專利名稱：黑乳海參中具有抗腫瘤作用的總皂苷的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是一種以黑乳海參為原料提取的總皂苷類化合物，含有該提取物的制備方法和用途。
背景技術(shù)：
黑乳海參(7%e/ewoto a""wfl^ J)，又名"鳳梨參"，為海洋棘皮動(dòng)物門(mén)海參綱刺參科動(dòng)物，其體形很大，長(zhǎng)一般為700mm，寬約100mm，高約80mm，廣泛分布于我國(guó)西沙群島和臺(tái)灣南端，具有補(bǔ)肝腎，益精，養(yǎng)血的功效。
皂苷是黑乳海參的主要次生代謝產(chǎn)物之一，是其化學(xué)防御的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，具有抗真菌，抗凝血、免疫調(diào)節(jié)，細(xì)胞毒和抗病毒等各種生物活性。在體外細(xì)胞毒活性篩選中，發(fā)現(xiàn)黑乳海參的乙醇提取物具有強(qiáng)烈誘導(dǎo)稻瘟霉(i^n'cM/fln》0^zae)菌絲體變形，最小變形濃度MMDC=8ng/ml。
目前，關(guān)于黑乳海參的報(bào)道有巫軍、易楊華等，NobilisideA C， Three NewTriterpene Glycosides from Sea Cucumber i/o/o,/i""'a Selenka, 研究了黑乳
海參體內(nèi)的皂苷類化合物，通過(guò)從黑乳海參體內(nèi)提取得到總皂苷，應(yīng)用多種色譜技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分離純化，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)，結(jié)果分離得到了 3個(gè)三萜皂苷類化合物，并將該化合物命名為Nobiliside A， B和C。該文獻(xiàn)僅僅闡述了從黑乳海參體內(nèi)的皂苷類化合物中分離純化得到3個(gè)新的化合物，并對(duì)該化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)的鑒定，沒(méi)有詳細(xì)的提取物制備工藝；王遠(yuǎn)紅，呂志華等，梅花參中多糖提取工藝及含量測(cè)定的研究，中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2005年第6期，公開(kāi)了 "采用正交設(shè)計(jì)L9(34)，研究梅花參(Thelenota ananas)中多糖 的提取工藝，探討并建立了測(cè)定海參多糖含量的方法"。結(jié)果表明最佳提取條 件為lg樣品加40mL 3%K0H溶液，40 45。C超聲2h;且提取溫度為首要的影 響因素；產(chǎn)物經(jīng)二次乙醇純化的結(jié)果較好，粗多糖得率20.25%。多糖經(jīng)單糖組 成分析，巖藻糖含量達(dá)到70%以上。測(cè)得梅花參中總糖含量8.79%;糖醛酸含 量0.95%。
現(xiàn)有的文獻(xiàn)主要是海參中多糖的提取工藝及含量測(cè)定的研究，關(guān)于總皂苷制 備方法的研究很少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供一種黑乳海參總皂苷，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提 供了該提取物的制備方法和用途。
黑乳海參總皂苷是由下述方法提取原料黑乳海參，洗凈，切碎，乙醇提取， 提取液濃縮，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，依次用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收溶 劑至干，即得。
本發(fā)明還提供了該黑乳海參總皂苷的制備方法，它包括如下步驟
a、 干燥黑乳海參，加入85%~95%乙醇提取，提取液濃縮，提取液濃縮，得 流浸膏；
b、 將流浸膏溶于水中，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，依次用水和50%乙醇洗脫，收 集乙醇洗脫液，回收溶劑至干，即得。
本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它是含有有效量的黑乳海參總皂苷為原 料，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑。
其中，所述的制劑是口服制劑、注射劑。黑乳海參總皂苷或黑乳海參總皂苷加上藥用輔料組成的醫(yī)學(xué)上可接受的各類制劑。如片劑、膠囊、顆粒、注射劑等。本發(fā)明所用的輔料為制藥工程中常用的輔料如固體制劑所用的輔料:糊精、淀粉、淀粉衍生物、羧甲基纖維素、蔗糖、硫酸鈣、硬脂酸鎂、乳糖、微精纖維素、葡萄糖、山梨醇、甘露醇等。液體制劑所用的輔料如水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇等。
本發(fā)明提供了該藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。
本發(fā)明黑乳海參總皂苷的生產(chǎn)工藝中，無(wú)需對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行脫脂，采用樹(shù)脂吸附除雜，在生產(chǎn)工程中的處理量大，且能夠經(jīng)過(guò)活化重復(fù)使用，節(jié)約了成本，所涉及的有機(jī)溶劑只有乙醇，減少了有機(jī)溶劑對(duì)操作人員和生產(chǎn)管道的損害。本發(fā)明黑乳海參總皂苷與其它方式制備所得的提取物相比，成本低、藥效顯著，可控性
強(qiáng)，質(zhì)量穩(wěn)定o
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
將黑乳海參10公斤克洗凈，切碎，分別用5倍量(重量)的95%、 85%、85%乙醇依次浸泡，每次浸泡7天，合并乙醇浸出液，減壓回收乙醇，得流浸膏。將流浸膏溶于3倍量水中，過(guò)濾，濾液通過(guò)DA201-B大孔樹(shù)脂柱，依次用水和50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至干，得總皂苷55克。實(shí)施例2
取黑乳海參總皂苷20g，用適量注射用水分散，加入輔料適量，混勻，制成顆粒，干燥。
按實(shí)施例所得的顆粒劑，按所需劑量分裝于空膠殼中，即得膠囊劑。按實(shí)施例所得的顆粒劑，直接壓片，薄膜包衣，即得片劑。用于治療腫瘤疾病。 實(shí)施例3
將黑乳海參總皂苷適量加注射用水分散，噴霧干燥或真空干燥，得黑乳海參 總苷干粉。取聚乙二醇400，加黑乳海參總皂苷干粉，邊加邊攪拌至勻，采用壓 制法，制成軟膠囊。用于治療腫瘤疾病。 實(shí)施例4
取黑乳海參總皂苷400mg，加注射用水適量溶解。加甘露醇400mg，按照常 規(guī)凍干工藝凍干，即得黑乳海參總皂苷凍干粉。用于治療腫瘤疾病。
權(quán)利要求
1、一種從黑乳海參中提取的皂苷類化合物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求書(shū)1所述的黑乳海參總皂苷，其特征在于黑乳海參來(lái)源于刺 參科動(dòng)物黑乳海參去內(nèi)臟的全體。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的黑乳海參總皂苷，其特征在于它是由下述方法提取取干燥黑乳海參去內(nèi)臟的全體，用85%~95%乙醇提取，提取液濃 縮，得流浸膏，將流浸膏溶于水中，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，依次用水和50%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收溶劑至干，即得。
4、 一種制備權(quán)利要求1所述的黑乳海參提取物的方法，它包括如下步驟a、 稱取黑乳海參去內(nèi)臟的全體，加入85%~95%乙醇提取，提取液濃縮， 得濃縮液；b、 通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂，依次用水和50%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收 溶劑至干，即得。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備黑乳海參提取物的方法，其特征在于步驟b所述的乙醇洗脫是用50%的乙醇洗脫。
6、 一種藥物組合物，它是含有有效量的權(quán)利要求1 4任一項(xiàng)所述的黑乳海參總 皂苷為原料，加入藥學(xué)上可以接受的輔料或輔料性成分制備而成的制劑。
7、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑是口服制劑、 注射劑。
8、 權(quán)利要求7所述的藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種從黑乳海參中提取的黑乳海參總皂苷類化合物。本發(fā)明還提供了黑乳海參總皂苷的制備方法和用途。本發(fā)明具有黑乳海參提取物成本低、可控性強(qiáng)，質(zhì)量穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A61K35/56GK101461827SQ20081016337
公開(kāi)日2009年6月24日 申請(qǐng)日期2008年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月18日
發(fā)明者丁萍月, 軍 巫, 張佳佳, 朱可奇, 王忠華 申請(qǐng)人:寧波保稅區(qū)欣諾生物技術(shù)有限公司