專(zhuān)利名稱(chēng)：放射性標(biāo)記方法
》文射性標(biāo)記方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及放射性診斷和放射性治療的試劑，包括用放射性核素 標(biāo)記的生物活性載體。本發(fā)明還涉及對(duì)載體例如肽進(jìn)4亍標(biāo)記的方法和 試劑。所得的標(biāo)記結(jié)合物可用作診斷試劑，例如，用作放射性藥物，
更特別地，用于正電子發(fā)射斷層掃描(PET , Positron Emission Tomography)或單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描(SPECT, Single Photon Emission Computed Tomography)或用于放射性治療中。
用來(lái)診斷成像的方文射性標(biāo)記的生物活性肽的應(yīng)用在核醫(yī)學(xué)中正 變得日益重要。生物活性分子，其與特定細(xì)胞種類(lèi)選擇性地相互作用， 可用于向靶組織傳遞放射性。例如，在向肺瘤、梗塞和感染組織傳送 ;故射性核素以進(jìn)行診斷成像和放射性治療方面，放射性標(biāo)記的肽具有 重要的潛能。半衰期約為110分鐘的"F是多種受體成像研究所選擇 的正電子發(fā)射核素。因此，由于"F標(biāo)記的生物活性肽在PET中的效 用，所以它在定量檢測(cè)和表征多種疾病方面具有重要的臨床潛能。其 它有效的放射性核素包括UC,放射性碘例如125I、 123I、 124I、 131I和 99mTc。
迄今為止，快速并且普遍適用的肽和生物分子標(biāo)記方法的缺乏已 經(jīng)阻礙了肽和生物分子作為診斷試劑的應(yīng)用。例如，幾乎所有現(xiàn)在正 使用的用18F標(biāo)記肽和蛋白質(zhì)的方法都利用了氟標(biāo)記的合成子 (synthon)的活性酯。由于肽和蛋白質(zhì)可能含有多個(gè)能夠與活性酯反應(yīng) 的官能基團(tuán)，所以這些當(dāng)前使用的方法不是位點(diǎn)特異性的。例如，含 有三個(gè)賴(lài)氨酸殘基的肽具有三個(gè)全部對(duì)標(biāo)記的合成子具有相等反應(yīng) 性的胺官能團(tuán)。因此，仍然存在對(duì)標(biāo)記試劑例如18F標(biāo)記的輔基 (prosthetic groups)和方法的需要，所述標(biāo)i己i式劑和方法允i午在溫和的 條件下快速、化學(xué)選擇性地將標(biāo)記例如放射性核素，如18F,特別引 入到肽中，從而得到高放射化學(xué)產(chǎn)率和純度的標(biāo)記的產(chǎn)品。另外，需 要這種順從于自動(dòng)化操作以便在臨床環(huán)境(clinical setting)中便于制備 診斷劑的方法。
本發(fā)明提供了一種標(biāo)記載體的方法，該方法包括，在Cu(I)催化劑 存在的情況下，使式(I)的化合物與式(II)的化合物反應(yīng)lu4
載體
R*-L2 -CO-
OI)
或者，
使式(III)的化合物與式(IV)的化合物反應(yīng)
O—N三C——L3_
載體
(III)
(IV)
其中，Ll、 L2、 L3和L4每一個(gè)都是連接基團(tuán) 11*是包括放射性核素的報(bào)告基團(tuán)部分； 以便分別得到式(V)或(VI)的結(jié)合物
N
R*—L2
一O
,LlH載體
(V)
L4-R*
其中，Ll、 L2、 L3、 L4和R'的定義同上。
連接基團(tuán)Ll、 L2、 L3和L4每一個(gè)獨(dú)立地為Q.6o的烴基，合適 地為C!.30的烴基，任選地包括1-30個(gè)雜原子，合適地包括1-10個(gè)雜 原子例如氧或氮。合適的連接基團(tuán)包括烷基、烯基(alkenyl)、炔基鏈、 芳香族、聚芳香族和雜芳香族環(huán)，其中任一種可以任選地用例如一個(gè) 或多個(gè)醚、硫醚、磺酰胺或酰胺官能團(tuán)、以及含有乙二醇、氨基酸或 碳水化合物亞基(carbohydrate subunits)的單體和聚合物取代。
體
載
3
L
N-o術(shù)語(yǔ)"烴基"的意思是由碳和氫構(gòu)成的有機(jī)取代基，這樣的基團(tuán)可 以包括飽和、不飽和或芳香族的部分。
可以選擇連接基團(tuán)Ll、 L2、 L3和L4以便提供良好的體內(nèi)藥物代 謝動(dòng)力學(xué)，例如所得的式(V)或(VI)化合物的有利的排泄特征。使用具 有不同親油性和/或電荷的連接基團(tuán)能夠顯著改變肽的體內(nèi)藥物代謝 動(dòng)力學(xué)以適應(yīng)診斷需要。例如，當(dāng)希望式(V)或(VI)的化合物通過(guò)腎排 泄從體內(nèi)清除時(shí)，使用親水連接子，當(dāng)希望通過(guò)肝膽排泄從體內(nèi)清除 時(shí)，使用疏水連接子。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，含有聚乙二醇部分的連接子減緩了 血液清除率，這在某些情況下是所期望的。
11*是含有放射性核素例如正電子發(fā)射放射性核素的報(bào)告基團(tuán)部 分。用于這一目的的合適的正電子發(fā)射放射性核素包括"C、 18F、 75Br、 76Br、 124I、 82Rb、 68Ga、 64Cu和62Cu，其中優(yōu)選"C和，。其他有用 的放射性核素包括123I、 125I、 131I、 2I1At、 "，c和川In。金屬放射性 核素通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如經(jīng)過(guò)直接合并被合適地結(jié) 合到螯合劑中。金屬報(bào)告基團(tuán)的螯合優(yōu)選在式(I)或式(IV)的化合物與 式(II)或式(III)的化合物反應(yīng)之前實(shí)行，以便避免Cu(I)催化劑的螯合。
在R*中含有的合適的螯合劑包括式X的那些
其中
毎個(gè)R'a、 R2A、 r3a和R"獨(dú)立地為RA基團(tuán)；
每個(gè)ra基團(tuán)獨(dú)立地為H或Cwo烷基、Cw。烷基芳基、Cw。烷氧 基烷基、Cw。羥烷基、Cwo烷基胺、d.1()氟烷基、或2個(gè)或更多RA 基團(tuán)和它們連接的原子一起形成碳環(huán)、雜環(huán)、飽和或不飽和的環(huán)，
或者r;可以含有式(i )、 (ii)、 (iii)、 (iv)給出的螯合劑(V)
在室溫下，在接近中性pH的含水條件下，可以對(duì)含有式X的螯 合劑的式(II)或(IV)的化合物進(jìn)行放射性標(biāo)記，以得到良好的放射化學(xué) 純度(RCP, radiochemical purity)。
在式(I)和(III)中以及在本發(fā)明的其它方面，除非另外特別的聲明， 用于標(biāo)記的合適的載體為肽，肽可以包括生長(zhǎng)素抑制素(somatostatin) 類(lèi)似物，例如奧曲肽(octreotide)、韓蛙皮素(bombesin)、血管活性腸肽 (vasoactive intestinal peptide)、趨化性肽(chemotactic peptide)類(lèi)似物、a-促黑素纟田月包;敫素(a-melanocyte stimulating hormone) 、 3申經(jīng)力口壓素 (neurotensin)、 Arg-Gly-Asp肽、人前胰島素連接肽(human pro-insulin
10connecting peptide)、胰島素(insulin)、內(nèi)皮縮血管肽(endothelin)、血管 緊張肽(angiotensin)、緩激肽(bradykinin)、內(nèi)皮抑素(endostatin)、血管 抑素(angiostatin)、谷胱甘肽(glutathione)、降血鈣素(calcitonin)、爪蟾 抗菌肽(Magainin)I和II、黃體生成素釋放激素(luteinizing hormone releasing hormone)、促胃液素(gastrins)、月旦嚢4丈縮素(cholecystochinin)、 P物質(zhì)、血管加壓素(vasopressin)、曱酰-正亮氨酰-亮氨酰-苯丙氨酰-正亮氨酰-酪氨酰-賴(lài)氨酸、膜聯(lián)蛋白(Annexin)V類(lèi)似物、血管活性蛋 白-l(VAP-l, Vasoactive Protein-1)肽和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (caspase)肽底物。用于標(biāo)記的優(yōu)選的肽是Arg-Gly-Asp肽及其類(lèi)似物， 例如在WO 01/77415和WO 03/006491中描述的那些，優(yōu)選含有下面 的片段的肽
更優(yōu)選式(A)的肽:
其中X7是-NH2或卜HN0o O0。 N^po^^剛2
o o
其中a是1至10的整數(shù)，優(yōu)選a為1。
如技術(shù)人員所了解，本發(fā)明的方法也可以用于其它生物分子例如 蛋白質(zhì)、激素、聚糖、低聚核苷酸和抗體片段、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒， 以及小的類(lèi)藥分子的放射性標(biāo)記，以提供各種診斷劑。在式(I)和式(III) 中以及在本發(fā)明的其它方面，除非另外特別聲明，用于放射性標(biāo)記的 特別合適的載體為肽、蛋白質(zhì)、激素、細(xì)胞、細(xì)菌、病毒以及小的類(lèi) 藥分子。
的化合物的反應(yīng)可以在合適的溶劑中例如乙腈、Cm坑基醇、二曱基 酰胺、四氫吹喃或二曱基亞砜、或者它們?nèi)魏蔚暮旌衔?、或者?水中進(jìn)行，并且在5-100。C的非極端溫度下，優(yōu)選在室溫下進(jìn)行。Cu(I) 催化劑以足夠反應(yīng)進(jìn)行的量存在，典型地為催化量或過(guò)量，例如相對(duì) 于式(I)或式(III)的化合物的0.02-1.5摩爾當(dāng)量。
合適的Cu(I)催化劑包括Cu(I)鹽，例如Cul、 CuOTf.C6H6或 [Cu(NCCH3)4][PF6]，但是，有利地，在還原劑例如抗壞血酸或其鹽例 如抗壞血酸鈉、氬醌、醌、金屬銅、谷胱甘肽、半胱氨酸、Fe^或Co2+ 存在的情況下，可以使用Cu(II)鹽例如硫酸銅(II)。 Cu(I)還固有地存在 于元素銅粒子的表面，因此元素銅，例如粉末或顆粒形式的元素銅， 也可以用作催化劑。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，使用具有可控粒徑的Cu(I)催化劑， 特別是元素銅，會(huì)導(dǎo)致放射化學(xué)產(chǎn)率得到驚人的提高。因此，在本發(fā) 明的一個(gè)方面，Cu(I)催化劑，特別是元素銅，具有0.001至1 mm范 圍內(nèi)的斗立徑，優(yōu)選0.1 mm至0.7 mm，更優(yōu)選地，約0.4 mm。
本發(fā)明提供了 一種更具有化學(xué)選擇性的放射性標(biāo)記方法，其中在 肽或載體前體的合成過(guò)程中，預(yù)先選擇標(biāo)記引入的確切位置。在載體 中的預(yù)定位置發(fā)生的連接反應(yīng)(ligation reaction)給出了唯一可能的產(chǎn) 品。因此該方法是化學(xué)選擇性的，并且認(rèn)為其能廣泛應(yīng)用于各種肽、 生物分子和低分子量藥物。另外，炔官能團(tuán)在大多數(shù)反應(yīng)條件下是穩(wěn) 定的，并且與大多數(shù)常見(jiàn)的肽官能團(tuán)不反應(yīng)，因此減少了標(biāo)記合成過(guò)程中所需要的保護(hù)和去保護(hù)步驟。而且，在標(biāo)記反應(yīng)過(guò)程中形成的異 噁唑環(huán)不水解，并在氧化和還原時(shí)都非常穩(wěn)定，這意味著該標(biāo)記的載 體具有高的體內(nèi)穩(wěn)定性。在大小和極性上，異噁唑環(huán)與酰胺也是相匹
配的，以便標(biāo)記的肽或蛋白質(zhì)是其天然對(duì)應(yīng)物(counterparts)的良好仿 造物(mimics)。
其中載體為肽或蛋白質(zhì)的式(i)和(m)化合物可以通過(guò)肽合成的標(biāo)
準(zhǔn)方法制備，例如，固相肽合成，例如,在Atherton, e.和Sheppard, R.C.; "Solid Phase Synthesis(固相合成)"；IRL Press: Oxford, 1989中所描述
的。向式(i)或(ni)化合物中摻入炔或腈氧化物基團(tuán)可以通過(guò)肽的n或 c-末端的反應(yīng)或與肽序列中含有的一些其它官能團(tuán)的反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)，其 的修飾不影響載體的結(jié)合特性。優(yōu)選地，將炔基團(tuán)引入到式(i)的化合
物中，這是通過(guò)以下實(shí)現(xiàn)的形成穩(wěn)定的酰胺鍵，例如通過(guò)肽胺官能 與活性酸反應(yīng)或者備選地肽酸官能與胺官能反應(yīng)而形成的，并且在肽 合成期間或肽合成之后被引入?？捎糜谙蚴?I)的化合物中引入炔基團(tuán) 的合適的中間體包括
N、斧基一，芳基 廣,2
ii
廣 ii ii
-NH2 H2N、
糖
11 O
LNH2
6
芳基
CO2H R、
,C02H
,SO3H
HOzC、
SCN^
基
H2Nvc02H
ii
6
'NH
0=
ii
由于腈氧化物基團(tuán)的不穩(wěn)定性，所以這些最適合地，例如從相應(yīng) 醛或掩蔽的腈氧化物比如環(huán)狀亞硫酸酯，原位引入到式(III)的化合物中。
雜l
c、
c、
基
,芳-
13|_^L3 yHNH20H rarm^L3、、
sir it t~ 、
8 氯胺T 、0
hstl3y V。 ~~^sa^3
N—O 加熱 、0
在另一方面，本發(fā)明提供了新的輔基，其可用于，例如通過(guò)以上
所述的方法，標(biāo)記載體例如肽和蛋白質(zhì)。因此，提供了式(II)的化合物
R*-L2 -CSN+-CT (II)
其中L2是如上定義的連接基團(tuán)，lT是如上定義的報(bào)告基團(tuán)部分。 在本發(fā)明的這個(gè)方面的一個(gè)實(shí)施方式中，f是"F,使得輔基是式(IIa):
18F-L2 -CSN+-CT (lla)
其中L2是如上定義的連接基團(tuán)。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，提供式(II)的化合物，其中R+是18F, L2 是苯基；這種化合物根據(jù)以下方案是容易制備的
o
( HO CHO I +
1.H2NOH.HCI, NaOH N. 、 ， t<"^ 2. CAT
+ NMe3TfO- 18F 1 2
其中化合物1可以通過(guò)Haka等；J. Label. Compds, Radiopharm. 27, 823-833 (1989)的方法制備。
在本發(fā)明方法中可以使用的優(yōu)選的式(IV)的化合物包括
14另一方面，本發(fā)明提供了式(m)的化合物
<formula>formula see original document page 15</formula>
載體
更優(yōu)選地，式(A)的肽:
<formula>formula see original document page 15</formula>
其中L3是如上定義的連接基團(tuán)，載體如上定義。合適地，在本
發(fā)明的這個(gè)方面中，載體是肽或蛋白質(zhì)。 一組式(ni)的組合物是以下
那些，其中載體為Arg-Gly-Asp肽或其類(lèi)似物，例如WO 01/77415和 WO 03/006491中所描述的那些，優(yōu)選地含有如下片段的肽<formula>formula see original document page 15</formula>其中X 是-NH2或
"hHN0。 。0O l^o^rNH2
o o
其中a是l至10的整數(shù)，優(yōu)選a為1。式(V)和(VI)的這種化合物 可以用于與癌癥有關(guān)的病癥如血管生成的體內(nèi)成像。
其中f是18F的式(II)的化合物可以通過(guò)醛或掩蔽的腈氧化物例如
其中X7是-NH2或
—^。 。0。 !^。^^2
O o
其中a是l至10的整數(shù)，優(yōu)選a為l。所述式(III)的化合物可以 用做制備如下所述式(VI)的標(biāo)記的載體的前體。
在另 一個(gè)方面中，本發(fā)明提供了如上定義的式(V)和(VI)的標(biāo)記的 載體。優(yōu)選的式(V)和(VI)的化合物是以下那些，其中載體為 Arg-Gly-Asp肽或其類(lèi)似物，如在WO 01/77415和WO 03/006491中所 描述的那些，優(yōu)選地含有如下片段的肽
更優(yōu)選地，式(A)的肽:環(huán)狀亞硫酸酯的親電子或親核的[18F]氟化制備，例如:
其中，LG是如下所述的離去基團(tuán)，L2是如對(duì)式(II)化合物所定義的。
用于制備式(II)的化合物的合適的放射氟化方法包括在相轉(zhuǎn)移試 劑例如環(huán)聚醚例如18-冠-6和Kryptofix 2.2.2.存在的情況下，使摻入 離去基團(tuán)(例如烷基或芳基磺酸根，例如曱磺酸根、三氟曱基磺酸根或 曱苯磺酸根；硝基或三烷基季銨鹽)的醛或掩蔽的腈氧化物前體與['SF] 氟化物反應(yīng)。該反應(yīng)可以在本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下(例如M丄Welch 禾口 C.S. Redvanly的"Handbook of Radiopharmaceuticals (》文射'性藥4勿手 冊(cè))"，Wiley出版)，在溶液相中(使用質(zhì)子惰性溶劑例如乙腈作為溶劑) 進(jìn)行，或者使用WO 03/002157中所描述的方法，使用固體載體以便 于式(II)化合物的純化。
的方法由合適的乙炔前體制備。
式(II)和(IV)的化合物，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知方法，例如Jurisson 等[Chem. Rev.，祖2205-2218 (1999)], WO 91/01144，和US 4885363 中描述的方法制備，其中f包括如上所述的螯合劑，與金屬放射性核 素螯合或適于這種螯合作用。
本發(fā)明還提供了一種放射性藥物組合物，包括有效量(例如，有效 用于體內(nèi)成像，適合地PET或SPECT的量)的如上定義的通式(V)或(VI) 的化合物；和一種或多種藥學(xué)上可接受的助劑、賦形劑或稀釋劑。優(yōu) 選地，式(V)或(VI)化合物中的載體為Arg-Gly-Asp肽或其類(lèi)似物，如 上所述。
本發(fā)明的另 一個(gè)實(shí)施方式涉及一種如上定義的通式(V)或(VI)的 化合物，用于醫(yī)學(xué)用途，特別是用于體內(nèi)成像(合適地，通過(guò)PET或
苗述的那些類(lèi)似SPECT)。優(yōu)選地，式(V)或(VI)的化合物中的載體為Arg-Gly-Asp肽或
其類(lèi)似物，如上所述。
式(V)和(VI)的標(biāo)記的載體可以以足夠產(chǎn)生期望信號(hào)的量給藥于
病人用于體內(nèi)成像，用于PET或SPECT成像的典型的放射性核素的劑量為0.01至100 mCi，優(yōu)選地0.1至50mCi,這將通常是足夠的，按70kg體重計(jì)。
因此，以完全在本領(lǐng)域技術(shù)范圍內(nèi)的方式，使用生理上可接受的載體或賦形劑，可以配制式(V)或(VI)的標(biāo)記的載體以用于給藥。例如，可以將，任選地加入了藥學(xué)上可接受的賦形劑的，化合物懸浮或溶于水介質(zhì)中，然后對(duì)所得的溶液或懸浮液進(jìn)行滅菌。
從另 一個(gè)方面看，本發(fā)明提供了式(V)或(VI)的標(biāo)記的載體在制備用于體內(nèi)成像方法，合適地PET,的藥物中的用途；所述體內(nèi)成像方法包括將所述藥物向人或動(dòng)物體給藥并產(chǎn)生所述人或動(dòng)物體的至少一部分的影像。
從另一個(gè)方面看，本發(fā)明提供一種產(chǎn)生人或動(dòng)物體影像的方法，包括將藥物向所述人或動(dòng)物體，例如向血管系統(tǒng)給藥，和使用體內(nèi)成
至少一部分的影像，其中所述藥物含有式(V)或(VI)的標(biāo)記的載體。
從另 一個(gè)方面看，本發(fā)明提供了 一種監(jiān)測(cè)用對(duì)抗病癥的藥物治療人或動(dòng)物體的效果的方法，所述方法包括將式(V)或(VI)的標(biāo)記的載體向所述人或動(dòng)物體給藥，并檢測(cè)所述標(biāo)記的載體的吸收，所述給藥和檢測(cè)任選地但是優(yōu)選地反復(fù)進(jìn)行，例如在用所述藥物治療之前、期間和之后。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，提供了一種用于制備放射氟化示蹤劑的試劑盒，所述示蹤劑包括式(II)或(IV)的輔基或其前體以及式(I)或式(III)的化合物。
在試劑盒的使用中，使用上述方法，將前體化合物轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的式(II)或(IV)的化合物。式(II)或(IV)的化合物可以以未純化的形式使用，但是優(yōu)選地，通過(guò)使反應(yīng)混合物經(jīng)過(guò)固相萃取(SPE)筒、通過(guò)色譜、或者通過(guò)蒸餾，可以將式(II)和(IV)的化合物從反應(yīng)物廢料中分離出
來(lái)。然后將式(n)和(iv)化合物分別加入到式(i)和(m)化合物中，所述式(i)和(m)化合物可以適當(dāng)?shù)厝芙庠谌绫疚闹兴龅暮线m的溶劑中。
18在非極端溫度下反應(yīng)1至90分鐘后，可以對(duì)標(biāo)記的肽進(jìn)行純化，例
如通過(guò)SPE純化，和收集。
這里所述的化學(xué)方法也可以用于制備適于篩選it斷藥物或體內(nèi)成像試劑的放射性標(biāo)記的載體的庫(kù)。因此，使用上述方法可以使式(II)或(IV)的輔基的混合物與 一種或多種式(I)或(III)的化合物分別反應(yīng)，以產(chǎn)生放射性標(biāo)記的載體的庫(kù)。
實(shí)施例
本發(fā)明通過(guò)實(shí)施例來(lái)說(shuō)明，其中使用了如下縮寫(xiě):min: 分鐘
HPLC:高效液相色譜DMSO: 二甲基亞石風(fēng)
實(shí)施例l:p-^Fl氟苯曱醛(化合物2)的制備
氟-18是通過(guò)回旋加速器(cyclotron)利用180(p,n)18F反應(yīng)和180富集的水(30%)作為目標(biāo)材料而制備的。將含氟-18的水(370 MBq, lml)加入到Wheaton瓶(2 ml)中，該瓶裝有Kryptofix 222(10 mg， 27 pmol)、石友酸鉀(l mg， 7 nmol,溶于0.05ml水)和乙腈(0.8ml)。通過(guò)在氮?dú)饬?100ml/min)下在110 。C加熱30分鐘除去溶劑。加入無(wú)水乙睛(0.5ml),并再一次進(jìn)行如前的蒸發(fā)。重復(fù)該步驟兩次。將所述瓶冷卻到室溫，之后在無(wú)水DMSO(0.2ml)中注入化合物1的溶液[l mg, 3.14 jxmol，如S. M. Haka等，J. Label. Compds. Radiopharm. 27 (1989) 823所述制備的]。在80。C攪拌反應(yīng)混合物15分鐘。
p-「Fl氟芐腈N-氣化物(化合物3)的制備
向含化合物2的瓶中添加鹽酸羥胺(14.6 mg, 0.21mmol)/叔丁醇/水(1/1 v/v, 0.1ml)和氬氧化鈉(8.4 mg, 0.21 mmol)/水(0.1 ml)的溶液。在室溫下攪拌混合物30分鐘。緩慢加入氯胺-T三水合物(CAT, 59mg，0.21mmol)/水(0.1ml)溶液。該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5分鐘?；衔?未一皮分離。
『，13-(4-氟苯基)-5-苯基-異噁唑(化合物4)的制備
將苯乙炔(21 mg， 0.21 mmol)/叔丁醇(0.05ml)溶液和銅粉(5mg,顆
粒尺寸0.07 mm)力口入到含化合物3的反應(yīng)混合物中。在90。C攪拌15
分鐘之后，通過(guò)制備》文射HPLC分離化合物4。
實(shí)施例2: 「"F13-氟化丁炔(butynylfluoride)(化合物5)的制備如實(shí)施例1中所述，氟-18被制備并改性為KryptofD^絡(luò)合物。將p-曱苯磺酸3-丁炔基酯(化合物4,從Aldrich獲得)/無(wú)水乙腈(0.2 ml)溶液添加到所述絡(luò)合物中。在80。C攪拌加熱該混合物15分鐘。在冷卻到室溫后，加入乙腈(0.5ml)。將所述^f瓦加熱到IO(TC,利用氮?dú)饬?10 ml/min)將化合物5蒸餾到含乙腈(0.05 ml)的收集瓶中。
實(shí)施例3: r"F13-a6-二曱基苯基)-5-(2-氟乙基)-異噁唑(化合物6)
的制備
將2,6-二甲基爺腈N-氧化物[5 mg, 0.34 mmol;如T. Kubota等，Chem. Pharm. Bull. 32 (1984) 383所述制備的]/乙腈(0.1 ml)溶液與化合物5的乙腈溶液(0.05 ml)混合。在加入銅粉(5mg，顆粒尺寸0.07 mm)之后，在80。C將該瓶加熱15分鐘。加水(0.2ml)，將該溶液從固體銅中輕輕倒出，并將其注入到用于分離化合物6的制備HPLC中。實(shí)施例4:化合物6的備選制備
硫酸銅(II)的水溶液(0.05ml， 3.6mg, 0.0144mmol)在氮?dú)鈿夥障潞涂箟难徕c(0.05ml， 2.9mg， 0.0144mmol)混合。加入2，6-二甲基節(jié)腈N-氧化物(0.2mg， 0.0144mmol)/乙腈(0.05 ml)溶液，之后加入化合物5/乙腈(0.05ml)。反應(yīng)混合物在80。C加熱15分鐘?；衔?通過(guò)冷卻水(0.2ml)并注入到制備HPLC中分離。
本文中描述和要求保護(hù)的發(fā)明在范圍上不受在本文中公開(kāi)的具體實(shí)施方式
的限制，雖然這些實(shí)施方式是用來(lái)說(shuō)明本發(fā)明的幾個(gè)方面的。任何等同的實(shí)施方式都被意圖在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實(shí)際上，從上文的描述出發(fā)，除了在此已經(jīng)顯示和描述的那些外，對(duì)本發(fā)明的各種變化對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的。這樣的變化也確定是落入了附加權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1. 一種標(biāo)記載體的方法，包括在Cu(I)催化劑存在的情況下，式(I)的化合物與式(II)的化合物的反應(yīng)R＊-L2-C≡N+-O- (II)或者，式(III)的化合物與式(IV)的化合物的反應(yīng)其中L1、L2、L3和L4每個(gè)都是連接基團(tuán)；R*是含有放射性核素的報(bào)告基團(tuán)部分；上述反應(yīng)分別得到式(V)或(VI)的結(jié)合物其中，L1、L2、L3、L4和R*如上定義。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R包括正電子發(fā)射放射性核素， 優(yōu)選"C或18F,最優(yōu)選18F。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中載體是肽、蛋白質(zhì)、激素、 細(xì)胞、細(xì)菌、病毒或小的類(lèi)藥分子，最合適的是肽。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的方法，其中載體是 Arg-Gly-Asp肽或其類(lèi)似物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的方法，其中載體是含有如下 片段的肽
6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的方法，其中載體是式(A)的肽:<formula>formula see original document page 3</formula>其中a是1至10的整數(shù)，優(yōu)選a為1。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的方法，其中元素銅用作Cu(I) 催化劑的來(lái)源。
8. 式(II)的化合物<formula>formula see original document page 4</formula>(II)其中，如權(quán)利要求1或2中所定義的，L2是連接基團(tuán)，R'是報(bào)告 基團(tuán)部分。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中f是18F。
10. 式(V)或式(VI)的化合物<formula>formula see original document page 4</formula>(V)<formula>formula see original document page 4</formula>載體 (VI)其中，Ll、 L2、 L3、 L4、 11*和載體是如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng) 所定義的。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10的式(V)或式(VI)的化合物，其中載體是 Arg-Gly-Asp肽或其類(lèi)4以物。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10或11的式(V)或式(VI)化合物，其中載體是 含有如下片段的肽更優(yōu)選式(A)的肽:<formula>formula see original document page 5</formula>其中a是1至10的整數(shù)，優(yōu)選a為1
13. 式(III)的化合物O—N三C——L3載體(111》其中L3是連接基團(tuán)，載體是如權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)所定 義的。
14. 一種放射性藥物組合物，包括有效量的根據(jù)權(quán)利要求10至 12中任一項(xiàng)的化合物；和一種或多種藥學(xué)上可接受的助劑、賦形劑或 稀釋劑。
15. —種用于醫(yī)療用途的根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)的化合物。
16. 根據(jù)權(quán)利要求10至12中任一項(xiàng)的化合物在制備用于體內(nèi)成 像方法的放射性藥物中的用途。
17. —種產(chǎn)生人或動(dòng)物體影像的方法，包括將根據(jù)權(quán)利要求10 至12中任一項(xiàng)的化合物向所述人或動(dòng)物體給藥，和使用PET產(chǎn)生已經(jīng)分布了所述化合物的所述人或動(dòng)物體的至少 一部分的影像。
18. —種監(jiān)測(cè)用對(duì)抗與癌癥有關(guān)的病癥優(yōu)選血管生成的藥物治 療人或動(dòng)物體的效果的方法，所述方法包括將根據(jù)權(quán)利要求10至12 中任一項(xiàng)的化合物向所述人或動(dòng)物體給藥，并^r測(cè)細(xì)胞受體對(duì)所述共 化合物的吸收，所述給藥和檢測(cè)任選地但是優(yōu)選地在用所述藥物治療 之前、期間和之后進(jìn)4亍。
全文摘要
本發(fā)明涉及放射性診斷和放射性治療的試劑，包括用放射性核素標(biāo)記的生物活性載體。本發(fā)明還涉及對(duì)載體例如肽進(jìn)行標(biāo)記的方法和試劑，包括在Cu(I)催化劑的存在下，式(I)的化合物與式(II)的化合物的反應(yīng)?；蛘?，式(III)的化合物與式(IV)的化合物的反應(yīng)。所得的標(biāo)記結(jié)合物可用作診斷劑，例如，用作放射性藥物，更特別地，用于正電子發(fā)射斷層掃描(PET)或單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描(SPECT)或用于放射性治療中。
文檔編號(hào)A61K51/00GK101472614SQ200780023107
公開(kāi)日2009年7月1日 申請(qǐng)日期2007年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月21日
發(fā)明者E·阿斯塔德, M·E·格拉澤 申請(qǐng)人:哈默史密斯網(wǎng)上成像有限公司