專利名稱：一種小檗皮提取物及該提取物和小檗皮的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種小檗皮提取物及該提取物和小檗皮的用途，屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著生活水平及現(xiàn)代化程度的提高，生活節(jié)奏的加快，膳食結(jié)構(gòu)與生活習(xí)慣的改變，糖尿病、高血脂、高血壓、代謝綜合征等一系列慢性疾病的發(fā)病率也逐漸增加。研究發(fā)現(xiàn)，胰島素抵抗(Insulin Resistance，IR)，不僅是II型糖尿病的發(fā)病基礎(chǔ)，更是貫穿高血脂、代謝綜合征等多種代謝相關(guān)疾病的主線，是連結(jié)它們的紐帶，為這些疾病的共同病理生
理基礎(chǔ)。目前，對(duì)代謝疾病的研究發(fā)現(xiàn)，過氧化物酶體增殖物活化受體(PPARs)與胰島素抵抗有著密切關(guān)系。PPARS包括α、δ、Y三個(gè)亞型。報(bào)道較多的為PPAR α和PPAR γ 0 其中，PPAR α主要在肝臟中表達(dá)，能夠增強(qiáng)脂肪酸的β氧化，能降低血脂、改善胰島素敏感性，在動(dòng)物模型及人群中均可改善胰島素敏感性[李全民，等.中國(guó)藥學(xué)雜志.2005， 40(14) :1070-1072] ；PPAR γ主要在脂肪組織中表達(dá)，其功能是促進(jìn)脂肪酸在脂肪組織的沉積和脂肪細(xì)胞的分化，目前已知PPAR γ與胰島素抵抗密切相關(guān)[方朝暉，等.丹蛭降糖膠囊對(duì)胰島素抵抗大鼠大網(wǎng)膜脂肪細(xì)胞PPAR-YmRNA表達(dá)的影響.]。常用的PPARy激動(dòng)劑，是吡格列酮和羅格列酮，為胰島素增敏劑，但這兩種藥物會(huì)引起體重增加、浮腫、LDL膽固醇水平升高等副作用。這是因?yàn)镻PAR γ在人體內(nèi)涉及調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成、糖類代謝，以及脂肪細(xì)胞的分化，它的活化會(huì)促進(jìn)脂肪細(xì)胞的分化和脂肪吸收的儲(chǔ)存。而PPAR α主要在肝臟表達(dá)，它可以促進(jìn)脂質(zhì)的分解，目前市售的貝特類降脂藥就是PPAR α激動(dòng)劑。研究表明， 若同時(shí)激動(dòng)PPAR γ和PPAR α，則能夠同時(shí)調(diào)節(jié)糖尿病患者血糖和脂質(zhì)。近年來，除PPAR γ和PPAR α以外，PPAR δ也逐漸受到人們的重視，研究發(fā)現(xiàn)PPAR δ在脂質(zhì)及糖類代謝、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞存活、創(chuàng)傷愈合等多方面都有重要作用。 Chih-Hao Lee 等[Chih-Hao Lee, et al. PPAR δ regulates glucose metabolism and insulin sensitivity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 2006,103(9) :3444 3449]報(bào)道，高糖高脂飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗的對(duì)比研究結(jié)果表明PPAR δ基因敲除小鼠顯示代謝低下和葡萄糖耐受降低；PPAR δ 激活劑受體活化2型糖尿病模型小鼠(db/db)顯示肝臟葡萄糖輸出抑制，葡萄糖消耗增加， 脂肪細(xì)胞游離脂肪酸釋放抑制；通過不同組織的互補(bǔ)作用，PPAR δ調(diào)節(jié)新陳代謝平衡，改善機(jī)體糖脂代謝，增加胰島素敏感性。因此，研制開發(fā)PPAR δ激動(dòng)劑也已成為預(yù)防和治療儀脂代謝紊亂和胰島素抵抗為主要特征的代謝性疾病的新方向。在對(duì)PPARs的不斷認(rèn)識(shí)過程中，人們考慮到PPARs各亞型對(duì)人體均有不同的作用， 已經(jīng)開始著手研發(fā)PPARs多重激動(dòng)劑。如史克必成公司研發(fā)的含苯并惡唑結(jié)構(gòu)的烷氧基苯丙酸類化合物，就是很好的α / Y雙重激動(dòng)劑；PPAR葛蘭素-史克公司的GWM33，為PPAR α / δ雙重激動(dòng)劑；禮來研究實(shí)驗(yàn)室于2006年報(bào)道了 PPAR γ / δ雙重激動(dòng)劑，具有良好的胰島素增敏性，而體重增加等副作用輕于羅格列酮；甚至，默克公司還得到了一種PPAR完全激動(dòng)劑，能夠同時(shí)激活PPAR a、PPAR δ、PPAR Y的表達(dá)。目前，有研究表明，肝X細(xì)胞受體α (LXR α)激活也可能產(chǎn)生類似PPAR Y激活劑的作用[李婧.肝X受體在脂肪生成和脂肪細(xì)胞形成中的作用.國(guó)際生殖健康/計(jì)劃生育雜志.2010, ) :92-95] 0綜上，適度激活PPAR a、PPAR δ、PPAR Y、LXR α的表達(dá)，具有胰島素增敏劑的作用機(jī)制，能夠改善胰島素抵抗。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)該領(lǐng)域也有較多研究，發(fā)現(xiàn)了某些中藥也具有PPARs激動(dòng)劑的作用。 如專利申請(qǐng)?zhí)?01010174927. 9，發(fā)明名稱醋炙黃連炮制品的新用途，該申請(qǐng)公開了醋炙黃連在制備胰島素增敏劑及PPAR Y激動(dòng)劑的藥物中的用途。黃連中主要含有小檗堿 (6. 68% )、藥根堿(0. 36% )、巴馬汀(1.61% )、黃連堿(1.96% )、非洲防己堿(0. 44% 表小檗堿(0. 97% )等6種生物堿。藏藥小檗皮，藏藥名譯音杰唯哇興、給爾馴、杰星、吉爾巴，為小檗科植物甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.及同屬多種植物的干燥皮，主要包括甘肅小檗、直穗小檗、鮮黃小檗、小檗、西北小檗、川滇小檗、無粉刺紅珠、無脈小檗、刺紅珠、砂生小檗、 大黃檗、粉葉小檗等12種(《藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)》1995年版)，為藏醫(yī)臨床治療常用藥物，本品性涼、糙，味酸，斂諸毒、干黃水，功能清熱解毒、燥濕，用于尿路感染、腎炎等疾病的防治 (西藏等六省區(qū)衛(wèi)生局.藏藥標(biāo)準(zhǔn).西寧青海人民出版社.1979:11、衛(wèi)生部藥典委員會(huì).藥品標(biāo)準(zhǔn)·藏藥第一冊(cè).1995 340)(帝瑪爾·丹增彭措.晶珠本草.上海上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.1986 :76)，可使尿頻和小便渾濁之癥狀得到改善。小檗皮中含有小檗堿、 藥根堿、巴馬汀、小檗胺等生物堿類成分，干燥皮(根皮、莖皮)中的平均百分含量依次為 1. 274士0. 973,0. 421 士0. 464,0. 097士0. 104,0. 840士0. 772(鄭曉峰，王勤·蘭州大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版).2009，35(1) :71-75)。目前，尚未見將小檗皮或其提取物用于制備PPARs、LXR α激動(dòng)劑的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種小檗皮提取物，以及該提取物和小檗皮的新用途；本發(fā)明的另一目的是提供一種激動(dòng)PPARs和/或LXR α的藥物組合物。本發(fā)明提供了一種小檗皮提取物，它來源于小檗科植物甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.及同屬多種植物的干燥皮，該提取物中，含有小檗胺5. 2 11. 0%ff/ W、藥根堿2. 6 5. 5% W/W、巴馬汀0. 7 1. 4% W/W、小檗堿7. 9 16. 5% ff/ff0其中，同屬植物為直穗小檗、鮮黃小檗、小檗、西北小檗、川滇小檗、無粉刺紅珠、無脈小檗、刺紅珠、 砂生小檗、大黃檗、粉葉小檗。(參見《藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)》1995年版)進(jìn)一步地，該提取物中，各成分的重量比例為小檗胺藥根堿巴馬汀小檗堿=(7.4 9.8) (3.7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。其中，所述的小檗皮提取物為小檗皮的水或有機(jī)溶劑提取物。其中，所述的有機(jī)溶劑提取物為60-95% V/V的乙醇提取物，優(yōu)選70-90% V/V乙醇提取物，更優(yōu)選為70% V/V乙醇提取物。本發(fā)明還提供了小檗皮或上述小檗皮提取物在制備PPARs或/和LXR α激動(dòng)劑中的用途。
其中，所述激動(dòng)劑為PPAR α激動(dòng)劑、PPAR δ激動(dòng)劑、或PPAR α /PPAR δ雙重激動(dòng)劑。進(jìn)一步地，所述激動(dòng)劑為改善胰島素抵抗的藥物。其中，所述激動(dòng)劑為治療糖尿病、糖尿病高脂血癥、糖尿病高膽固醇血癥、糖尿病腎病、肥胖癥的藥物。其中，所述小檗皮提取物來源于小檗科植物甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.及同屬多種植物的干燥皮，該提取物中，含有小檗胺3. 6 11.0% W/W、藥根堿 1. 3 5. 5% W/W、巴馬汀 0. 35 1. 4% W/W、小檗堿 3. 95 ~ 16. 5% ff/ff0進(jìn)一步地，該提取物中，各成分的重量比例為小檗胺藥根堿巴馬汀小檗堿=(7. 4 9. 8) (3. 7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。其中，所述的小檗皮提取物為小檗皮的水或有機(jī)溶劑提取物。其中，所述的有機(jī)溶劑提取物為60-95% V/V的乙醇提取物。本發(fā)明還提供了一種激動(dòng)PPARs或/^PLXR α的藥物組合物，它是由有效量的小檗皮或上述的提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。其中，所述的制劑是口服制劑。小檗皮及其提取物，能夠激動(dòng)PPAR δ ,PPAR α、Lxr α，可以改善機(jī)體糖脂代謝， 增加胰島素敏感性，具有明顯的降血糖、降血脂作用；同時(shí)，還可以部分拮抗PPAR γ，克服了單純的PPAR γ激動(dòng)劑所具有的不良反應(yīng)，并且能阻止脂肪形成，可以避免現(xiàn)有胰島素增敏劑(PPAR γ激動(dòng)劑)產(chǎn)生的體重增加、膽固醇水平升高等副作用，為臨床治療代謝性疾病提供了一種新的選擇。


圖1本發(fā)明小檗皮提取物的HPLC檢測(cè)圖譜，其中，1.鹽酸小檗胺；2.鹽酸藥根堿； 3.鹽酸巴馬??；4.鹽酸小檗堿；圖2對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞胰島素抵抗模型PPARs、LXR α表達(dá)圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明小檗皮提取物的制備取藥材粉小檗皮(甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)碎成粗粉，浸漬M小時(shí)，加70%乙醇9倍量，以2ml/min. kg的速度滲漉，收集滲漉液，濃縮，干燥即得。實(shí)施例2本發(fā)明小檗皮提取物的制備取藥材粉小檗皮(甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)碎成粗粉，加70 %乙醇12倍量，回流提取2次，合并濾液，濃縮，干燥即得。實(shí)施例3本發(fā)明小檗皮提取物的制備取小檗皮(甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)，去其雜質(zhì)，切段，加水約高出藥面6 10cm，加熱，在沸騰狀態(tài)，保持1 2小時(shí)，傾出煮液，殘?jiān)僬丈戏?br> 5煎煮，殘?jiān)鼦壋?，殘?jiān)偌逯?次，煎煮液合并，靜置12小時(shí)，使雜質(zhì)沉淀，傾出上清液，底部渾濁液過濾，合并上清液及濾液，濃縮，即得。若測(cè)定該提取物的成分含量，也可對(duì)其進(jìn)行干
O實(shí)施例4本發(fā)明藥物組合物的制備取小檗皮(甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.的干燥皮)，去雜質(zhì)后，粉碎，過篩，裝膠囊即得。實(shí)施例5本發(fā)明小檗皮提取物中生物堿含量的測(cè)定1、色譜條件色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱XtimateTM C18 (4. 6X 250謹(jǐn)，5 μ m)。以 0. 三乙胺(碳酸氫銨，氨水調(diào)PH為10)為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，0 15min(10% 25% ) B，15 25min(25% 30% ) B，25 40min (30 % 45 % )B。檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm ；流速為lml/min ；柱溫為30°C ；理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于6000， 供試品色譜峰中其他雜質(zhì)色譜峰與待測(cè)物質(zhì)色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。本發(fā)明檢測(cè)方法也可以參考文獻(xiàn)張藝，等.RP-HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地黃連中6種生物堿的含量.中國(guó)中藥雜志·2010,35(19) :2576-2580。2、對(duì)照品溶液的制備精密稱取鹽酸藥根堿、非洲防己堿、鹽酸表小檗堿、鹽酸黃連堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿適量，以鹽酸-甲醇(1 100)分別制成1.06mg/ml、1.04mg/ml、0.256mg/ml、 0. 456mg/ml、0. 48mg/ml、0. 552mg/ml的溶液，做為對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別吸取鹽酸藥根堿、非洲防己堿、表小檗堿、黃連堿、巴馬汀和鹽酸小檗堿對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，以鹽酸甲醇(1 100)制成 16.96μβ/πι1、Μ.96μβ/πι1、40.96μβ/πι1、 72. 96 μ g/ml、57. 6 μ g/ml,264. 96 μ g/ml的混合溶液，作為混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。3、供試品溶液的制備取待測(cè)樣品約0. 5g，精密稱定，置150ml錐形瓶中，精密加入鹽酸甲醇 (1 100) 50ml，稱定重量，超聲處理(功率200W，頻率40kHz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，鹽酸甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，過0. 45 μ m微孔濾膜，作為供試品溶液。4、測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。結(jié)果參見圖1，表1-3。表1各成分在藥材中的含量
權(quán)利要求
1.一種小檗皮提取物，其特征在于它來源于小檗科植物甘肅小檗BerberiS kansuensis Schneid.及同屬多種植物的干燥皮，該提取物中，含有小檗胺3. 6 11. 0%ff/ W、藥根堿 1. 3 5. 5% W/W、巴馬汀 0. 35 1. 4% W/W、小檗堿 3. 95 16. 5% W/W。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于該提取物中，各成分的重量比例為 小檗胺藥根堿巴馬汀小檗堿=(7. 4 9. 8) (3. 7 5. 2) 1.0 (11. 3 16. 3)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取物，其特征在于所述的小檗皮提取物為小檗皮的水或有機(jī)溶劑提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的提取物，其特征在于所述的有機(jī)溶劑提取物為60-95%V/V 的乙醇提取物。
5.小檗皮或權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的小檗皮提取物在制備PPARs或/和LXRα 激動(dòng)劑中的用途。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于所述激動(dòng)劑為PPARα激動(dòng)劑、PPAR δ 激動(dòng)劑、或PPAR α /PPAR δ雙重激動(dòng)劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用途，其特征在于所述激動(dòng)劑為改善胰島素抵抗的藥物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于所述激動(dòng)劑為治療糖尿病、糖尿病高脂血癥、糖尿病高膽固醇血癥、糖尿病腎病、肥胖癥的藥物。
9.根據(jù)權(quán)利要求5-8任意一項(xiàng)所述的用途，其特征在于所述小檗皮提取物來源于小檗科植物甘肅小檗Berberis kansuensis Schneid.及同屬多種植物的干燥皮，該提取物中，小檗胺3. 6 11. 0% W/W、藥根堿1. 3 5. 5% W/W、巴馬汀0. 35 1. 4% W/W、小檗堿 3. 95 16. 5% W/W。
10.一種激動(dòng)PPARs或/和LXR α的藥物組合物，其特征在于它是由有效量的小檗皮或權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的提取物為活性成分，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學(xué)上常用的制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種小檗皮提取物。本發(fā)明還公開了小檗皮及該提取物的新用途。小檗皮及其提取物，能夠激動(dòng)PPAR δ、PPAR α、Lxr α，可以改善機(jī)體糖脂代謝，增加胰島素敏感性，具有明顯的降血糖、降血脂作用；同時(shí)，還可以部分拮抗PPAR γ，克服了單純的PPAR γ激動(dòng)劑所具有的不良反應(yīng)，并且能阻止脂肪形成，可以避免現(xiàn)有胰島素增敏劑(PPAR γ激動(dòng)劑)產(chǎn)生的體重增加、膽固醇水平升高等副作用，為臨床治療代謝性疾病提供了一種新的選擇。
文檔編號(hào)A61P3/06GK102327309SQ201110296460
公開日2012年1月25日 申請(qǐng)日期2011年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月28日
發(fā)明者孟憲麗, 張藝, 賴先榮 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)