專利名稱：：一種獨(dú)一味活性成分提取物的制備工藝及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及獨(dú)一味總黃酮活性成分的提取工藝及提取物的應(yīng)用，與傳統(tǒng)提取工藝相比較，更為優(yōu)質(zhì)，高效，產(chǎn)品具有更高的性價(jià)比。本發(fā)明的基本原理和操作步驟也可普遍適用于獨(dú)一味以及其他植物的總黃酮成分的制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：獨(dú)一味，丄am/op/z/cw^iototofSew仇^)/:wJo，為多年生唇形科草本植物，為常見藏藥，耐寒、耐干旱瘠薄。常生于海拔3卯0-5100米的高山碎石灘、河灘地或石質(zhì)草甸。分布于青海、甘肅、四川西部及云南西北部。我國藥典2005版規(guī)定獨(dú)一味的藥用部位為全草，包括根及根狀莖，葉等。今年來，通過國際上對(duì)獨(dú)一味研究的深入，其以下兩方面的功效已經(jīng)得到證實(shí)和應(yīng)用一.抗菌消炎和止血鎮(zhèn)痛目前研究普遍認(rèn)為其止血和止痛的機(jī)理在于獨(dú)一味內(nèi)有效成分總黃酮具有活血化瘀作用，并能促進(jìn)巨核細(xì)胞增生、提升外周血血小板數(shù)和提高人體痛覺閾值.二.提高特異性和非特異性免疫免疫功能的實(shí)驗(yàn)表明，獨(dú)一味能顯著提高巨噬細(xì)胞吞噬率、巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)、E」花環(huán)形成率及酯酶染色陽性率，表明獨(dú)一味有顯著提高非特異性免疫和特異性細(xì)胞免疫的作用?，F(xiàn)有專利中有多項(xiàng)涉及獨(dú)一味活性成分或其劑型的制備方法，如CN200410022734.6和CN200410051660.9均涉及獨(dú)一味提取物的制備工藝和其應(yīng)用。CN200410021816.9,CN200410022268.1,CN200410023381.1和CN200410091395.7等均涉及獨(dú)一味各劑型的制備方法。綜觀現(xiàn)有專利，在制備獨(dú)一味提取物的過程中，多使用水提法或單一其他方法，使得提取物中總黃酮含量并不高。本專利采用水提法和大孔樹脂，聚酰胺樹脂吸附精制結(jié)合的純化方法，有效地提高總黃酮含量的同時(shí)控制了生產(chǎn)成本，提供了一種高性價(jià)比的普遍適用于獨(dú)一味以及其他植物的總黃酮提取方法，獲得的產(chǎn)品適合開發(fā)成相應(yīng)的劑型滿足醫(yī)用需要。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的主要目的，是基于現(xiàn)有的獨(dú)一味提取技術(shù)，將水提和大孔樹脂吸附精致，聚酰胺樹脂吸附精制相結(jié)合，提出一種高性價(jià)比的獨(dú)一味總黃酮制劑制備方法及其應(yīng)用，從而克服現(xiàn)有獨(dú)一味制劑劑型少，現(xiàn)有制劑總黃酮成分含量偏低，產(chǎn)品性價(jià)比低等缺點(diǎn)。這種方法得到的提取物中，總黃酮的含量經(jīng)水提可以達(dá)到20%以上，經(jīng)大孔樹脂吸附分離后可以達(dá)到60%以上，再經(jīng)過聚酰胺吸附精致后可以達(dá)到90%以上。本發(fā)明得到的提取物可以根據(jù)需要，開發(fā)成軟膠囊，膠囊，微丸劑等多種劑型，有效成分的增加將更加利于患者的服用。實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明得到的獨(dú)一味系列藥品，總黃酮含量大幅提高，質(zhì)量控制穩(wěn)定，崩解時(shí)間短，溶出速度快，性價(jià)比遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于市場上其他方法制備的獨(dú)一味同類藥品。本發(fā)明通過以下方法實(shí)施，主要分為兩個(gè)主要步驟中藥獨(dú)一味總黃酮活性成分提取物的制備和各劑型獨(dú)一味藥品的開發(fā)。步驟1.中藥獨(dú)一味總黃酮活性成分提取物的制備-(1)制備獨(dú)一味粗提取物采集原料藥材獨(dú)一味(全草或莖葉皆可)，洗凈后烘干，碾磨成微小顆粒，與水按照約l:9的質(zhì)量比例于7(TC提取三次，每次一小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，密度約為1.30-1.50。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇，持續(xù)攪拌，直至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇后，減壓濃縮得到相對(duì)密度約為1.0-1.25的二次浸膏，即獨(dú)一味的粗提物。(2)大孔樹脂吸附精制在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充大孔樹脂，用水平衡固定床。將(1)中制得的獨(dú)一味粗提物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.25，4000卬m離心半小時(shí)，將藥液上清液通過大孔樹脂吸附，流速為每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過大孔樹脂之后，先用水沖洗樹脂固定床，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用30%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫成分主要為少量黃酮和大量雜質(zhì)，因?yàn)楹罄m(xù)精制成本大且有效成分含量低，故棄去不用。最后使用90%的高濃度乙醇溶液洗脫大孔樹脂固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.36。本步驟中，可以使用HPD系列和D101，D201等大孔樹脂。本工藝采用自制大孔樹脂F(xiàn)DS(另專利申報(bào)，標(biāo)準(zhǔn)達(dá)到用于藥用和食用的樹脂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn))，故相對(duì)成本較低。(3)聚酰胺樹脂吸附精制在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將(2)中制得的三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，濃縮藥液通過聚酰胺樹脂固定床反應(yīng)器，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用10%到90%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，可以根據(jù)后續(xù)工藝要求制備不同劑型的獨(dú)一味藥品。利用步驟1得到的獨(dú)一味活性成分的提取物干粉，可以按照常規(guī)的藥劑學(xué)生產(chǎn)方法，將提取物與輔料相混合，經(jīng)過適當(dāng)工藝，可以制備以下劑型步驟2.多種獨(dú)一味藥物劑型的制備A.已經(jīng)成功開發(fā)和上市銷售的劑型(1)軟膠囊制備獨(dú)一味軟膠囊的輔料為聚乙二醇400和甘油。其中輔料和獨(dú)一味干粉的比例如下獨(dú)一味干粉聚乙二醇400:甘油=80:160:1。軟膠囊膠皮配方比例如下明膠100g，甘油50g,純化水100g，聚乙二醇4005g，尼泊金乙酯0.1g，巧克力棕0.2g，鈦白粉0,2g，木糖醇2g，山梨醇10g。^聚乙二醇400為基質(zhì)加熱融化后加入甘油和獨(dú)一味干粉并混合攪拌均勻，填充進(jìn)膠皮，壓制得到獨(dú)一味軟膠囊。B.已經(jīng)進(jìn)行研究并取得實(shí)驗(yàn)室成果，即將投入工業(yè)生產(chǎn)和上市銷售的劑型(2)膠囊劑將步驟1中制得的獨(dú)一味干粉與適量的稀釋劑，崩解劑，增溶劑，包衣劑混合均勻后，使用干法制粒機(jī)制得顆粒，過篩后包衣，裝填膠囊，制得膠囊劑。其中稀釋劑可以選用乳糖，甘露醇，山梨醇或木糖醇；增溶劑可以選用PEG-2000,PEG-4000或PEG-6000;崩解劑可以選用甲基纖維素鈉或羧甲基淀粉鈉；包衣劑可以選用歐巴代AMB或尤特奇EPO。以1000粒膠囊劑為例，其中各組分含量如下-<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>(3)微丸劑將步驟1中制得的獨(dú)一味干粉與微晶纖維素混合，加入L-HPC溶液做粘合劑和水做潤濕劑，于造粒機(jī)中制丸并包衣，制得微丸劑。經(jīng)過上述方法制得獨(dú)一味活性成分提取物的各劑型藥物，主要用于外科手術(shù)后止血鎮(zhèn)痛，以及由于其他疾病所引起的出血和疼痛等。相對(duì)于傳統(tǒng)的獨(dú)一味活性成分提取物的制備工藝，本發(fā)明具有以下顯著特點(diǎn)(1)經(jīng)過藥效學(xué)和毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本發(fā)明制得的獨(dú)一味活性成分提取物具有良好的止血鎮(zhèn)痛，活血化瘀和消炎作用并且毒副作用小。(2)本發(fā)明采用水提和大孔樹脂，聚酰胺樹脂精致相結(jié)合的辦法，使得獨(dú)一味提取物中總黃酮的有效含量大大增高。利用本發(fā)明制備的獨(dú)一味藥劑含有重量比為20-90%的總黃酮成分，最優(yōu)選為重量比30-60%的總黃酮成分，相比同類產(chǎn)品有很大提高。(3)本發(fā)明采用多個(gè)精制步驟，一定程度上增加了總生產(chǎn)成本，但是由于采用符合藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的自制大孔樹脂F(xiàn)DS為原料。綜合活性成分大幅度提高的有利因素，本專利制備的獨(dú)一味藥物性價(jià)比遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于同類產(chǎn)品。綜合(2)和(3)，本發(fā)明是一種優(yōu)質(zhì)高效的獨(dú)一味活性成分提取物制備工藝。為了驗(yàn)證本發(fā)明得到的獨(dú)一味制劑所具有的藥學(xué)性能，本發(fā)明采用小鼠為動(dòng)物模型進(jìn)行了以下幾個(gè)方面的藥效學(xué)研究。一.鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)1.小鼠醋酸扭體法動(dòng)物模型昆明種小鼠，體重19-24克，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)藥物獨(dú)一味提取物A，B，C,D，E，P(其中P為用于后續(xù)藥品生產(chǎn)的獨(dú)一味干粉規(guī)格)，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0%，20%，40%,60%,80%，71%，實(shí)驗(yàn)時(shí)按照50mg(提取物重量)/kg(小鼠體重)給藥。選用蒸餾水作為空白對(duì)照，選用鹽酸曲馬多(北京某廠出品)片為陽性對(duì)照物。使用藥用蒸餾水配置成lmg/ml鹽酸曲馬多溶液，給藥量為10mg/ml。實(shí)驗(yàn)方法選取96只昆明種小鼠，雌雄各48只，體重為19-24克。隨機(jī)分為8個(gè)組，每組12只，分別為空白對(duì)照組，陽性對(duì)照組，受試物六個(gè)組。以灌胃的方式分別給藥一次。一小時(shí)后，向各組小鼠分別腹腔注射6mol/L的醋酸溶液10ml/kg(小鼠體重)。開始計(jì)時(shí)，記錄潛伏期時(shí)間和15分鐘內(nèi)的扭體次數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表l.表1.獨(dú)一味提取物對(duì)小鼠醋酸扭體的影響(5±SD,PO.05)實(shí)驗(yàn)組小鼠數(shù)目給藥劑量(g/kg)潛伏期扭體次數(shù)鎮(zhèn)痛率空白對(duì)照120900±023±60鹽酸曲馬多120.01220±1090±0100獨(dú)一味提取物干粉A(黃酮含量0%)120.05619±20121±88.70獨(dú)一味提取物干粉B(黃酮含量20%)120.05619±23414±739.13獨(dú)一味提取物干粉C(黃酮含量40%)120.05701±26712±647.83獨(dú)一味提取物干粉D(黃酮含量60%)120.05778±3019±560.87獨(dú)一味提取物干粉E(黃酮含量80%)120.05823±3426±473.91獨(dú)一味提取物干粉P120.05763±2808±565.27實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明獨(dú)一味提取物可以明顯減少由于醋酸引起的小鼠腹痛產(chǎn)生的扭體次數(shù)。并且鎮(zhèn)痛作用與獨(dú)一味提取物中總黃酮含量有關(guān)系，隨著總黃酮含量增大，鎮(zhèn)痛作用越明顯。2.熱板法動(dòng)物模型昆明種小鼠，體重19-24克，痛閾值在5-30S，全部雄性。實(shí)驗(yàn)藥物獨(dú)一味提取物A，B，C，D，E，P(其中P為用于后續(xù)藥品生產(chǎn)的獨(dú)一味干粉規(guī)格)，分別含總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0%，20%，40%，60%，80%，71%，試驗(yàn)時(shí)按照50mg(提取物重量)/kg(小鼠體重)給藥。選用蒸餾水作為空白對(duì)照，選用鹽酸曲馬多(北京某廠出品)片為陽性對(duì)照物。使用蒸餾水配置成1mg/ml鹽酸曲馬多溶液，給藥量為10mg/kg(小鼠體重)。實(shí)驗(yàn)方法選取96只昆明種小鼠，全部雄性，體重為19-24克。隨機(jī)分為8個(gè)組，每組12只，分別為空白對(duì)照組，陽性對(duì)照組，受試物六個(gè)組。以灌胃的方式分別給藥一次。分別于一小時(shí)，兩小時(shí)，三小時(shí)后測定各組試驗(yàn)鼠的痛閾值，每組數(shù)據(jù)各測量三次取平均值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2.表2.熱板法測定獨(dú)一味提取物對(duì)小鼠的止痛作用(c±SD,P<0.05)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>獨(dú)一味提取物干粉P120.0531.4±13.229.8±11.128.0±10.9實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣說明獨(dú)一味提取物可以減輕熱板法中小鼠的痛閾值，有效地說明了獨(dú)一味提取物的鎮(zhèn)痛作用。并且隨著獨(dú)一味提取物中總黃酮含量的升高，鎮(zhèn)痛作用更加明顯。二.止血試驗(yàn)剪尾法動(dòng)物模型昆明種小鼠，體重19-24克，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)藥物獨(dú)一味提取物A,B，C，D，E，P(其中P為用于后續(xù)藥品生產(chǎn)的獨(dú)一味干粉規(guī)格)，分別含總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0%，20%，40%，60%，80%，71%，試驗(yàn)時(shí)按照50mg(提取物重量)/kg(小鼠體重)給藥。選用蒸餾水作為空白對(duì)照。實(shí)驗(yàn)方法選取84只昆明種小鼠，雌雄各42只，體重為19-24克。隨機(jī)分為7個(gè)組，每組12只，分別為空白對(duì)照組，受試物六個(gè)組。連續(xù)給藥7天后測定鼠尾原始長度并記錄，一小時(shí)后將鼠尾距末端3mm處剪斷，從血液溢出時(shí)開始計(jì)時(shí)，每隔一分鐘用濾紙吸去溢出血液，直至自然停止溢出。統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)組出血時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3.表3.剪尾法中獨(dú)一味提取物對(duì)小鼠出血時(shí)間的影響G±SD,P<0.05)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣說明獨(dú)一味提取物可以顯著減少小鼠的凝血時(shí)間，有效地說明了獨(dú)一味提取物的止血作用。也間接說明了獨(dú)一味的止血作用與總黃酮含量相關(guān)聯(lián)，總黃酮含量高的提取物的止血作用更加明顯。綜上所述，本發(fā)明的顯著特點(diǎn)在于-1.本發(fā)明制得的獨(dú)一味提取物干粉及后續(xù)開發(fā)的各種制劑相比傳統(tǒng)的提取工藝，顯著地了提高了總黃酮的含量，使得有效成分更加富集，提高了藥物療效。2.本發(fā)明相比傳統(tǒng)的水提工藝之外，還采用了大孔樹脂和聚酰胺樹脂精制的步驟，雖然總成本相應(yīng)增加，但是經(jīng)過成本計(jì)算，本發(fā)明制得的獨(dú)一味藥物實(shí)際性價(jià)比遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于采取單一提取步驟的同類產(chǎn)品。3.本發(fā)明制得的獨(dú)一味提取物經(jīng)過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，被證明具有顯著的鎮(zhèn)痛和止血效果，可以用于外科手術(shù)后的出血以及各種疼痛。4.本發(fā)明提供了一種可以用于工業(yè)化批量生產(chǎn)的獨(dú)一味活性成分提取方法。具體實(shí)施方式以下通過具體的例子進(jìn)一步闡述本發(fā)明的具體實(shí)施過程實(shí)施例1:采集原料藥材獨(dú)一味1000g，洗凈烘干，碾磨成為小顆粒，與水按照1:9的質(zhì)量比例于70'C提取三次，每次1小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，密度約為1.30。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇，持續(xù)攪拌至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇，再減壓濃縮，得到相對(duì)密度約為1.25的二次浸膏，即獨(dú)一味的粗提取物。在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充大孔樹脂F(xiàn)DS，用水平衡固定床。將獨(dú)一味粗提物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.20，4000rpm離心半小時(shí)，將藥液上清液通過固定床吸附，流速為每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過固定床之后，先用水沖洗，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用30%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫液棄去不用。最后使用卯％的高濃度乙醇溶液洗脫固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.36。在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，通過聚酰胺固定床，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用10%到90%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，總黃酮含量為65%。實(shí)施例2:采集原料藥材獨(dú)一味1000g，洗凈烘干，碾磨成為小顆粒，與水按照1:8的質(zhì)量比例于60°C提取三次，每次2小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，密度約為1.33。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇，持續(xù)攪拌至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇，再減壓濃縮，得到相對(duì)密度約為1.27的二次浸膏,即獨(dú)一味的粗提取物。在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充D101大孔樹脂，用水平衡固定床。將獨(dú)一味粗提物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.24，4000rpm離心半小時(shí)，將藥液上清液通過固定床吸附，流速為每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過固定床之后，先用水沖洗，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用40%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫液棄去不用。最后使用85%的高濃度乙醇溶液洗脫固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.39。在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，通過聚酰胺固定床，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用10%到90%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，總黃酮含量為57%。實(shí)施例3:'采集原料藥材獨(dú)一味1000g，洗凈烘干，碾磨成為小顆粒，與水按照l:10的質(zhì)量比例于75'C提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，.密度約為1.27。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇，持續(xù)攪拌至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇，再減壓濃縮，得到相對(duì)密度約為1.22的匕次浸膏,即獨(dú)一味的粗提取物。在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充D201大孔樹脂，用水平衡固定床。將獨(dú)一味粗提取物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.17，4000rpm離心半小時(shí)，將藥液上清液通過固定床吸附，流速A每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過固定床之后，先用水沖洗，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用30%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫液棄去不用。最后使用90%的高濃度乙醇溶液洗脫固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.32。在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，通過聚酰胺固定床，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用10%到90%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，總黃酮含量為69%。實(shí)施例4:采集原料藥材獨(dú)一味1000g，洗凈烘干，碾磨成為小顆粒，與水按照1:6的質(zhì)量比例于50°C提取三次，每次1小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，密度約為1.40。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇，持續(xù)攪拌至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇，再減壓濃縮，得到相對(duì)密度約為1.35的二次浸膏,即獨(dú)一味的粗提取物。在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充D201大孔樹脂，用水平衡固定床。將獨(dú)一味粗提物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.30，4000ipm離心半小時(shí)，將藥液上清液通過固定床吸附，流速為每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過固定床之后，先用水沖洗，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用30%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫液棄去不用。最后使用80%的高濃度乙醇溶液洗脫固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.39。在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，通過聚酰胺固定床，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用20%到80%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，總黃酮含量為58%。實(shí)施例5:采集原料藥材獨(dú)一味1000g，洗凈烘干，碾磨成為小顆粒，與水按照l:11的質(zhì)量比例于85°C提取三次，每次1.5小時(shí)，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏，密度約為1.23。加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80Q/。的乙醇，持續(xù)攪拌至浸膏溶解，靜置過夜后過濾?；厥諡V液中的乙醇，再減壓濃縮，得到相對(duì)密度約為1.20的二次浸膏,即獨(dú)一味的粗提取物。在固定床反應(yīng)器內(nèi)填充FDS大孔樹脂，用水平衡固定床。將獨(dú)一味粗提物溶于水得到藥液，相對(duì)密度約為1.23，4000rpm離心半小時(shí)，將藥液上清液通過固定床吸附，流速為每小時(shí)3倍固定床體積，待濾液全部通過固定床之后，先用水沖洗，除去吸附較弱的雜質(zhì)。之后換用20%的乙醇溶液等流速洗脫，洗脫液棄去不用。最后使用90%的高濃度乙醇溶液洗脫固定床，收集洗脫液，回收乙醇。將剩余部分濃縮，制得三次浸膏，密度約為1.37。在次級(jí)固定床反應(yīng)器內(nèi)填充聚酰胺樹脂，用水平衡次級(jí)固定床。將三次浸膏溶于少量水形成濃縮藥液，通過聚酰胺固定床，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用10%到90%的乙醇溶液梯度洗脫，收集40%到80%的洗脫液，合并，回收乙醇溶劑。經(jīng)過噴霧干燥，收集干'燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味活性成分的終提取物干粉，總黃酮含量為68%。實(shí)施例6:取實(shí)施例1方法制得的獨(dú)一味提取物lkg，聚乙二醇4002kg，甘油10g，混勻后制得獨(dú)一味軟膠囊內(nèi)容物。明膠lkg，甘油0.5kg，純化水lkg，聚乙二醇40050g，尼泊金乙酯lg，巧克力棕2g，鈦白粉2g，木糖醇20g，山梨醇0.1kg壓制成為軟膠囊殼。填充內(nèi)容物，制備獨(dú)一味提取物軟膠囊制劑。實(shí)施例7:取實(shí)施例1方法制得的獨(dú)一味提取物lkg，聚乙二醇4002.5kg，甘油20g，混勻后制得獨(dú)一味軟膠囊內(nèi)容物。明膠lkg,甘油lkg，純化水lkg，聚乙二醇40040g，尼泊金乙酯2g，巧克力棕lg，鈦白粉lg，木糖醇10g，山梨醇0.2kg壓制成為軟膠囊殼。填充內(nèi)容物，制備獨(dú)一味提取物軟膠囊制劑。實(shí)施例8:以50mg規(guī)格的膠囊1000片計(jì)，獨(dú)一味提取物膠囊的制備組分包含獨(dú)一味提取物干粉50g，乳糖100g，羧甲基淀粉鈉10g，PEG-600010g和5Q/Q的歐巴代AMB。制作過程如下先于歐巴代AMB中加入純水，制成濃度為5^的歐巴代AMB溶液備用。再將獨(dú)一味干粉，乳糖和PEG-6000混合均勻后用干法制粒機(jī)制備顆粒，過20-50目篩，其余物料繼續(xù)用于制粒。將篩選出來的20-50目顆粒進(jìn)行包衣，制粒和包衣過程控制相對(duì)濕度小于40%。包衣后填充膠囊，制得獨(dú)一味提取物膠囊制劑。實(shí)施例9:以50mg規(guī)格的膠囊1000片計(jì)，獨(dú)一味提取物膠囊的制備組分包含獨(dú)一味提取物干粉50g，山梨醇100g，甲基纖維素鈉10g，PEG-400010g和5%的尤特奇EPO。制作過程如下先于尤特奇EPO中加入純水，制成濃度為5。/。的尤特奇EPO溶液備用。再將獨(dú)一味干粉，山梨醇和PEG-4000混合均勻后用干法制粒機(jī)制備顆粒，過20-50目篩，其余物料繼續(xù)用于制粒。將篩選出來的20-50目顆粒進(jìn)行包衣，制粒和包衣過程控制相對(duì)濕度小于40%。包衣后填充膠囊，制得獨(dú)一味提取物膠囊制劑。實(shí)施例10:取實(shí)施例1方法制得的獨(dú)一味提取物與微晶纖維素按照3:.1的質(zhì)量比混合，添加水和濃度為1。/o的L-HPC。調(diào)整造粒機(jī)轉(zhuǎn)速至200r/min，供粉機(jī)轉(zhuǎn)速至20r/min，載氣流量為10L/min，載氣壓力0.5MPa，鼓風(fēng)流量為10x20L/min，出漿時(shí)間6min，滾圓時(shí)間6min，制備獨(dú)一味微丸劑。實(shí)施例11:取實(shí)施例1方法制得的獨(dú)一味提取物與微晶纖維素按照4:1的質(zhì)量比混合，添加水和濃度為P/。的L-HPC。調(diào)整造粒機(jī)轉(zhuǎn)速至300r/min，供粉機(jī)轉(zhuǎn)速至30r/min，載氣流量為20L/min，載氣壓力0.5MPa，鼓風(fēng)流量為15x20L/min，出漿時(shí)間5min，滾圓時(shí)間5min，制備獨(dú)一味微丸劑。權(quán)利要求1.一種獨(dú)一味提取物干粉，是從植物獨(dú)一味全草或莖葉中制備獲得的提取物。其特征在于制備過程中，總黃酮的百分含量經(jīng)水提后可以達(dá)到20％以上，經(jīng)大孔樹脂吸附分離可以達(dá)到60％以上，再經(jīng)過聚酰胺吸附精致可以達(dá)到90％以上。干粉可以用于后續(xù)制劑工藝，可以制成藥劑學(xué)上所有可以接受和應(yīng)用的劑型，包括軟膠囊，膠囊，微丸劑等。2.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(1)制備獨(dú)一味粗提物采集原料藥材獨(dú)一味的全草或莖葉，洗凈后烘干，碾磨成微小顆粒，與水混合后提取三次，過濾，合并提取液。減壓濃縮，制得浸膏。再加入髙濃度乙醇，溶解浸膏，靜置過濾。即得到獨(dú)一味的粗提物。(2)大孔樹脂精制將(1)中制得的獨(dú)一味粗提物溶于水后離心，將上清液通過大孔樹脂吸附，之后先用水沖洗樹脂除去吸附較弱的雜質(zhì)。然后換用低濃度乙醇溶液洗脫，洗脫成分棄去不用。最后使用高濃度乙醇溶液洗脫，收集洗脫液濃縮，再次制得浸膏。(3)聚酰胺樹脂精制將(2)中制得的浸膏溶于少量水形成濃縮藥液后通過聚酰胺樹脂，先用水沖洗雜質(zhì)，之后換用乙醇溶液從低濃度到高濃度梯度洗脫，收集中等和較高濃度的洗脫液，合并后經(jīng)過噴霧干燥，收集干燥粉，過篩，即可得到中藥獨(dú)一味富含總黃酮的終提物干粉。3.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(l)步水提中所用藥材和水的質(zhì)量比介于l:6禾B1:ll之間，其中最合適比例為l:8禾U1:IO之間。4.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(l)步水提后加入高濃度乙醇靜置過濾?！?.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(l)步得到的浸膏可以采用大孔樹脂吸附和聚酰胺樹脂吸附，選用是中低極性的大孔樹脂。盛放填料的裝置可以為固定床反應(yīng)器或者樹脂柱。6.按照權(quán)利要求l所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(2)步中將獨(dú)一味藥液采用大孔樹脂吸附后，使用低濃度的乙醇溶液洗脫吸附的雜質(zhì)。7.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(2)步中將使用低濃度乙醇洗脫雜質(zhì)后，再使用高濃度的乙醇溶液洗脫，并收集洗脫組分。8.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味提取物干粉，其特征在于(3)步中將獨(dú)一味藥液采用聚酰胺樹脂吸附并用水洗脫雜質(zhì)后，使用由低濃度到高濃度的乙醇溶液梯度洗脫，并收集高濃度洗脫組分。9.按照權(quán)利要求l所述的獨(dú)一味提取物干粉的應(yīng)用，將獨(dú)一味提取物干粉用于制備各種獨(dú)一味制劑，其特征在于制備的獨(dú)一味制劑具有良好的止血鎮(zhèn)痛，活血化瘀和消炎作用并且含有臨床上滿足有效劑量的上述獨(dú)一味提取物。10.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味軟膠囊制劑的制備方法，其特征在于以聚乙二醇400和甘油作為輔料，其中獨(dú)一味干粉聚乙二醇400:甘油=80:160:1;將聚乙二醇400為基質(zhì)加熱融化后加入甘油和獨(dú)一味干粉并混合攪拌均勻，填充進(jìn)膠皮，壓制得到獨(dú)一味軟膠囊制劑。11.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味膠囊制劑的制備方法，其特征在于稀釋劑可以選用乳糖，甘露醇，山梨醇或木糖醇，增溶劑可以選用PEG-2000，PEG4000或PEG-6000，崩解劑可以選用甲基纖維素鈉或羧甲基淀粉鈉，包衣劑可以選用歐巴代AMB或尤特奇EPO。以50mg規(guī)格的膠囊1000片計(jì)，獨(dú)一味提取物膠囊的制備組分包含獨(dú)一味提取物干粉50g，稀釋劑約100g，崩解劑約10g,分散劑約10g和濃度約為5Q/。的包衣劑。制作過程如下先制備濃度約為5%的包衣劑溶液。再將獨(dú)一味干粉，稀釋劑和崩解劑混合均勻后用干法制粒機(jī)制備顆粒，過20-50目篩，其余物料繼續(xù)用于制粒。將篩選出來的20-50目顆粒進(jìn)行包衣，制粒和包衣過程控制相對(duì)濕度小于40%。包衣后填充膠囊，制得獨(dú)一味提取物膠囊制劑。12.按照權(quán)利要求1所述的獨(dú)一味微丸劑的制備方法，其特征在于按照權(quán)利要求4制備的獨(dú)一味干粉中添加三分之一量的微晶纖維素，水和1%的L-HPC，出漿，制丸，滾圓并包衣，制備獨(dú)一味微丸劑。全文摘要本發(fā)明公開了獨(dú)一味總黃酮活性成分的提取工藝和用途，以及由提取物制備的多種劑型的獨(dú)一味藥物。本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明將水提和大孔樹脂吸附精致，聚酰胺樹脂吸附精制相結(jié)合，從而克服現(xiàn)有制劑總黃酮成分含量偏低，產(chǎn)品性價(jià)比低等缺點(diǎn)。得到的提取物中，總黃酮的含量經(jīng)水提可以達(dá)到20％以上，經(jīng)大孔樹脂吸附分離后可以達(dá)到60％以上，再經(jīng)過聚酰胺吸附精致后可以達(dá)到90％以上。本發(fā)明得到的提取物可以根據(jù)需要，開發(fā)成多種劑型。經(jīng)過藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本發(fā)明得到的獨(dú)一味提取物具有良好的止血鎮(zhèn)痛，活血化瘀和消炎作用?？傸S酮含量大幅提高，性價(jià)比遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于市場上其他獨(dú)一味同類藥品。本發(fā)明的原理和步驟也普遍適用于其他含總黃酮植物的制備和應(yīng)用。文檔編號(hào)A61K9/48GK101269114SQ20081006873公開日2008年9月24日申請(qǐng)日期2008年4月30日優(yōu)先權(quán)日2008年4月30日發(fā)明者路祖強(qiáng)申請(qǐng)人:貴州地道藥業(yè)有限公司