專利名稱：：過氧化物酶體增殖物激活受體(ppar)的配體劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及對預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病有效的過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的配體劑。本發(fā)明還進(jìn)一步涉及用于預(yù)防及/或治療上述疾病的醫(yī)藥組合物及/或飲食品。
背景技術(shù)：
：曾·—舌(Peroxisomeproliferator-activatedreceptorPPAR)屬于維持脂質(zhì)及糖代謝的擔(dān)負(fù)基因組表達(dá)調(diào)控的核受體家族的控制配體依賴性轉(zhuǎn)錄的因子，已知存在PPARα、PPARγ、PPARδ(PPARβ)的3種亞型。已確認(rèn)PPARa主要在肝臟、心肌等中表達(dá)并調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，特別是在肝臟中高表達(dá)。作為PPARa的配體，已知有棕櫚酸、油酸、亞油酸、花生四烯酸等的脂肪酸類，苯扎貝特、氯貝特等的貝特類抗高脂血癥藥等的合成化合物，還已知通過激活肝臟的PPARa、促進(jìn)脂質(zhì)代謝來體現(xiàn)出血液中的脂質(zhì)降低作用(非專利文獻(xiàn)1，2)。PPARY主要在脂肪組織中表達(dá)，參與小型脂肪細(xì)胞的分化，且具有誘導(dǎo)引起胰島素抵抗的TNFα及游離脂肪酸的產(chǎn)生、分泌亢進(jìn)的肥大脂肪細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，從而改善胰島素抵抗、降低血糖值的作用等。作為PPARγ的配體，已知有α-亞麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等的不飽和脂肪酸，曲格列酮、匹格列酮、羅格列酮等的噻唑烷二酮類糖尿病治療藥等的合成化合物，通過抑制肥大脂肪細(xì)胞的過量形成，使胰島素敏感性的小型脂肪細(xì)胞增加，從而改善胰島素抵抗、降低血糖值(非專利文獻(xiàn)1，2)。PPARδ因在組織內(nèi)普遍表達(dá)，所以難于進(jìn)行功能預(yù)測，其生理作用不明了，但在最近，證實(shí)了其在骨格肌細(xì)胞中高表達(dá)，進(jìn)而在骨格肌細(xì)胞、脂肪組織內(nèi)參與脂肪酸代謝相關(guān)的基因表達(dá)，具有促進(jìn)脂肪酸代謝的功能。另外，可知PPARδ配體除了抑制肥胖小鼠模型的高脂餐負(fù)荷所引起的體重增加以外，還顯示出改善胰島素抵抗的效果。而且，還證實(shí)了使骨格肌中PPARS過表達(dá)的重組小鼠不易產(chǎn)生高脂餐負(fù)荷所引起的肥胖和胰島素抵抗，還可使脂肪細(xì)胞小型化(非專利文獻(xiàn)1)。作為PPARδ的配體，已報(bào)道有二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸等的多不飽和脂肪酸類，前列腺素Al、前列腺素D2等的類花生酸類，半合成前列腺素的前列腺環(huán)素等(非專利文獻(xiàn)2)。其他，作為PPAR配體，已報(bào)道有沒食子酸酯、沒食子單寧類、槲皮酮類、黃酮、異黃酮、兒茶素、表兒茶素等的多酚類(專利文獻(xiàn)1)。專利文獻(xiàn)1日本特開2002-80362號公報(bào)專利文獻(xiàn)2日本特開2003-95968號公報(bào)專利文獻(xiàn)3日本特開2006-42816號公報(bào)專利文獻(xiàn)4日本特開2003-26694號公報(bào)專利文獻(xiàn)5日本特開2005-8572號公報(bào)專利文獻(xiàn)6日本特開2006-16330號公報(bào)專利文獻(xiàn)7日本特開2005-126405號公報(bào)專利文獻(xiàn)8日本特開2006-20606號公報(bào)專利文獻(xiàn)9日本特開2006-230225號公報(bào)專利文獻(xiàn)10日本特開2006-22095號公報(bào)專利文獻(xiàn)11日本特開2006-520804號公報(bào)專利文獻(xiàn)12W097/28149非專利文獻(xiàn)1日本臨床，2005年，63卷557583項(xiàng)非專利文獻(xiàn)2JournalofMedicinalChemistry，2000年，43卷，527550頁非專利文獻(xiàn)3JournalofPeriodontology,2006年，77卷，271279頁非專利文獻(xiàn)4Phytother.Res.，2007年，21卷，391394頁非專利文獻(xiàn)5JournalofAgriculturalandFoodChemistry,54,335-341(2006)非專利文獻(xiàn)6AnnalsofMedicine,2005年，37卷，270275頁非專利文獻(xiàn)7Exp.Biol.Med.，2005年，230卷，225234頁
發(fā)明內(nèi)容如上所述，PPAR配體(本說明書中，也記為“PPAR的配體劑”)通過使脂質(zhì)代謝、糖代謝亢進(jìn)，可期待預(yù)防及/或改善肥胖及肥胖引起的胰島素抵抗、更有高脂血癥、高血壓、糖尿病改善等。但是，對于已有的PPAR配體，除了因擔(dān)心醫(yī)藥品的長期投給所引起的副作用等以外，來自食品的多酚類等又不能得到充分的PPAR配體作用(本說明書中，也記為“配體活性”)，作為PPAR配體劑的功效也不一定令人滿意。本發(fā)明的目的在于提供安全、具有優(yōu)異的PPAR配體作用的PPAR配體劑。本發(fā)明者為得到即使長期攝取也安全而副作用少的PPAR配體，不斷探索各種植物提取物中的PPAR配體的結(jié)果，成功地得到了具有優(yōu)異的PPAR配體作用的特定的食用植物的提取物。而且還發(fā)現(xiàn)，其配體作用的特性因溶劑種類等的不同而不同，從而完成了本發(fā)明。本發(fā)明中，作為優(yōu)選方式包含以下的方式。[方式1]一種過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的配體劑，其特征在于，含有作為有效成分的選自以下的植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物。[方式2]根據(jù)方式1所述的配體劑，其中，PPAR為PPARδ。[方式3]根據(jù)方式1或2所述的配體劑，其中，植物選自西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上。[方式4]根據(jù)方式13中任一項(xiàng)所述的配體劑，其中，提取物為醇或醇水溶液提取物。[方式5]根據(jù)方式4所述的配體劑，其中，醇為乙醇。[方式6]根據(jù)方式1或2所述的配體劑，其中，植物選自亞麻、阿魏蘑、無梗五加、大麻中的1種或2種以上。[方式7]根據(jù)方式1、2或6所述的配體劑，其中，提取物為熱水提取物。[方式8]—種醫(yī)藥組合物，其特征在于，其用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病，含有選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物和藥學(xué)上允許的添加劑。[方式9]根據(jù)方式8所述的醫(yī)藥組合物，其中，與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病選自肥胖、高脂血癥、高血壓、糖尿病中的1種或2種以上的疾病。[方式10]一種飲食品，其特征在于，含有選自以下的植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物和作為飲食物允許的添加劑。[方式11]根據(jù)方式10所述的飲食品，其用于預(yù)防及/或改善與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病。[方式12]一種抗肥胖劑，其特征在于，含有作為有效成分的選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物。[方式13]一種用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病的方法，其特征在于，所述方法包括向需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物的醫(yī)藥組合物。[方式14]一種用于制造醫(yī)藥組合物的應(yīng)用，其為用于制造用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病的醫(yī)藥組合物的應(yīng)用，其特征在于，所述醫(yī)藥組合物包含選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物。[方式15]一種用于預(yù)防及/或治療肥胖的方法，其特征在于，所述方法包括向需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物的抗肥胖劑。[方式16]一種用于制造抗肥胖劑的應(yīng)用，其為用于制造用于預(yù)防及/或治療肥胖的抗肥胖劑的應(yīng)用，其特征在于，所述抗肥胖劑含有選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物。根據(jù)本發(fā)明，提供優(yōu)異的PPAR配體劑、及以其為有效成分含有的組合物(醫(yī)藥組合物、飲食品)。本發(fā)明的作為配體劑的有效成分的植物提取物因可作為來自天然的食物進(jìn)行攝取，安全性高，所以可長期攝取。因此，可作為經(jīng)口用組合物日常攝取，也可作為與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病、例如肥胖、高脂血癥、高血壓、糖尿病等的預(yù)防用組合物來利用。此外，也可作為在長期進(jìn)行治療及改善上必需的上述疾病的治療用及改善用組合物來利用。圖1表示投給西洋接骨木提取物時(shí)的體重變化。白色菱形為不投給提取物的對照，方形為投給lOOmg/kg/day、三角形為投給300mg/kg/day的結(jié)果。圖2表示投給西洋接骨木時(shí)的體脂肪量。白色柱為不投給提取物的對照，橫紋柱為投給lOOmg/kg/day、深黑色柱為投給300mg/kg/day投給的結(jié)果。圖3表示投給西洋接骨木時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度。白色柱為不投給提取物的對照，橫紋柱為投給lOOmg/kg/day、深黑色柱為投給300mg/kg/day的結(jié)果。**P<0.01對眧圖4表示投給西洋接骨木時(shí)的血液中中性脂肪濃度。白色柱為不投給提取物的對照，橫紋柱為投給lOOmg/kg/day、深黑色柱為投給300mg/kg/day的結(jié)果。圖5表示投給茴芹提取物時(shí)的體重變化。白色菱形為不投給提取物的對照，黑色方形為投給lOOOmg/kg/day的結(jié)果。圖6表示投給茴芹時(shí)的體脂肪量。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給1000mg/kg/day的結(jié)果。圖7表示投給茴芹時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給1000mg/kg/day的結(jié)果。<0.01圖8表示投給茴芹時(shí)的血液中中性脂肪濃度。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給lOOOmg/kg/day的結(jié)果。圖9表示投給單子山楂提取物時(shí)的體重變化。圓形為不投給提取物的對照，方形為投給lOOmg/kg/day、菱形為投給300mg/kg/day、三角形為投給lOOOmg/kg/day的結(jié)果。圖10表示投給單子山楂時(shí)的體脂肪量。白色柱為不投給提取物的對照，淺黑色柱為投給lOOmg/kg/day、橫紋柱為投給300mg/kg/day投給、黑色柱為投給lOOOmg/kg/day的結(jié)果。圖11表示投給單子山楂時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度。白色柱為不投給提取物的對照，淺黑色柱為投給lOOmg/kg/day、橫紋柱為投給300mg/kg/day投給、黑色柱為投給1000mg/kg/day的結(jié)果。**P<0.01對照圖12表示投給亮葉楊桐提取物時(shí)的體重變化。白色菱形為不投給提取物的對照，黑色方形為投給lOOmg/kg/day的結(jié)果。圖13表示投給亮葉楊桐時(shí)的體脂肪量。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給lOOmg/kg/day的結(jié)果。圖14表示投給亮葉楊桐時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給100mg/kg/day的結(jié)果。<0.01圖15表示投給亮葉楊桐時(shí)的血液中中性脂肪濃度。白色柱為不投給提取物的對照，黑色柱為投給lOOmg/kg/day的結(jié)果。具體實(shí)施例方式I.PPAR配體劑本發(fā)明涉及含有作為有效成分的特定的植物提取物的過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的配體劑及/或抗肥胖劑。(植物提取物)作為本發(fā)明的配體劑的原料的植物為選自以下23種植物中的1種或2種以上的食用植物。(1)西洋接骨木(Sambucusnigra)；(2)亮葉楊桐(Adinandranitida)；(3)(Passifloraincarnata)；(4)賓海前古月(Peucedanumjaponicum)；(5)茴序(Pimpinellaanisum)；(6)穗花牡荊(Vitexagnus-castus)；(7)印度人參(Withaniasomnifera)；(8)帚石楠(Callunavulgaris)；(9)IfdLl^S(Crataegusmonogyna)；(10)亞麻(Linumusitatissimum)；(11)阿魏蘑(Pleurotusferulae)；(12)刺槐(Robiniapseudoacacia)；(13)無梗五力口(Acanthopanaxsessiliflorus)；(14)大麻(Cannabissativa)；(15)豆蔻(Elettariacardamomum)；(16)歐白]E(Angelicaarchangelica)；(17)番石榴(Psidiumguajava)；(18)黑刺李(Prumusspinosa)；(19)鋸葉棕(Serenoarepens)；(20)木半夏(Eleagnusmultiflora)；(21)川彎(Ligusticumchuaxiong)；(22)刺五力口(Acanthopanaxsenticosus)及(23)巴西莓(Euterpeoleracea、或Ε·edulis)。以下，對各植物進(jìn)行說明。(1)西洋接骨木忍冬科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用花。已知西洋接骨木的花的別名也稱為接骨木花，是在歐洲自古以來一直使用的芳香藥草，對感冒、咽喉炎、關(guān)節(jié)炎等的改善有效。且有報(bào)道指出其對牙周炎的初期炎癥具有抑制效果(非專利文獻(xiàn)3)。但是，對西洋接骨木的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(2)亮葉楊桐(石崖茶)山茶科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用葉。亮葉楊桐是中國南部、廣西壯族自治區(qū)特產(chǎn)的茶，公認(rèn)其有消炎、解毒作用，對咽喉炎、口腔炎有療效，并具有降壓效果、防癌效果。但是，對亮葉楊桐的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(3)西番蓮西番蓮科棺物,在本發(fā)明中優(yōu)詵使用地上部。西番蓮的地上部被稱為時(shí)鐘花，在歐洲是被用于煩躁不安、失眠的芳香藥草。已知有包含1種以上包含西番蓮(時(shí)鐘花)在內(nèi)的多種多酚材料和大蒜材料的循環(huán)器官疾病預(yù)防組合物(專利文獻(xiàn)2)。且公開了以減輕因減肥而造成的精神壓力的作用為目的的含有食物纖維的減肥食品，其中記載了配合有時(shí)鐘花的減肥食品(專利文獻(xiàn)3)。但是所有的文獻(xiàn)中均未提及西番蓮的獨(dú)立的生理作用，也未證實(shí)和公開西番蓮的溶劑提取物為PPAR配體劑。(4)濱海前胡日本名稱為牡丹防風(fēng)，余形科棺物，在本發(fā)明中優(yōu)詵使用地上部。專利文獻(xiàn)4中記載了濱海前胡的干燥粉末或提取物具有二糖類分解酶抑制活性，對抗糖尿病、抗肥胖有效，但對濱海前胡的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(5)茴芹傘形科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用種子。茴芹的種子作為芳香性的芳香藥草被用于飲料、烤制點(diǎn)心、芳香藥草茶等，作為民間療法藥被用于利尿、消化不良、支氣管炎等。但是，對茴芹的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(6)穗花牡荊馬鞭草科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用果實(shí)。在歐洲，穗花牡荊的果實(shí)作為香辛料、且作為民間療法藥被用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)前緊張癥。此外，還有關(guān)于乙醇提取物中含有的類黃酮類的抗氧化活性的報(bào)道(非專利文獻(xiàn)4)。但是，對穗花牡荊的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(7)印度人參茄科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用根。印度人參的葉和根在印度的傳統(tǒng)醫(yī)療阿育吠陀中自古以來即被用作長壽藥薩拉揚(yáng)(Sarayan)。已知有滋養(yǎng)強(qiáng)壯、強(qiáng)精、抗焦慮、抗抑郁、緩和風(fēng)濕病等的關(guān)節(jié)炎等的功效。但是，對印度人參的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(8)帚石楠杜鵑花科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用花。在歐洲，帚石楠的花被作為對預(yù)防尿道感染、利尿、關(guān)節(jié)炎、失眠、呼吸器官疾病等有效的芳香藥草使用，葉·莖也被作為具有同樣效果的保健茶使用。專利文獻(xiàn)5中公開了因脂肪酶抑制作用而作為脂肪吸收抑制劑的抗肥胖、改善粉刺的效果，但這是與作為PPAR配體劑的改善脂質(zhì)代謝的效果不同的作用，且對帚石楠的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(9)單子山楂薔薇科棺物，在本發(fā)明中優(yōu)詵使用果實(shí)。在歐洲，單子山楂的花、葉、果實(shí)被作為治療心臟病的芳香藥草使用，特別是果實(shí)被作為對動(dòng)脈硬化、腎臟病有效的芳香藥草使用。但是，對單子山楂的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(10)Λ:亞麻科植物，優(yōu)選使用種子。已知亞麻種子富含ω3脂肪酸，具有降低血液中膽固醇的作用，此外，從免疫學(xué)上已知在攝取亞麻種子的芬蘭，前列腺癌、乳癌等的激素敏感性癌的患病率低。如上所述，雖已知脂肪酸為PPAR配體劑，但亞麻的溶劑提取物為PPAR配體劑并未被具體公開，也未被證實(shí)。tons]側(cè)耳科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用子實(shí)體。已知有提高免疫的抗腫瘤效果及增強(qiáng)胰臟功能而對糖尿病有效。但是，對阿魏蘑的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(12)IM也稱為洋槐，豆科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用花。花作為中藥被用于下血、喀血。雖然專利文獻(xiàn)6中公開了作為與以原花色素為有效成分的脂質(zhì)燃燒促進(jìn)劑有關(guān)的材料的洋槐的果實(shí)，但優(yōu)選使用的部位不同，且也未證實(shí)和公開其作為PPAR配體劑。(13)無梗五加五加科棺物,在本發(fā)明中優(yōu)詵使用葉。無梗五加的根皮作為中藥的五加皮被用于抗炎癥、鎮(zhèn)痛、強(qiáng)壯，葉被作為食用、保健茶使用。非專利文獻(xiàn)5中報(bào)道了無梗五加的葉的皂苷通過抑制胰脂肪酶而具有抗肥胖效果，但這是與作為PPAR配體劑的改善脂質(zhì)代謝的效果不同的作用，且對無梗五加的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(14)^1:大麻科植物，優(yōu)選使用種子。有報(bào)道指出大麻的葉和花冠中含有的向神經(jīng)性物質(zhì)大麻素作用于神經(jīng)系統(tǒng)，與食欲、能量代謝有關(guān)(非專利文獻(xiàn)6及7)，但卻不知道大麻的果實(shí)(種子)使脂質(zhì)代謝亢進(jìn)，且對大麻的溶劑提取物為PPAR配體劑全然不知。(15)豆蔻姜科棺物，在本發(fā)明中優(yōu)詵使用種子。豆蔻的種子被用作香辛料。專利文獻(xiàn)7中公開了以配合水溶性半乳甘露聚糖及食品乳化劑、酵母粉末、維生素B類為特征的肥胖防止劑，且有在其中配合豆蔻精油的記載，該專利中記載了其主要作用為通過由水溶性半乳甘露聚糖引起胃的膨滿感從而控制飲食和降低、延遲葡萄糖、脂肪的吸收以防止肥胖，通過精油的配合來促進(jìn)體內(nèi)代謝，但未得到證明，也沒有對豆蔻的溶劑提取物為PPAR配體劑的作用的證實(shí)和公開。(16)歐白芷傘形科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用根。歐白芷的根在歐洲是被用于食欲不振、消化不良、膨滿感等癥狀的芳香藥草。已知?dú)W白芷對高血壓、貧血、糖尿、神經(jīng)痛、利尿、疲勞恢復(fù)、預(yù)防血栓形成等有功效，但對其為PPAR配體劑還全然不知。(17)番石榴桃金娘科植物，優(yōu)選使用未成熟果實(shí)。專利文獻(xiàn)8及9中公開了番石榴茶的防止及改善肥胖的作用。但是，其作用在專利文獻(xiàn)8中為通過碳水化合物、脂肪的消化酶抑制來控制脂肪、淀粉、糖分的吸收，在專利文獻(xiàn)9中為通過糖質(zhì)消化酶的抑制效果來抑制糖的吸收，但對番石榴的未成熟果實(shí)使脂質(zhì)代謝亢進(jìn)還不得而知，且對番石榴的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(18)黑刺李(黑刺李)在本發(fā)明中優(yōu)選使用果實(shí)。黑刺李的果實(shí)在歐洲被作為芳香藥草茶且被作為口腔、咽粘膜炎癥的民間療法藥使用。但是，對黑刺李的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(19)鋸葉棕棕櫚科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用果實(shí)。已知鋸葉棕的果實(shí)有抗雄激素作用，對前列腺障礙有效。但是，對鋸葉棕的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(20)木半夏胡頹子科棺物,在本發(fā)明中優(yōu)詵使用果實(shí)。木半夏的果實(shí)在中藥中稱為木半夏，被用于跌打損傷、風(fēng)濕病所引起的關(guān)節(jié)痛的治療。但是，對木半夏的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(21)川芎余形科棺物，在本發(fā)明中優(yōu)詵使用地上部。該植物的根莖在中藥中為川芎，被用作強(qiáng)壯、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛藥。但是，對川芎的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。(22)刺五加五加科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用根皮。根皮作為五加皮被用于抗炎癥、鎮(zhèn)痛、強(qiáng)壯，葉具有抗精神壓力的作用，被用作保健茶。專利文獻(xiàn)10中公開了因刺五加葉的皂苷的脂肪酶抑制活性而具有抑制脂質(zhì)吸收、抗肥胖、改善高脂血癥的效果等，但對刺五加的根皮使脂質(zhì)代謝亢進(jìn)還不得而知，對刺五加的溶劑提取物為PPAR配體劑也還全然不知。(23)^MM:日本名為阿薩伊莓，棕櫚科植物，在本發(fā)明中優(yōu)選使用果實(shí)。果實(shí)中富含具有抗氧化作用的多酚、氨基酸、必須脂肪酸，雖有關(guān)于以具有抗氧化作用的阿沙依椰子(Jucara)及巴西莓果實(shí)為基礎(chǔ)的健康補(bǔ)助食品的見解(專利文獻(xiàn)11)，但卻沒有關(guān)于預(yù)防、改善脂質(zhì)代謝和肥胖的記載。此外，對巴西莓的溶劑提取物為PPAR配體劑還全然不知。本發(fā)明中使用的植物的植物提取物中的各種植物體的使用部位優(yōu)選上述部位，但不限于此，花蕾、花、果實(shí)、果皮、種子、葉、枝、干、樹皮、根、根皮、地上部、全草等的所有的部位均可使用。此外，不僅為上述的優(yōu)選部位，也可并用選自上述的所有部位中的1種或2種以上。作為原料的植物體可使用新鮮或干燥后的產(chǎn)物，可根據(jù)需要進(jìn)行粉碎、細(xì)切、粉末化等的加工后使用。此外，也可直接使用可獲得的生藥。植物提取物除了通過使用溶劑直接從上述各種提取部位中提取而得到以外，進(jìn)行水蒸氣蒸餾、使用超臨界萃取技術(shù)的二氧化碳提取、進(jìn)而進(jìn)行壓榨處理后得到的壓榨液(榨汁)及/或在殘?jiān)屑尤肴軇┻M(jìn)行提取而得到的產(chǎn)物、所述的壓榨液本身均包含于本發(fā)明的植物提取物的定義范圍內(nèi)。此外，本發(fā)明者由上述23種植物的醇水溶液得到提取物，在其中加入乙酸乙酯、正丁醇或水進(jìn)行液相分配而得到乙酸乙酯萃取物、丁醇萃取物及水萃取物中，證實(shí)了一個(gè)或一個(gè)以上的萃取物中具有優(yōu)異的PPAR配體活性。本發(fā)明的植物提取物中也包含此種溶劑提取物的萃取物。本發(fā)明的植物提取物也可根據(jù)需要用柱色譜法等分離精制其活性成分。(提取方法)本發(fā)明中，可使用上述的植物提取物或其精制物。這些可單獨(dú)使用，也可將二種以上混合使用。作為用于得到植物提取物而使用的提取溶劑無特別限定，可列舉水、碳原子數(shù)為14的低級醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等)、液狀多元醇(例如1，3-丁二醇、丙二醇、丙三醇等)、酮類(例如丙酮、丁酮)、酯類(例如乙酸乙酯、乙酸丁酯等)等。也可將上述單獨(dú)或2種以上混合使用。作為原料植物使用⑴西洋接骨木(特別是花)、⑵亮葉楊桐(特別是葉)、(3)西番蓮(特別是地上部)、(4)濱海前胡(特別是地上部)、(5)茴芹(特別是種子)、(6)穗花牡荊(特別是果實(shí))、(7)印度人參(特別是根)、⑶帚石楠(特別是花)、(9)單子山楂(特別是果實(shí))、(10)亞麻(特別是種子)、(11)阿魏蘑(特別是子實(shí)體)、(12)刺槐(特別是花)、(13)無梗五加(特別是葉)時(shí)，作為溶劑，優(yōu)選使用醇、特別是低級醇或其水溶液。作為溶劑，使用醇或其水溶液時(shí)，醇的濃度可根據(jù)所希望的配體作用適當(dāng)選擇。通常，提取溶劑中醇的濃度為約10100容量％，優(yōu)選為約1070容量％。本發(fā)明的配體劑因適合作為醫(yī)藥組合物或飲食品等的經(jīng)口用組合物使用，所以，從安全性的觀點(diǎn)來看，作為醇優(yōu)選使用乙醇。而且，作為原料植物使用(10)亞麻(特別是種子)、(11)阿魏蘑(特別是子實(shí)體)、(13)無梗五加(特別是葉)時(shí)，除了上述醇或醇水溶液以外，作為溶劑也優(yōu)選使用熱水的方式。此外，作為原料植物使用(14)大麻(特別是種子)時(shí)，作為溶劑也優(yōu)選使用熱水。本說明書中所述的熱水具體為50100°C，更優(yōu)選為5085°C的水。上述的溶劑、即熱水、醇或醇水溶液中，只要在不過大地?fù)p害作為本發(fā)明的特征的PPAR配體作用、提取效率的范圍內(nèi)，也可含有任意其他的成分。作為提取方法，無特別限定，通過使溶劑與上述植物原料接觸來進(jìn)行。具體地說，可在溶劑中浸漬原料靜置保存，攪拌、加熱回流等提取方式可根據(jù)公知方法，根據(jù)所需適當(dāng)設(shè)定。提取溫度無特別限制，可根據(jù)溶劑的溫度適當(dāng)設(shè)定，但從操作上的觀點(diǎn)來看，優(yōu)選為溶劑的沸點(diǎn)以下。此外，也可根據(jù)需要設(shè)定加壓、減壓等的條件。提取時(shí)間可根據(jù)所使用的植物原料的種類、提取溶劑的種類及使用量等適當(dāng)設(shè)定。具體地說，作為溶劑使用醇或醇水溶液時(shí)，其使用量通常相對于1重量份原料為11000倍，優(yōu)選為1100倍，進(jìn)一步優(yōu)選為110倍，提取時(shí)間通常為約10分鐘1個(gè)月左右，優(yōu)選為10分鐘7天左右。此外，作為溶劑使用熱水時(shí)，其使用量通常相對于1重量份原料為11000倍，優(yōu)選為1100倍，進(jìn)一步優(yōu)選為110倍，提取時(shí)間通常為約10分鐘7天左右，優(yōu)選為10分鐘1天左右，進(jìn)一步優(yōu)選為101小時(shí)左右。本發(fā)明的植物提取物在上述的提取操作后，分離提取殘?jiān)瞥商崛∫旱男螒B(tài)。作為此種分離手段可使用公知的方法，例如可例舉過濾、離心分離等。在本發(fā)明中，可直接使用上述提取液，也可根據(jù)需要，作為提取液的濃縮物或干燥物(濃縮干固物)使用，從輸送的方便性等觀點(diǎn)來看，優(yōu)選作為濃縮物或干燥物。濃縮可在常壓或減壓下進(jìn)行，通過濃縮可使?jié)饪s液的容積減少至約1050容量％，優(yōu)選為約1030容量％。干固物優(yōu)選在減壓下使含有PPAR配體活性成分的提取液中的溶劑干燥而獲得。如上所述，本發(fā)明的植物提取物中，也包含使溶劑與上述植物原料接觸而得到的提取物的萃取物(例如乙酸乙酯萃取物、丁醇萃取物、水萃取物)。該萃取物通常是通過將植物原料的醇或醇水溶液的提取物進(jìn)行液相分配而得到。作為液相分配的方法無特別限制，可使用公知的方法。(PPAR配體劑及抗肥胖劑)本發(fā)明的PPAR配體劑及抗肥胖劑如上所述，含有作為有效成分的選自鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物的溶劑提取物。在此，本說明書中的PPAR配體劑是指具有與PPAR配體結(jié)合區(qū)域結(jié)合的能力、即具有PPAR配體作用的物質(zhì)的總稱。配體劑可以是激動(dòng)劑也可以是拮抗劑，優(yōu)選為激動(dòng)劑。本發(fā)明的PPAR配體劑可對與胰島素抵抗、高脂血癥、糖尿病、高血壓及肥胖等的生活習(xí)慣病有關(guān)的各種基因的表達(dá)進(jìn)行正控制或負(fù)控制。所述各種基因例如可例舉?；o酶A氧化酶、中鏈酰基輔酶A脫氫酶、肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶、長鏈?；o酶A合成酶、脂肪酸結(jié)合蛋白、脂蛋白脂肪酶、載脂蛋白、解耦聯(lián)蛋白等，但不限于這些。PPAR配體活性例如可通過將PPAR配體結(jié)合區(qū)與GAL4的融合蛋白的結(jié)合用熒光素酶的表達(dá)來體現(xiàn)的報(bào)告基因檢測(Cell，1995年，83卷，803812頁)、使用包含PPAR配體結(jié)合區(qū)的蛋白的競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)(competitivebindingassay)(Cell，1995年，83卷，813819頁)等測定。這些檢測中，樣品的活性通常與溶劑對照相比，將顯示比溶劑對照活性高的樣品評價(jià)為“具有PPAR配體活性”。在本發(fā)明中，將與溶劑對照相比顯示1.3倍以上活性的樣品評價(jià)為“具有PPAR配體活性”。本發(fā)明的PPAR配體劑只要對于PPARα、γ、δ之中的至少1種以上的PPAR具有配體作用即可。如后述實(shí)施例所示，本發(fā)明的PPAR配體劑特別是作為PPARδ的配體劑而有用。因本發(fā)明中可使用的來自23種植物的提取物均至少對于PPARδ亞型具有配體活性，所以，作為上述PPARS的配體劑有用。如本說明書的[
背景技術(shù)：
]的項(xiàng)目中所記載，PPARδ的生理作用得到證實(shí)是最近的事。關(guān)于PPARδ，可期待可激活PPARδ的激動(dòng)劑作為提高HDL膽固醇作用、由其引起的抑制動(dòng)脈硬化發(fā)展及其治療、脂質(zhì)降低劑、血糖降下劑的應(yīng)用。但是，其具有充分的活性，可被臨床應(yīng)用還不為人所知。因此，本發(fā)明的PPAR的配體劑作為PPARS激動(dòng)劑被認(rèn)為特別是作為血液中脂質(zhì)降低劑、抗肥胖劑而有希望。而且，如后述的實(shí)施例所明確的，對于α亞型及Υ亞型的PPAR，因所來源的植物種類不同，有具有配體活性的情況，也有不具有的情況。具體地說，豆蔻的水萃取物、亞麻的乙酸乙酯萃取物及正丁醇萃取物顯示PPARa活性(實(shí)施例2)。此外，刺五加、木半夏、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、茴芹及帚石楠的乙酸乙酯萃取物、以及亮葉楊桐的正丁醇萃取物顯示PPARγ活性(實(shí)施例4)。根據(jù)本發(fā)明所公開的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)需要，通過選擇所使用的植物材料制備所需的配體劑。優(yōu)選對PPARS和PPARy兩者顯示配體活性。此外，如后述實(shí)施例6所述，將本發(fā)明的抗肥胖劑投給小鼠16天后，可證實(shí)其具有抑制體重增加、抑制體脂肪積累、降低血液中中性脂肪濃度的作用。因此，本發(fā)明的抗肥胖齊IJ可作為體重增加抑制劑、體脂肪積累抑制劑、血液中中性脂肪降低劑等使用。本發(fā)明的抗肥胖劑優(yōu)選含有選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物。具體地說，以未投藥的對照組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的體重為100%時(shí)，西洋接骨木提取物投給組(300mg/kg/day)的體重增加被抑制到約92%左右，投給茴芹提取物組(IOOOmg/kg/day)被抑制到約93%左右，投給單子山楂提取物組(lOOOmg/kg/day)被抑制到約94%左右，投給亮葉楊桐提取物組(lOOmg/kg/day)被抑制到約69%左右。且以未投藥的對照組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的體脂肪量為100%時(shí)，西洋接骨木提取物投給組(300mg/kg/day)的體脂肪積累被抑制到約81%左右，投給茴芹提取物組(lOOOmg/kg/day)被抑制到約88%左右，投給單子山楂提取物組(lOOOmg/kg/day)被抑制到約80%左右，投給亮葉楊桐提取物組(100mg/kg/day)被抑制到約88%左右。而且，以未投藥的對照組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的血液中中性脂肪濃度為100%時(shí)，西洋接骨木提取物投給組(300mg/kg/day)的中性脂肪濃度被降低到約80%左右，投給茴芹提取物組(lOOOmg/kg/day)被降低到約87%，投給亮葉楊桐提取物組(lOOmg/kg/day)被降低到約63%左右。而且，本發(fā)明的抗肥胖劑還可使投給本發(fā)明的植物提取物的機(jī)體的血液中的游離脂肪酸濃度發(fā)生變化。血液中的游離脂肪酸濃度增加是指脂肪細(xì)胞中積累的中性脂肪或血液中的中性脂肪被分解而游離于血液中，從而成為能量源。并非限定，但含有西洋接骨木、茴芹及單子山楂中的提取物的抗肥胖劑可得到血液中的游離脂肪酸濃度增加的效果。血液中的游離脂肪酸濃度減少是指因游離的脂肪酸進(jìn)入肝臟等進(jìn)一步燃燒而產(chǎn)生亢進(jìn)的狀況，從而使血液中的游離脂肪酸濃度減少的狀態(tài)。并非限定，但含有亮葉楊桐中的提取物的抗肥胖劑可得到血液中的游離脂肪酸濃度減少的效果。II.醫(yī)藥用組合物及飲食品在本發(fā)明中，可由來自各種植物的提取物制備PPAR配體劑。本發(fā)明也提供含有該P(yáng)PAR配體劑和藥學(xué)上允許的添加劑及可食用的添加劑的醫(yī)藥組合物、飲食品(也可總稱記為“本發(fā)明的組合物”)。本發(fā)明的組合物根據(jù)PPAR在機(jī)體內(nèi)的分布和生理活性，可用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病。具體地說，本發(fā)明的組合物對肥胖、高脂血癥、高血壓、高血糖、胰島素抵抗、糖尿病的預(yù)防或改善有效。在本發(fā)明中，肥胖的預(yù)防是指防止或延遲包括內(nèi)臟肥胖在內(nèi)、日本肥胖學(xué)會(huì)在肥胖·肥胖癥的指導(dǎo)手冊第2版(2001年7月發(fā)行)中定義的肥胖或肥胖癥的狀態(tài)的形成。且肥胖的改善是指從上述學(xué)會(huì)定義的肥胖癥或肥胖的狀態(tài)向上述學(xué)會(huì)定義的正常范圍的狀態(tài)靠近。在本發(fā)明中，高脂血癥的預(yù)防是指防止或延遲日本動(dòng)脈硬化學(xué)會(huì)在動(dòng)脈硬化性疾病診療指南(2002年9月發(fā)行)中定義的高脂血癥的狀態(tài)或臨界狀態(tài)的形成。此外，高脂血的改善是指從上述所示的高脂血癥的狀態(tài)或臨界狀態(tài)向上述指南中定義的正常范圍的狀態(tài)靠近。在本發(fā)明中，胰島素抵抗是指在肝臟·脂肪細(xì)胞·骨格肌中，作為胰島素的主要作用的糖的吸收促進(jìn)作用減弱的狀態(tài)。胰島素抵抗的預(yù)防是指防止或延遲SSPG(steady-stateplasmaglucose)法等規(guī)定的作為胰島素抵抗的指標(biāo)的值更加惡化。胰島素抵抗的改善是指進(jìn)一步改善作為上述的胰島素抵抗的指標(biāo)的值。在本發(fā)明中，糖尿病的預(yù)防是指防止或延遲日本糖尿病學(xué)會(huì)在糖尿病治療指南2002-2003(2002年5月發(fā)行)中定義的糖尿病的狀態(tài)或臨界狀態(tài)的形成。此外，糖尿病的改善是指從上述的糖尿病的狀態(tài)或臨界狀態(tài)向上述指南中定義的正常范圍的狀態(tài)靠近。本發(fā)明的組合物其形態(tài)不受限定，例如可作為健康食品、營養(yǎng)補(bǔ)助食品、營養(yǎng)功能食品、特定保健用食品等的飲食品及醫(yī)藥品使用。本發(fā)明的飲食品含有上述23種植物提取物的1種或2種以上、和作為飲食物允許的添加劑。在此，添加劑是指飲食品中通常使用的添加劑，例如可例舉維生素E、維生素C等的維生素類、糖類、賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、乳化劑、繃緊劑(tensingagent)(等張劑)、緩沖劑、助溶劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、著色劑、矯味劑、香料、凝固劑、PH調(diào)節(jié)劑、增粘劑、提取物粉末、生藥、無機(jī)鹽等，只要不損壞所希望的本發(fā)明配體劑的效果，不限定于這些。特別是本發(fā)明的飲食物為營養(yǎng)強(qiáng)化劑時(shí)，例如可適當(dāng)配合制備維生素E、維生素C等的維生素類、制備營養(yǎng)強(qiáng)化劑時(shí)通常配合的乳化劑、繃緊劑(tensingagent)(等張劑)、緩沖劑、助溶劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑等。作為飲食品，可在口香糖、巧克力、奶糖、果凍、餅干、克力架等的點(diǎn)心類，冰淇淋、冰點(diǎn)心等的冰點(diǎn)心類，茶、清涼飲料、保健營養(yǎng)液、美容飲料等的飲料，面條、中華面條、意大利面、速食面等的面類，魚糕、圓筒狀魚糕、魚肉山芋餅等的加工產(chǎn)品，調(diào)味汁、沙拉醬、醬汁等的調(diào)味料，人造奶油、黃油、沙拉油等的油脂類，面包、火腿、湯、軟罐頭食品、冷凍食品等所有的飲食品中使用。該提取物的攝取量無特別限定，但期望PPAR配體活性、特別是預(yù)防及/或改善肥胖及因肥胖而發(fā)病的胰島素抵抗、高血脂、高血壓、糖尿病而攝取時(shí)，其攝取量按該提取物計(jì)成人每人每天為0.011000mg/kg體重，優(yōu)選1300mg/kg體重，進(jìn)一步優(yōu)選220mg/kg體重。本發(fā)明的醫(yī)藥組合物含有上述23種植物提取物中的1種或2種以上、和藥學(xué)上允許的添加劑。作為在此所述的添加劑，例如可例示賦形劑、崩解劑、潤滑劑、粘合劑、抗氧化齊U、著色劑、抗凝劑、吸收促進(jìn)劑、助溶劑、穩(wěn)定劑等。醫(yī)藥組合物的形態(tài)無特別限定，例如可例舉膠囊劑、片劑、顆粒劑、注射劑、栓劑、貼劑等，特別優(yōu)選為經(jīng)口用組合物的形態(tài)。為經(jīng)口用組合物時(shí)，該提取物的攝取量無特別限定，但在期待PPAR配體活性、特別是預(yù)防及/或改善肥胖及因肥胖而發(fā)病的胰島素抵抗、高脂血、高血壓、糖尿病而攝取時(shí)，其投給量按該提取物計(jì)成人每人每天為0.011000mg/kg體重，優(yōu)選為0.1300mg/kg體重，進(jìn)一步優(yōu)選為220mg/kg體重，分一次或數(shù)次投給。本領(lǐng)域技術(shù)人員可考慮患者的狀態(tài)(年齡、性別、癥狀等)、及投給方式等確定適當(dāng)?shù)耐督o量?！坝桧?本發(fā)明還提供用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病的方法，所述方法包括對于需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有本發(fā)明的植物提取物的醫(yī)藥組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供用于制造如下醫(yī)藥組合物的本發(fā)明的植物提取物的應(yīng)用，該醫(yī)藥組合物為預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病時(shí)所使用的醫(yī)藥組合物。本發(fā)明還提供用于預(yù)防及/或治療肥胖的方法，所述方法包括對于需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有本發(fā)明的植物提取物的抗肥胖劑。本發(fā)明還進(jìn)一步提供本發(fā)明的植物提取物用于制造如下抗肥胖劑的應(yīng)用，該抗肥胖劑為預(yù)防及/或治療肥胖時(shí)使用的抗肥胖劑。對于本發(fā)明的“預(yù)防及/或治療方法”、以及“用于制造醫(yī)藥組合物的應(yīng)用”，有關(guān)投給方式、投給量等如以上“醫(yī)藥組合物”中所述。實(shí)施例以下，列舉實(shí)施例進(jìn)一步具體說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。植物材料本說明書中的實(shí)施例中所使用的植物和其使用部位如表1所示。樣品制備中使用各植物使用部位的干燥粉碎物。破碎時(shí)使用日本株式會(huì)社T0SH0制片劑粉碎機(jī)TS-10M型或日本株式會(huì)社吉田制作所制Wiley型粉碎機(jī)1029-JAS型。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>※丨“果汁粉末”為將鮮果實(shí)榨汁后得到的果汁進(jìn)行冷凍干燥后得到的粉末。※？“地上部”有時(shí)包含莖葉部、花。樣品制備例1將表1所示植物的破碎物Ig分別浸入IOml(10(ff/V)倍量)70容量％的乙醇中，室溫下進(jìn)行1天1次攪拌操作后提取7天，過濾后得到提取液。將提取液5ml濃縮后進(jìn)行冷凍干燥，得到提取物。使提取物在Iml蒸餾水中溶解或懸浮，加入3ml水飽和乙酸乙酯進(jìn)行攪拌、離心分離后，取分離后的乙酸乙酯層。進(jìn)一步在水層中加入水飽和Iml正丁醇進(jìn)行攪拌、離心分離后，分離正丁醇層和水層。濃縮所得到的乙酸乙酯層、正丁醇層及水層后進(jìn)行冷凍干燥，得到乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及水萃取物。樣品制備例2將西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加的破碎物分別浸入表1所示的重量的10(W/V)倍量的70容量％乙醇中，室溫下進(jìn)行1天1次攪拌操作后提取7天，過濾后得到提取液。將提取液濃縮后進(jìn)行冷凍干燥，得到乙醇提取物。樣品制備例3將亞麻、阿魏蘑、無梗五加、大麻的破碎物分別加入表1所示的重量的20(W/V)倍量的蒸餾水，每10分鐘進(jìn)行攪拌操作，同時(shí)在80°C下進(jìn)行30分鐘提取。將提取液用水冷卻后，將3000rpm、離心10分鐘后得到的上清進(jìn)行過濾。冷凍干燥濾液，得到熱水提取物。實(shí)施例1PPARS配體活件的測定對于樣品制備例1中得到的各植物的乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物，使用以下所示方法測定PPARδ配體活性。將H印G2細(xì)胞(來自人體肝癌的培養(yǎng)細(xì)胞)接種于96孔培養(yǎng)皿中，使其為lxl04Cells/well，在37°C、5%CO2條件下培養(yǎng)24小時(shí)。培養(yǎng)基使用含有10%FBS(胎牛血清；Equitech-Bio公司)、0.3g/LL-Glutamine(日水制藥)的RPMI1640(日水制藥)。將其細(xì)胞用OPTI-MEM(GIBC0公司)洗滌后，使用pBIND/GAL4::mPPAR5和pG51uc(Promega公司)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。且pBIND/GAL4::mPPARS為在來自酵母的轉(zhuǎn)錄因子GAL4融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒pBIND(Promega公司)中插入小鼠PPARδ基因的質(zhì)粒，pG51u為在熒光素酶基因的上游將GAL4的應(yīng)答序列(UAS)整合5次后的報(bào)告基因質(zhì)粒(可用Cell，1995年，83卷，803812頁等中記載的方法制備)。轉(zhuǎn)染約24小時(shí)后，換成含有植物提取物的培養(yǎng)基，培養(yǎng)24小時(shí)。溶劑對照使用DMS0，在培養(yǎng)基中添加1/100量。將細(xì)胞用磷酸緩沖生理鹽水(PBS-)洗滌后，用細(xì)胞溶解液(CellCultureLysisReagent:Promega公司)使細(xì)胞溶角軍，添力口LuciferaseAssayReagent(Promega公司)用多標(biāo)記檢測儀(multilabelcounter)(ffallac公司)測定熒光素酶的發(fā)光強(qiáng)度。此外，將PPARδ的合成激動(dòng)劑L-165041(Sigma公司濃度為25μΜ)作為陽性對照使用。配體活性的評價(jià)將相對于對照(溶劑對照)發(fā)光強(qiáng)度的樣品發(fā)光強(qiáng)度的比作為樣品的PPARS配體活性發(fā)光度比，將顯示出1.3以上的樣品判斷為具有PPARδ的配體活性。用于活性測定的樣品濃度(培養(yǎng)基中的樣品濃度)和配體活性(發(fā)光度比)如表2所示。表2PPARδ配體活性<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實(shí)施例2PPARa配體活性的測定在實(shí)施例1中記載的方法中，作為融合蛋白表達(dá)質(zhì)粒除使用pBIND/GAL4mPPARα替代pBIND/GAL4mPPARδ以外，與實(shí)施例1同樣實(shí)施，進(jìn)行PPARα配體活性的測定。且pBIND/GAL4::mPPARa是指在pBIND(Promega公司)中插入小鼠PPARa基因的質(zhì)粒。此外，以PPARα的合成激動(dòng)劑WY-14643(Sigma公司濃度為25μΜ)作為陽性對照使用。用于活性測定的樣品濃度(培養(yǎng)基中的樣品濃度)和配體活性(發(fā)光度比)如表3所示。表3PPARa配體活性<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實(shí)施例3PPARy配體活件的測定PPARγ配體活性測定用CHO細(xì)胞用如下方法獲得。PPAR報(bào)告基因質(zhì)粒(pPPRE-Luc)是在包含SV40啟動(dòng)子基因、熒光素酶基因的報(bào)告基因質(zhì)粒pGL3(Promega公司)的SV40啟動(dòng)子基因的上游將PPAR應(yīng)答序列(PPRE)整合3次后的報(bào)告基因質(zhì)粒。PPARy表達(dá)質(zhì)粒(pKD-rPPARY)是通過SV40啟動(dòng)子在哺乳類細(xì)胞用表達(dá)質(zhì)粒中整合大鼠PPARy基因的質(zhì)粒。將pPPRE-Luc與pKD-rPPARγ使用Lipofectamine(Invitorgen公司)在CHO(dhfr-)細(xì)胞(來自中國倉鼠卵巢細(xì)胞的二氫葉酸還原酶缺陷株)中進(jìn)行共轉(zhuǎn)染。通過用含有幾乎不含胸腺嘧啶脫氧核苷的透析胎牛血清(GIBC0公司)的D-MEM培養(yǎng)基(GIBC0公司)培養(yǎng)細(xì)胞，獲得保留了pPPRE-Luc和pKD-rPPARγ的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化株(CHO/PPARy/PPRE)。將上述細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，使其為lX104CellS/Well，在37°C、5%CO2條件下培養(yǎng)24小時(shí)。培養(yǎng)基使用含有10%FBS(胎牛血清；Equitech-Bio社)、0.3g/LL-Glutamine(日水制藥)、10ml/LMEM用非必需氨基酸溶液(大日本住友制藥)的DMEM(日水制藥)。培養(yǎng)24小時(shí)后，換成含有植物提取物的培養(yǎng)基，培養(yǎng)24小時(shí)。溶劑對照使用DMS0，在培養(yǎng)基中添加1/100量。將細(xì)胞用磷酸緩沖生理鹽水(PBS-)洗滌后，用細(xì)胞溶解液(CellCultureLysisReagent=Promega公司)使細(xì)胞溶解,添加LuciferaseAssayReagent(Promega公司)，用多標(biāo)記檢測儀(multilabelcounter)(ffallac公司)測定熒光素酶的發(fā)光強(qiáng)度。此外，以PPARy的合成激動(dòng)劑Ciglitiz0ne(Sigma公司濃度為25μM)作為陽性對照使用。用于活性測定的樣品濃度(培養(yǎng)基中的樣品濃度)和配體活性(發(fā)光度比)如表4所示。表4PPARy配體活性<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>實(shí)施例4乙醇提取物的PPARδ配體活件的測定將樣品制備例2中得到的各植物的乙醇提取物的PPARδ配體活性用實(shí)施例1中記載的方法測定。用于活性測定的樣品濃度(培養(yǎng)基中的樣品濃度)和配體活性(發(fā)光度比)如表5所示。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>實(shí)施例5熱水提取物的PPARδ配體活件的測定將樣品制備例3中得到的各植物的熱水提取物的PPARδ配體活性用實(shí)施例1中記載的方法測定。用于活性測定的樣品濃度(培養(yǎng)基中的樣品濃度)和配體活性(發(fā)光度比)如表6所示。表6熱水提取物中的PPARδ配體活性<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>如以上實(shí)施例15所示，證實(shí)各植物提取物中均有PPAR的配體活性。具體如下。(1)證實(shí)西洋接骨木的乙酸乙酯萃取物中有PPARδ及PPARγ的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(2)證實(shí)亮葉楊桐的乙酸乙酯萃取物中有PPARδ及PPARγ的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ及PPARγ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(3)證實(shí)西番蓮的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(4)證實(shí)濱海前胡的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(5)證實(shí)茴芹的乙酸乙酯萃取物中有PPARγ的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(6)證實(shí)穗花牡荊的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(7)證實(shí)印度人參的水萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(8)證實(shí)帚石楠的乙酸乙酯萃取物中有PPARδ及PPARγ的配體活性，且證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(9)證實(shí)單子山楂的水萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(10)證實(shí)亞麻的乙酸乙酯萃取物中有PPARa的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARα的配體活性，還證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性，進(jìn)而證實(shí)熱水提取物中有PPARδ活性。(11)證實(shí)阿魏蘑的水萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性，進(jìn)一步證實(shí)熱水提取物中有PPARδ活性。(12)證實(shí)刺槐的水萃取物中有PPARS的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性。(13)證實(shí)無梗五加的水萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)乙醇提取物中有PPARδ活性，進(jìn)一步證實(shí)熱水提取物中有PPARδ活性。(14)證實(shí)大麻的乙酸乙酯萃取物中有PPARy的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性，還進(jìn)一步證實(shí)熱水提取物中有PPARδ活性。(15)證實(shí)豆蔻的乙酸乙酯萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)水萃取物中有PPARα的配體活性。(16)證實(shí)歐白芷的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性。(17)證實(shí)番石榴的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性。(18)證實(shí)黑刺李的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性。(19)證實(shí)鋸葉棕的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性。(20)證實(shí)木半夏的乙酸乙酯萃取物中有PPARy的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性。(21)證實(shí)川芎的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性。(22)證實(shí)刺五加的乙酸乙酯萃取物中有PPARy的配體活性，且證實(shí)正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，進(jìn)一步證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性。(23)證實(shí)巴西莓的正丁醇萃取物中有PPARδ的配體活性，且證實(shí)水萃取物中有PPARδ的配體活性。實(shí)施例6抗肥胖作用的驗(yàn)證(試驗(yàn)方法)將西洋接骨木、亮葉楊桐、茴芹、單子山楂的各植物提取物的抗肥胖作用通過以下所示方法進(jìn)行驗(yàn)證。動(dòng)物使用ddY小鼠、雄性、6周齡(紀(jì)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)，用標(biāo)準(zhǔn)飼料(CE-2(日本Clea公司(CleaJapan,Inc.))馴化飼養(yǎng)1星期后投給樣品。樣品投給是將用與樣品制備例2同樣的方法制備的西洋接骨木、亮葉楊桐、茴芹、單子山楂的各植物提取物懸浮于含有3%阿拉伯膠的精制水中，將后述的投給量以1天1次在上午、共計(jì)17天內(nèi)強(qiáng)制經(jīng)口投給12次。此外，對照組投給只含有3%阿拉伯膠的精制水。在投給樣品期間內(nèi)的飼料使用含有45kcal%的脂肪成分的ResearchDietsInc.的高脂肪餐(D12415)，試驗(yàn)期間自由攝水。在解剖前一天即投給開始第16天，使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用X線CT裝置(LathetaLCT-100·阿洛卡株式會(huì)社(ALOKACO.,LTD.))測定體脂肪量。解剖當(dāng)天不投給，在小鼠斷食4小時(shí)后，在乙醚麻醉下從腹大靜脈取全身血，離心后得到血漿，保存于-80°C。之后，將血液中的中性脂肪、游離脂肪酸使用自動(dòng)分析裝置(日立7070株式會(huì)社日立制作所)測定。6-1西洋接骨木(結(jié)果)以100、300mg/kg/day(投給液量為10ml/kg)投給西洋接骨木提取物時(shí)，試驗(yàn)期間內(nèi)的體重變化如圖1所示，投給第16天的體脂肪量、試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度及血液中中性脂肪濃度分別如圖2、圖3、圖4所示。如圖1-4所示，西洋接骨木提取物抑制體重增加和體脂肪積累具有用量依賴性。且血液中游離脂肪酸的水平顯著上升，而另一方面，中性脂肪的水平降低。6-2茴芹(結(jié)果)以lOOOmg/kg/day(投給液量為10ml/kg)投給茴芹提取物時(shí)，試驗(yàn)期間內(nèi)的體重變化如圖5所示，投給第16天的體脂肪量、試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度及血液中中性脂肪濃度分別如圖6、圖7、圖8所示。如圖5-8所示，通過茴芹提取物的投給抑制了體重增加、體脂肪積累。且血液中游離脂肪酸的水平顯著提高，而另一方面，中性脂肪的水平降低。6-3單子山楂(結(jié)果)以100、300、lOOOmg/kg/day(投給液量為10ml/kg)投給單子山楂提取物時(shí)，試驗(yàn)期間內(nèi)的體重變化如圖9所示，投給第16天的體脂肪量如圖10所示，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度的測定結(jié)果如圖11所示。如圖9-11所示，單子山楂提取物抑制體重增加和體脂肪積累具有用量依賴性。且血液中游離脂肪酸濃度具有用量依賴性地顯著增加。6-4亮葉楊桐(結(jié)果)以lOOmg/kg/day(投給液量為10ml/kg)投給亮葉楊桐提取物時(shí)，試驗(yàn)期間內(nèi)的體重變化如圖12所示，投給第16天的體脂肪量、試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的血液中游離脂肪酸濃度及血液中中性脂肪濃度分別如圖13、圖14、圖15所示。證實(shí)通過投給亮葉楊桐提取物，顯著抑制了體重增加，也抑制了體脂肪積累量。此外，游離脂肪酸的水平顯著降低，中性脂肪的水平也顯著降低。權(quán)利要求一種過氧化物酶體增殖物激活受體PPAR的配體劑，其特征在于，含有作為有效成分的選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的配體劑，其中，PPAR為PPAR6。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的配體劑，其中，植物選自西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上。4.根據(jù)權(quán)利要求13中任一項(xiàng)所述的配體劑，其中，提取物為醇或醇水溶液提取物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的配體劑，其中，醇為乙醇。6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的配體劑，其中，植物選自亞麻、阿魏蘑、無梗五加、大麻中的1種或2種以上。7.根據(jù)權(quán)利要求1、2或6中所述的配體劑，其中，提取物為熱水提取物。8.—種醫(yī)藥組合物，其特征在于，其用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病，含有選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物和藥學(xué)上允許的添加劑。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的醫(yī)藥組合物，其中，與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病為選自肥胖、高脂血癥、高血壓、糖尿病中的1種或2種以上的疾病。10.一種飲食品，其特征在于，含有選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物和作為飲食物允許的添加劑。11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的飲食品，其用于預(yù)防及/或改善與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病。12.一種抗肥胖劑，其特征在于，含有作為有效成分的選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物。13.一種用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病的方法，其特征在于，所述方法包括向需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物的醫(yī)藥組合物。14.一種用于制造醫(yī)藥組合物的應(yīng)用，其為用于制造用于預(yù)防及/或治療與過氧化物酶體增殖物激活受體相關(guān)的疾病的醫(yī)藥組合物的應(yīng)用，其特征在于，所述醫(yī)藥組合物包含選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物。15.一種用于預(yù)防及/或治療肥胖的方法，其特征在于，所述方法包括向需要該預(yù)防及/或治療的個(gè)體投給含有選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物的抗肥胖劑。16.一種用于制造抗肥胖劑的應(yīng)用，其為用于制造用于預(yù)防及/或治療肥胖的抗肥胖劑的應(yīng)用，其特征在于，所述抗肥胖劑含有選自西洋接骨木、茴芹、單子山楂及亮葉楊桐中的1種或2種以上的植物提取物。全文摘要本發(fā)明的目的為提供過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)的配體劑等。具體為，本發(fā)明的配體劑的特征在于，含有作為有效成分的選自以下植物鋸葉棕、刺五加、巴西莓、豆蔻、歐白芷、番石榴、黑刺李、木半夏、川芎、大麻、西洋接骨木、亮葉楊桐、西番蓮、濱海前胡、茴芹、穗花牡荊、印度人參、帚石楠、單子山楂、亞麻、阿魏蘑、刺槐、無梗五加中的1種或2種以上的植物提取物。文檔編號A61K36/06GK101835480SQ200880112928公開日2010年9月15日申請日期2008年10月24日優(yōu)先權(quán)日2007年10月24日發(fā)明者前田滿,北川義德,小倉享一,櫓木智裕,江川香申請人:三得利控股株式會(huì)社