專利名稱：：藥物微乳注射液組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物微乳注射液組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：目前常用的微乳中多采用單一的乳化劑、助乳化劑、油相和水即可制成微乳，但均存在著不穩(wěn)定；不能被水或者其它溶劑稀釋；在滅菌過程中由于乳化劑曇點的原因，造成微乳的分層或者混濁等問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是如何克服現(xiàn)有藥物微乳注射液組合物的上述缺陷，提供一種穩(wěn)定性好、容易被稀釋、且滅菌時不會出現(xiàn)曇點、不易分層、不易混濁的藥物微乳注射液組合物及其制備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明藥物微乳注射液組合物，包括主藥、注射用油、乳化劑、助乳化劑、PH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑和注射用水，所述乳化劑包括聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆、磷脂，其特征在于所述乳化劑中還包括膽酸鹽或去氧膽酸鹽，該乳化劑的四種組份重量比為1:0.020.1:0.10.5:0.0010.02。如此設(shè)計，不但有利于磷脂的穩(wěn)定，而且增加了尼莫地平的溶解度。膽酸鹽、去氧膽酸鹽可以是鈉鹽，也可以是鉀鹽。作為優(yōu)化，所述助乳化劑為混合助乳化劑，該混合助乳化劑由乙醇和聚乙二醇400組成，乙醇和聚乙二醇400的重量比為1:0.310。作為優(yōu)化，所述主藥為尼莫地平，每100ml中含有尼莫地平0.01~0.2g、注射用油210g、乳化劑530g、助乳化劑530g、等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧劑適量，其余為注射用水。尼莫地平適于改善腦血流量。按照上述配方制備的尼莫地平微乳注射液組合物穩(wěn)定性好，易稀釋、且滅菌時不會出現(xiàn)曇點、不分層、不混濁。上述藥物微乳注射液組合物的制備方法，包括下述步聚①、油相的制備室溫下在配制罐中加入油相，然后加入尼莫地平，攪拌混勻，加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，使尼莫地平完全溶解，作為溶液A，在氮氣下，將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解，再將磷脂的乙醇溶液、聚乙二醇400和抗氧劑加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻。②、水相的制備室溫下，將泊洛沙姆加入約2倍量的水中，使泊洛沙姆溶解；將膽酸鈉或去氧膽酸鈉溶解于適量的水中；在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和膽酸鈉或去氧膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至全量的80%，根據(jù)需要加入等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH至5.07.5，攪拌均勻。③、在上述的溶液中加入0.05%0.1%的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22pm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量，即得尼莫地平微乳注射液組合物，滅菌，即可。在上述步聚中各組份的用量前所述。如此設(shè)計，操作方便，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。采用上述技術(shù)方案后，本發(fā)明藥物微乳注射液組合物，特別是尼莫地平微乳注射液組合物具有穩(wěn)定、易稀釋、且滅菌時，不分層、不出現(xiàn)曇點，不混濁的優(yōu)點，本發(fā)明藥物微乳注射液組合物的制備方法具有操作方便，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的優(yōu)點，廣泛適用于各種微乳藥劑制備過程中。圖1是按本發(fā)明方法制備的尼莫地平微乳注射液冷凍蝕刻電鏡圖片;圖2是按本發(fā)明方法制備的尼莫地平微乳注射液粒徑分布圖。具體實施例方式下面對本發(fā)明作進一步說明組方尼莫地平工藝:聚氧乙烯蓖麻油泊洛沙姆磷脂膽酸鈉無水乙醇聚乙二醇400中碳鏈甘油酯生育酚注射用水加至O.lglO.Og0.8g3.0g0.05g3.0gl.Og1.6gO.lg5.0g100ml1、油相的制備室溫下在配制罐中加入中碳鏈甘油酯，然后加入尼莫地平，攪拌混勻。加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，使尼莫地平完全溶解，作為溶液A。將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解。再將磷脂的乙醇溶液、聚乙二醇400和生育酚加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻。2、室溫下，將泊洛沙姆加入約2g水中，使泊洛沙姆溶解。將膽酸鈉溶解于適量的水中。在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至80ml，加入葡萄糖溶解后，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為7.0，攪拌均勻。3、在上述溶液中加入0.05%的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22Pm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量。115'C熱壓滅菌30分鐘。即得尼莫地平微乳注射液組合物，為略帶淡藍色乳光的澄清透明液體，平均粒徑為56.2nm。尼莫地平0.2g聚氧乙烯蓖麻油泊洛沙姆0.6g磷脂l.Og去氧膽酸鈉0.15g無水乙醇2.0g聚乙二醇4001.5g中碳鏈甘油酯1.5g生育酚O.lg氯化鈉0.9g注射用水加至100ml工藝1、油相的制備室溫下在配制罐中加入中碳鏈甘油酯，然后加入尼莫地平，攪拌混勻。加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，使尼莫地平完全溶解，作為溶液A。將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解。再將磷脂的乙醇溶液、聚乙二醇400和生育酚加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻。2、室溫下，將泊洛沙姆加入約1.5g水中，使泊洛沙姆溶解。將去氧膽酸鈉溶解于適量的水中。在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和去氧膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至80ml，加入氯化鈉溶解后，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為6.5，攪拌均勻。3、在上述溶液中加入0.05X的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22Pm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量。115"熱壓滅菌30分鐘。即得尼莫地平微乳注射液組合物，為略帶淡藍色乳光的澄清透明液體，平均粒徑為43.6nm。泊洛沙姆分別改取0.12g、0.36g、0.6g，其余組份和用量不變，重復(fù)上述制備方法，所得尼莫地平微乳注射液組合物在穩(wěn)定性、稀釋性等方面具有相似的優(yōu)點，故略。磷脂分別改取0.6g、1.8g、3.0g，其余組份和用量不變，重復(fù)上述制備方法，所得尼莫地平微乳注射液組合物在穩(wěn)定性、稀釋性等方面具有相似的優(yōu)點，故略。去氧膽酸鈉分別改取0.006g、0.063g、0.12g,其余組份和用量不變，重復(fù)上述制備方法，所得尼莫地平微乳注射液組合物在穩(wěn)定性、稀釋性等方面具有相似的優(yōu)點，故略。聚乙二醇400分別改取0.12g、6.0g、6.0g,其余組份和用量不變，重復(fù)上述制備方法，所得尼莫地平微乳注射液組合物在穩(wěn)定性、稀釋性等方面具有相似的優(yōu)點，故略。分別以膽酸鈉、膽酸鉀、去氧膽酸鉀代替去氧膽酸鈉，所得尼莫地平微乳注射液組合物在穩(wěn)定性、稀釋性等方面具有相似的優(yōu)點，故略。實施例3:尼莫地平0.15g聚氧乙烯蓖麻油6.5g泊洛沙姆0.8g磷脂1.2g去氧膽酸鈉0.04g無水乙醇2.5g聚乙二醇4001.5g注射用大豆油l,Og注射用水加至腦ml工藝1、油相的制備室溫下在配制罐中加入注射用大豆油，然后加入尼莫地平，攪拌混勻。加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，使尼莫地平完全溶解，作為溶液A。將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解。再將磷脂的乙醇溶液和聚乙二醇400加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻。2、室溫下，將泊洛沙姆加入約2g水中，使泊洛沙姆溶解。將去氧膽酸鈉溶解于適量的水中。在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和去氧膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至80ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為7.0，攪拌均勻。3、在上述溶液中加入0.1%的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22Pm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量。115。C熱壓滅菌30分鐘。即得尼莫地平微乳注射液組合物，為略帶淡藍色乳光的澄清透明液體，平均粒徑為51.8nm。組方己烷雌酚0.50g聚氧乙烯蓖麻油8.0g泊洛沙姆0.8g磷脂1.5g膽酸鈉1.6g無水乙醇4.0g聚乙二醇4002.4g中碳鏈甘油酯2.0g注射用水加至100ml1、油相的制備室溫下在配制罐中加入中碳鏈甘油酯，然后加入己垸雌酚，攪拌混勻。加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，作為溶液A。將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解。再將磷脂的乙醇溶液和聚乙二醇400加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻。2、室溫下，將泊洛沙姆加入約2g水中，使泊洛沙姆溶解。將膽酸鈉溶解于適量的水中。在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至80ml，攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH至6.5，攪拌均勻。3、在上述溶液中加入0.08%的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22Pm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量。115。C熱壓滅菌30分鐘。即得己烷雌酚微乳注射液組合物，為略帶淡藍色乳光的澄清透明液體，平均粒徑為68.2nm。如同己烷雌酚一樣，用其他需要制備微乳注射液的主藥替代尼莫地平，按上述配比、方法制備的微乳注射液藥劑同樣具有穩(wěn)定性好、容易被稀釋、且滅菌時不會出現(xiàn)曇點、不易分層、不易混濁的優(yōu)點，略。將實施例2進行如下實驗觀察形態(tài)、粒度、分布測定、穩(wěn)定性考察、生物利用度、刺激性、過敏性、溶血性試驗。(1)形態(tài)學(xué)研究抽高真空至3xlO—Vbar，降溫至-120。C，用液氮迅速冷凍微乳樣品，將樣品轉(zhuǎn)移至冷凍蝕刻儀，在3xl0—7mbar得高真空和-12(TC狀態(tài)下，蝕刻樣品，一分鐘后，于45。C噴Pt、9(TC噴C，取出樣品，在水中用銅網(wǎng)撈膜，晾干，上鏡觀察并照相。電鏡下觀察尼莫地平微乳呈大小均勻規(guī)則的圓球形粒子。見圖1。(2)粒徑及其分布測定取制備的微乳樣品適量，用激光粒度散射儀測定粒徑及其分布。激光粒度散射儀測得的尼莫地平微乳粒徑分布均勻，平均粒徑為43.6nm，多分散系數(shù)0.277，呈Gauss分布。符合微乳的粒徑要求。見圖2。(3)穩(wěn)定性考察影響因素實驗將制備的尼莫地平微乳置于烘箱6(TC、冰箱4。C放置10天，于0、5、IO天末取樣測定；熱循環(huán)實驗三次(每次將樣品置于-2(TC放置2天，然后加熱到4(TC放置兩天進行測定)。考察指標(biāo)外觀性狀、pH值、粒徑、包封率、含量、有關(guān)物質(zhì)等項。結(jié)果微乳在6(TC試驗條件下，pH值略有下降，有關(guān)物質(zhì)略有增加；光照條件下，溶液顏色變?yōu)樯铧S色，含量極低，表明尼莫地平見光極易分解，其他指標(biāo)均無明顯變化。提示本品應(yīng)常溫避光保存。加速實驗將制備的尼莫地平微乳置于隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱4(TC放置6個月，分別于0、1、2、3、6月末取樣測定?？疾熘笜?biāo)同上，同時6月末檢查無菌和熱原。結(jié)果尼莫地平微乳均是澄清透明或略帶淡藍色乳光的熱力學(xué)穩(wěn)定的淡黃色液體，未見分層、絮凝、合并、破裂。粒徑、包封率、含量、有關(guān)物質(zhì)均無發(fā)生明顯的變化。實驗數(shù)據(jù)對比表(本發(fā)明方法和常規(guī)方法分別制備的尼莫地平微乳)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>說明本發(fā)明方法添加了膽酸鈉或去氧膽酸鈉；使用了乙醇和聚乙二醇的混合助乳化劑。常規(guī)方法未使用膽酸鈉或去氧膽酸鈉；單用乙醇或但用聚乙二醇為助乳化劑。(4)生物利用度和靶向性試驗本試驗采用HPLC法測定小鼠血漿中的尼莫地平的血藥濃度，以此評價尼莫地平微乳靜注的生物利用度和靶向性。對照藥為市售尼莫地平注射液。色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為237nm，以乙腈-水(65:35)為流動相，流速為1.0ml/min。給藥及采樣小鼠給藥前12小時禁食，自由飲水，其中10組尾靜脈注射尼莫地平微乳液(含量0.4mg/ml)，按小鼠體重(0.25mg/kg，0.25ml/20g)給藥，作為實驗組。另外10組尾靜脈注射尼莫地平注射液(相同劑量)，做為對照組。實驗組和對照組于給藥后0.08(5min)、0.33(20min)、0.5(30min)、45min、l.Oh、1.5、2、3、4、6h分別摘眼球取血，取血后立即處死一組動物，立即取各時間點血漿、腦、肝、脾、心樣品，樣品處理后進行測定。將測得的峰面積以外標(biāo)法計算血漿、腦、肝中尼莫地平的濃度。結(jié)果表明(1)尼莫地平微乳在腦組織中具有較高的濃度，但腦中濃度與血漿濃度無顯著性差異(P>0.05)，體內(nèi)各組織濃度分布次序為腦>血漿>肝臟。(2)尼莫地平微乳注射液比市售尼莫地平注射液生物利用度高，但無顯著性差異(P〉0.05)，市售尼莫地平注射液腦組織液中含量甚微，與尼莫地平微乳注射液比具有顯著性差異(P<0.05)。(5)刺激性、過敏性、溶血性試驗動物白色豚鼠體重250-300g，雌雄兼用；大耳白家兔體重2.8kg，雄性；均由清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。過敏性試驗取白色豚鼠18只，雌雄兼用，體重250-300g，隨機分為供試藥，陰性對照藥和陽性對照藥三組，每組6只豚鼠，然后供試藥組分別隔日腹腔尼莫地平微乳注射液溶液0.5ml/只，陰性對照藥組分別隔日腹腔注射0.9%氯化鈉溶液0.5ml/只，陽性對照組分別隔日腹腔注射5%卵蛋白溶液0.5ml/只，連續(xù)三次，然后再將供試藥組、陰性對照組和陽性對照組分別隨機分成二小組，每小組3只豚鼠，第一小組于注射后第14天、第二小組于注射后第21天，由耳緣靜脈注射原藥液lml/只，并觀察注射各藥后15分鐘內(nèi)豚鼠有無豎毛、呼吸困難、噴嚏、干咳或咳嗽3聲等現(xiàn)象中兩種以上者或有羅音、抽搐、虛脫或死亡現(xiàn)象之一者，判為有過敏現(xiàn)象。結(jié)果表明尼莫地平微乳注射液組豚鼠于首次注射后第Md，再由耳緣靜脈注射尼莫地平微乳lml/只，15分內(nèi)3只豚鼠均未出現(xiàn)明顯顫抖、豎毛、咳嗽、呼吸困難、痙攣、抽搐乃至死亡。表明該批制劑沒有過敏反應(yīng)發(fā)生。溶血性試驗；制備2%紅細胞懸液取家兔血10ml，除去纖維蛋白原后，放入潔凈盛有玻璃球的三角燒杯中振搖10min，除去纖維蛋白原后，加約IO倍量0.9%氯化鈉溶液，搖勻，以3000r/min離心，棄去上清液，沉淀紅細胞，再用0.9%氯化鈉溶液反復(fù)洗滌至無紅色為止，量取血球，以0.9%氯化鈉溶液配置成2%紅細胞懸液。測試方法取潔凈試管7支，按表配比量一次加入2%紅細胞懸液和0.9%氯化鈉溶液，混勻后，于37攝氏度恒溫水浴放置30min，然后分別加入不同量尼莫地平微乳注射液，第六管不加藥液做陰性對照管，第7管亦不加藥液，0.9%氯化鈉溶液改加蒸餾水，做陽性對照管，各試管均搖勻后，置37攝氏度恒溫水浴中，開始觀察放入后15min、30min、45min、lh、2h、3h、4h有無溶血和紅細胞凝集出現(xiàn)，試驗結(jié)果加樣個時間內(nèi)時，未見出現(xiàn)紅細胞溶解及紅細胞凝集現(xiàn)象。血管刺激性試驗取家兔6只，雄性、體重2.5-2.8kg，分為兩組，每組三只。用藥組以無菌注射器每日給家兔耳緣靜脈緩慢注射尼莫地平微乳注射液溶液5.0ml/只，對照組注射等量0.9%氯化鈉溶液，均每天一次，連續(xù)二天，于末次藥后30分處死家兔，剪取注射部位耳，標(biāo)記后放入10%甲醛溶液中固定，石蠟包埋，切片、HE染色，光鏡下觀察血管有無變性和組織壞死。光鏡下觀察，家兔血管無變性和壞死，該批尼莫地平微乳注射液對血管無明顯刺激性。權(quán)利要求1、一種藥物微乳注射液組合物，包括主藥、注射用油、乳化劑、助乳化劑、PH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑和注射用水，所述乳化劑包括聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆、磷脂，其特征在于所述乳化劑中還包括膽酸鹽或去氧膽酸鹽，該乳化劑的四種組份重量比為1∶0.02～0.1∶0.1～0.5∶0.001～0.02。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物微乳注射液組合物，其特征在于所述助乳化劑為混合助乳化劑，該混合助乳化劑由乙醇和聚乙二醇400組成，乙醇和聚乙二醇400的重量比為1:0.310。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物微乳注射液組合物，其特征在于所述主藥為尼莫地平，每100ml中含有尼莫地平0.010.2g、注射用油2~10g、乳化劑530g、助乳化劑530g、等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧劑適量，其余為注射用水。4、一種制備權(quán)利要求3所述藥物微乳注射液組合物的方法，包括下述步聚①、油相的制備室溫下在配制罐中加入油相，然后加入尼莫地平，攪拌混勻，加入聚氧乙烯蓖麻油，攪拌混勻，使尼莫地平完全溶解，作為溶液A，在氮氣下，將磷脂加入乙醇中，使磷脂溶解，再將磷脂的乙醇溶液、聚乙二醇400和抗氧劑加入到上述溶液A中，攪拌混合均勻；②、水相的制備室溫下，將泊洛沙姆加入約2倍量的水中，使泊洛沙姆溶解；將膽酸鈉或去氧膽酸鈉溶解于適量的水中；在攪拌狀態(tài)下，將泊洛沙姆水溶液和膽酸鈉或去氧膽酸鈉的水溶液，緩緩加入到上述混合油相中，逐漸加注射用水至全量的80%，根據(jù)需要加入等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH至5.07.5，攪拌均勻；③、在上述的溶液中加入0.05%0.1%的針用活性炭，4(TC吸附30分鐘，經(jīng)0.22Mm微孔濾膜濾過，加注射用水至全量，即得尼莫地平微乳注射液組合物，滅菌，即可；在上述步聚中各組份的用量比如權(quán)利要求3所述。全文摘要本發(fā)明涉及一種藥物微乳注射液組合物及其制備方法。本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是如何克服現(xiàn)有藥物微乳注射液組合物的不穩(wěn)定缺陷。本發(fā)明藥物微乳注射液組合物，包括主藥、注射用油、乳化劑、助乳化劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑和注射用水，所述乳化劑包括聚氧乙烯蓖麻油、泊洛沙姆、磷脂，所述乳化劑中還包括膽酸鹽或去氧膽酸鹽，該乳化劑的四種組份重量比為1∶0.02～0.1∶0.1～0.5∶0.001～0.02。本發(fā)明具有操作方便，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的優(yōu)點，廣泛適用于各種微乳藥劑制備過程中。文檔編號A61K9/107GK101357119SQ20071002954公開日2009年2月4日申請日期2007年8月1日優(yōu)先權(quán)日2007年8月1日發(fā)明者劉清飛,周麗娟,梁瓊麟,王義明,羅國安申請人:珠海清大弘瑞生物科技有限公司