專利名稱：藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中藥技術領域，具體涉及一種含有金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷的復方中藥藥物組合物。
本申請組分有效部位金銀花有機酸、梔子總苷可以是本申請工藝方法制備得到，也可以是文獻或專利方法得到，包括市售；本申請黃芩苷是根據(jù)文獻或專利方法得到，包括市售。
背景技術：
銀黃制劑是經(jīng)過多年的臨床實踐遴選出來的，臨床應用顯示出清熱解毒和抗感染療效。中藥銀黃制劑(銀黃膠囊、銀黃含片等)和銀黃液體制劑(銀黃口服液、銀黃注射液)由金銀花、黃芩為原料藥制備而成，主要用于上呼吸道感染、急性扁桃體炎、咽炎治療等癥，兩味藥材為方中君、臣藥，金銀花性寒、味甘，歸肺、心、胃經(jīng)，有清熱解毒、疏散風熱之功效；黃芩苦寒，清熱燥濕，瀉火解毒，泄半表半里之里邪。銀黃制劑雖然在臨床上具有一定的療效，該藥采用的是原藥材進行配伍，通過簡單提取制備成制劑，因此在使用過程中醫(yī)患發(fā)現(xiàn)該制劑具有一定的缺陷(1)銀黃注射液、銀黃口服液中有效組分為金銀花提取物和黃芩苷，金銀花提取物原料粗糙，質量均一性差，而且二者在水溶液下穩(wěn)定性較差，導致產(chǎn)品質量在儲存、運輸和使用過程中會產(chǎn)生很大的變化，因此在臨床應用中療效不穩(wěn)定，質量不均一，造成了醫(yī)生用藥的疑問；(2)銀黃片、口含片及膠囊中有效組分為金銀花粗提物和黃芩苷，金銀花藥材經(jīng)簡單提取而成金銀花提取物，有效組分含量低，批次間質量不均一，療效不穩(wěn)定。而且銀黃片、口含片及膠囊生物利用度低，療效較差；(3)銀黃制劑對感冒伴有上呼吸道和呼吸道病毒和細菌感染的病癥，特別是對炎癥，效果不是很好，需要醫(yī)生在臨床上配伍其它藥物才能達到治療作用。這在臨床上對醫(yī)生的用藥造成了一定的困難，降低了患者的用藥依從性。因此，很多醫(yī)生給科研工作者提出希望，通過金銀花、黃芩與其它藥物的配伍，提升產(chǎn)品質量，提高療效，解決銀黃制劑的一些缺陷，從而便于醫(yī)生的臨床應用。
傳統(tǒng)中藥是以中藥原藥材為物質基礎進行組方，進行簡單的提取工藝，制備成制劑，缺乏物質基礎研究，質量控制模糊，僅測定一個或幾個指標成分的含量，無法客觀反映產(chǎn)品的質量；現(xiàn)代中藥是以活性物質研究為基礎，經(jīng)提取、分離與純化等現(xiàn)代工藝獲得有效成分或組分有效部位，經(jīng)有效成分或組分有效部位組成與配比的藥效篩選與系統(tǒng)評價，彼此具有藥效協(xié)同與互補作用，它們通過多成分或組分、多靶點、多系統(tǒng)發(fā)揮綜合調節(jié)治療作用，在此基礎上進行科學優(yōu)選組方，并且對有效成分或組分有效部位進行高效液相色譜法定量，全面客觀定量組方中有效成分或組分有效部位的含量，質量控制系統(tǒng)精確，客觀全面反應產(chǎn)品的質量；傳統(tǒng)中藥制劑僅采用崩解時限作為體內生物利用度的評定標準，但依靠崩解時限檢查作為在體內吸收的評定標準顯然是不夠完善的，因為藥物溶解后通過崩解儀篩網(wǎng)粒徑常在1.6-2.0mm之間，而藥物需呈溶液狀態(tài)才能被機體吸收，其粒子大小以來計算，所以崩解僅僅是藥物溶出的最初階段，而后面的繼續(xù)分散和溶解過程，崩解時限檢查是無法控制的，且制劑的崩解還要受到處方設計、制劑制備、貯存過程及體內許多復雜因素的影響，所以崩解時限檢查不能客觀反映藥物與生物利用度之間的相關性，而溶出度包含了崩解及溶解兩個過程，選擇適當?shù)娜艹鼋橘|和方法進行溶出度定量，溶出度與體內生物利用度具有相關性，溶出度標準的建立是提高生物利用度的關鍵與基礎，良好的生物利用度是產(chǎn)品發(fā)揮療效及療效中藥高效中藥的保障，是創(chuàng)新中藥與中藥制劑標準化的發(fā)展目標。
現(xiàn)代藥理表明，金銀花中有機酸具有較強的抑菌、殺菌和抗病毒作用，用于抗炎、抗感染有較好的治療效果；黃芩中黃芩苷具有抗菌、抗病毒、降壓、保肝、鎮(zhèn)靜、抗炎等作用；梔子總苷是梔子的組分有效部位，很多文獻報道了梔子總苷具有保肝、促膽汁胰腺分泌、鎮(zhèn)痛、抗炎等作用鄭占虎等編著，中藥現(xiàn)代研究與應用，第四卷，學苑出版社，1998，3174。
查閱文獻和專利，未檢索到金銀花有機酸、黃芩苷與梔子總苷的配伍應用。

發(fā)明內容
基于上述原因，我們經(jīng)組成與配比的藥效篩選與系統(tǒng)評價，創(chuàng)新性地優(yōu)選出了以金銀花有機酸組分有效部位、黃芩苷有效成分與梔子總苷組分有效部位為活性物質基礎的組分配伍組方，它們彼此具有藥效協(xié)同與互補作用，通過多成分或組分、多靶點、多系統(tǒng)發(fā)揮綜合調節(jié)治療作用，該藥物組合物制備的制劑具有抗菌譜廣、抗病毒作用好、起效快的特點，特別是針對感冒伴有呼吸道、上呼吸道細菌感染、病毒感染、炎癥具有很好治療作用，與西藥抗生素具有相近的藥效，并且還具有安全性高、沒有耐藥性的優(yōu)點；對有效成分或組分有效部位進行高效液相色譜法定量，全面客觀定量組方中有效成分或組分有效部位的含量，質量控制系統(tǒng)精確，客觀全面反應產(chǎn)品產(chǎn)品的質量；建立固體制劑的溶出度方法，以溶出度為篩選指標，金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷在45分鐘時溶出度達到80％以上，符合藥典標準的基礎上(藥典標準是45分鐘時溶出度達到70％以上)，溶出度包含了崩解及溶解兩個過程，體外溶出度與體內生物利用度具有相關性，溶出度標準的建立是提高生物利用度的關鍵與基礎，良好的生物利用度是產(chǎn)品發(fā)揮療效及療效中藥高效中藥的保障，是創(chuàng)新中藥與中藥制劑標準化的發(fā)展目標。
組分有效部位我們認為首先應將方法來源的有效部位研究清楚，通過對各成分的藥效篩選、量效關系與藥物代謝研究，優(yōu)選出強效活性成分，保留中等活性成分，篩除低效或無效成分，將強效活性與中等活性組成優(yōu)選的有效部位即組分有效部位；對組分有效部位進行比例優(yōu)選研究，從而確定組分有效部位的組成和比例，也即標準有效部位，該有效部位不但物質基礎清楚，而且具有顯著的生物活性，這種標準有效部位既是組分有效部位。
本申請是通過以下技術方案實現(xiàn)的。
藥物組合物，它包括金銀花有機酸5-10重量份，黃芩苷5-12重量份，梔子總苷1-5重量份。
本申請藥物組合物還可以加入黃連素、連翹苷、板藍根有效部位等具有清熱解毒作用中藥有效部位或有效成分中的一種或幾種。
本申請金銀花有機酸包括現(xiàn)有文獻或專利方法制備得到，也包括市售；也包括本申請工藝方法制備得到。
本申請黃芩苷Baicalin包括現(xiàn)有文獻或專利方法制備得到，也包括市售。
本申請梔子總苷包括現(xiàn)有文獻或專利方法制備得到，也包括市售(梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)；也包括本申請工藝方法制備得到。
本申請金銀花有機酸中綠原酸含量20％-55％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％-20％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為7％-20％，總含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡酰奎寧酸計大于等于50％且小于等于95％；黃芩苷含量大于等于90％且小于100％，梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計大于等于50％且小于100％，其中梔子苷含量為45％-90％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為5％-30％。
其中藥物組合物制備成單位劑量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。
其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為50mg-5000mg。
其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為100-3000mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量25mg-2500mg。
其中水針劑輸液劑、粉針劑單位劑量50mg-1500mg。
其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑制劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度大于等于80％且小于100％；制劑在45分鐘時黃芩苷溶出度大于等于80％且小于100％；制劑在45分鐘時梔子總苷溶出度大于等于80％且小于100％。
上述藥物組合物在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病和肝病的藥物方面中的應用。
本申請?zhí)峁┝艘环N含有金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷配伍的藥物組合物。
本申請還提供了一種含有金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷組分配伍為原料的中藥制劑的制備方法。
本申請還提供了一種含有金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷組分配伍為原料的用途。
一、工藝制備(1)取金銀花，加水回流提取2-4次，每次15-40分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1-2，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸；
(2)取梔子用乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至5.0-10；將溶液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，非極性或弱極性大孔樹脂柱為HPD-100、100A、300、400、400A、450或D101、1300-I、1400、AB-8中的一種；先用水除去雜質，再用6％-30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；或先用水、1％-5％稀乙醇洗脫除去雜質，再用6％-30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；或先用水、3％-5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用10％-20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；其中原料藥包括黃芩苷；制劑制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。
二、檢測分析方法(1)金銀花有機酸的檢測分析色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；梯度洗脫，流動相變化為0-70分鐘時流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比為94∶6-70∶30；檢測波長327nm；流速為1.0ml/min；對照品溶液的配制精密稱定綠原酸對照品、3，5-二咖啡?？鼘幩釋φ掌?、3，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌?，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲處理，再加水，超聲處理，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；供試品溶液的配制精密稱取樣品，加無水乙醇，超聲處理，再加水，超聲處理，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；
測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，依法測定，按外標法以峰面積計算含量，即得；(2)黃芩苷的檢測分析高效液相色譜條件為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸體積比＝54∶46∶0.2為流動相；檢測波長為280nm；對照品溶液的配制精密稱取黃芩苷對照品，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的配制精密稱取樣品，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水稀釋至刻度，超聲處理，定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，按外標法以峰面積計算，即得；(3)梔子總苷的測定色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速1.0ml/min；柱溫35℃；檢測波長238nm；以乙腈-水體積比＝10∶90為流動相；梔子苷對照品溶液的配制精密稱取梔子苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品溶液的配制精密稱取京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；供試品溶液的配制精密稱取樣品，預處理后加到容量瓶中加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄60分鐘的色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。
實驗結果見表1
表1本申請制劑檢測分析結果

實驗結論通過上述實驗表明，本申請制劑具有科學意義。
三、固體制劑的溶出度的測定取本申請片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑制劑按照中國藥典2005版二部附錄XC第一法，以水為溶出介質，轉速為100轉/分，經(jīng)45分鐘，取溶液，濾過，得供試品溶液；(1)金銀花有機酸、黃芩苷溶出度測定色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；梯度洗脫，流動相變化為0-70分鐘時流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝94∶6-70∶30；70-75分鐘流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝70∶30-20∶80；75-80分鐘流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝20∶80；檢測波長327nm；流速為1.0ml/min；對照品溶液的配制精密稱定綠原酸對照品、3，5-二咖啡?？鼘幩釋φ掌贰?，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌?，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水，超聲處理，放冷，加水至刻度，搖勻，備用；精密稱定黃芩苷對照品，置容量瓶中，加無水乙醇超聲處理，精密量取綠原酸對照品、3，5-二咖啡?？鼘幩釋φ掌贰?，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌啡芤褐链巳萘科恐?，再加水至近刻度，超聲處理，放冷，加水至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的配制精密量取45分鐘溶出液，濾過，定容，搖勻，以微孔濾膜濾過，取濾液做為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，依法測定，按外標法以峰面積計算含量，即得；(2)梔子總苷的溶出度測定高效液相色譜條件為色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速1.0ml/min；柱溫35℃；檢測波長238nm；以乙腈-水體積比＝10∶90為流動相；梔子苷對照品溶液的配制精密稱取梔子苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品溶液的配制精密稱取京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；供試品溶液的配制精密量取45分鐘溶出液，定容，濾過，取濾液做為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，按外標法以峰面積計算，即得。
實驗結果實驗表明，在45分鐘時金銀花有機酸、黃芩苷、梔子總苷的溶出度大于等于80％且小于100％。
四、原料藥配伍和配比優(yōu)選實驗銀黃制劑在臨床應用一定的缺陷，我們通過抗菌、抗病毒、抗炎等藥理實驗，確定原料藥的配伍，以金銀花有機酸、黃芩苷，金銀花有機酸、黃芩苷與黃連有效部位或有效成分，金銀花有機酸、黃芩苷與黃柏有效部位或有效成分，金銀花有機酸、黃芩苷與板藍根有效部位或有效成分，金銀花有機酸、黃芩苷與連翹有效部位或有效成分，金銀花有機酸、黃芩苷與大青葉有效部位或有效成分，金銀花有機酸、黃芩苷與梔子總苷配伍，在同等條件下進行實驗，優(yōu)選出最好的原料藥配伍處方。
方案1金銀花有機酸、黃芩苷配伍；方案2金銀花有機酸、黃芩苷與黃連有效部位配伍；方案3金銀花有機酸、黃芩苷與黃連有效成分配伍；方案4金銀花有機酸、黃芩苷與黃柏有效部位配伍；方案5金銀花有機酸、黃芩苷與黃柏有效成分配伍；方案6金銀花有機酸、黃芩苷與板藍根有效部位配伍；方案7金銀花有機酸、黃芩苷與板藍根有效成分配伍；方案8金銀花有機酸、黃芩苷與連翹有效部位配伍；方案9金銀花有機酸、黃芩苷與連翹有效成分配伍；方案10金銀花有機酸、黃芩苷與大青葉有效部位配伍；方案11金銀花有機酸、黃芩苷與大青葉有效成分配伍；方案12金銀花有機酸、黃芩苷與梔子總苷配伍；1、抗菌實驗研究實驗動物Wistar大鼠，體重190-230g；菌種金黃色葡萄球菌、肺炎球菌、流感嗜血桿菌、大腸桿菌；實驗方法大鼠分組，雌雄各半，上述不同方案組藥物灌胃給藥2次/日，每次給藥量為30mg/kg，共5次，末次給藥后2小時，ip戊巴比妥鈉35mg/kg麻醉，腹主動脈無菌采血，注入無菌負壓采血管，凝固后離心分離血清，新華1號濾紙片制備無菌的小圓片，分裝于無菌小瓶內，取上述血清加入小瓶中，浸泡1小時，置零下20℃冰箱保存。
菌種復活后，分別在MHA平板及MHA血平板上純培養(yǎng)15小時，用無菌生理鹽水洗取菌落，用無菌棉簽取菌液均勻涂布于平板表面，待平板略干后，在標記位置上貼上上述不同方案的濾紙片，放入37℃溫箱24小時取出，攝像機攝像，圖象分析儀測量抑菌圈直徑，實驗結果見表2表2不同方案組血清紙片抗菌實驗結果

注與空白血清組比較**P＜0.01，*P＜0.05；與陽性對照組方案1-11組比較##P＜0.012、抗病毒實驗研究采用半體內法作抗病毒作用試驗(1)對甲型流感病毒的影響實驗采用半體內法，不同方案組、正常對照組及空白對照組，將不同藥物相同濃度分別與病毒直接作用，立即接種于雞胚尿囊腔中，用石蠟封接種孔，置37℃孵箱培養(yǎng)48h，收取每胚之尿液，用0.5％雞紅血球凝集試驗，判斷藥物的抗病毒活性，結果見表3(2)對乙型流感病毒的影響接種方法、藥物劑量同甲型流感病毒實驗。結果見下表3。
表3對流感病毒的作用比較

注-代表無病毒生長，+-代表少量病毒生長，++代表較多病毒生長，+++代表大量病毒生長3、抗炎試驗實驗方法取昆明種小鼠，體重20-22g，雌雄不分，分為生理鹽水組、上述不同方案組，尾靜脈給藥，給藥量45mg/kg，每天給藥一次，連續(xù)給藥7天，于末次給藥30分鐘后，用二甲苯棉球接觸小鼠左耳約5s，15分鐘后脫頸椎處死，以打孔器將小鼠雙耳相同部位等面積切下，用電子天平精確稱重，以左耳重減右耳重為小鼠的耳腫脹度，并求出抑制率。實驗結果見表4表4不同方案抗炎實驗結果


注與空白血清組比較**P＜0.01，*P＜0.05；與陽性對照組方案1-11組比較##P＜0.01實驗結論通過上述，從實驗數(shù)據(jù)中可以分析到金銀花有機酸、黃芩苷與梔子總苷進行配伍是具有很好的抗菌、抗病毒、抗炎作用，與其它方案組比較具有極顯著性差異(P＜0.01)，充分說明將金銀花有機酸、黃芩苷與梔子總苷進行組合是具有實際意義的。
再通過上述實驗方法的研究，我們確定這種藥物組合藥量為金銀花有機酸5-10重量份，黃芩苷5-12重量份，梔子總苷1-5重量份。
六、藥理實驗1、對狗心肌缺血保護作用實驗藥物本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備；脈絡寧注射液，南京金陵制藥股份有限公司生產(chǎn)。
實驗方法取實驗狗，分為生理鹽水組、脈絡寧注射液組、本申請制劑組，給藥組分別在狗前肢皮下頭靜脈給藥，給藥量每次4mg/kg，生理鹽水組等容不等量，每天給藥1次，連續(xù)給藥3天，給藥第3天后用戊巴比妥鈉25mg/kg靜脈麻醉，氣管插管，接人工呼吸機加以正壓呼吸，從左側第五肋開胸，剪開心包，暴露心臟，將心包切開緣縫于胸壁，在左冠狀動脈前降支分二期結扎，并緩慢iv利多卡因8mg/kg以防結扎前可能引起的心室顫動，隨后縫合心包及胸壁。心梗后24h，狗經(jīng)戊巴比妥鈉麻醉后處死，迅速取出心臟，切除大血管和脂肪組織，核對前降支結扎點的位置，稱全心重，然后切除右心室和左右心房，留下室中隔及左心房，稱得左心室重，從心尖和開始與前降支垂直方向將左心室切成2-3mm厚的肌片，浸于硝基四唑藍溶液(NBT)中染色30min，剪下缺血區(qū)心肌組織稱重，計算心肌梗塞范圍，即心梗范圍＝缺血區(qū)重/左心室重×100％，結果見表5
表5不同方案組對狗心肌缺血的保護作用

注與對照組比較**P＜0.01，*P＜0.05；2、對大鼠腦梗塞的影響實驗藥物本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備；血栓通注射液組。
實驗方法取健康SD大鼠，體重240-260g，隨機分組模型對照組、本申請制劑組、血栓通注射液組，各實驗組給藥量15mg/kg，尾靜脈給藥。給藥3天后，于末次給藥1小時，取大鼠，水合氯醛300mg/kg ip麻醉，頸部切口，分離并結扎右側頸總動脈，縫合肌肉皮膚后，右側位固定，在右耳和右眼外眥連線中點切開皮膚，分離顳肌，暴露顴突及顳骨，在顴突的頭端1～2mm處開一約3×3mm的骨窗，暴露大腦中動脈(MCA)，將MCA灼斷，縫合切口。參考Bederson法，處死動物，取右大腦半球，切成5片，置于2g/LNPT中37℃溫育15min染色，仔細挖取并稱重未被染成蘭色的白色梗塞腦組織，實驗結果見表6表6對大鼠腦梗塞保護情況

注與對照組比較**P＜0.01，*P＜0.05；3、對四氯化碳致大鼠慢性肝損傷的影響實驗藥物本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備；茵梔黃口服液組。
實驗方法取Wistar大鼠，按體重隨機分組，正常對照組、肝損傷模型組、本申請制劑組、茵梔黃口服液組，給藥組灌胃給藥，給藥量為60mg/kg。除正常對照組外，各組動物腹腔注射10％CCl4植物油0.5ml/100g體重，每周兩次，共12周，正常對照組ip生理鹽水。造模同時每日ig給藥一次。實驗結束前，動物禁食12小時，取股動脈血，以3000轉/分離心10分鐘，分離血清，測定GPT、GOT，實驗結果見表7表7不同方案組對肝損傷的影響結果

注與模型組比較**P＜0.01，*P＜0.05；與茵梔黃口服液組比較#P＜0.05。
4、在鴨體內對鴨肝炎病毒的影響實驗藥物本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備；茵梔黃口服液組。
實驗方法取北京鴨，經(jīng)腿脛靜脈注射上海麻鴨DHBV-DNA陽性鴨血清，每只0.3ml，感染后7天取血，分離血清，檢測血清中DHBV-DNA含量。雛鴨血清經(jīng)檢測DHBV呈陽性后，將鴨隨機分為組病毒對照組、本申請制劑組、茵梔黃注射液組，灌胃給藥，給藥量為20mg/kg，每天2次。對照組給予同體積生理鹽水，連續(xù)給藥10天。分別與藥物治療后5天(T5)、10天(T10)和停藥后3天(P3)自鴨脛靜脈取血，分離血清，按缺口翻譯試劑盒說明書方法，用32P標記DHBV-DNA探針，并作鴨血清斑點雜交，放射自顯影膜片斑點，酶標儀測定OD值(濾光片為490nm)，計算血清DHBV-DNA光密度，以雜交斑點OD值作為標本DHBV-DNA水平值，實驗結果見表7。
表7在鴨體內對鴨肝炎病毒DHBV-DNA的影響

注與模型組比較**P＜0.01，*P＜0.05；與茵梔黃口服液組比較#P＜0.05。
5、對內毒素致兔發(fā)熱的解熱作用實驗藥物銀黃制劑，生產(chǎn)單位天津天平藥業(yè)有限公司，貯藏方法密封保存；本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備。
實驗動物大耳白兔，級別健康一級，月齡4月，性別雄性，體重1.95±0.25kg。
實驗方法雄性大耳白兔隨機分為正常對照組、銀黃對照組、模型組、本申請制劑組。稱取動物空腹體重，以計算給藥量。除空白對照組和模型組給予等量的蒸餾水外，其余各組動物灌胃給予相應的藥物，給藥量為400mg/kg。除空白對照組以1.0ml/kg的生理鹽水代替內毒素外，其余各組供試大耳白兔給藥40min時耳緣靜脈注射內毒素1200Eu/ml/kg造模，造模后0.5h、1h、2h、3h、4h和5h各測量一次肛溫。每次抓取兔的動作要輕柔，體溫計插入肛門的深度與時間基本相同。
實驗小結實驗結果表明，本申請制劑組與模型組比較具有極顯著差異(P＜0.01)，與銀黃對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05)，充分說明本申請藥物組合物具有很好的藥理作用。
6、對2，4-二硝基氯苯誘導的小鼠遲發(fā)型超敏反應的影響實驗藥物銀黃制劑，生產(chǎn)單位天津天平藥業(yè)有限公司，貯藏方法密封保存；本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備。
實驗動物KM小鼠，級別健康二級，周齡6.5±0.5周，性別雄性，體重20±2g。
實驗方法KM小鼠按體重隨機分為本申請制劑組、銀黃制劑對照組、模型組和強的松對照組。除模型組給予蒸餾水外，強的松組灌胃給藥，給藥量為1.5mg/kg，其余各組每天尾靜脈注射給藥一次，給藥量為50mg/kg，連續(xù)給藥7天。
2，4-二硝基氯苯溶液的配制精密稱取2，4-二硝基氯苯200mg置于10ml容量瓶中，用丙酮橄欖油溶液(丙酮∶橄欖油＝1∶1)溶解后，定容至10.0ml備用。致敏給藥第1日小鼠腹部去毛3×3cm2，將2.0％2，4-二硝基氯苯100μl均勻涂于腹部脫毛區(qū)致敏，第2日同法致敏一次，共致敏2次。
攻擊與指標測定第7日給予供試藥20min后，將2.0％2，4-二硝基氯苯20μl均勻涂抹于小鼠右耳進行攻擊。攻擊24h后空腹稱重，脫臼處死小鼠，沿耳廓剪下雙耳，用7mm直徑打孔器分別在同一部位打下左右兩圓耳片，電子天平稱重，每鼠用右耳片的重量減去左耳片的重量即為腫脹度；同時取小鼠胸腺及脾稱重，以每g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作為脾指數(shù)和胸腺指數(shù)，實驗結果見表8表8對IV型變態(tài)反應的影響

注與模型組比較***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05；與陽性對照組銀黃制劑比較△△P＜0.01，△P＜0.05。
7、對醋酸致小鼠疼痛的抑制作用實驗藥物銀黃制劑，生產(chǎn)單位天津天平藥業(yè)有限公司，貯藏方法密封保存；本申請制劑，北京本草天源藥物研究院實驗室制備。
實驗動物KM小鼠，級別健康二級，周齡6.5±0.5周，性別雄性，體重20±2g。
實驗方法KM小鼠按體重隨機分為模型組、本申請制劑組、銀黃制劑組和阿司匹林對照組。除模型組給予蒸餾水外，阿司匹林組灌胃給藥，給藥量為120mg/kg，其余各組灌胃給藥，給藥量為100mg/kg，每天給藥一次，連續(xù)給藥3天。0.8％醋酸溶液的配制精密量取0.8ml醋酸原液加入100ml容量瓶中，加生理鹽水定容至100.0ml備用。末次給藥40min時各組小鼠腹腔注射0.8％醋酸溶液(10.0ml/kg)。觀察20min內各組動物出現(xiàn)扭體反應(腹部內凹、伸展后肢、臀部抬高)的次數(shù)，計算各組的鎮(zhèn)痛百分率。

實驗結果見表9表9對醋酸致小鼠疼痛的抑制作用

注與模型組比較***P＜0.001，**P＜0.01，*P＜0.05；與陽性對照組銀黃制劑比較△△P＜0.01，△P＜0.05。
實驗結果通過上述藥理實驗表明，本申請制劑具有很好的藥理作用，充分說明將金銀花有機酸、黃芩苷與與梔子總苷進行藥物組合具有科學意義。
七.制備實施例實施例1口服原料藥為金銀花有機酸75克，黃芩苷75克，梔子總苷15克；藥用輔料；注射原料藥為金銀花有機酸37.5克，黃芩苷37.5克，梔子總苷7.5克；藥用輔料；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取2次，每次15分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸綠原酸含量20％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡酰奎寧酸計50％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸綠原酸含量20％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為20％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡酰奎寧酸計50％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸綠原酸含量20％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?0％；(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量為90.08％；
或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量為90.1％；(3)取梔子用10％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至5.0；將溶液HPD-100層析分離；先用水除去雜質，再用6％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計53.3％，其中梔子苷含量為46.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為7.1％；或先用水、1％稀乙醇洗脫除去雜質，再用30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計51.9％，其中梔子苷含量為45.7％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為6.2％；或先用水、1％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用10％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計50.1％，其中梔子苷含量為45％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為5％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計50％，其中梔子苷含量為45％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為5％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；
取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為50mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為25mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度80.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度80.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度80.4％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例2口服原料藥為金銀花有機酸150克，黃芩苷180克，梔子總苷75克；藥用輔料；注射原料藥為金銀花有機酸75克，黃芩苷90克，梔子總苷37.5克；藥用輔料；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取4次，每次40分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至2，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸綠原酸含量55％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸綠原酸含量55％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為20％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸綠原酸含量55％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％，金銀花有機酸含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量99.4％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量為99.1％；(3)取梔子用95％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至10；將溶液經(jīng)100A大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計大于等于98.7％，其中梔子苷含量為89.1％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為9.6％；或先用水、5％稀乙醇洗脫除去雜質，再用30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計大于等于99.5％，其中梔子苷含量為90.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為9.3％；或先用水、5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計大于等于99.3％，其中梔子苷含量為90％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為9.3％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計99.7％，其中梔子苷含量為90％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為9.7％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物；)。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為5000mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為2500mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度99.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度99.0％，45分鐘時梔子總苷溶出度99.2％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例3口服原料藥為金銀花有機酸100克，黃芩苷120克，梔子總苷45克；藥用輔料；
口服原料藥為金銀花有機酸50克，黃芩苷60克，梔子總苷22.5克；藥用輔料；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取3次，每次30分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.5，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?4.3％；金銀花有機酸綠原酸含量47.9％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?7.7％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5.1％；金銀花有機酸綠原酸含量48.3％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為18.1％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為18.7％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；金銀花有機酸綠原酸含量47.3％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?7.9％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?9.8％(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量95.3％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量95.7％；(3)取梔子用50％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至8.5；將溶液經(jīng)300大孔樹脂層析分離；先用水除去雜質，再用15％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計74.2％，其中梔子苷含量為44.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％；或先用水、3％稀乙醇洗脫除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計75.7％，其中梔子苷含量為45.7％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％；或先用水、4％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用15％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計75％，其中梔子苷含量為45％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計75％，其中梔子苷含量為45％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為2500mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為1500mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度90.1％，45分鐘時黃芩苷溶出度89.3％，45分鐘時梔子總苷溶出度91.0％。
其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例4口服原料藥為金銀花有機酸80克，黃芩苷90克，梔子總苷20克；注射原料藥為金銀花有機酸40克，黃芩苷45克，梔子總苷10克；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取2次，每次35分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.8，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?0.3％；金銀花有機酸綠原酸含量40.7％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為16.1％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?3.5％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?8.2％；金銀花有機酸綠原酸含量38.9％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?6.7％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?2.6％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?0％；金銀花有機酸綠原酸含量38.9％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為12.4％(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量93.1％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量92.8％；(3)取梔子用15％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至6.0；將溶液經(jīng)400大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用8％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計61.9％，其中梔子苷含量為51.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.7％；或先用水、2％稀乙醇洗脫除去雜質，再用10％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計61.7％，其中梔子苷含量為50％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為11.7％；或先用水、5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計60％，其中梔子苷含量為50％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計60.3％；其中梔子苷含量50.3％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法
制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為50mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為25mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度84.9％，45分鐘時黃芩苷溶出度85.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度86.0％。
其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例5口服原料藥為金銀花有機酸140克，黃芩苷170克，梔子總苷70克；注射原料藥為金銀花有機酸70克，黃芩苷85克，梔子總苷35克；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取4次，每次20分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.2，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡酰奎寧酸計84.2％；金銀花有機酸綠原酸含量54.5％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為19.8％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.9％
或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡酰奎寧酸計83.1％；金銀花有機酸綠原酸含量54.0％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.4％或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡酰奎寧酸計82％；金銀花有機酸綠原酸含量53.7％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?9.1％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.2％(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量97.2％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量97.2％；(3)取梔子用90％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至7.5；將溶液經(jīng)400A大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用25％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計89.2％，其中梔子苷含量為60％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為29.2％；或先用水、4％稀乙醇洗脫除去雜質，再用25％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計91.9％，其中梔子苷含量為61.9％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％；或先用水、5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計90％，其中梔子苷含量為60％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為30％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計89.3％，其中梔子苷含量為60％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為29.3％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為4500mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為2000mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度87.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度87.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度88.4％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例6口服原料藥為金銀花有機酸80克，黃芩苷175克，梔子總苷18克；
注射原料藥為金銀花有機酸40克，黃芩苷87.5克，梔子總苷9克；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取3次，每次25分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.4，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?6.1％；金銀花有機酸綠原酸含量53.9％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?3.5％或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡酰奎寧酸計78.3％；金銀花有機酸綠原酸含量49.7％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?9.4％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.2％或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡酰奎寧酸計75.4％；金銀花有機酸綠原酸含量48.7％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?7.1％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.6％；(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量97.3％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量97.0％；(3)取梔子用35％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至7.0；將溶液經(jīng)450大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用12％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計71.6％，其中梔子苷含量為55.4％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為16.2％；或先用水、2％稀乙醇洗脫除去雜質，再用15％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液洗，脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計71％，其中梔子苷含量為56％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為15％；或先用水、3％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用14％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計70％，其中梔子苷含量為55％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為15％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計70％，其中梔子苷含量為55％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為15％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為1500mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為750mg；
其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度82.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度83.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度83.4％。
其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例7口服原料藥為金銀花有機酸140克，黃芩苷80克，梔子總苷60克；注射原料藥為金銀花有機酸70克，黃芩苷40克，梔子總苷30克；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取3次，每次25分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.6，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?7.9％；金銀花有機酸綠原酸含量45.3％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?7.1％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?5.5％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?2.3％；金銀花有機酸綠原酸含量45.1％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為18.0％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.2％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡酰奎寧酸計73％；金銀花有機酸綠原酸含量44.7％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?6.8％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?1.5％
(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量為96.0％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量96.3％；(3)取梔子用40％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至9.5；將溶液經(jīng)D101大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用25％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計94.1％，其中梔子苷含量為72.7％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為21.4％；或先用水、4％稀乙醇洗脫除去雜質，再用28％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計95.0％，其中梔子苷含量為74.0％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為21.0％；或先用水、4％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用19％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計95.8％，其中梔子苷含量為74.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為21.6％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計97.3％，其中梔子苷含量為70％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為27.3％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
制劑的制備方法
制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為280mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為140mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度81.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度82.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度82.4％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例8口服原料藥為金銀花有機酸140克，黃芩苷90克，梔子總苷30克、黃連素；藥用輔料；注射原料藥為金銀花有機酸70克，黃芩苷45克，梔子總苷15克、黃連素；藥用輔料；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取2次，每次30分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.8，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5.3％；金銀花有機酸綠原酸含量46.7％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?9.0％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為9.6％或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?8.1％；金銀花有機酸綠原酸含量49.1％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為10.3％或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；金銀花有機酸綠原酸含量47.1％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.9％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.0％(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量95.3％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量95.7％；(3)取梔子用乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至5.5；將溶液經(jīng)1300-I大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用28％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計91.7％，其中梔子苷含量為80.8％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.9％；或先用水、1％稀乙醇洗脫除去雜質，再用30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計90.5％，其中梔子苷含量為80.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.3％；
或先用水、3％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計90.2％，其中梔子苷含量為80.1％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.1％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計92.3％，其中梔子苷含量為81.9％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.4％(或梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物)。
(4)黃連素為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，含量98.2％。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷、黃連素，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷、黃連素，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為2600mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為1300mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度91.0％，45分鐘時黃芩苷溶出度87.0％，45分鐘時梔子總苷溶出度90.9％，黃連素的溶出度為81.2％；其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例9口服原料藥為金銀花有機酸90克，黃芩苷160克，梔子總苷65克、連翹苷；藥用輔料；注射原料藥為金銀花有機酸45克，黃芩苷80克，梔子總苷32.5克、連翹苷；藥用輔料；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取4次，每次20分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.9，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?8.3％；金銀花有機酸綠原酸含量48.9％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.2％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?1.2％；或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩帷?，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5.1％；金銀花有機酸綠原酸含量47.4％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?7.9％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為9.8％；或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?5％；金銀花有機酸綠原酸含量49.1％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?6.8％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.1％；(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量95.3％；
或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量95.7％；(3)取梔子用乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至5.0-10；將溶液經(jīng)1400大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用6％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計65.3％，其中梔子苷含量為53.3％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為12.0％；或先用水、1％稀乙醇洗脫除去雜質，再用8％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計63.7％，其中梔子苷含量為53.0％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為10.7％；或先用水、3％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用12％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計64.9％，其中梔子苷含量為53.1％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為11.8％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計66.3％，其中梔子苷含量為52.9％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為13.4％。(梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物；)(4)連翹苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，含量95.9％。
制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷、連翹苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷、連翹苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為3150mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為1575mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度80.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度80.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度80.4％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
實施例10口服原料藥為金銀花有機酸145克，黃芩苷165克，梔子總苷20克；注射原料藥為金銀花有機酸72.5克，黃芩苷82.5克，梔子總苷10克；提取工藝(1)取金銀花，加水回流提取4次，每次20分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1.2，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸，金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?4.2％；金銀花有機酸綠原酸含量54.5％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?9.8％，3，4-二咖啡酰奎寧酸含量為9.9％或金銀花有機酸為市場上銷售的標準提取物，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡?？鼘幩?、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?3.1％；金銀花有機酸綠原酸含量54.0％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?8.7％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.4％或本領域的技術人員采用現(xiàn)有技術對金銀花進行提取純化得到的金銀花有機酸，符合標準為金銀花有機酸以含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡?？鼘幩嵊?2％；金銀花有機酸綠原酸含量53.7％，3，5-二咖啡酰奎寧酸含量為19.1％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?.2％(2)黃芩苷是標準提取物，按照部頒中藥19冊銀黃注射液黃芩苷制備方法得到黃芩苷，黃芩苷含量97.2％；或黃芩苷為本領域的技術人員按照現(xiàn)有技術制備得到，黃芩苷含量97.2％；(3)取梔子用85％乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至8.5；將溶液經(jīng)AB-8大孔樹脂柱層析分離；先用水除去雜質，再用25％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計93.2％，其中梔子苷含量為62.0％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為31.2％；或先用水、4％稀乙醇洗脫除去雜質，再用25％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液，洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計95.0％，其中梔子苷含量為63.1％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為31.9％；或先用水、5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計94.7％，其中梔子苷含量為62.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為32.5％；或梔子總苷為現(xiàn)有技術制備，包括市售；梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計95.4％，其中梔子苷含量為66.2％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為29.2％；(梔子苷按照現(xiàn)有技術得到、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷按照現(xiàn)有技術得到，再按照本申請標準提取物的質量標準混合得到本申請梔子總苷標準提取物；)制劑的制備方法制劑的制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、口服液或10000數(shù)量的微丸劑、滴丸劑；取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成1000數(shù)量水針劑、輸液劑、粉針劑；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為3300mg。
其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量為1650mg；其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度87.3％，45分鐘時黃芩苷溶出度87.1％，45分鐘時梔子總苷溶出度88.4％其中藥物組合物和制劑制備在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
注本發(fā)明所要求保護的具體技術方案，不限于上述實施例所表達的技術方案的具體組合。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于它包括金銀花有機酸5-10重量份，黃芩苷5-12重量份，梔子總苷1-5重量份。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種藥物組合物，其中金銀花有機酸中綠原酸含量20％-55％，3，5-二咖啡?？鼘幩岷繛?0％-20％，3，4-二咖啡?？鼘幩岷繛?％-20％，總含量以綠原酸、3，4-二咖啡酰奎寧酸、3，5-二咖啡酰奎寧酸計大于等于50％且小于等于95％；黃芩苷含量大于等于90％且小于100％，梔子總苷以梔子苷、京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量計大于等于50％且小于100％，其中梔子苷含量為45％-90％，京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷含量為5％-30％。
3.根據(jù)權利要求1的一種藥物組合物，其中藥物組合物制備成單位劑量的片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。
4.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為50mg-5000mg。
5.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液單位劑量為100mg-3000mg。
6.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中水針劑、輸液劑、粉針劑單位劑量25mg-2500mg。
7.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中水針劑輸液劑、粉針劑單位劑量50mg-1500mg。
8.根據(jù)權利要求1或3所述的一種藥物組合物，其特征在于檢測分析方法為(1)金銀花有機酸的檢測分析色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；梯度洗脫，流動相變化為0-70分鐘時流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比為94∶6-70∶30；檢測波長327nm；流速為1.0ml/min；對照品溶液的配制精密稱定綠原酸對照品、3，5-二咖啡酰奎寧酸對照品、3，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌?，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲處理，再加水，超聲處理，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；供試品溶液的配制精密稱取樣品，加無水乙醇，超聲處理，再加水，超聲處理，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，依法測定，按外標法以峰面積計算含量，即得；(2)黃芩苷的檢測分析高效液相色譜條件為以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸體積比＝54∶46∶0.2為流動相；檢測波長為280nm；對照品溶液的配制精密稱取黃芩苷對照品，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水稀釋至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的配制精密稱取樣品，置容量瓶中，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水稀釋至刻度，超聲處理，定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，按外標法以峰面積計算，即得；(3)梔子總苷的檢測分析高效液相色譜條件為色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速1.0ml/min；柱溫35℃；檢測波長238nm；以乙腈-水體積比＝10∶90為流動相；梔子苷對照品溶液的配制精密稱取梔子苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品溶液的配制精密稱取京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；供試品溶液的配制精密稱取樣品，預處理后加到容量瓶中加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄60分鐘的色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。
9.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑在45分鐘時金銀花有機酸溶出度大于等于80％且小于100％；制劑在45分鐘時黃芩苷溶出度大于等于80％且小于100％；制劑在45分鐘時梔子總苷溶出度大于等于80％且小于100％。
10.根據(jù)權利要求3所述的一種藥物組合物，其中制劑原料藥包括黃芩苷，其特征為(1)取金銀花，加水回流提取2-4次，每次15-40分鐘，提取液濾過，合并濾液，濃縮，水溶液用鹽酸調pH值至1-2，再用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯用量分別為水相量的1.5倍、1.2倍、1.0倍量，合并乙酸乙酯層，濃縮至浸膏狀，加等體積乙醇，混勻，真空干燥，得到金銀花有機酸；(2)取梔子用乙醇溶液提取得到乙醇提取液，濃縮至無醇味；濃縮液調節(jié)PH值至5.0-10；將溶液經(jīng)非極性或弱極性大孔樹脂柱層析分離，非極性或弱極性大孔樹脂柱為HPD-100、100A、300、400、400A、450、D101、1300-I、1400、AB-8中的一種；先用水除去雜質，再用6％-30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；或先用水、1％-5％稀乙醇洗脫除去雜質，再用6％-30％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；或先用水、3％-5％稀乙醇洗脫，除去雜質，再用10％-20％濃度的乙醇洗脫，收集含有梔子苷和京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷部分的洗脫液；洗脫液濃縮干燥即得；制劑制備取金銀花總有機酸、黃芩苷、梔子總苷，按照藥劑學常規(guī)要求制備成片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑、口服液、水針劑、輸液劑、粉針劑。
11.根據(jù)權利要求3、9或10所述的一種藥物組合物，其中片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膠囊劑、微丸劑、滴丸劑溶出度的測定方法為取固體制劑按照中國藥典2005版二部附錄XC第一法，以水為溶出介質，轉速為100轉/分，經(jīng)45分鐘，取溶液，濾過，得供試品溶液；(1)金銀花有機酸、黃芩苷溶出度測定色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；梯度洗脫，流動相變化為0-70分鐘時流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝94∶6-70∶30；70-75分鐘流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝70∶30-20∶80；75-80分鐘流動相0.2％磷酸二氫鈉溶液∶乙腈體積比＝20∶80；檢測波長327nm；流速為1.0ml/min；對照品溶液的配制精密稱定綠原酸對照品、3，5-二咖啡?？鼘幩釋φ掌?、3，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌罚萌萘科恐?，加無水乙醇，超聲使溶解，再加水，超聲處理，放冷，加水至刻度，搖勻，備用；精密稱定黃芩苷對照品，置容量瓶中，加無水乙醇超聲處理，精密量取綠原酸對照品、3，5-二咖啡酰奎寧酸對照品、3，4-二咖啡?？鼘幩釋φ掌啡芤褐链巳萘科恐校偌铀两潭?，超聲處理，放冷，加水至刻度，搖勻，即得；供試品溶液的配制精密量取45分鐘溶出液，濾過，定容，搖勻，以微孔濾膜濾過，取濾液做為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀，依法測定，按外標法以峰面積計算含量，即得；(2)梔子總苷的溶出度測定高效液相色譜條件為色譜條件與系統(tǒng)適應性實驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流速1.0ml/min；柱溫35℃；檢測波長238mn；以乙腈-水體積比＝10∶90為流動相；梔子苷對照品溶液的配制精密稱取梔子苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品溶液的配制精密稱取京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷對照品到容量瓶中，加甲醇溶解搖勻，并定容至刻度；供試品溶液的配制精密量取45分鐘溶出液，定容，濾過，取濾液做為供試品溶液；測定法精密量取對照品溶液和供試品溶液，分別注入高效液相色譜儀，按外標法以峰面積計算，即得。
12.根據(jù)權利要求1、3任一項所述的一種藥物組合物在制備抗炎、抗菌、抗病毒、治療心腦血管疾病或肝病的藥物方面中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，其特征在于包括為不同重量份組分有效部位金銀花有機酸、梔子總苷、有效成分黃芩苷，建立了科學的質量控制方法和溶出度測定方法，通過抑菌、抗病毒、抗炎等藥效篩選實驗確定本申請原料藥藥物組合配比與用量，藥理實驗表明，本申請藥物組合物具有更好的藥理作用。
文檔編號A61K9/20GK101066312SQ20071010028
公開日2007年11月7日 申請日期2007年6月7日 優(yōu)先權日2007年6月7日
發(fā)明者顧群, 李志剛, 魏俊玲, 郭小鵬, 渠守峰, 米長江, 阮愛華, 金治剛, 林治榮, 劉嚴, 曹艷芳 申請人:北京本草天源藥物研究院