專利名稱：靶向式抗腫瘤抗癌藥劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所涉及的是在《國家藥典》中常規(guī)使用無禁忌的中藥制備方法及化學類藥齊U，具體說是整合后的一種新型靶向式抗腫瘤抗癌藥劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
癌癥仍然是目前威脅人類健康最主要的疾病之一，它每年奪走成千上萬個患者的生命；目前大氣污染、環(huán)境污染、腫瘤患者逐年增加。早在50至70年代美國曾投入大量的資力、人力，決心在上世紀末攻克癌癥。但是；時至今日，癌癥仍然是世界性難題，世界各國都在探索研究開發(fā)抗癌藥物，每年都有多種新的抗癌品種藥物問世，但這些藥物普遍存在療效差、毒副反應大等多種問題，在治療方面任然沒有明顯的突破。對于癌癥的治療，至今仍然局限于手術(shù)、化療、放療為治療手段。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服腫瘤患者通常進行手術(shù)、放療、化療手段后毒副反應帶來的痛苦；本發(fā)明的目的在于提供一種靶向式抗腫瘤抗癌藥劑。所謂的分子靶向治療，是在細胞分子水平上，針對已經(jīng)明確的致癌位點來設(shè)計相應的治療藥物,藥物進入體內(nèi)會特異地選擇致癌位點來相結(jié)合發(fā)生作用，使腫瘤細胞特異性死亡，而不會波及腫瘤周圍的正常細胞組織，所以靶向式的意思是:有目標針對性的、吸收更徹底、效果更佳。本發(fā)明的另一目的是提供靶向式抗腫瘤抗癌藥劑的制備方法。本方法成本低、生產(chǎn)工藝先進簡單、安全性可靠、可規(guī)?；a(chǎn)。本發(fā)明的目的可通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn):一種靶向式抗腫 瘤抗癌藥劑，含下列重量百分比原料:擬黑多刺螞蟻56 % 59%，胎盤27 % 29%，紅芪13 % 15%，蟲草素0.05 % 0.15%，延胡索0.05 % 0.10%。上述藥劑的制備方法，其步驟如下:①擬黑多刺螞蟻制備擬黑多刺螞蟻:春、夏、秋季在西部海拔3500米以上採挖野生活體洗凈一在純凈水中生物技術(shù)飼養(yǎng)7日后致死一曬干或60°C烘干7h干燥一存儲于冰箱備用一取冰箱備用擬黑多刺螞蟻一粉碎一過24目篩選干粉一干粉置于CO萃取器內(nèi)一調(diào)節(jié)萃取溶器流速15L/h —萃取壓力30MPa —溫度為60°C下進行3h —收集萃取用80°C石油醚分離一收集分離液在蒸餾器加熱至125°C —控制流液量一蒸餾液流出冷卻在0°C—過濾后裝入溶器滅菌待用；②健康人胎盤制備取健康人胎盤一經(jīng)過巴氏消毒器一速凍-20°C—剪切機切片一用膠體磨研磨成膠體化一加入適量紅芪酶水解一煮沸滅酶一注入95 %的乙醇靜止12h后離心，每分鐘8000轉(zhuǎn)，離心20分鐘一去除沉淀一用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量< 3000道爾頓的胎盤提取物；進行過濾即得一裝入溶器除菌待用；③紅芪炮制制備；除去雜質(zhì)、大小分開一取紅芪一洗凈一潤透一切厚片一干燥一粉碎一過24目篩選干粉備用一注入蒸餾器一加去離子水23000ml加熱至125°C—控制流液量一蒸餾液流出冷卻在0°C —過濾后裝入溶器滅菌待用；④.蟲草素:成品由國內(nèi)廠商或西安天豐生物科技有限公司購得；⑤.延胡索:成品由國內(nèi)廠商或國家藥品檢驗所購得。將以上①②③④⑤備用原料混合后注入二級藥用蒸餾水25000ml制成液劑置入容器中，加入活性碳處理后過濾，加入總380立升注射用水中及含有0.9%的氯化鈉溶液的容器中稀釋，攪拌均勻。注射用水經(jīng)氫氧化鈉調(diào)節(jié)滲透壓，并再次用過濾器過濾，濾液應符合國家GMP標準認定達標的大輸液企業(yè)按要求生產(chǎn)；分裝于250ml或500ml的玻璃瓶中，壓力設(shè)定在0.39兆帕、溫度設(shè)定在116°C條件下滅菌消毒后即得靶向式抗腫瘤抗癌藥劑。用藥方法與用量:成人患·者一次250ml 500ml緩慢靜脈注射(每分鐘40滴為宜)，對重癥患者及兒童酌減或尊醫(yī)囑。35天為一個療程；間歇2 5天開始第二療程，總療程2 4個，檢查臨床指標達標可以長期停藥。對重癥病患者必要時可重復使用。貯藏方法:陰涼、干燥、防曬、防潮、存放在10°C 25°C的室內(nèi)。藥物功效擬黑多刺螞蟻具有豐富的營養(yǎng)價值，蟻卵含有42-69%的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，28種游離氨基酸，20多種人體必需的微量元素，如鋅、鈣、鐵、硒、錳等；維生素A、B1、B2、B5、B6、B12、C、D、E等，以及三萜類化合物。蟻酸、草體蟻醛、三磷酸腺苷等共計70多種滋養(yǎng)成分。螞蟻的營養(yǎng)成分最全面、最豐富、最均衡、最具有生物活性、最天然，吸收率最高，效果最快。螞蟻能激活細胞、活化細胞、再生細胞，提高細胞的分裂增長，延緩細胞老化，延年益壽。螞蟻含有蟻酸，有抗風濕的能力效果好。螞蟻里有草體蟻醛，具有雙向免疫調(diào)節(jié)的作用，調(diào)節(jié)人體免疫功能，平衡人體營養(yǎng)。使排毒功能達到平衡正常，螞蟻具有抗炎解毒的作用。擬黑多刺螞蟻抗腫瘤、抗癌；含有的硒元素有抑制癌細胞生長的作用。螞蟻通過專家臨床試驗證明，抗癌率達到38%。擬黑多刺螞蟻是一種溫和的滋補良藥，具有扶正固本、延年益壽、補腎壯陽、強壯筋骨、祛瘀通絡、美容催乳的功效，其中以補腎之功尤為顯著。對陰虛、陽虛、血虛及氣血雙虛均可適用，食用后起到護肝、抗炎、抑菌、防癌、抗癌、解痙、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等作用。同時，臨床上用于治療類風濕、風濕、乙肝、托法、白發(fā)、性功能障礙、神經(jīng)衰弱、病后體力不足等虛損性疾病均有良好的療效。人體衰老的本質(zhì)在與氣虛血瘀、氣血失衡。而益氣活血、平衡氣血則可延緩衰老，擬黑多刺螞蟻在扶正祛邪和活血化瘀方面有著顯著的作用。因而，擬黑多刺螞蟻又是一種有效的抗衰老劑。功效1、營養(yǎng)細胞、活化細胞、促進細胞；2、具有廣普雙向調(diào)節(jié)，提升免疫功能；3、抗氧化、抗菌、抗風濕、降血脂、降血糖、降膽固醇、防癌、抗癌、防止多種疾病；4、美容護膚、增高、增智、增力、提升性功能、提高視力；
5、調(diào)解人體生命節(jié)律、調(diào)節(jié)睡眠；6、既是食品又是藥品與保健品，互補免疫增效食療之劑；7、是一種免疫興奮劑和調(diào)節(jié)劑；8、是一種全面增強人體免疫功能、抗衰老制劑；因此，擬黑多刺螞蟻它在體內(nèi)具有特殊的生理功能，是生物體內(nèi)不可缺少的成分
之一 O胎盤藥理作用:胎盤進入人體后，可作為抗原，不需要T細胞的輔助就能直接刺激B細胞產(chǎn)生抗體?？烧T導和促進T細胞分化、成熟；刺激B細胞產(chǎn)生并分泌免疫球紅芪(抗體)參與人體免疫反應，提高自然殺傷(NK)活力，在無抗體的情況下，靶向殺傷腫瘤(癌)細胞，發(fā)揮廣譜抗腫瘤，抗感染作用，參與免疫調(diào)節(jié)，提高白細胞介素_2 (1L-2)的產(chǎn)生水平和受體表達水平，增強外因單核細胞Y-干擾素的產(chǎn)生；增強血清中SOD活性sk顯著增加淋巴細胞功能，能有效防止輻射核放化療及污染中引起的腫瘤細胞生長，可防止惡性腫瘤放化療引起的CD4+降低?？傊且环N現(xiàn)代醫(yī)學的新型免疫劑，是現(xiàn)代的免疫珍品。提取胎盤的特點是:高純性胎盤 胎盤分子量極小，僅為3000道爾頓，可靜脈注射和肌肉注射。所以本品研究制造過程中選用了靜脈注射吸收更徹底，效果更明顯。紅芪的功效與作用:紅芪為植物和中藥材的統(tǒng)稱。野生植物紅芪主要產(chǎn)于甘肅省境內(nèi)，分布在偏僻的高寒山區(qū)宕昌、武都、峽縣、舟曲、臨潭、卓尼、文縣、禮縣、武山、西和及臨夏等地。由于紅芪根入藥，莖、葉可作飼料或燃料，多為人工栽培紅芪。為國家三級保護植物。功能主治補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌。用于氣虛乏力、食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴，慢性腎炎蛋白尿，糖尿病。貯藏置通風干燥處，防潮，防蛀。藥理作用1、正常大鼠飼以含黃芪粉末的事務I周后，測其耗氧量比服藥前逐漸增加。2、能加強正常心臟收縮，對衰竭的心臟有強心作用。3、本品能使管狀血管和腎臟血管擴張，并使全身末梢血管擴張，皮膚循環(huán)暢盛，使高血壓患者血壓下降。4、實驗者在自己身上進行了利尿試驗，證明黃芪有中等的利尿作用。5、黃芪磨成粉末加入飼料給大白鼠喂服3日，有阻抑實驗性腎炎作用。6、黃芪對小白鼠有鎮(zhèn)靜作用，能維持數(shù)小時。7、家兔口服黃芪，可使血糖明顯下降。8、對大白鼠離體子宮具有興奮收縮作用。9、抑菌試驗:本品在體外對志賀氏痢疾桿菌、炭疽桿菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、白喉桿菌、假白喉桿菌、肺炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌、枯草桿菌等均有抑制作用。蟲草素:是從冬蟲夏草中提取出來的一種天然生物活性物質(zhì)。能溶于水、乙醇。蟲草素為含氮配糖體的核酸衍生物，屬嘌呤類生物堿。蟲草素是一種核甙類新藥，20世紀70年代發(fā)現(xiàn)有抑制腫瘤抗癌作用，引起醫(yī)學界的高度重視。蟲草素目前在美國作為抗癌、抗病毒新藥已經(jīng)進入三期臨床試用階段；這個品種也表明了在本合成劑中應用的重要性。延胡索:含多種異喹啉類生物堿，有延胡索甲素、乙素、丙素、丁素、戊素、己素、庚素、辛素、壬素、葵素、子素、丑素、寅素、黃連堿、去氫延胡索甲素、延胡索胺堿、去氫延胡索胺堿及古倫胺堿等.延胡索的藥理作用:鎮(zhèn)痛作用，延胡索粉有鎮(zhèn)痛作用，其止痛效價約為阿片的1/100 ;延胡索總堿、延胡索甲素、乙素、丑素、癸素均有鎮(zhèn)痛作用，以乙素較強.各種劑型以醇制浸膏及粉劑作用強；鎮(zhèn)靜、安定、催眠作用:延胡索乙素具有一定的鎮(zhèn)靜、安定作用，其左旋體為新型的中樞抑制劑，較大劑量時對兔、狗、猴有明顯的催眠作用；對消化系統(tǒng)的影響:去氫延胡索甲素有顯著的抗大鼠實驗性胃潰瘍作用對心血管的作用:延胡索乙素、丑素有輕微降壓、減慢心率作用；去氫延胡索堿有降壓、增加冠狀竇血流量作用。在本劑中為了使病患者盡快解除痛疼，采用了靜脈注射劑方法使用吸收更徹底、作用更明顯的效果O將以上擬黑多刺螞蟻、胎盤、紅芪、蟲草素、延胡索制成藥劑后的綜合優(yōu)點是:人體不可缺少所需的微量元素，我們在選擇配料時考慮到這一點；因為:癌癥病大部分患者“邪氣盛則實，精氣奪則虛”的特征，采取雙向調(diào)節(jié)，治療與提升免疫功能并??；“扶正祛邪，標本兼治”的治療原則，在靶向式殺死癌細胞的同時很快提高人體免疫功能，解除患者的疼痛，改善臨床癥狀，使原本體弱的患者有了戰(zhàn)勝癌魔的勇氣。該組方從西藥成分組成配伍上深入研究，使配伍組方更科學合理，工藝技術(shù)更先進，組方混合后其成分發(fā)生了變化，其藥效功能發(fā)生了新的整合協(xié)同，不同于單藥作用的簡單相加，而是它們的作用機制發(fā)生了質(zhì)的變化，產(chǎn)生了一種新的殺死癌細胞抗腫瘤治癌機制的有效奇特作用。動物反復長急毒理學試驗本藥劑在大鼠每日分別腹腔注射1.5g生藥，0.75g生藥/kg，連續(xù)3個月，與NS組大鼠的一般狀況，攝食、飲食、糞便性狀等無差別；體重增長；外周血象；肝、腎功能生化檢查；重要臟器系數(shù)和病理組織學改變基本相同。停藥后所留的大鼠(每組各10只)繼續(xù)觀察3周，其組織學未見異常改變。停藥后3周內(nèi)未見產(chǎn)生繼發(fā)性毒性反應。表明本品在此劑量范圍內(nèi)長期使用是可靠安全的。另據(jù)試驗:根據(jù)藥物的毒性試驗方法，找不出本藥劑一次靜脈注射或腹腔注射引起小鼠0%和100%死亡的劑量，故無法測出本品靜脈注射或腹腔注射對小鼠的LD50。用最大耐受量測定方法，以0.05g生藥/20g體重，一日3次小鼠腹腔注射，總給藥量7.5生藥/kg，連續(xù)觀察7天，動物未出現(xiàn)中毒反應或死亡。計算出本品小鼠一日最大耐受量相當于臨床用量的250倍，表明本品毒性甚低，無副作用，臨床用藥是安全的；無不良反應。該品按照《中國藥典》二 00五年版
藥效學研究報告表明:研究本制劑注射液對人肝細胞IfepG-2抗腫瘤作用的分子機制及其對細胞活性的影響。方法:用透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)的變化；H0echst33258熒光染色觀察細胞核形態(tài)的變化；應用泫式細胞儀(FCM)PI染色檢測細胞周期變化及bcl-2的變化，AV/PI雙染檢測細胞膜的變化；免疫組化方法測定Survivin蛋白及NF_kBp65的表達；用TRAP-PCR銀染法對肝癌細胞活性進行檢測。結(jié)果:H0echst33258熒光染色顯示本品使細胞核輕微濃縮；免疫組化顯示本品使Survivin蛋白及NF_kBp65的表達下調(diào)(p< 0.0005) ;FCM檢測結(jié)果顯示本品作用后，S期細胞比例增高，G0/G1期及G2/M期細胞比例下降(P < 0.01)。結(jié)論:本品對人肝癌細胞的作用主要是癌細胞自噬，導致細胞漿空泡變性，胞漿內(nèi)容物降解，輕度的染色濃縮；明顯改變細胞周期，阻滯細胞于S期，細胞膜磷脂酰絲氨酸外翻，膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變；其誘導細胞自噬作用機制主要與抑制癌細胞活性有關(guān)。本試驗旨在研究本藥劑對人體癌細胞的作用機制。本藥劑藥對小鼠移植瘤的抑瘤作用和生命延長率的實驗觀察本藥劑是一種中藥西制方法的注射劑，其作用和臨床使用的作用機制是，靶向式破壞癌細胞及病變細胞的胞膜結(jié)構(gòu)，內(nèi)含解癌素6000ppm，對人體正常組織未發(fā)現(xiàn)毒副作用。為了驗證本藥劑注射對小鼠可移植性腫瘤有否抑制腫瘤生長和延長存活時間的作用，本實驗用小鼠肝癌(H22);小鼠前胃癌(FC)和小鼠子宮頸癌(U14)等三種腫瘤模型進行療效評估和實驗觀察。材料和方法:一、藥物1.本藥劑注射液為無色透明液體250ml瓶裝，內(nèi)含解癌素6000ppm,是用中藥西制方法合成的一種物質(zhì)，由何忠琳先生生產(chǎn)提供的成品藥。2.嗎特靈注射液，體內(nèi)抗癌實驗曾經(jīng)被證明對小鼠S_180，EAC實體瘤和Lewis肺癌均有明顯的抗癌作用，本實驗作用為陽性對照組用藥，由哈爾濱制藥三廠生產(chǎn)出品，批號為:961201.
二、腫瘤模型1.小鼠肝癌(H22)，接種率100%，皮下移植后10天可有80%的淋巴結(jié)內(nèi)轉(zhuǎn)移，標
本實驗室保存。2.小鼠前胃癌(FC)是一株肺內(nèi)高轉(zhuǎn)移模型，皮下接種可存活13-15天。試驗室用甲基芐基亞硝胺建立的腫瘤模型。3.小鼠子宮頸癌(U14):皮下移植為實體癌，腹腔內(nèi)注射可成為腹水瘤，腹腔內(nèi)注射瘤細胞后一般可存活12-14天。是試驗室建立和保存的瘤株。三、動物；615小鼠，為近交系二級動物，由中國醫(yī)學科學院腫瘤所購進，動物合格證號9209M19號，本實驗每批實驗用同一性別，體重一般為18±2克。四、腫瘤移植；三種腫瘤細胞，從液氮內(nèi)取出，復蘇后，每一種瘤細胞先在數(shù)只小鼠的腋窩皮下和腹腔內(nèi)接種，實體瘤待瘤體長至2cm大小時，處死動物，選擇生長良好的瘤組織,剪成小塊后再用不銹鋼網(wǎng)過濾制成單細胞懸液，細胞計數(shù)后，每批實驗均按2X10/0.2ml瘤細胞在小鼠腋窩下接種，5個組均用相同的瘤細胞同時在相同部位接種，腹水瘤一般是在腫瘤移植后6-8天取出腹水，用生理鹽水調(diào)整細胞數(shù)后，在小鼠腹腔內(nèi)接種2X10/0.2ml瘤細胞懸液。每批實驗均相同。五、實驗分組；瘤重抑制率，H22和FC瘤細胞腋皮下移植后隨機每批實驗分為5組同時進行。1、本藥劑注射液組:高、中和低三個劑量組，高劑量組:于癌細胞移植后24小時，按20ml/kg體重腹腔內(nèi)注射，(此劑量為人用量的2-4倍)2、中劑量組為10ml/kg體重，用原液稀釋I倍，其溶積不變。
3、低劑量組為5ml/kg體重，其溶積仍與高劑量組相同。每天I次，每批實驗，均連續(xù)給藥11天。4、陽性對照組(嗎特靈)組:每瓶IOml內(nèi)含500mg，本實驗稀釋50倍，按15mg/kg體重腹腔內(nèi)注射，每日一次，連續(xù)注射11次，實驗用劑量低于人的最高劑量。5、陰性對照組，腫瘤移植后，每天一次腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.3-0.4ml，連續(xù)注射11次。六、檢查指標；1、瘤重抑制率:停藥后第二天各組動物同時處死，剝離瘤體，稱重，按公式:
權(quán)利要求
1.一種靶向式抗腫瘤抗癌藥劑，含下列重量百分比原料: 將擬黑多刺螞蟻56 % 59 %，胎盤27 % 29 %，紅芪13 % 15 %，蟲草素0.05 % 0.15%，延胡索 0.05% 0.10%。
2.制備權(quán)利要求1所述一種靶向式抗腫瘤抗癌藥劑方法，其步驟如下: ①擬黑多刺螞蟻制備 擬黑多刺螞蟻:春、夏、秋季在西部海拔3500米以上採挖野生活體洗凈一在純凈水中生物技術(shù)飼養(yǎng)7日后致死一曬干或60°C烘干7h干燥一存儲于冰箱備用一取冰箱備用擬黑多刺螞蟻一粉碎一過24目篩選干粉一干粉置于CO萃取器內(nèi)一調(diào)節(jié)萃取溶器流速15L/h —萃取壓力30MPa —溫度為60°C下進行3h —收集萃取用80°C石油醚分離一收集分離液在蒸餾器加熱至125°C—控制流液量一蒸餾液流出冷卻在0°C —過濾后裝入溶器滅菌待用； ②健康人胎盤制備 取健康人胎盤一經(jīng)過巴氏消毒器一速凍-20°C—剪切機切片一用膠體磨研磨成膠體化—加入紅芪酶水解一煮沸滅酶一注入95%的乙醇靜止12h后離心，每分鐘8000轉(zhuǎn)，離心20分鐘一去除沉淀一用 切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量< 3000道爾頓的胎盤提取物；進行過濾即得一裝入溶器除菌待用； ③紅芪炮制制備； 除去雜質(zhì)、大小分開一取紅芪一洗凈一潤透一切厚片一干燥一粉碎一過24目篩選干粉備用一注入蒸餾器一加去離子水23000ml加熱至125°C—控制流液量一蒸餾液流出冷卻在0°C —過濾后裝入溶器滅菌待用； ④.蟲草素 ⑤.延胡索 將以上①②③④⑤備用原料混合后注入二級藥用蒸餾水25000ml制成液劑置入容器中，加入活性碳處理后過濾，加入總380立升注射用水中及含有0.9%的氯化鈉溶液的容器中稀釋，攪拌均勻；注射用水經(jīng)氫氧化鈉調(diào)節(jié)滲透壓，并再次用過濾器過濾，濾液應符合國家GMP標準認定達標的大輸液企業(yè)按要求生產(chǎn)；分裝于250ml或500ml的玻璃瓶中，壓力設(shè)定在0.39兆帕、溫度設(shè)定在116°C條件下滅菌消毒后即得靶向式抗腫瘤抗癌藥劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種靶向式抗腫瘤抗癌藥劑，將制備后擬黑多刺螞蟻，胎盤，紅芪，蟲草素，延胡索混合后注入二級藥用蒸餾水制成液劑置入容器中，加入活性碳處理后過濾，加入注射用水中及含有氯化鈉溶液的容器中稀釋，攪拌均勻。注射用水經(jīng)氫氧化鈉調(diào)節(jié)滲透壓，并再次用過濾器過濾，濾液應符合國家GMP標準認定達標的大輸液企業(yè)按要求生產(chǎn)；分裝于250ml或500ml的玻璃瓶中，壓力設(shè)定在0.39兆帕、溫度設(shè)定在116℃條件下滅菌消毒后即得靶向式抗腫瘤抗癌藥劑。本發(fā)明安全、無毒、無副作用，發(fā)揮廣譜抗腫瘤、抗癌、抗感染作用；本品還含有豐富的營養(yǎng)成分，參與免疫功能調(diào)節(jié)，提高白細胞介素-2(1L-2)的產(chǎn)生水平和受體表達水平。
文檔編號A61K35/64GK103191197SQ20121000336
公開日2013年7月10日 申請日期2012年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月5日
發(fā)明者何忠琳 申請人:何忠琳