專利名稱：特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及由山竹的果皮提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑。
技術(shù)背景
特應(yīng)性皮炎是反復(fù)惡化、緩解且以發(fā)癢的濕疹為主要病變的疾病，患者多具有特 應(yīng)性素質(zhì)。特應(yīng)性素質(zhì)是指(1)家族史、既往史，( 容易產(chǎn)生IgE抗體的素質(zhì)。
特應(yīng)性皮炎的主要病變有皮膚的紅斑或丘疹、耳下裂紋、干皮癥、伴有糠秕狀鱗屑 的毛孔一致性角化性丘疹，患者皮膚的抓撓會(huì)產(chǎn)生印痕。根據(jù)近年的調(diào)查，特應(yīng)性皮炎的患 病率為4個(gè)月大的兒童12. 8%，1歲半的兒童9. 8 %，3歲的兒童13. 2 %，小學(xué)一年級學(xué)生 11.8%,小學(xué)六年級學(xué)生10. 6%，大學(xué)一年級學(xué)生8. 2%，在兒童中患病率高達(dá)每10人中有 1人患病。病因、惡化因素主要有食物、出汗、環(huán)境因子、細(xì)菌真菌、接觸抗原、精神壓力等。
特應(yīng)性皮炎的治療通過以下方法進(jìn)行1)病因、惡化因素的檢索和應(yīng)對，幻皮膚 護(hù)理，幻藥物療法。用方法1)、幻無法減輕癥狀時(shí)進(jìn)行藥物治療。藥物中使用最廣泛的是 類固醇外用藥，有多種類固醇外用藥。這些類固醇外用藥根據(jù)臨床效果分為從弱到最強(qiáng)的5 級，根據(jù)患者的患病嚴(yán)重程度和年齡分別使用。另一方面，作為非類固醇類外用藥，免疫調(diào) 節(jié)劑普特彼(protopic)的有用性在近年得到了確認(rèn)。此外，作為口服藥，使用抗組胺藥、抗 過敏藥等，但對于患病程度最嚴(yán)重的患者，有時(shí)會(huì)暫時(shí)使用類固醇的內(nèi)服藥。
但是，類固醇在用作外用藥時(shí)，可能會(huì)伴有皮膚的萎縮、血管擴(kuò)張、毛囊炎等副作 用，根據(jù)由厚生勞動(dòng)科學(xué)研究班制作的指導(dǎo)手冊的指導(dǎo)，在面部應(yīng)盡可能避免使用類固醇 外用藥。此外，對于類固醇藥物，有很多患者擔(dān)心其副作用而表現(xiàn)出排斥反應(yīng)。另一方面， 普特彼是于1999年11月認(rèn)可使用的較新的藥劑，對于未滿16歲的患者只認(rèn)可低濃度下的 使用，對于2歲以下的幼兒，低濃度下的使用也不被認(rèn)可。作為內(nèi)服藥的抗組胺藥、抗過敏 藥可能會(huì)引起困倦、乏力或伴隨抗膽堿作用的痰的咳出困難等副作用。
因此，要求開發(fā)出副作用小且可簡便地使用的藥物，進(jìn)行了在來源于天然物的提 取物中尋找能作為特應(yīng)性皮炎的預(yù)防劑或治療劑的物質(zhì)的研究。
此外，已知特應(yīng)性皮炎在狗、貓、家畜等人以外的動(dòng)物中也會(huì)發(fā)病，要求進(jìn)行其預(yù) 防、治療。
金絲桃科植物山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮在泰國作為偏方用于止瀉 或炎癥治療，近年有報(bào)道稱山竹果皮中所含的α-倒捻子素、Y-倒捻子素可抑制過敏反應(yīng)。
日本專利特許第3968405中揭示從山竹提取物中純化的α -倒捻子素和、-倒 捻子素具有抗組胺效果或抗5-羥色胺效果，且α-倒捻子素和Y-倒捻子素顯示出對人花 粉癥的抑制效果。日本專利特開2005-298379中揭示山竹提取物、S卩α-倒捻子素、γ-侄J 捻子素具有對I κ B激酶的抑制效果。日本專利特開2001-278770中揭示金絲桃科植物的 提取物具有緩解精神壓力的影響的效果。
此外，也進(jìn)行了用于闡明山竹提取物的抗過敏效果的機(jī)理的研究。BioUharm.Bull.，25，pll37(2002)中揭示山竹提取物可抑制組胺的釋放以及前列腺素E的合成。 Eur. J. Pharmacol.，314，p351 (1996)中揭示α -倒捻子素是組胺H受體的拮抗劑。Mol. Pharmacol.，66，p667 (2004)中揭示γ -倒捻子素可抑制I κ B激酶活性，抑制前列腺素E 的釋放，其結(jié)果是抑制環(huán)加氧酶2基因的表達(dá)。Biochem. Pharmacol. ,63, p73 (2002)中揭 示Y -倒捻子素可抑制環(huán)加氧酶和前列腺素E2的合成。
對山竹果皮的提取物進(jìn)行了各種安全性試驗(yàn)。日本專利特開平5-17365的0015 段中用小鼠進(jìn)行了采用口服給藥的急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果顯示，即使給予I0g/Kg的山竹果皮 提取物，也未觀察到死亡例。另外，在日本專利特開平4-M4004的0047段所示的安全性試 驗(yàn)中，進(jìn)行了將山竹果皮提取物涂布于人皮膚的刺激性試驗(yàn)，結(jié)果顯示，刺激性極低，其安 全性高。
發(fā)明的揭示
日本專利特許第3968405和日本專利特開2005-298379中揭示從山竹提取物中 純化的α-倒捻子素、Y-倒捻子素具有抗過敏效果，且α-倒捻子素和Y-倒捻子素顯示 出對人花粉癥的抑制效果。但是，這些文獻(xiàn)中未研究對特應(yīng)性皮炎的效果。本發(fā)明的目的 是提供從山竹的果皮提取的特應(yīng)性皮炎的預(yù)防劑和/或治療劑。
本發(fā)明人為了獲得產(chǎn)生副作用等的可能性低、安全性高的特應(yīng)性皮炎的預(yù)防劑和 /或治療劑進(jìn)行了認(rèn)真研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用極性溶劑從山竹的果皮萃取的物質(zhì)可預(yù)防或治療 特應(yīng)性皮炎，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明提供由用極性溶劑從山竹的果皮萃取的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防 劑和/或治療劑。此外，本發(fā)明提供含有所述特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑的食品。
本發(fā)明的由用極性溶劑從山竹的果皮萃取的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/ 或治療劑也可用于寵物、家畜和/或家禽、特別是狗和/或貓。此外，本發(fā)明提供含有由用 極性溶劑從山竹的果皮萃取的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑的飼料。
山竹的果皮可使用從山竹果實(shí)(新鮮或干燥物)得到的果皮。山竹的果皮可直接 使用，但如果考慮到提高萃取率，則較好是在粉碎或制成粉末后進(jìn)行萃取。此外，也可在萃 取前用非極性溶劑將山竹果皮脫脂。
采用選自作為極性溶劑的甲醇、乙醇、正丙醇、2-丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯和 水的至少1種極性溶劑來實(shí)施萃取。也可將2種以上的溶劑組合起來實(shí)施萃取。另外，如 果考慮到用作口服劑或飲食品、飼料等的情況，則作為萃取溶劑，從安全性的角度來看優(yōu)選 使用乙醇或水與乙醇的組合。萃取的溫度無特別限定，從萃取效率的角度來看，較好是在室 溫到溶劑的沸點(diǎn)溫度的范圍內(nèi)。萃取時(shí)間根據(jù)溶劑的種類、果皮的狀態(tài)(新鮮或干燥物、粉 碎物或粉末等)和萃取溫度而變化，較好是在0. 5 M小時(shí)的范圍內(nèi)。
提取物可根據(jù)需要用蒸發(fā)器等將萃取溶劑濃縮或除去。此外，提取物也可根據(jù)需 要通過溶劑分提或色譜法進(jìn)行純化后使用。
本發(fā)明的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑可添加于清涼飲料、點(diǎn)心、冷飲、乳制 品、酒類和肉類等食品以及飼料。
作為特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑的山竹果皮提取物的給藥量根據(jù)給藥方法 和所需的治療而變化，不能一概而論，提取物的量為每Ikg動(dòng)物60 250mg，對人而言是 0. 3mg 300mg/kg體重/天、更好是0. 5mg 200mg/kg體重/天。4
本發(fā)明的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療食品可按照作為食品的1天的常規(guī)攝取量 滿足上述有效量的條件來規(guī)定摻入量。1天的量也可分?jǐn)?shù)次攝取。
此外，本發(fā)明的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療用飼料可按照作為飼料的1天的常 規(guī)攝取量滿足上述有效量的條件來規(guī)定摻入量。1天的量也可分?jǐn)?shù)次攝取。
根據(jù)本發(fā)明，可利用山竹的果皮提取物來預(yù)防或治療特應(yīng)性皮炎。此外，本發(fā)明 的提取物是用極性溶劑從山竹中萃取的，即使不進(jìn)行進(jìn)一步的純化也可獲得上述效果。如 果給予本發(fā)明的山竹果皮提取物，則可觀察到與涂布普特彼軟膏的組同等或在其之上的效 果。通過給予本發(fā)明的山竹果皮提取物，血中總IgE值的上升得到抑制，提示過敏反應(yīng)得到 了全身性的抑制。
此外，山竹被稱為果后，其果實(shí)可供食用，知名度也高，是印象良好的素材。因此， 由山竹果皮的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑不會(huì)帶來由風(fēng)評引起的不安， 容易讓患者接受。此外，含有由山竹果皮的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑 的飼料在用于將來會(huì)被用作食品的家畜時(shí)也容易讓人接受，此外，在用于狗、貓等寵物時(shí)也 容易讓寵物愛好者接受。
附圖的簡單說明


圖1是表示各組的臨床癥狀評分隨時(shí)間的變化的圖。
圖2是表示各組的試驗(yàn)開始前后的抓撓行為次數(shù)的圖。
圖3是表示各組的試驗(yàn)開始前后的抓撓行為時(shí)間的圖。
圖4是表示各組的試驗(yàn)開始前后的血中IgE值的圖。
圖5是表示各組的經(jīng)表皮水分丟失量隨時(shí)間的變化的圖。
圖6是表示各組的體重隨時(shí)間的變化的圖。
實(shí)施發(fā)明的最佳方式
下面例舉本發(fā)明的例子進(jìn)行說明，但本發(fā)明的范圍不限定于以下的例子。
實(shí)施例1
如下所述獲得山竹果皮提取物。即，將山竹的IOOg未干燥果皮粉碎，在11的70% 乙醇中于80°C攪拌萃取1小時(shí)。對其進(jìn)行過濾，用蒸發(fā)器對濾液進(jìn)行減壓干燥，得到27. 4g 提取物。
實(shí)施例2
對山竹果皮提取物的攝取對由過敏引起的皮炎的癥狀改善所起到的效果進(jìn)行了 特應(yīng)性皮炎自然發(fā)病模型小鼠驗(yàn)證。
試驗(yàn)中，使用5-6周齡的特應(yīng)性皮炎自然發(fā)病模型小鼠NC/NgaTnd小鼠。這些實(shí) 驗(yàn)動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開始前進(jìn)行1周的預(yù)飼養(yǎng)后，分成山竹果皮提取物喂食組、對照飼料喂食組、 普特彼軟膏涂布組這3組(N = 7)來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用Durmett的多重比較檢驗(yàn)或 斯氏檢驗(yàn)(t檢驗(yàn))。
將實(shí)施例1中得到的山竹果皮提取物按照0. 25% W/W的比例混入飼料(CRF-1，東 方酵母公司(才U - >夕 >酵母社)制)，制成山竹果皮提取物粉末混合飼料。按照山竹提 取物的攝取量為250mg/kg/天的量讓山竹果皮提取物喂食組的NC/NgaTnd小鼠自然攝取該 飼料。讓對照飼料喂食組的NC/NgaTnd小鼠自然攝取普通飼料(CRF-I)。讓普特彼軟膏涂 布組的NC/NgaTnd小鼠與對照飼料喂食組同樣地自然攝取普通飼料(CRF-I)，以1天1次、1周5次的頻率進(jìn)行普特彼(0.1%軟膏)的涂布。各組中，飼料和水均自由攝取。
對上述3組進(jìn)行皮炎評分的判定。判定方法以Matsuda，H.等.，ht. Immunol. 9 461-466，1997為參考如下所述進(jìn)行。即，從開始喂食試驗(yàn)食物的前一天及開始喂食當(dāng)天起 到最后一次喂食的后一天為止，每周2次對“撓癢癥狀”、“紅斑/出血”、“浮腫”、“擦傷/糜 爛”、“落屑/干燥”這5個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行判定，判定分為“0 無”、“1 輕度”、“2 中度”、“3 重度1 級。另外，判定人員和喂食人員在試驗(yàn)期間由不同人員進(jìn)行，判定人員不知道動(dòng)物屬于哪一 組。結(jié)果示于表1、圖1。圖1中，〇表示山竹果皮提取物喂食組，Δ表示對照飼料喂食組， □表示普特彼軟膏涂布組。
表1各組的臨床癥狀評分的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差
(Α 山竹果皮提取物喂食組N = 8，B 對照飼料喂食組N = 7，C 普特彼軟膏涂布 組 N = 7)
權(quán)利要求
1.一種特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑，其特征在于，由用極性溶劑從山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物組成。
2.如權(quán)利要求1所述的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑，其特征在于，極性溶劑是乙醇 或乙醇水溶液。
3.一種特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑，其特征在于，含有用乙醇或乙醇水溶液從山 竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物作為有效成分，可抑制IgE抗體的產(chǎn)生。
4.一種食品，其特征在于，含有權(quán)利要求1 3中的任一項(xiàng)所述的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和 /或治療劑。
5.一種瘙癢預(yù)防和/或治療用食品，其特征在于，含有山竹(Garcinia mangostana L.)果皮的乙醇或乙醇水溶液提取物作為有效成分。
6.一種飼料，其特征在于，含有權(quán)利要求1 3中的任一項(xiàng)所述的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和 /或治療劑。
7.一種瘙癢預(yù)防和/或治療用飼料，其特征在于，含有山竹(Garcinia mangostana L.)果皮的乙醇或乙醇水溶液提取物作為有效成分。
全文摘要
本發(fā)明人為了提供產(chǎn)生副作用等的可能性低、安全性高的特應(yīng)性皮炎的預(yù)防劑和/或治療劑進(jìn)行了認(rèn)真研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用極性溶劑從山竹(Garcinia mangostana L.)的果皮萃取的提取物可預(yù)防或治療特應(yīng)性皮炎。即，本發(fā)明提供由用極性溶劑從山竹的果皮萃取的提取物組成的特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑。此外，本發(fā)明提供含有所述特應(yīng)性皮炎預(yù)防劑和/或治療劑的食品。
文檔編號A61P17/00GK102036673SQ200980118910
公開日2011年4月27日 申請日期2009年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月22日
發(fā)明者大澤謙二, 成瀨敦, 樋口裕明, 清水和正, 黑田玲子 申請人:羅蒂株式會(huì)社