專利名稱：基于酰胺的胰島素前藥的制作方法
基于酰胺的胰島素前藥相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
本申請(qǐng)要求2010年6月24日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/358，192的優(yōu)先權(quán)，其特此通過(guò)引用整體并入。通過(guò)引用電子形式提交的材料的并入
通過(guò)引用整體并入計(jì)算機(jī)可讀的核苷酸/氨基酸序列表，所述序列表與本文一并提交并如下標(biāo)識(shí):于2011年6月23日創(chuàng)建的名稱為“IN216461”的一個(gè)27 KB ACII (文本)文件。
背景技術(shù)：
胰島素是一種由二鏈異源二聚體組成的肽激素，所述異源二聚體以生物合成的方式由低效能單鏈胰島素原前體通過(guò)酶加工獲得。人胰島素由通過(guò)二硫鍵結(jié)合在一起的兩條肽鏈(“A鏈”(SEQ ID NO:1)和“B鏈”(SEQ ID NO: 2))組成，共有51個(gè)氨基酸。B鏈的C末端區(qū)和A鏈的兩個(gè)末端區(qū)以三維結(jié)構(gòu)締合裝配成以高親和力結(jié)合胰島素受體的部位。對(duì)于幾乎所有形式的糖尿病，胰島素都顯示出無(wú)以倫比的降低葡萄糖的能力。遺憾的是，其藥理學(xué)并不是葡萄糖敏感性的，以至于它能夠產(chǎn)生可導(dǎo)致危及生命的低血糖癥的過(guò)度作用。不一致的藥理學(xué)是胰島素療法的標(biāo)志，使得要使血糖正常化而又不發(fā)生低血糖癥極為困難。此外，天然胰島素的作用持續(xù)時(shí)間短，而且天然胰島素需要經(jīng)過(guò)修飾使之適用于基礎(chǔ)葡萄糖的控制。已確立的延遲胰島素起效的方法包括降低溶解度和白蛋白結(jié)合。例如，已制備了兩種市售的胰島素衍生物以提供較長(zhǎng)的作用特征。更具體地講，制備了胰島素衍生物[GlyA21，ArgB31，ArgB32]胰島素，以使胰島素的pi由5.4變?yōu)?.7，導(dǎo)致該肽在生理pH下沉淀，由此遲緩吸收和作用時(shí)間(參見Bolli等，Diabetologia 1999,42，1151-1167)。然而，這種胰島素衍生物的IGF-1親和力升高，導(dǎo)致增殖作用增強(qiáng)和腫瘤發(fā)生的可能性增加。另一種市售的胰島素衍生物是[LysB29-十四烷?；琩es(B30)]胰島素,其中 LysB29 已經(jīng)用 C14 脂肪酸酰化(Mayer 等Science,88,5,687-713)。脂肪酸鏈的存在促進(jìn)肽與血清白蛋白的結(jié)合，導(dǎo)致血漿半衰期延長(zhǎng)。然而，這種衍生物具有體內(nèi)效能降低的缺點(diǎn)。另外，兩種胰島素衍生物的生物學(xué)作用在一名患者與另一患者之間表現(xiàn)出差異。前藥化學(xué)法為在從給藥部位清除并在血漿中以高度限定的濃度平衡后精確控制胰島素作用的開始和持續(xù)時(shí)間提供了機(jī)會(huì)。與現(xiàn)有的長(zhǎng)效胰島素類似物和制劑相比，該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是胰島素貯庫(kù)不是其中進(jìn)行注射的皮下脂肪組織，而是血液隔室。這就排除了現(xiàn)有技術(shù)延遲起效胰島素衍生物所遇到的吸收變化性。這還使通過(guò)皮下注射以外的途徑施用該肽激素成為可能。胰島素與其受體結(jié)合將引起生物刺激，但也將通過(guò)胰島素肽的酶促降解而引發(fā)胰島素誘導(dǎo)的藥理學(xué)的后續(xù)失活。使用胰島素前藥衍生物的額外優(yōu)勢(shì)是這類方法還基于抑制前藥被相應(yīng)受體識(shí)別的策略來(lái)延長(zhǎng)胰島素的生物半衰期。盡管存在與前藥衍生物相關(guān)的這些優(yōu)勢(shì)，但是制備這類前藥的復(fù)雜特性至今一直妨礙有效胰島素前藥衍生物的制備。為了開發(fā)成功的前藥激素，需要活性部位結(jié)構(gòu)地址(structural address),其可形成用于前藥結(jié)構(gòu)元件可逆附著的基礎(chǔ)。該結(jié)構(gòu)地址需提供兩個(gè)關(guān)鍵特征；(I)選擇性化學(xué)修飾的潛力，和(2)在脫去前藥結(jié)構(gòu)元件時(shí)以天然形式提供高度活性的能力。將本文公開的胰島素前藥以化學(xué)法轉(zhuǎn)化為可被受體識(shí)別的結(jié)構(gòu)，其中該化學(xué)轉(zhuǎn)化的速度將決定體內(nèi)生物作用的開始和持續(xù)時(shí)間。本申請(qǐng)公開的前藥化學(xué)法有賴于分子內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)，該反應(yīng)不依賴其它化學(xué)添加劑或者酶或酶抑制劑。理想的前藥在生理?xiàng)l件(例如pH 7.2和37°C )下應(yīng)可溶于水，并且以粉末形式長(zhǎng)期保存時(shí)應(yīng)保持穩(wěn)定。與母體藥物相比，前藥還應(yīng)是免疫沉默的，并顯示出低活性。通常，前藥將顯示出不超過(guò)母體藥物活性的10%,在一個(gè)實(shí)施方案中，與母體藥物相比,前藥顯示出小于10%、小于5%、約1%或小于1%的活性。此外，當(dāng)注射到體內(nèi)時(shí)，前藥應(yīng)在規(guī)定時(shí)段內(nèi)定量轉(zhuǎn)化為活性藥物。申請(qǐng)人首次公開了符合這些目標(biāo)中的每一項(xiàng)的胰島素前藥類似物。

發(fā)明內(nèi)容
基于肽的藥物是十分有效的藥物，其作用持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短并且治療指數(shù)可變。本公開內(nèi)容涉及胰島素前藥，其中將前藥衍生物設(shè)計(jì)成延遲起效，而且藥物半衰期延長(zhǎng)。起效延遲是有利的，因?yàn)樵试S前藥在其活化前系統(tǒng)分布。因此，施用前藥排除了在給藥時(shí)由峰值活性引起的并發(fā)癥，并提高母體藥物的治療指數(shù)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方·案，將二肽通過(guò)酰胺鍵與胰島素肽的活性部位共價(jià)連接來(lái)制備胰島素的前藥衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，二肽在干擾胰島素與胰島素受體和IGF-1受體相互作用的能力的位置上與胰島素肽共價(jià)結(jié)合。隨后在生理?xiàng)l件下且缺乏酶活性時(shí)，通過(guò)導(dǎo)致二酮哌嗪或二酮嗎啉形成的分·子內(nèi)反應(yīng)除去二肽，恢復(fù)多肽的完整活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供具有U-O-胰島素的通用結(jié)構(gòu)的胰島素前藥，其中U為氨基酸或羥酸，0為通過(guò)在U-O和胰島素肽的胺之間形成酰胺鍵而與胰島素肽連接的N-烷基化氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，U-O 二肽在A鏈或B鏈各自的N端或與A鏈或B鏈各自的A19、B16或B25位對(duì)應(yīng)的氨基酸側(cè)鏈上通過(guò)酰胺鍵結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，選擇U-O的結(jié)構(gòu)，其中在生理?xiàng)l件下的PBS中，在約I小時(shí)至約720小時(shí)內(nèi)U-O自胰島素肽的化學(xué)裂解完成至少約90%。在一個(gè)實(shí)施方案中，在生理?xiàng)l件下的PBS中，U-O自胰島素肽的化學(xué)裂解半衰期(t1/2)為至少約I小時(shí)至約I周。在一個(gè)實(shí)施方案中，選擇U和0以抑制存在于哺乳動(dòng)物血清中的酶從胰島素肽上酶促切割U-O 二肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，選擇U和/或0，使得在生理?xiàng)l件下的PBS中，從胰島素肽對(duì)U-O的裂解半衰期不大于在包含DPP-1V蛋白酶的溶液中從胰島素肽對(duì)U-O的裂解半衰期的兩倍(即在DPP-1V蛋白酶存在和生理?xiàng)l件下從胰島素前藥中裂解U-O不會(huì)以超過(guò)2倍的更快速率發(fā)生(與不存在該酶的相同條件相比))。在一個(gè)實(shí)施方案中，U、0或U-O與之連接的胰島素肽的氨基酸為非編碼氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，U和/或0為呈D立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸。在一些示例性的實(shí)施方案中，U為呈D立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸，而0為呈L立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸。在一些示例性的實(shí)施方案中，U為呈L立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸，而0為呈D立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸。在一些示例性的實(shí)施方案中，U為呈D立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸，而0為呈D立體異構(gòu)體構(gòu)型的氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，0為N-烷基化氨基酸，但不是脯氨酸。
在一個(gè)實(shí)施方案中，二肽前藥元件包含具有以下式I通用結(jié)構(gòu)的化合物:
權(quán)利要求
1.一種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ； 其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前藥，其中B選自甘氨酸(N-甲基)、甘氨酸(N-乙基)、甘氨酸(N-丙基)、甘氨酸(N- 丁基)、甘氨酸(N-戊基)、甘氨酸(N-己基)、甘氨酸(N-庚基)和甘氨酸(N-辛基)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的前藥，其中B為甘氨酸(N-甲基)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的前藥，其中B為甘氨酸(N-己基)。
5.一種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ； 其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的前藥，其中R4選自CH3、CH2(C1-C4烷基)、CH2 (C1-C4)烯基、CH2 (C0-C4 烷基)0H、CH2 (C0-C4 烷基)SH、CH2 (C0-C3 烷基)SCH3XH2 (C0-C3 烷基)CONH2、CH2 (C0-C3烷基)C00H、CH2 (C0-C4 烷基)NH2 和 CH2 (C0-C3 烷基)NHC (NH2+) NH2。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-C1-Cltl烷基)、亮氨酸(N-C1-Cltl燒基)、甲硫氨酸(N-C1-Cltl燒基)、天冬酰胺(N-C1-Cltl燒基)、谷氨酸(N-C1-Cltl燒基)、天冬氨酸(N-C1-Cltl燒基)、谷氨酰胺(N-C1-Cltl燒基)、組氨酸(N-C1-Cltl燒基)、賴氨酸(N-C1-Cltl烷基)、精氨酸(N-C1-Cltl烷基)、絲氨酸(N-C1-Cltl烷基)和半胱氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-C1-C6烷基)、亮氨酸(N-C1-Qg基)、甲硫氨酸(N-C1-C6燒基)、天冬酰胺(N-C1-C6燒基)、谷氨酸(N-C1-C6燒基)、天冬氨酸(N-C1-C6燒基)、谷氨酰胺(N-C1-C6燒基)、組氨酸(N-C1-C6燒基)、賴氨酸(N-C1-C6燒基)、精氨酸(N-C1-C6烷基)、絲氨酸(N-C1-C6烷基)和半胱氨酸(N-C1-C6烷基)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-甲基)、亮氨酸(N-甲基)、甲硫氨酸(N-甲基)、天冬酰胺(N-甲基)、谷氨酸(N-甲基)、天冬氨酸(N-甲基)、谷氨酰胺(N-甲基)、組氨酸(N-甲基)、賴氨酸(N-甲基)、精氨酸(N-甲基)、絲氨酸(N-甲基)和半胱氨酸(N-甲基)。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的前藥，其中R4選自CH2(Ctl-C3烷基)(C3-C6環(huán)烷基)、CH2 (Ctl-C3烷基)(C2-C5 雜環(huán)基)、CH2 (C0-C3 烷基)(C6-Cltl 芳基)R7、CH2 (C1-C3 烷基)(C3-C9 雜芳基)和CH2 (C0-C12烷基)(W1) C1-C12烷基，其中W1為選自N、S和O的雜原子，且其中R7選自H和OH。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-C1-Cltl烷基)、酪氨酸(N-C1-C10烷基)和色氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-C1-C6烷基)、酪氨酸(N-C1-C6烷基)和色氨酸(N-C1-C6烷基)。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所 述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-甲基)、酪氨酸(N-甲基)和色氨酸(N-甲基)。
14.根據(jù)權(quán)利要求5所述的前藥，其中B為脯氨酸。
15.—種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ； 其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的前藥，其中R4是OKC1-C8烷基)2或OKC1-C8烷基)0H。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-C1-Cltl烷基)、纈氨酸(N-C1-C10烷基)和蘇氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-C1-C6烷基)、纈氨酸(N-C1-C6烷基)和蘇氨酸(N-C1-C6烷基)。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-甲基)、纈氨酸(N-甲基)和蘇氨酸(N-甲基)。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前藥，其中所述脂族氨基是在A鏈或B鏈的N端氨基酸上的α氨基。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的前藥，其中所述脂族氨基是在Q的側(cè)鏈上的脂族氨基。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的前藥，其中所述B鏈包含序列FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT (SEQ ID NO: 8)或FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT(SEQ ID NO: 9)，且所述脂族氨基是賴氨酸的側(cè)鏈氨基。
23.—種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ；其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的前藥，其中B選自甘氨酸(N-甲基)、甘氨酸(N-乙基)、甘氨酸(N-丙基)、甘氨酸(N- 丁基)、甘氨酸(N-戊基)、甘氨酸(N-己基)、甘氨酸(N-庚基)和甘氨酸(N-辛基)。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的前藥，其中B為甘氨酸(N-甲基)。
26.根據(jù)權(quán)利要求24所述的前藥，其中B為甘氨酸(N-己基)。
27.—種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ； 其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的前藥，其中R4選自CH3、CH2 (C1-C4烷基)、CH2 (C1-C4)烯基、CH2 (C0-C4 烷基)0H、CH2 (C0-C4 烷基)SH、CH2 (C0-C3 烷基)SCH3XH2 (C0-C3 烷基)CONH2、CH2 (C0-C3烷基)COOH、CH2 (C0-C4 烷基)NH2 和 CH2 (C0-C3 烷基)NHC (NH2+) NH2。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-C1-Cltl烷基)、亮氨酸(N-C1-Cltl燒基)、甲硫氨酸(N-C1-Cltl燒基)、天冬酰胺(N-C1-Cltl燒基)、谷氨酸(N-C1-Cltl燒基)、天冬氨酸(N-C1-Cltl燒基)、谷氨酰胺(N-C1-Cltl燒基)、組氨酸(N-C1-Cltl燒基)、賴氨酸(N-C1-Cltl烷基)、精氨酸(N-C1-Cltl烷基)、絲氨酸(N-C1-Cltl烷基)和半胱氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-C1-C6烷基)、亮氨酸(N-C1-C6燒基)、甲硫氨酸(N-C1-C6燒基)、天冬酰胺(N-C1-C6燒基)、谷氨酸(N-C1-C6燒基)、天冬氨酸(N-C1-C6燒基)、谷氨酰胺(N-C1-C6燒基)、組氨酸(N-C1-C6燒基)、賴氨酸(N-C1-C6燒基)、精氨酸(N-C1-C6烷基)、絲氨酸(N-C1-C6烷基)和半胱氨酸(N-C1-C6烷基)。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的前藥，其中B選自丙氨酸(N-甲基)、亮氨酸(N-甲基)、甲硫氨酸(N-甲基)、天冬酰胺(N-甲基)、谷氨酸(N-甲基)、天冬氨酸(N-甲基)、谷氨酰胺(N-甲基)、組氨酸(N-甲基)、賴氨酸(N-甲基)、精氨酸(N-甲基)、絲氨酸(N-甲基)和半胱氨酸(N-甲基)。
32.根據(jù)權(quán)利要求27所述的前藥，其中R4選自CH2(Ctl-C3烷基)(C3-C6環(huán)烷基)、CH2 (C0-C3 烷基)(C2-C5 雜環(huán)基)、CH2 (C0-C3 烷基)(C6-Cltl 芳基)R7、CH2 (C1-C3 烷基)(C3-C9 雜芳基)和CH2 (Ctl-C12烷基)(W1)C1-C12烷基，其中W1為選自N、S和O的雜原子，且其中R7選自H和0H。
33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-C1-Cltl烷基)、酪氨酸(N-C1-C10烷基)和色氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-C1-C6烷基)、酪氨酸(N-C1-C6烷基)和色氨酸(N-C1-C6烷基)。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的前藥，其中B選自苯丙氨酸(N-甲基)、酪氨酸(N-甲基)和色氨酸(N-甲基)。
36.根據(jù)權(quán)利要求27所述的前藥，其中B為脯氨酸。
37.一種包含以下結(jié)構(gòu)的前藥:A-B-Q ； 其中Q是包含A鏈和B鏈的胰島素肽，其中所述A鏈包含序列Giveqccx1Sicslyqlenx2Cx3 (seq id no: 3)，且所述b鏈包含序列x14-x4lcgx5x6lvealx7lvcgERGFX8 (SEQ ID NO: 14)， 其中 X14是鍵，或選自下述的1-4個(gè)氨基酸的序列:FVNQ (SEQ ID NO: 11)、VNQ、NQ和Q ; X1選自蘇氨酸和組氨酸； X2為以下通用結(jié)構(gòu)的氨基酸
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的前藥，其中R4是OKC1-C8烷基)2或OKC1-C8烷基)0H。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-C1-Cltl烷基)、纈氨酸(N-C1-C10烷基)和蘇氨酸(N-C1-Cltl烷基)。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-C1-C6烷基)、纈氨酸(N-C1-C6烷基)和蘇氨酸(N-C1-C6烷基)。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的前藥，其中B選自異亮氨酸(N-甲基)、纈氨酸(N-甲基)和蘇氨酸(N-甲基)。
42.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，其中RJPR2獨(dú)立地選自C1-Cltl烷基、C2-Cltl烯基、(C1-Cltl 烷基)OH、(C1-Cltl 烷基)SH、(C2-C3 烷基)SCH3、(C1-C4 烷基)CONH2、(C1-C4 燒基)COOH、(C1-C4 烷基)NH2、(C1-C4 烷基)NHC (NH2+) NH2、(C0-C4 烷基)(C3-C6 環(huán)烷基)、(C0-C4烷基)(C2-C5 雜環(huán)基)、(C0-C4 烷基)(C6-Cltl 芳基)R7、(C1-C4 烷基)(C3-C9 雜芳基)和 C1-C12烷基(W1) C1-C12烷基，其中W1為選自N、S和0的雜原子，或者R1和R2與它們所連接的原子一起形成C3-C12環(huán)烷基，且其中R7選自H和0H。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的前藥，其中A是氨基異丁酸。
44.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，其中R1是H并且R2選自H、C1-C10烷基、C2-C10 烯基、(C1-C10 烷基)OH、(C1-C10 烷基)SH、(C2-C3 烷基)SCH3、(C1-C4 烷基)CONH2、(C1-C4烷基)COOH、(C1-C4 烷基)NH2、(C1-C4 烷基)NHC (NH2+) NH2、(C0-C4 烷基)(C3-C6 環(huán)烷基)、(C0-C4烷基)(C2-C5 雜環(huán)基)、(C0-C4 烷基)(C6-Cltl 芳基)R7、(C1-C4 烷基)(C3-C9 雜芳基)和 C1-C12烷基(W1) C1-C12烷基，其中R7選自H和0H，其中W1為選自N、S和0的雜原子，或者R1和R2與它們所連接的原子一起形成C3-C12環(huán)烷基，或者R2和R5與它們所連接的原子一起形成4、5或6元雜環(huán)。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的前藥，其中A選自賴氨酸、半胱氨酸和丙氨酸。
46.根據(jù)權(quán)利要求44或45所述的前藥，其中A具有d_立體化學(xué)。
47.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，其中A-B選自Aib-Gly(N-己基)、dLys-Gly (N-己基)、dCys-Gly (N-己基)、dAIa-GIy (N-己基)、Aib-Gly (N-甲基)、dLys-Gly (N-甲基)、dCys-Gly (N-甲基)、dAIa-GIy (N-己基)、Aib-Phe (N-甲基)、dLys-Phe (N-甲基)、dCys-Phe (N-甲基)或 dAIa-Phe (N-甲基)。
48.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，所述前藥另外包含與所述前藥共價(jià)連接的未水部分。
49.根據(jù)權(quán)利要求48所述的前藥，其中所述親水部分是聚乙二醇。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的前藥，其中所述聚乙二醇與A-B共價(jià)連接。
51.根據(jù)權(quán)利要求50所述的前藥，其中所述聚乙二醇通過(guò)間隔物與A-B共價(jià)連接。
52.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，所述前藥另外包含與所述前藥共價(jià)連接的?；蛲榛?。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的前藥，其中所述?；蛲榛cA-B共價(jià)連接。
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的前藥，其中所述酰基或烷基通過(guò)間隔物與A-B共價(jià)連接。
55.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的前藥，其中B鏈羧基端經(jīng)由8-12個(gè)氨基酸的肽接頭與A鏈的氨基端連接，以形成單鏈胰島素類似物。
56.根據(jù)權(quán)利要求55所述的前藥，其中所述肽接頭選自:GYGSSSRRAPQT;SEQ ID NO:23,GYGSSSX7X8 (SEQ ID NO: 71)或 GAGSSSRRAPQT (SEQ ID NO: 70)，其中 X7 和 X8 獨(dú)立地為鳥氨酸、精氨酸或賴氨酸。
全文摘要
提供了胰島素和胰島素類似物的前藥制劑，其中胰島素肽已通過(guò)酰胺鍵連接二肽前藥元件來(lái)修飾。本文公開的前藥具有至少10小時(shí)、更通常大于2小時(shí)、20小時(shí)和小于70小時(shí)的延長(zhǎng)的半衰期，并且在生理?xiàng)l件下通過(guò)由化學(xué)不穩(wěn)定性驅(qū)動(dòng)的非酶促反應(yīng)轉(zhuǎn)化成活性形式。
文檔編號(hào)A61K38/00GK103119057SQ201180040875
公開日2013年5月22日 申請(qǐng)日期2011年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月24日
發(fā)明者R.D.迪馬基, 寇賓賓, 程抒江 申請(qǐng)人:印第安納大學(xué)研究及科技有限公司