專利名稱：9,10－斷孕甾烷衍生物及醫(yī)藥品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及9，10-斷孕甾烷(secopregnane)衍生物(維生素D3衍生物)及含有該衍生物作為有效成分的醫(yī)藥組合物。

背景技術(shù)：
尋常牛皮癬癥、魚鱗癬癥候群、掌跖角化病、掌跖膿皰癥或毛發(fā)苔蘚是顯現(xiàn)紅斑及浸潤·肥厚、角化·鱗屑等各種特征性皮膚癥狀的廣義的角化異常癥。該癥屬于難以治愈的慢性疾病，會給患者的日常生活的舒適性帶來很大障礙。一般認為該病癥是由于炎癥性細胞及皮膚細胞的增殖·分化異常所引起的。
角化異常癥中作為代表性疾病的尋常牛皮癬癥雖然不是致命的但很難治愈，由于伴隨對于外表的偏見和精神上的痛苦，多數(shù)情況下會嚴重影響生活品質(zhì)。
對于以尋常牛皮癬癥為代表的上述角化病實施了多種治療方法，但未找到根本性的治療方法，只是根據(jù)癥狀實施長期的治療和護理。作為主要的治療方法，廣泛采用外用腎上腺皮質(zhì)類固醇劑的方法，可發(fā)揮良好的治療效果。但是，該方法存在副作用強，特別是引起皮膚萎縮或反跳的問題。
近年，具有9，10-斷孕甾烷骨架的維生素D3衍生物的外用劑被廣泛使用。確認該外用劑與類固醇相比副作用少，病癥得到緩解后的再發(fā)病期限延長(例如，參照非專利文獻1)。維生素D3衍生物介以表皮細胞增殖抑制作用(例如，參照非專利文獻2和3)、表皮細胞分化促進作用(例如，參照非專利文獻4～6)、細胞因子產(chǎn)生抑制作用及T細胞活化抑制作用(例如，參照非專利文獻7)等，對于包括尋常牛皮癬癥在內(nèi)的角化病有用。
作為具有9，10-斷孕甾烷骨架的維生素D3衍生物，已知的有例如(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-甲基丁氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇(通用名馬沙骨化醇，以下稱為馬沙骨化醇)(例如，專利文獻1中記載了合成方法及其藥理作用，非專利文獻8～10中記載了藥理作用)、專利文獻2及非專利文獻11中記載的化合物等各種衍生物。
另一方面，已知作為活化型維生素D的1α，25(OH)2D3使血清甲狀旁腺激素和血清鈣一起上升，維持調(diào)節(jié)鈣體內(nèi)平衡。目前臨床所用的維生素D3衍生物的最令人擔(dān)憂的副作用是伴隨血清鈣濃度的上升(高鈣血癥)的口渴、倦怠感、無力感、食欲不振、嘔吐、腹痛、肌力下降等。因此，不僅是給高鈣血癥患者服用，即使是給沒有患有該疾病的患者服用，也都必須要定期測定血中鈣濃度。另外，還需對用量有所控制(例如，參照非專利文獻12、13)。
因此，作為尋常牛皮癬癥等角化病的治療劑，對全身性的鈣代謝的影響少、特異性地使表皮細胞的角化異常正?；木S生素D3衍生物受到期待。
專利文獻1歐洲專利申請公開第0184112號說明書
專利文獻2日本專利第2908566號說明書
專利文獻3；美國專利第6296997號說明書
專利文獻4美國專利第5612325號說明書
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非專利文獻33J.Am.Chem.Soc.，80，4969-4971(1958)
非專利文獻34Tetrahedron.，42，11，2931-2935(1986)
非專利文獻35Tetrahedron.，42，11，2931-2935(1986)
非專利文獻36Synthesis，7，1009-1014(1998)
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非專利文獻42J.Med.Chem.，43，1508-1518(2000)
非專利文獻43J.Gen.Chem.USSR(Engl.Transl.)，32，786-788(1962)
非專利文獻44J.Org.Chem.，52，4798-4800(1987) 發(fā)明的揭示 本發(fā)明的主要目的是提供具有良好的維生素D3活性且對全身性的鈣代謝的影響小的新的維生素D3衍生物。
本發(fā)明者進行各種認真探討后發(fā)現(xiàn)，新的下述9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽可實現(xiàn)上述目的，從而完成了本發(fā)明。
作為本發(fā)明，可例舉以下的通式[1]表示的9，10-斷孕甾烷衍生物(以下稱為本發(fā)明化合物)或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)上的特征在于，羰氧基未介以亞烷基鏈而是直接結(jié)合于20位的碳。

通式[1]中，Y表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)1～5的亞烯基或(4)亞苯基；R1、R2可以相同也可以不同，表示(1)氫，(2)可被1～3個鹵素取代的碳數(shù)1～6的烷基或(3)碳數(shù)3～8的環(huán)烷基，或者R1、R2與相鄰的碳原子一起表示碳數(shù)3～8的環(huán)烷基；R3表示氫或甲基；Z表示(1)氫，(2)羥基或(3)-NR11R12；R11表示氫或碳數(shù)1～6的烷基；R12表示(1)可被羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基或(2)碳數(shù)1～6的烷基磺?；?br> 作為本發(fā)明，可例舉含有本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分的醫(yī)藥組合物，含有本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分的包括尋常牛皮癬癥在內(nèi)的角化異常癥的治療劑，或者本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法。
本發(fā)明化合物中，例如優(yōu)選以下的(1)～(33)的化合物。
(1)(1S，3R，20S)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (2)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (3)(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (4)(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟-3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (5)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (6)(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (7)(1S，3R，20S)-20-[4，4，4-三氟-3-羥基-3-(三氟甲基)丁酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (8)(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-羥基-4-甲基戊-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (9)(1S，3R，20S)-20-(3-環(huán)丙基-3-羥基-丙酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (10)(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-乙基-4-羥基己-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (11)(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (12)(1S，3R，20S)-20-(3-乙基-3-羥基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (13)(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (14)(1S，3R，20S)-20-[3-(1-羥基-1-甲基乙基)-苯甲酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (15)(1S，3R，20S)-20-[N-(異丙基磺?；?-3-氨基丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (16)(1S，3R，20S)-20-(6-羥基-6-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (17)(1S，3R，20S)-20-{4-[2，2，2-三氟-1-羥基-1-(三氟甲基)乙基]苯甲酰氧基}-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (18)(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (19)(1S，3R，20S)-20-[N-(2-羥基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-氨基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (20)(1S，3R，20S)-20-[3-(1-羥基環(huán)戊基)丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (21)(1S，3R，20S)-20-(3，3-二氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (22)(1S，3R，20S)-20-[(3S)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (23)(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (24)(1S，3R，20R)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (25)(1S，3R，20R)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (26)(1S，3R，17β)-17-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基甲基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (27)(1S，3R，20S)-20-(4-羥基-4-甲基-3-氧代-戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (28)(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基-3-氧代-己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (29)(1S，3R，20S)-20-[3-(羥基甲基)苯基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (30)(1S，3R，17β)-1 7-[(2E)-4-乙基-4-羥基-己-2-烯酰氧基甲基]-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (31)(1S，3R，20S)-20-[(3R)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (32)(1S，3R，20S)-20-[5，5，5-三氟-4-羥基-4-(三氟甲基)戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 (33)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-正丙基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 以下對本發(fā)明進行詳述。
本發(fā)明中的鹵素可例舉例如氟、氯、溴、碘。
本發(fā)明中的亞烷基是直鏈狀或支鏈狀的亞烷基，其碳數(shù)為1～5個，可例舉例如亞甲基、亞乙基、亞丙基、甲基亞乙基、亞丁基、甲基亞丙基、乙基亞乙基、亞戊基、甲基亞丁基、乙基亞丙基。特好的是直鏈狀的碳數(shù)1～3的亞烷基。本發(fā)明的亞烷基可被選自鹵素、羥基及氧代基的1～3個基團取代。
本發(fā)明中的亞烯基是直鏈狀或支鏈狀的亞烯基，其碳數(shù)為2～5個，可例舉例如亞乙烯基、亞丙烯基、亞丁烯基、亞戊烯基。特好的是直鏈狀的碳數(shù)2～4的亞烯基。
本發(fā)明中的亞苯基可例舉例如1，2-亞苯基、1，3-亞苯基、1，4-亞苯基。
本發(fā)明中的烷基是直鏈狀或支鏈狀的烷基，其碳數(shù)為1～6，可例舉例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、正己基、異己基。特好的是甲基、乙基。本發(fā)明的烷基可被1～3個鹵素取代。
烷基磺?；?、三烷基甲硅烷基中的烷基部分可例舉與上述同樣的烷基。
本發(fā)明中的環(huán)烷基例如為碳數(shù)3～8的1～3環(huán)性的環(huán)烷基，具體可例舉環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基、環(huán)癸基、金剛烷基(1-金剛烷基、2-金剛烷基等)、2-二環(huán)[3.1.1]庚基、2-二環(huán)[2.2.1]庚基。特好為碳數(shù)3～6的1～3環(huán)性的環(huán)烷基。
本發(fā)明中的?；鐬樘紨?shù)1～6的烷?；?，具體可例舉甲酰基、乙?；?、丙?；?、丁酰基、異丁酰基。特好為碳數(shù)2～5的烷酰基。
本發(fā)明中的羥基的保護基只要是可用于本反應(yīng)的羥基的保護基即可，無特別限定，可例舉例如1)三乙基甲硅烷基、三丁基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基等三烷基甲硅烷基，2)(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基，3)苯甲基、4-甲氧基苯基甲基等芳香族甲基，4)乙酰基等?；?)2-四氫吡喃。
附圖的簡單說明

圖1表示對SD系雄性大鼠(7周齡)1天1次共3天反復(fù)經(jīng)皮給予實施例1記載的本發(fā)明化合物及馬沙骨化醇后的結(jié)果，縱軸表示尿中鈣量(mg/天)，橫軸表示時間(hr)，白色三角形表示對照組，白色四方形表示給予實施例1的化合物0.33μg/kg的情況，白色菱形表示給予實施例1的化合物3.3μg/kg的情況，白色圓形表示給予實施例1的化合物33μg/kg的情況，黑色四方形表示給予馬沙骨化醇0.33μg/kg的情況，黑色菱形表示給予馬沙骨化醇3.3μg/kg的情況，黑色圓形表示給予馬沙骨化醇33μg/kg的情況。
實施發(fā)明的最佳方式 本發(fā)明化合物可由公知化合物或易合成的中間體，例如通過下述方法制得。本發(fā)明化合物的制備中，原料具有對反應(yīng)有影響的取代基時，一般預(yù)先通過公知方法用適當(dāng)?shù)谋Ｗo基對原料進行保護后再實施反應(yīng)。保護基可在反應(yīng)后通過公知方法脫去。

式中，Y、Z、R1、R2、R3如前所述，Y1表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、得到了保護的羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)1～5的亞烯基或(4)亞苯基；R5、R6表示羥基的保護基；Z1、Z2、Z3可以相同也可不同，表示鹵素；Z4表示(1)氫，(2)得到了保護的羥基或(3)-NR13R14；R13表示氫或碳數(shù)1～6的烷基，R14表示(1)可被得到了保護的羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基或(2)碳數(shù)1～6的烷基磺?；?br> 本反應(yīng)包括通式[2]表示的化合物(醇)和通式[3]表示的化合物(羧酸)的縮合反應(yīng)及其后的脫保護反應(yīng)，因此，縮合反應(yīng)和脫保護反應(yīng)可通過公知方法實施。例如，使上述醇和上述羧酸反應(yīng)，然后進行脫保護反應(yīng)，藉此可制得本發(fā)明化合物。
步驟1(縮合反應(yīng)) 本步驟是使用縮合劑(例如，1，1’-草酰二咪唑、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺、二環(huán)己基碳二亞胺、氰基膦酸二乙酯、二苯基磷酰疊氮、碘化2-氯-1-甲基吡啶)，在堿(例如，三乙胺、N，N-二異丙基-N-乙胺、N，N-二甲基苯胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯等有機堿)的存在下或無堿存在下，于-20～100℃的反應(yīng)溫度實施醇[2]和羧酸[3]的縮合的步驟?？墒褂玫娜軇┲灰粫绊懛磻?yīng)即可，無特別限定，可例舉四氫呋喃、乙醚等醚類，N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等酰胺類，乙腈、丙腈等腈類，苯、甲苯等烴類，氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類或它們的混合溶劑。本步驟中，還可加入添加劑(例如，1-羥基苯并三唑、N-羥基琥珀酰亞胺等)。
反應(yīng)時間因原料及縮合劑的種類、反應(yīng)溫度等而異，通常以30分鐘～24小時為宜。上述羧酸[3]及縮合劑的用量最好為醇[2]的1～3倍摩爾量。
此外，可用上述羧酸[3]的反應(yīng)性衍生物來替代用于該步驟的上述羧酸[3]。作為該反應(yīng)性衍生物，可例舉例如酰鹵(例如，酰氯、酰溴)、混合酸酐、咪唑(imidazolide)、活性酰胺等通常用于酯縮合形成反應(yīng)的化合物。采用該反應(yīng)性衍生物上述該步驟的反應(yīng)時，也可不使用上述縮合劑。
作為羧酸[3]的反應(yīng)性衍生物，例如使用混合酸酐時，可使用吡啶、4-甲基吡啶等吡啶系溶劑或與前述相同的堿和溶劑在-20～100℃的反應(yīng)溫度下進行縮合反應(yīng)。作為添加劑，例如可加入4-二甲基氨基吡啶。反應(yīng)時間因所用混合酸酐的種類和反應(yīng)溫度而異，通常以30分鐘～24小時為宜。使用了混合酸酐的本步驟中，尤其好的是例舉下述通式[3a]表示的混合酸酐(例如，參照非專利文獻14)作為混合酸酐。

式中，Y1、R1、R2、Z1、Z2、Z3、Z4如前所述。
R5、R6只要是可用于本反應(yīng)的羥基的保護基即可，無特別限定，例如可例舉前述保護基。
作為原料化合物的通式[2]表示的化合物，即R3為甲基的化合物例如可通過與非專利文獻15、16記載的方法同樣的方法制得。
作為原料化合物的通式[2]表示的化合物，即R3為氫的化合物例如可通過與非專利文獻17記載的方法同樣的方法制得。
作為原料化合物的通式[3]表示的化合物例如可通過與非專利文獻18～22記載的方法同樣的方法或以專利文獻4或非專利文獻26～41記載的方法為基準的方法制得。
步驟2(脫保護反應(yīng)) 該步驟為羥基的脫保護反應(yīng)，可利用常規(guī)方法實施。具體操作因所用保護基的種類而異，例如使用叔丁基二甲基甲硅烷基作為保護基時，可按照以下操作實施脫保護。
通式[4]表示的化合物的脫保護反應(yīng)可采用脫保護劑(例如，氟化四丁基銨、氟化氫、氟化氫-吡啶、乙酸、三氟乙酸)，在-20～100℃的反應(yīng)溫度下實施?？墒褂玫娜軇┲灰粫Ψ磻?yīng)造成影響即可，無特別限定，可例舉例如四氫呋喃、乙醚等醚類，N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺等酰胺類，乙腈、丙腈等腈類，苯、甲苯等烴類，氯仿、二氯甲烷等鹵代烴類或它們的混合溶劑。反應(yīng)時間因原料及脫保護劑的種類、反應(yīng)溫度等而異，通常以30分鐘～24小時為宜。脫保護劑的用量最好為通式[4]表示的化合物的1～100倍摩爾量。
本發(fā)明化合物還包含具有不對稱碳的化合物，本發(fā)明不僅包括其旋光體還包括外消旋體。該旋光體的合成可按照常規(guī)方法通過使用了手性柱的拆分而制得，但作為原料化合物的化合物[2]也可通過不對稱合成制得(例如，與非專利文獻15、16的不對稱合成法同樣進行制備)。
本發(fā)明化合物中存在幾何異構(gòu)體或互變異構(gòu)體時，本發(fā)明化合物不僅包含其中的任一種異構(gòu)體還包含它們的混合物。
本發(fā)明化合物可以游離堿的形式作為醫(yī)藥品使用，也可通過公知方法形成為藥學(xué)上可接受的鹽而使用。作為該鹽，可例舉與鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸等無機酸的鹽，與乙酸、檸檬酸、酒石酸、馬來酸、琥珀酸、富馬酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、甲磺酸等有機酸的鹽等。
例如，本發(fā)明化合物的鹽酸鹽可通過將本發(fā)明化合物溶于氯化氫的醇溶液、乙酸乙酯溶液或乙醚溶液而制得。
本發(fā)明化合物如下述試驗例所示作為醫(yī)藥品有用，特別是作為尋常牛皮癬癥等角化病治療劑有用。
本發(fā)明化合物作為醫(yī)藥品給藥時，本發(fā)明化合物可直接或作為在藥學(xué)上可接受的無毒性且惰性的載體中的含量例如為0.0001～99.5％、優(yōu)選0.001～90％的醫(yī)藥組合物給予包括人在內(nèi)的哺乳動物。
作為載體，可使用1種以上的固形、半固形或液狀的稀釋劑、填充劑及其它處方用助劑。醫(yī)藥組合物最好以給藥單位形態(tài)給藥。對本發(fā)明的醫(yī)藥組合物的給藥形態(tài)無特別限定，只要以適用于該給藥方法的劑型給藥即可，優(yōu)選局部給藥(經(jīng)皮給藥等)。
作為包括尋常牛皮癬癥在內(nèi)的角化異常癥的治療劑的用量，最好視疾病的性質(zhì)和程度、年齡和體重等患者的狀態(tài)、給藥方法等而定，通常成人1天的本發(fā)明化合物的有效成分量為0.01～1000mg/人，一般優(yōu)選0.1～500mg/人。
根據(jù)情況低于上述用量也可以，相反有時必須超過上述用量。此外，還可1天分2～5次給藥。
實施例 以下，揭示參考例、實施例、試驗例及制劑例對本發(fā)明進行更詳細的說明，但本發(fā)明并不僅限于此。
參考例1 3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酸 步驟1在3-羥基-3-甲基丁酸3.76g和苯甲醇4.13g的無水二氯甲烷溶液中加入4-二甲基氨基吡啶0.78g，冰冷下攪拌。然后，在其中加入N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺9.9g，撤去冰浴，于室溫徹夜攪拌。濾去析出的不溶物后濃縮母液，獲得殘留油狀物13g。用硅膠柱色譜法對其進行精制，獲得呈微黃色油狀物的3-羥基-3-甲基丁酸苯甲酯7.2g。
1H-NMR(CDCl3)δ1.28(6H，s)，2.55(2H，s)，5.16(2H，s)，7.36(5H，s) 步驟2在步驟1獲得的3-羥基-3-甲基丁酸苯甲酯3.5g的無水二氯甲烷溶液中加入2，6-二甲基吡啶3.6g，冰冷下攪拌。在其中慢慢滴加叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯3.9mL后，冰冷下攪拌1小時，室溫下攪拌2小時。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液后，用水、飽和氯化銨水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，濃縮。用硅膠柱色譜法對殘留物4.5g進行精制，獲得呈無色油狀物的3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酸苯甲酯2.62g。
1H-NMR(CDCl3)δ0.07(6H，s)，0.82(9H，s)，1.36(6H，s)，2.52(2H，s)，5.09(2H，s)，7.35(5H，s) 步驟3將步驟2獲得的3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酸苯甲酯2.37g溶于乙酸乙酯30mL，添加10％鈀碳0.47g，常壓攪拌下氫化。40分鐘后停止攪拌，濾去催化劑。減壓下蒸除濾液的溶劑，獲得呈無水油狀物的標題化合物1.70g。
1H-NMR(CDCl3)δ0.18(6H，s)，0.89(9H，s)，1.40(6H，s)，2.51(2H，s) 參考例2(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇 冰冷下，在氬氣中將(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-孕甾烷-5，7-二烯-20-醇(例如，非專利文獻23中記載了合成方法)155mg的四氫呋喃溶液500mL冒泡10分鐘。然后，將冷卻層中循環(huán)有硫酸鎳-硫酸銅溶液濾子(filter，如非專利文獻24中記載)的500W高壓水銀燈插入到反應(yīng)容器內(nèi)，冰冷攪拌下光照5分鐘。接著再光照2.5分鐘后，將反應(yīng)液移入褐色燒瓶中回流3小時。減壓蒸除溶劑后，用硅膠柱色譜法和制備薄層色譜法對殘留物進行精制，獲得呈無色油狀物的標題化合物30mg。
1H-NMR(CDCl3)δ0.06(12H，s)，0.54(3H，s)，0.88(18H，s)，1.23(3H，d)，2.45(1H，dd)，2.84(1H，dd)，3.71(2H，m)，4.19(1H，m)，4.38(1H，dd)，4.86(1H，d)，5.18(1H，s)，6.03(1H，d)，6.23(1H，d) 實施例1(1S，3R，20R)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1 在按照非專利文獻25記載的方法獲得的4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸20mg和三乙胺11.2μL的四氫呋喃溶液0.5mL中加入2，4，6-三氯苯甲酰氯13μL，室溫下攪拌30分鐘。過濾析出結(jié)晶后蒸除四氫呋喃，減壓干燥殘留物。氬氣氛下在該殘留物中加入?yún)⒖祭?獲得的(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇30mg的無水苯溶液0.5mL和4-二甲基氨基吡啶30mg，室溫下攪拌30分鐘。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液后，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后減壓濃縮。殘留物用硅膠柱色譜法精制，獲得呈無色油狀物的(1S，3R，20S)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯27mg。
1H-NMR(CDCl3)δ0.06(12H，s)，0.54(3H，s)，0.57(6H，q)，0.87(18H，s)，0.94(9H，t)，1.20(6H，s)，2.36(2H，t)，2.84(1H，d)，4.19(1H.m)，4.37(1H，dd)，4.85(1H，d)，4.94(1H，m)，5.17(1H，d)，6.02(1H，d)，6.23(1H，d) 步驟2 氬氣氛下，在步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯22mg的無水四氫呋喃1mL中加入1M氟化四(正丁基)銨0.56mL中加入乙酸16μL而調(diào)制的試劑，室溫下徹夜攪拌。在反應(yīng)液中加入冷水，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘留物用硅膠柱色譜法及制備薄層色譜法精制，獲得呈無色粉末的作為標題的本發(fā)明化合物7.1mg。
1H-NMR(CDCl3)δ0.55(3H，s)，1.23(6H，s)，1.23(3H，d)，1.80(2H，t)，2.39(2H，t)，2.60(1H，dd)，2.83(1H，m)，4.24(1H，m)，4.43(1H，dd)，4.95(1H，m)，4.99(1H，dd)，5.33(1H，br)，6.02(1H，d)，6.37(1H，d) (+)-FABMS m/z 447[M+H]+ 實施例2(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酸(參考例1)替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
1H-NMR(CDCl3)δ0.06(12H，s)，0.08(6H，s)，0.53(3H，s)，0.84(9H，s)，0.87(18H，s)，1.23(3H，d)，1.40(3H，s)，1.36(3H，s)，2.43(2H，brs)，2.84(1H，d)，4.18(1H，m)，4.36(1H，dd)，4.85(1H，d)，4.91(1H，m)，5.17(1H，d)，6.02(1H，d)，6.23(1H，d) 步驟2按照與實施例1的步驟2同樣的方法，用步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-甲基丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯替代(1S，3R，20S)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
1H-NMR(CDCl3)δ0.56(3H，s)，1.26(3H，d)，1.27(6H，s)，2.32(1H，dd)，2.44(2H，s)，2.60(1H，dd)，2.84(1H，m)，3.74(1H，br)，4.24(1H，m)，4.43(1H，dd)，4.99(1H，s)，5.01(1H，m)，5.33(1H，s)，6.03(1H，d)，6.37(1H，d) ESIMS m/z 455[M+Na]+ 實施例3(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻26記載的方法制得的5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基己酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 483.5[M+Na]+ 實施例4(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟-3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4，4，4-三氟-3-甲基丁酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4，4，4-三氟-3-甲基丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4，4，4-三氟-3-甲基丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 509.3[M+Na]+ 實施例5(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻27記載的方法制得的3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4-甲基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 469.4[M+Na]+ 實施例6(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用4，4，4-三氟丁酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟丁酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟丁酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 479.3[M+Na]+ 實施例7(1S，3R，20S)-20-[4，4，4-三氟-3-羥基-3-(三氟甲基)丁酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4，4，4-三氟-3-(三氟甲基)丁酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4，4，4-三氟-3-(三氟甲基)丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-4，4，4-三氟-3-(三氟甲基)丁酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(-)-FABMS m/z 539.2[M-H]- 實施例8(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-羥基-4-甲基戊-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻28記載的方法制得的(2E)-4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊-2-烯替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊-2-烯酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊-2-烯酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 467.3[M+Na]+ 實施例9(1S，3R，20S)-20-(3-環(huán)丙基-3-羥基-丙酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻29記載的方法制得的3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-環(huán)丙基丙酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-環(huán)丙基丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-3-環(huán)丙基丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 467.3[M+Na]+ 實施例10(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-乙基-4-羥基己-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻28記載的方法制得的(2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基戊-2-烯替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-烯酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-烯酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 495.5[M+Na]+ 實施例11(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻30記載的方法制得的5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基庚酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基庚酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(5-三乙基甲硅烷氧基-5-甲基庚酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 475.3[M+Na]+ 實施例12(1S，3R，20S)-20-(3-乙基-3-羥基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻31記載的方法制得的3-乙基-3-三乙基甲硅烷氧基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(3-乙基-3-三乙基甲硅烷氧基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(3-乙基-3-三乙基甲硅烷氧基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 483.4[M+Na]+ 實施例13(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻32記載的方法制得的4-乙基-4-三乙基甲硅烷氧基己酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-三乙基甲硅烷氧基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-三乙基甲硅烷氧基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 497.5[M+Na]+ 實施例14(1S，3R，20S)-20-[3-(1-羥基-1-甲基乙基)-苯甲酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻33記載的方法制得的3-(1-三乙基甲硅烷氧基-1-甲基乙基)苯甲酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(1-三乙基甲硅烷氧基-1-甲基乙基)苯甲酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(1-三乙基甲硅烷氧基-1-甲基乙基)苯甲酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 517.4[M+Na]+ 實施例15(1S，3R，20S)-20-[N-(異丙基磺?；?-3-氨基丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照專利文獻3記載的方法制得的N-(異丙基磺酰基)-β-丙氨酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[N-(異丙基磺?；?-3-氨基丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[N-(異丙基磺酰基)-3-氨基丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 532.4[M+Na]+ 實施例16(1S，3R，20S)-20-(6-羥基-6-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻35記載的方法制得的6-三乙基甲硅烷氧基-6-甲基庚酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(6-三乙基甲硅烷氧基-6-甲基庚酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(6-三乙基甲硅烷氧基-6-甲基庚酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 497.4[M+Na]+ 實施例17(1S，3R，20S)-20-{4-[2，2，2-三氟-1-羥基-1-(三氟甲基)乙基]苯甲酰氧基}-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用4-{2，2，2-三氟-1-三氟甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲氧基]乙基}苯甲酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[4-{2，2，2-三氟-1-三氟甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲氧基]乙基}苯甲酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[4-{2，2，2-三氟-1-三氟甲基-1-[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲氧基]乙基}苯甲酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
實施例18(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用5，5，5-三氟戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 493.3[M+Na]+ 實施例19(1S，3R，20S)-20-[N-(2-羥基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-氨基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用按照非專利文獻40記載的方法制得的N-(2-三乙基甲硅烷氧基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-胺乙酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[N-(2-三乙基甲硅烷氧基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-氨基乙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[N-(2-三乙基甲硅烷氧基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-氨基乙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 476.4[M+1]+ 實施例20(1S，3R，205)-20-[3-(1-羥環(huán)戊基)丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻36記載的方法制得的3-(1-三乙基甲硅烷氧基環(huán)戊基)丙酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(1-三乙基甲硅烷氧基環(huán)戊基)丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(1-三乙基甲硅烷氧基環(huán)戊基)丙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 473.5[M+1]+ 實施例21(1S，3R，20S)-20-(3，3-二氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用專利文獻4記載的方法制得的4-三乙基甲硅烷氧基-3，3-二氟-4-甲基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-3，3-二氟-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-3，3-二氟-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 483.4[M+1]+ 實施例22(1S，3R，20S)-20-[(3S)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻37記載的方法制得的(3S)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[(3S)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3S)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 485.4[M+Na]+ 實施例23(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻41記載的方法制得的4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-甲基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 523.3[M+Na]+ 實施例24(1S，3R，20R)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻16記載的方法制得的(1S，3R，20R)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇替代(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇，制備(1S，3R，20R)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20R)-20-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 469.4[M+Na]+ 實施例25(1S，3R，20R)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例2的步驟1同樣的方法，用非專利文獻16記載的方法制得的(1S，3R，20R)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇替代(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇，制備(1S，3R，20R)-20-(3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-3-甲基丁酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20R)-20-(3-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-3-甲基丁酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例2的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-FABMS m/z 432[M+1]+ 實施例26(1S，3R，17β)-17-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基甲基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻17記載的方法制得的(1S，3R，17β)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-17-羥基甲基-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯替代(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇，制備(1S，3R，17β)-17-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基甲基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，17β)-17-(4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酰氧基甲基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 455.3[M+Na]+ 實施例27(1S，3R，20S)-20-(4-羥基-4-甲基-3-氧代-戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻38記載的方法制得的4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-甲基戊-2-酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-甲基戊-2-酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2氬氣氛下，在上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-甲基戊-2-酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯32mg的無水四氫呋喃溶液0.4mL中加入于1M氟化四正丁基銨0.81mL中加入了乙酸14μL而調(diào)制的試劑，室溫下徹夜攪拌。在反應(yīng)液中加水用氯仿萃取3次，氯仿層用飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。殘渣用硅膠柱色譜法精制，獲得呈淡褐色非晶態(tài)的作為標題的本發(fā)明化合物9.5mg。[4183-VDA-48] (+)-ESIMS m/z 483.3[M+Na]+ 實施例28(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基-3-氧代-己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻38記載的方法制得的4-三乙基甲硅烷氧基-4-乙基己-2-酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例27的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 511.5[M+Na]+ 實施例29(1S，3R，20S)-20-[3-(羥基甲基)苯基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻42記載的方法制得的3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)苯基乙酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)苯基乙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)苯基乙酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 503.3[M+Na]+ 實施例30(1S，3R，17β)-17-[(2E)-4-乙基-4-羥基-己-2-烯酰氧基甲基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例10的步驟1同樣的方法，用非專利文獻17記載的方法制得的(1S，3R，17β)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-17-羥基甲基-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯替代(1S，3R，20S)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-20-醇，制備(1S，3R，17β)-17-[(2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-烯酰氧基甲基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，17β)-17-[(2E)-4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-4-乙基己-2-烯酰氧基甲基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 481.4[M+Na]+ 實施例31(1S，3R，20S)-20-[(3R)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻37記載的方法制得的(3R)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[(3R)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[(3R)-3，4-二(三乙基甲硅烷氧基)-4-甲基戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 485.4[M+Na]+ 實施例32(1S，3R，20S)-20-[5，5，5-三氟-4-羥基-4-(三氟甲基)戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻41記載的方法制得的4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-(三氟甲基)戊酸替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-(三氟甲基)戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-5，5，5-三氟-4-(三氟甲基)戊酰氧基]-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 577.3[M+Na]+ 實施例33(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-正丙基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇 步驟1按照與實施例1的步驟1同樣的方法，用非專利文獻44記載的方法制得的3-羥基-3-正丙基己烷替代4-三乙基甲硅烷氧基-4-甲基戊酸，制備(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-正丙基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯。
步驟2將上述步驟1獲得的(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-正丙基己酰氧基)-1，3-二(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯用于與實施例1的步驟2同樣的反應(yīng)，制備作為標題的本發(fā)明化合物。
(+)-ESIMS m/z 511.5[M+Na]+ 試驗例1對人急性骨髓性白血病細胞株HL-60分化誘導(dǎo)能的探討 已知人急性骨髓性白血病細胞株HL-60被活化型維生素D等分化為類中性白細胞(neutrophil-like cell)。即，分化后的細胞開始表達CD11、CD32等表面標志的同時，因為佛波酯等的刺激而產(chǎn)生氧自由基。本試驗中，利用該性質(zhì)，以佛波酯刺激而產(chǎn)生的氧自由基量為指標比較探討維生素D3活性，藉此探討實施例記載的本發(fā)明化合物及馬沙骨化醇的HL-60細胞分化誘導(dǎo)能。使用市售的試劑或試劑盒時，按照所附帶的說明書來使用。
(步驟)在96孔板中以每孔5×103個細胞/100μL接種HL-60細胞(ATCC制)，在第2～12列(最高濃度第2列)添加從10-7M 2倍連續(xù)稀釋而得的檢體。第1列為空白。在A、B行添加馬沙骨化醇，在C、D行添加本發(fā)明化合物。采用CO2保溫箱于37℃、5％CO2、加濕條件下培養(yǎng)72小時后，每孔添加10μL含50mMWST-1(Takara Bio公司制)和10μM佛波12、13-二癸酸酯(SIGMA公司制)的PBS，再培養(yǎng)4小時。利用分化的HL-60細胞產(chǎn)生的氧自由基由WST-1變化而產(chǎn)生的WST-1甲

色素的450nm下的吸光度(參考波長655nM)通過基準標記微板讀數(shù)器(BioRad公司制)測定。采用吸光度計控制軟件MPM3(BioRad公司制)，由濃度-吸光度曲線利用對數(shù)曲線回歸求出各50％最大有效濃度(以下稱為“EC50”)。其結(jié)果示于表1。表1 如表1所示，本發(fā)明化合物顯現(xiàn)與馬沙骨化醇同等以上的強細胞分化誘導(dǎo)能，證明其具備優(yōu)異的維生素D3活性。
試驗例2對血清鈣濃度上升作用的探討 在SD系雄性大鼠(7周齡)的背部，1天1次7天內(nèi)反復(fù)經(jīng)皮給予實施例1記載的本發(fā)明化合物及馬沙骨化醇的含0.3％DMSO的乙醇溶液(33μg/200μL/kg/天)。對于對照組給予含0.3％DMSO的乙醇溶液。最終給藥后24小時采集血液，測定血清中的鈣濃度。其結(jié)果示于表2。 表2 如表2所示，馬沙骨化醇引發(fā)血清中的鈣濃度上升，但本發(fā)明化合物對血清中的鈣濃度沒有影響。
試驗例3對尿中鈣量上升作用的探討(1) 在SD系雄性大鼠(7周齡)的背部，1天1次3天內(nèi)反復(fù)經(jīng)皮給予實施例1記載的本發(fā)明化合物及馬沙骨化醇的含0.3％DMSO的乙醇溶液(0.33、3.3、33μg/200μL/kg/天)。對于對照組給予含0.3％DMSO的乙醇溶液。測定分別在各天給藥后24小時所采集的尿中的鈣濃度，乘以尿量算出尿中鈣量。其結(jié)果示于圖1。
如圖1所示，馬沙骨化醇給藥組的尿中鈣量依賴于用量而增加，但本發(fā)明化合物給藥組與對照組無差值，未確認尿中鈣量的顯著增加。
試驗例4對尿中鈣量上升作用的探討(2) 對于SD系雄性大鼠(7周齡)靜脈內(nèi)給予實施例3、8記載的本發(fā)明化合物或馬沙骨化醇22.4nmol/kg。給予對照組含0.1％TritonX100的生理鹽水。測定在給藥后24小時所采集的尿中的鈣濃度，算出以尿中鈣量(尿中鈣濃度×尿量)及對照組為基準的尿中鈣量比(給予被驗化合物時的尿中鈣量/對照組的尿中鈣量)。其結(jié)果示于表3。
表3 如表3所示，馬沙骨化醇給藥組的尿中鈣量幾乎倍增，但在本發(fā)明化合物給藥組中，未確認對尿中鈣量的影響。
試驗例5對人肝微粒體中的代謝速度的探討 比較探討實施例記載的本發(fā)明化合物及馬沙骨化醇的人肝微粒體中的代謝速度。
使用Tissue Transformation Technologies公司制混合人肝微粒體(HHM-0323)。在微管中加入0.25M磷酸鈣緩沖液(pH7.4)200μL、各被驗化合物的DMSO溶液(250μM)5μL、NADPH生成系(將β-NADP+20mg、葡糖-6-磷酸70mg、葡糖-6-磷酸脫氫酶40單位及氯化鎂20mg溶于1mL蒸餾水)50μL及蒸餾水220μL，于37℃預(yù)培養(yǎng)5分鐘。通過人肝微粒體25μL(蛋白最終濃度1mg/mL)的添加引發(fā)反應(yīng)，培養(yǎng)2、10、30、60分鐘后添加500μL乙腈，停止反應(yīng)。以13000rpm離心分離5分鐘，以HPLC在以下條件下測定上清液中(25μL)的各被驗化合物。
柱使用Inertsil ODS-3(4.6×150mm，GL Science)，在表4記載的直線梯度條件下，流動相使用A液(乙腈/0.1％乙酸銨水溶液＝10∶90)和B液(乙腈/0.1％乙酸銨水溶液＝90∶10)。將柱溫設(shè)定為40℃，流速設(shè)定為1.0mL/min，檢測在UV270nm進行。
表4 按照上述HPLC的測定結(jié)果，算出被驗化合物的代謝速度。其結(jié)果示于表5。表5 如表5所示，本發(fā)明化合物中包含在人肝微粒體中比馬沙骨化醇更快速代謝的化合物。
制劑例1 采用實施例1的化合物0.25μg及軟膏基劑(白色凡士林、中鏈脂肪酸甘油三酯、羊毛脂、石蠟或它們的混合基劑)、其它合適的添加劑，按照常規(guī)方法通過實施捏合等制得軟膏劑1g。
制劑例2 采用實施例2的化合物0.25μg及軟膏基劑(白色凡士林、中鏈脂肪酸甘油三酯、羊毛脂、石蠟或它們的混合基劑)、其它合適的添加劑，按照常規(guī)方法通過實施捏合等制得軟膏劑1g。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性 如上所述，本發(fā)明化合物是具有優(yōu)異的維生素D3活性、同時對全身性的鈣代謝的影響少的新的有用的維生素D3衍生物。
權(quán)利要求
1.下述通式[1]表示的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，
通式[1]中，Y表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)2～5的亞烯基或(4)亞苯基；R1、R2可以相同也可以不同，表示(1)氫，(2)可被1～3個鹵素取代的碳數(shù)1～6的烷基或(3)碳數(shù)3～8的環(huán)烷基，或者R1、R2與相鄰的碳原子一起表示碳數(shù)3～8的環(huán)烷基；R3表示氫或甲基；Z表示(1)氫，(2)羥基或(3)-NR11R12；R11表示氫或碳數(shù)1～6的烷基；R12表示(1)可被羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基或(2)碳數(shù)1～6的烷基磺酰基。
2.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，Z為羥基。
3.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，Y為碳數(shù)1～5的亞烷基。
4.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1、R2可以相同也可不同，為碳數(shù)1～6的烷基。
5.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R3為甲基。
6.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，(1)Z為羥基，(2)Y為亞甲基或亞乙基，(3)R1、R2可以相同也可不同，為甲基或乙基，(4)R3為甲基。
7.如權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其特征在于，為下述(1)～(33)的化合物，
(1)(1S，3R，20S)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(2)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(3)(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(4)(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟-3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(5)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(6)(1S，3R，20S)-20-(4，4，4-三氟丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(7)(1S，3R，20S)-20-[4，4，4-三氟-3-羥基-3-(三氟甲基)丁酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(8)(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-羥基-4-甲基戊-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(9)(1S，3R，20S)-20-(3-環(huán)丙基-3-羥基-丙酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(10)(1S，3R，20S)-20-[(2E)-4-乙基-4-羥基己-2-烯酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(11)(1S，3R，20S)-20-(5-羥基-5-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(12)(1S，3R，20S)-20-(3-乙基-3-羥基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(13)(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(14)(1S，3R，20S)-20-[3-(1-羥基-1-甲基乙基)-苯甲酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(15)(1S，3R，20S)-20-[N-(異丙基磺?；?-3-氨基丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(16)(1S，3R，20S)-20-(6-羥基-6-甲基庚酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(17)(1S，3R，20S)-20-{4-[2，2，2-三氟-1-羥基-1-(三氟甲基)乙基]苯甲酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(18)(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(19)(1S，3R，20S)-20-[N-(2-羥基-2-甲基丙基)-N-甲基-2-氨基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(20)(1S，3R，20S)-20-[3-(1-羥基環(huán)戊基)丙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(21)(1S，3R，20S)-20-(3，3-二氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(22)(1S，3R，20S)-20-[(3S)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(23)(1S，3R，20S)-20-(5，5，5-三氟-4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(24)(1S，3R，20R)-20-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(25)(1S，3R，20R)-20-(3-羥基-3-甲基丁酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(26)(1S，3R，17β)-17-(4-羥基-4-甲基戊酰氧基甲基)-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(27)(1S，3R，20S)-20-(4-羥基-4-甲基-3-氧代-戊酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(28)(1S，3R，20S)-20-(4-乙基-4-羥基-3-氧代-己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(29)(1S，3R，20S)-20-[3-(羥基甲基)苯基乙酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(30)(1S，3R，17β)-17-[(2E)-4-乙基-4-羥基-己-2-烯酰氧基甲基]-9，10-斷雄甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(31)(1S，3R，20S)-20-[(3R)-3，4-二羥基-4-甲基戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(32)(1S，3R，20S)-20-[5，5，5-三氟-4-羥基-4-(三氟甲基)戊酰氧基]-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇
(33)(1S，3R，20S)-20-(3-羥基-3-正丙基己酰氧基)-9，10-斷孕甾-5Z，7E，10(19)-三烯-1，3-二醇。
8.醫(yī)藥組合物，其特征在于，含有權(quán)利要求1～7中任一項所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。
9.角化異常癥治療劑，其特征在于，含有權(quán)利要求1～7中任一項所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。
10.尋常牛皮癬癥治療劑，其特征在于，含有權(quán)利要求1～7中任一項所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分。
11.權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，使用下述通式[3a]表示的混合酸酐，
通式[3a]中，Y1表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、得到了保護的羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)2～5的亞烯基或(4)亞苯基；R1、R2可以相同也可以不同，表示(1)氫，(2)可被1～3個鹵素取代的碳數(shù)1～6的烷基或(3)碳數(shù)3～8的環(huán)烷基，或者R1、R2與相鄰的碳原子一起表示碳數(shù)3～8的環(huán)烷基；Z1、Z2、Z3可以相同也可不同，表示鹵素；Z4表示(1)氫，(2)得到了保護的羥基或(3)-NR13R14；R13表示氫或碳數(shù)1～6的烷基，R14表示(1)可被得到了保護的羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基或(2)碳數(shù)1～6的烷基磺?；?br> 12.如權(quán)利要求11所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Z1、Z2、Z3都為氯。
13.如權(quán)利要求11所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Y1為碳數(shù)1～5的亞烷基。
14.如權(quán)利要求11所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，R1、R2可以相同也可以不同，為碳數(shù)1～6的烷基。
15.如權(quán)利要求11所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Z4為得到了保護的羥基，所述羥基的保護基為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、?；?-四氫吡喃基。
16.如權(quán)利要求11所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，(1)Z1、Z2、Z3都為氯，(2)Y1為亞甲基或亞乙基，(3)R1、R2可以相同也可以不同，為甲基或乙基，(4)Z4為得到了保護的羥基，所述羥基的保護基為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、酰基或2-四氫吡喃基。
17.權(quán)利要求1所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，包括下述步驟
(a)通過使下述通式[2]表示的化合物和通式[3a]表示的混合酸酐反應(yīng)制備通式[4]表示的化合物的步驟，以及
(b)通過將通式[4]表示的化合物中的各羥基的保護基脫保護而制備通式[1]表示的化合物的步驟；
式中，Y表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)2～5的亞烯基或(4)亞苯基；Y1表示(1)單鍵，(2)可被選自鹵素、得到了保護的羥基及氧代基的1～3個基團取代的碳數(shù)1～5的亞烷基，(3)碳數(shù)2～5的亞烯基或(4)亞苯基；R1、R2可以相同也可以不同，表示(1)氫，(2)可被1～6個鹵素取代的碳數(shù)1～6的烷基或(3)碳數(shù)3～8的環(huán)烷基，或者R1、R2與相鄰的碳原子一起表示碳數(shù)3～8的環(huán)烷基；R3表示氫或甲基；R5、R6可以相同也可以不同，表示羥基的保護基；Z表示(1)氫，(2)羥基或(3)-NR11R12；R11表示氫或碳數(shù)1～6的烷基，R12表示(1)可被羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基或(2)碳數(shù)1～6的烷基磺?；?；Z1、Z2、Z3可以相同也可不同，表示鹵素；Z4表示(1)氫，(2)得到了保護的羥基或(3)-NR11R12；R11表示氫或碳數(shù)1～6的烷基，R12表示(1)碳數(shù)1～6的烷基或(2)可被得到了保護的羥基取代的碳數(shù)1～6的烷基磺?；?br> 18.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Z1、Z2、Z3都為氯。
19.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Z4為得到了保護的羥基，所述羥基的保護基為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、酰基或2-四氫吡喃基。
20.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，Y、Y1為亞甲基或亞乙基。
21.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，R1、R2可以相同也可以不同，為甲基或乙基。
22.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，R3為甲基。
23.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，R5、R6可以相同也可以不同，為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、?；?-四氫吡喃基。
24.如權(quán)利要求17所述的9，10-斷孕甾烷衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，其特征在于，(1)Z1、Z2、Z3都為氯，(2)Z4為得到了保護的羥基，所述羥基的保護基為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、?；?-四氫吡喃基，(3)Y、Y1為亞甲基或亞乙基，(4)R1、R2可以相同也可以不同，為甲基或乙基，(5)R3為甲基，(6)R4、R5、R6可以相同也可以不同，為三烷基甲硅烷基、苯甲基、(2-三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、?；?-四氫吡喃基。
全文摘要
本發(fā)明提供具有優(yōu)異的維生素D3活性、同時對全身性的鈣代謝影響小的新的有用的維生素D3衍生物。本發(fā)明可例舉下述通式[1]表示的9，10－斷孕甾烷衍生物或含有其作為有效成分的醫(yī)藥組合物。通式[1]中，Y表示(1)單鍵，(2)亞烷基，(3)亞烯基或(4)亞苯基；R1、R2可以相同也可以不同，表示(1)氫，(2)烷基或(3)環(huán)烷基，或者R1、R2與相鄰的碳原子一起表示環(huán)烷基；R3表示氫或甲基；Z表示(1)氫，(2)羥基或(3)－NR11R12。
文檔編號A61P3/02GK101068779SQ20058004132
公開日2007年11月7日 申請日期2005年12月5日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月3日
發(fā)明者藤枝弘樹, 大津博則, 安福祥二 申請人:日本新藥株式會社