一種利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及制藥工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種利用離子液體高效提取雷公藤生物 堿的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 雷公藤（TripterygiumwilfordiiHook.f.)為衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，以根、葉、花 以及果入藥，已廣泛應(yīng)用于治療各種自身免疫性疾病，如腎炎、紅斑狼瘡、接觸性皮炎和類 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病。雷公藤生物堿是雷公藤植株內(nèi)產(chǎn)生的一類具有較高生 理活性的天然化學(xué)物，因其具有特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)及作用機制，特別是在臨床上對自身免疫 性疾?。ㄈ缂t斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎和過敏性紫癜等）有獨特療效，藥理 研宄證明其具有抗炎、免疫抑制、抗腫瘤、抑制雄性生育、抗艾滋病、殺蟲等作用。近幾年， 人們對雷公藤生物堿的化學(xué)成分和藥理作用進行了大量的研宄，已發(fā)現(xiàn)了 30多種結(jié)構(gòu)明 確的雷公藤生物堿，如雷公藤春堿（wilfortrine)、雷公藤次堿（wilforine)、雷公藤定堿 (wilfordine)和雷公藤堿乙（wilforgine)等倍半貓大環(huán)內(nèi)醋類生物堿。其中有些具有明 顯的免疫抑制、抗腫瘤作用和較小的毒性，充分顯示了雷公藤生物堿良好的應(yīng)用前景。雷公 藤春堿、雷公藤次堿、雷公藤定堿以及雷公藤堿乙的結(jié)構(gòu)式如下：
【主權(quán)項】
1. 一種利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 超聲強化提?。豪坠俑⑶o、葉等干燥粉碎，過40~80目篩，按固液比1:5~100 加入體積比為1:0. 1~2. 0:0. 5~2. 0的乙醇、水和咪唑類離子液體I混合液，于超聲功率 密度10~200W/cm2及超聲頻率20~IOOkHz下，20~95°C超聲提取5~90min，固液分離 得含雷公藤生物堿的提取液； 2) 有機溶劑萃取：將有機溶劑加入到所述步驟1)得到的提取液中，按提取液與有機溶 劑的體積比1~10:1萃取1~5次，分離有機相得雷公藤生物堿萃取相，萃取余液循環(huán)使 用，該萃取余液即上述咪唑類離子液體I; 3) 重結(jié)晶：將所述步驟2)中得到的萃取相經(jīng)鹽酸化處理以去除有機相，而水相用氫氧 化鈉溶液堿化后過濾，將過濾得到的沉淀物再溶于甲醇中進行重結(jié)晶，得到雷公藤總生物 喊粗品； 4)HSCCC分離純化：選擇HSCCC溶劑系統(tǒng)，按體積（mL)/重量（g)比100~600:1將 HSCCC溶劑系統(tǒng)以及上述雷公藤總生物堿粗品加入到分液漏斗中，震蕩、靜置分層，平衡后， 將上、下相分開，以溶劑系統(tǒng)的上相為固定相，溶劑系統(tǒng)的下相為流動相，調(diào)整轉(zhuǎn)速，以一定 流速泵入流動相，根據(jù)檢測器的譜圖分步收集目標物，分別獲得各雷公藤生物堿溶液； 5) 真空冷凍干燥：將上述各雷公藤生物堿溶液，在適當溫度、干燥壓力下真空冷凍干 燥，回收有機萃取劑，分別得到純度均大于95%的雷公藤春堿、雷公藤次堿、雷公藤定堿和 雷公藤喊乙。
2. 如權(quán)利要求1所述的利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于： 所述咪唑類離子液體I為1-乙基-3-甲基咪唑氯鹽、1-乙基-3-甲基咪唑溴鹽、1-丁 基-3-甲基咪唑溴鹽、1-辛基-3-甲基咪唑氯鹽、1-烯丙基-3-甲基咪唑氯鹽中的至少一 種。
3. 如權(quán)利要求1所述的利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于：所 述步驟1)中乙醇、水和咪唑類離子液體I混合液的體積比為3:2:5。
4. 如權(quán)利要求1所述的利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于：所 述有機溶劑為丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷和四氯化碳中的至少一種。
5. 如權(quán)利要求1所述的利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于：所 述HSCCC溶劑系統(tǒng)為體積比為6:4:5:8:0. 05正已烷-醋酸乙酯-乙醇-水-咪唑類離子液 體II配制的HSCCC溶劑系統(tǒng)、體積比為2:4:2:5:0. 05甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水-咪 唑類離子液體II配制的HSCCC溶劑系統(tǒng)或者體積比為5:4:3:0. 05氯仿-乙醇-水-咪唑 類離子液體II配制的HSCCC溶劑系統(tǒng)中的任意一種。
6. 如權(quán)利要求5所述的利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，其特征在于：所 述咪唑類離子液體II為1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽、1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸 鹽、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽、1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽中的至少一種。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種利用離子液體高效提取雷公藤生物堿的方法，該方法包括以下步驟：1)超聲強化提?。禾崛∫簽轶w積比為1:0.1～2.0:0.5～2.0的乙醇、水和咪唑類離子液體Ⅰ混合液，超聲處理功率密度為10～200W/cm2，頻率為20～100kHz；2)有機溶劑萃取：采用有機溶劑萃取上述雷公藤生物堿提取液；3)重結(jié)晶：上述萃取相去除有機相后經(jīng)堿化、過濾，重結(jié)晶得雷公藤總生物堿粗品；4)HSCCC分離純化：選擇HSCCC溶劑系統(tǒng)，以離子液體Ⅱ為流動相添加劑，經(jīng)HSCCC分離純化得各雷公藤生物堿溶液；5)真空冷凍干燥。該方法大大減少了有機溶劑的使用，顯著降低了提取過程中的污染和危害，大大改善了提取效果和提取效率，并且離子液體能大大縮短HSCCC的分離時間，得到的四種雷公藤生物堿的純度均大于95％。
【IPC分類】C07D491-18
【公開號】CN104817565
【申請?zhí)枴緾N201510116285
【發(fā)明人】金米聰, 陳曉紅, 蔡美強
【申請人】寧波市疾病預(yù)防控制中心
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年3月17日