專利名稱：一種包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，具體涉及一種包載紫杉烷類難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑及制備方法和用途。
背景技術(shù)：
近年來，腫瘤的發(fā)病率急劇上升，因其治療難度大、死亡率高，己成為人類死亡的第二大病因。目前，臨床應(yīng)用的大多數(shù)抗腫瘤藥物是疏水性藥物，如紫杉烷類的紫杉醇、多西紫杉醇，以及羥基喜樹堿等；上述藥物雖然已經(jīng)在臨床上廣泛使用，但市售制劑仍然存在如下諸多問題，如，目前常用的紫杉醇注射液(泰素、特素等)需加入高濃度的表面活性劑聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)和無水乙醇混合溶液來提高紫杉醇在水中的溶解度，但 Cremophor EL在體內(nèi)降解時(shí)釋放組胺，可導(dǎo)致嚴(yán)重的過敏反應(yīng)，還可在血液中形成微小顆粒，包裹紫杉醇分子，從而影響藥物分子向組織間擴(kuò)散，影響抗腫瘤效果；另外，有研究發(fā)現(xiàn) Cremophor EL，還可溶解PVC輸液器中的乙烯己基鄰苯二甲酸鹽，引起嚴(yán)重的毒性反應(yīng)，進(jìn)而影響用藥安全；所述的多西紫杉醇的市售制劑中也加入高濃度的吐溫-80作為增溶劑， 大量的吐溫容易引起溶血及過敏等不良反應(yīng)，為了防止上述過敏反應(yīng)的發(fā)生，患者在用藥前需用地塞米松等抗過敏藥進(jìn)行預(yù)處理等等，這些問題都給臨床用藥帶來諸多不便，同時(shí)也嚴(yán)重影響藥物療效和安全性。因此，新制劑的研究開發(fā)變得尤為迫切和重要，據(jù)知，紫杉醇新劑型如白蛋白納米紫杉醇、紫杉醇脂質(zhì)體(力撲素)等已有上市并且用于臨床。近年來發(fā)展迅速的兩性嵌段共聚物膠束研究是藥劑學(xué)納米體系研究的重要領(lǐng)域之一。兩性嵌段共聚物膠束是一種自組裝納米化膠體粒子，具有疏水性內(nèi)核與親水性外殼。 由于其具有臨界膠束濃度較低、耐稀釋性好、增溶疏水性藥物能力強(qiáng)、熱力學(xué)穩(wěn)定性較好等優(yōu)點(diǎn)，可采用化學(xué)、物理以及靜電作用等多種方法將難溶性藥物包裹在疏水內(nèi)核中，作為難溶性藥物的遞送載體，顯示出良好的應(yīng)用前景。有大量研究表明，兩性嵌段共聚物膠束能夠顯著增加難溶性藥物在水中的溶解度，提高治療劑量；且藥物包裹其中，可避免體內(nèi)的降解失活，又能減少毒副反應(yīng)。此外，由于膠束粒徑很小，通常在IOOnm以下，PEG修飾后可躲避 RES系統(tǒng)的吞噬，延長體內(nèi)循環(huán)時(shí)間，同時(shí)對腫瘤部位具有被動(dòng)靶向的EI3R效果；如果在聚合物親水基團(tuán)上接上對腫瘤特異性靶向的基團(tuán)，還可達(dá)到主動(dòng)靶向的目的。與其他的納米制劑相比，聚合物膠束具有強(qiáng)大的增溶能力；如紫杉醇，其固有溶解度約為ι μ g/ml，制成脂質(zhì)體可增溶到3. 4mg/ml ；而聚合物膠束的增溶能力則可達(dá)到IOmg/ ml以上，藥聚比可達(dá)到25% (w/w)以上；此外，制得的聚合物膠束可過濾除菌，進(jìn)一步制成凍干粉制劑，在貯存時(shí)間和易用性方面將得提升。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和技術(shù)難點(diǎn)，提供包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，具體涉及一種包載紫杉烷類難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑。
本發(fā)明的另一目的是提供所述聚合物膠束凍干制劑在制備治療肺癌、腸癌、乳腺癌、卵巢癌藥物中的用途，尤其是制備治療原發(fā)性腸細(xì)胞癌的藥物中的用途。本發(fā)明采用可生物降解且具有良好生物相容性的兩親嵌段共聚物通過分子自組裝形成膠束，再將難溶性腫瘤藥物包載于聚酯形成的疏水性內(nèi)核中而制得，該制劑包封率高、粒徑小、穩(wěn)定性好。本發(fā)明的聚合物膠束凍干制劑可明顯提高難溶性藥物的水溶性；利用聚合物膠束對于腫瘤血管的滲透和滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))，使更多抗腫瘤藥物被動(dòng)靶向而濃集于腫瘤組織；以提高抗腫瘤治療效果，降低藥物毒副作用。具體而言，本發(fā)明的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于， 以兩親嵌段共聚物作為膠束載體材料，制成載藥膠束，難溶性的抗腫瘤藥物包裹在膠束內(nèi)， 制成聚合物膠束凍干制劑。本發(fā)明中，膠束載體材料選用一定嵌段比例的甲氧基聚乙二醇2000-聚酯嵌段共聚物(mPEG2_-聚酯兩性聚合物)作為載體材料；本發(fā)明中，難溶性的抗腫瘤藥物選自紫杉醇或多西紫杉醇；本發(fā)明中，所述的難溶性抗腫瘤藥物與聚合物材料的質(zhì)量比為優(yōu)選 10% 20% ；本發(fā)明的進(jìn)一步目的是提供所述聚合物膠束凍干制劑的制備方法。本發(fā)明的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑的制備方法，其特征在于，首先合成聚乙二醇聚酯嵌段共聚物載體材料，再利用該材料制備載藥膠束，其包括步驟(1)合成聚乙二醇聚酯嵌段共聚物載體材料；(2)采用薄膜水化法制備載藥膠束水溶液；將難溶性抗腫瘤藥物與聚乙二醇聚酯嵌段共聚物溶于有機(jī)溶劑中，去除有機(jī)溶劑，得到藥物和聚合物的凝膠狀藥膜，隨后加入水溶液溶解分散藥膜，制得膠束溶液；本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中將難溶性抗腫瘤藥物與甲氧基聚乙二醇-聚酯嵌段共聚物溶于有機(jī)溶劑中；(3)所述膠束溶液(或加入凍干賦形劑)，經(jīng)過濾除菌、冷凍干燥，制得載藥聚合物膠束的凍干制劑。上述制備方法中，所用嵌段聚合物的制備方法采用聚醚與內(nèi)酯的本體共聚方法， 或采用非傳統(tǒng)的(專利申請?zhí)?01110063785. 3)制備方法其包括步驟用充分干燥的聚醚在真空條件下引發(fā)內(nèi)酯開環(huán)聚合制備嵌段共聚物，真空度要求< ImmHg ；聚合過程控制在130°C以上進(jìn)行，聚合時(shí)間為l_12h;反應(yīng)結(jié)束后產(chǎn)物中殘存的未反應(yīng)單體通過加水反應(yīng)去除，重金屬催化劑通過高速離心的方法去除；制得的共聚物材料分子量均一性好(PDI <1.2),未反應(yīng)的單體殘留量< 0. 01 %，重金屬殘留量< lppm，催化劑Sn < IOppm,可滿足藥用輔料的質(zhì)量要求。本發(fā)明的嵌段聚合物中，聚醚可選自聚乙二醇、聚乙二醇單甲醚、聚丙二醇或聚丁二醇，數(shù)均分子量為400-35000 ；內(nèi)酯可選自L-丙交酯、D，L-丙交酯、乙交酯、己內(nèi)酯或環(huán)狀碳酸酯及其衍生物；催化劑以溶液形式加入到反應(yīng)體系中，溶劑在體系真空除水的過程同時(shí)去除；所述的催化劑選自辛酸亞錫、氯化亞錫、二乙基鋅、氯化鋅或三乙基鋁，催化劑的用量為反應(yīng)物總重量的0. 05-3% ；
本發(fā)明的嵌段聚合物中，聚醚所占重量比為50. 1_90%，聚酯所占重量比為 10-49. 9% ；本發(fā)明中，所述的有機(jī)溶劑，是指可以完全溶解兩親嵌段聚合物和藥物的有機(jī)溶劑，包括乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、四氫呋喃等，上述溶劑可單獨(dú)或混合使用；本發(fā)明優(yōu)選乙腈、二氯甲烷、丙酮；所述有機(jī)溶劑的加入量體積(ml)與藥物和輔料總量(mg)的比例為1 5 60 ；本發(fā)明中，所述的溶解藥膜的分散溶液選自三蒸水、生理鹽水、5%葡萄糖溶液或磷酸鹽緩沖液；制得的膠束溶液在不影響包載藥物穩(wěn)定性的基礎(chǔ)上，控制PH值在6. 5 7. 5 間。本發(fā)明中，所述的膠束溶液可直接(或加入凍干保護(hù)劑后)凍干；所用的凍干保護(hù)劑劑為甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、右旋糖酐、甘氨酸、聚乙二醇中的任意一種或混合物，保護(hù)劑的添加量為處方總量的 15%，優(yōu)選量為2% 5% ；本發(fā)明制得的凍干制劑包封率高，> 90%，載藥量大，10% 20%，粒徑小，10 50nm，分散系數(shù)窄，P. I. <0.3;所述的凍干制劑采用注射用水、5%葡萄糖注射液或0. 9%氯化鈉注射液為臨床用藥的分散介質(zhì)。本發(fā)明用可生物降解且具有良好生物相容性的兩親嵌段共聚物通過分子自組裝形成膠束，包載難溶性腫瘤藥物于聚酯形成的疏水性內(nèi)核中，可大大提高難溶性藥物的溶解度，改善并提高藥物的安全性和有效性；本發(fā)明在載體材料合成工藝和膠束制劑的制備技術(shù)上解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的技術(shù)難點(diǎn)，制得得膠束凍干制劑具有包封率高、粒徑小、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)，可用于制備治療肺癌、腸癌、乳腺癌、卵巢癌等的藥物。本發(fā)明中，所述的凍干制劑加入注射用水、生理鹽水等可迅速溶解分散成透明的膠束溶液，粘度低，流動(dòng)性好，便于臨床用藥；經(jīng)人結(jié)腸癌HD9裸小鼠移植瘤抑制試驗(yàn)，結(jié)果表明，對移植瘤生長有明顯的抑制作用，所述的注射用紫杉醇膠束尤其可用于制備治療原發(fā)性腸細(xì)胞癌藥物，其安全性高于市售注射用紫杉醇注射液，該制劑對于臨床治療原發(fā)性腸細(xì)胞癌有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑具有以下優(yōu)點(diǎn)1，選用的mPEG2_-聚酯兩性聚合物材料，無毒、無免疫原性，在體內(nèi)可生物降解， 具有良好的生物相容性；對于難溶性藥物的包載增溶是利用其在水溶液中自組裝形成膠束的特點(diǎn)實(shí)現(xiàn)，無需使用吐溫、聚氧乙烯蓖麻油等增溶劑，消除了由傳統(tǒng)的溶媒帶來的用藥安全隱患，大大提高藥物的安全性；2，所選用的嵌段共聚物可形成膠束，膠束與生物體具有相容性，可生物降解，安全性很好；3，通過控制聚合物制備的條件，使制得的聚合物產(chǎn)物分子量均一性好(PDI < 1.幻，殘留未反應(yīng)的單體和重金屬催化劑的含量極低，可滿足藥用輔料的質(zhì)量要求；4，制得的載有紫衫烷類藥物的聚合物膠束凍干制劑具有包封率高(> 90% )，載藥量大(10% 20% )、粒徑小(10 50nm)、分散系數(shù)窄(P. I. < 0. 3)的特點(diǎn)；凍干過程明顯提高了載藥膠束的穩(wěn)定性，便于制劑的保存和運(yùn)輸；5，臨床用藥方便，所述的凍干制劑加入注射用水、生理鹽水等可迅速溶解分散成透明的膠束溶液，粘度低，流動(dòng)性好，便于臨床用藥；6，采用薄膜水化法制備膠束溶液，簡便易行、條件溫和可控、重復(fù)性好；通過控制投藥量和分散溶液的體積，可得到一系列不同濃度的載藥膠束，易于生產(chǎn)過程的控制，易于工業(yè)化生產(chǎn)的實(shí)施；7，通過動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)證實(shí)，本發(fā)明的膠束凍干制劑，可明顯提高紫杉醇或多西紫杉醇的安全性和有效性，具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。為了便于理解，以下將通過具體的附圖和實(shí)施例對本發(fā)明的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑進(jìn)行詳細(xì)地描述。需要特別指出的是，具體實(shí)例和附圖僅是為了說明方便，但不作為本發(fā)明的限制。


圖1是紫杉醇聚合物膠束的核磁共振H譜(D2O為溶劑)。圖2是紫杉醇聚合物膠束的核磁共振H譜(⑶Cl3為溶劑)。圖3是紫杉醇對照品的核磁共振H譜(⑶Cl3為溶劑)。圖4是包載紫杉醇膠束的透射電鏡圖。圖5顯示了激光粒度儀測定紫杉醇膠束的粒徑分布。圖6顯示了注射用多西紫杉醇膠束對A549肺癌細(xì)胞的抑制率的影響。圖7顯示了注射用紫杉醇膠束對人肺腺癌A549移植瘤裸小鼠體重影響。圖8顯示了注射用紫杉醇膠束對人肺腺癌A549裸小鼠移植瘤T/C(% )影響。圖9顯示了注射用紫杉醇膠束對人乳腺癌MCF-7裸小鼠移植瘤腫瘤體積影響。圖10顯示了注射用紫杉醇膠束對人結(jié)腸癌HD9裸小鼠移植瘤腫瘤體積影響(第一次試驗(yàn))。圖11顯示了注射用紫杉醇膠束對人結(jié)腸癌HD9裸小鼠移植瘤腫瘤體積影響(重復(fù)試驗(yàn))。
具體實(shí)施例方式實(shí)施實(shí)例1包載紫杉醇(多西紫杉醇)的聚合物膠束處方設(shè)計(jì)表1是包載紫杉醇(多西紫杉醇)聚合物膠束處方中各組分的比例)。表 權(quán)利要求
1.一種包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于，以兩親嵌段共聚物作為膠束載體材料，制成載藥膠束，難溶性的抗腫瘤藥物包裹在膠束內(nèi)，制成聚合物膠束凍干制劑；所述的難溶性抗腫瘤藥物與聚合物材料的質(zhì)量比為 觀％。
2.按權(quán)利要求1所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于， 所述的兩親嵌段共聚物為甲氧基聚乙二醇2000-聚酯嵌段共聚物，其中，所述的單甲醚聚乙二醇與聚酯的嵌段比例為1 0. 5 1.5，所述的聚酯選自D，L-丙交酯、L-丙交酯、己內(nèi)酯或乙交酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于，所述的嵌段共聚物為單甲醚聚乙二醇聚丙交酯，分子量范圍為3000-5000。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于，所述的聚酯片段長度為1000-3000。
5.按權(quán)利要求1所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于， 所述的難溶性抗腫瘤藥物與聚合物材料的質(zhì)量比為10% 20%。
6.按權(quán)利要求1所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于， 所述的難溶性的抗腫瘤藥物選自紫杉醇或多西紫杉醇。
7.按權(quán)利要求1所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑，其特征在于， 所述的的凍干制劑包封率> 90%，載藥量為10% 20%，粒徑為10 50nm，分散系數(shù)為 P. I. < 0. 3。
8.權(quán)利要求1所述的包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑的制備方法，其特征在于，其包括步驟(1)合成聚乙二醇聚酯嵌段共聚物載體材料；(2)采用薄膜水化法制備載藥膠束水溶液；將難溶性抗腫瘤藥物與聚乙二醇聚酯嵌段共聚物溶于有機(jī)溶劑中，去除有機(jī)溶劑，得到藥物和聚合物的凝膠狀藥膜，隨后加入水溶液溶解分散藥膜，制得膠束溶液；(3)所述膠束溶液或加入凍干賦形劑，經(jīng)過濾除菌、冷凍干燥，制得載藥聚合物膠束的凍干制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述嵌段共聚物的通過下述方法制備用充分干燥的聚醚在真空條件下引發(fā)內(nèi)酯開環(huán)聚合制備嵌段共聚物，真空度要求 < ImmHg ；聚合過程控制在130°C以上進(jìn)行，聚合時(shí)間為l_12h ；反應(yīng)結(jié)束后產(chǎn)物中殘存的未反應(yīng)單體通過加水反應(yīng)去除，重金屬催化劑通過高速離心的方法去除，制得嵌段聚合物；其中，制得的嵌段聚合物的PDI < 1. 2，未反應(yīng)的單體殘留量< 0. 01%，重金屬殘留量< lppm， 催化劑Sn < IOppm0
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑選自乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、四氫呋喃中的任意一種或混合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑選自乙腈、二氯甲烷或丙酮。
12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑的加入量與藥物和輔料總量的比例為Iml 5 60mg。
13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，選用三蒸水、生理鹽水、5%葡萄糖溶液或磷酸鹽緩沖液為溶解藥膜的分散溶液；制得的膠束溶液的PH值為6. 5-7. 5。
14.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的膠束溶液中，所述的凍干保護(hù)劑選自甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、右旋糖酐、甘氨酸、聚乙二醇中的任意一種或混合物，保護(hù)劑的添加量為_15%。
15.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的膠束溶液中，所用的凍干保護(hù)劑的添加量為2% -5%。
16.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述的凍干制劑采用注射用水、5% 葡萄糖注射液或0. 9%氯化鈉注射液為分散介質(zhì)。
17.權(quán)利要求1的凍干制劑在制備治療肺癌、腸癌、乳腺癌或卵巢癌藥物中的用途。
18.權(quán)利要求1的凍干制劑在制備治療原發(fā)性腸細(xì)胞癌藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種包載難溶性抗腫瘤藥物的聚合物膠束凍干制劑及制備方法和用途。本發(fā)明采用甲氧基聚乙二醇2000-聚酯嵌段共聚物通過分子自組裝形成膠束，再包載難溶性腫瘤藥物于聚酯形成的疏水性內(nèi)核中而制得。本凍干制劑的包封率高、載藥量高、粒徑小，可明顯提高難溶性藥物的水溶性，使更多抗腫瘤藥物被動(dòng)靶向而濃集于腫瘤組織，以提高抗腫瘤治療效果，降低藥物毒副作用，可用于制備治療肺癌、腸癌、乳腺癌、卵巢癌等的藥物。本凍干制劑還可加入注射用水、生理鹽水等迅速溶解分散成透明的膠束溶液，用于制備治療原發(fā)性腸細(xì)胞癌的藥物。
文檔編號(hào)A61K45/00GK102218027SQ201110105540
公開日2011年10月19日 申請日期2011年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月22日
發(fā)明者周勁松, 孫菁, 張立高, 李端, 沈亞領(lǐng), 蔣新國 申請人:上海誼眾生物技術(shù)有限公司