專利名稱：從Kratom中提取生物堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物中活性成分的提取方法，具體涉及從Kratom中提取生物堿的方法。
背景技術(shù)：
Kratom(Mitragyna specilsa)是茜草科帽柱木屬植物中的一種樹(shù)木，原產(chǎn)于東南 亞(泰國(guó)，馬來(lái)西亞和緬甸)。從遠(yuǎn)古時(shí)代起，東南亞各國(guó)的人們就已將Kratom的樹(shù)葉作為 草藥藥物使用。它被作為興奮劑(低劑量)、鎮(zhèn)靜劑(高劑量，可使人產(chǎn)生幻覺(jué))、娛樂(lè)性藥 物，止痛藥，腹瀉藥使用，也可用于治療鴉片成癮。Kratom的活性成分為其中含有的生物堿。目前從kratom已分離鑒定出超過(guò)25生 物堿，其中含量最豐富的生物堿包括三種吲哚(indoles)和兩種吲哚酮(oxindoles)，這三 種吲哚分別是帽柱堿(mitragynine)，美艷帽柱木堿(paynanthine)和speciogynine ；兩種 吲哚酮是帽柱木非靈(mitraphylline)和美麗帽柱木堿(speciofoline)。其中最主要的是 帽柱堿(mitragynine)，它起到止痛、鎮(zhèn)靜、愉快，并有刺激作用。帽柱堿(mitragynine)的 結(jié)構(gòu)類似于育亨賓，但不具有相同的效果。目前所知道的其他生物堿包括其他吲哚，如阿瑪 喊，柯捕喊(corynanthedine),異葉巾冒柱喊(mitraversine),鉤藤喊(rhychophylline)禾口 stipulatine 等。Kratom樹(shù)葉一般是咀嚼或是由溫水泡茶飲用。也可將Kratom樹(shù)葉由水浸提后上 樹(shù)脂分離得到Kratom粗提物，但目前還沒(méi)有見(jiàn)有用乙醇從Kratom樹(shù)葉中提取生物堿的相 關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種從Kratom中提取生物堿的方法。該方法采 用乙醇進(jìn)行提取，方法簡(jiǎn)單，易控，所得提取物中生物堿的總含量可達(dá)70%以上。本發(fā)明所述的從Kratom中提取生物堿的方法，包括以下步驟1)取Kratom樹(shù)葉，粉碎，用體積濃度為90 95 %的乙醇常溫提取，合并提取液， 濃縮，得濃縮液；2)向濃縮液中加入乙醇，使其中的乙醇濃度為90% (質(zhì)量)，放置1 3小時(shí)，離 心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用乙酸乙酯萃取1 3次，再用氯仿萃取1 2次，所得氯仿 萃取液濃縮，除去氯仿，冷凍干燥，即得到Kratom生物堿提取物。本申請(qǐng)中提取得到的產(chǎn)品(即生物堿提取物)中，包括植物Kratom中所含有的各 種生物堿。上述方法步驟1)中，提取的次數(shù)為1 3次，料液比為1 7 10(W/V)，每次提 取20 M小時(shí)。其中所述提取液濃縮至原料重量的0. 5 0. 8倍。步驟3)中，乙酸乙酯的用量為原料重量的2 3倍，氯仿的用量為原料重量的3 34倍。如果所得濃縮上清液太粘稠，可先加水進(jìn)行一定稀釋后再用乙酸乙酯萃取，一般將濃 縮上清液用水稀釋至原料重量的0. 5 0. 7倍。得到的乙酸乙酯萃取液經(jīng)濃縮至無(wú)乙酸乙 酯后，再用氯仿萃取。同樣地，如果去除乙酸乙酯的萃取液太粘稠，可先加水進(jìn)行一定稀釋 后再用氯仿萃取，一般將去除乙酸乙酯的萃取液用水稀釋至原料重量的0. 3 0. 5倍。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種從Kratom中提取生物堿的方法。該方法利用 Kratom中生物堿的醇溶性質(zhì)，采用90 95 %乙醇進(jìn)行提取，可使其中的生物堿盡可能的 溶出，提取液醇沉后再先后用乙酸乙酯和氯仿萃取，方法簡(jiǎn)單，易控，得到的提取物中生物 堿的總含量可達(dá)70% (HPLC測(cè)定)以上，收率為0. 6 0. 8% (即100克原料可提取得到 0. 6 0. 8克的生物堿)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例11)取Kratom樹(shù)葉，粉碎至10 20目，用相當(dāng)于原料重量7倍(W/V) ,90% (ν/ν) 的乙醇常溫提取20小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)儆孟喈?dāng)于原料重量7倍(W/V)、95% (ν/ν)的乙醇常 溫提取M小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，濃縮至原料重量的0. 5倍，所得濃縮液備用；2)向濃縮液中加入無(wú)水乙醇，使其中的乙醇濃度為90% (質(zhì)量)，放置1小時(shí)，離 心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用水稀釋至原料重量的0. 6倍，然后用乙酸乙酯萃取2次 (乙酸乙酯的用量為原料重量的2倍)，合并萃取液，濃縮，直至萃取液中無(wú)乙酸乙酯，所得 去除乙酸乙酯的萃取液用水稀釋至原料重量的0. 3倍，再用氯仿萃取1次(氯仿的用量為 原料重量的3倍)，所得氯仿萃取液濃縮，用水除去氯仿，冷凍干燥，即得Kratom生物堿提取 物。上述所得提取物中生物堿的總含量為75%，收率為0. 65%。實(shí)施例21)取Kratom樹(shù)葉，粉碎至10 20目，用相當(dāng)于原料重量9倍(W/V) ,95% (ν/ν) 的乙醇常溫提取M小時(shí)，過(guò)濾，提取液，濃縮至原料重量的0. 7倍，所得濃縮液備用；2)向濃縮液中加入95% (ν/ν)的乙醇，使其中的乙醇濃度為90% (質(zhì)量)，放置 3小時(shí)，離心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液用乙酸乙酯萃取3次(乙酸乙酯的用量為原料重量的3倍)，合 并萃取液，濃縮，直至萃取液中無(wú)乙酸乙酯，所得去除乙酸乙酯的萃取液再用氯仿萃取2次 (氯仿的用量為原料重量的3倍)，合并萃取液，濃縮，用水除去氯仿，冷凍干燥，即得Kratom 生物堿提取物。上述所得提取物中生物堿的總含量為73%，收率為0. 62%。實(shí)施例31)取Kratom樹(shù)葉，粉碎至20 30目，用相當(dāng)于原料重量8倍(W/V) ,95% (ν/ν) 的乙醇常溫提取M小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)儆孟喈?dāng)于原料重量7倍(w/V)、95% (ν/ν)的乙醇常 溫提取M小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)^續(xù)用相當(dāng)于原料重量7倍(W/V)、95% (ν/ν)的乙醇常溫提取 24小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，濃縮至原料重量的0. 8倍，所得濃縮液備用；2)向濃縮液中加入95% (ν/ν)的乙醇，使其中的乙醇濃度為90% (質(zhì)量)，放置2小時(shí)，離心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用水稀釋至原料重量的0. 5倍，然后用乙酸乙酯萃取3次 (乙酸乙酯的用量為原料重量的2.5倍)，合并萃取液，濃縮，直至萃取液中無(wú)乙酸乙酯，所 得去除乙酸乙酯的萃取液用水稀釋至原料重量的0. 5倍，再用氯仿萃取2次(氯仿的用量 為原料重量的3倍)，合并氯仿萃取液，濃縮，用水除去氯仿，冷凍干燥，即得Kratom生物堿 提取物。上述所得提取物中生物堿的總含量為80%，收率為0. 75%。實(shí)施例41)取Kratom樹(shù)葉，粉碎至30 40目，用相當(dāng)于原料重量10倍(W/V)、90% (ν/ν) 的乙醇常溫提取20小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)儆孟喈?dāng)于原料重量7倍(W/V)、92% (ν/ν)的乙醇常 溫提取23小時(shí)，過(guò)濾，合并提取液，濃縮至原料重量的0. 6倍，所得濃縮液備用；2)向濃縮液中加入無(wú)水乙醇，使其中的乙醇濃度為90% (質(zhì)量)，放置1.5小時(shí)， 離心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用水稀釋至原料重量的0. 7倍，然后用乙酸乙酯萃取1次 (乙酸乙酯的用量為原料重量的3倍)，萃取液濃縮，直至萃取液中無(wú)乙酸乙酯，所得去除乙 酸乙酯的萃取液用水稀釋至原料重量的0. 4倍，再用氯仿萃取1次(氯仿的用量為原料重 量的3. 5倍)，所得氯仿萃取液濃縮，用水除去氯仿，冷凍干燥，即得Kratom生物堿提取物。上述所得提取物中生物堿的總含量為78%，收率為0. 72%。
權(quán)利要求
1.從Kratom中提取生物堿的方法，其特征在于包括以下步驟1)取Kratom樹(shù)葉，粉碎，用體積濃度為90 95%的乙醇常溫提取，合并提取液，濃縮， 得濃縮液；2)向濃縮液中加入乙醇，使其中的乙醇濃度為90%(質(zhì)量)，放置1 3小時(shí)，離心，收 集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用乙酸乙酯萃取1 3次，再用氯仿萃取1 2次，所得氯仿萃取 液濃縮，除去氯仿，冷凍干燥，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從Kratom中提取生物堿的方法，其特征在于步驟1)中，提 取的次數(shù)為1 3次，料液比為1 7 10 (W/V)，每次提取20 M小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從Kratom中提取生物堿的方法，其特征在于步驟1)中，提 取液濃縮至原料重量的0. 5 0. 8倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的從Kratom中提取生物堿的方法，其特征在于步驟3) 中，乙酸乙酯的用量為原料重量的2 4倍，氯仿的用量為原料重量的3 4倍。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種從Kratom中提取生物堿的方法，包括以下步驟1)取Kratom樹(shù)葉，粉碎，用體積濃度為90～95％的乙醇常溫提取，合并提取液，濃縮，得濃縮液；2)向濃縮液中加入乙醇，使其中的乙醇濃度為90％(質(zhì)量)，放置1～3小時(shí)，離心，收集上清液，濃縮至無(wú)醇味，得濃縮上清液；3)所得濃縮上清液先用乙酸乙酯萃取1～3次，再用氯仿萃取1～2次，所得氯仿萃取液濃縮，除去氯仿，冷凍干燥，即得到Kratom生物堿提取物。該方法簡(jiǎn)單，易控，得到的提取物中生物堿的總含量可達(dá)70％(HPLC測(cè)定)以上，收率為0.6～0.8％。
文檔編號(hào)A61P25/20GK102048857SQ20091011451
公開(kāi)日2011年5月11日 申請(qǐng)日期2009年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月1日
發(fā)明者孫步祥, 宋云飛, 梁遠(yuǎn)盛, 湯凌志, 趙軍 申請(qǐng)人:桂林萊茵生物科技股份有限公司