專利名稱：：穿心蓮內(nèi)酯衍生物及其在制藥中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物及其在制藥中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：穿心蓮內(nèi)酯(Andro)是中藥穿心蓮中的主要有效成分。穿心蓮在亞洲國(guó)家，包括中國(guó)、印度、閂本、韓國(guó)等廣泛用于治療炎癥性疾病，包括風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、咽喉炎、腹瀉、細(xì)菌和病毒感染(ZhaoandFang,Chin.Med.J.(Engl)1991,104,770-775;Purietal.,J.Nat.Prod.1993,56,995—999;ZhangandTan,Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.1996,23,675478;ZhangandTan,Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.2000,27,358-363;Shenetal.,Br.J.Pharmacol.2002,35,399>406)。最近，研究表明穿心蓮內(nèi)酯具有廣譜的抗癌作用，并且治療效果良好(Rajagopaletal.，J.Exp.Ther.Oncol.2003,3,147-158;Satyanarayanaetal.Science2003,299，363-370)。在印度和馬來西亞，穿心蓮內(nèi)酯廣泛地用于治療糖尿病。近30年來，穿心蓮內(nèi)酉旨及其3種衍生物穿琥寧、炎琥寧，蓮比治已在中國(guó)廣泛應(yīng)用于臨床。穿心蓮內(nèi)酉旨及其衍生物穿琥寧、炎琥寧，蓮比治的結(jié)構(gòu)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>Andro穿琥寧這些藥物能夠減輕炎癥、發(fā)熱、細(xì)菌和病毒感染性疾病的臨床癥狀(Hendricksonetal.，J.Bacteriol.2001,183,7126-7134;ZhangandTan,Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.1996,23，675-678;Zhangetal.,Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.2000,2358-368;Shenetal.,Br.J.Pharmacol.2002,35,399406;Gabrielianetal.，Phytomedicine2002,9，589-597)。穿心蓮內(nèi)酯抗菌活性的研究。用穿心蓮提取物治療急性上呼吸道感染合并鼻竇炎，結(jié)果穿心蓮提取物較安慰劑療效顯著，患者頭痛，鼻、咽部和全身不適癥狀明顯改善，治療組體溫溫和下降(Caceresetal.,Phytomedicine1997,4,101-104)。在一個(gè)有250名受i式者的試驗(yàn)中，穿心蓮提取物明顯降低感冒患者的患病時(shí)間和減輕病情(Hanckeetal.，Phytother.Res.1995,9,559-5621;Melchioretal.Phytomedicine1996,3,314-318;Caceresetal.,Phytomedicine1999,6,217-223)。在107名18歲學(xué)生中進(jìn)行的試驗(yàn)中，每天給予受試者100mg含5.6。/。穿心蓮提取物片劑2片，該劑量遠(yuǎn)小于臨床上用于治療感冒的穿心蓮劑量(每天約1,200到6,000mg)連續(xù)三個(gè)月，其余53人給予安慰劑治療。結(jié)果，使用穿心蓮組只有16人感冒，而安慰劑對(duì)照組33人感冒，證明穿心蓮減少了患感冒風(fēng)險(xiǎn)(Caceresetal.,Phytomedicine1997,4,101-104)。雖然Andro己被廣泛用于臨床，但試驗(yàn)證明它并無直接殺菌效果(Singhaetal.,Fitoterapia2003,74,692-694;Lietal.,ChinaJ,ChineseMateriaMedica2006,12,1015-1017;Xiaetal.,J.Immunol.2004,173,4207-4017)。最近，Li等(ChinaJ.ChineseMateriaMedica2006,12,1015-1017)發(fā)!lAndro衍生物(蓮必治)雖不能直接抑制綠膿肝菌(PAOl)生長(zhǎng)，但能明顯抑制它的QS系統(tǒng)。蓮必治12.5mg/mL(34mM)對(duì)培養(yǎng)的PA01生長(zhǎng)無影響，但顯著抑制綠膿菌素的產(chǎn)生及蛋白水解酶和彈性蛋白酶的活性。這個(gè)新發(fā)現(xiàn)的作用機(jī)理能夠部分的解釋其抗菌效果。金黃色葡萄球菌(Sto;^/OCOmaz#mtf，SA)，簡(jiǎn)稱金葡菌，屬于革蘭氏陽性菌，通常附著在健康人的鼻腔。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界大約有十億人攜帶不同亞型的金葡菌(Ryanetal.,SherrisMedicalMicrobiology2004,4thed.,McGrawHill)。金葡菌感染是最常見的皮膚感染疾病之一，在淺膿腫中繁殖可引起嚴(yán)重的感染導(dǎo)致面容毀損和其他危及生命的疾病，如心內(nèi)膜炎、肺炎、骨髓炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎、腦(脊)膜炎，以及術(shù)后傷口感染、敗血病、中毒性休克綜合征等(Silversteinetal.,Infect.Immun.1994,62,152-161;D羅etal.,Clin.Inf,Dis.1994,18,437-439;Wisplinghoffetal.,Pediatr.Infect.Dis.J.2003,22,686-691;Karlowskyetal.,Ann.Clin.MicrobiolAntimicrob.2004,3,7-15)。隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，金葡菌的耐藥性也越來越嚴(yán)重。MRSA是耐抗生素金葡菌中的一種，它對(duì)含P-內(nèi)翻安類抗生素耐藥，包括甲氧苯青霉素和其他更為常用的抗生素如苯唑西林、盤尼西林和阿莫西林。最近的研究表明，在美國(guó)靜脈注射感染金葡菌病人中約有20。/。是MRSA感染(Grahametal,Ann.Intern.Med.2006,144,318-325)。目前嚴(yán)重感染耐藥金葡菌的患者，萬古霉素和替考拉寧是目甜唯一有效的抗生素，替考拉寧是萬古霉素的同源衍生物。萬古霉素和替考拉寧口服吸收差，所以，對(duì)全身感染必須采用靜脈注射。更重要的是現(xiàn)已出現(xiàn)對(duì)萬古霉素和替考拉寧都耐藥的耐藥金葡菌(VISA)(Schitoetal.,Clin.Microbiol.Infect12Suppl.2006,1,3-8)。綠膿桿菌(銅綠假單胞菌，7VW，朋osfrag/TO肌PA)屬于革蘭氏陰性菌，是一種劍牛致病菌。綠膿桿菌通常感染肺部，尿道，燒傷等，也會(huì)弓胞血液感染(Stoveretah,Nature2000,406,959-964;Lyczaketal.,Microbes.Infect.2000,2，1051-1060)。綠膿桿菌也是肺囊性纖維變性患者中引起慢性肺感染的主要病菌(Frederiksenetal.,Pediatr.Pulmonol.1997，23,330-335),近來被認(rèn)為是弓i起傷口長(zhǎng)期感染的主要病因之一(Bjamsholtetal.,Anal.Bioanal.Chem.2007,387,409-414)。細(xì)菌黏附在表面并在一個(gè)自身產(chǎn)生的多聚體基質(zhì)中形成社會(huì)群落，稱之為生物被膜(Costertonetal.，Science1999,284，1318-1322)。綠膿桿菌常常自身形成生物被膜。在適宜的實(shí)驗(yàn)室條件下，綠膿桿菌會(huì)形成一個(gè)厚達(dá)幾百毫米的生物柳莫，生活在這個(gè)生物被膜的細(xì)菌X寸抗生素產(chǎn)生抵抗作用。肺部綠膿桿菌感染的患者中，肺囊性纖維變性患者特別適用于以生物膜為治療靶點(diǎn)進(jìn)行治療。很多物種通過細(xì)胞與細(xì)胞之間的信號(hào)傳導(dǎo)達(dá)到一個(gè)臨界密度，叫群體感應(yīng)系統(tǒng)(quorumsensing,QS)。細(xì)菌細(xì)胞通過產(chǎn)生并釋放胞外自身誘導(dǎo)分子(autoinducers,AIs)調(diào)節(jié)基因的表達(dá)和細(xì)菌群落的排列(生物被膜的形成)(Fuquaetal.,Curr.Opin.Microbiol.1998,1,183-189;Hammeretal.，N.(Engl)丄Med.1996,35,1081-1090)。現(xiàn)認(rèn)為QS調(diào)控系統(tǒng)保證當(dāng)細(xì)菌密度增大到足以壓倒寄主時(shí)才大量繁殖引起病癥出現(xiàn)。革蘭氏陰性菌的?；呓z氨酸內(nèi)酯系統(tǒng)(AHLs)是研究最多的QS系統(tǒng)。雖然細(xì)菌間的交流是微生物生態(tài)學(xué)的內(nèi)容，但現(xiàn)已證明AHLs在植物和動(dòng)物包括人類疾病中同樣重要。這一系統(tǒng)首先在費(fèi)希爾氏弧菌的生物發(fā)光系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)(Eberhardetal.,Biochem.1981,20,2444-2449;Nealsonetal,JBacteriol.1970，104,300-306)。費(fèi)希爾氏弧菌含有兩種蛋白-AI合成酶的LuxI和LuxR，他們都是由AI調(diào)節(jié)發(fā)光操縱子激活的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。AHL合成酶產(chǎn)生的AHL分子含有高絲氨酸內(nèi)酯環(huán)(源于S-腺蛋氨酸)，伴有可變的?；?源于脂類代謝)由柳安鍵連接。AHLs為含4-18個(gè)碳原子的?；湥译S其氧化態(tài)和不飽和度而變(Fuquaetal.,Curr.Opin.Microbiol.1998,1，183-189)。在綠膿桿菌中已發(fā)現(xiàn)兩種AHL介導(dǎo)的群體感,徑?！瓯叵到y(tǒng)由負(fù)責(zé)合成3-氧代十二?；呓z氨酸內(nèi)酯的AHL合成酶基因te/和編碼丄肌i型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)子蛋白基因tei組成(Gambelloetal.,J.Bacteriol.1991,173,3000-3009;Zhaoetal"Chin.Med,J.(Engl)1991,104,770-775)。已有研究顯示to系統(tǒng)調(diào)節(jié)致病因子的表達(dá)，包括胞外酶類(LasBelastase,LasAprotease,alkalineprotease)、次級(jí)代謝產(chǎn)物(pyocyanin,hydrogencyanide,pyoverdin)、毒素(exotoxinA)禾口/o/自身。在A/系統(tǒng)中，^//基因產(chǎn)物決定丁?；呓z氨酸內(nèi)酯(C4-HSL)的合成，它與A漢基因產(chǎn)物一起激活rM4S鼠李糖脂生物合成基因的轉(zhuǎn)錄。A/系統(tǒng)同時(shí)也調(diào)節(jié)一些受te系統(tǒng)控制的致病因子的表達(dá)。3-氧代十二?；呓z氨酸內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)式如下綠膿桿菌群體感應(yīng)通用的模型為當(dāng)細(xì)菌集落密度低時(shí)，細(xì)菌產(chǎn)生基礎(chǔ)水平3-氧代十二酰基高絲氨酸內(nèi)酯。當(dāng)細(xì)菌密度升高，3-氧代十二?；呓z氨酸內(nèi)酯達(dá)到臨介濃度時(shí)，它就與丄o^作用形^Lmi-3-oxo-d2-HSL復(fù)合物，可激活許多基因的轉(zhuǎn)錄，這些基因的表達(dá)產(chǎn)生胞外酶、次級(jí)代謝產(chǎn)物和毒素等致病因子。在細(xì)菌群體行為基因表達(dá)調(diào)控中，群體感應(yīng)是廣泛認(rèn)同的一種有效的作用機(jī)制。最近二十年關(guān)于細(xì)菌群體感應(yīng)的研究表明，細(xì)菌群體感應(yīng)信號(hào)途徑對(duì)新的抗菌藥物的研發(fā)來說，是十分有前景的方向。穿心蓮內(nèi)酉旨及其3種衍生物炎琥寧、穿琥寧、蓮比治能夠減輕炎癥、發(fā)熱、細(xì)菌和病毒感染性疾病的臨床癥狀(Hendricksonetal.,J.Bacteriol.2001,183,7126-7134;Zhangetal.,Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.2000,27，358-368;Shenetal.,Br.J.Pharmacol,2002，35,399406;Gabrielianetal.，Phytomedicine2002,9,589-597)。因其來源于天然中藥且療效好，這些藥物通常稱為"綠色抗生素"。穿心蓮內(nèi)酯解熱抗炎作用。穿心蓮內(nèi)酯^2,4-二硝基酚或內(nèi)毒素誘導(dǎo)的發(fā)熱和蛋清誘導(dǎo)的水腫或巴豆油誘導(dǎo)的炎癥模型均有退熱、抗炎活性。具有抑制和延緩肺炎雙球菌和溶血性乙型鏈球菌弓胞的體溫升高的作用，對(duì)于傷寒、副傷寒菌苗所致的發(fā)熱家兔戀,4-二硝基苯酚所致發(fā)熱大鼠有一定的解熱作用，對(duì)同時(shí)感染肺炎雙球菌和溶血性鏈球菌培養(yǎng)物的家兔能延緩體溫上升時(shí)間，減緩#^顯上升程度?？诜?0、100、300mg/kg穿心蓮內(nèi)酯能顯著抑制角叉菜藻、高嶺土和制霉菌素誘導(dǎo)的大鼠爪腳水腫。而且還顯著抑制由棉球誘導(dǎo)的肉芽腫和減輕佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎弓跑的水腫。穿心蓮內(nèi)酯(300mg/kg)能抑制乙酸誘導(dǎo)的血管Mit性i^驗(yàn)中染料的漏出(Hanetal.,TlieChinese丄ModernAppliedPharmacy2005,22,126-129)。Chiou等(Br.J.Pharmacol.2000,129,1553-1560)研究認(rèn)為穿心蓮內(nèi)酯(1-100mM)在RAW264.7細(xì)胞中通過降低誘導(dǎo)型NO合酶(iNOS)蛋白表達(dá)抑制NO合成，且可阻止蛋白從頭合成和通過加速降解降低蛋白穩(wěn)定性。Ba她uu等(Biol.Pharm.Bul.2002,25,1169-1174)結(jié)果表明穿心蓮內(nèi)酉旨抑榮ijNO產(chǎn)生，在O.l-lOOmM范圍內(nèi)呈濃度依賴性，IC50為7.9mM。在炎癥反應(yīng)中，粘附分子表達(dá)上調(diào)及內(nèi)皮-白細(xì)胞粘附增加是炎癥反應(yīng)發(fā)展的重要?dú)i驟。誘導(dǎo)劑腫瘤壞死因子a(TNF-a)可以通過增加內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(ICAM-1)的表達(dá)來增強(qiáng)內(nèi)皮-白細(xì)胞的粘附。當(dāng)內(nèi)iJEahy926細(xì)胞與TOF-a(0.5ng/ml)接觸培養(yǎng)18h后，其粘附率增加15倍，若同時(shí)加入穿心蓮內(nèi)酯(0.6-16.7)mg/ml可減少由TOF-a弓l起的粘附增加，在研究穿心蓮內(nèi)酯對(duì)ICAM-1表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯(0.6-16.7)mg/ml可劑量依賴性抑制由TNF-a弓胞的ICAM-1表達(dá)上調(diào)。Shen等(Br.J.Pharmacol.2002,135,399406)闡明了穿心蓮內(nèi)酯通過鼠嗜中性粒細(xì)胞抑制炎癥反應(yīng)的機(jī)理是通過調(diào)，KC依賴途徑阻止或至少部分阻止活性氧(ROS)的產(chǎn)生，使內(nèi)酯下調(diào)Mac-l高表達(dá)。Tsai等(Euro.J.Pharmacol.2004,498,45-52)評(píng)價(jià)了穿心蓮內(nèi)酯作用于體外補(bǔ)體5a(C5a)誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞補(bǔ)充的抗炎機(jī)制。穿心蓮內(nèi)酯呈劑量依賴性抑制細(xì)胞分裂，IC5o為5.6士0.7^M。胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)，P38致分裂原激活的蛋白激酶(P38MAPK)和磷月旨酰肌醇-3-激酶(PI3K)是C5a誘導(dǎo)分裂所必需的，而c-JunN-末端激酶(JNK)是非必需的。穿心蓮內(nèi)酯顯著減弱C5a刺激的ERK1/2和其上游激活齊UMAP激酶-ERK激酶(MEK1/2)磷酸化作用。在同樣條件下,穿心蓮內(nèi)酯不能影響C5a刺激的P38MAPK和JNK磷酸化。穿心蓮內(nèi)酯也顯著消除C5a刺激的下游PI3K耙蛋白AKT的磷酸化。因此穿心蓮內(nèi)酯抗炎作用的機(jī)理可能是通過摻AERK1/2和PI3K/Akt信號(hào)通路的細(xì)胞分裂抑制作用。Xia等g.Immunol.2004,173，4207-4217)的研究發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯抑制細(xì)胞核中心轉(zhuǎn)錄因子(NF-kappaB)活性。相關(guān)機(jī)理研究表明，它同p50的還原半胱氨酸(62)形成共價(jià)加合物，阻斷NF-kappaB寡核苷酸與核酸蛋白的連接。穿心蓮內(nèi)酉旨能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞中NF-kappaB的活化，進(jìn)而降低細(xì)胞粘附ME選擇素(E-selectin)的表達(dá)，而且阻ihE-selectin介導(dǎo)的白細(xì)胞黏附，它也消除細(xì)胞因子和內(nèi)毒素誘導(dǎo)的噬中性白細(xì)胞的腹膜沉著，減弱敗血癥休克，阻止體內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的關(guān)節(jié)炎。它對(duì)IkappaBalpha,軍、p50和p65核轉(zhuǎn)位，或細(xì)胞生長(zhǎng)速率無抑制作用。Hidalgo等(Br.J.Pharmacol.2005,144,680-686)關(guān)于穿心蓮內(nèi)酯的抗炎機(jī)理研究表明穿心蓮內(nèi)酯抑制某些前炎癥蛋白的表達(dá)，這些蛋白在基因中起至ljNF-kappaB連接位點(diǎn)的作用。作者分析了穿心蓮內(nèi)酯在分化成嗜中性粒細(xì)胞的HL260中由血小板激活因子(PAF)禾nN-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)誘導(dǎo)的NF-kappaB激活作用中的作用。發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯通過抑帝jNF-kappaB與DNA連接發(fā)揮抗炎作用，進(jìn)而降低前炎癥蛋白如COX-2的表達(dá)。穿心蓮內(nèi)酯對(duì)心血管系統(tǒng)的影響。Chen等(Biochem.Pharmacol.2004,67,1337-1345)調(diào)査了穿心蓮內(nèi)酯保護(hù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVES-VCs)免受生長(zhǎng)因子(GF)缺乏誘導(dǎo)的凋亡的M機(jī)理和信號(hào)通路。結(jié)果表明當(dāng)HUVESVCs缺乏GF18h后凋亡，但是加入穿心蓮內(nèi)酯可抑制凋亡的發(fā)生,且呈劑量依賴性(1-100mM)。穿心蓮內(nèi)酯M抑制細(xì)胞色素C進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中且消除線粒體勢(shì)能，導(dǎo)致阻止caspase-3和-9的激活，抑制凋亡的線粒體通路。穿心蓮內(nèi)酯處理內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)一個(gè)抗凋亡信號(hào)蛋白激酶Akt的活化和一個(gè)Akt下游革EBAD的磷酸化。穿心蓮內(nèi)酯在HUVES-VCs中通過激活A(yù)kt-BAD通路發(fā)揮其抗凋亡作用，因而可作為動(dòng)脈粥樣硬化的候選治療劑。穿心蓮內(nèi)酯的保肝作用。在給予半乳糖胺48，24，2h甜或給予撲熱息痛后l，4，給予不同劑量的(50，100，200，400mg/kg)穿心蓮內(nèi)酯，可使半乳糖胺和撲熱息痛引起的天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸S每、膽紅素、三酰甘油濃度的增加均受到抑制并恢復(fù)到正常水平。穿心蓮內(nèi)酯能對(duì)抗四氯化碳所致的大鼠肝損傷。穿心蓮內(nèi)酯(5.0和10mg/kg，p.o.)能抑制大鼠肝微粒體苯胺羥化酶、N-去甲基酶和O-去甲基酶活性,其中對(duì)O-去甲基酶最敏感。Visen等(J.Ethnopharmacol.1993.40,131-136)研究表明穿心蓮內(nèi)酯表現(xiàn)出顯著的劑量依賴性(0.75-12mg/kg，p.o.)保肝活性，對(duì)于撲熱息痛誘導(dǎo)的體外分離到的大鼠肝細(xì)胞毒性，穿心蓮內(nèi)酯可顯著增加肝細(xì)胞的存活率，完全對(duì)抗撲熱息痛對(duì)血清中和分離肝細(xì)胞中某些酶(GOT，GPT和堿性磷酸,的毒性，比水飛薊素(臨床應(yīng)用的保肝絢更有效。穿心蓮內(nèi)酯的降血糖作用。糖尿病(DiabetesMellitus,DM)是一種與遺傳因素有關(guān)，又與多種環(huán)境因素相關(guān)的慢性全身性疾病，是由于體內(nèi)胰島素的絕對(duì)或相對(duì)分泌不足而弓胞的糖、月旨肪、蛋白質(zhì)的代謝紊亂，可分為胰島素依賴型糖尿病(I型，即IDDM)和非胰島素依賴型糖尿病(II型，即NIDDM)，其中n型患者占糖尿病病例的80%以上。臨床常用的治療糖尿病藥物按作用機(jī)制主要分為胰島素分泌促進(jìn)劑(如磺酰脲類藥物格列本脲、格列吡嗪等)；胰島素增敏劑(如^1E類藥物苯乙7IM、二甲)5W等)；Cl-葡萄f船酶抑制(如阿卡波糖、米格列醇等)；以及胰島素制劑和一些促進(jìn)葡萄糖代謝、利用的藥物。從目前臨床所用或即將應(yīng)用的降糖藥物來看，各種西藥都有一定的局限性和不良反應(yīng)，甚至是很嚴(yán)重的不良反應(yīng)，如導(dǎo)別氐血糖、乳酸性酸中毒，長(zhǎng)期使用弓胞并發(fā)癥等；如磺,類主要副作用為低血糖等，^M類藥可能發(fā)生乳酸酸中毒。對(duì)于n型糖尿病的治療，傳統(tǒng)的磺m類和OT類口服降糖藥療效有限，并且無法根本阻^l夷島e細(xì)胞的進(jìn)一步壞死，導(dǎo)致胰島素依賴。近來研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥對(duì)糖尿病有治療作用，一些中藥除了具備上述西藥的降糖機(jī)制外，而且對(duì)胰島e細(xì)胞有保護(hù)作用，并能改善血流動(dòng)力學(xué)，減少糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生(李津，劉亞明.山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,7(3):49-51),從而達(dá)到標(biāo)本兼治的目的。糖尿病發(fā)生發(fā)展過程中，高糖環(huán)境、NF-kB激活、氧化應(yīng)激、炎癥和P細(xì)胞凋亡以及糖尿病并發(fā)癥之間存在錯(cuò)綜復(fù)雜的聯(lián)系。糖尿病的高糖環(huán)境激活NF-kB。Sakiko等(Am.J.Physiol.Renal.Physiol.2007,292,1141-1150)發(fā)現(xiàn)富糖條件下可促進(jìn)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1表達(dá)和激活NF-KB，這種改變可被匹列格酮等一些NF-kB抑制劑所阻斷。Pieper等(J.Cardiovasc.Pharmacol.1997,30,528-532)把不同濃度的高糖和血管內(nèi)皮細(xì)胞共孵育，電泳遷移率變動(dòng)分析法(EMSA)檢測(cè)出NF-KB的活性升高，加入能抑制NF-kB的抑制物SN250，則可以阻斷以上作用。氧化應(yīng)激激活NF-KB。對(duì)于長(zhǎng)期處于高糖環(huán)境中的細(xì)胞而言，核酸和脂類物質(zhì)面對(duì)被氧化的趨勢(shì)，其結(jié)果是非酶促終末糖基化產(chǎn)物(AGE)的形成，而后者反過來可以和它的受體(RAGE)結(jié)合，影響細(xì)胞的功能。Mohamed等(Biofactors,1999,10，157-67)的研究發(fā)現(xiàn)，AGE可以在體內(nèi)、體外使細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激增加，進(jìn)而激活NF-kb。在糖尿病人中，NF-kB的激活與血糖控制的情況相關(guān)，并能被抗氧化劑a-硫辛酸所減弱。來自鼠和人類胰島細(xì)胞的資料顯示NF-KB激活可促進(jìn)iNOS的表達(dá)，導(dǎo)致胰島0細(xì)胞損害(MohamedA.K,etal.Biofactors，1999，10,157-167)。Hofoiann等(Diabetologia.1999,42，222-232)觀察43例I型糖尿病人體外分離的末梢血單核細(xì)胞中NF-kB的活性，其中10例預(yù)先接受抗氧化劑硫辛酸治療2周。結(jié)果顯示，糖基化血紅蛋白(HbAlc)水平>10%的病人，NF-KB活性明顯升高，NF-KB活性的增加與血漿脂質(zhì)過氧化物的增加相關(guān)；用硫辛酸處理的病人NF-KB的結(jié)合活性降低。因此認(rèn)為高血糖可誘導(dǎo)糖尿病患者血液?jiǎn)魏思?xì)胞的NF-kB活化，而NF-kB的激活至少部分地依賴于氧化應(yīng)激。NF-kb調(diào)控胰島e細(xì)胞凋亡。NF-kB調(diào)節(jié)著多種導(dǎo)致胰島細(xì)胞功能損害的促炎癥因子基因的表達(dá)。例如，NF-kB可通過誘導(dǎo)Fas和iNOS、COX-2的表達(dá)促進(jìn)T細(xì)胞介導(dǎo)的殺傷作用和3細(xì)胞毒性產(chǎn)生。此外，e細(xì)胞內(nèi)其它的一些促炎癥因子，如趨化因子(MCAP-1,和黏附分子(ICAM-1等)的啟動(dòng)子上有NF-kB的結(jié)合序列(MayandGhosh,Immunol.Today1998,19，80-88)。NF-kB在e細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的重要作用在一些體外NF-kB抑制模型上也被證實(shí)。抑制NF-kB活性可抑制e細(xì)胞死亡。Stephens等(j.Autoimmun.1997,10,293-298)使用TNF刺激MT-1胰島卩細(xì)胞，觀察到抑制NF-kB活性可抑制P細(xì)胞中免疫介導(dǎo)的幾種不同的細(xì)胞死亡途徑，這種機(jī)制在自身免疫性糖尿病中可能作為保護(hù)胰島P細(xì)胞的有效策略。抗氧化劑可保護(hù)胰島e細(xì)胞。由誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)催化產(chǎn)生的NO是細(xì)胞因子介導(dǎo)的e細(xì)胞損害及功能異常的潛在的介質(zhì)。反應(yīng)性氧化物(ROS)已顯示與P細(xì)胞的死亡及糖尿病的形成有關(guān)。Ho等(FreeRadicalBiologyMed.2000,28,604-624)使用ROS的清除劑和穩(wěn)定劑PBN處理alloxan和STZ誘導(dǎo)的糖尿病鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)注射alloxan和STZ后30射中可誘導(dǎo)出胰腺中的NF-kB活性，預(yù)先用PBN處理可抑制NF-kB的激活及NO的產(chǎn)生，并有效地降低高血糖。NF-kB激活與糖尿病并發(fā)癥。血管病變是糖尿病的主要并發(fā)癥和患者致殘的重要原因，糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)促進(jìn)糖尿病血管并發(fā)癥的形成已獲得共識(shí)。Schamidt等(j.Clin.Invest.1995,96,1395-1403)報(bào)道從糖尿病患者血清中分離出的AGEs可誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)粘附分子VCAM-l，誘導(dǎo)機(jī)制涉及NF-kB的激活，而AGEs引發(fā)的氧化應(yīng)激亦可激活NF-kB。糖尿病視網(wǎng)膜病變和腎臟病變是當(dāng)今失明和腎功能衰竭的主要原因。Romeo等(Diabetes.1999,48(Sppl)，154)。應(yīng)用單克隆抗體免疫組化技術(shù)比較13例尸檢的糖尿病患者和14例年齡、性別酉fiX寸的非糖尿病人視網(wǎng)膜微血管細(xì)胞的凋亡狀況和無細(xì)胞毛細(xì)血管的發(fā)生率。結(jié)果，糖尿病組具有大量NF-kB激活的外膜細(xì)胞，并顯示內(nèi)皮細(xì)胞和外膜細(xì)胞的凋亡增加，無細(xì)胞毛細(xì)血管亦增加，提示糖尿病患者視網(wǎng)膜外膜細(xì)胞的NF-kB活化可能^i糖尿病視網(wǎng)膜病的早期損害Hofinann等(Diabetologia.1999,42,222-232)。對(duì)33例糖尿病患者進(jìn)行觀察，其中21例并發(fā)糖尿病腎病。結(jié)果，糖尿病腎病患者末梢血單核細(xì)胞的NF-KB活性增高，對(duì)活化的NF-KBp65的免疫組化染色亦增強(qiáng)，NF-kb的活性與尿微量白蛋白的程度及血漿血栓調(diào)節(jié)蛋白的濃度呈正相關(guān)。綜上所述，糖尿病中的高糖環(huán)境和氧化應(yīng)激狀態(tài)可激活NF-kb。NF-kb激活所誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激的氧自由基等可引起胰島e細(xì)胞凋亡、壞死，導(dǎo)致糖尿病的發(fā)生；此外還發(fā)現(xiàn)糖尿病的并發(fā)癥血管病變、視網(wǎng)膜病變和腎損害程度與NF-kB激活呈正相關(guān)。因此，尋找有效的NF-kb抑制劑和抗氧化劑來保護(hù)胰島e細(xì)胞和防止糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生，從根本上達(dá)到治療糖尿病的目的，這有可能為糖尿病的治療提供新的策略。穿心蓮內(nèi)酯顯著降低糖尿病大鼠的血糖水平。Zhang和Frei(ASEBJ.2001,15，2423-2432)在正常和STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠中研究了穿心蓮乙醇提取物的治療作用，發(fā)現(xiàn)口服穿心蓮乙醇提取物可呈劑量依賴地降低糖尿病大鼠的血糖水平，當(dāng)口服劑Mii400mg/kg時(shí)，降糖效果與二甲7觀(500mg/kg，口服)相當(dāng)，f!X寸正常大鼠的血糖水平無影響。在長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)中，連續(xù)給藥14天，穿心蓮乙醇提取物400mg/kg或二甲雙胍500mg/kg，口服，每天兩次，發(fā)現(xiàn)穿心蓮或二甲雙胍治療組糖尿病大鼠較對(duì)照組體重明顯增加，治療組進(jìn)食和飲水量減少，對(duì)正常大鼠無影響。糖尿病大鼠間胰島素水平無明顯差異，說明穿心蓮的降糖作用與胰島素?zé)o關(guān)。穿心蓮治療組肝臟葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性明顯降低，推測(cè)穿心蓮降糖作用可能于增加了葡萄糖代謝有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)穿心蓮乙醇提取物除有降糖作用外，還具有抗氧化應(yīng)激效應(yīng)，可增加糖尿病大鼠肝、腎組織中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和還原型谷胱甘肽(GSH)含量，減少了脂質(zhì)過氧化反應(yīng)產(chǎn)物(MDA)。氧化應(yīng)激是糖尿病并發(fā)癥的重要致病因素，因此推斷穿心蓮將可降低糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生和組織損傷程度。同樣，Rao(IranianJ.Pharmacol.Ther.2006,5,47-45)在alloxan誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型中也證實(shí)穿心蓮氯仿提取物(300mg/kg，口服)具有降血糖作用和腎保護(hù)話性，能有效防止蛋白尿、尿毒癥的發(fā)生。Yu等(PlantaMed.2003,69,1075-1079)報(bào)道穿心蓮內(nèi)酯(1.5mg/kg，口服)對(duì)IH常大鼠靜脈葡萄糖激發(fā)實(shí)驗(yàn)和STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖升高有明顯抑第U作用。體外比目魚肌葡萄糖攝取實(shí)驗(yàn)顯示穿心蓮內(nèi)酯能增加放射性葡萄糖的攝取，并進(jìn)一歩證實(shí)這可能與穿心蓮內(nèi)酯增加了4型葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體(GLUT4)基因表達(dá)有關(guān)。葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體是葡萄糖穿過細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)的介導(dǎo)者，前期研究已發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者GLUT4基因表達(dá)減少(SivitzWi,etal.Nature1989,340,72-74)。穿心蓮內(nèi)酯的抗腫瘤作用。Nanduri等(美國(guó)專利US6486196,2002;Bioorg.Med.Chem.Lett.2004,14,4711-4717)研究表明，8,17-環(huán)氧化穿心蓮內(nèi)酉旨保持了內(nèi)酯的細(xì)胞毒性，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步得到的酯化衍生物使活性有相當(dāng)大的提高。體外實(shí)驗(yàn)IC5Q范圍在5-15nM的穿心蓮內(nèi)酯對(duì)多種類型的人腫瘤細(xì)胞有活性(Satyanarayanaetal.,BMCCancer2003,4,26-34)。Rajagopa等(J.Exp.Ther.Oncol.2003,3，147-158)研究表明，穿心蓮內(nèi)酉旨能抑制多種腫瘤細(xì)胞系的增殖。對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接作用是通過誘導(dǎo)周期抑制蛋白P27和斷氐CDK4的表達(dá)使周期阻滯于Go-G溯，通過《腿淋巴細(xì)胞的增殖和IL-2分泌起免自lj激作用。穿心蓮內(nèi)酯也增加TOF-a的產(chǎn)生和CD4標(biāo)志物的表達(dá)導(dǎo)致淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性，這可能是其抗腫瘤活性的間接原因。穿心蓮內(nèi)酯使細(xì)胞周期停止在Go-G溯，并誘導(dǎo)細(xì)胞周期抑制蛋白p27的產(chǎn)生和減少細(xì)胞周期依賴的蛋白激斷(CDK4)的表達(dá)。穿心蓮內(nèi)酯治療對(duì)MCF-7細(xì)胞細(xì)胞周期的影響用流式細(xì)胞斜口蛋白印跡分析(Rajagopaletal.，J.Exp.Ther.Oncol.2003,3,147-158)。MCF-7細(xì)胞用5^M穿心蓮內(nèi)酯處理24和48小時(shí)后經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，與用DMSO處理的對(duì)照細(xì)胞相比，穿心蓮內(nèi)酯處理24小時(shí)后G，期細(xì)胞增加了10%，伴隨S期和G2/M期細(xì)胞比例的下降，說明細(xì)胞周期停止在GJ月。處理48小時(shí)后，與對(duì)照組相比處于G1期細(xì)胞比例下降，而S期和G2-M期細(xì)胞數(shù)沒有變化，然而處于亞Gl期的MCF-7細(xì)胞數(shù)量增加了7%。這就提示在穿心蓮處啦4小時(shí)時(shí)，誘導(dǎo)細(xì)胞停止在Gt期，如果進(jìn)一步處理，處于Gi期的細(xì)胞發(fā)生凋亡，明顯的證據(jù)就是反映凋亡特征的亞G,期細(xì)胞增加。體內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果表明，穿心蓮內(nèi)酯具有抗黑色素瘤(B16F0)和結(jié)腸癌(HT-29)移植模型的作用(Rajagopaletal.,J.Exp.Ther.Oncol.2003,3,147-158)。Satyanarayana等(Satyanarayanaetal.,BMCCancer2003,4,26-34)報(bào)道了在使用中空纖維系統(tǒng)荷MCF-7乳腺癌小鼠中穿心蓮內(nèi)酯的抗腫瘤活性。在劑量為100mg/kg時(shí)，穿心蓮內(nèi)酯可抑制大約50%的腫瘤生長(zhǎng)。穿心蓮內(nèi)酯的抗癌活性也在HT-29人結(jié)腸癌裸鼠模型和B16F0骨髓瘤小鼠模型中得到了檢驗(yàn)?？诜┝繛?00mg/kg，每天兩次，穿心蓮內(nèi)酯對(duì)骨髓瘤和結(jié)腸癌的生長(zhǎng)抑制率分別達(dá)到39%和52%。當(dāng)MCF-7人乳腺癌小鼠模型用穿心蓮內(nèi)酯治療，蛋白印跡分析發(fā)現(xiàn)，在腹腔或皮下途徑接禾中的腫瘤中100mg/kg穿心蓮內(nèi)酯可明顯增加p27的表達(dá)(Rajagopaletal.,J.Exp.Ther.Oncol.2003,3,147-158)，后者是調(diào)節(jié)細(xì)胞周期Q期的主要CDK抑制劑。細(xì)胞周期依賴的蛋白激酶，CDK4水平只是在腹腔注射途徑接種的腫瘤中下降，而皮下注射途徑?jīng)]有變化。這些結(jié)果顯示穿心蓮內(nèi)酯抑制細(xì)胞周期的進(jìn)程是ffi3i調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。硫辛酸。Alpha-硫辛酸(LA)存在于各種原核和真核細(xì)胞。在人體中，它是許多參與能量形成的2-含氧酸脫氫酶的一部分，并且是一些多酶復(fù)合體的輔助因子(Biewengaetal.,DrugMetab.Rev.1997,29,1025-1054)。硫辛酸及其還原形式脫氫硫辛酸(DHLA)，作為氧化還原作用物質(zhì)，從脫氫酶底物轉(zhuǎn)運(yùn)電子給NAD+。實(shí)際上，脫氫硫辛酸比硫辛酸具有更強(qiáng)的抗氧化特性。除了充當(dāng)酶的角色，體內(nèi)夕卜研究表明硫辛酸還可作為強(qiáng)大的微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有多種藥理學(xué)和抗氧化特征。藥理學(xué)上，硫辛酸可改善肝抗胰島素物質(zhì)的控制，糖尿病引起的多神經(jīng)病變，可有效減輕重金屬中毒。作為抗氧化劑，硫辛酸直接清除自由基，鰲合過渡金屬離子，例如鐵和銅，增加胞槳中谷胱苷肽和維他命C的水平，并阻止它們丟失弓胞的毒性。這些不同的功能暗示硫辛酸通過多種生理學(xué)和藥理學(xué)機(jī)制來發(fā)揮作用(Smithetal.,Curr.Med.Chem.2004,11,1135-1146)。由于以上原因，硫辛酸是應(yīng)用最廣泛的保健補(bǔ)充劑之一，在德國(guó)，硫辛酸被批準(zhǔn)用于治療糖尿病引起的癥狀性神經(jīng)病已有20余年的歷史。硫辛酸的結(jié)構(gòu)如下硫辛酸是一種很強(qiáng)的抗氧化劑。LesterPacker(FreeRadic.Biol.Med.1995,19,227-250)認(rèn)為硫辛酸是最強(qiáng)的生物抗氧化劑。這一觀點(diǎn)來源于很多的研究質(zhì)料。首先，LA/DHLA能直接清除自由基，包括羥基、過氧化氫、次氯酸和純態(tài)氧(Packeretal.，F(xiàn)reeRadic.Biol.Med.1995,19,227-250;Matsugoetal.,Biochem.Biophys.Res.Commun.1996，227，216-220)。其次，它們鰲合過渡金屬離子，具有改變相對(duì)弱的氧化劑(例如超氧陰離子和過氧化氫)向有害的羥基活性物質(zhì)轉(zhuǎn)化的益處(Matsugoetal.,Biochem.Biophys.Res.Commun.1996,227,216-220)。最后，它們?cè)偕渌目寡趸瘎?。氧化還原作用抗氧化劑的有效功能需要氧化形式的抗氧化劑向有效的還原新式再循環(huán)。DHLA是一種強(qiáng)還原劑，因此它能夠使氧化型抗氧化劑再循環(huán)(Matsugoetal.,Biochem.Biophys.Res.Commun.1996,227，216-220)。DHLA可從它們各自的氧化形式直接再生抗壞血栓鹽和間接再生維他命E，并能夠使氧化型谷胱苷肽還原成還原形式(Jocelyn,P.C.Eur.J.Biochem.1967,2,327-331)。實(shí)際上，體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中，硫辛酸己被發(fā)現(xiàn)可增加細(xì)胞內(nèi)谷胱苷肽的含量(Busseetal.,Arai.Forsch.1992,42,829-831)。給注射動(dòng)物抗氧化劑硫辛酸，發(fā)現(xiàn)谷胱苷肽水平增加了30%-70%，特別是在肺、肝和腎臟細(xì)胞中。Zhangetal.(FASEBJ.2001，15,2423-2432)以人大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HAEC)為模型，研究了LA以及谷胱苷肽和維他命C在TNF-a誘導(dǎo)黏附分子表達(dá)和NF-kappaB信號(hào)傳導(dǎo)中的作用。用硫辛酸(0.05—1mmol)預(yù)處理HAEC48小時(shí)可呈劑量依賴性地抑制TOF-a(10U/ml)誘導(dǎo)的NF-kappaB結(jié)合活性(Fig.10)。當(dāng)硫辛酸為0.5mmol/l,TNF-a誘導(dǎo)的NF-kappaB活性被抑制81%。硫辛^(寸TNF-a誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞活化的這種抑制效應(yīng)提示是金屬鰲合作用，而非普通的抗氧化劑效應(yīng)。這也可能解釋了需預(yù)處理HAEC48小時(shí)后硫辛酸才能發(fā)揮最大的抑制效應(yīng)，因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)金屬離子鰲合作用和從細(xì)胞內(nèi)排除是一個(gè)緩慢的過程。DeMarketal.(丄CellPhysiol.2003,194，325-340)報(bào)道硫辛酸在體內(nèi)誘導(dǎo)組蛋白高度乙?；?，且對(duì)正常細(xì)胞和變化了的細(xì)胞系的生長(zhǎng)和生存能力有不同的效應(yīng)。人腫瘤細(xì)胞系FaDu和Jurkat，以^Ki-v-Ras-改造了的Balb/c-3T3鼠間間質(zhì)細(xì)胞系，經(jīng)硫辛酸處理后都發(fā)生凋亡。相應(yīng)地，硫辛酸處理的未改變細(xì)胞系只是細(xì)胞周期被可逆地阻滯在G(/Gi期。硫辛酸導(dǎo)致細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶的抑制劑水平翻譯后升高。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，硫辛酸減少了環(huán)磷酰氨和長(zhǎng)春新堿引起的副作用，但沒有降低藥效(Bergeretal.,Arzneimittelforschung1983,33,1286-1288)。最近，Dovinova^etal.(Neoplasmaa999,46,237-241)提出聯(lián)合應(yīng)用硫辛酸(16mg/kg)和阿霉素(5mg/kg)可使L1210白血病小鼠成活率增加67%。而硫辛酸經(jīng)腹腔給藥的LD5o達(dá)160mg/kg，說明上述結(jié)果很不平常。盡管硫辛酸在體外、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腫瘤模型和人體內(nèi)都已被證實(shí)具有抗腫瘤活性，但作用機(jī)理還不明確。如前所述，硫辛酸可清除自由基，抑制NF-kB活化，增加p27表達(dá)等等。然而，沒有單一機(jī)制足以解釋其抗腫瘤活性，也許它們中的每一種機(jī)制各自發(fā)揮一種作用。藥理學(xué)上，硫辛酸可改善肝抗胰島素物質(zhì)，糖尿病引起的多神經(jīng)病變，可有效減輕重金屬中毒。作為抗氧化劑，硫辛酸直接清除活性氧和自由基，鰲合過渡金屬離子，例如鐵和銅，增加胞漿中谷胱苷肽和維他命C的水平，并阻止它們丟失引起的毒性。這些不同的功能暗示硫辛酸通過多種生理學(xué)和藥理學(xué)機(jī)制來發(fā)揮作用(Sm池etal.,Curr.Med.Chem.2004,11,1135-1146)。硫辛酸被用來治療糖尿病及其并發(fā)癥。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，線粒體電子傳遞呼吸鏈超氧化物產(chǎn)生過多是高糖介導(dǎo)組織損傷的主要途徑激活的原因，認(rèn)為氧化應(yīng)激狀態(tài)是糖尿病慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的共同因素(Brown,L.Nature2001,414,813-820)，改善氧化應(yīng)激狀態(tài)可能成為防治糖尿病慢性并發(fā)癥的有效措施。Yorek等(Yorek^M.A.Exp.DiabetesRes.,2004,5,123-135)報(bào)道硫辛酸確能改善糖尿病血管內(nèi)皮的功能。臨床研究提示抗氧化劑能改善糖尿病患者的自主神經(jīng)癥狀(ZieglerD,etal.,Diabetologia^1995,38,1425-1433)。短期口服a-硫辛酸能增加II型糖尿病患者外周胰島素敏感性，從而降低血糖和減少心血管并發(fā)癥(KamenovaP.Hormones(Athens),2006,5,251-258)。綜上所述，天然產(chǎn)物穿心蓮內(nèi)酯的應(yīng)用己有很長(zhǎng)的歷史，具有良好的安全性。尤為重要的是，研究表明它可通過獨(dú)特的作用機(jī)理發(fā)揮抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗感染、抗炎、護(hù)肝利膽、降血糖等多種功效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于衝共一種新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物；本發(fā)明的目的還在于提供所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物在藥學(xué)上可接受的鹽；本發(fā)明的目的還在于提供所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物、在藥學(xué)上可接受的鹽、藥物的制劑等制備方法；本發(fā)明的目的還在于提供所述穿心蓮內(nèi)酯衍生物在制備治療細(xì)菌及病毒感染、炎癥、癌癥和糖尿病等病癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物具有通式I的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中RhR2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表示氫或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如脂肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、擰檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、1,2-硫戊環(huán)-3-戊酸根(硫辛酸根)、N-乙酰半胱氨酸根、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基、雜芳基等。附帶條件是R1;R2和R3中至少有一個(gè)是硫辛酸(所有均指R-硫辛酸或S-硫辛酸或消旋體硫辛酸以及其相應(yīng)的二氫硫辛酌或N-乙酰半胱氨酸。根據(jù)新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物所定義的通式I的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的化合物具有通式II的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中R2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表示氫或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如脂肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、檸檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基、雜芳基等。根據(jù)新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物所定義的通式I的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的化合物具有通式III的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中R2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表示氫或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如月旨肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、檸檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基、雜芳基等。根據(jù)新的穿心蓮內(nèi)酉旨衍生物所定義的通式II的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明首選的化合物是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>根據(jù)新的穿心蓮內(nèi)酯衍生物所定義的通式ni的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明首選的化合物是:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>本發(fā)明提供的化合物還有AQAF,AC1和ANO:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>本發(fā)明是關(guān)于含有通式I的化合物或AQAF,AC1,ANO的藥物和藥物組合物及其這些藥物和藥物組合物在治療包括細(xì)菌及病毒感染、炎癥、癌癥和糖尿病等疾病中的用途。此藥物和藥物組合物包括含有通式I化合物中的一種或AQ,AF,AC1，ANO有效劑量或其藥學(xué)上可接受的鹽。其中Ri,R2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表示氫或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如脂肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、檸檬酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基、雜芳基等。而且Ri,R2和R3中至少有一個(gè)是硫辛酸(所有均指R-硫辛酸或S-硫辛酸或消旋體硫辛酸以及其相應(yīng)的二氫硫辛酸)或N-乙酰半胱氨酸。本發(fā)明是關(guān)于含有通式n化合物的藥物和藥物組合物，及其這些藥物和藥物組合物在治療包括細(xì)菌及病毒感染、炎癥、癌癥和糖尿病等疾病中的用途。此藥物和藥物組合物包括含有通式n化合物中的一種有效劑量或其藥學(xué)上可接受的鹽。其中R2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表^或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如脂肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、檸檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基、雜芳基等。本發(fā)明是關(guān)于含有通式III化合物的藥物和藥物組合物，及其這些藥物和藥物組合物在治療包括細(xì)菌及病毒感染、炎癥、癌癥和糖尿病等疾病中的用途。此藥物和藥物組合物包括含有通式m化合物中的一種有效劑量或其藥學(xué)上可接受的鹽。其中R2和R3可以相同或不同，并且獨(dú)立的表示氫或取代或未取代的下列基團(tuán)有機(jī)酸根，如H3CtH2ORH3CtH2OR脂肪酸和芳香酸根，包括乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、擰檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸、氨基酸根、苯甲酸根和無機(jī)酸根，如硫酸根、硝酸根、磷酸根等及它們的鹽；烷基、芳基雜芳基等。本發(fā)明是關(guān)于含有化合物AG或ANO的藥物和藥物組合物，及其這些藥物和藥物組合物在治療包括細(xì)菌及病毒感染、炎癥、癌癥和糖尿病等疾病中的用途。此藥物和藥物組合物包括含有化合物AG或ANO的一種有效劑量或其藥學(xué)上可接受的鹽。穿心蓮內(nèi)酯可抑希JNF-KB，，-KB在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、血管形成以及轉(zhuǎn)移等過程發(fā)揮重要作用，腫瘤微環(huán)境誘導(dǎo)NF-KB的表達(dá)，在很多癌癥中高表jiiNF-KB，從而誘導(dǎo)癌癥耐藥性的產(chǎn)生。穿心蓮內(nèi)酯也用于抗細(xì)菌與病毒感染，抗炎，治療糖尿病等。Alpha-硫辛酸是一種有效的抗氧化劑，具有對(duì)多種疾病的治療作用，例如抗細(xì)菌與病毒感染，抗炎，治療糖尿病及其并發(fā)癥。本發(fā)明提供的化合物是穿心蓮內(nèi)酯與一抗氧化劑如Alpha-硫辛酸的偶合物，具有多重作用機(jī)理和對(duì)多種疾病的治療作用。因此，本發(fā)明提供的穿心蓮內(nèi)酯衍生物不同于，而且優(yōu)于現(xiàn)有的穿心蓮內(nèi)酯衍生物。本發(fā)明的新穿心蓮內(nèi)酯衍生物適用于作為抗癌藥物或治療具有耐藥性的腫瘤；作為抗微生物藥物，包括細(xì)菌和病毒感染藥物；作為抗糖尿病藥物。由于獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征，本發(fā)明中的化合物具有多種治療功效，不僅僅包括抗菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤和抗糖尿病作用。圖1-1至1-8是本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯衍生物對(duì)細(xì)胞周期與引起細(xì)胞凋亡的作用圖；圖2是本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯衍生物對(duì)綠膿桿菌生長(zhǎng)的抑制作用圖；其中Andro,和AL-1的濃度分別為lmM;穿琥寧、炎琥寧和蓮必治則分別10mM;圖3是本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯衍生物對(duì)綠膿菌素分泌的抑制作用圖；其中Andro,和AL-1的濃度分別為lmM;穿琥寧、炎琥寧和蓮必治則分別10mM;圖4是本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯衍生物對(duì)胞外蛋白水解酶活性的抑制作用圖；其中Andro,和AL-1的濃度分別為lmM;穿琥寧、炎琥寧和蓮必治則分別10mM;圖5-l，5-2、5-3依次為無用藥組、Andro、AL-1對(duì)綠膿桿菌生長(zhǎng)形態(tài)影響的電鏡圖；其中，Andro和AL-1的濃度分別為1mM;圖6-l，6-2、6-3、6-4依次為無用藥組、Andro、穿琥寧、AL-1對(duì)綠膿桿菌早期BF形成的影響電鏡圖；其中Andro和AL-1的濃度分別為1mM,穿琥寧則為10mM。圖7-l，7-2、7-3、7-4依次為無用藥組、Andro、穿琥寧、AL-1對(duì)綠膿桿菌成熟BF形成的影響電鏡圖；其中Andro和AL-l的濃度分別為1mM,穿琥寧則為10mM。具體實(shí)施方式1、定義。本文所用的術(shù)語"有機(jī)酸"指飽和的和不飽和柳旨肪酸和芳香酸，其中脂肪酸包括，但不限于，含烷基脂肪酸、烯基脂肪酸、炔基脂肪酸。本文所用的術(shù)語"烷基"是指未被取代的或被取代的直鏈、支鏈或環(huán)形的多至15個(gè)碳原子的烷基碳鏈。直鏈烷基包括，如甲基、乙基、正丙基正丁基、TH戊基、正己基、正庚基和正辛基。環(huán)狀烷基("環(huán)烷基")包括，例如，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。烷基可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代。上述取代基的非限定性例子包括NH2、N02、N(CH3)2、ON02、F、Cl、Br、I、OH、OCH3、C02H、C02CH3、CN、芳基和雜芳基。術(shù)語"烷基"也指未取代或取代的直鏈、支鏈或環(huán)狀的含有多至15個(gè)碳原子的在鏈上含有至少一個(gè)雜原子(例如氮、氧或硫)的烷基。上述直鏈烷基包括，例如，CH2CH2OCH3、CH2CH2N(CH3)2ft1CH2CH2SCH3。支鏈基團(tuán)包括，例如，CH2CH(OCH3)CH3、CH2CH(N(CH3)2)CH)QCH2CH(OCH3)CH3。上述環(huán)狀基團(tuán)包括，例如，CH(CH2CH2)20、H(CH2CH2)2NCH^nCH(CH2CH2)2S。上述烷基可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代。上述取代基的非限定性例子包括NH2、N02、N(CH3)2、ON02、F、Cl、Br、I、OH、OCH3、C02H、C02CH3、CN、芳基和雜芳基。本文所用的術(shù)語"芳基"是指未被取代的或取代的芳香化合物、碳環(huán)基團(tuán)和雜芳基。芳基或者是單環(huán)或者是多環(huán)稠合化合物。例如，苯基是單環(huán)芳基。萘基是具有多環(huán)稠合的芳基的例子。芳基可以被一個(gè)或多個(gè)取代基取代。取代基的非限制性的例子包括NH2、N02、N(CH3)2、ON02、F、Cl、Br、I、OH、OCH3、C02H、C02CH3、CN、芳基和雜芳基。雜芳基涉及到取代的或非取代的單環(huán)或多環(huán)的基團(tuán)，環(huán)內(nèi)至少包括一個(gè)雜原子，譬如氮、氧以及硫。剩列來說，典型的雜環(huán)基團(tuán)包括一個(gè)或多個(gè)氮原子譬如四唑基、吡咯基、吡啶基(如4-吡啶基，3-吡P定基，2-吡啶基等)、噠嗪基、B引I^S、喹啉基(如2-喹啉基，3-喹啉基,、咪唑基、異喹啉基，吡唑基、吡嗪基、嘧啶基、吡啶酮基或噠嗪基；典型的含一個(gè)氧原子的雜環(huán)基團(tuán)包括2-呋喃基，3-呋喃基或苯并呋喃基；典型的硫雜原子基團(tuán)包括噻吩基、苯并噻吩基；典型的混合雜原子基團(tuán)包括呋吖基、噁唑基、異噁唑基、噻哇基和吩噻噁基。雜環(huán)基團(tuán)能被一個(gè)或多個(gè)取代基取代。這些取代基包括麗2、N02、O-烷基、NH-烷基、N(烷基)2、NHC(O)-烷基、ON02、F、Cl、Br、I、OH、OCF3、OS02CH3、C02H、COr烷基、CN以及芳基和多芳基。這些情況同時(shí)包括環(huán)內(nèi)雜原子被氧化，譬如形成N-氧化物、酮或砜。本文使用的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"指的是在化合物如鹽或賦形劑中不具有不能接受的毒性。藥學(xué)上可接受的鹽包括無機(jī)陰離子，例如氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、亞硫酸根、硝酸根、亞硝酸根、磷酸根等。有機(jī)陰離子包括乙酸根、丙酮酸根、丙酸根、肉桂酸根、甲苯磺酸根、檸檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根等。藥學(xué)上可接受的賦形劑在后文有描述，參見E.W.Martin^inRemington'sPharmaceuticalSciencesMackPublishingCompany(1995),PhiladelphiaPA,19thed中。本文使用的術(shù)語"氨基酸"指的是天然和非天然氨基酸，其中24種天然氨基酸包括丙氨酸、精氨酸、門冬醐安、門冬氨酸、瓜氨酸、半胱氮酸、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、羥脯氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、色氨酸、酪氨酸、纈氨酸；非天然氨基酸包括2-氟苯丙氨酸、3-氟苯丙氨酸、4-氟苯丙氨酸、2-氯苯丙氨酸、3-氯苯丙氨酸、4-氯苯丙氨酸、2，4-二氯苯丙氨酸、3，4-二氯苯丙氨酸、2-溴苯丙氨酸、4-溴苯丙氨酸、4-碘苯丙氨酸、4-硝基苯丙氨酸、2-甲基苯丙氨酸、3-甲基苯丙氨酸、4-苯丙氨酸、2-氰基苯丙氨酸、3-氰基苯丙氨酸、4-氰基苯丙氨酸、高苯丙氨酸、烯丙基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、3-(2-吡啶萄丙氨酸、3-(3-吡啶萄丙氨酸、3-(4-吡啶萄丙氨酸、3-(1-萘蜀丙氨酸、3-(2-萘基)丙氨酸、2-呋喃丙氨酸、3，3-二苯基丙氨酸、3-苯并噻吩丙氨酸、2-噻吩丙氨酸、3-噻吩丙氨酸、苯乙烯基丙氨酸、2，3，4，5，6-五氟苯丙氨酸、1，2，3，4-四氫-異喹嚀-3-羧酸、1,2，3，4-四氫-e咔啉-3-羧酸等。術(shù)語"治療有效量"指的是能夠抑制哺乳動(dòng)物疾病所需的藥物的量。由于獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征，本發(fā)明中的化合物具有多種治療功效，不僅僅包括抗菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤和抗糖尿病作用。2、治療方法和劑型。用于口服的組合物可以根據(jù)本領(lǐng)域藥學(xué)化合物生產(chǎn)已知的任何方法來制備并且這些組合物可以包含一種或多種選自甜味化合物、調(diào)味化合物、著色化合物和防腐化合物的化合物以提供藥學(xué)上和適口的制劑。片劑包含混合有無毒性的藥學(xué)上可接受的適用于片劑生產(chǎn)的賦形齊啲活性化合物。這些賦形劑可以是隋性稀釋齊咖碳酸鈣或海草酸，或者是粘合化合物如淀粉、明膠或阿拉伯膠和潤(rùn)滑化合物，如硬脂酸鎂、硬脂肪酸或滑石粉。片劑可以不涂層或它們可以用已知技術(shù)涂層以延緩在腸胃道中的分解和吸收并因此提供長(zhǎng)期持續(xù)作用。例如，可以使用如甘油硬脂酸鹽的為材料來延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間。口服的劑型還可以是硬膠囊形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或作為軟膠囊形式，其中活性成分與水或油介質(zhì)如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。水懸乳液包含混合有適合于水懸浮液生產(chǎn)的賦形劑的活性成分。其賦形劑是懸浮化合物，如羧甲基纖維素鈉、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃芷膠和阿拉伯膠；分散或潤(rùn)濕化合物可以是天然存在的磷脂，如卵磷脂劍旨肪MM氧化物的縮聚產(chǎn)物，如十七烷基乙烯氧鯨蠟醇或具有部分衍生自脂肪酸和己糖醇的乙烯氧化物的縮聚產(chǎn)物，如聚氧化乙烯山梨醇-油酸酯，或具有部分衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的乙烯氧化物的縮聚產(chǎn)物，如聚乙烯脫水山梨醇-油酸酯。水溶性懸浮液還可以包含一種或多種防腐劑，如乙烯或正丙基對(duì)羥基苯甲酸酯，以及一種或多種著色化合物，一種或多種調(diào)味化合物、一種或多種甜味化合物，如甘蔗或糖精。油懸浮液可以通過將活性成分懸浮植物油或礦物油制備，植物油如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油、礦物油如液體石蠟。油懸浮液可以包含增稠化合物，如蜂蠟、硬石蠟或乙酰醇。甜味化合物如上述那些，調(diào)味化合物可以加入以提供適合口服的制劑。這些組合物可以通過加入抗氧化劑如抗壞血酸而保存。適合通過加ZK制備水懸浮液的可分散粉劑和粒劑提供了混合有分散或濕潤(rùn)化合物、懸浮化合物以及一種或多種防腐劑的活性成分。適當(dāng)?shù)姆稚⒒驖駶?rùn)化合物和懸浮化合物示例于上面提到的那些化合物。附加的賦形劑如甜味、調(diào)B斜fl著色化合物也可以存在。發(fā)明中的藥物組合物還可以是水包油乳液形式。油相可以是植物油，如橄欖油、花生油或礦物油如液體石蠟或它們的混合物。適當(dāng)?shù)娜榛衔锟梢允翘烊淮嬖诘臉淠z，例如阿拉伯樹膠、黃薯膠、天然存在的磷脂例如大豆、卵磷脂和衍生自脂肪酸和已糖醇的酯或部分酯，酸酐例如脫水山梨醇和上面所述的部分酯與乙烯氧化物的縮聚產(chǎn)物，例如甜味、調(diào)味和著色化合物也可存在。糖漿劑可以通過甜味化合物如甘油、丙酸甘油山梨醇或蔗糖配制。這樣的劑型還可以包含緩和劑、防腐劑、調(diào)味和著色化合物。藥學(xué)的組合物可以是無菌可注射的水或油懸浮液的形式。這種懸浮液可以根據(jù)本領(lǐng)域己知的使用那些適當(dāng)?shù)姆稚⒒驖駶?rùn)化合物和上面已經(jīng)提至啲懸浮化合物配制。無菌可注射制劑還可以是無毒的生理上可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液，例如l，3-丁二醇的溶液。在這些可接受的賦形劑中可以使用溶劑水林格式(Ringer)溶液和等滲氯化物溶液。另外，無菌的混合油通常用作、，i」或懸浮介質(zhì)。為了這個(gè)目的，任何包括合成單體或甘油二酸酯的溫和混合油可以使用，而且脂肪酸如油酸在可注射制劑中使用?；钚曰衔镞€可以以藥物直腸給藥的栓劑形式給藥。這些組合物可以通過混合藥物與具有適當(dāng)糊瞎U激性賦形齊幌合第恪，其在常溫下是固體但在飾纟鵬下是液體并且將在直腸中融化釋放出藥物。這樣的物質(zhì)是可可豆脂和聚乙二醇?；钚曰衔镞€可以在無菌介質(zhì)中的非腸道給藥。依賴于賦形齊訴M吏用的濃度藥物既可以是懸浮的也可以溶角祐賦形劑中。有益的如局部麻醉齊啲輔劑、防腐劑和緩沖化合物可以溶解在賦形劑中。本發(fā)明的組合物可以連續(xù)地或間斷地通過任何與特定分子相容的路徑給藥。這樣，適當(dāng)?shù)?，給藥可以是井口的或非腸道的，包括皮下、靜脈、吸入、鼻飼和腹腔內(nèi)的給藥途徑。另外，間斷給藥可以通過每天一次、每?jī)商煲淮?、每三天一次、每周一次、每周兩次、兩周一次、每月兩次和每月一次定期注射組合物的大丸劑。.本發(fā)明的治療化合物可以通過任何適當(dāng)?shù)姆绞?、直接?如通過注射、植入的局部或?qū)M織部位的局部給夠或全身地(非腸道或經(jīng)口的)J^共給個(gè)體。其中組合物是非腸道方式給藥，如通過靜脈、皮下、目艮睛、腹腔、肌肉、口腔、直腸、陰道、真皮下、皮膚、氣管、大腦、顱內(nèi)、脊柱內(nèi)、心室內(nèi)、鞘內(nèi)、腦池內(nèi)、囊內(nèi)、鼻內(nèi)或通過氣溶膠給藥，優(yōu)選的組合物包括部分水或生理上相容的液體懸浮液或溶液的部分。這樣，載體或賦形劑是生理上可接受的以致于除了運(yùn)輸患者所需要的組合物外，其不會(huì)影響患者的電解質(zhì)和容積平衡。試劑的液體介質(zhì)因此可以包括常規(guī)的生理鹽水或PH為3-7.4的緩沖液。換句話說，本發(fā)明的治療組合物連續(xù)地或搏動(dòng)地通過微泵給藥用途可以使用在本發(fā)明的方法中。非腸道給藥的有益溶液可以通過任何制藥領(lǐng)域己知的方法制備，己經(jīng)描述的如在REMIGTON，SPHARMACEUTICALSCINECES(Gennaro,A.,ed.)，MackPub.,1990中。發(fā)明中的治療試劑的劑型可以包括，例如，聚亞烷基二醇如聚乙烯二醇、植物源油、氫化萘等。特別是直接給藥的劑型可以包括甘油和其他高粘稠組合物以助于維持試劑在所需的部位。生物相容的，優(yōu)選生物可吸收的聚合物，包括透明質(zhì)酸、膠原、磷酸三鈣、聚丁酸鹽、環(huán)二酯和乙交酯聚合物以及環(huán)二酯/乙交酉拱聚物，是對(duì)控制體內(nèi)試劑的釋放有益的賦形劑。其他的潛在的有益的對(duì)這些試劑的非腸胃運(yùn)輸系統(tǒng)包括乙烯-乙烯蠟酸酯共聚物顆粒、滲透泵、可移植浸劑和微脂粒。吸入給藥的劑型包含作為賦形劑的，如乳糖或可以是含水溶液的，如聚氧化乙烯-9-月桂醚、甘氨膽酸酯和脫氧膽酯或以滴鼻給藥方式的油溶液，或作為應(yīng)用于鼻內(nèi)的凝膠。非腸道給藥的劑型還可以包括口腔給藥的甘割旦酸鹽、；i^給藥的甲氧水楊酸鹽或陰道給藥的cutric酸。直腸給藥的栓劑還可以通過本發(fā)明(單獨(dú)或與化療試劑結(jié)合)的治療化合物與非刺激性的賦形劑的混合來制備，賦形劑如可可豆脂或其他的在室溫下為固體而在體溫下為液體的組合物。通過溶解、懸浮或乳化于水或非溶劑中配制的本發(fā)明合成的新化合物，其可以通過注射給藥。甲基亞砜、N,N-二甲基乙酰氧、N,N-二甲基甲酰胺、植物油或類似油、合成脂肪酸、甘油酯、高級(jí)脂肪酸的酯和proylene二醇示例為非水溶劑?；衔锱渲朴谒芤褐?，如Hank溶液、林格式溶液或生理鹽水緩沖液。通過與藥學(xué)上可接受的本領(lǐng)域已知的載體結(jié)合制備的本發(fā)明穿心蓮內(nèi)酯衍生物可以通過經(jīng)口給藥，載體允W^七合物配制成如患者口服的片劑、懸浮液、液體或凝膠。口服的制劑可以包含在各種方式中，包括將固體賦形劑與化合物混合，任意地研磨得到的混合物，加入適當(dāng)?shù)妮o助加工的粒劑混合物。下面的歹瞎包括可以用于口服劑型的賦形劑的例子糖如乳糖、蔗糖、甘露糖或山梨醇；纖維素制劑如玉米淀粉、小麥淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芷膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥甲基纖維素鈉和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。本發(fā)明的穿心蓮內(nèi)酯衍生物還可以以氣霧劑噴霧劑制劑從增壓塞、噴霧器或從干粉吸汝器中釋放。在噴霧器中可以使用的適當(dāng)推進(jìn)劑包括二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷和二氧化碳。在增壓噴霧器的例子中，劑量可以通過規(guī)定閥門釋放調(diào)節(jié)的化合物量。局部給藥到皮膚表面的劑型可以通過分散可釋放本發(fā)明的治療組合物的分子與皮膚病學(xué)可接受的載體如洗劑、乳膏、軟膏或肥皂而制備。特別有益的是載體在皮膚上可形成膜或?qū)右跃植繎?yīng)用和抑制遷移，對(duì)局部、內(nèi)組織表面的給藥，試劑可以分散在液體組織粘著的或其他的已知的基質(zhì)中以增強(qiáng)組織表面的吸收。例如，羥丙基纖維素或纖維蛋白原/凝血酶溶液可以使用使優(yōu)點(diǎn)突出。換句話說，組織途覆溶液，如含果膠的劑型可以使用。本發(fā)明的化合物可以用于抗癌藥物或治療具有耐藥性的腫瘤，抗微生物藥物，包括細(xì)菌和病毒感染藥物。本發(fā)明的新穿心蓮內(nèi)酯衍生物SS用于作為抗糖尿病藥物。本發(fā)明的這些化合物可以單獨(dú)給藥或與其他治療試劑結(jié)合使用。本發(fā)明的藥學(xué)組合物包含治療有效量的穿心蓮內(nèi)酯衍生物。化合物的量依據(jù)正在接受治療的患者的體重、疾病的嚴(yán)重性、給藥的方式和處方主治醫(yī)師的判斷在確定適當(dāng)?shù)挠盟幜繒r(shí)、應(yīng)該考慮。穿心蓮內(nèi)酉謝生物的治療有效量的確定受本領(lǐng)i或技術(shù)人員能力的限制。雖然穿心蓮內(nèi)酯衍生物的治療有效量根據(jù)正在治療的患者是變化的，但適當(dāng)?shù)幕衔锏膭┝康湫蚷也位于大約lmg/kg-lg/kg之間。在一些病例中，需要使用超過固定治療患者的范圍的劑量。那些病例對(duì)處方主治醫(yī)師是清楚的。必要的是，主治醫(yī)師也將結(jié)合待定特定患者的反應(yīng)知道如何和何時(shí)中止、調(diào)節(jié)或終止治療。通過參考下面的實(shí)施例來駐一歩明確本發(fā)明，但不意味對(duì)本發(fā)明范圍的限制。很明顯，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員很明顯的是對(duì)材料和方法的修改可以不離開發(fā)明的目的和意義而實(shí)踐。本發(fā)明的化合物可以在體內(nèi)和試驗(yàn)動(dòng)物模型中使用下面所描述的試劑測(cè)量功效。在下面給出的實(shí)施例子中詳細(xì)解釋了本發(fā)明，這些實(shí)施例子僅僅是說明性的，因此不應(yīng)將其解釋為對(duì)本發(fā)明范圍的限制。實(shí)施例l.制備3,19-異丙叉穿心蓮內(nèi)酯1將穿心蓮內(nèi)酯(150mg,0.43mmol)溶解在含2，2-二甲氧基丙烷(0.2mL)、對(duì)甲苯磺酸吡啶嗡(3mg)和甲苯/DMS0(3mL/0.4mL)的混合溶液中，80。C下攪拌l小時(shí)，反應(yīng)完全后，冷卻到室溫，用三乙胺(0.1mL)使反應(yīng)混合物終止反應(yīng)。反應(yīng)混合物用甲苯(20mL)稀釋，用水(3x5mL)洗滌，有機(jī)層用無7KNa2S04干燥并濃縮，得到的白色固體用乙醚洗滌并過濾得化合物1(130mg,78%)(Srinivasetal.,Bioorg.Med.Chem.Lett.2004,14，4711-4717)。實(shí)施例2.制備14魂辛酰-3，19-異丙叉穿心蓮內(nèi)酯2將氯甲酸乙酯(0,11mL)加入到a-硫辛酸的(214mg)CH2Cl2(8mL)溶液中，加入三乙胺0.21mL，氮?dú)獗Ｗo(hù)下0。C攪拌lh。化合物l(100mg)溶解于CH2C12(8mL)中，加入到此混合物中，常溫下攪拌2天。反應(yīng)后加入CH2Cl2(30mL)稀釋，依次用NaHC03水溶液和水洗滌。有機(jī)層用無水NaS04干燥，真空濃縮?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物2(90mg,610/。)，黃色結(jié)晶性粉末。iHNMR(CDCb,400MHz):57.03(t，1H，J=5.20Hz)，5.90(d，1H，J二6,50Hz)，4.90(s，1H)，4.20(dd，1H，^7.20，17.20Hz)，3.90(d，1H，</=11.99Hz)，1.42(s，3H)，1.37(s，3H)，1.21(s，3H)，0.81(s，3H)。MS(ESI)[M+H]+m/z578。實(shí)施例3.制備14魂辛酰-3，19-二羥1穿心蓮內(nèi)酯AL-1化合物2(100mg)加入到酸性水溶液中(AcOH/H20=7/3，3mL)，常溫下攪拌1h。反應(yīng)混合物加入水和NaHC03中，fflCH2Cl2(3x20mL)萃取。有機(jī)層用無水NaS04干燥，真空濃縮?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物AL-l(42mg,45M)黃色結(jié)晶性粉末。'HNMR(CDCl3,400MHz):7.03(t，1H，/=5.20Hz)，5.93(d，1H，A6.50Hz)，4.88(s，H)，4.50(s，1H)，4.244.17(dd，1H，J=6.80，18.40Hz)，3.34-3.32(d，1H，/=10.79Hz)，1.34(s，6H)。HRMS[M]+w^538.2417,(calcd538.2408)。其合成反應(yīng)式如下實(shí)施例4.制備14-[4'-氟肉桂駒-3,19-異丙叉穿心蓮內(nèi)酯3氯甲酸乙酯(56nL)加入到4'-氟肉桂酸的(85mg)的CH2C12(4mL)溶液中，加入三乙胺(107pL)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下0。C攪拌lh?；衔飈(100mg)溶解于CH2Cl2(4mL)中，加入到此混合物中，常溫下攪拌2天。反應(yīng)后加入CH2Cl2(40mL)稀釋，依次用NaHC037K溶液和水洗滌。有機(jī)層用^7KNaS04干燥，真空濃縮。混合物用硅膠柱分離得化合物3(85mg)。實(shí)施例5.制備14-[4'-氟肉桂酰]-3，19-二羥^~穿心蓮內(nèi)酯AF化合物3(70mg)加入到酸性zK溶液中(AcOH/H20=7/3，2mL)，常溫下攪拌1h。反應(yīng)混合物加入NaHC03水溶液中，并用CH2Cl2(3x20mL)萃取。有機(jī)層用無zRNaS04干燥，真空濃縮?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物AF(45mg)。實(shí)施例6.制備14-[4'-氯肉桂酰]-3，19-異丙叉穿心蓮內(nèi)酯4氯甲酸乙酯(56^L)加入到4'-氯肉桂酸的(95mg)的CH2C12(4mL)溶液中，加入三乙胺(107^L)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下0°C攪拌1h?；衔?(100mg)溶解于CH2C12(4mL)中，加入到此混合物中，常溫下攪拌2天。反應(yīng)后加入CH2Cl2(40mL)稀釋，依次用NaHC03水溶液和水洗滌。有機(jī)層用無7]CNaS04干燥，真空^^fl?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物4(68mg)。實(shí)施例7.制備14-[4'-氯肉桂酰1-3，19-二羥基-穿心蓮內(nèi)酯AC1化合物4(45mg)加入到酸性水溶液中(AcOH/H20=7/3，2mL)，常溫下攪拌1h。反應(yīng)混合物加入水和NaHCO3中和并用CH2Cl2(3x20mL)萃取，有機(jī)層用無水NaS04干燥，真空濃縮。混合物用硅膠柱分離得化合物AC1(40mg)。實(shí)施例8.制備14-[4',基肉桂酰-3,19-異丙叉穿心蓮內(nèi)酯5氯甲酸乙酯(56pL)加入到4'-硝基肉桂酸的(100mg)的CH2Cl2(4mL)溶液中，加入三乙胺(107pL)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下0。C攪拌lh?；衔飈(100mg)溶解于CH2C12(4mL)中，加入到此混合物中，常溫下攪拌2天。反應(yīng)后加入CH2Cl2(40mL)稀釋，依次用NaHC03水溶液和水洗滌。有機(jī)層用無水NaS04干燥，真空濃縮?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物5(115mg)。實(shí)施例9.制備14-[4'-硝基肉桂酰l-3，19-二羥1穿心蓮內(nèi)酯ANO化合物5(95mg)加入到酸性水溶液中(AcOH/H20=7/3，3mL)，常溫下攪拌1h。反應(yīng)混合物加入水和NaHC03中，并用CH2C12(3x20mL)萃取。有機(jī)層用無水NaS04干燥，真空濃縮?；旌衔镉霉枘z柱分離得化合物ANO(60mg)。化合物AF、AC1和ANO的合成反應(yīng)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>實(shí)施例IO.體外對(duì)L1210白血病細(xì)胞的棚中瘤活性將L1210細(xì)胞(1.5-2.0x105cells/mL)分別接種于96孔培養(yǎng)板中(90nL/孔)，加入含系列遞比稀釋濃度的穿心蓮內(nèi)酉旨衍生物及陽性對(duì)照藥物鹽酸阿霉素(Dox,10pL/孔)。置于37。C，在5%0)2和飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。加入5mg/mL的MTT(20^L/L)，同樣條件培養(yǎng)4h，加入DMSO(150pL/孔)，溶解紫藍(lán)色結(jié)晶，用酶標(biāo)儀測(cè)定(570/630nm)吸光度(A働。表1是體外對(duì)L1210白血病細(xì)胞的抗月中瘤活性，表1的數(shù)據(jù)表明新的穿心蓮內(nèi)酉旨衍生物具有比穿心蓮內(nèi)酯及其臨床上常用的穿琥寧，炎琥寧及蓮必治更強(qiáng)的抗腫瘤活性。表l化合物ic50.Andro28.74±6.19AL-18.04±1.92ANO9.96±2.25穿琥寧>100炎琥寧>100蓮必治>扁實(shí)施例11.細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)將L1210細(xì)胞(1.5-2.0xl05cells/mL)分別接種于6孔培養(yǎng)板(4mL/L)，加入一定濃度的待測(cè)穿心蓮內(nèi)酯衍生物及陽性對(duì)照藥物鹽酸阿霉素(1.72uM)，置于37。C，在5。/。C02和飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。離心除去培養(yǎng)基，PBS洗滌兩次，于-20。C固定過夜。然后離心，PBS洗滌除去乙醇，RNaseA(200pg/mL,Sigma)37°C培養(yǎng)1h，PI(50pg/mL,Sigma)避光染色30min，流式細(xì)胞儀檢測(cè)。濃度為10(iM時(shí)，穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL4和ANO能使L1210細(xì)胞12h后在G，前期發(fā)生阻滯，也就是發(fā)生凋亡；而穿心蓮內(nèi)酯則使L1210細(xì)胞阻滯在Go-G,期；陽性對(duì)照藥物Dox使L1210細(xì)胞阻滯在G2期;而臨床上使用的穿心蓮內(nèi)酯衍生物穿琥寧，炎琥寧及蓮必治并沒使L1210細(xì)胞的周期發(fā)生改變(如下圖l-8)。穿心蓮內(nèi)酉旨衍生物AL-l的細(xì)胞毒活性不但大于穿心蓮內(nèi)酯本身的3倍，而且還能引起L1210細(xì)胞的凋亡。實(shí)施例12.抑菌圈實(shí)驗(yàn)采用打洞法(Chitnisetal.,Mol.Microbiology1993,8,583-589)，分別將Andro、AL-1、ANO、穿琥寧，炎琥寧及蓮必治加入到含金黃色葡萄球菌及其耐藥菌株(MRAS5676和5677)、大腸桿菌、枯草桿菌、綠膿桿菌LB固體培養(yǎng)基的平皿中(白色念珠菌用YP固體培養(yǎng)基)，37°C，培養(yǎng)24h，量取抑菌圈大小。教是體外抗微生物活性，如敦所示，天然Andro及3種臨床上常用的穿心蓮內(nèi)酯衍生物炎琥寧、穿琥寧和蓮必治均無抗菌活性。然而，新合成的穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL-l和ANO不但能生型金葡菌，對(duì)甲氧苯青霉素耐藥菌株MRSA5676和5677也有抑菌活性。敦<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>其中，陽性對(duì)照藥:素0.15mg/孔，慶大霉素O.lOmg/孔，萬古霉素0.15mg/孔，制霉素O.IOmg/L;a重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)差，化合物0.05mg/L;b無活性(抑菌直徑小于4mm)。實(shí)施例13.最低抑菌濃度(MIC)實(shí)驗(yàn)采用二倍稀釋法，分別將Andro、AL-l和ANO、穿琥寧、炎琥寧及蓮必治加入到含金黃色葡萄球菌及其耐藥菌株(MRAS5676和5677)的LB液體培養(yǎng)基的96孔板中，37°C，培養(yǎng)24h，595nm測(cè)定吸光度。表3是化合物對(duì)金黃色葡萄球菌及其耐藥菌株的MC;如表3所示，新合成的穿心蓮內(nèi)酯衍生物AL-l和ANO具有良好的抑菌活性。同樣，Andro、穿琥寧、炎琥寧及蓮必治的MIC>1mM。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>其中，c表示無活性(>lmM)。實(shí)施例14.綠膿桿菌生長(zhǎng)曲線測(cè)定將綠膿桿菌接種于LB培養(yǎng)基中，37°C恒溫?fù)u晃培養(yǎng)過夜,對(duì)照組為L(zhǎng)B培養(yǎng)基，用藥組為含Andro、AL-l禾卩ANO、穿琥寧、炎琥寧及蓮必治的LB培養(yǎng)基。將培養(yǎng)12h的PA菌液分別加入對(duì)照組和用藥組培養(yǎng)基，使待測(cè)菌液初始A600為0.05，于37。C下同時(shí)培養(yǎng)，取不同時(shí)間測(cè)量菌液波長(zhǎng)為600nm下的A。如下圖2所示，當(dāng)藥物濃度為lmM時(shí)，AL-1能明顯抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，Andro有很弱的抑菌活性。而臨床上常用穿琥寧、炎琥寧和蓮必治對(duì)綠膿桿菌生長(zhǎng)無直接抑制作用。實(shí)施例15.綠膿菌素(Pyocyanin)領(lǐng)!l定將綠膿桿菌接種于LB培養(yǎng)液中，37。C恒溫?fù)u晃培養(yǎng)過夜，對(duì)照組為PB培養(yǎng)基，用藥組為含Andro、AL-l和ANO、穿琥寧、炎琥寧及蓮必治的PB培養(yǎng)基。將培養(yǎng)12h的綠膿桿菌菌液分別加入對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基，使待測(cè)菌液初始A60o為0.05，培養(yǎng)3-4h,A6oo為0.3-0.5,綠膿桿菌菌液分別加入對(duì)照組和用藥組培養(yǎng)基，使待領(lǐng)U菌液初始A6oo為0.05，于37。C下同時(shí)i咅養(yǎng)18h，離心，取上清夜，依次加氯仿提取，0.2NHC1萃取(淺紅色)，As2o檢測(cè)(Zielinshietal.，Biol.Chem.1991,266，9754-9763;Mayetal.,Clin.MicrobiologyRev.1991,4,191-206)。我們測(cè)定了綠膿菌素的分泌并發(fā)現(xiàn)待測(cè)化合物均能抑制綠膿菌素的分泌(如下圖3)。抑制綠膿菌素分泌的活性依次為AL-l>AndnANO，AL-1活性最強(qiáng)。值得指出的是，實(shí)驗(yàn)中的AL-1和ANO的濃度僅為穿琥寧、炎琥寧和蓮必治的1/10。實(shí)施例16.胞外蛋白水解,rotease)測(cè)定將綠膿桿菌接種于LB液中，37。C恒溫?fù)u晃培養(yǎng)過夜，對(duì)照組為PTSB培養(yǎng)基，用藥組為含Andro、AL-l和ANO、穿琥寧、炎琥寧及蓮必治的PTSB培養(yǎng)基。將培養(yǎng)12h的綠膿桿菌菌液分別加入對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基，使待測(cè)菌液初始A6oo為0.05，綠膿桿菌菌液分別加入對(duì)照組和用藥組培養(yǎng)基使待測(cè)菌液初始A6oo為0.05，于37。C下同時(shí)培養(yǎng)6h，離心，取上清夜100pL，加入偶氮酪蛋白5mg，力nlmM，Tris(pH7.2)10mM，CaCl210mM，于37。C下同時(shí)振蕩反應(yīng)6h，EDTA-Na停止反應(yīng)，上清^A440檢測(cè)(Zielinshietal.,Biol.Chem.1991，266,9754-9763;Mayetal.,Clin.MicrobiologyRev.1991,4,191-206)。所有化合物均能抑制胞外蛋白水解酶的產(chǎn)生(如下圖4)。抑制外蛋白酶活性為AL-l>ANO>Andro。值得指出的是，實(shí)驗(yàn)中的Andro和ANO的濃度僅為穿琥寧、炎琥寧和蓮必治的1/10。實(shí)施例17.原子力顯微鏡(AFM)實(shí)驗(yàn)將綠膿桿菌接種于LB液中，37。C恒溫?fù)u晃培養(yǎng)過夜，取菌液離心，無菌生理鹽水洗滌2次，再用生理鹽7尺配成0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)(細(xì)菌數(shù)約為5xl(PCFU/mL)的菌懸液，此菌懸液用生理鹽7K稀釋50倍，對(duì)照組為MHB培養(yǎng)基，用藥組為含Andro、和AL-1的MHB培養(yǎng)基。與藥物接觸15h，1mL的培養(yǎng)液入無菌離心管，10,000xg，離心5min，棄上清液，將收集的細(xì)菌樣本用雙蒸水洗滌兩次，使細(xì)菌懸浮于雙蒸水中，吸取少量綠膿桿菌懸液，小心滴于蓋玻片上，待水分自然風(fēng)干，CP-Research型原子力顯微鏡(美國(guó)Themiomicroscopes公司)檢領(lǐng)!l(Pasteretal.，Antimicro.Chemother.1994,34，679-685;Wickenetal.,Antimicro.AgentsChemother.2000，44,682-687;Nickeletal,Urology1986,135,586-588)。由下圖5可看出，用藥組的綠膿桿菌生長(zhǎng)狀態(tài)明顯差于無用藥的對(duì)照組，而且新合成的衍生物AL-l又明顯的優(yōu)于Andro組。經(jīng)AH(1mM)處理過的綠膿桿菌并不能形成密集的菌落，直觀的證明了新合成的衍生物AL-l能直接的破壞綠膿桿菌的OS系統(tǒng)。實(shí)施例18.掃描電鏡(SEM)實(shí)驗(yàn)將綠膿桿菌接種于LB液中，37。C恒溫?fù)u晃i咅養(yǎng)過夜,取菌液離心，無菌生理鹽水洗滌2次，再用生理鹽7jC配成0,5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)(細(xì)菌數(shù)約為5xl(f9CFU/mL)的菌懸液，此菌懸液用生理鹽7K稀釋50倍，將生物被膜(BF)載體方認(rèn)盛有2mL菌懸液的試管內(nèi)，37。C恒溫培養(yǎng)，第3天在載體表面形成早期BF，第7天形成成熟的BF(Waltersetal.,J.Antimicro.Chemother.2003,47,317-323)。每隔兩天更換i咅養(yǎng)基。用Quanta400熱場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡(荷蘭飛利浦FEI公司)觀^BF的形成情況。附著BF的載體經(jīng)滅菌生理鹽水沖洗去掉浮游菌后用2.5%戊二醛固定，依次用pH7.4的PBS浸泡3次，再用50%、70%、80%、90%酒精各脫7_)0次，然后用100。/。酒精脫7X2次，叔丁醇脫7jC2次，每次均為5min，冷凍干燥5h。載體表面在真空條件下鍍金粉，SEM觀察，確認(rèn)BF形成。SEM下BF的觀察結(jié)果提示，早期(如下圖6)或成熟(如下圖7)的BF纟5AL-1作用后載體表面的BF均比空白對(duì)照組少，表明AL-1能破壞PA的BF。Andro并不能明顯的抑制BF的形成；而臨床使用的穿琥寧即使在濃度高達(dá)lOmM(其余的化合物均為lmM)時(shí)仍然不能破壞綠膿桿菌的BF;Andro破壞綠膿桿菌的BF的能力非常弱。再一次證明了AL-1具有很強(qiáng)的破壞綠膿桿菌的BF形成能力。實(shí)施例19.與抗生素^用藥實(shí)驗(yàn)臨床上紅霉素(Erythromycin)和環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin)是治療綠膿桿菌感染較為有效的藥物。前已敘述，天然Andro和紅霉素類藥物及環(huán)丙沙星有協(xié)同作用。因此，我們對(duì)懸浮的綠膿桿菌用新合成的衍生物AL-1和紅霉素及環(huán)丙沙星進(jìn)行了聯(lián)合抗菌實(shí)驗(yàn)。單獨(dú)用環(huán)丙沙星時(shí)的存活率為85%，環(huán)丙沙星和新合成的衍生物AL-l合用時(shí)的存活率只有為54.9y。(見表4，是不同藥物處理后綠膿桿菌的存活率)。單獨(dú)用紅霉素時(shí)的存活率為93.9%，紅霉素和新合成的衍生物AL-1合用時(shí)的存活率只有40.8%。環(huán)丙沙星和紅霉素合用時(shí)的存活率為35.7%。在此濃度下紅霉素和新合成的衍生物AL-1合用與環(huán)丙沙星和紅霉素合用效果幾乎相當(dāng)。更為重要的是，新合成的衍生物AL-1與環(huán)丙沙星和紅霉素合用時(shí)的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于Andro與環(huán)丙沙星和紅霉素合用。再次證明了AL-1的療效強(qiáng)于臨床應(yīng)用的Andro。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>其中，Andro(350pg/mL)和AL-l(538pg/mL)的摩爾濃度相同，艮卩1^unol/mL.用藥后的綠膿桿菌，經(jīng)15h培養(yǎng)，OD,測(cè)A值。實(shí)施例20.對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的治療作用雌性SD大鼠30只，體重180-220g，禁食16hrs后腹腔注射STZ(購(gòu)自sigma公司)60mg/kg。72hrs后剪尾采血，之前禁食16hrs，用血糖儀(強(qiáng)生公司)測(cè)定血糖。將糖尿病大鼠分為4組:Vehicle對(duì)照組，Andro(100mg/kg)治療組，AL-l(160mg/kg)治療組和格列苯脲(0.6mg/kg)陽性對(duì)照組，每組4只，另設(shè)正常對(duì)照組大鼠4只。動(dòng)物稱重，眼眶采血，分離血清，按試劑盒(購(gòu)自浙江東鷗生物工程有限公司)說明操作測(cè)定甘油三酯(Triglyceride)和總膽固醇(Cholesterol)含量，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物根據(jù)分組給予Andro，AL-1或格列苯脲治療，灌胃，每天1次，連續(xù)7天，Vehicle對(duì)照組每日給予等量的溶劑(20%DMSOinH20)。禁食16hrs后，稱重，采血測(cè)治療后血糖、甘油三酯和總膽固醇。數(shù)據(jù)處理采用單因素方差分析t-檢驗(yàn)(One-wayANOVAfollowedbyStudent'st-test)。表5是AL-1對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的治療作用，如表5所示，糖尿病大鼠經(jīng)治療一周后，Andro，AL-1對(duì)糖尿病大鼠體重減輕有保護(hù)作用，效果與格列苯脲相當(dāng)；降糖作用AL-1效果明顯優(yōu)于Andro(等摩爾濃衝，與陽性對(duì)照格列苯脲效果相當(dāng)，可降低血糖的66%左右；此外，AL-1和Andro對(duì)糖尿病大鼠的甘油三酯和總膽固醇升高也有一定的逆轉(zhuǎn)作用，兩者效果相當(dāng)。表5指標(biāo)大'線樹照穿心蓮內(nèi)酯AL-1格列苯脲019633±11.93198.33±10.69214.33±9.81201±3.61體重(g)191.67±7.64b7170±3.05194±5.66a195±1.4f024.93±4.9722.15±0.3519.53±.9026.9±1.56血糖(mmol/L)6.63±2.41b'c9.25±0.64b'e723肚3.0618.6±0.2807.36±1.038.44±2.456.28±0.787.84±2.21總甘油三酯(mmol/L)2.04±0.38b'e1.9±0.8b'c76.78±0.964.79±0.45e02.87±1.43.15±1.673.39±0.592.57±1.09總膽固醇(mmol/L)了2.15±0.051.61±0.26a1.95i0.63a1.86±0.29cSTZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠^AL-1治療7天后體重、血糖、總甘油三酯和膽固醇7jC平變化情況。第0天表示給藥前，第7天表示連續(xù)給要7天后。每組4只動(dòng)物，數(shù)值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，aP<0.05,b尸O.Ol與溶劑對(duì)照比較。e尸〈0.05與第0天比較(采用單因素方差分析T檢驗(yàn)。)。3權(quán)利要求1、一種穿心蓮內(nèi)酯衍生物，其特征在于具有如下通式I的結(jié)構(gòu)其中，R1，R2和R3是相同或不同的氫、取代或未取代的有機(jī)酸根、無機(jī)酸根、烷基、芳基或雜芳基，而且R1，R2和R3中至少有一個(gè)是R-硫辛酸、S-硫辛酸或二者混合物、或其相應(yīng)的二氫硫辛酸或N-乙酰半胱氨酸根。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物，其特征在于具有如下通式II的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>所述有機(jī)酸根是指脂肪酸根或芳香酸根，所述脂肪酸根是指乙酸根、丙酸根、丁酸根、丙二酸根、丙酮酸根、肉桂酸根、琥珀酸根、檸檬酸根、乳酸根、葡萄糖酸根、硫辛酸根、N-乙酰半胱氨酸或氨基酸根；所述芳香酸根是指苯甲酸根；所述無機(jī)酸根是指硫酸根、硝酸根或磷酸根。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物，其特征在于具有如下式AL-l的結(jié)構(gòu)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物，其特征在于具有如下通式III的結(jié)構(gòu):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5根據(jù)權(quán)利要求4所述的所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物，其特征在于具有如下式A-AC的結(jié)構(gòu):6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>或其藥學(xué)上可接受的鹽。7、權(quán)利要求l"6之一所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物或其組合物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。8、權(quán)利要求l"6之一所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物或其組合物在制備治療炎癥藥物中的應(yīng)用。9、權(quán)利要求1~6之一所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物或其組合物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。10、權(quán)利要求M之一所述的穿心蓮內(nèi)酯衍生物或其組合物在制備治療細(xì)菌及病毒感染藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及一種穿心蓮內(nèi)酯衍生物，具有如下通式I的結(jié)構(gòu)其中，R₁，R₂和R₃是相同或不同的氫、取代或未取代的有機(jī)酸根、無機(jī)酸根、烷基、芳基或雜芳基，而且R₁，R₂和R₃中至少有一個(gè)是R-硫辛酸、S-硫辛酸或二者混合物、或其相應(yīng)的二氫硫辛酸或N-乙酰半胱氨酸根；所述衍生物具有良好的抗腫瘤效果，并且能引起腫瘤細(xì)胞的凋亡，能直接殺滅革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌和耐藥菌MRSA5676和MRSA5677，還能抑制革蘭氏陰性菌綠膿桿菌的QS系統(tǒng)，同時(shí)還可以抑制和破壞綠膿桿菌生物被膜的形成；具有明顯的降糖作用，可用于制備治療癌癥藥物、炎癥藥物、糖尿病藥物、細(xì)菌及病毒感染藥物。文檔編號(hào)A61P31/00GK101125850SQ20071002964公開日2008年2月20日申請(qǐng)日期2007年8月8日優(yōu)先權(quán)日2007年8月8日發(fā)明者沛于,張?jiān)谲?楊兆琪,江曉間,王玉強(qiáng),杰蔣申請(qǐng)人:暨南大學(xué)