專利名稱：一種藥物緩釋止血組合物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于新型止血材料技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種制備簡(jiǎn)單，生物相容性好，效果顯著，還具有治療功能的藥物或生物因子緩釋可吸收止血組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
在突發(fā)性事故的急救治療、手術(shù)過程中的創(chuàng)傷止血，病患者局部有效地快速止血 非常重要。目前報(bào)道的止血材料主要有粉末類(沸石、膠原粉末和馬鈴薯淀粉)、多孔海綿 (明膠海綿、膠原海綿)、氧化再生纖維素和纖維蛋白膠等，它們各自有一定的不足之處明 膠和膠原的組織黏附力較差，兩者的止血功能均依賴于足量的血小板和凝血因子，故應(yīng)用 受到限制；血纖維蛋白膠源自血液，可能會(huì)導(dǎo)致病毒感染；多孔沸石和馬鈴薯淀粉在吸收 血液中的水分后會(huì)放出大量的熱，導(dǎo)致傷口炎癥。隨著我國醫(yī)學(xué)界對(duì)止血材料止血性能要求的提高，開發(fā)出止血效果更佳的材料勢(shì) 在必行。首先，作為止血敷料或止血?jiǎng)┑牟牧弦邆淞己玫闹寡阅?，?yōu)良的生物相容性， 無毒副作用，無刺激性，易于加工成型等。因此，從現(xiàn)有的條件出發(fā)，尋找自然界中優(yōu)良的生 物材料并加以加工、改進(jìn)就成為一種理想的選擇。其次，可根據(jù)各種止血材料不同的性能， 采用多種止血材料聯(lián)用的方法，使材料發(fā)揮更好的止血性能。此外，止血材料、止血方法和 止血途徑的研究有待進(jìn)一步加強(qiáng)，以便開發(fā)出與現(xiàn)有止血途徑不同的止血材料。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備簡(jiǎn)單，生物相容性好，效果顯著，還具有治療功能 的藥物緩釋止血組合物及制備方法，彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種藥物緩釋止血組合物，包括載藥殼聚糖微球、殼聚糖和透明質(zhì)酸，所述的載藥 殼聚糖微球包括藥用級(jí)殼聚糖和藥用級(jí)氨甲環(huán)酸，該藥用級(jí)殼聚糖與藥用級(jí)氨甲環(huán)酸重 量比為(0. 01 100) 1，所述的載藥殼聚糖微球、殼聚糖和透明質(zhì)酸重量比為(0. 01 100) (0.01 100) 1。更優(yōu)的方案是所述的藥物為乙酰甘氨酸乙二胺、氨基己酸(6-Aminocaproic acid, EACA)、氛甲環(huán)酸(Tranexamicacid, AMCHA)、止血敏、去氛力口壓素(Desmopresion)中 的一種或幾種。更優(yōu)的方案是所述的的藥物為生物凝血因子，如因子I (纖維蛋白原)、因子 11 (凝血素)、因子III (凝血酶原酶)、因子IV (鈣(Ca2+)因子)、因子V (促凝血球蛋白原， 易變因子)、因子VII (轉(zhuǎn)變加速因子前體，促凝血酶原激酶原，輔助促凝血酶原激酶)、因子 VIIK抗血友病球蛋白A (AHG A))、抗血友病因子A (AHFA)、血小板輔助因子I其中的一種或 幾種。更優(yōu)的方案是所述的殼聚糖為殼聚糖衍生物，如羧甲基殼聚糖等；所述的透明 質(zhì)酸為透明質(zhì)酸衍生物；所述的藥用級(jí)殼聚糖的脫乙酰度為40-95%。
更優(yōu)的方案是所述的藥用級(jí)殼聚糖的脫乙酰度為92-95%。本發(fā)明的另一目的在于提供藥物緩釋止血組合物的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種藥物緩釋止血組合物的制備方法，包括如下步驟1)將藥用級(jí)殼聚糖溶解于酸性溶液得到0. 5-3%的殼聚糖溶液，并加入藥用級(jí)氨 甲環(huán)酸得到藥用級(jí)殼聚糖和藥用級(jí)氨甲環(huán)酸溶液A，溶液中藥用級(jí)殼聚糖與藥用級(jí)氨甲環(huán) 酸重量比為(0.01 100) 1 ；2)將溶液A滴加到含乳化劑溶液的溶液B中，室溫高速攪拌10-60min后，加入交 聯(lián)劑，繼續(xù)室溫高速攪拌10-60min，得到載藥殼聚糖微球A ；
3)將殼聚糖置于透明質(zhì)酸溶液中，溶液中殼聚糖和透明質(zhì)酸的重量比為(0. 01 100) 1，室溫高速攪拌I-IOOmin后得到混合溶液B ；4)將載藥殼聚糖微球A置于混合溶液B中，溶液中載藥殼聚糖微球和膠原蛋白 (0. 01 100) 1，室溫高速攪拌5-lOOmin后得到混合溶液C ；5)將混合溶液C置于止血海綿模具中，冷凍干燥后得到海綿狀載藥止血組合物 D ；6) D經(jīng)消毒射線照射15-30min后得到成品E?？商娲姆桨甘遣襟E3)中將殼聚糖溶于0. 1-30% (ν/ν)的醋酸溶液或蟻酸溶 液等酸性溶液中，將溶有殼聚糖的酸性溶液與透明質(zhì)酸溶液混合。可替代的方案是步驟3)中可將透明質(zhì)酸溶于殼聚糖溶液中?？商娲姆桨甘遣襟E5)也可以采用高溫干燥、風(fēng)干等常見的干燥方法?？商娲姆桨甘遣襟E6)可以采用高溫消毒、環(huán)氧乙烷消毒、紫外消毒等常見的 消毒方法?？商娲姆桨甘菍ぞ厶侨芤褐糜谀＞咧欣鋬龈稍锏玫綒ぞ厶堑暮＞d，將其浸 入含載藥殼聚糖微球的透明質(zhì)酸溶液中l(wèi)-60min鐘后取出干燥，得到載藥止血組合物。可替代的方案是將透明質(zhì)酸溶液置于模具中冷凍干燥得到透明質(zhì)酸的海綿，將 其浸入含載藥殼聚糖微球的殼聚糖溶液中l(wèi)-60min鐘后取出干燥，得到載藥止血組合物?？商娲姆桨甘菤ぞ厶侨芤褐糜谀＞咧欣鋬龈稍锏玫綒ぞ厶堑暮＞d，，將其依 次浸入載藥殼聚糖微球溶液和透明質(zhì)酸溶液中l(wèi)-60min鐘后取出干燥，得到載藥止血組合 物。可替代的方案是得到透明質(zhì)酸的海綿后，將其先后浸入載藥殼聚糖微球溶液和 殼聚糖溶液中l(wèi)-60min鐘后取出干燥，得到載藥止血組合物。更優(yōu)的方案是所述步驟2)中所述乳化劑為0.8-52% (質(zhì)量體積分?jǐn)?shù))的石 蠟溶液；所述交聯(lián)劑為三聚磷酸鹽，該三聚磷酸鹽的用量為步驟1中藥用級(jí)殼聚糖重量的 0. 1-50 倍。本發(fā)明專利與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果透明質(zhì)酸是構(gòu)成人體細(xì)胞間質(zhì)、眼玻璃體、關(guān)節(jié)滑液等結(jié)締組織的主要成分，在體 內(nèi)發(fā)揮保水、維持細(xì)胞外空間、調(diào)節(jié)滲透壓、潤滑、促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)的重要生理功能。透明質(zhì)酸 分子中含有大量的羧基和羥基。透明質(zhì)酸用于預(yù)防術(shù)后粘連和促進(jìn)皮膚傷口的愈合。生物 相容性優(yōu)異，其降解產(chǎn)物無毒，且能被生物體完全吸收。
由于殼聚糖具有優(yōu)良的生物相容性和可生物降解性能，為幾丁質(zhì)的脫乙酰的產(chǎn) 物，脫乙酰度越大，其表面的氨基含量越高，對(duì)親水性和生物相容性有著很大的影響，本發(fā) 明使用高脫乙酰度的殼聚糖(高達(dá)95% )，使得整個(gè)止血海綿的生物相容性以及止血止痛 功能大幅提高。血循環(huán)中存在各種纖溶酶(原)的天然拮抗物，如抗纖溶酶素(antiplasmin)等。 正常情況時(shí)，血液中抗纖溶活性比纖溶活性高很多倍，所以不致發(fā)生纖溶性出血。但這些拮 抗物不能阻滯已吸附在纖維蛋白網(wǎng)上的激活物(如尿激酶等)所激活而形成纖溶酶。纖溶 酶是一種肽鏈內(nèi)切酶，在中性環(huán)境中能裂解纖維蛋白(原)的精氨酸和賴氨酸肽鏈，形成纖 維蛋白降解產(chǎn)物，并引起凝血塊溶解出血。氨甲環(huán)酸能競(jìng)爭(zhēng)性阻抑纖溶酶原在纖維蛋白上 吸附，從而防止其激活，保護(hù)纖維蛋白不被纖溶酶所降解和溶解，最終達(dá)到止血效果。氨甲 環(huán)酸能直接抑制纖溶酶活力，減少纖溶酶激活補(bǔ)體的作用，從而達(dá)到防止遺傳性血管神經(jīng) 性水腫的發(fā)生。本發(fā)明選用殼聚糖、透明質(zhì)酸復(fù)合得到主要止血基質(zhì)同時(shí)結(jié)合殼聚糖藥物緩釋微 球復(fù)合藥物氨甲環(huán)酸，利用殼聚糖兼?zhèn)渲寡δ芎退幬锞忈尮δ芴厥獾男再|(zhì)，同時(shí)采用止 血功能以及生物相容性較好的透明質(zhì)酸為主要基質(zhì)，制備出能夠快速止血并且藥物能夠在 一定時(shí)間內(nèi)持續(xù)穩(wěn)定釋放藥物/因子的新型止血組合物，有著極大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明 實(shí)施例1將1克脫乙酰度為40%殼聚糖溶于IOOml 0. 2% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入0. 1 克藥物氨甲環(huán)酸得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑10%石蠟溶 液B中，室溫高速攪拌IOmin后加入5克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌IOmin后， 得到載藥殼聚糖微球C ；將1克脫乙酰度為40%殼聚糖(分子量為2萬-30萬之間)溶于 IOOml 0. 2% (ν/ν)醋酸溶液中，室溫高速攪拌IOmin后加入0. 1克透明質(zhì)酸，繼續(xù)室溫高 速攪拌IOmin得到殼聚糖和透明質(zhì)酸的混合溶液D ；將1克載藥殼聚糖微球C置于20ml混 合溶液D中室溫?cái)嚢鑜Omin，置于長方形模具中，將含有藥物微球的混合溶液冷凍干燥并經(jīng) Co60射線照射消毒后得到所需的海綿狀止血組合物。實(shí)施例2將1克脫乙酰度為60%殼聚糖溶于IOOml 1% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入0. 1克 藥物氨甲環(huán)酸得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑20%石蠟溶液 B中，室溫高速攪拌IOmin后加入0. 5克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌IOOmin后， 得到載藥殼聚糖微球C ；將1克脫乙酰度為60%殼聚糖(分子量為10萬-50萬之間)溶于 IOOml 1% (ν/ν)醋酸溶液中，加入透明質(zhì)酸溶液50ml，室溫高速攪拌IOmin后得到殼 聚糖和透明質(zhì)酸的混合溶液D ；將0. 1克載藥殼聚糖微球C置于20mi混合溶液D中室溫?cái)嚢鑜Omin，置于長方形 模具中，將含有藥物微球的混合溶液D冷凍干燥并經(jīng)紫外線照射消毒后得到所需的海綿狀 止血組合物。實(shí)施例3
將1克脫乙酰度為80%殼聚糖溶于IOOml 2% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入0. 1克 藥物氨甲環(huán)酸得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑5%石蠟溶液 B中，室溫高速攪拌IOmin后加入10克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌IOmin后， 得到載藥殼聚糖微球C ；將1克脫乙酰度為80%殼聚糖(分子量為0. 5萬-20萬之間)溶 于IOOml 2% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入2襯％透明質(zhì)酸鈉溶液IOOml繼續(xù)室溫高速攪拌 20min后得到殼聚糖和透明質(zhì)酸的混合溶液D ；將1克載藥殼聚糖微球置于30ml混合溶液D 中室溫?cái)嚢鑜Omin，置于長方形模具中，將含有藥物微球的混合溶液D經(jīng)60°C高溫干燥IOh 后，并經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒后得到所需的海綿狀止血組合物。實(shí)施例4將1克脫乙酰度為92%殼聚糖溶于IOOml 3% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入0. 1克 藥物氨甲環(huán)酸得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑10%石蠟溶液 B中，室溫高速攪拌IOmin后加入5克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌IOmin后，得到 載藥殼聚糖微球C ；將50ml 3wt%脫羧甲基殼聚糖水溶液與50ml2wt%透明質(zhì)酸鈉溶液混 合，室溫下高速攪拌得到混合溶液D。將1克載藥殼聚糖微球C置于20ml混合溶液D中室 溫?cái)嚢鑜Omin，置于長方形模具中冷凍干燥并經(jīng)Co60射線照射消毒后得到所需的海綿狀止 血組合物。實(shí)施例5將1克脫乙酰度為95%殼聚糖溶于IOOml 4% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入0. 1克藥 物乙酰甘氨 酸乙二胺得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑10%石 蠟溶液B中，室溫高速攪拌IOmin后加入5克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌IOmin 后，得到載藥殼聚糖微球C ；將50ml5wt%脫羧甲基殼聚糖水溶液與50ml2wt%透明質(zhì)酸鈉 溶液混合，室溫下高速攪拌得到混合溶液D ；將1克載藥殼聚糖微球C置于20ml混合溶液 D中室溫?cái)嚢鑜Omin，置于長方形模具中，于零下2攝氏度冷凍3小時(shí)候，置于冷凍干燥機(jī)中 冷凍干燥8小時(shí)候取出，然后經(jīng)Co60照射消毒后，得到所需的止血組合物。實(shí)施例6將5克脫乙酰度為45%殼聚糖溶于IOOml 5% (ν/ν)醋酸溶液中，并加入5克藥物 氨甲環(huán)酸得到殼聚糖和藥物的醋酸溶液A ；將溶液A液滴加入到乳化劑10%石蠟溶液B中， 室溫高速攪拌50min后加入1克交聯(lián)劑三聚磷酸鹽，繼續(xù)室溫高速攪拌50min后，得到載藥 殼聚糖微球C ；將5克羧甲基殼聚糖(分子量為50萬-100萬之間)溶于50ml蒸餾水中， 室溫高速攪拌IOmin后置于長方形模具中，冷凍干燥后得到海綿狀物D。將D至于1襯％透 明質(zhì)酸鈉溶液中充分浸潤5min后，于50攝氏度烘干得到海綿狀D，再將D浸入1襯％透明 質(zhì)酸鈉溶液中充分浸潤5min后，于80攝氏度烘干，如此反復(fù)2_10次，得到海綿狀組合物E ； 將E至于含載藥殼聚糖微球C的溶液中充分浸潤5min后，于50攝氏度烘干，如此反復(fù)1_5 次，得到含載藥微球海綿狀組合物F，經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒后，得到最終所需的止血組合物。本發(fā)明的藥物緩釋止血組合物產(chǎn)品對(duì)不同部位以及不同傷口的效果，經(jīng)過多次實(shí) 驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在出血量為1 士 0. 5ml時(shí)產(chǎn)品的止血時(shí)間在1 士 0. 5min，產(chǎn)品的載藥緩釋系統(tǒng)能夠 在3天內(nèi)持續(xù)穩(wěn)定的有效濃度釋放。本發(fā)明所述的制備藥物緩釋止血組合物材料的方法， 配方簡(jiǎn)單，制備工藝易行，在48個(gè)小時(shí)內(nèi)即可制備。以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的 保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
一種藥物緩釋止血組合物，其特征是包括載藥殼聚糖微球和殼聚糖透明質(zhì)酸組合物，所述的載藥殼聚糖微球包括藥用級(jí)殼聚糖和藥用級(jí)氨甲環(huán)酸，該藥用級(jí)殼聚糖與藥用級(jí)氨甲環(huán)酸重量比為0.01～100∶1，所述的載藥殼聚糖微球、透明質(zhì)酸和殼聚糖重量比為0.01～100∶0.01～100∶1。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物緩釋止血組合物，其特征是所述的透明質(zhì)酸為透明質(zhì)酸 或其衍生物，殼聚糖為殼聚糖或其衍生物，所述的藥用級(jí)殼聚糖的脫乙酰度為40-95%。
3.如權(quán)利要求2所述的藥物緩釋止血組合物，其特征是所述的藥用級(jí)殼聚糖的脫乙 酰度為92-95%
4.如權(quán)利要求1所述的藥物緩釋止血組合物，其特征是所述所述的藥物為乙酰甘氨 酸乙二胺、氨基己酸(6 — Aminocaproic acid，EACA)、氨甲環(huán)酸(Tranexamicacid，AMCHA)、 止血敏、去氨加壓素(Desmopresion)中的一種或幾種。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物緩釋止血組合物，其特征是所述的的藥物為生物凝血 因子，生物凝血因子為纖維蛋白原；或凝血素；或凝血酶原酶；或鈣因子；或促凝血球蛋白 原、或轉(zhuǎn)變加速因子前體與促凝血酶原激酶原與輔助促凝血酶原激酶；或抗血友病球蛋白 A(AHG A))、抗血友病因子A(AHFA)、血小板輔助因子I、血友病因子其中的一種或幾種。
6.一種藥物緩釋止血組合物的制備方法，其特征是包括如下步驟(1)將藥用級(jí)殼聚糖溶解于酸性溶液得到0.5-3%的殼聚糖溶液，并加入藥用級(jí)氨甲 環(huán)酸得到藥用級(jí)殼聚糖和藥用級(jí)氨甲環(huán)酸溶液A，溶液中藥用級(jí)殼聚糖與藥用級(jí)氨甲環(huán)酸 重量比為0. 01 100 1 ；(2)將溶液A滴加到含乳化劑溶液的溶液B中，室溫高速攪拌10-60min后，加入交聯(lián) 齊IJ，繼續(xù)室溫高速攪拌10-60min，得到載藥殼聚糖微球；(3)將載藥殼聚糖微球置于如權(quán)利要求1-3任一所述的膠原蛋白溶液中，溶液中載藥 殼聚糖微球和膠原蛋白(0.01 100) 1，室溫高速攪拌I-IOOmin后置于止血海綿模具 中，冷凍干燥后形成止血海綿，經(jīng)消毒射線照射l-60min后得到成品。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物緩釋止血組合物的制備方法，其特征是步驟(1)中所述 的酸性溶液為0. 1-10% (ν/ν)的醋酸溶液或蟻酸溶液。
8.如權(quán)利要求6所述的藥物緩釋止血組合物的制備方法，其特征是所述步驟(2)中 所述乳化劑為0. 8-52%的石蠟溶液；所述交聯(lián)劑為三聚磷酸鹽，該三聚磷酸鹽的用量為步 驟1中藥用級(jí)殼聚糖重量的0. 1-50倍。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物緩釋止血組合物及制備方法，屬于新型止血材料技術(shù)領(lǐng)域，包括載藥殼聚糖微球、殼聚糖和透明質(zhì)酸的組合物，所述的載藥殼聚糖微球包括藥用級(jí)殼聚糖和藥用級(jí)氨甲環(huán)酸。本發(fā)明選用殼聚糖和透明質(zhì)酸為主要止血基質(zhì)同時(shí)結(jié)合殼聚糖藥物緩釋微球復(fù)合藥物氨甲環(huán)酸，利用殼聚糖兼?zhèn)渲寡δ芎退幬锞忈尮δ芴厥獾男再|(zhì)，同時(shí)采用止血功能以及生物相容性較好的透明質(zhì)酸和殼聚糖的組合物為主要基質(zhì)，制備出能夠快速止血并且藥物/因子能夠在一定時(shí)間內(nèi)持續(xù)穩(wěn)定釋放的新型止血組合物，有著極大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。
文檔編號(hào)A61L15/28GK101837143SQ20101015313
公開日2010年9月22日 申請(qǐng)日期2010年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月22日
發(fā)明者甘少磊, 胡堃 申請(qǐng)人:胡堃