專利名稱：緩釋藥物釋放系統(tǒng)及其制備方法與應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種藥物釋放系統(tǒng)及其制備方法與應用，尤其是緩釋藥物釋放系統(tǒng)及
其制備方法與應用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤極大地危害人類的健康與生命，尤其是膀胱癌為最常見并容易復發(fā)的惡性腫瘤，70% _80%為淺表性膀胱癌。50% _70%的淺表性膀胱腫瘤術(shù)后容易復發(fā)，其中30% _40%的復發(fā)病例伴有惡性程度增加或浸潤能力增強。膀胱癌顯著特點是初次發(fā)病時多為淺表性乳頭狀瘤，但是單純腫瘤切除后復發(fā)率高，多次復發(fā)不但給患者造成痛苦及經(jīng)濟負擔，而且每次復發(fā)時病理分級均升高一次，最終發(fā)展成浸潤性癌。因而防止腫瘤術(shù)后復發(fā)一直是膀胱癌治療中的難題，如何降低復發(fā)率防止膀胱癌復發(fā)是提高膀胱癌治療水平的關鍵。 應用化學藥物或免疫制劑進行膀胱灌注是當前預防膀胱癌術(shù)后復發(fā)最常用的方法，已被臨床肯定和廣泛應用。但是膀胱灌注藥物種類繁多，灌注方法不一，治療效果亦不相同。自從1903年Herring應用硝酸銀進行膀胱灌注治療以來，大約有25種以上藥物先后應用于臨床。但膀胱灌注存在以下缺點(1)常規(guī)灌注化療藥物在開始一個治療方案時都有一個沖擊劑量，致使體內(nèi)產(chǎn)生的血藥濃度峰值超過中毒水平；另一方面，又無法在很長時間內(nèi)使血藥濃度總是維持在一個臨界治療水平，以達到有效預防及治療腫瘤的目的；(2)需多次插尿管注藥，大多引起泌尿系感染，尿道狹窄等合并癥，增加病人痛苦，產(chǎn)生恐懼心理；(3)膀胱灌注藥物利用率較低，增加病人經(jīng)濟負擔。 理想的腫瘤預防及治療應該使血藥濃度長期保持相對恒定，并且在最低治療水平和中毒水平之間的狹窄的范圍內(nèi)，這樣可避免藥物的全身性毒性，并且在腫瘤細胞對藥物最敏感的增生期就將其破壞。 高分子聚合物作為藥物載體的系統(tǒng)研究始于70年代中期，美國波士頓麻省總醫(yī)院的Langer和Folkman首先將大分子物質(zhì)(如蛋白質(zhì))與聚合物結(jié)合，這些大分子物質(zhì)能從聚合物內(nèi)以彌散的方式逐步釋放.隨后的研究又成功的將抗生素、生物因子、化療藥物等結(jié)合進入聚合物。最早的聚合物采用的是醋酸乙烯-乙烯共聚物(ethylene-vinylacetate EVAc)，雖然在實驗室證明它是良好的藥物載體，但由于是非生物降解型聚合物，注入體內(nèi)后藥物雖然能以彌散的方式逐步釋藥，但將留下載體異物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供緩釋藥物釋放系統(tǒng)。 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法。
本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)的應用。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是 緩釋藥物釋放系統(tǒng)，是生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物的靶向緩釋制劑。
3
優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，所述靶向緩釋制劑為緩釋植入劑或緩釋微球注射制劑。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，所述生物可降解高分子材料包括化學合成高分子材料、生物技術(shù)合成高分子材料或天然高分子材料。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，所述化學合成高分子材料包括聚酯(polyester)或聚酸酐(polyanhydride);生物技術(shù)合成高分子材料包括聚原酸酯；天然高分子材料包括白蛋白、明膠、海藻酸或改性多糖。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，所述聚酯(polyester)為聚乳酸(PLA)、聚羥基乙酸(PGA)或乙交酯丙交酯集合物(PLAG);聚酸酐(polyanhydride)為對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物(PCPP-SA)或脂肪酸與癸二酸共聚物(PFDA-SA);聚原酸酯為聚P-羥基丁酸酯(PHB)。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，所述抗腫瘤藥物包括化學合成、生物技術(shù)合成或天然抗腫瘤藥物。 上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，由生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，根據(jù)載體和藥物的性質(zhì)將聚合物基
質(zhì)和抗腫瘤藥物共溶于溶劑后形成溶液，經(jīng)熔融澆鑄制成膀胱黏膜內(nèi)緩釋埋植劑。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，經(jīng)乳化溶劑揮發(fā)法冷凍干燥制成膀
胱黏膜內(nèi)緩釋微球注射制劑。 上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)在制備抗腫瘤藥物方面的應用。 優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)在制備抗膀胱腫瘤、胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝臟腫瘤、腦部腫瘤、脾部腫瘤、腎部腫瘤或口腔及耳鼻喉部位腫瘤的藥物方面的應用。
優(yōu)選的，上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)在制備抗膀胱腫瘤的藥物方面的應用。
本發(fā)明的有益效果是 所述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，通過體內(nèi)埋植或注射等方式將藥物直接送達病灶部位，在藥物釋放過程中聚合物基質(zhì)逐漸降解，避免了二次手術(shù)取出，也避免了普通制劑血藥濃度出現(xiàn)波峰波谷的現(xiàn)象；局部長效緩釋制劑的藥效時間長，可使處于不同細胞周期的癌細胞均有機會被化療藥物殺死，藥物生物利用率高，毒副作用小，抑瘤效果好。尤其對于實施膀胱腫瘤切除部位粘膜下植入抗腫瘤緩釋植入劑、對無需進行膀胱切除術(shù)患者實施膀胱鏡輔助下膀胱黏膜內(nèi)注射緩釋微球注射制劑，達到膀胱癌局部長效治療及化療、預防膀胱癌術(shù)后復發(fā)的效果尤為突出，可極大地提高瘤內(nèi)或術(shù)后瘤腔內(nèi)藥物濃度，同時降低了身體其它部位的藥物濃度。


圖1是比柔吡星_聚酸酐緩釋埋植劑組兔血漿及尿液吡柔比星濃度_時間變化圖(x±s n = 10); 圖2是比柔吡星膀胱灌注組兔血漿及尿液吡柔比星濃度_時間變化圖(x±s n
=10); 圖3是卡泊_聚酸酐緩釋微球的粒徑及粒徑分布 圖4是卡泊_聚酸酐緩釋微球體外釋放圖。
具體實施例方式
為了使本領域的技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面結(jié)合
具體實施例方式
對本發(fā)明所述技術(shù)方案作進一步的詳細說明。 實施例1 熔融澆鑄制備吡柔比星_對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物緩釋埋植劑 將對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物與吡柔比星原料藥在瑪瑙研缽內(nèi)充分混合
并溶于二氯甲烷中，澆注于膜具中置干燥器內(nèi)4t:下成膜，最后加工而成的對羧基苯氧基
丙烷與癸二酸共聚物_吡柔比星緩釋植入劑，規(guī)格為圓形，直徑6mm，厚2mm，質(zhì)量(20. 0 士 0. 2)mg，每片植入劑含吡柔比星5. Omg，吡柔比星含量為25% ;將緩釋植入劑密封，Co_60輻 照滅菌，輻照劑量為20kGy， -2(rC保存?zhèn)溆?，即得?(1片植入劑在體外生理鹽水中吡柔比星釋放速度約8-10 ii g/d.非酶水解釋放可 維持100d以上。)
實施例2 乳化溶劑揮發(fā)法冷凍干燥制備比柔吡星_對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物緩 釋微球注射制劑 精確稱量醫(yī)用對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物1000mg及吡柔比星原藥粉 250mg，并溶解于50ml丙酮-乙醇溶液中，待完全溶解后，在攪拌器攪拌條件下(120r/min) 將比柔吡星-聚酸酐-丙酮-乙醇溶液用注射器緩慢注入聚乙烯醇(PVA)水溶液中，通過 攪拌器進行乳化，形成水包油乳液，于通風櫥內(nèi)常壓下攪拌至完全除去有機溶劑，然后用超 速離心機在20000r/min轉(zhuǎn)速下離心20min，沉淀，用蒸餾水洗滌離心3次，除掉游離的比柔
吡星及pva后，冷凍干燥，4t:保存。 離心和洗滌過程中同時收集所有上清液，用于檢測游離吡柔比星的含量為 7.84% ;采用激光粒度儀(Brookhaven Co.)測定微球的粒徑及粒徑分布，結(jié)果吡柔比 星-對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物緩釋微球的平均粒徑為566. 7nm，分散指數(shù)為 0. 234。 實施例3 熔融澆鑄制備紫杉醇_聚13 _羥基丁酸酯緩釋埋植劑 將聚e-羥基丁酸酯與紫杉醇原料藥在瑪瑙研缽內(nèi)充分混合并溶于二氯甲烷中，
澆注于膜具中置干燥器內(nèi)4t:下成膜，最后加工而成的紫杉醇-聚P-羥基丁酸酯緩釋植
入劑，規(guī)格為圓形，直徑6mm，厚2mm，質(zhì)量(20. 0±0. 2)mg，每片植入劑含紫杉醇5. Omg，紫杉 醇含量為25X;將緩釋植入劑密封，Co-60輻照滅菌，輻照劑量為20kGy，-2(TC保存?zhèn)溆?，即得?實施例4透析法制備吡柔比星兩親性共聚物緩釋微球注射制劑用聚乙二醇(PEG)和聚乳酸(PLA)的兩親性三嵌段共聚物PEG-PLA-PEG (PEAL)作
載體，采用透析法包載吡柔比星形成緩釋微球，微球具有明顯的核殼結(jié)構(gòu)，可有效地改善吡
柔比星的水溶性。 載體PEG-PAL-PEG的三嵌段相對分子質(zhì)量比為2000 : 2000 : 2000。采用透析法
包載吡柔比星形成緩釋微球用丙酮-乙醇i : l混合液溶解吡柔比星300mg，并用丙酮液溶解PEAL 1200mg，將其混合倒入透析袋(透過相對分子質(zhì)量8000)內(nèi)，封口后投人1L雙 蒸水中，按設定時間間隔8h更換雙蒸水，將丙酮、乙醇除盡，緩釋微球在透析袋內(nèi)形成。所 得制備液分別用G3濾過漏斗減壓過濾，濾液經(jīng)冷凍干燥24h得緩釋微球產(chǎn)品。濾渣用乙腈 清洗、回收。用高效液相色譜(HPLC)測定緩釋微球的藥物包封質(zhì)量分數(shù)(EE)為93. 74%和 緩釋微球的載藥質(zhì)量分數(shù)(DLC)為4.65%。用光子相關光譜儀(PCS)測定粒徑分布，平均 粒徑93. 6nm。其中，包封質(zhì)量分數(shù)用下式計算 包封質(zhì)量分數(shù)=緩釋微球藥物含量/初始投藥質(zhì)量X 100%
實施例5
1材料與方法
1. 1儀器與材料 高效液相分析儀Agilent 1100高效液相色譜儀(美國安捷倫科技有限公司) G1312A G1311A四元泵、G1314A VWD檢測器、G1321A FLD檢測器；安捷倫化學色譜工作站； KS-1200超聲波清洗器(天津市鑫洲科技有限公司)；
鹽酸吡柔比星(THP):深圳萬樂藥業(yè)有限公司生產(chǎn)；
鹽酸吡柔比星對照品陜西中林醫(yī)藥有限公司提供； 大耳白兔天津市醫(yī)學實驗動物開發(fā)中心提供，醫(yī)學實驗動物合格證書 2002-084 ; 聚[l，3-雙(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸](P(CPP-SA)) (Wcpp : Wsa = 75 : 25):濟南岱罡生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。 1. 2比柔吡星-對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋埋植劑制備 取實施例1所述吡柔比星_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋埋植劑。 1. 3動物選擇和分組 取體質(zhì)量220 250g健康大耳白兔20只.隨機分為植入劑組和灌注組，①植入 劑組，n = IO，在每只大耳白兔膀胱黏膜內(nèi)植入4片植入劑，內(nèi)含吡柔比星20. Omg②灌注 組，n = IO，在每只大耳白兔膀胱內(nèi)灌注20. Omg吡柔比星。植入方法將兔脫毛、麻醉后取 仰臥位，切開皮膚將消毒后的植入劑放入膀胱黏膜內(nèi)，逐層縫合傷口 ，術(shù)后回籠飼養(yǎng)，定時 取血取尿；灌注方法將兔麻醉后取仰臥位，插入尿管，用20ml生理鹽水溶解20. Omg吡柔 比星并注入膀胱內(nèi)，保留lh排除。
1. 4標本采集 將4片比柔吡星_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋埋植劑植入大耳白兔膀 胱粘膜內(nèi)，分別于術(shù)后1，3，5，8， 10，20，30，40，60，80， 120， 180， 240， 300， 340d取血和尿各 1. 8mL，血加入肝素抗凝管中，4000r/min離心15min，吸取上清液，-20°〇存放待測。
1. 5植入劑在兔體內(nèi)緩釋釋放研究 1. 5. 1高效液相色譜法檢測吡柔比星含量HPLC色譜條件，色譜柱Agilent C18(250mmX4. 6mm)，流動相用0. 04%磷酸二氫鈉水溶液；乙腈=68 : 32 (V : V)，用冰乙 酸調(diào)節(jié)pH至4. 05 ;Ex = 480nm， Em = 550nm，室溫，進樣體積20. 0 ii L。
1.5.2樣品制備凍存標本室溫回復后，取O. lml，置于EP管中，加入醋酸乙酯 0. 9ml，旋渦混合5min，離心5mi n (12000r/min)，將醋酸乙酯層置于試管中，氮氣吹干，殘渣 用0. lml注射用水溶解，取20iiL進樣。
1.5. 3標準曲線繪制 血樣標準曲線繪制血漿吡柔比星標準曲線分為兩段0. 5 50. 0 ii g/L和 50.0 800.0iig/L，將吡柔比星(THP)標準液分別加入到50 空白兔血漿中，配置成 0. 5、2. 5、5. 0、10. 0、20、30、40、50ii g/L和50、 100、200、300、400、500、600、800 ii g/L濃度的 THP血漿樣品，渦旋振蕩混合5min，離心lOmin(12000r/min);取上清0. lml，置于EP管中， 最后取20iU進樣，把不同吡柔比星濃度對應峰面積分為兩段，以THP濃度(X)作橫坐標， 以峰面積(v)為縱坐標，進行線性回歸，求得回歸方程。 尿樣標準曲線繪制尿液吡柔比星標準曲線分為兩段0. 5 50. 0 ii g/L和 50.0 800.0iig/L，將吡柔比星(THP)標準液分別加入到50 空白兔尿液中，配置成 0. 5、2. 5、5. 0、10. 0、20、30、40、50ii g/L和50、 100、200、300、400、500、600、800 ii g/L濃度的 THP兔尿樣品，渦旋振蕩混合5min，離心lOmin (12000r/min);取上清0. 1ml，置于EP管中， 最后取20iU進樣，把不同吡柔比星濃度對應峰面積分為兩段，以THP濃度(X)作橫坐標， 以峰面積(v)為縱坐標，進行線性回歸，求得回歸方程。
1. 5. 4精密度、回收率試驗 血樣精密度、回收率試驗在1. 8ml兔血漿中分別加入50 y 1不同濃度的THP標準 液，配成6. 45、 188. 4、432. Oil g/L高中低3個濃度，按樣品處理的方法提取測定。 一天內(nèi)重 復測定5次求得一天內(nèi)精密度；每天2次，重復測定5天求得日間精密度；測得的峰面積根 據(jù)標準曲線回歸方程計算得相應濃度，與理論濃度相比，求得回收率。 尿樣精密度、回收率試驗在1. 8ml兔尿液中分別加入50 y 1不同濃度的THP標準 液，配成27. 5、265. 5、730. 6ii g/L高中低3個濃度，按樣品處理的方法提取測定。 一天內(nèi)重 復測定5次求得一天內(nèi)精密度；每天2次，重復測定5天求得日間精密度；測得的峰面積根 據(jù)標準曲線回歸方程計算得相應濃度，與理論濃度相比，求得回收率。
1. 5. 5兩組動物實驗體內(nèi)吡柔比星藥物濃度對比 植入劑組將4片比柔吡星-聚酸酐緩釋埋植劑(含吡柔比星20. Omg)植入大耳白 兔膀胱粘膜內(nèi)；灌注組在每只大耳白兔膀胱內(nèi)灌注20. 0mg/20ml生理鹽水吡柔比星溶液， 分別于術(shù)后不同時間取血和尿進行吡柔比星藥物濃度測定，觀察兩種治療方法動物體液中 有效藥物濃度持續(xù)時間。
1. 6統(tǒng)計學處理 采用SPSS 12. 0統(tǒng)計軟件分析，計量資料采用均數(shù)±標準差(x士s)表述。以P < 0.01為有統(tǒng)計學意義。
2實驗結(jié)果 2. 1兔血槳、尿液吡柔比星標準曲線 兔血漿吡柔比星標準曲線把不同吡柔比星濃度對應峰面積分為兩段以實測峰面 積為y對濃度樣品中THP濃度為x (y g/L)作線性回歸，血漿標本在0. 5 50. 0 ii g/L和 50. 0 800. Oii g/L兩段濃度范圍內(nèi)線性良好，得標準曲線回歸方程為y = 4. 54x+0. 65，r =0. 997， n = 5 (0. 5 50. 0 ii g/L) ;y = 6. 26x_0. 47， r = 0. 999， n = 5 (50. 0 800. 0 ii g/L)。 兔尿液吡柔比星標準曲線以實測峰面積為y對濃度樣品中THP濃度為x (ii g/L) 作線性回歸，尿液標本在0. 5 50. 0 ii g/L和50. 0 800. 0 y g/L兩段濃度范圍內(nèi)線性良好，得標準曲線回歸方程為y = 5. 85x+0. 32， r = 0. 998， n = 5 (0. 5 50. 0 y g/L) ;y = 6. 69x-0. 38， r = 0. 998， n = 5 (50. 0 800. 0 ii g/L)。
2. 2回收率及精密度實驗結(jié)果 表1為兔血漿中吡柔比星濃度測定回收率和精密度，表2為兔尿液中吡柔比星濃 度測定回收率和精密度。 表1兔血漿中吡柔比星濃度測定回收率和精密度(x±s n = 5)
濃度(/ L ) 相對回收率(％ ) 絕對回收率(％ )精密度(％ )
曰內(nèi) 曰間
6.4 99. 20 ± 3. 27 78. 21 ± 2. 845.71 8.26
188.4 101.45 ±2.18 84.70 ± 2.663.04 2.93
432.0 104. 21 ± 2. 93 81. 34 ± 1. 591.84 2.02 表2兔尿液中吡柔比星濃度測定回收率和精密度(x±s n = 5)
濃度(/ L ) 相對回收率(％ ) 絕對回收率(％ ) 精密度(％ )
日內(nèi) 日間
27.5 99.20 ± 3. 27 90. 80 ± 3. 063.40 4.23
265.5 98.49 ± 2.18 94. 24 ± 2. 45 2.54 1.56
730.6 103. 56 ±2. 93 87. 66 ± 2. 11 1.34 2.9 2. 3對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物_吡柔比星植入后兔血漿及尿液藥物濃 度-時間變化 由圖1可知，聚酸酐對吡柔比星具有較好的緩釋性能，四片緩釋植入劑在膀胱黏 膜內(nèi)約350d藥物釋放完畢，藥物在釋放過程中無突釋效應，基本滿足長效局部植人劑應用 于膀胱癌治療的基本要求.在測定時間范圍內(nèi)，用一級釋放動力學方程Y = a+bt+ct2(Y 為藥物釋放百分率，t為持續(xù)釋放時間)擬合藥物釋放曲線，對羧基苯氧基丙烷-癸 二酸聚合物對藥物的釋放呈一級釋放動力學特征，回歸系數(shù)R2為98%，回歸結(jié)果Y = 8. 58+5. 46t-0. 13t2。 2. 4吡柔比星膀胱灌注后兔血漿及尿液藥物濃度_時間變化 由圖2可知，采用目前使用的膀胱灌注治療方法，體內(nèi)藥物濃度僅能維持一周左 右，而相同藥物劑量的植入劑體內(nèi)藥物濃度能維持一年左右，兩種治療方法有顯著性差異。
3結(jié)論 對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物_吡柔比星長效緩釋植入劑具有一級釋放動力 學，可在體內(nèi)長期維持穩(wěn)定的藥物釋放量，預期一次植入四片可有效預防膀胱腫瘤復發(fā)一 年。因而經(jīng)膀胱粘膜緩釋給藥作為膀胱癌治療及預防術(shù)后復發(fā)的手段有望在臨床應用。
實施例6 1.卡泊-緩釋微球注射制劑的制備 精確稱量對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物lOOmg及卡泊原藥粉25mg，并溶解于 5ml丙酮溶液中，待完全溶解后，在攪拌器攪拌條件下(200r/min)將卡泊-對羧基苯氧基丙 烷-癸二酸聚合物丙酮溶液用注射器緩慢注入聚乙烯醇(PVA)水溶液中，通過攪拌器進行 乳化，形成水包油乳液，于通風櫥內(nèi)常壓下攪拌至完全除去有機溶劑，然后用超速離心機在 20000r/min轉(zhuǎn)速下離心30min，沉淀，用蒸餾水洗滌離心3次，除掉游離的卡泊及PVA后，冷
凍干燥，4t:保存。 離心和洗滌過程中同時收集所有上清液，用于檢測游離卡泊的含量。
2卡泊-對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球的表征 采用激光粒度儀(Brookhaven Co.)測定卡泊_聚酸酐緩釋微球的粒徑及粒徑分 布情況，如圖3所示，透射電鏡觀察其形態(tài)(平均粒徑566. 7nm，分散指數(shù)為0. 234)。
3.卡泊-對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球體外釋放實驗
卡泊-對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球體外釋放是在磷酸二氫鈉緩沖 液中進行，精確稱量卡泊_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球2. 5mg，加入濃度為 lmol/L磷酸二氫鈉緩沖溶液4ml中，制成懸浮液，將其放人雙腔擴散池的一側(cè)，兩池之間用 0. 22 m的濾膜隔開，另一側(cè)為接收池，加人4ml濃度為lmol/L的磷酸二氫鈉緩沖釋放液， 將此雙室擴散池置于37°C，200r/min的恒溫搖床中進行釋放實驗，每24h用新鮮磷酸二氫 鈉緩沖溶液更換接收池中的釋放液，更換出的樣品要用萃取的方法將藥物提取出來，然后 用高效液相在波長233nm處測定吸光值，從而計算釋放量并繪制累積釋放曲線，如圖4所 示。 藥物提取方法為樣品中加入lml三氯甲烷，充分振蕩，靜置20min，將上層磷酸二 氫鈉緩沖液進行二次提取。最后用10. lkPa(O. latm)氮氣將提取物中的氯仿吹去，即可用 HPLC測定其含量。 釋放量(mg)=(提取卡泊峰面積/內(nèi)標峰面積)X內(nèi)標質(zhì)量 4.卡泊_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球藥物含量和包埋率的測定 4. 1卡泊_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球藥物含量測定 精密稱量5mg樣品，加人5ml乙腈，再加入5ml蒸餾水，溶解后，用HPLC測定其藥
物含量。 藥物含量(％ )=微球中的卡泊質(zhì)量/卡泊_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物
緩釋微球質(zhì)量X100% 試驗測定藥物含量為18. 27%。 4. 2卡泊-對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球包埋率的測定 將新制備的混懸液冷凍離心后收集上清液，測定上清液中的卡泊含量，從而得出
未被包裹的卡泊質(zhì)量，進而計算卡泊_對羧基苯氧基丙烷_癸二酸聚合物緩釋微球的包埋率。 包埋率(％ )=緩釋微球中的卡泊質(zhì)量/最初所用卡泊質(zhì)量X 100%
試驗測定藥物包埋率為91.65%。 研究所用材料對羧基苯氧基丙烷-癸二酸聚合物為生物可降解材料，要完全降解 需要1. 5年，因而在藥物釋放完全前可有效保證材料強度，不會出現(xiàn)藥物崩解現(xiàn)象。實驗表 明藥物含量達到18. 27%時，卡泊-對羧基苯氧基丙烷-癸二酸聚合物緩釋微球?qū)τ诎螂装?具有緩釋治療作用，可減少常規(guī)治療藥物劑量，延長藥物作用時間，提高藥物耐受劑量。
有益效果分析 應用本發(fā)明所述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，尤其是抗膀胱腫瘤生物降解型長效緩釋埋植 劑及其微球制劑可有效預防膀胱癌術(shù)后復發(fā)，避免了以往術(shù)后需長期治療，多次導尿，藥物 在膀胱內(nèi)作用時間短；且反復灌注，費用高，副作用大，患者痛苦，易誘導腫瘤的耐藥性等一 系列缺點，經(jīng)實驗證明可行性強。因為膀胱腫瘤復發(fā)的原因有三點甚為重要①腫瘤為多中 心性，手術(shù)時已存在肉眼看不見的黏膜病變，以后發(fā)展為癌腫；②約3% 10%的膀胱癌患 者在黏膜下淋巴管和毛細血管內(nèi)存在癌細胞，可發(fā)展為癌腫；③術(shù)中器械等致黏膜微損傷， 使腫瘤細胞種植在損傷的上皮組織.本發(fā)明所述技術(shù)方案可明顯提高黏膜及黏膜下層的 抗腫瘤藥物濃度，延長對膀胱黏膜持續(xù)作用時間，且緩釋部位廣泛，藥物擴散均勻，增強了 藥物對殘留癌細胞的殺滅作用，并對微小病灶和原位癌產(chǎn)生細胞毒性作用.化療藥物能夠 沿組織間隙及淋巴管浸潤整個膀胱，到達膀胱周圍及淋巴引流區(qū)域，對上述區(qū)域存在的癌 細胞具有直接的殺傷作用。 黏膜緩釋藥物釋放系統(tǒng)是一種成本很低的膀胱黏膜植入制劑，選用的載體基質(zhì)均 為無毒、無致畸、組織相容性好、可被機體完全降解的生物材料，具有良好的載藥及藥物緩 釋能力；體內(nèi)釋藥平穩(wěn)可持續(xù)350d，在手術(shù)同期黏膜下埋植及非手術(shù)微球注射膀胱黏膜內(nèi) 兩種治療方法，具有不增加患者痛苦、一次完成無需二次手術(shù)取出、操作簡單、費用低、安 全、副作用少等優(yōu)點。 實驗證明黏膜緩釋埋植劑和微球注射劑具有良好的局部緩釋功能，尿液內(nèi)藥物質(zhì) 量濃度明顯高于血藥濃度，在術(shù)后300d時尿液中藥物濃度達92. 5±7. 4ii g/L，仍明顯高于 藥物膀胱灌注的治療濃度，并且具有一級釋放動力學，可在體內(nèi)長期維持穩(wěn)定的藥物釋放 量，預期一次植入/注射可有效預防膀胱腫瘤復發(fā)一年，因而經(jīng)膀胱粘膜緩釋給藥作為膀 胱癌治療及預防術(shù)后復發(fā)是臨床應用的有效手段。本發(fā)明所述技術(shù)方案不僅僅適用于膀胱 腫瘤，同樣適用于胃部腫瘤、肺部腫瘤、肝臟腫瘤、腦部腫瘤、脾部腫瘤、腎部腫瘤、口腔及耳 鼻喉等部位的腫瘤生長部位粘膜下埋植或注射進行長效治療和化療。 上述參照具體實施方式
對該緩釋藥物釋放系統(tǒng)及其制備方法與應用進行的詳細 描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個實施例，因此在不脫離 本發(fā)明總體構(gòu)思下的變化和修改，應屬本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
緩釋藥物釋放系統(tǒng)，其特征在于是生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物的靶向緩釋制劑。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)，其特征在于所述靶向緩釋制劑為緩釋植入劑或緩釋微球注射制劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)，其特征在于所述生物可降解高分子材料包括化學合成高分子材料、生物技術(shù)合成高分子材料或天然高分子材料。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)，其特征在于所述化學合成高分子材料為聚酯或聚酸酐；生物技術(shù)合成高分子材料為聚原酸酯；天然高分子材料為白蛋白、明膠、海藻酸或改性多糖。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)，其特征在于所述聚酯為聚乳酸、聚羥基乙酸或乙交酯丙交酯集合物；聚酸酐為對羧基苯氧基丙烷與癸二酸共聚物或脂肪酸與癸二酸共聚物；聚原酸酯為聚e-羥基丁酸酯。
6. 權(quán)利要求1-5所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，其特征在于由生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，其特征在于根據(jù)載體和藥物的性質(zhì)將聚合物基質(zhì)和抗腫瘤藥物共溶于溶劑后形成溶液，經(jīng)熔融澆鑄制成膀胱黏膜內(nèi)緩釋埋植劑。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)的制備方法，其特征在于經(jīng)乳化溶劑揮發(fā)法冷凍干燥制成膀胱黏膜內(nèi)緩釋微球注射制劑。
9. 上述緩釋藥物釋放系統(tǒng)在制備抗腫瘤藥物方面的應用。
10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的緩釋藥物釋放系統(tǒng)在制備抗膀胱腫瘤的藥物方面的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及緩釋藥物釋放系統(tǒng)及其制備方法與應用，所述緩釋藥物釋放系統(tǒng)是生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物的靶向緩釋制劑，由生物可降解高分子材料包載抗腫瘤藥物制備而成，在制備抗腫瘤藥物方面具有廣泛應用前景，所述緩釋藥物釋放系統(tǒng)，通過體內(nèi)埋植或注射等方式將藥物直接送達病灶部位，在藥物釋放過程中聚合物基質(zhì)逐漸降解，避免了二次手術(shù)取出，也避免了普通制劑血藥濃度出現(xiàn)波峰波谷的現(xiàn)象；局部長效緩釋制劑的藥效時間長，可使處于不同細胞周期的癌細胞均有機會被化療藥物殺死，藥物生物利用率高，毒副作用小，抑瘤效果好。
文檔編號A61K9/00GK101711735SQ20091022905
公開日2010年5月26日 申請日期2009年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月10日
發(fā)明者于美麗, 杜智 申請人:于美麗;杜智