專利名稱：長效y2 受體激動(dòng)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療性肽的領(lǐng)域，即新的持久肽類似物例如肽YY(PYY)類似物及其衍生物，其中所述類似物或衍生物包含選自下述在肽中的至少一種改變針對(duì)蛋白酶解分解穩(wěn)定化所述肽類似物的置換、缺失、插入和修飾。
背景技術(shù)：
肽酪氨酸-酪氨酸(PYY)在用餐過程中由遠(yuǎn)端小腸和結(jié)腸中的L細(xì)胞釋放。已知 PYY具有在GI道中的外周作用并且也在中樞充當(dāng)飽腹感信號(hào)。PYY作為ΡΥΥ(1-36)釋放， 但切割為構(gòu)成約50%循環(huán)PYY的PYY(3-36)。在體內(nèi)主要負(fù)責(zé)降解成ΡΥΥ(3_36)的酶是二肽基肽酶IV(DPP IV)。PYY(3-36)通過蛋白酶和其他清除機(jī)制被快速消除。PYY(3-36)的半衰期據(jù)報(bào)道在豬中是<30分鐘。因此，PYY展示亞最佳藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，且必須至少每天施用一次，以便發(fā)揮療效。雖然hPYY(1-36)以極少選擇性激活Yl、Y2和TO受體，但DPPIV加工的hPYY(3-36) 展示對(duì)于Y2受體增加的選擇性，雖然保留了某些Yl和TO親和力。已知Y2受體激活減少食欲和食物攝入，而Yl和TO受體激活導(dǎo)致食欲和食物攝入中的增加。此外，Yl和TO受體激活可以增加血壓。PYY通過Y2受體發(fā)信號(hào)并且關(guān)于與Y2受體結(jié)合的決定簇主要定位于肽的C末端部分。相應(yīng)地，PYY的C末端部分中的變化涉及療效喪失的危險(xiǎn)?；谶@些肽中的一些在動(dòng)物模型和人中證實(shí)的作用和基于肥胖的人具有PYY的低基礎(chǔ)水平以及這種肽較低的用餐應(yīng)答的事實(shí)，已建議將PYY用于在肥胖和相關(guān)疾病的治療中使用。此外，Y2激動(dòng)劑已證實(shí)在胃腸(GI)道中具有抗分泌和促吸收效應(yīng)。已提出了 Y2激動(dòng)劑在許多胃腸病癥治療中的潛在用途。關(guān)于響應(yīng)Y2受體調(diào)節(jié)的病狀例如肥胖和腸分泌過多的治療，將希望使用持久的 Y2受體選擇性激動(dòng)劑，例如持久的PYY。PYY(3-36)的相對(duì)短半衰期限制這種肽的治療用途，因?yàn)榉€(wěn)定暴露水平將要求頻繁給藥，這對(duì)于患者將是非常不方便的。生物活性肽需要在刺激其分別受體后被滅活。循環(huán)肽的滅活途徑包括通過細(xì)胞表面或可溶性血漿肽酶的降解以及其他類型的清除機(jī)制。通過蛋白酶的所述降解由一組蛋白酶完成，包括調(diào)節(jié)肽的受體選擇性的高度專門化肽酶以及負(fù)責(zé)完全肽滅活的廣泛特異性肽酶。在所述清除機(jī)制中，腎清除是對(duì)于PYY去除是最重要的，雖然在某些情況下肝清除起重要作用，同時(shí)對(duì)于大多數(shù)肽和蛋白質(zhì)，不存在通過出汗和呼吸的清除。相應(yīng)地，希望延長PYY 的體內(nèi)半衰期。為了延長PYY的半衰期，該肽可以附著至較大的蛋白質(zhì)例如白蛋白。對(duì)于響應(yīng)Y受體調(diào)節(jié)的病狀例如肥胖的治療，使用這樣的PYY類似物將是有吸引力的，其激活Y受體亞型Y2并且重要的是還展示持久的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，并且像這樣可以用于具有比人PYY例如人PYY(3-36)更低施用頻率的給藥方案中。在人中，已將惡心和嘔吐描述為關(guān)于用Y2受體激動(dòng)劑治療的劑量限制性不利事件。已描述了在其中可以觀察到施用的正面治療效應(yīng)而無任何不利事件的治療窗，對(duì)于Y2 受體激動(dòng)劑是狹窄的。此外，動(dòng)物研究暗示慢性暴露是獲得最佳療效必需的。由于在臨床上對(duì)于PYY治療描述的窄治療窗，希望獲得與人ΡΥΥ(1-36)、人PYY(3-36)或具有等同于所述衍生物那種的血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈的人PYY (3-36)相比，具有改善的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的PYY類似物或其衍生物。所述改善的藥物代謝動(dòng)力學(xué)性質(zhì)將允許在治療窗內(nèi)更佳的滴定和/或使得能夠避免多重每日施用。發(fā)明概述在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及與人PYY(1-36)或人ΡΥΥ(3_36)相比，針對(duì)降低所述類似物或衍生物的功能性的C末端蛋白酶解分解具有改善穩(wěn)定性的PYY類似物或其衍生物，其中所述功能性通過如本文描述的測(cè)定(IV)、測(cè)定(I)或測(cè)定(V)進(jìn)行確定。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及PYY類似物或其衍生物，其包含i.包含具有至少14個(gè)碳原子的烷基鏈的至少一條血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈，其中所述烷基鏈任選進(jìn)一步包含遠(yuǎn)端羧酸或遠(yuǎn)端四唑基團(tuán)；和ii.選自下述的置換成蛋白質(zhì)生成(proteinogenic)或非蛋白質(zhì)生成氨基酸殘基的至少一個(gè)氨基酸殘基
權(quán)利要求
1. 一種PYY類似物或其衍生物，其包含包含具有至少14個(gè)碳原子的烷基鏈的至少一條血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈，其中所述烷基鏈任選進(jìn)一步包含遠(yuǎn)端羧酸或遠(yuǎn)端四唑基團(tuán)；和 .選自下述的置換成蛋白質(zhì)生成或非蛋白質(zhì)生成氨基酸殘基的至少一個(gè)氨基酸殘基
2.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述蛋白質(zhì)生成或非蛋白質(zhì)生成氨基酸殘基在選自位置36、35、34、33、32、31、30、四、28、27、26、25、21、20、19和4 或位置33、34、35和36的至少一個(gè)位置中。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈選自 A-B-C-D-、A-C-D-、A-B-C-和 A-C-，其中A-是
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈?zhǔn)?-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-羧基-4-({反式-4-[(19-羧基十九酰氨基)甲基]環(huán)己烷羰基}氨基)丁酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙酰氨基]乙氧基}乙氧基)乙酰基或2- -{2-[2-(2-{2-[4-羧基-4-(17-羧基十七酰氨基)丁酰氨基]乙氧基}-乙氧基) 乙酰氨基]-乙氧基}乙氧基)乙?；?。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述類似物或衍生物包含式(I)的氨基酸序列一一 Xa&33 一一 一式⑴ 其中Xaa1是Tyr、Wie、Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸、Lys或不存在； ) 是ftx)、Ala、Leu、Wie、羥脯氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸、Lys 或不存在；& 3是116、￥&1、1^11(1-氨基環(huán)戊基)羧酸、(1-氨基環(huán)己基)羧酸、I-氨基丁酸、2， 3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa4是Lys、Glu,2, 3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa5是ftx)、2，3- 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa6是Glu、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa7是Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa8是ftx)、Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa9是Gly、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa10是Glu、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa11是Asp、Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa12是Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa13是kr、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa14是Pro或羥脯氨酸；Xaa15是Glu、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa16是Glu、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa17是Leu、Val、lie、高亮氨酸、正亮氨酸、(1_氨基環(huán)戊基)羧酸、(1_氨基環(huán)己基) 羧酸或ι-氨基丁酸；Xaa18是Asn、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa19是Arg、Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa20是Tyr、Ala、W!e、3-吡啶基丙氨酸、2，3_ 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；& 21是171~413、^^、3-吡啶基丙氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa22是Ala、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa23是kr、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； 敘知是Leu、lie、Val、高亮氨酸、正亮氨酸、(1_氨基環(huán)戊基)羧酸、(1_氨基環(huán)己基) 羧酸、I"氨基丁酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa25是Arg、Ala、HiS、Tyr、氨基異丁酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa26是His、Arg、2，3- 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa27是Tyr、Ala、Wie、高Phe或3_吡啶基丙氨酸、2，3_ 二氨基丙酸、2，4_ 二氨基丁酸、 鳥氨酸或Lys ；是Ile、Val、LeU、高亮氨酸、正亮氨酸、(1_氨基環(huán)戊基)羧酸、(1_氨基環(huán)己基) 羧酸、氨基異丁酸、I"氨基丁酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa29是Asn、Gin,2, 3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa3tl是Met、Leu、Val、lie、高亮氨酸、氨基異丁酸、正亮氨酸、(1_氨基環(huán)戊基)羧酸、 (1-氨基環(huán)己基)羧酸、I"氨基丁酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ；Xaa31是LeiuVal、Ile、氨基異丁酸、高亮氨酸、正亮氨酸、(1_氨基環(huán)戊基)羧酸、(1_氨基環(huán)己基)羧酸、I"氨基丁酸、2，3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； Xaa32是kr、Thr,2, 3- 二氨基丙酸、2，4- 二氨基丁酸、鳥氨酸或Lys ； )(脅33是Arg、N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、O-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、胍基-丁氨基)_乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)_丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)_ 丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；父& 4是6111、六811、圯8、1^0、^甲基Gin、β-高Gin、(2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His ；& 35是六印、N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、O-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、胍基-丁氨基)_乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)_丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)_ 丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；Xa^5是Tyr、Phe, N-甲基Tyr、C-α -甲基Phe、3_吡啶基丙氨酸或(4_羥基-芐氨基)_乙酸；其中Xaa33、Xaa34> Xaa35和Xaasi中的至少一個(gè)選自Xaa33是N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2_氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)_ 丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)_丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；敘知是^甲基Glru β-高Glru (2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基 His ；Xaa35是N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2_氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)-乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)_ 丁酸、2-氨基-3-(4-胍基-苯基)_丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸；) 是N-甲基Tyr、C-a-甲基W!e、3-吡啶基丙氨酸或(4_羥基-芐氨基)-乙酸。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中是N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、 單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)_乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3- (4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。
7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中& 34是Pro、N-甲基 Gln, β-高Glru (2-氨基甲酰-乙氨基)-乙酸、N-甲基Asn或N-甲基His。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中是N-甲基Arg、甲基賴氨酸、二甲基賴氨酸、三甲基賴氨酸、2-氨基-3-胍基-丙酸、2-氨基-4-胍基-丁酸、 單甲基精氨酸、二甲基精氨酸、(2-胍基-乙氨基)-乙酸、(3-胍基-丙氨基)-乙酸、(4-胍基-丁氨基)_乙酸、2-氨基-3-(1-甲脒基-吡咯烷-2-基)-丙酸、2-氨基-4-(2-氨基-嘧啶-4-基)-丁酸、2-氨基-3- (4-胍基-苯基)-丙酸或氨基-(1-甲脒基-哌啶-4-基)-乙酸。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中) 是N-甲基Tyr、 C- α -甲基Phe,3-吡啶基丙氨酸或羥基-芐氨基)_乙酸。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中) 和) 不存在或Xaa1、Xaa2、Xaa3 禾口 Xaa4 不存在。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述類似物或衍生物選自 SEQ ID NO :3、SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :5、SEQ ID NO :6、SEQ ID NO :7、SEQ ID NO 8,SEQ ID NO 9,SEQ ID NO 10,SEQ ID NO 20、SEQ ID NO :21、SEQ ID NO :22、SEQ ID NO: 25、SEQ ID NO 26, SEQ ID NO :29、SEQ ID NO :30, SEQ ID NO :33 禾口 SEQ ID NO :35。
12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中與人PYY(1_36)或人 PYY(3-36)相比，所述類似物或衍生物針對(duì)C末端蛋白酶解分解具有改善的穩(wěn)定性，所述分解降低所述類似物或衍生物的功能性，其中所述功能性通過如本文描述的測(cè)定(IV)、測(cè)定 (I)或測(cè)定(V)進(jìn)行確定。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述類似物或衍生物不包含衍生化基團(tuán)，并且其中所述類似物或衍生物不是[N-甲基 Arg33] PYY (3-36)，[N-甲基 Gln34]PYY (3-36)，[N-甲基 Arg35] PYY (3-36)，[N-甲基 Tyr36] PYY (1-36)，或[N-甲基 Tyr36]PYY (3-36)。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，其中所述類似物或衍生物選自 SEQ ID NO =IUSEQ ID NO 13,SEQ ID NO 16,SEQ ID NO 17,SEQ ID NO 18,SEQ ID NO 19, SEQ ID NO 23, SEQ ID NO 24, SEQ ID NO 28, SEQ ID NO 32 禾口 SEQ ID NO :34。
15.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的PYY類似物或其衍生物，用于治療響應(yīng)Y受體調(diào)節(jié)的病狀，例如肥胖、肥胖相關(guān)疾病例如食物攝入的減少或糖尿病。
16.一種組合物，其包含如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)中定義的PYY類似物或其衍生物和至少一種藥學(xué)賦形劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及PYY類似物或其衍生物，其包含選自置換、插入、缺失和修飾的至少一個(gè)改變和包含具有至少14個(gè)碳原子的烷基鏈的任選血清白蛋白結(jié)合側(cè)鏈。此外，本發(fā)明涉及關(guān)于此的組合物和治療響應(yīng)Y2受體調(diào)節(jié)的病狀的方法。
文檔編號(hào)A61K47/48GK102573888SQ201080041228
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2010年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月18日
發(fā)明者J·奧爾森, J·科弗伊德, R·喬根森, S·奧斯特伽德 申請(qǐng)人:諾和諾德公司