專利名稱：刺玫葉總黃酮提取物及其提取方法和其醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥材新的藥用部位中的提取物及其提取方法和其藥物用途。
背景技術(shù)：
山刺玫Rosa davurica Pall.為薔薇科薔薇屬落葉灌木植物,主要分布于我國東北地區(qū)，其果實(shí)為刺玫果。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)將刺玫果列為補(bǔ)藥，據(jù)《中華大辭典》稱刺玫果具有健脾理氣、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)之功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，刺玫果具有抗衰老、抗疲勞、耐缺氧，增強(qiáng)人體免疫功能作用，長期服用能顯著提高人體中SOD含量。刺玫果為藥食同源的寶貴資源，其富含有機(jī)酸，黃酮、香豆素、留醇、三萜、烯烴、皂甙、揮發(fā)油、多種礦物質(zhì)、微量元素等多種活性成分，其中的黃酮類化合物具有抗氧化、降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、降低心肌耗氧量、防治血管硬化、降壓、抗衰老、抗自由基和抗癌、防癌等作用。鐘方麗，等對(duì)刺玫果總黃酮的提取、純化方法及醫(yī)藥用途進(jìn)行了研究并申請(qǐng)了專利刺玫果總黃酮提取物及其提取方法和其醫(yī)藥用途，申請(qǐng)?zhí)?201110091577. 4。目前，未見有關(guān)刺玫葉的活性成分提取、化學(xué)成分、藥理作用的研究。僅有王瑋、葛愛梅對(duì)刺玫葉茶的制備進(jìn)行了研究，并申請(qǐng)了專利野生刺玫果葉茶及其制備方法，申請(qǐng)?zhí)?00610010199. 1，本發(fā)明利用野生刺玫果嫩葉自然資源，研制成具有茶葉色、香、形特點(diǎn)的新型飲品，豐富了飲品品種。刺玫葉每年均可采摘，產(chǎn)量豐富，經(jīng)濟(jì)價(jià)廉，但目前未見其藥用價(jià)值研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種刺玫葉總黃酮提取物及其提取方法和其醫(yī)藥用途。本發(fā)明采取的技術(shù)方案是，刺玫葉總黃酮提取物是由下述方法制備得到的a.將刺玫葉干燥粉碎，用12-16倍量70_80%乙醇微波提取3次，每次提取40min、20min、10min,過濾,合并提取液；b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱，經(jīng)水洗至無色后，繼用70-90%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。本發(fā)明所述的大孔吸附樹脂柱采用D101、AB-8或D4020。本發(fā)明所述刺玫葉總黃酮提取物在制備用于治療冠心病、抗心肌缺血、降血脂藥物及降糖藥物中的應(yīng)用。山刺玫為直立灌木，刺玫葉每年都可采摘利用，資源非常豐富，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，刺玫葉中總黃酮含量可達(dá)2-5%，是十分珍貴難得的新的藥用部位。刺玫葉總黃酮提取物的提取、純化方法目前未見報(bào)道，其藥物用途屬首次發(fā)現(xiàn)，刺玫葉屬新的藥用部位。刺玫葉總黃酮提取物其特征為淺褐色至褐色粉末，可溶于乙醇，該刺玫葉提取物中總黃酮的含量大于50%。當(dāng)本發(fā)明用于制備治療冠心病，心肌缺血，高血脂的藥物時(shí)，其口服或胃腸外給藥，均是安全的，在口服情況下，其可以任何常規(guī)形式給藥，例如散劑、粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、溶液劑、懸浮液、糖漿、口腔含片、舌下含片等；當(dāng)該藥腸胃外給藥時(shí)，可采用任何常規(guī)形式,例如注射劑如靜脈內(nèi)注射、軟膏劑、栓劑、經(jīng)皮給藥、吸入劑等。 本發(fā)明制備治療誕心病，聞血脂，聞血糖、心肌缺血的藥物是由有效部位或有效部位與固體或液體的賦形劑一起構(gòu)成的，這里使用的固體或液體的賦形劑在本領(lǐng)域是眾所周知的，下面舉幾個(gè)具體例子，散劑是內(nèi)服的粉末劑，它的賦形劑有乳糖、淀粉、漿糊精、碳酸鈣、合成或天然硫酸鋁、氧化鎂、硬脂酸鎂、碳酸氫鈉、干燥酵母等；溶液劑的賦形劑有水、甘油、丙二醇、單糖漿、乙醇、乙二醇、聚乙二醇、山梨糖醇等；軟膏劑的賦形劑可以使用脂油、含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂蠟、木蠟、液體石蠟、樹脂、高級(jí)蠟等組合成的疏水劑或親水劑。本發(fā)明的有益效果是，刺玫葉總黃酮提取物即新的有效部位，其藥物用途屬首次發(fā)現(xiàn)，擴(kuò)大了藥源。有效部位的劑量可以根據(jù)服用方式，病人的年齡和體重及病情嚴(yán)重程度和其它類似的因素而改變，口服量為100-200mg/次，每日2-3次服用；注射80_120mg/次，每日I次。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例Ia.將刺玫葉干燥粉碎，用12倍量70%乙醇微波提取3次，每次40min、20min、IOmin,過濾,合并提取液；b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱D101，經(jīng)水洗至無色后，繼用70%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。實(shí)施例2a.將刺玫葉干燥粉碎，用14倍量75%乙醇微波提取3次，每次40min、20min、IOmin,過濾,合并提取液；b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱AB-8，經(jīng)水洗至無色后，繼用80%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。實(shí)施例3a.將刺玫葉干燥粉碎，用16倍量80%乙醇微波提取3次，每次40min、20min、IOmin,過濾,合并提取液；b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱D4020，經(jīng)水洗至無色后，繼用90%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。本發(fā)明用途可通過下面的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說明。刺玫葉總黃酮提取物，以下簡稱DRLFE。實(shí)驗(yàn)例I、DRLFE抗大鼠心肌缺血初步實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)材料I. I 動(dòng)物Wistar大鼠，雌雄各半，體重230_270g，由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。I. 2藥品及試劑本發(fā)明藥物DRLFE，按本發(fā)明方法制備，褐色粉末狀，用生理鹽水配制成混懸液；生化試劑盒激酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)由中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)；紅四氮唑(TTC)，分析純，上?；菔郎噭┯邢薰旧a(chǎn)；山玫膠囊，承德御室金丹藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；氯化鈉注射液，哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；乙醚，分析純，天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司生產(chǎn)。1. 3 儀器E0S-880半自動(dòng)生化分析儀，意大利生產(chǎn)；UV_755B紫外分光光度計(jì)由上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；BI-2000圖像分析儀，成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。二、實(shí)驗(yàn)方法2. 1分組及給藥劑量實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為7組，每組12只。假手術(shù)對(duì)照組給予氯化鈉溶液(生理鹽水)10ml/kg ;模型對(duì)照組給予生理鹽水10ml/kg ;陽性對(duì)照組給予山玫膠囊220mg/kg(2. 2% ) ；DRLFE 小劑量組 50mg/kg(0. 5%, ) ；DRLFE 中劑量組 100mg/kg(l. 0% ) ；DRLFE大劑量組200mg/kg(2. 0% )。連續(xù)給藥6d。于末次給藥30min,制備心肌缺血模型。2. 2實(shí)驗(yàn)方法大鼠乙醚全身麻醉，行開胸手術(shù)，采取冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎24h，造成心肌缺血模型。24h后進(jìn)行股動(dòng)脈取血，離心取血清待測生化指標(biāo)(CK、LDH、AST、SOD、MDA);開胸術(shù)取心臟剪除右心室，將左心室切心肌片5片，用TTC溶液染色l_3min，用BI-2000圖像分析儀照相、測量心肌梗塞面積，計(jì)算心肌梗塞面積占左心室百分率。剪取冠脈結(jié)扎線下方小塊心肌組織放入10%福爾馬林溶液中固定，待做光學(xué)顯微鏡病理學(xué)檢查。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果3. I對(duì)心肌缺血大鼠血清酶含量的影響CK:模型組血清CK含量與假手術(shù)組比較明顯升高，有顯著性差異，P <0.05 ；DRLFE高劑量、中劑量組與模型組比較，CK含量明顯降低，有顯著性差異，P < 0. 05 ；DRLFE小劑量組及陽性藥組與模型組比較，血清CK含量雖然有下降趨勢(shì)，但統(tǒng)計(jì)學(xué)無明顯差異，P> 0. 05,見表 I。LDH:模型組血清LDH含量與假手術(shù)組比較明顯升高，有顯著性差異，P < 0. 05 ；DRLFE高劑量組、中劑量組以及陽性藥組與模型組比較，LDH含量明顯降低，有顯著性差異，P < 0. 05 ；DRLFE小劑量組LDH含量雖然有下降趨勢(shì)，但與模型組比較無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P > 0. 05,見表I。AST :模型組血清AST含量與假手術(shù)組比較明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P < 0. 05 ；DRLFE高劑量組、中劑量組以及陽性藥組與模型組比較，AST血清含量明顯降低，有顯著性差異，P < 0. 05 ；DRLFE小劑量組與模型組比較，AST含量雖然有下降趨勢(shì)，但與模型組比較均無明顯差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P > 0. 05,見表I。表1 DRLFE對(duì)心肌缺血大鼠血清酶含量的影響丨(1± n=12 )
權(quán)利要求
1.一種刺玫葉總黃酮提取物，其特征在于它由下述方法制備得到的 a.將刺玫葉干燥粉碎，用12-16倍量70-80%乙醇微波提取3次，每次提取40min、20min、10min,過濾,合并提取液； b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱，經(jīng)水洗至無色后，繼用70-90%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。
2.如權(quán)利要求I所述的刺玫葉總黃酮提取物的制備方法，其特征在于包括下列步驟 a.將刺玫果干燥粉碎，用12-16倍量70-80%乙醇微波提取3次，每次提取40min、20min、10min,過濾,合并提取液； b.將步驟a得到的提取液上大孔吸附樹脂柱，經(jīng)水洗至無色后，繼用70-90%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得浸膏，干燥至恒重。
3.如權(quán)利要求I所述的刺玫葉總黃酮提取物在制備用于治療冠心病、抗心肌缺血、降血脂及降糖藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種刺玫葉總黃酮提取物及其提取方法和其醫(yī)藥用途，屬于一種中藥材新的藥用部位中的提取物及其提取、純化方法和其藥物用途。將刺玫葉干燥、粉碎后用70-80％乙醇微波提取，提取液上大孔吸附樹脂，經(jīng)水洗脫至無色后，繼用70-90％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇可得到用于中藥新藥研究的原料藥。本發(fā)明提取純化的刺玫葉總黃酮提取物，具有治療冠心病、心肌缺血、高血脂及高血糖等疾病的作用。
文檔編號(hào)A61P3/10GK102614276SQ20121012420
公開日2012年8月1日 申請(qǐng)日期2012年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月22日
發(fā)明者李平亞, 王曉林, 薛健飛, 譚乃迪, 鐘方麗, 陳帥 申請(qǐng)人:吉林化工學(xué)院