專利名稱：：防治感冒的藥物組合及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥組合物，尤其涉及一種應(yīng)用于防治感冒、流行性感冒的藥物。
背景技術(shù)：
：感冒是最常見的一種呼吸道傳染性疾病，其中70%80%是由病毒感染引起，少部分由細(xì)菌感染所致。感冒危害著人類的健康，它可降低人體的免疫能力，引起其他疾病，如咽喉炎、鼻竇炎、中耳炎、支氣管炎和肺炎，甚至膿胸、肝膿腫、心包炎和骨髓炎等。由于目前尚無確切的抗病原體藥物，所以西藥對感冒的治療主要是緩解癥狀，防止繼發(fā)感染。臨床應(yīng)用的抗感冒藥已有20余種，它們對于感冒所引起的各種癥狀具有緩解或消除作用，但最終還需靠人的自身免疫力治愈，且一般都有嗜唾、困倦等副作用。流感是由流感病毒引發(fā)的一種比普通感冒更為嚴(yán)重的急性呼吸道傳染病，其特點(diǎn)為起病急、傳染性強(qiáng)、發(fā)病率高、病程長。目前防治流感的最有效手段是接種流感疫苗，但由于流感病毒變異性強(qiáng)，可使現(xiàn)有疫苗失效，從而加大了防治的難度。從中醫(yī)的角度講，感冒、流感是在機(jī)體內(nèi)火伏里的基礎(chǔ)上外感風(fēng)寒引發(fā)的。中藥治療感冒既可清除內(nèi)熱，又可疏散外表風(fēng)寒之邪，表里同治，并且中藥可以整體調(diào)節(jié)人體的免疫機(jī)能，達(dá)到扶正驅(qū)邪的目的，可以使感冒、流感得到徹底有效的治療。臨床上已有數(shù)十種治療感冒的中成藥問世，如板藍(lán)根顆粒、抗病毒口服液、荊防敗毒散等，但由于它們的藥物組成較為單一，適應(yīng)癥比較局限，加上制劑工藝比較落后，起效較慢，臨床療效不太理想。因此，研究開發(fā)出療效顯著、毒副作用低的防治感冒、流感產(chǎn)品，具有重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，提供一種用于防治感冒、流行性感冒及其他病毒性感染疾病的藥物組合及制備方法。本發(fā)明采用具有抗菌、抗病毒和抗炎功效的莪術(shù)油、廣藿香油及野菊花超臨界二氧化碳萃取物作為主要成分，制成口服劑型。莪術(shù)油是從姜科植物蓬莪術(shù)、溫郁金、廣西莪術(shù)中提取的揮發(fā)油，主要成分為半萜類，如莪術(shù)醇、莪術(shù)酮、莪術(shù)雙酮等。現(xiàn)代藥理研究表明莪術(shù)油具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎等作用，動物實驗證明莪術(shù)油對呼吸道合胞病毒、流感病毒A1型和A3型具有直接的抑制作用?，F(xiàn)已制成莪術(shù)油注射液和莪術(shù)油葡萄糖注射液在臨床上用于治療上呼吸道感染、病毒性肺炎等病毒性感染疾病。但由于中藥注射劑化學(xué)成分復(fù)雜、制備工藝落后，莪術(shù)油注射液的不良反應(yīng)時有發(fā)生，甚至導(dǎo)致死亡，嚴(yán)重影響了莪術(shù)油在臨床上的應(yīng)用。廣藿香油作為廣藿香藥材的主要成分具有抑菌的功效，對金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌等病原體具有一定的抑制作用。此外，文獻(xiàn)報道野菊花超臨界二氧化碳萃取物具有抗菌、解熱、增強(qiáng)免疫等作用，現(xiàn)已有以其作為原料用于治療牙周病的牙膏。為達(dá)上述目的，本發(fā)明的防治感冒的藥物組合，采用以下的技術(shù)方案-一種防治感冒的藥物組合，由以下重量配比的原料藥組成莪術(shù)油0.520份、廣藿香油550份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物550份。進(jìn)一步地，本發(fā)明原料藥的重量配比優(yōu)選為莪術(shù)油2.7份、廣藿香油13.5份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5份；進(jìn)一步地，所述藥物組合物以及提取物或精制物可以加入常規(guī)輔料或賦形劑，制成臨床可接受的劑型，為口服劑型；口服劑型選自于丸劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑以及滴丸劑當(dāng)中的一種；上述的藥物組合物在呼吸系統(tǒng)疾病方面的應(yīng)用，用于感冒、流行性感冒及其他病毒性感染的預(yù)防和治療。本發(fā)明原料藥的來源為莪術(shù)油為姜科植物蓬莪術(shù)CurcumaphaeocaulisValeton、溫有卩金CurcumawenyujinY.H.ChenetC丄ing、廣西莪術(shù)CurcumakwangsiensisS.G丄eeetC.F丄iang的干燥根莖經(jīng)水蒸汽蒸餾或應(yīng)用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)提取的脂溶性部分。廣藿香油為唇形科植物廣藿香Pogostemoncablin(Blanco)Banth.的地上部分經(jīng)水蒸汽蒸餾或應(yīng)用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)提取的脂溶性部分。野菊花為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL的干燥頭狀花序。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)《中華人民共和國藥典》2005年版一部。一種防治感冒的藥物組合的制備方法，包括下述步驟①、首先制備野菊花超臨界二氧化碳萃取物，取野菊花原藥材，粉碎成粗粉，置超臨界二氧化碳萃取儀中萃取，萃取參數(shù)為萃取溫度45±3°C，萃取壓力20土10MPa，解析壓力為67MPa，解析溫度55±5°C，二氧化碳流量為25±3L/h，萃取時間為2i1h，所得萃取物置潔凈容器中，備用；②、再將上述制備的野菊花超臨界二氧化碳萃取物，按藥物組合的各成重量配比莪術(shù)油0.520份、廣藿香油550份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物550份，以上材料混合攪拌均勻，然后制得藥物組合。本發(fā)明是一種具有芳香化濁、發(fā)表解毒功效的藥物組合，藥理研究表明其具有抗菌、抗病毒、抗炎、解熱和調(diào)解免疫的作用。而且，該藥物組合抗病毒、抗炎及解熱作用均比單獨(dú)用莪術(shù)油、廣藿香油或野菊花萃取物要強(qiáng)?？捎糜诟忻?、流行性感冒及其他病毒性感染的預(yù)防和治療。具體實施例方式為能進(jìn)一步了解本發(fā)明的特征、技術(shù)手段以及所達(dá)到的具體目的、功能，下面將通過動物實驗對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。首先制備野菊花超臨界二氧化碳萃取物，取野菊花原藥材，粉碎成粗粉，置超臨界二氧化碳萃取儀中萃取，萃取參數(shù)為萃取溫度45±3°C，萃取壓力20土10MPa，解析壓力為67MPa，解析溫度55±5°C，二氧化碳流量為25±3L/h，萃取時間為2土1h，所得萃取物置潔凈容器中，備用；將制備好的野菊花超臨界二氧化碳萃取物，按藥物組合的各成重量配比莪術(shù)油0.520份、廣藿香油550份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物550份，以上材料混合攪拌均勻，然后制得藥物組合。例1(硬膠囊劑):取2.7g莪術(shù)油、13.5g廣藿香油、13.5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，用240g倍他環(huán)糊精包合，得包合物；加淀粉至370g，混勻，制成顆粒，6(TC以下干燥，過篩，裝入1號膠囊，制成硬膠囊1000粒(0.37g/粒)。服用劑量為每天2次，每次2粒。例2(片劑)取2.7g莪術(shù)油、13.5g廣藿香油、13.5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，用240g倍他環(huán)糊精包合，得包合物，加淀粉至250g，混勻，制成顆粒，60'C以下干燥，壓制成1000片(0.25g/片)，包薄膜衣，即得。服用劑量為每天2次，每次2片。例3(軟膠囊劑)取2.7g莪術(shù)油、13.5g廣藿香油、13.5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，加入花生油至250g，混勻，制成軟膠囊1000粒(0.25g/粒)。服用劑量為每天2次，每次2粒。例4(滴丸劑)取170g聚乙二醇4000，7(TC水浴加熱使熔融，加入2.7g莪術(shù)油、13.5g廣藿香油、13.5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，混勻，滴入冷卻的二甲硅油中，制成滴丸1000丸(0.21g/丸)。服用劑量為每天2次，每次2丸。例5(顆粒劑)取2.7g莪術(shù)油、13.5g廣藿香油、13.5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，用240g倍他環(huán)糊精包合，得包合物，加淀粉至250g，混勻，制成顆粒，6CTC以下干燥，分裝成500袋(1g像)。服用劑量為每天2次，每次1袋。例6(軟膠囊劑)取20g莪術(shù)油、50g廣藿香油、50g野菊花二氧化碳超臨界提取物，加入花生油至250g，混勻，制成軟膠囊1000粒(0.25g/粒)。服用劑量為每天2次，每次2粒。例7(滴丸劑)取160g聚乙二醇4000，7CTC水浴加熱使熔融，加入0.5g莪術(shù)油、5g廣藿香油、5g野菊花二氧化碳超臨界提取物，混勻，滴入冷卻的二甲硅油中，制成滴丸1000丸(0.18g/丸)。服用劑量為每天2次，每次2丸。例8(硬膠囊劑)取5g莪術(shù)油、20g廣藿香油、20g野菊花二氧化碳超臨界提取物，用240g倍他環(huán)糊精包合，得包合物；加淀粉至370g，混勻，制成顆粒，6trc以下干燥，過篩，裝入1號膠囊，制成硬膠囊1000粒(0.37g/粒)。服用劑量為每天2次，每次2粒。例9(片劑)取10g莪術(shù)油、8g廣藿香油、25g野菊花二氧化碳超臨界提取物，用240g倍他環(huán)糊精包合，得包合物，加淀粉至250g，混勻，制成顆粒，60'C以下干燥，壓制成1000片(0.25g/片)，包薄膜衣，即得。服用劑量為每天2次，每次2片。以下是動物實驗證明本發(fā)明具有的技術(shù)效果一、體內(nèi)抗病毒試驗1、對流感病毒感染小鼠致死的保護(hù)作用1.1實驗材料受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥利巴韋林，由湖北醫(yī)藥工業(yè)研究所提供，批號080104。實驗動物NIH小鼠，單一性別，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，SPF級別，體重1315g。小鼠伺料為富含多種成分的配方。飼養(yǎng)環(huán)境室溫23土2。C，相對濕度75±10%。病毒甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株由廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱研所病毒室提供，給小鼠增強(qiáng)毒力后，于雞胚尿囊腔傳代2次。并測定其半數(shù)致死量LD50=5.52，放冰水中保存。1.2實驗方法把小鼠隨機(jī)分成陽性藥物組(利巴韋林)、病毒對照組(即模型組)、本發(fā)明組合物組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組，每組15只。各組小鼠用乙醚輕度麻醉，選用甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株5個LD50病毒濃度，滴鼻感染小鼠，每只4滴，約0.05ml。從感染前1d開始按0.16ml/10g的劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)12d，病毒感染對照組以等體積蒸鎦水灌胃。逐日觀察動物發(fā)病癥狀與死亡數(shù)，共觀察15d。計算死亡率、保護(hù)率、平均存活天數(shù)及生命延長率。死亡保護(hù)率=(病毒感染對照組死亡率—試驗組死亡率)/病毒感染對照組死亡率；生命延長率-(試驗組平均存活天數(shù)一病毒感染對照組平均存活天數(shù)/病毒感染對照組平均存活天數(shù)"100%。1.3實驗結(jié)果小鼠感染流感病毒后，大多發(fā)病在4d以后，小鼠出現(xiàn)鷙毛、活動減少、體重減輕、體溫下降等癥狀，從第6日開始出現(xiàn)死亡。野菊花組，小鼠癥狀嚴(yán)重，死亡率高達(dá)100%，至實驗第10天，小鼠全部死亡。其余各組動物癥狀減輕，少數(shù)癥狀重，甚至死亡。結(jié)果見表1表1對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>(與病毒對照組比較*P<0.05,**:PO.01;與利巴韋林比較#P<0.05,##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05，&&:P<0.01)1.4討論結(jié)果表明，該藥物組合對流感病毒致小鼠死亡的保護(hù)作用比相同濃度下單獨(dú)用莪術(shù)油、廣藿香油或野菊花萃取物要強(qiáng)。2、對小鼠流感病毒性肺炎的影響2.1實驗材料受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥利巴韋林，由湖北醫(yī)藥工業(yè)研究所提供，批號080104。實驗動物NIH小鼠，單一性別，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，SPF級別，體重1315g。小鼠詞料為富含多種成分的配方。詞養(yǎng)環(huán)境室溫23土2。C，相對濕度75±10%。病毒甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株由廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱研所病毒室提供，給小鼠增強(qiáng)毒力后，于雞胚尿囊腔傳代2次。并測定其半數(shù)致死量LD50=5.52，放冰水中保存。2.2實驗方法將小鼠隨機(jī)分正常對照組、陽性藥物組(利巴韋林)、病毒對照組(即模型組)、本發(fā)明組合物組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組，除正常對照組外，每組10只。各組小鼠用乙醚輕度麻醉，選用甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株15個LD50病毒濃度，滴鼻感染小鼠，每只4滴，約0.05ml。從感染前1d開始按0.16ml/10g的劑量灌胃給藥，每天1次，連續(xù)4d，病毒感染對照組以等體積蒸餾水灌胃。第6天稱取小鼠體重后解剖，肉眼觀察肺部病變，記錄肺部肝樣實變的程度，摘取全肺稱重，與體重計算肺指數(shù)值，并求出肺指數(shù)與抑制率。肺指數(shù)小鼠肺重(g)x100%/小鼠體重(g)肺指數(shù)抑制率-(對照組平均肺指數(shù)一實驗組平均肺指數(shù))xioox/對照組平均肺指數(shù)2.3實驗結(jié)果小鼠感染流感病毒4d后被處死，解剖發(fā)現(xiàn)病毒對照組小鼠的肺部病變明顯，其肺指數(shù)與正常對照組比較具有顯著性差別(P<0.01)，表明此模型成立。利巴韋林對于流感病毒所致小鼠肺炎病變均有明顯的抑制作用，與病毒對照組相比，肺指數(shù)有明顯好轉(zhuǎn)(P<0.01)。本發(fā)明組合物組與病毒對照相比，肺指數(shù)低于病毒對照組(P<0.05)。結(jié)果見表2。表2藥物對流感病毒性肺炎的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(與正常對照組比較，##:P<0.01;與病毒對照組比較**:P<0.01，*:PO.05;與利巴韋林比較屮P<0.05,屮屮<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05'&&:P<0.01)2.4討論結(jié)果表明，該藥物組合對小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用比相同濃度下單獨(dú)用莪術(shù)油、廣藿香油或野菊花萃取物要強(qiáng)。二、體外抗病毒試驗1、材料和方法1.1細(xì)胞傳代人宮頸癌細(xì)胞、狗腎細(xì)胞，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱帶醫(yī)學(xué)研究所提供。1.2病毒呼吸道合胞病毒；腺病毒3型；柯薩奇B3病毒，流感病毒亞甲型鼠肺適應(yīng)株FM1由廣州中醫(yī)藥大學(xué)熱帶醫(yī)學(xué)研究所提供。1.3藥品和試劑本發(fā)明藥物組合、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花提取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；利巴韋林注射液(由湖北醫(yī)藥工業(yè)研究所提供，批號080104)，IMDM細(xì)胞培養(yǎng)液(G舊CO公司，美國)，新生小牛血清(大連生化試劑廠)，胰蛋白酶(SIGMA，美國)，噻唑藍(lán)(MTT，SIGMA，美國)。2、實驗方法.2.1藥物毒性實驗將待測藥物分別用含有2FBS的IMDM稀釋，莪術(shù)油稀釋10倍(27.31mg/ml)、100倍(2.73mg/m1)、200倍(1,36mg/m1)、400倍(0.68mg/m1)、600倍(0.46mg/m1)、800倍(0.34mg/m1)、I000倍(0.27mg/m1)、I200倍(O.23mg/m1)、I400倍(0.20mg/m1)。本發(fā)明藥物組合以莪術(shù)油濃度為實驗濃度，其余廣藿香油、野菊花提取物以及利巴韋林注射液配制均同上。將傳代人宮頸癌細(xì)胞按2x108/ml接種于96孔培養(yǎng)板(0.2ml/孔)，待形成單層細(xì)胞后傾掉培養(yǎng)液，加入上述5種濃度藥物0.2ml，48h后觀察細(xì)胞病變，同時采用MTT法測定細(xì)胞存活量。并采用Reed—Muench法計算藥物的最大無毒濃度(TDO)和半數(shù)致死濃度(TD50)。2.2藥物抗病毒的體外實驗實驗分為正常細(xì)胞對照組；病毒對照組；本發(fā)明組合物組；莪術(shù)油組；廣藿香油組；野菊花提取物組；利巴韋林注射液組七組。按上述分組方法，接種于96孔培養(yǎng)板，正常對照組觀察細(xì)胞病變，待病毒對照組的細(xì)胞病變達(dá)++++時，用MTT法測定作OD值以確定細(xì)胞存活量，計算各藥物對細(xì)胞病變的平均抑制率(CPI)和最小抑制濃(MIC)。采用Reed—Muench法計算各組藥物抑制病毒致50%細(xì)胞病變的濃度(IC50)、90。/。有效濃度(IC90)和抗病毒的治療指數(shù)(TI)。Tl值是治療藥物療效的綜合判斷指標(biāo)，值越大說明藥物的毒性越小，抑制病毒的有效濃度越低。3、結(jié)果3.1體外實驗的藥物無毒劑量結(jié)果本發(fā)明組合物及莪術(shù)油TDO均為680Mg/ml，TD50為I360|jg/ml。實驗時每組分別取680|jg/ml、340|jg/ml、170|jg/ml三個濃度。廣藿香油TDO為I360|jg/ml，TD50為2730pg/ml。野菊花提取物TDO為2730|jg/ml，TD50為27.31mg/ml。對照藥利巴韋林注射液TDO為800|jg/ml，TD50為I500|jg/ml。3.2體外實驗藥物對細(xì)胞的病變抑制效果見表3表6。四組藥物中，本發(fā)明組合物組的CPI和Tl值在4種抗病毒實驗結(jié)果中均為最高，證明本發(fā)明組合物對4種病毒的抑制效果均優(yōu)于單獨(dú)的莪術(shù)油或廣藿香油。表3不同藥物對呼吸道合胞病毒引起細(xì)胞病變的抑制效果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4不同藥物對腺病毒Ad3型引起細(xì)胞病變的抑制效果分組<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表5不同藥物對柯薩奇B3型病毒引起細(xì)胞病變的抑制效果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表6不同藥物對流感病毒亞甲型鼠肺適應(yīng)株FM1引起細(xì)胞病變的抑制效果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>三、抗炎試驗(對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響)1、實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥醋酸潑尼松，5mg/片，廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號070301。1.2實驗動物NIH小鼠，SPF級，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。2、實驗方法取NIH小鼠，體重1822g，80只，雌雄各半，隨機(jī)分成六組，空白對照組、醋酸潑尼松組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油、野菊花提取物組。除空白對照組外，各組按表7劑量分別灌胃給藥，空白對照組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續(xù)4天。末次給藥0.5h后，將二甲苯100iJl滴于小鼠右耳兩面，左耳不涂作為對照，致炎0.5h后處死動物，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9mm打下雙耳同一部位圓片，電子分析天平，精密稱重，以左、右耳片重量之差作為腫脹度，比較各組間差異。3、實驗結(jié)果與討論實驗結(jié)果見表7表7各組藥物對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(；±s,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>(與病毒對照組比較*P<0.05，**:PO.01;與醋酸潑尼松#P<0.05，##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05,&&:P<0.01)表7結(jié)果表明，與空白對照組比較，醋酸潑尼松組、本發(fā)明組合物組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組，均能顯著抑制二甲苯致炎小鼠的耳腫脹度(P值均<0.01)，提示各實驗組有較好的抗炎作用。與醋酸潑尼松組比較，本發(fā)明組合物組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組，P值均>0.05,提示本發(fā)明藥物組合抗炎作用強(qiáng)度與醋酸潑尼松相當(dāng)，且其抗炎作用比單獨(dú)使用莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花提取物強(qiáng)。四、解熱試驗1、實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥消炎痛片(噴哚美辛腸溶片)，5mg/片，廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號071001。1.2實驗動物SD大鼠，SPF級，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。2.、實驗方法取大鼠若干只，體重(200士20)g，選取體溫在36.6。O38.3。C內(nèi)的大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，灌胃給藥，給藥體積20ml/kg，連續(xù)給藥3，于實驗前禁食12，自由飲水，實驗當(dāng)日測體溫2次，隔2h1次，選擇溫差不超過0.3'C的合格大鼠80只，給藥后立刻于大鼠背部皮下注射干酵母(15)混懸液10ml/kg，然后于2、4、6、10h測定肛溫值，進(jìn)行組間比較。3、實驗結(jié)果與討論實驗結(jié)果見表8表8各組藥物對鮮酵母致大鼠發(fā)熱的影響^is，n-10)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>(與病毒對照組比較:*P<0.05'**:PO,01;與消炎痛比較#P<0.05,##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05,&&:P<0.01)表8結(jié)果表明，與空白對照組比較，消炎痛在給藥24h后對鮮酵母致大鼠的發(fā)熱具有解熱作用，本發(fā)明藥物組合在給藥后3、4h具有解熱作用，野菊花提取物組在給藥后4h時具有解熱作用，其余各組均無解熱作用。五、對免疫功能的影響1、實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥醋酸潑尼松，5mg/片，廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號070301。1.2實驗動物NIH小鼠，SPF級，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。2、實驗方法取NIH小鼠60只，雌雄各半，體重為1822g，隨機(jī)分成六組，空白對照組、醋酸潑尼松(免疫抑制劑)組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組。除空白對照組外，各組按表9劑量分別灌胃給藥，空白對照組給予等容積蒸餾水，每天1次，連續(xù)7d。末次給藥后0.5小時，于尾靜脈注入稀釋中華墨汁(用1%明膠液稀釋4倍)0.1mL/10g，于注入墨汁后2min及12min，用特制吸管從小鼠眼眶后靜脈叢取血10mL，立刻吹入0.1%Na2C03溶液10mL中，用吸管從該液中吸入吹出數(shù)次，充分洗出吸管壁附著之血液，以0.025mL正常小鼠血溶于10mL0.1XNa2CO3溶液校零，于576nm處測定吸收度(A)值，計算吞噬指數(shù)K，實驗數(shù)據(jù)采用單因素方差分析比較各組間差異。K=(logOD1logOD2)/(t1t2)3、實驗結(jié)果與討論表9各組藥物對小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬功能的影響pi^，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(與病毒對照組比較*P<0.05，**:P<0.01;與醋酸潑尼松比較#P<0.05,##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05,&&:PO.01)表9結(jié)果表明，與空白對照組比較，本發(fā)明藥物組合、莪術(shù)油、廣藿香油，均能顯著提高小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能(P<0.01)，醋酸潑尼松組能顯著降低小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能(P<0.01),提示本發(fā)明藥物組合有明顯的提高免疫功能的作用。六、鎮(zhèn)痛實驗(對小鼠熱板痛閾的影響)1、實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥消炎痛片(吲哚美辛腸溶片)，5mg/片，廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號071001。1.2實驗動物NIH小鼠，雄性，SPF級，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。2、實驗方法調(diào)節(jié)恒溫裝置使水溫控制在(55土0.5)'C,熱板預(yù)熱30min。測小鼠正常痛閾值取1822g雌性小鼠數(shù)只，每次一只放在熱板上，記錄其開始舔后足所需時間(秒)為此鼠的正常痛閾值(小于5秒或大于30秒或中跳躍者不用)。將合格小鼠隨機(jī)分為6組，測量其痛閾值為其給藥前痛閾值。分為空白對照組、消炎痛組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組，除空白對照組外，各組按表10劑量分別灌胃給藥，空白對照組給予等容積蒸餾水，每天給藥1次，連續(xù)4d。末次給藥60min后，分別測量小鼠痛閾值。若60秒無反應(yīng)，其痛閾值按60秒計算。實驗數(shù)據(jù)采用單因素方差分析比較各組間差異。3、實驗結(jié)果與討論實驗結(jié)果見表10表10各組藥物對小鼠熱板法痛閾值的影響P±\n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>(與病毒對照組比較*P<0.05,**:P<0.01;與消炎痛比較#P<0.05，##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05，&&:PO.01)結(jié)果表明，與空白對照組比較，消炎痛組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油組，均能抑制熱板所致小鼠的疼痛，提示上述各實驗組均有較好的鎮(zhèn)痛作用。與消炎痛組比較，本發(fā)明藥物組合組無差異，提示本發(fā)明藥物組合的鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)度相當(dāng)于消炎痛。七、鎮(zhèn)靜試驗(對小鼠自主活動次數(shù)的影響試驗)1、實驗材料1.1受試藥物本發(fā)明藥物組合(含莪術(shù)油2.7g、廣藿香油13.5g、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5g)、莪術(shù)油、廣藿香油、野菊花超臨界二氧化碳萃取物，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)新藥開發(fā)研究中心提供；陽性對照藥阿司匹林片，20mg/片，廣州白云山光華制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號070201。1.2實驗動物NIH小鼠，雌雄各半，SPF級，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。2、實驗方法取NIH小鼠50只，雌雄各半，體重18~22，隨機(jī)分為六組，每組10只，即為空白對照組、阿司匹林組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油組、野菊花提取物組。除空白對照組外，各組按表11劑量分別灌胃給藥，空白對照組給予等容積蒸熘水，每天給藥1次，連續(xù)4d。末次給藥1h、2h后，將小鼠置小鼠自主活動記錄儀中，使其適應(yīng)3min后，記錄5min內(nèi)活動次數(shù)，采用重復(fù)測量的方差分析進(jìn)行組間比較。3、實驗結(jié)果與討論實驗結(jié)果見表11表11各組藥物對小鼠自主活動的影響(；±5,11=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>(與病毒對照組比較*P<0,05,**:P<0.01;與阿司匹林比較#P<0.05,##<0.01;與本發(fā)明藥物組合比較&<0.05，&&:PO.01)結(jié)果表明，與空白對照組比較，阿司匹林組、本發(fā)明藥物組合組、莪術(shù)油組、廣藿香油組，均能顯著減少小鼠5min內(nèi)的自主活動次數(shù)(P值均0.01)，提示上述各實驗組均有較好的鎮(zhèn)靜作用。權(quán)利要求1、一種防治感冒的藥物組合，其特征在于由以下重量配比的原料藥組成莪術(shù)油0.5～20份、廣藿香油5～50份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物5～50份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治感冒的藥物組合，其特征在于各成分重量配比優(yōu)選為莪術(shù)油2.7份、廣藿香油13.5份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物13.5份。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治感冒的藥物組合，其特征在于所述藥物組合物在呼吸系統(tǒng)疾病方面的應(yīng)用，用于感冒、流行性感冒及其他病毒性感染的預(yù)防和治療。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治感冒的藥物組合，其特征在于所述該藥物組合物以及提取物或精制物可以加入常規(guī)輔料或賦形劑，制成臨床可接受的劑型，為口服劑型。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治感冒的藥物組合，其特征在于所述口服劑型選自于丸劑、片劑、膠囊劑、噴霧劑以及滴丸劑當(dāng)中的一種。6、一種防治感冒的藥物組合的制備方法，其特征在于，包括下述步驟①、首先制備野菊花超臨界二氧化碳萃取物，取野菊花原藥材，粉碎成粗粉，置超臨界二氧化碳萃取儀中萃取，萃取參數(shù)為萃取溫度45±3°C，萃取壓力20士10MPa，解析壓力為67MPa，解析溫度55士5。C，二氧化碳流量為25土3L/h，萃取時間為2土1h，所得萃取物置潔凈容器中，備用；②、再將上述制備的野菊花超臨界二氧化碳萃取物，按藥物組合的各成重量配比莪術(shù)油0.520份、廣藿香油550份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物550份，以上材料混合攪拌均勻，然后制得藥物組合。全文摘要本發(fā)明提供一種用于防治感冒、流行性感冒及其他病毒性感染疾病的藥物組合及制備方法。本發(fā)明的防治感冒的藥物組合，由以下重量配比的原料藥組成莪術(shù)油0.5～20份、廣藿香油5～50份、野菊花超臨界二氧化碳萃取物5～50份。本發(fā)明是一種具有芳香化濁、發(fā)表解毒功效的藥物組合，藥理研究表明其具有抗菌、抗病毒、抗炎、解熱和調(diào)節(jié)免疫的作用，可用于感冒、流行性感冒及其他病毒性感染的預(yù)防和治療。文檔編號A61P31/16GK101361941SQ20081019889公開日2009年2月11日申請日期2008年9月28日優(yōu)先權(quán)日2008年9月28日發(fā)明者張奉學(xué),蘇子仁,賴小平申請人:東莞廣州中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥數(shù)理工程研究院