專利名稱：(－)－美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬制藥領域，涉及光學純(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類及其制備方法和用途。
背景技術：
美普他酚(Meptazinol)，分子式C15H23NO，化學名為3-(3-乙基-1-甲基-1H-六氫氮雜卓-3-基)苯酚，是1986年上市的鎮(zhèn)痛藥物，其鎮(zhèn)痛活性與噴他佐辛、度冷丁及右丙氧酚相當，但比嗎啡稍弱，與其他阿片類鎮(zhèn)痛藥相比，其呼吸抑制和成癮性等副作用極低，故不屬“麻藥”管理范疇。已知美普他酚可適用于急慢性疼痛，如創(chuàng)傷、術后、產(chǎn)科和癌痛等，特別用于分娩鎮(zhèn)痛安全有效，不影響新生兒的健康。上市后臨床療效可靠，于1998年為英國藥典收載。
臨床上使用的是鹽酸美普他酚的外消旋體，有研究，以光學純的酒石酸或其衍生物為拆分劑，對外消旋美普他酚進行化學拆分獲得光學純美普他酚或其鹽類，經(jīng)毛細管電泳方法確證e.e.值＞99％，左旋體通過單晶X衍射確定了它的絕對構型為(3S)。經(jīng)小鼠腦乙酰膽堿酯酶抑制活性測定，獲得的(-)-美普他酚鹽酸鹽具備乙酰膽堿酯酶抑制的藥理活性，結果表明左旋體或其鹽類值得進行乙酰膽堿酯酶抑制劑的開發(fā)研究。
乙酰膽堿酯酶抑制劑是目前FDA批準用于治療早老性癡呆的主要臨床藥物，能夠有效緩解患者的癡呆癥狀。近幾年，根據(jù)乙酰膽堿酯酶存在底部(三合一酶催化中心)和口部(外周陰離子位點)兩個重要的活性位點的特點，設計和合成了許多活性提高的乙酰膽堿酯酶抑制劑雙配基和雙功能團衍生物，包括雙分子他克林，雙分子石杉堿乙等。國內(nèi)外目前尚未有美普他酚的雙配基藥物的研究報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供光學純(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一目的是提供光學純(-)-美普他酚雙配基衍生物及其鹽類的制備方法。
本發(fā)明的進一步目的是提供上述光學純(-)-美普他酚雙配基衍生物及其鹽類對乙酰膽堿酯酶優(yōu)良的抑制活性，以及用于早老性癡呆的治療的用途。
本發(fā)明以(-)-美普他酚為活性單元，運用計算機輔助對接方法，設計和合成了(-)-美普他酚雙配基衍生物，使便與酶的兩個活性部位催化中心和外周陰離子位點，同時作用，研究雙配基鏈長與活性的構效關系。尋找新的活性更強的乙酰膽堿酯酶抑制劑，以進一步開發(fā)成為治療指數(shù)高、毒副作用小的早老性癡呆治療藥物本發(fā)明涉及的(-)-美普他酚雙配基衍生物具有(I)的結構通式 A為C＝O，CH2；n為0～10；所述鹽的酸根可以是無機酸，也可以是有機酸。
本發(fā)明采用下述制備方法合成上述(-)-美普他酚雙配基衍生物及其鹽類，合成路線如(II)所示1.(-)-美普他酚去N-甲基的反應(-)-美普他酚與鹵甲酸酯在惰性溶劑中，堿存在下反應制得中間體(-)-N-烷氧甲?；?N-去甲基美普他酚，然后再通過水解反應制得(-)-N-去甲基美普他酚。
所述惰性溶劑選自四氫呋喃(THF)、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或者上述溶劑的混合物中；所述鹵甲酸酯選自氯甲酸乙酯、氯甲酸乙烯酯、氯甲酸苯酯或者氯甲酸三氯乙酯；所述堿選自碳酸氫鉀或鈉；所述水解反應可以在硫酸水溶液或水合肼溶液或四氫呋喃水溶液條件下進行。
所述惰性溶劑優(yōu)選氯仿；所述鹵甲酸酯優(yōu)選氯甲酸乙酯；所述堿優(yōu)選碳酸氫鉀；所述水解反應優(yōu)選50％硫酸水溶液條件下進行。
2.(-)-美普他酚雙配基酰胺衍生物(A為C＝O，n為0～10)的制備方法是，(-)-N-去甲基美普他酚在惰性溶劑中，堿的存在下，與二酰鹵反應制得。
所述惰性溶劑選自四氫呋喃(THF)、乙醚、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或者上述溶劑的混合物；所述堿選自吡啶、三乙胺、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、二異丙基乙胺、碳酸鉀或鈉、氫氧化鉀或鈉等。所述二酰鹵選自二酰氯、二酰溴等。
所述惰性溶劑優(yōu)選二氯甲烷；所述堿優(yōu)選三乙胺；所述二酰鹵優(yōu)選二酰氯。
3.(-)-美普他酚雙配基衍生物(A為CH2，n為0～10)的制備方法是，(-)-N-去甲基美普他酚在惰性溶劑中，堿的存在下，與二鹵代烷反應制得。
所述惰性溶劑選自乙腈、四氫呋喃(THF)、乙醚、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或者上述溶劑的混合物；所述堿選自吡啶、三乙胺、4-二甲氨基吡啶(DMAP)、二異丙基乙胺、碳酸鉀或鈉、氫氧化鉀或鈉等。所述二鹵代烷選自二氯代烷、二溴代烷、二碘代烷等。
所述惰性溶劑優(yōu)選乙腈；所述堿優(yōu)選三乙胺；所述二酰鹵優(yōu)選二溴代烷。
4.(-)-美普他酚雙配基衍生物(A為CH2，n為0～10)的另一制備方法是，由(-)-美普他酚雙配基酰胺衍生物(A為C＝O，n＝0～10)在干燥的醚類溶劑中經(jīng)氫化鋁鋰還原反應制得。
所述溶劑選自四氫呋喃(THF)、乙醚、1，4-二氧六環(huán)等，優(yōu)選四氫呋喃。
5.所得的(-)-美普他酚雙配基衍生物(A為CH2，n為0～10)，與各種無機酸或有機酸成鹽制得其鹽類。無機酸可以是鹽酸、氫溴酸、氫碘酸或硫酸等，有機酸可以是酒石酸、馬來酸或富馬酸等。

所述美普他酚按照中國專利CN200410017499的方法制備。光學純(-)-美普他酚根據(jù)中國專利CN200610025390.3提供的方法獲得。
本發(fā)明對合成的(-)-美普他酚雙配基衍生物及其鹽類的乙酰膽堿酯酶抑制活性進行測試。
AChE抑制活性測試方法取大鼠腦組織稱重后，加9倍生理鹽水制成10％勻漿，3500轉/分離心10分鐘，取上清液于-20℃保存。根據(jù)乙酰膽堿酯酶水解乙酰膽堿，生成膽堿及乙酸，膽堿與琉基顯色劑反應生成黃色化合物，比色法檢測膽堿數(shù)量，從而以水解產(chǎn)物膽堿的數(shù)量反映乙酰膽堿酯酶活力的實驗原理，按南京建成生物技術有限公司提供的乙酰膽堿酯酶(AChE)試劑盒說明書測定乙酰膽堿酯酶活性。不同濃度待測藥與大鼠腦勻漿上清液反應20分鐘后測定乙酰膽堿酯酶活性，以計算其抑制乙酰膽堿酯酶的IC50值。
AChE抑制活性測試結果(-)-美普他酚鹽酸鹽對大鼠腦勻漿中乙酰膽堿酯酶的抑制活性IC50＝32.5μM，其(-)-美普他酚雙配基衍生物(A＝CH2，n＝0～10)鹽酸鹽的結果表明，當連接鏈含碳數(shù)＜9時，乙酰膽堿酯酶的抑制活性隨著鏈含碳數(shù)的增加而提高，當連接鏈含碳數(shù)＞9時，活性隨鏈含碳數(shù)增加而降低，當連接鏈含碳數(shù)＝7時，活性最強。
表1是(-)-美普他酚雙配基衍生物(A＝CH2，n＝0～10)對大鼠腦勻漿中乙酰膽堿酯酶的抑制活性。
表1.

經(jīng)大鼠腦乙酰膽堿酯酶抑制活性實驗證實，(-)-美普他酚雙配基衍生物對乙酰膽堿酯酶的抑制活性與(-)-鹽酸美普他酚相比有很大的提高，有5個化合物活性提高1000倍左右，其中(-)-美普他酚雙配基衍生物鹽酸鹽當A為CH2，n為7時活性最強，IC50為2.94nM，是(-)-鹽酸美普他酚的1.1萬倍。結果表明，本發(fā)明所設計的(-)-美普他酚雙配基衍生物是新型的活性很強的乙酰膽堿酯酶抑制劑，有望被開發(fā)成為治療指數(shù)高、毒副作用小的早老性癡呆治療藥物。


圖1是.(-)-美普他酚雙配基衍生物(A＝CH2，n＝0～10)對大鼠腦勻漿中乙酰膽堿酯酶的抑制活性與連接鏈含碳數(shù)的構效關系。
具體實施例方式
下面用制備實施例進一步說明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。
實施例1 (-)-N-去甲基美普他酚的制備(-)美普他酚20.9g(89.70mmol)，KHCO3157g(1.57mol)，氯仿2000ml混合，40℃加入氯甲酸苯酯97ml(0.77mol)，回流反應3hr。放冷，加水1000ml，分液，氯仿層濃縮得淺黃色油狀物。油狀物溶解在1400ml甲醇中，加入K2CO3138g(1mol)的1000ml水溶液，氮氣保護下室溫反應18hr。滴加6N HCl(270ml)調(diào)節(jié)pH至5，減壓濃縮蒸去甲醇，加乙醚1200ml、800ml提取，合并醚層，無水Na2SO4干燥。過濾，蒸除溶劑，得棕黃色油狀物34g。硅膠柱層析分離，含乙醚-氯仿溶液梯度洗脫，得(-)N-去甲基-N-苯氧甲酰基美普他酚29g，淺黃色油狀物，收率95％。
(-)N-去甲基-N-苯氧甲?；榔账?2g(64.9mmol)和85％水合肼170ml(2.98mol)混合，N2保護下回流反應4hr。冷卻，加水200ml，乙醚600ml，200ml×2提取，合并有機層，無水Na2SO4干燥。過濾，濃縮至干，得棕黃色油狀物21g。硅膠柱層析純化，洗脫劑乙醇-氯仿梯度洗脫，所得(-)-去甲基美普他酚為一白色至黃色油狀物6.07g，收率43％。
1HNMR(DMSO-d6)9.42(H，s，OH)，7.16(H，t)，6.74～6.65(3H，m)，3.49(H，d)，3.21(H，d)，3.08～3.00(2H，m)，2.14(H，m)，1.77～1.55(7H，m)，0.49(3H，t)LC-MS(ESI) 220.1[M+1]+實施例2 同法可制備化合物(A＝CH2，n＝0～1和4～10)及其鹽酸鹽N，N’-(1，9-亞壬基)-雙-(-)-N-去甲美普他酚鹽酸鹽的制備
(-)-N-去甲基美普他酚0.89g(4.06mmol)熱溶解在11ml乙腈中，加入三乙胺1.13ml(8.12mmol)，加入1，9-二溴壬烷423μL(2.03mmol)，回流反應2小時。冷卻，蒸除溶劑，加飽和碳酸鈉溶液10ml，氯仿20ml，10ml×3提取。合并氯仿層，適量無水硫酸鈉干燥。過濾，濃縮到干得棕色油狀物1.60g，硅膠柱層析分離，洗脫劑(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶2)，得淺黃色油狀物0.71g，收率62.3％。
上述產(chǎn)物0.67g溶解在20ml無水乙醚中，pH9，過濾，濾液滴加無水HCl-乙醚溶液10.6ml，調(diào)節(jié)pH至4，析出白色粉末。過濾，少量無水乙醚洗，放入P2O5干燥器真空干燥，放置過夜，得到白色粉末0.62g，收率81.9％，mp.118～124℃，[α]D＝-39.13°(c＝0.32，MeOH)。
1HNMR(DMSO-d6)10.10(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，9.95(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，9.56～9.44(m，2H，Ar-OH，重水交換消失)，8.41(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，8.34(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，7.19～7.11(m，2H，Ar-H)，6.84～6.64(m，6H，Ar-H)，3.82(d，H，J＝14.09Hz，N-CH2)，3.53(d，H，J＝13.7Hz，N-CH2)，3.38～3.27(m，3H，N-CH2)，3.15～3.04(m，7H，N-CH2)，2.38～2.32(m，H，CH2)，2.10～2.01(m，3H，CH2)，1.79～1.70(m，12H，CH2)，1.54～1.27(m，14H，CH2)，0.47(t，6H，CH3)LC-MS(ESI) [M+1]+563.5；[M+2]2+282.3實施例3 N，N’-(1，4-丁二?；?-雙-(-)-N-去甲美普他酚的制備(-)-N-去甲基美普他酚1.45g(6.63mmol)溶解在25ml無水二氯甲烷中，加無水三乙胺1.84ml(12.23mmol)。冰鹽浴冷卻下，緩慢滴加丁二酰氯382μL(3.30mmol)的10ml無水二氯甲烷溶液，溫度控制在～0℃。滴加完畢，0℃攪拌15分鐘。用水5ml、2N HCl 5ml和水5ml洗滌。水層合并，用二氯甲烷10ml×3提取，合并二氯甲烷層，適量無水硫酸鈉干燥。過濾，蒸除溶劑得到墨綠色泡沫1.85g，硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯剃度洗脫，得到產(chǎn)品為淺黃顆粒晶0.73g，收率41.4％，mp 117～120℃。
1HNMR(DMSO-d6)8.79(s，2H，Ar-OH，重水交換消失)，7.19(t，2H，Ar-H)，6.78～6.70(m，6H，Ar-H)，4.88(d，2H，J＝14.66Hz，N-CH2)，3.59(m，2H，J1＝11.73Hz，J2＝6.23Hz，N-CH2)，3.08(d，2H，J＝15.03Hz，N-CH2)，2.91(t，2H，J＝11.73Hz，N-CH2)，2.83(d，2H，J＝13.56Hz，N-CH2)，2.39(dm，2H，J＝7.7Hz，CH2)，2.33(d，2H，J＝13.2Hz，N-CH2)，1.82～1.48(m，14H，CH2)，0.68(t，6H，J＝7.33Hz，CH3)LC-MS(ESI) [M+1]+521.3
實施例4 N，N’-(1，4-亞丁基)-雙-(-)-N-去甲美普他酚鹽酸鹽的制備在無水THF15ml中加入LiAlH4粉末0.20g(5.26mmol)，冰水浴冷卻下，緩慢滴入N，N’-(1，4-丁二?；?-雙-(-)-N-去甲基美普他酚0.56g(1.08mmol)的15ml無水THF溶液，回流反應1hr。冷卻，依次滴加0.28ml水的3ml THF溶液、15％ NaOH溶液0.28ml、水0.84ml。過濾，濾液濃縮到干，加水15ml，氯仿30ml，滴加10％ NH4Cl水溶液1.5ml，調(diào)節(jié)pH≈9。水層用氯仿10ml×4提取，合并有機層，適量無水硫酸鈉干燥。過濾，蒸除溶劑得橙色油狀物0.55g，硅膠柱層析(洗脫劑甲醇∶氯仿)純化得橙色油狀產(chǎn)品0.19g，收率35.8％。
N，N’-(1，4-亞丁基)-雙-(-)-(N-去甲基美普他酚)0.19g加無水乙醚20ml溶解，滴加無水HCl-乙醚溶液2.2ml，析出類白色粉末。過濾，少量無水乙醚洗，P2O5干燥器真空干燥過夜，得鹽酸鹽0.12g，收率55％，mp.110～115℃，[α]D＝-51.96°(c＝0.092，MeOH)。
1HNMR(DMSO-d6)9.98(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，9.77(brs，1/2H，NH+，重水交換消失)，9.56-9.43(m，2H，Ar-OH，重水交換消失)，8.46(brs，1H，NH+，重水交換消失)，7.21-7.13(m，2H，Ar-H)，6.85-6.65(m，6H，Ar-H)，3.83(t，H，J＝13.3Hz，N-CH2)，3.52(t，H，J＝13.7，N-CH2)，3.36-3.15(m，10H，N-CH2)，2.38(m，H，CH2)，2.10-1.46(m，19H，CH2)，0.49(t，6H，CH3)LC-MS(ESI)[M+1]+493.3 [M+2]2+247.權利要求
1.(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，具有如下的結構通式 其中A為C＝O，CH2；n為0～10；所述鹽的酸根是無機酸或有機酸。
2.按權利要求1所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，，其特征在于所述的衍生物，A為C＝O，n為0～10。
3.按權利要求1所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，其特征在于所述的衍生物，A為CH2，n為0～10。
4.權利要求1或2所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類的制備方法，其特征在于所述的衍生物由(-)-N-去甲基美普他酚與二酰鹵反應制得。
5.權利要求1或3所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類的制備方法，其特征在于所述的衍生物由(-)-N-去甲基美普他酚與二鹵代烷反應制得。
6.權利要求3所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，其特征在于所述的衍生物由權利要求2的(-)-美普他酚雙配基衍生物再經(jīng)氫化鋁鋰反應還原制得。
7.權利要求4或5所述的(-)-N-去甲基美普他酚和/或其鹽類的制備方法，其特征在于其中所述的(-)-美普他酚與鹵甲酸酯在惰性溶劑中，堿存在下反應制得中間體(-)-N-烷氧甲酰基-N-去甲基美普他酚，然后再通過水解反應制得(-)-N-去甲基美普他酚。
8.權利要求1或3所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，其特征在于所述鹽類由(-)-美普他酚雙配基衍生物與無機酸或有機酸成鹽。
9.按權利要求1所述的(-)-美普他酚雙配基衍生物和/或其鹽類，其特征在于所述無機酸選自鹽酸或氫溴酸或氫碘酸或硫酸，有機酸選自酒石酸或馬來酸或富馬酸。
10.權利要求1的(-)-美普他酚雙配基衍生物或其鹽類在制備治療早老性癡呆癥藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明屬制藥領域，涉及光學純(－)－美普他酚雙配基衍生物或其鹽類，制備方法及其用途。本發(fā)明以(－)－美普他酚為原料，經(jīng)N－去甲基反應制得(－)－N－去甲基美普他酚，而后由(－)－N－去甲基美普他酚與二酰氯或二鹵代烴縮合成為(－)－美普他酚雙配基衍生物。經(jīng)鼠腦乙酰膽堿酯酶抑制活性測試顯示，(－)－美普他酚雙配基衍生物鹽酸鹽的活性與(－)－鹽酸美普他酚相比有明顯的提高，其中(－)－美普他酚雙配基衍生物當A為CH
文檔編號A61P25/18GK101037430SQ20061002947
公開日2007年9月19日 申請日期2006年7月27日 優(yōu)先權日2006年7月27日
發(fā)明者仇綴百, 謝瓊, 陳紅專, 王昊, 盧美艷, 王星海 申請人:復旦大學