于普蘭林肽在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶。在一些實(shí)施方案中，胰島素和普蘭林肽制劑還包含降低制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑中的胰島素和第二非揮發(fā)性緩沖劑中的普蘭林肽中的一者或兩者還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。在一些實(shí)施方案中，第一非揮發(fā)性緩沖劑和第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。在一些實(shí)施方案中，胰島素和普蘭林肽中的每一者都以從約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于制劑中。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約1.5到約2.5。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約6.0到約8.0。在一些實(shí)施方案中，第二 pH記憶從約3.0到約5.0。在一些實(shí)施方案中，第二 pH記憶從約4.0到約6.0。在一些實(shí)施方案中，第一 pH記憶從約1.5到約2.5，并且第二 pH記憶從約3.0到約5.0。
[0136]在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括作為筆注射裝置、自動(dòng)注射器裝置或泵的一部分的注射器。在一些實(shí)施方案中，注射器預(yù)裝滿穩(wěn)定制劑。在一些實(shí)施方案中，試劑盒還包括說明書，其中所述說明書指導(dǎo)穩(wěn)定制劑的施用以治療有此需要的對(duì)象(例如具有低血糖癥或糖尿病的患者)。
[0137]VI1.實(shí)施例
[0138]本發(fā)明會(huì)通過具體的實(shí)施例更加詳細(xì)地描述。以下實(shí)施例是為了說明的目的提供的，不打算以任何方式限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)容易地識(shí)別出可以變化或改變而產(chǎn)生基本相同結(jié)果的各種非關(guān)鍵性參數(shù)。
[0139]實(shí)施例1:在冷凍干燥中使用的胰高血糖素溶液的制備
[0140]制備各種溶液以包含濃度為10mg/mL的胰高血糖素。所述溶液包含5mM的甘氨酸、檸檬酸鹽或磷酸鹽，通常提供確立P`H為3的緩沖劑。溶液還以等于胰高血糖素的w/v量(1:1)的量或以200% (2:1)胰高血糖素的量單獨(dú)或組合地包含糖。所述糖是海藻糖、HES或β -環(huán)糊精(β -⑶)。一些溶液還包含0.10%的吐溫-20作為表面活性劑。各種制劑以如以下表I所描述的量混合至基本均勻。
[0141]表1.用于之后凍干的胰高血糖素混合物
[0142]
【權(quán)利要求】
1.一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，包含: (a)肽或其鹽，其中所述肽已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的肽具有約等于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和 (b)非質(zhì)子極性溶劑； 其中所述制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的肽時(shí)，所述干燥的肽保持約等于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的所述pH記憶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽或其鹽選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制劑，其中所述肽是胰高血糖素。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制劑，其中所述肽是格拉默。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制劑，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑是甘氨酸緩沖劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制劑，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑是檸檬酸鹽緩沖劑和磷酸鹽緩沖劑的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利.要求1所述的制劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑是DMSO。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑是DMSO和NMP的混合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑是DMSO和乙酸乙酯的混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，還包含降低所述制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制劑，其中所述共溶劑是乙醇或丙二醇。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制劑，其中所述共溶劑以從約10%(w/v)到約50% (w/v)的量存在于所述制劑中。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，還包含穩(wěn)定化賦形劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的制劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑選自糖、淀粉及其混合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的制劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑是糖。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的制劑，其中所述糖是海藻糖。
19.根據(jù)權(quán)利要求16所述的制劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑是淀粉。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的制劑，其中所述淀粉是羥乙基淀粉(HES)。
21.根據(jù)權(quán)利要求15所述的制劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑以從約1%(w/v)到約60%(w/v)的量存在于所述制劑中。
22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑的水分含量為約0.01%到約3%。
23.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑的水分含量小于約2%。
24.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑的水分含量小于約1%。
25.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，所述肽的pH記憶相對(duì)于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的偏差在一個(gè)pH單位范圍內(nèi)。
26.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)時(shí)，所述肽的pH記憶相對(duì)于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的偏差在半個(gè)pH單位范圍內(nèi)。
27.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽具有約2.0到約3.0的pH記憶。
28.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽具有約4.0到約6.0的pH記憶。
29.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽具有約6.0到約8.0的pH記憶。
30.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽以約0.5mg/mL到約100mg/mL的量存在于所述制劑中。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的制劑，其中所述肽以約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于所述制劑中。
32.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述肽是鹽酸鹽或乙酸鹽。
33.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑在40°C下穩(wěn)定至少一個(gè)月。
34.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其中所述制劑在4°C下穩(wěn)定至少一周。
35.一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，包含: (a)胰高血糖素，其中所述胰高血糖素已經(jīng)被干燥在非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的胰高血糖素具有約等于所述胰高血糖素在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶，其中所述干燥的胰高血糖素的pH記憶為約2.0到約3.0 ; 和 (b)選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑； 其中所述制劑的水分含量小于1%，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的胰高血糖素時(shí)，所述干燥的胰高血糖素保持約等于所述胰高血糖素在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的pH的pH記憶ο
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的制劑，還包含降低所述制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。
37.根據(jù)權(quán)利要求35所述的制劑，還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。
38.根據(jù)權(quán)利要求35所述的制劑，其中所述胰高血糖素以約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于所述制劑中。
39.一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，包含: (a)第一肽或其鹽，其中所述第一肽已經(jīng)被干燥在第一非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的第一肽具有約等于所述第一肽在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶； (b)第二肽或其鹽，其中所述第二肽已經(jīng)被干燥在第二非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的第二肽具有約等于所述第二肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶；和 (c)非質(zhì)子極性溶劑； 其中所述制劑的水分含量小于5%，其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的第一肽時(shí)，所述干燥的第一肽保持約等于所述第一肽在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的第二肽時(shí)，所述干燥的第二肽保持約等于所述第二肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一肽或其鹽和所述第二肽或其鹽中的每一者都選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的制劑，其中所述第一肽是普蘭林肽，所述第二肽是胰島素。
42.根據(jù)權(quán)利要求40所述的制劑，其中所述第一肽是胰高血糖素，所述第二肽是艾塞那肽。
43.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑選自甘氨酸緩沖劑、梓檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。
44.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。
45.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所示第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。
46.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物。
47.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，還包含降低所述制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。
48.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的所述第一肽和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的所述第二肽中的一者或兩者還包含穩(wěn)定化賦形劑。
49.根據(jù)權(quán)利要求48所 述的制劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑選自糖、淀粉及其混合物。
50.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一pH記憶的pH相對(duì)于所述第二 pH記憶的PH的偏差在一個(gè)pH單位范圍內(nèi)。
51.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一pH記憶的pH相對(duì)于所述第二 pH記憶的PH的偏差超出一個(gè)pH單位。
52.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一pH記憶為約3.0到約5.0，所述第二pH記憶為約6.0到約8.0。
53.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述第一肽和所述第二肽中的一者或兩者以約0.5mg/mL到約100mg/mL的量存在于所述制劑中。
54.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述制劑的水分含量為約0.01%到約3%。
55.根據(jù)權(quán)利要求39所述的制劑，其中所述制劑的水分含量小于約2%。
56.一種腸胃外注射用穩(wěn)定制劑，包含: (a)胰島素，其中所述胰島素已經(jīng)被干燥在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第一非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的胰島素具有約等于所述胰島素在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 pH記憶，其中所述第一 pH記憶為約1.5到約2.5或約6.0到約8.0 ； (b)普蘭林肽，其中所述普蘭林肽已經(jīng)被干燥在選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物的第二非揮發(fā)性緩沖劑中，并且其中干燥的普蘭林肽具有約等于所述普蘭林肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶，其中所述第二 pH記憶為約3.0到約5.0 ;和 (c)選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物的非質(zhì)子極性溶劑； 其中所述制劑的水分含量小于1%，其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的胰島素時(shí)，所述干燥的胰島素保持約等于所述胰島素在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 PH記憶，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的普蘭林肽時(shí)，所述干燥的普蘭林肽保持約等于所述普蘭林肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶。
57.根據(jù)權(quán)利要求56所述的制劑，還包含降低所述制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。
58.根據(jù)權(quán)利要求56所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的所述第一肽和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的所述第二肽中的一者或兩者還包含選自糖、淀粉及其混合物的穩(wěn)定化賦形劑。
59.根據(jù)權(quán)利要求56所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。
60.根據(jù)權(quán)利要求56所述的制劑，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。
61.根據(jù)權(quán)利要求56所述的制劑，其中所述胰島素和所述普蘭林肽中的每一者都以約lmg/mL到約50mg/mL的量存在于所述制劑中。
62.一種腸胃外注射用穩(wěn)定`制劑，所述制劑包含: 肽或其鹽；和 非質(zhì)子極性溶劑； 其中所述制劑的水分含量小于5%。
63.根據(jù)權(quán)利要求62所述的制劑，其中所述肽或其鹽選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、其類似物以及其混合物。
64.根據(jù)權(quán)利要求62所述的制劑，還包含非揮發(fā)性緩沖劑。
65.根據(jù)權(quán)利要求62所述的制劑，還包含穩(wěn)定化賦形劑。
66.一種用于治療可以通過對(duì)對(duì)象施用對(duì)治療、減輕或預(yù)防疾病、病癥或病況有效量的權(quán)利要求1-65中任一項(xiàng)所述的穩(wěn)定制劑來治療、減輕或預(yù)防所述疾病、病癥或病況的方法。
67.一種用于通過對(duì)對(duì)象施用對(duì)治療低血糖癥有效量的權(quán)利要求35-38中任一項(xiàng)所述的穩(wěn)定制劑來治療低血糖癥的方法。
68.一種用于通過對(duì)對(duì)象施用對(duì)治療糖尿病有效量的權(quán)利要求56-61中任一項(xiàng)所述的穩(wěn)定制劑來治療糖尿病的方法。
69.根據(jù)權(quán)利要求66-68中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過使用注射器來施用所述穩(wěn)定制劑。
70.根據(jù)權(quán)利要求66-68中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過使用筆注射裝置來施用所述穩(wěn)定制劑。
71.根據(jù)權(quán)利要求66-68中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過使用自動(dòng)注射器裝置來施用所述穩(wěn)定制劑。
72.根據(jù)權(quán)利要求66-68中任一項(xiàng)所述的方法，其中通過使用泵來施用所述穩(wěn)定制劑。
73.一種制備腸胃外注射用穩(wěn)定制劑的方法，所述方法包括: (a)將在非揮發(fā)性緩沖劑中的包含肽或其鹽的混合物干燥成干燥的肽粉，其中所述干燥的肽粉具有約等于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶；和 (b)在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的肽粉； 其中所述制劑的水分含量小于5%，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的肽粉時(shí)，所述干燥的肽粉保持約等于所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的pH記憶。
74.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述肽或其鹽選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。
75.根據(jù)權(quán)利要求74所述的方法，其中所述肽是胰高血糖素。
76.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。
77.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方 法，其中所述非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙酸乙酯及其混合物。
78.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，還包括干燥所述肽和所述非揮發(fā)性緩沖劑以及穩(wěn)定化賦形劑，其中所述穩(wěn)定化賦形劑選自糖、淀粉及其混合物。
79.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中步驟(b)包括在包含非質(zhì)子極性溶劑和降低所述制劑的凝固點(diǎn)的共溶劑的溶液中重構(gòu)所述干燥的肽粉，其中所述共溶劑選自乙醇、丙二醇、甘油及其混合物。
80.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的pH使得所述干燥的肽粉具有約2.0到約3.0的pH記憶。
81.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的pH使得所述干燥的肽粉具有約4.0到約6.0的pH記憶。
82.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述肽在所述非揮發(fā)性緩沖劑中的pH使得所述干燥的肽粉具有約4.0到約5.0的pH記憶。
83.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述肽以約0.5mg/mL到約100mg/mL的量存在于所述混合物中。
84.根據(jù)權(quán)利要求73所述的方法，其中所述制劑的水分含量為約0.01%到約3%。
85.一種制備腸胃外注射用穩(wěn)定制劑的方法，所述方法包括: (a)將在第一非揮發(fā)性緩沖劑中的包含第一肽或其鹽的第一混合物干燥成干燥的第一肽粉，其中所述干燥的第一肽粉具有約等于所述第一肽在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 PH記憶； (b)將在第二非揮發(fā)性緩沖劑中的包含第二肽或其鹽的第二混合物干燥成干燥的第二肽粉，其中所述干燥的第二肽粉具有約等于所述第二肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 PH記憶；和(C)在非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的第一肽粉和所述干燥的第二肽粉； 其中所述制劑的水分含量小于5%，其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的第一肽粉時(shí)，所述干燥的第一肽粉保持約等于所述第一肽在所述第一非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第一 PH記憶，并且其中當(dāng)在所述非質(zhì)子極性溶劑中重構(gòu)所述干燥的第二肽粉時(shí)，所述干燥的第二肽粉保持約等于所述第二肽在所述第二非揮發(fā)性緩沖劑中的PH的第二 pH記憶。
86.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一肽或其鹽和所述第二肽或其鹽中的每一者都選自胰高血糖素、普蘭林肽、胰島素、亮丙瑞林、LHRH激動(dòng)劑、甲狀旁腺素(PTH)、糊精、肉毒桿菌毒素、hematide、淀粉樣肽、縮膽囊素、芋螺毒素、胃抑制肽、胰島素樣生長因子、生長激素釋放因子、抗微生物因子、格拉默、胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動(dòng)劑、艾塞那肽、其類似物以及其混合物。
87.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一肽是普蘭林肽，所述第二肽是胰島素。
88.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一肽是胰高血糖素，所述第二肽是艾塞那肽。
89.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述非揮發(fā)性緩沖劑選自甘氨酸緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、磷酸鹽緩沖劑及其混合物。
90.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑相同。
91.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一非揮發(fā)性緩沖劑和所述第二非揮發(fā)性緩沖劑不同。
92.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述非質(zhì)子極性溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙 酸乙酯及其混合物。
93.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一pH記憶和所述第二 pH記憶中的一者或兩者為約2.0到約3.0。
94.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一pH記憶和所述第二 pH記憶中的一者或兩者為約4.0到約6.0。
95.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一pH記憶和所述第二 pH記憶中的一者或兩者為約6.0到約8.0。
96.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述第一肽和所述第二肽中的一者或兩者以約0.5mg/mL到約100mg/mL的量存在于所述制劑中。
97.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述制劑的水分含量為約0.01%到約3%。
98.根據(jù)權(quán)利要求85所述的方法，其中所述制劑的水分含量小于約2%。
【文檔編號(hào)】A61K9/00GK103442695SQ201280012645
【公開日】2013年12月11日 申請(qǐng)日期:2012年3月9日 優(yōu)先權(quán)日:2011年3月10日
【發(fā)明者】史蒂文·普萊斯特斯基, 約翰·肯澤勒 申請(qǐng)人:Xeris藥物公司