F]AlF標記的PET多肽探針及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于放射性標記化合物領域，具體設及一種r円A1F標記的PET多膚探針 及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 根據目前癌癥的發(fā)展趨勢，2020年全世界癌癥發(fā)病率將比現在增加50%，全球每 年新增癌癥患者人數將達到1500萬人（世界衛(wèi)生組織近期發(fā)表《世界癌癥報告》）。對腫 瘤的早期發(fā)現、早期治療是減少癌癥患者死亡率最為有效的辦法，目前在發(fā)展中國家，80% 的癌癥患者都是在癌癥晚期才被發(fā)現。腫瘤轉移是惡性腫瘤的重要生物學特征，它是腫瘤 治療失敗的主要原因，也是腫瘤患者死亡的主因。初次確診的腫瘤患者中，70%左右的患者 可W通過手術、輔助放療或者化療手段控制病情，然而有一部分病人會發(fā)生腫瘤的復發(fā)或 者轉移，其5年存活率小于50%，因此對惡性腫瘤微小轉移的診斷便至關重要。
[0003] 雖然腫瘤發(fā)生于轉移的明確機制目前仍然不清楚，但是如果能在早期對癌癥進行 診斷，并確定腫瘤的惡性程度與轉移能力，然后制定相應的手術、放療或者化療方案，就可 W提高患者的存活率，并改善患者的生存質量。目前用于癌癥診斷的成像方法主要有X-射 線（CT)，超聲扣巧，核磁共振成像（MRI)W及核醫(yī)學SPECT/PET。
[0004] CT、US和MRI是基于實體瘤的解剖結構分析，故他們無法在分子水平上檢測腫瘤 組織的生理變化，不能確定腫瘤的惡性程度，而且對于高發(fā)性腫瘤（例如乳腺癌、肝癌、前 列腺癌等）的特異性和靈敏性較差，因此我們亟需開發(fā)一種新型可W特異性鑒別腫瘤惡性 程度的放射性示蹤劑，他能夠實現對惡性腫瘤的早期診斷，而且可W檢測腫瘤的生長W及 腫瘤對治療方案的反應。
[0005] 正電子發(fā)射計算機斷層掃描（Positronemissiontomogra地y，陽T)由于其具有 靈敏、準確及定位精確等特點，在診斷和指導治療腫瘤、冠屯、病和腦部疾病等方面均已顯示 出獨一無二的優(yōu)越性。PET技術有S個要素；PET探針，信號放大，高靈敏探測器，其中PET 探針最為重要，它是實現信號放大和高靈敏探測的首要前提，目前臨床上對腫瘤診斷應用 最廣的是[1中]FDG，但是因為它的特異性低，容易造成假陽性等局限，它并不能完全滿足臨 床要求，另外r円抑G對腫瘤是否具有轉移能力也無法做出準確的判斷，故新型1中標記分 子影像探針仍然亟待開發(fā)。
[0006] 多膚類陽T探針的開發(fā)是一個重要的方向，目前已經有大量研究針對血管活性腸 膚（VasoactiveintestinalP巧tide,VIP)、奧曲膚、鈴贍膚、RGD、VEGF、TNF、胃泌激素、生 長素抑制素等多膚進行放射性標記研究（M.Fani,H.R.Maecke,S.M.Okarvi,Radiol油eled peptides:valuabletoolsforthedetectionandtreatmentofcancer,Theranosti 〇3,2012,2(5):481-501)，但目前為止尚未有真正可^廣泛應用到臨床的1中標記多膚類分 子影像探針，其主要原因在于多膚擁有大量的活性官能團，對標記條件比較敏感，進行放射 性標記后的多膚活性改變比較大，標記后的探針體內的藥動學性質不理想，例如肝臟攝取 偏高、體內穩(wěn)定性差、腫瘤攝取值低等。

【發(fā)明內容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于克服現有技術缺陷，提供一種r円A1F標記的陽T多膚探針。 [000引本發(fā)明的另一目的在于提供上述[叩]A1F標記的陽T多膚探針的制備方法
[0009] 本發(fā)明的具體技術方案如下；
[0010] 一種r円A1F標記的陽T多膚探針，包括連接在一起的TMTP1多膚和NOTA，其結 構式如下：
[0011]
【主權項】
1. 一種[18F]A1F標記的PET多肽探針，其特征在于：包括連接在一起的TMTPl多肽和 NOTA，其結構式如下：
2. -種權利要求1所述的[18F]A1F標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：包 括如下步驟： (1) 將G-TMTPl溶于DMF中，力P入NOTA-NHS ester，然后加入DIEA將pH調節(jié) 到8. 0-8. 5,室溫攪拌過夜，經HPLC分離純化，收集目標產物的餾分，合并后凍干，得 N0TA-G-TMTP1 ； (2) 在回旋加速器上用核反應180(p，n) 18F制得[18F]r，然后富集在S印-Park light QMA柱上，用去離子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金屬雜質離子，用生理鹽水洗脫，得到 925~1850MBq(25~150mCi)的 18F生理鹽水溶液； (3) 向反應容器中加入AlCljP pH = 4. 0的醋酸鈉緩沖液，然后加入步驟（2)制得的 18卩_的生理鹽水溶液，均勻混合，再加入N0TA-G-TMTP1的去離子水溶液，混合物搖勻后在 80~110°C反應10~30min，冷卻至常溫，用HPLC測定其標記率，得[ 18F] A1F-N0TA-G-TMTP1 反應液； (4) 將步驟（3)制備的[18F]A1F-N0TA-G-TMTP1反應液緩慢注入事先活化過的S印-Pak C18柱，再用蒸餾水淋洗除去水溶性雜質，吹干后用乙醇淋洗，所得淋洗液用生理鹽水稀釋 至乙醇含量小于10%，用HPLC測定其保留時間和放化純，觀察其外觀性狀是否為無色澄清 透明液體，即得所述[ 18F]A1F標記的PET多肽探針。
3. 如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[18F] AlF標記的PET多肽探針的制備方 法，其特征在于：所述步驟（1)為：將IOmg G-TMTPl溶于ImL DMF中，加入15mg NOTA-NHS ester，然后加入DIEA將pH調節(jié)到8. 0-8. 5,室溫攪拌過夜，經HPLC分離純化，收集目標產 物的餾分，合并后凍干，得N0TA-G-TMTP1。
4. 如權利要求3所述的一種權利要求1所述的[18F] AlF標記的PET多肽探針的制備方 法，其特征在于：所述步驟（I)HPLC分離純化中第一流動相為0. 1%三氟乙酸水溶液，第二 流動相為〇. 1%三氟乙酸乙腈，梯度洗脫條件，〇~l〇min，95%的第一流動相；10~25min， 95%~15%的第一流動相；25~40min，15%的第一流動相；流動相的流速為5mL/min，檢 測波長為220nm〇
5. 如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[18F]A1F標記的PET多肽探針的制備 方法，其特征在于：所述步驟（2)為：在回旋加速器上用核反應 180(p，n) 18F制得[18F]r，然 后富集在S印-Park light QMA柱上，用5mL去離子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金屬雜 質離子，用〇. 2~ImL生理鹽水洗脫，得到925~1850MBq (25~150mCi)的18F生理鹽水溶 液。
6. 如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[18F]A1F標記的PET多肽探針的制備 方法，其特征在于：所述步驟⑶為：向反應容器中加入10 μ L2nmol/L的AlClJP 300 μ L 0. lmol/L pH = 4. 0的醋酸鈉緩沖液，然后加入100 μ L步驟⑵制得的18F_的生理鹽水 溶液，均勻混合3min，再加入1000 μ L lmg/mL的N0TA-G-TMTP1的去離子水溶液，混合 物搖勻后在80~110°C反應10~30min，冷卻至常溫，用HPLC測定其標記率，得[ 18F] A1F-N0TA-G-TMTP1 反應液。
7. 如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[18F] AlF標記的PET多肽探針的制備方 法，其特征在于：所述步驟（4)為：將步驟（3)制備的[18F]A1F-N0TA-G-TMTP1反應液緩慢注 入事先活化過的S印-Pak C18柱，再用20mL蒸餾水淋洗除去水溶性雜質，吹干后用800 μ L 乙醇淋洗，所得淋洗液用生理鹽水稀釋至乙醇含量小于10%，用HPLC測定其保留時間和放 化純，觀察其外觀性狀是否為無色澄清透明液體，即得所述[ 18F]AlF標記的PET多肽探針。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種[18F]AlF標記的PET多肽探針及其制備方法，包括連接在一起的TMTP1多肽和NOTA，其結構式如下：。本發(fā)明通過對TMTP1增加一個甘氨酸，設計G-TMTP1多肽，使其在經過放射性標記后，不影響其生物活性，并采用18F為放射性核素，利用[18F]AlF-NOTA的方法標記G-TMTP1多肽，所獲得的[18F]AlF標記的PET多肽探針具有優(yōu)異的藥動學性質，其本底清除速率快，肝臟攝取低，體內穩(wěn)定性好，腫瘤部位攝取高，可以特異性的診斷高轉移的腫瘤，可以用于高轉移的惡性腫瘤的診斷或療效評價。
【IPC分類】C07K7-06, C07K1-13, C07K1-20
【公開號】CN104725473
【申請?zhí)枴緾N201410460832
【發(fā)明人】李業(yè)森, 吳華, 張現忠, 宋曼莉, 郭志德
【申請人】廈門大學附屬第一醫(yī)院, 廈門大學
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2014年9月11日