專利名稱：人參的處理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種人參的處理方法。

背景技術(shù)：
人參含有皂苷類、多糖類、揮發(fā)油等多種活性成分，具有補(bǔ)元?dú)?、?fù)脈固脫、補(bǔ)脾益肺、生津安神的功效，是典型的藥食兩用性植物。但是，目前的人參加工產(chǎn)品，如紅參、白參、活性參、人參茶、人參碳酸飲料等，大多是將人參浸泡或研磨后與其他食品添加劑或可藥用載體加工而成，僅含有人參的有效成分。
靈芝不僅味道鮮美，還含有多糖、氨基酸、維生素和無機(jī)鹽等生物活性物質(zhì)，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、延緩衰老、降血脂、預(yù)防心血管疾病等多種功效，具有較高的保健及藥用價(jià)值。
中國(guó)菌物學(xué)會(huì)莊毅教授于1998年提出了藥用真菌在藥性基質(zhì)上進(jìn)行固體發(fā)酵的理論與方法(抗癌新藥槐耳沖劑的研究.中國(guó)藥學(xué)雜志.1998，33(5)。P273～275)。真菌與藥材雙向固體發(fā)酵時(shí)，藥材為真菌提供生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)，真菌的酶也會(huì)對(duì)藥材產(chǎn)生影響導(dǎo)致藥材的成分的改變。現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)公開了多種藥用真菌與多種藥材進(jìn)行雙向固體發(fā)酵，如申請(qǐng)?zhí)枮?00510041362.6的中國(guó)專利文獻(xiàn)公開了將藥用真菌與雷公藤進(jìn)行雙向固體發(fā)酵，以解雷公藤的毒的方法；申請(qǐng)?zhí)枮?00810023423.X的中國(guó)專利文獻(xiàn)公開了一種將藥用真菌與馬錢子進(jìn)行雙向固體發(fā)酵的方法，實(shí)現(xiàn)了對(duì)馬錢子的降毒存效。
本發(fā)明人考慮，將人參與靈芝進(jìn)行雙向固體發(fā)酵，得到的靈芝人參藥性菌質(zhì)既含有人參的有效成分，又含有靈芝的有效成分，具有良好的保健及藥用功效。


發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種人參的處理方法，提高人參的保健功效。
本發(fā)明提供了一種人參的處理方法，包括 將人參粉碎后加水潤(rùn)濕，滅菌后得到發(fā)酵基質(zhì)； 將靈芝菌種活化后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到發(fā)酵菌種； 將所述發(fā)酵菌種接種于發(fā)酵基質(zhì)中，在24℃～28℃、避光的條件下進(jìn)行雙向固體發(fā)酵10天～20天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。
優(yōu)選的，加水潤(rùn)濕時(shí)，水的重量為人參干重的50％～150％。
優(yōu)選的，加水潤(rùn)濕時(shí)，水的重量為人參干重的100％～150％。
優(yōu)選的，所述雙向固體發(fā)酵的溫度為26℃～28℃。
優(yōu)選的，所述雙向固體發(fā)酵的時(shí)間為10天～15天。
優(yōu)選的，所述擴(kuò)大培養(yǎng)的方法為液體培養(yǎng)液搖瓶培養(yǎng)或固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。
優(yōu)選的，所述液體培養(yǎng)液包括 2wt％的葡萄糖； 0.5wt％的蛋白胨； 0.1wt％的酵母粉； 0.1 5wt％的KH2PO4； 0.1 wt％MgSO4； 余量為水。
優(yōu)選的，所述人參為生曬人參或鮮人參。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明利用人參與靈芝雙向固體發(fā)酵技術(shù)對(duì)人參進(jìn)行處理，即將靈芝菌種活化并擴(kuò)大培養(yǎng)后，接種于人參固體發(fā)酵基質(zhì)上進(jìn)行發(fā)酵。在發(fā)酵過程中，人參為靈芝提供其生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)靈芝中的酶與人參中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)，通過產(chǎn)生新的化學(xué)成分或改變?cè)谐煞值暮渴谷藚@得新的性味功能。靈芝經(jīng)固體發(fā)酵后的產(chǎn)物可能存在于菌體細(xì)胞內(nèi)，也可能分泌到細(xì)胞外進(jìn)入發(fā)酵基質(zhì)人參中，由于靈芝生長(zhǎng)的大量菌絲體與發(fā)酵后的人參無法分離，因此得到的靈芝人參藥性菌質(zhì)既含有人參的有效成分也含有靈芝的有效成分，具有比人參或靈芝或兩者簡(jiǎn)單相加更好的保健和藥用功效，具有鎮(zhèn)靜、安神、補(bǔ)氣的功效，可以用于治療失眠、調(diào)節(jié)免疫力、抗腫瘤的藥物中，也可以作為保健品，增強(qiáng)亞健康人群的體質(zhì)。同時(shí)，靈芝與人參雙向固體發(fā)酵后得到的靈芝人參藥性菌質(zhì)具有靈芝特有的香味，能夠覆蓋人參的苦味，提高靈芝人參藥性菌質(zhì)的口感，使產(chǎn)品更易被大眾所接受。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明所稱雙向固體發(fā)酵技術(shù)是指真菌(靈芝)在中藥材(人參)組成的固體發(fā)酵基質(zhì)上進(jìn)行發(fā)酵的技術(shù)，在發(fā)酵過程中，真菌與中藥材的作用是雙向的，即一方面中藥材作為發(fā)酵基質(zhì)為真菌提供菌體生長(zhǎng)所需的C、N等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另一方面真菌中的酶與中藥材中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)，使中藥材具有新的性味功效。
本發(fā)明所稱靈芝人參藥性菌質(zhì)是指靈芝在人參組成的固體發(fā)酵基質(zhì)上生長(zhǎng)發(fā)酵而獲得的菌質(zhì)。靈芝經(jīng)固體發(fā)酵后的產(chǎn)物包括菌體即次生代謝物質(zhì)，這些產(chǎn)物可能存在于菌體細(xì)胞內(nèi)，也可能分泌到細(xì)胞外進(jìn)入發(fā)酵基質(zhì)人參中；同時(shí)，由于靈芝生長(zhǎng)的大量菌絲體與發(fā)酵后的人參無法分離，因此發(fā)酵后得到的物質(zhì)統(tǒng)稱為靈芝人參藥性菌質(zhì)。
本發(fā)明所稱的發(fā)酵基質(zhì)指能提供真菌生長(zhǎng)所必需成分的物質(zhì)，主要是人參，也可以為由人參和農(nóng)副產(chǎn)品組成的基質(zhì)。
本發(fā)明提供了一種人參的處理方法，包括 將人參粉碎后加水潤(rùn)濕，滅菌后得到發(fā)酵基質(zhì)； 將靈芝菌種活化后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到發(fā)酵菌種； 將所述發(fā)酵菌種接種于發(fā)酵基質(zhì)上，在24℃～28℃、避光的條件下進(jìn)行雙向固體發(fā)酵10天～20天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。
本發(fā)明以人參為靈芝的發(fā)酵基質(zhì)，使人參和靈芝進(jìn)行雙向固體發(fā)酵。本發(fā)明優(yōu)選使用生曬人參或鮮人參，優(yōu)選為無蟲蛀、無霉變的人參。
將鮮人參切片或?qū)⑸鷷袢藚⒛シ刍驅(qū)⑷藚⒂闷渌绞椒鬯楹螅铀疂?rùn)濕。加水的目的是為靈芝發(fā)酵提供必需的自由水，同時(shí)由于是固體發(fā)酵，加水量不能過多。本發(fā)明中，加水的重量?jī)?yōu)選為人參干重的50％～150％，更優(yōu)選為100％～150％。為了使水分充分滲透到人參內(nèi)部，潤(rùn)濕時(shí)間優(yōu)選為6h～12h。
將潤(rùn)濕后的人參滅菌，即可作為發(fā)酵基質(zhì)備用。本發(fā)明中，進(jìn)行滅菌時(shí)的壓力優(yōu)選為0.1MPa～0.14MPa，滅菌溫度優(yōu)選為121℃～126℃，滅菌時(shí)間優(yōu)選為30min～60min。
本發(fā)明使用靈芝進(jìn)行發(fā)酵，本發(fā)明對(duì)所述靈芝菌種的來源沒有特殊限制，本發(fā)明所用菌種為長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥用真菌研究所保存的靈芝菌種。
本發(fā)明首先將靈芝菌種進(jìn)行活化并擴(kuò)大培養(yǎng)后，得到發(fā)酵菌種，然后將發(fā)酵菌種接種于發(fā)酵基質(zhì)中進(jìn)行發(fā)酵。對(duì)靈芝菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)的具體步驟包括將靈芝菌種接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂斜面培養(yǎng)基(PDA斜面培養(yǎng)基)上24℃～28℃培養(yǎng)5天～10天，得到菌絲體，然后將菌絲體進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。
對(duì)得到的菌絲體進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)的方法可以為液體培養(yǎng)液搖瓶培養(yǎng)，也可以為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，本發(fā)明優(yōu)選進(jìn)行液體培養(yǎng)液搖瓶培養(yǎng)，優(yōu)選包括以下步驟 配置含2wt％的葡萄糖、0.5wt％的蛋白胨、0.1wt％的酵母粉、0.1 5wt％的KH2PO4和0.1wt％MgSO4的培養(yǎng)液，滅菌后備用； 切取活化后的菌絲體接入培養(yǎng)液中，在24℃～28℃、120r/min～170rmin的條件下振蕩培養(yǎng)5天～7天，得到發(fā)酵菌種。
為了避免產(chǎn)生污染，菌絲體接入培養(yǎng)液的操作優(yōu)選在無菌條件下進(jìn)行。
將發(fā)酵菌種接入人參發(fā)酵基質(zhì)中，在24℃～28℃、避光的條件下進(jìn)行雙向固體發(fā)酵10天～20天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。進(jìn)行雙向固體發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵溫度優(yōu)選為26℃～28℃，發(fā)酵時(shí)間優(yōu)選為10天～12天。
在發(fā)酵過程中，人參為靈芝提供其生長(zhǎng)必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)靈芝中的酶與人參中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)，通過產(chǎn)生新的化學(xué)成分或改變?cè)谐煞值暮渴谷藚@得新的性味功能。靈芝經(jīng)固體發(fā)酵后的產(chǎn)物可能存在于菌體細(xì)胞內(nèi)，也可能分泌到細(xì)胞外進(jìn)入發(fā)酵基質(zhì)人參中，由于靈芝生長(zhǎng)的大量菌絲體與發(fā)酵后的人參無法分離，因此得到的靈芝人參藥性菌質(zhì)既含有人參的有效成分也含有靈芝的有效成分。
將靈芝人參藥性菌質(zhì)烘干粉碎后，在顯微鏡下觀察，靈芝人參藥性菌質(zhì)粉末同時(shí)具有人參和靈芝的特征 草酸鈣簇晶直徑20μm～68μm，棱角尖銳； 樹脂道碎片呈管狀，含塊狀黃色分泌物； 木栓細(xì)胞類方形，壁薄、波狀彎曲； 導(dǎo)管多網(wǎng)紋或梯紋； 菌絲體近無色、細(xì)長(zhǎng)、相互盤纏交織，直徑為2μm～5μm，具有橫隔。
根據(jù)中國(guó)藥典提供的方法對(duì)所述靈芝人參藥性菌質(zhì)進(jìn)行薄層色譜分析，將得到的色譜與人參對(duì)照藥材色譜相比，在人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1的相應(yīng)位置上顯示相同顏色的點(diǎn)，可見，所述靈芝人參藥性菌質(zhì)中含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1。
用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)所述靈芝人參藥性菌質(zhì)進(jìn)行分析檢測(cè)，測(cè)得所述靈芝人參藥性菌質(zhì)中總多糖、總皂苷和總蛋白的含量分別為20wt％、3.7wt％和5.5wt％，總皂苷的含量與傳統(tǒng)人參中總皂苷的含量無明顯差別，但總多糖和總蛋白的含量均高于傳統(tǒng)人參中相應(yīng)成分的含量。
將所述靈芝人參藥性菌質(zhì)配置成受試藥物溶液，對(duì)小白鼠進(jìn)行毒性實(shí)驗(yàn)，未能測(cè)出靈芝人參藥性菌質(zhì)的半數(shù)致死劑量，實(shí)驗(yàn)證明所述靈芝人參藥性菌質(zhì)不僅對(duì)小白鼠無毒性，而且能促進(jìn)小白鼠的生長(zhǎng)。
將所述靈芝人參藥性菌質(zhì)與吐溫80調(diào)和后配置成溶液，對(duì)小白鼠進(jìn)行功效實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明本發(fā)明制備的靈芝人參藥性菌質(zhì)能夠增加小鼠的睡眠時(shí)間、提高睡眠發(fā)生率、縮短睡眠潛伏時(shí)間，且效果均好于人參、靈芝、人參和靈芝的混合物。
由此可見，所述靈芝藥性菌質(zhì)含有人參和靈芝的有效成分，具有良好的功效。同時(shí)，本發(fā)明提供的靈芝藥性菌質(zhì)毒性極低，能夠安神、鎮(zhèn)靜，治療失眠。
為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的人參的處理方法進(jìn)行詳細(xì)描述。
實(shí)施例1 將長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥用真菌研究所保存的靈芝菌株接種在PDA斜面培養(yǎng)基上、27℃±1℃時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)7天得到菌絲體備用； 制作含2wt％葡萄糖、0.5wt％蛋白胨、0.1wt％酵母粉、0.15wt％KH2PO4、和0.1wt％MgSO4的菌種培養(yǎng)液。取100mL菌種培養(yǎng)液裝入250mL三角瓶中，0.1MPa、121℃滅菌30min。在無菌室內(nèi)切取4塊0.5cm×0.5cm的菌絲體接入三角瓶的菌種培養(yǎng)液中，28℃、150r/min的條件下振蕩培養(yǎng)5天后，得到含有菌絲球的種子液； 取50g無蟲蛀、無霉變的生曬人參粉碎過60目篩，加50g水潤(rùn)濕12h后，將得到的人參裝入500mL三角瓶中，0.1MPa滅菌60min后，接入50mL種子液，28℃時(shí)黑暗培養(yǎng)10天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。
將靈芝人參藥性菌質(zhì)烘干、磨粉，得到具有靈芝香氣的黃白色粉末； 將所述粉末在顯微鏡下進(jìn)行鑒別，可見粉末具有如下特征菌絲體近無色、細(xì)長(zhǎng)、直徑2μm～5μm、可見橫隔、相互盤纏交織；草酸鈣簇晶直徑20μm～68μm，棱角尖銳；樹脂道碎片呈管狀，含塊狀黃色分泌物；木栓細(xì)胞類方形，壁薄、波狀彎曲；導(dǎo)管多網(wǎng)紋或梯紋。
按照中國(guó)藥典中提供的方法對(duì)所述粉末進(jìn)行薄層色譜分析，將得到的色譜與人參對(duì)照藥材色譜相 比，在人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1的相應(yīng)位置上顯示相同顏色的點(diǎn)，說明所述粉末中含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1。
利用北京普析通用儀器有限責(zé)任公司的TU1810紫外可見分光光度計(jì)對(duì)所述粉末進(jìn)行分析，測(cè)得粉末中的總多糖、總皂苷和總蛋白的含量分別為20wt％、3.8wt％和5.5wt％。
實(shí)施例2 人參藥性菌質(zhì)毒性實(shí)驗(yàn) 2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 長(zhǎng)春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供的40只昆明種小白鼠，雌雄各半，體重18g～22g。
2.2實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 電子稱、小鼠籠和1mL灌胃器； 取100g實(shí)施例1制備的靈芝人參藥性菌質(zhì)粉末，與0.2g吐溫80調(diào)和后，加400g蒸餾水配置成質(zhì)量濃度為25％的受試藥物溶液； 將0.2g吐溫80與400g蒸餾水配置成對(duì)照溶液。
2.3預(yù)實(shí)驗(yàn) 取20只小白鼠，雌雄各半，禁食不禁水16h，分為樣品組和對(duì)照組； 每日給樣品組的小白鼠灌胃給7.5g/kg體重的受試藥物溶液，連續(xù)灌7天，發(fā)現(xiàn)小白鼠的生命狀況良好，無死亡現(xiàn)象，由此可知最大耐受量為7.5g/kg。
2.4急性毒性實(shí)驗(yàn) 取20只樣品組小白鼠，雌雄各半，禁食不禁水16h，分為樣品組和對(duì)照組；每天早、中、晚三次對(duì)樣品組小白鼠灌胃以40mL/kg的受試藥物溶液；每天早、中、晚三次對(duì)對(duì)照組小白鼠灌胃以40mL/kg的對(duì)照溶液；連續(xù)灌胃14天，灌胃期間正常飲食； 每次灌胃給藥后，立即觀察毒性反應(yīng)，連續(xù)觀察14天，發(fā)現(xiàn)給藥后樣品組小白鼠活動(dòng)減少，24h后恢復(fù)正常；而小白鼠的外觀、精神狀態(tài)、食欲、大小便次數(shù)及其顏色、被毛、膚色、呼吸、分泌物等和對(duì)照組無明顯區(qū)別，未見與藥物有關(guān)的中毒反應(yīng)，無死亡發(fā)生。
在灌胃前分別記錄樣品組和對(duì)照組小白鼠的體重，分別記錄灌胃第3天、第7天、第11天和第15天時(shí)樣品組和對(duì)照組小白鼠的體重，采用DAS2.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，結(jié)果見表1，表1為本發(fā)明實(shí)施例提供的毒性實(shí)驗(yàn)中各組小白鼠體重的變化。
表1本發(fā)明實(shí)施例提供的毒性實(shí)驗(yàn)中各組小白鼠體重的變化
由表1可知，本發(fā)明提供的靈芝人參藥性菌質(zhì)對(duì)小鼠的體重增長(zhǎng)有促進(jìn)作用。
灌胃第15天時(shí)將小白鼠用頸椎脫臼致死法處死，將小白鼠解剖，肉眼觀察小白鼠肝臟、腎臟等臟器，未發(fā)現(xiàn)異常改變；比較各組小白鼠肝臟與體重的比值和腎臟與體重的比值，采用DAS2.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，結(jié)果見表2，表2為本發(fā)明實(shí)施例提供的毒性實(shí)驗(yàn)中各組小白鼠肝臟與體重的比值(肝體比值)和腎臟與體重的比值(腎體比值)。
表2本發(fā)明實(shí)施例提供的毒性實(shí)驗(yàn)中各組小白鼠肝體比值和腎體比值
由表2可知，被灌胃靈芝人參藥性菌質(zhì)的小白鼠的肝體比值和腎體比值與對(duì)照組小白鼠無明顯差異，可見，靈芝人參藥性菌質(zhì)對(duì)小白鼠的臟器無明顯毒性反應(yīng)。
由上述毒性實(shí)驗(yàn)可知，靈芝人參藥性菌質(zhì)不僅毒性極低，還能夠促進(jìn)小白鼠的生長(zhǎng)發(fā)育。
實(shí)施例3 人參藥性菌質(zhì)具有改善睡眠的功效實(shí)驗(yàn) 3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性ICR小鼠，體重1 8g～26g，吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
3.2試劑 取實(shí)施例1制備的靈芝人參藥性菌質(zhì)粉末，加蒸餾水配成質(zhì)量濃度為25％的受試藥物溶液； 將吉林省金宇醫(yī)藥開發(fā)有限公司提供的靈芝磨粉，加蒸餾水配成質(zhì)量濃度為25％的靈芝溶液； 將吉林省金宇醫(yī)藥開發(fā)有限公司提供的人參磨粉，將蒸餾水配成質(zhì)量濃度為25％的人參溶液； 將靈芝和人參共同磨粉，加蒸餾水配成質(zhì)量濃度為25％的靈芝人參混合液； 戊巴比妥鈉(AR)，中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn)。
3.3直接睡眠實(shí)驗(yàn) 選取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，分別為人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組； 按1.0g／kg體重的劑量分別將人參溶液、靈芝溶液、人參靈芝混合液、受試藥物溶液和蒸餾水灌胃給人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)各小鼠，灌胃30天后，觀察各組小鼠的睡眠發(fā)生率，發(fā)現(xiàn)各組小鼠均無睡眠現(xiàn)象發(fā)生。觀察時(shí)，睡眠儀翻正反射消失為判斷標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)小鼠置于背臥位時(shí)，1分鐘內(nèi)不能翻正，即認(rèn)為翻正反射消失，進(jìn)入睡眠；翻正反射恢復(fù)即為動(dòng)物覺醒；翻正反射消失至恢復(fù)期間為動(dòng)物睡眠時(shí)間。
3.4延長(zhǎng)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn) 選取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，分別為人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組； 按1.0g/kg體重的劑量分別將人參溶液、靈芝溶液、人參靈芝混合液、受試藥物溶液和蒸餾水灌胃給人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)各小鼠，灌胃30天。最后一次灌胃后15min后，各組小鼠腹腔注射50mg/kg體重的戊巴比妥鈉，注射量為0.2mL/20g，以翻正反射消失為指標(biāo)，觀察睡眠時(shí)間并記錄入睡時(shí)間和覺醒時(shí)間，采用DAS2.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，結(jié)果見表3，表3為本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠時(shí)間。
表3本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠時(shí)間
由表3可知，靈芝人參藥性菌質(zhì)能夠增加小鼠的睡眠時(shí)間，且效果好于人參、靈芝、人參和靈芝的混合物。
3.5戊巴比妥鈉閾下催眠劑量實(shí)驗(yàn) 選取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，分別為人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組； 按1.0g/kg體重的劑量分別將人參溶液、靈芝溶液、人參靈芝混合液、受試藥物溶液和蒸餾水灌胃給人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)各小鼠，灌胃30天。最后一次灌胃后15min后，各組小鼠腹腔注射25mg／kg體重的戊巴比妥鈉最大閾下催眠劑量，觀察并記錄30min內(nèi)入睡小鼠數(shù)，翻正反射消失1min以上為入睡，結(jié)果見表4，表4為本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠發(fā)生率。
表4本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠發(fā)生率

由表4可知，靈芝人參藥性菌質(zhì)能夠提高小鼠的睡眠發(fā)生率，且效果好于人參、靈芝、人參和靈芝的混合物。
3.6縮短戊巴比妥鈉睡眠潛伏期實(shí)驗(yàn) 選取50只小鼠，隨機(jī)分成5組，分別為人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組； 按1.0g/kg體重的劑量分別將人參溶液、靈芝溶液、人參靈芝混合液、受試藥物溶液和蒸餾水灌胃給人參實(shí)驗(yàn)組、靈芝實(shí)驗(yàn)組、人參和靈芝混合實(shí)驗(yàn)組、靈芝人參藥性菌質(zhì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組內(nèi)各小鼠，灌胃30天。最后一次灌胃后20min后，各組小鼠腹腔注射230mg/kg體重的戊巴比妥鈉，注射量為0.2mL/20g，以翻正反射消失為指標(biāo)，觀察并記錄小鼠的睡眠潛伏時(shí)間，采用DAS2.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，結(jié)果見表5，表5為本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠潛伏時(shí)間。
表5本發(fā)明實(shí)施例提供的功效實(shí)驗(yàn)中各組小鼠的睡眠潛伏時(shí)間
由表5可知，靈芝人參藥性菌質(zhì)能夠縮短小鼠的睡眠潛伏時(shí)間，且效果好于人參、靈芝、人參和靈芝的混合物。
由上述結(jié)果可知，靈芝人參藥性菌質(zhì)可增加小鼠的睡眠時(shí)間、提高睡眠發(fā)生率、縮短睡眠潛伏時(shí)間，且效果均好于人參、靈芝、人參和靈芝的混合物。
比較例1 將從長(zhǎng)春市宏檢藥材公司購(gòu)得的生曬人參磨粉，得到黃白色粉末； 將所述粉末在顯微鏡下進(jìn)行鑒別，可見粉末具有如下特征草酸鈣簇晶直徑20～68微米，棱角尖銳；樹脂道碎片呈管狀，含塊狀黃色分泌物；木栓細(xì)胞類方形，壁薄、波狀彎曲；導(dǎo)管多網(wǎng)紋或梯紋。
按照中國(guó)藥典中提供的方法對(duì)所述粉末進(jìn)行薄層色譜分析，將得到的色譜與人參對(duì)照藥材色譜相比，在人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1的相應(yīng)位置上顯示相同顏色的點(diǎn)，說明所述粉末中含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1。
利用北京普析通用儀器有限責(zé)任公司的TU1810紫外可見分光光度計(jì)對(duì)所述粉末進(jìn)行分析，測(cè)得粉末中的總多糖、總皂苷和總蛋白的含量分別為12wt％、3.8wt％和4.5wt％。
將傳統(tǒng)人參與本發(fā)明實(shí)施例1制備的靈芝人參藥性菌質(zhì)相比，結(jié)果參見表6，表6為本發(fā)明實(shí)施例提供的靈芝人參藥性菌質(zhì)和比較例提供的傳統(tǒng)人參的比較。
表6本發(fā)明實(shí)施例提供的靈芝人參藥性菌質(zhì)和比較例提供的傳統(tǒng)人參的比較
由表6可知，本發(fā)明實(shí)施例提供的靈芝人參藥性菌質(zhì)中含有菌絲體，其化學(xué)成分中，總皂苷與傳統(tǒng)人參含量無明顯差別，但總多糖和總蛋白的含量均有所增加。
以上實(shí)施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種人參的處理方法，其特征在于，包括
將人參粉碎后加水潤(rùn)濕，滅菌后得到發(fā)酵基質(zhì)；
將靈芝菌種活化后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到發(fā)酵菌種；
將所述發(fā)酵菌種接種于發(fā)酵基質(zhì)中，在24℃～28℃、避光的條件下進(jìn)行雙向固體發(fā)酵10天～20天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，加水潤(rùn)濕時(shí)，水的重量為人參干重的50％～150％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，加水潤(rùn)濕時(shí)，水的重量為人參干重的100％～150％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，所述雙向固體發(fā)酵的溫度為26℃～28℃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，所述雙向固體發(fā)酵的時(shí)間為10天～15天。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的處理方法，其特征在于，所述擴(kuò)大培養(yǎng)的方法為液體培養(yǎng)液搖瓶培養(yǎng)或固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的處理方法，其特征在于，所述液體培養(yǎng)液包括
2wt％的葡萄糖；
0.5wt％的蛋白胨；
0.1wt％的酵母粉；
0.15wt％的KH2PO4；
0.1wt％MgSO4；
余量為水。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述的處理方法，其特征在于，所述人參為生曬人參或鮮人參。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種人參的處理方法，包括將人參粉碎后加水潤(rùn)濕，滅菌后得到發(fā)酵基質(zhì)；將靈芝菌種活化后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，得到發(fā)酵菌種；將所述發(fā)酵菌種接種于發(fā)酵基質(zhì)中，在24℃～28℃、避光的條件下進(jìn)行雙向固體發(fā)酵10天～20天，得到靈芝人參藥性菌質(zhì)。通過本發(fā)明提供的處理方法得到的靈芝人參藥性菌質(zhì)既含有人參的有效成分也含有靈芝的有效成分，具有比人參或靈芝或兩者簡(jiǎn)單相加更好的保健和藥用功效，具有鎮(zhèn)靜、安神、補(bǔ)氣的功效，可以用于治療失眠、調(diào)節(jié)免疫力、抗腫瘤的藥物中，也可以作為保健品，增強(qiáng)亞健康人群的體質(zhì)。
文檔編號(hào)A61P37/04GK101816689SQ20101017611
公開日2010年9月1日 申請(qǐng)日期2010年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月19日
發(fā)明者陳心智, 邱智東, 翁麗麗, 陳雪松 申請(qǐng)人:陳心智, 邱智東, 翁麗麗, 陳雪松