專(zhuān)利名稱(chēng)：一種紅景天苷納米脂質(zhì)體懸浮液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種紅景天苷納米脂質(zhì)體懸浮液的制備方法，屬功能性保健食品技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)是最近幾十年才被重視的東方民間草藥，它是繼人參、刺五加之后所發(fā)展的又一種重要保健藥源植物。主要有效成分是紅景天苷(Salidroside)及其苷元，即對(duì)酪醇(ρ-Tyrosol)，對(duì)人體具有雙向調(diào)節(jié)作用，且無(wú)任何毒副作用或成習(xí)癮性，具有促進(jìn)機(jī)體能量代謝，刺激神經(jīng)興奮，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能及抗毒解毒等生物效應(yīng)。近年來(lái)已有不少研究報(bào)道證明紅景天苷具有抗疲勞作用、抗缺氧、抗微波輻射作用、抑制血糖升高、抗過(guò)氧化作用等保健功效。紅景天類(lèi)的保健品已廣泛被宇航員、登山運(yùn)動(dòng)員、司機(jī)等特殊行業(yè)的從業(yè)人員服用。2002年衛(wèi)生部確定的三類(lèi)物品名單中，紅景天被列為可用作保健食品的物品名單之一?？梢?jiàn)，紅景天作為中藥保健食品的研究是極具開(kāi)發(fā)潛能的。但市售的紅景天苷保健品存在許多問(wèn)題，諸如在體內(nèi)濃度忽高忽低、沒(méi)有緩釋功效、服用次數(shù)頻繁、生物利用度低等等。
迄今為止，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)有關(guān)于紅景天苷納米脂質(zhì)體制備的報(bào)道。雖然不少的科研工作者已開(kāi)始嘗試將紅景天苷進(jìn)行海藻酸鈉—?dú)ぞ厶俏⒛z囊化包埋和制備藥用注射的磷脂復(fù)合物。國(guó)內(nèi)學(xué)者趙武奇采用無(wú)毒、生物相容性好、可生物降解的天然高分子材料海藻酸鈉和殼聚糖為膜材，制備了紅景天苷的緩釋膠囊。但此種方法一方面所用紅景天苷的純度低，僅將紅景天苷的粗提液進(jìn)行包埋，粗提液中含有大量的淀粉、蛋白、鞣質(zhì)、樹(shù)膠、極性色素等等雜質(zhì)，另一方面，所制備的微膠囊粒徑很大，緩釋功能仍不明顯。作為新型藥物制劑的開(kāi)發(fā)，顧艷麗等人嘗試將經(jīng)過(guò)純化的紅景天苷制備紅景天苷的磷脂復(fù)合物，藥物動(dòng)力學(xué)的研究結(jié)果表明，紅景天磷脂復(fù)合物的分布特征與紅景天提取物相比發(fā)生了較大的變化，其血漿藥物初始濃度明顯降低。進(jìn)一步做小鼠體內(nèi)分布也證明，注射同等劑量的紅景天苷，二者在小鼠臟器中紅景天苷濃度卻不同，尤其在小鼠的心臟、腦中分布的紅景天苷濃度，注射紅景天提取物磷脂復(fù)合物乳劑組明顯比注射紅景天提取物組分布濃度高。但此磷脂復(fù)合物僅作為藥物注射用，且制備中使用了大量的泊洛沙姆和注射用油等醫(yī)用乳化劑，安全性隱患較大，不適合于食品工業(yè)中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種紅景天苷納米脂質(zhì)體的制備方法，為了增強(qiáng)紅景天的主要成分—紅景天苷作為保健因子的生物利用率，達(dá)到緩釋或控釋效果，增強(qiáng)在體內(nèi)的靶向性以提高其抗疲勞、抗輻射等保健功效。
本發(fā)明的技術(shù)方案紅景天苷納米脂質(zhì)體懸浮液的制備方法為該懸浮液中包含紅景天有效成分提取物紅景天苷及包封紅景天苷的納米脂質(zhì)體。以經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂、超濾處理的紅景天苷提取液為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用超聲法制備紅景天苷納米脂質(zhì)體。
(1)配制紅景天苷磷酸鹽緩沖液以過(guò)60目篩的紅景天粉為原料，用20％(v/v)乙醇作提取溶劑，固液比以g/mL計(jì)為1∶25～30，預(yù)浸60分鐘，采用微波輔助提取技術(shù)，微波功率為130W，微波輻照時(shí)間1分鐘，重復(fù)操作提取一次，合并二次的粗提液，所得紅景天苷的粗提液再經(jīng)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附，用4倍柱體積的50％(v/v)乙醇洗脫，收集到的洗脫液濃縮回收乙醇后加水稀釋?zhuān)刂萍t景天苷濃度為1mg/mL，經(jīng)截留分子量3000Da的超濾膜超濾，將收集的濾過(guò)液濃縮至干，用pH7.0、0.05mol/L磷酸鹽緩沖液配制紅景天苷溶液，控制紅景天苷溶液的濃度為0.5mg/mL。
(2)脂質(zhì)成膜將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比5∶1溶于少量無(wú)水乙醚，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)有機(jī)溶劑，在瓶壁上形成均勻的一層脂質(zhì)薄膜，并保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚；(3)水合溶脹將吐溫80添加入配制的紅景天苷磷酸鹽緩沖液中，使緩沖液中吐溫80的濃度為1％(w/w)，卵磷脂質(zhì)量比緩沖液體積以g/mL計(jì)為1∶100，取該溶液在40℃下旋轉(zhuǎn)水合30分鐘；(4)超聲分散水合后的懸浮液再經(jīng)過(guò)探頭式超聲處理，超聲強(qiáng)度50％～70％，1秒開(kāi)，1秒停，處理5～7分鐘，即得紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。
粒徑的測(cè)定采用動(dòng)態(tài)光散射粒度儀進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定溫度25℃，樣品稀釋至磷脂濃度0.025％。紅景天苷包封率采用透析法測(cè)定。
制得的紅景天苷納米脂質(zhì)體的平均粒徑小于100nm，紅景天苷的包封率可達(dá)25％～35％。
本發(fā)明的有益效果以經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂、超濾處理的紅景天苷提取液為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用超聲法制備紅景天苷納米脂質(zhì)體?？稍鰪?qiáng)紅景天的主要成分—紅景天苷作為保健因子的生物利用率，達(dá)到緩釋或控釋效果，增強(qiáng)在體內(nèi)的靶向性以提高其抗疲勞、抗輻射等保健功效。


圖1紅景天苷納米脂質(zhì)體的粒徑分布圖具體實(shí)施方式
實(shí)施例1準(zhǔn)確稱(chēng)取60目紅景天粉末50g，以1450mL20％(v/v)乙醇預(yù)浸60min，在微波功率130W、微波輻照時(shí)間60s下提取1min，過(guò)濾得粗提液。濾渣仍按以上操作提取一次，合并二次的粗提液，濃縮回收乙醇。所得紅景天苷的粗提液再經(jīng)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附，4倍柱體積的50％(v/v)乙醇洗脫，收集到的洗脫液濃縮回收乙醇后加水稀釋至紅景天苷濃度為1mg/mL，再用截留分子量3000Da的超濾膜處理，將收集的濾過(guò)液濃縮至干，配成磷酸鹽緩沖液(pH7.0)。準(zhǔn)確稱(chēng)取卵磷脂200mg、膽固醇40mg，溶于5mL無(wú)水乙醚，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，在瓶壁上形成均勻的一層脂質(zhì)薄膜，并保持減壓30min，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有1％(w/w)吐溫80的紅景天苷磷酸鹽緩沖液(pH7.0)20mL，40℃下旋轉(zhuǎn)水合30min。水合體積為卵磷脂質(zhì)量的100倍，紅景天苷濃度為0.5mg/mL。水合后的懸浮液再經(jīng)過(guò)5min的探頭式超聲處理(強(qiáng)度70％，1s開(kāi)，1s停)，即得紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。
實(shí)施例2準(zhǔn)確稱(chēng)取60目紅景天粉末50g，以1250mL20％(v/v)乙醇預(yù)浸60min，在微波功率130W、微波輻照時(shí)間60s下提取1min，過(guò)濾得粗提液。濾渣仍按以上操作提取一次，合并二次的粗提液，濃縮回收乙醇。所得紅景天苷的粗提液再經(jīng)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附，4倍柱體積的50％(v/v)乙醇洗脫，收集到的洗脫液濃縮回收乙醇后加水稀釋至紅景天苷濃度為1mg/mL，再用截留分子量3000Da的超濾膜處理，將收集的濾過(guò)液濃縮至干，配成磷酸鹽緩沖液(pH7.0)。準(zhǔn)確稱(chēng)取卵磷脂100mg、膽固醇20mg，溶于5mL無(wú)水乙醚，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，在瓶壁上形成均勻的一層脂質(zhì)薄膜，并保持減壓30min，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有1％(w/w)吐溫80的紅景天苷磷酸鹽緩沖液(pH7.0)10mL，40℃下旋轉(zhuǎn)水合30min。水合體積為卵磷脂質(zhì)量的100倍，紅景天苷濃度為0.5mg/mL。水合后的懸浮液再經(jīng)過(guò)5min的探頭式超聲處理(強(qiáng)度70％，1s開(kāi)，1s停)，即得紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。
實(shí)施例3準(zhǔn)確稱(chēng)取60目紅景天粉末50g，以1500mL20％(v/v)乙醇預(yù)浸60min，在微波功率130W、微波輻照時(shí)間60s下提取1min，過(guò)濾得粗提液。濾渣仍按以上操作提取一次，合并二次的粗提液，濃縮回收乙醇。所得紅景天苷的粗提液再經(jīng)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附，4倍柱體積的50％(v/v)乙醇洗脫，收集到的洗脫液濃縮回收乙醇后加水稀釋至紅景天苷濃度為1mg/mL，再用截留分子量3000Da的超濾膜處理，將收集的濾過(guò)液濃縮至干，配成磷酸鹽緩沖液(pH7.0)。準(zhǔn)確稱(chēng)取卵磷脂200mg、膽固醇40mg，溶于5mL無(wú)水乙醚，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，在瓶壁上形成均勻的一層脂質(zhì)薄膜，并保持減壓30min，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶中加入含有1％(w/w)吐溫80的紅景天苷磷酸鹽緩沖液(pH7.0)20mL，40℃下旋轉(zhuǎn)水合30min。水合體積為卵磷脂質(zhì)量的100倍，紅景天苷濃度為0.5mg/mL。水合后的懸浮液再經(jīng)過(guò)7min的探頭式超聲處理(強(qiáng)度50％，1s開(kāi)，1s停)，即得紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。
權(quán)利要求
1.一種紅景天苷納米脂質(zhì)體懸浮液的制備方法，其特征在于該懸浮液中包含紅景天有效成分提取物紅景天苷及包封紅景天苷的納米脂質(zhì)體，制備工藝為(1)配制紅景天苷磷酸鹽緩沖液以過(guò)60目篩的紅景天粉為原料，用20％(v/v)乙醇作提取溶劑，固液比以g/mL計(jì)為1∶25～30，預(yù)浸60分鐘，采用微波輔助提取技術(shù)，微波功率為130W，微波輻照時(shí)間1分鐘，重復(fù)操作提取一次，合并二次的粗提液，所得紅景天苷的粗提液再經(jīng)DA201-C大孔吸附樹(shù)脂吸附，用4倍柱體積的50％(v/v)乙醇洗脫，收集到的洗脫液濃縮回收乙醇后加水稀釋?zhuān)刂萍t景天苷濃度為1mg/mL，經(jīng)截留分子量3000Da的超濾膜超濾，將收集的濾過(guò)液濃縮至干，用pH7.0、0.05mol/L磷酸鹽緩沖液配制紅景天苷溶液，控制紅景天苷溶液的濃度為0.5mg/mL；(2)脂質(zhì)成膜將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比5∶1溶于少量無(wú)水乙醚，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)有機(jī)溶劑，在瓶壁上形成均勻的一層脂質(zhì)薄膜，并保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚；(3)水合溶脹將吐溫80添加入配制的紅景天苷磷酸鹽緩沖液中，使緩沖液中吐溫80的濃度為1％(w/w)，卵磷脂質(zhì)量比緩沖液體積以g/mL計(jì)為1∶100，取該溶液在40℃下旋轉(zhuǎn)水合30分鐘；(4)超聲分散水合后的懸浮液再經(jīng)過(guò)探頭式超聲處理，超聲強(qiáng)度50％～70％，1秒開(kāi)，1秒停，處理5～7分鐘，即得紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。
全文摘要
一種紅景天苷納米脂質(zhì)體懸浮液的制備方法，屬于功能性保健食品技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明懸浮液中包含紅景天有效成分提取物紅景天苷及包封紅景天苷的納米脂質(zhì)體。本發(fā)明方法是將卵磷脂、膽固醇按適當(dāng)比例溶于少量無(wú)水乙醚，減壓蒸發(fā)有機(jī)溶劑，再加入含一定濃度表面活性劑的紅景天苷磷酸鹽緩沖液，經(jīng)水合溶脹(自組裝)，超聲分散等步驟得到紅景天苷納米脂質(zhì)體的懸浮液。本發(fā)明制得的紅景天苷納米脂質(zhì)體的平均粒徑小于100nm，紅景天苷的包封率可達(dá)25％－35％，可克服市售紅景天苷保健品在體內(nèi)濃度忽高忽低、沒(méi)有緩釋功效、服用次數(shù)頻繁、生物利用度低等等問(wèn)題。
文檔編號(hào)A61K36/185GK1951391SQ200610097159
公開(kāi)日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2006年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月28日
發(fā)明者許時(shí)嬰, 張曉鳴, 鐘芳, 范明輝, 王璋, 盧蓉蓉, 張文斌 申請(qǐng)人:江南大學(xué)