專利名稱：腺苷受體激動劑的制作方法
專利說明腺苷受體激動劑 本發(fā)明涉及作為腺苷受體激動劑的化合物，及其作為治療化合物、特別是作為止痛或抗炎化合物、或調(diào)節(jié)疾病的抗風濕性藥物(DMARD)的用途，以及使用這類化合物預(yù)防、治療或緩解疼痛或炎癥的方法。
腺苷作為無處不在的局部激素/神經(jīng)遞質(zhì)，其作用于四種已知受體腺苷A1、A2A、A2B和A3受體。腺苷在組織中通常具有平衡能量的供給與需求的作用。例如，心臟中釋放的腺苷通過A1受體在結(jié)節(jié)和心房中的介導作用減慢心跳(Belardinelli，L & I senberg，G Am.J.Physiol.224，H734-H737)，同時使冠狀動脈擴張而增大能量(即葡萄糖、脂肪和氧)供給(Knabb等人，Circ.Res.(1983)53，33-41)。類似地，在發(fā)炎過程中，腺苷具有抑制炎癥活性的作用，而在神經(jīng)活性過度的病癥(如癲癇)中，腺苷抑制神經(jīng)發(fā)放(firing)(Klitgaard等人，Eur J.Pharmacol.(1993)242，221-228)。上述體系或其變型存在于所有組織中。
腺苷自身可用于診斷和治療室上性心動過速。已知腺苷A1受體激動劑可用作強效的止痛藥(Sawynok，J.Eur J Pharmacol.(1998)347，1-11)，同時已知腺苷A2A受體激動劑具有抗炎活性(參見例如US5,877,180和WO 99/34804)。在試驗動物中，據(jù)顯示A2A受體激動劑可有效對抗各種病癥，包括敗血癥、關(guān)節(jié)炎、以及由腎、冠狀或腦動脈閉塞引起的缺血/再灌注損傷。這些癥狀的共同因素在于由上述受體對大部分(即使不是全部)炎性細胞的抑制作用引起的炎癥應(yīng)答降低。
然而，腺苷受體無處不在的分布意味著施用腺苷受體激動劑將引起不利的副作用。這通常妨礙了以腺苷為基礎(chǔ)的治療學的發(fā)展。選擇性A1受體激動劑可以引起心動過緩。A2A受體激動劑可以引起廣泛的血管舒張，結(jié)果導致低血壓和心動過速。第一個選擇性A2A受體激動劑(2-[4-(2-羧乙基)苯基乙氨基]-5’-N-乙基甲酰胺腺苷、或稱CGS21680)在2A期臨床試驗中作為潛在的抗高血壓藥接受了測試。然而，施用該化合物引起血壓大幅下降，繼而導致心輸出量增加。這阻礙了CGS21680作為藥物的應(yīng)用。Webb等人(J.Pharmacol Exp Ther(1991)259，1203-1212)、Casati等人(J Pharmacol Exp Ther(1995)275(2)914-919)、和Bonnizone等人(Hypertension.(1995)25，564-9)指出，選擇性A2A腺苷受體激動劑可以引起低血壓和心動過速。所誘導心動過速的程度足以阻礙其作為藥物的應(yīng)用。Alberti等人(JCardiovasc Pharmacol.1997年9月；30(3)320-4)公開了選擇性A2A腺苷受體激動劑作為強的血管擴張劑，其可降低血壓和誘導心率和血漿腎素活性顯著提高。這些副作用阻礙了其作為藥物的應(yīng)用。
US 5,877,180涉及被聲稱可有效治療炎性疾病的A2A腺苷受體激動劑。優(yōu)選的激動劑WRC0090和SHA 211(WRC0474)被公開比先前報道過的腺苷類似物例如CGS21680和CV1808更有效和具有選擇性。施用SHA 211或WRC0090被認為降低了出現(xiàn)由該類似物與其它腺苷受體結(jié)合而介導的副作用的可能性。然而，其中僅僅包括涉及SHA 211活性的體外數(shù)據(jù)。沒有證據(jù)證明所有的化合物在體內(nèi)都是治療有效的，并且還不會引起嚴重的副作用。盡管預(yù)期通過使用上述激動劑可以減少通過使有效的選擇性腺苷A2A受體激動劑與其它腺苷受體結(jié)合而介導的副作用，但是無處不在分布的腺苷受體意味著這些化合物仍然可能活化正常組織中的腺苷A2A受體，從而引起嚴重的副作用(例如低血壓和反射性心動過速)。
US 3,936,439公開了2，6-二氨基水粉蕈素衍生物作為用于哺乳動物冠狀擴展和/或血小板聚集抑制劑的用途。其中包括了在狗中的體內(nèi)數(shù)據(jù)，其證明N2-苯基-2，6-二氨基水粉蕈素、N2-環(huán)己基-2，6-二氨基水粉蕈素、N2-(對甲氧基苯基)-2，6-二氨基水粉蕈素和N2-乙基-2，6-二氨基水粉蕈素具有冠狀擴展作用，并且，體外數(shù)據(jù)證明，N2-苯基-2，6-二氨基水粉蕈素、N2-環(huán)己基-2，6-二氨基水粉蕈素、2，6-二氨基水粉蕈素、和N2-乙基-2，6-二氨基水粉蕈素具有血小板聚抑制作用。FR 2162128(Takeda Chemical Industries，Ltd)公開了腺苷衍生物(包括含有不少于兩個碳原子的低級烷基的2-烷氧基腺苷衍生物)具有降血壓和冠狀血管擴張活性。狗中的體內(nèi)數(shù)據(jù)證明，2-正戊氧基腺苷、2-(β-羥基乙氧基)-腺苷和2-苯氧基腺苷具有冠狀血管擴張活性。然而，US 3,936,439或者FR 2162128并沒有證實所述全部化合物可用于給藥而不引起嚴重的副作用。
Ribeiro等人(Progress in Neurobiology 68(2003)377-392)對神經(jīng)系統(tǒng)中的各種腺苷受體進行了綜述。在該論文的結(jié)尾評論(第387頁，右欄，第8段第4-10行)中指出，“正如很早以前指出的那樣，外周腺苷受體的活化與低血壓、心動過緩和體溫過低有關(guān)…這些副作用一直以來嚴重地限制了腺苷受體激動劑的臨床應(yīng)用”。
因此，仍然需要提供具有最低副作用的可以給藥的腺苷受體激動劑。
本發(fā)明的某些方面涉及疼痛的治療。疼痛具有兩個要素，它們均涉及對感覺神經(jīng)元的活化。第一要素是早期或即發(fā)期，此時感覺神經(jīng)元由于例如皮膚發(fā)熱或受壓的緣故而被刺激。第二要素為對先前已經(jīng)受損的神經(jīng)支配組織的感覺機制的敏感性增強的結(jié)果。第二要素被稱作痛覺過敏，其涉及由組織損傷引起的任意形式的慢性疼痛，而不是疼痛感覺的早期或即發(fā)期。
因此，痛覺過敏是由組織損傷引起的疼痛感覺增強的病癥。這種癥狀作為神經(jīng)系統(tǒng)的自然響應(yīng)，其目的顯然是為了鼓勵受損個體保護受損組織，從而獲得進行組織修復的時間。之所以出現(xiàn)上述病癥存在兩個已知的根本原因感覺神經(jīng)元活性增加、以及發(fā)生在脊髓中的感覺傷害信息的神經(jīng)元進程出現(xiàn)變化。在慢性炎癥(例如類風濕性關(guān)節(jié)炎)病癥中，并且當出現(xiàn)感覺神經(jīng)損傷(即神經(jīng)性疼痛)時，痛覺過敏可能會有所削弱。
已知有兩類主要的止痛藥(i)非甾類抗炎藥(NSAID)和相關(guān)的COX-2抑制劑；和(ii)基于嗎啡的阿片制劑。這兩類止痛藥都可以有效地控制一般性疼痛、即發(fā)性疼痛或傷害性疼痛。然而，它們對于某些類型的痛覺過敏例如神經(jīng)性疼痛卻并不是同樣有效。大多數(shù)醫(yī)學從業(yè)人員都不太情愿按照影響神經(jīng)性疼痛所需的高劑量開出阿片制劑處方，這是因為施用這些化合物具有各種副作用(例如坐立不安、惡心、和嘔吐)，并且患者還可能對其成癮。由于NSAID的效力遠遠不及阿片制劑，因此甚至還可能需要更高劑量的該化合物。然而，由于這些化合物會引起胃腸道刺激作用，因而這樣也不適宜。
同樣仍然需要提供這樣的止痛藥(特別是抗痛覺過敏藥)，這類藥物足以有效地控制神經(jīng)性以及其它痛覺過敏綜合征中的疼痛感覺，并且不會產(chǎn)生嚴重的副作用或者導致患者對其成癮。
海綿核苷(spongosine)最初是在1945年從熱帶海綿Cryptotethia cstypta中分離出來的(Bergmann和Feeney，J.Org.Chem.(1951)16，981，同上(1956)21，226)，并且是自然界發(fā)現(xiàn)的最早的甲氧基嘌呤。其也被稱作2-甲氧基腺苷或9H-嘌呤-6-胺、9-α-D-阿糖呋喃糖腺嘌呤-2-甲氧基。Bartlett等人描述了海綿核苷最初的生物活性(J.Med.Chem.(1981)24，947-954)。在口服后，測試了海綿核苷(以及其它化合物)在嚙齒動物中的骨骼肌弛緩、降低體溫、心血管和抗炎活性(抗炎活性通過對大鼠爪鹿角菜膠誘導水腫的抑制作用來評價)。大鼠中口服20mg/kg海綿核苷使鹿角菜膠誘導的炎癥受到25％的抑制。然而，在以上述劑量施用該化合物之后，也觀察到平均血壓(41％)和心率(25％)有所降低。
已經(jīng)對海綿核苷對大鼠腺苷A1和A2A受體的親和力進行了測量。所得到的Kd值(在大鼠中)對A1受體為340nM，對A2A受體為1.4μM，而對于刺激大鼠A2A受體的EC50值據(jù)顯示為3μM(Daly等人，Pharmacol.(1993)46，91-100)。在豚鼠的離體心臟制品中測量了海綿核苷的效力，對于腺苷A1和A2A受體而言，所得到的EC50值分別為10μM和0.7μM(Ueeda等人，J Med Chem(1991)34，1334-1339)。由于該化合物效力低且受體選擇性差，因此在尋找更有效的受體選擇性腺苷受體激動劑時，其往往被忽視。
現(xiàn)在出人意料地發(fā)現(xiàn)，在比基于該化合物對腺苷受體的已知親和力所預(yù)期的劑量低達100倍的劑量下，海綿核苷是一種有效的止痛藥。在上述劑量下，海綿核苷不會引起與更高劑量的該化合物或者其它腺苷受體激動劑所相關(guān)的顯著性副作用。因此，可以將海綿核苷的治療效果與其副作用分離開來。海綿核苷作為止痛藥的活性構(gòu)成了國際專利申請?zhí)朠CT/GB03/05379的主題，涉及海綿核苷的化合物作為止痛藥的活性構(gòu)成了國際專利申請?zhí)朠CT/GB04/00935的主題。海綿核苷及其相關(guān)化合物治療炎癥及其它疾病的用途構(gòu)成了國際專利申請?zhí)朠CT/GB04/000952的主題。
本申請人發(fā)現(xiàn)，PCT/GB04/00935和PCT/GB04/000952中描述的海綿核苷及其相關(guān)化合物在低于pH 7.4的pH下對于腺苷受體而言具有提高了的親和力。據(jù)信該性質(zhì)可用于解釋這些化合物在低劑量下為何具有出人意料的活性。本申請人已經(jīng)能夠識別出哪些其它的化合物在低pH下同樣對腺苷受體具有提高了的親和力。據(jù)信這些化合物可用作藥物，同時還不會引起嚴重的副作用。
本發(fā)明提供了下式的腺苷受體激動劑、或其可藥用鹽
其中 當X＝OH時，R1是C1或C4-C6烷氧基(優(yōu)選C5-C6烷氧基)、OCH2環(huán)丙基、OCH2環(huán)戊基、O-(2，2，3，3-四氟環(huán)丁基)、苯氧基、被取代的苯氧基(優(yōu)選被腈(優(yōu)選4-腈)、4-甲基、苯基(優(yōu)選3-苯基)、3-溴、3-異丙基、2-甲基、2，4-二氟、2，5-二氟、3，4-二氟、2，3，5-三氟、或者(3-甲基、4-氟)取代)、OCH2CH2OH、OCH2CHF2、(5-茚滿基)氧基、C1、C2、C5或C6烷氨基、(R)或(S)-仲丁氨基、C5或C6環(huán)烷氨基、外降冰片烷氨基、(N-甲基、N-異戊氨基)、苯氨基、具有甲氧基或氟取代基的苯氨基、C2砜基(sulfone group)、C7烷基、氰基、CONH2基團、或者3，5-二甲基苯基；或者 當X＝H時，R1是正己氧基；
其中R2是NMe2、N-(2-異戊烯基)、哌嗪基、(N-Me、N-芐基)、(N-Me、N-CH2Ph(3-Br))、(N-Me、N-CH2Ph(3-CF3))、或(N-Me、N-(2-甲氧乙基))、或者OCH2環(huán)戊基；
其中 當R1＝H時，R3是異丙基，且R2是NH2、甲氨基(NHMe)或異戊基(CH2CH2CHMe2)；或者 當R1＝H時，R3是H，且R2是NH2；或者 當R1是OMe時，R3是Ph，且R2是NH2；或者 當R1是NHCH2CH2CH2CH2CH2Me時，R3是CH2CH2CH2Me，且R2是NH2；
其中R4是正丙基或NHCH2CH3；
其中 當R2是NMe2時，R1是NH環(huán)己基；或者 當R2是NH芐基時，R1是OMe；
其中R1是NH環(huán)己基、NH環(huán)戊基或NH正己。
本文所使用的術(shù)語“烷基”是指未被取代的直鏈或支鏈烴基。所述烷基優(yōu)選為直鏈。
本文所使用的術(shù)語“烷氧基”是指未被取代的直鏈或支鏈烷氧基。所述烷氧基優(yōu)選為直鏈烷氧基。
本文所使用的術(shù)語“C1、C2、C5或C6烷氨基”是指基團-NRXRY，其中RX是氫，并且RY是C1、C2、C5或C6烷基，或者其中RX和RY各自獨立地是C1、C2、C5或C6烷基。優(yōu)選RX和RY各自是C1烷基。
優(yōu)選的式(I)化合物是式(I)(a)或(I)(b)化合物
其中 當X＝OH時，R1是C5-C6烷氧基、被腈(優(yōu)選4-腈)、苯基(優(yōu)選3-苯基)或3-異丙基取代的苯氧基、(5-茚滿基)氧基、C5或C6烷氨基、(N-甲基、N-異戊氨基)、C2砜基、或者C7烷基；或者 當X＝H時，R1是正己氧基； 或其可藥用鹽；
其中 當X＝OH時，R1是苯氧基、被取代的苯氧基、C1或C2烷氨基、具有甲氧基或氟取代基的苯氨基、或者OCH2CH2OH；或者 當X＝H時，R1是正己氧基； 或其可藥用鹽。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是下面實施例1-6中所述的編號2、3、7-18、22-25、31-33、35、37、40、44、45、47、48或51-61的化合物，或者其可藥用鹽。這些化合物的合成描述在下面的實施例14-30中。
本發(fā)明還提供了后面權(quán)利要求書中所述的編號2、3、7-18、22-25、31-33、35、37、40、44、45、47、48或者51-61化合物的合成方法。在某些情形中，這些化合物的前體包括一個或多個保護基團。應(yīng)該理解的是，如果需要的話，其它基于羧基的羥基保護基團也可以用來替代本文所指出的基團。
據(jù)信本發(fā)明的化合物在低于pH 7.4的pH下對腺苷受體具有提高的親和力。在正常哺乳動物組織中，細胞外pH被嚴格控制在pH7.35-7.45之間。某些組織中具有更低的pH值，特別是胃內(nèi)腔(pH介于2-3之間)和某些上皮細胞表面(例如肺表面pH為大約6.8)。在病理組織例如正處于發(fā)炎、缺血以及其它類型損傷的組織中，pH會出現(xiàn)降低。
由于本發(fā)明化合物在低pH下對腺苷受體具有提高的親和力，因而認為這些化合物可能是靶向作用于低pH的區(qū)域，例如病理組織。因此，使這些化合物發(fā)揮出治療效果所需的劑量遠遠低于根據(jù)其在正常細胞外生理pH下對腺苷受體具有的親和力所預(yù)期的劑量。由于僅僅需要低劑量的化合物，因此就避免或者排除了與施用腺苷受體激動劑相關(guān)的嚴重副作用。這將帶來令人驚喜的結(jié)果(相對于本領(lǐng)域例如US5,877,180中的教導而言)某些在生理pH下具有低親和力的腺苷受體激動劑和/或非選擇性激動劑(例如海綿核苷)在治療上將是有效的，同時還不會引起嚴重的副作用。
落入式(I)-(VI)范圍內(nèi)的某些化合物先前作為腺苷受體激動劑已被公開。然而，并不能由此預(yù)期認為這些化合物的作用可以靶向作用于各種病理組織，或者是據(jù)此認為它們的治療效果可以與其副作用分離開來。根據(jù)本發(fā)明的教導，據(jù)信式(I)-(VI)化合物可以按照比根據(jù)其在pH 7.4下對腺苷受體具有的親和力所預(yù)期的劑量低得多的劑量施用，在該劑量下可以獲得治療效果并且不會引起嚴重的副作用。
因此，根據(jù)本發(fā)明提供了用作藥物的本發(fā)明化合物。
據(jù)信式(I)-(VI)化合物具有止痛和/或抗炎活性，因此相對于其它腺苷受體激動劑而言，施用上述化合物出現(xiàn)副作用的可能性和嚴重程度將更低。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物用于制備預(yù)防、治療或緩解疼痛、特別是痛覺過敏的藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療或緩解疼痛(特別是痛覺過敏)的方法，所述方法包括向需要接受該預(yù)防、治療或緩解的對象施用式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物。
實施例中詳細描述了優(yōu)選的式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物。
據(jù)信式(I)-(VI)化合物可以有效抑制正患有疼痛、特別是神經(jīng)性或炎性疼痛的哺乳動物的疼痛感覺，甚至當按照預(yù)期所獲得的血漿濃度遠遠低于已知能夠活化腺苷受體的血漿濃度的劑量施用時也有效。因此，據(jù)信式(I)-(VI)化合物可以治療疼痛(特別是神經(jīng)性和炎性疼痛)，同時不會引起與施用其它腺苷受體激動劑相關(guān)的明顯副作用。
如上所述，痛覺過敏在大多數(shù)情形中是組織損傷的結(jié)果，要么是直接損害感覺神經(jīng)，要么是損害受指定感覺神經(jīng)支配的組織。因此，在很多癥狀中，疼痛感覺包括痛覺過敏這一要素。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物作為用于預(yù)防、治療或緩解疼痛(特別是痛覺過敏)的止痛劑(特別是抗痛覺過敏劑)的用途，所述疼痛(特別是痛覺過敏)由包括下述的神經(jīng)病引起糖尿病性神經(jīng)病、多發(fā)性神經(jīng)病、癌性疼痛、纖維肌痛、肌筋膜痛綜合征、骨關(guān)節(jié)炎、胰痛、骨盆/會陰疼痛、皰疹后神經(jīng)痛、類風濕性關(guān)節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛/腰神經(jīng)根病、脊柱狹窄、顳頜關(guān)節(jié)病癥、HIV疼痛、三叉神經(jīng)痛、慢性神經(jīng)性疼痛、下腰痛、背部手術(shù)失敗疼痛、背痛、術(shù)后痛、物理創(chuàng)傷后疼痛(包括射擊、道路交通事故、燒傷)、心痛、胸痛、骨盆疼痛/PID、關(guān)節(jié)痛(腱炎、滑囊炎、急性關(guān)節(jié)炎)、頸痛、腸痛、幻肢痛、產(chǎn)科疼痛(分娩/C-部分)、腎絞痛、急性帶狀皰疹疼痛、急性胰腺炎破裂(Breakthrough)疼痛(癌癥)、痛經(jīng)/子宮內(nèi)膜異位。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)或(VI)化合物作為用于預(yù)防、治療或緩解疼痛(特別是痛覺過敏)的止痛劑(特別是抗痛覺過敏劑)的用途，所述疼痛(特別是痛覺過敏)由炎性疾病、或者合并的炎性、自身免疫性和神經(jīng)性組織損傷結(jié)果引起，其中包括類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、痛風性關(guān)節(jié)炎和其它關(guān)節(jié)炎病癥、癌癥、HIV、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺肉瘤病、骨吸收疾病、再灌注損傷(包括由缺血性發(fā)作例如心肌梗塞、中風之后的再灌注引起的器官損傷)、自身免疫損傷(包括多發(fā)性硬化、Guillam Barre綜合征、重癥肌無力)、移植物對宿主的排斥、同種異體移植物排斥、感染引起的發(fā)熱和肌痛、與AIDS相關(guān)的并發(fā)癥(ARC)、瘢痕瘤形成、瘢痕組織形成、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱、過敏性腸綜合征、骨質(zhì)疏松、腦型瘧和細菌性腦膜炎、腸痛、癌性疼痛、背痛、纖維肌痛、術(shù)后痛。
另外還預(yù)期海綿核苷可以有效地預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛。據(jù)信那些與海綿核苷相關(guān)的化合物也可以有效對抗缺血性疼痛。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(VII)化合物或其可藥用鹽用于制備預(yù)防、治療或緩解疼痛、特別是缺血性疼痛的藥物的用途
其中R是C1-4烷氧基，且X是H或OH。
優(yōu)選R是C1-4烷氧基，且X是OH，或其可藥用鹽。式(VII)化合物可以排除2-甲氧基腺苷(海綿核苷)。
根據(jù)本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療或緩解疼痛、特別是缺血性疼痛的方法，所述方法包括向需要接受該預(yù)防、治療或緩解的對象施用式(VII)化合物。
另外還預(yù)期式(I)-(VI)化合物可以有效地預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛。
本文所使用的術(shù)語“缺血性疼痛”是指與向身體某部分血液供給減少有關(guān)的疼痛。血液供給減少限制了向身體該部分供給氧(缺氧)和能量。缺血是由組織血灌注不足引起的，因此缺血性疼痛是由冠狀動脈疾病、外周動脈疾病引起的，那些特征表現(xiàn)為血流不足的病癥往往會繼發(fā)為動脈粥樣硬化。其它血管疾病也可能導致缺血性疼痛。它們包括左心室肥大、冠狀動脈疾病、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心臟機能不足、運動耐量、慢性心力衰竭、心律失常、心律紊亂、syncopy、動脈硬化、輕度慢性心力衰竭、心絞痛、Prinzmetal′s(變型)心絞痛、穩(wěn)定型心絞痛和運動誘導的心絞痛、心臟旁路再閉合、間歇性跛行(動脈硬化oblitterens)、動脈炎、舒張期功能障礙和收縮期功能障礙、動脈粥樣硬化、缺血后/再灌注損傷、糖尿病(I型和II型)、血栓栓塞。出血事件也可能導致缺血性疼痛。此外，灌注不足也可能導致由于缺氧誘導的神經(jīng)細胞損傷而引起的神經(jīng)性和炎性疼痛(例如在心跳停止或分流手術(shù)中、糖尿病或產(chǎn)后痛苦)。
據(jù)信式(I)-(VII)化合物可以有效預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛，甚至當按照預(yù)期所獲得的血漿濃度遠遠低于已知能夠活化腺苷受體的血漿濃度的劑量施用時也有效。在該劑量下，據(jù)信所述化合物不會引起與施用更高劑量海綿核苷或其它腺苷受體激動劑相關(guān)的明顯副作用。
根據(jù)本發(fā)明進一步提供了本發(fā)明化合物(即式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物)在制備用于預(yù)防、治療、或緩解炎癥的藥物中的用途。
根據(jù)本發(fā)明進一步提供了預(yù)防、治療或緩解炎癥的方法，所述方法包括向需要接受該預(yù)防、治療、或緩解的對象施用本發(fā)明的化合物。
特別地，據(jù)信本發(fā)明化合物(即式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、或(VII)化合物)可用于預(yù)防、治療或緩解由下述疾病引起或者與其相關(guān)的炎癥癌癥(例如白血球過多癥、淋巴瘤、癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、肝細胞癌、腎癌、黑素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌、以及前列腺癌等)；自身免疫疾病(例如器官移植排斥、紅斑狼瘡、移植物對宿主的排斥、同種異體移植物排斥、多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病包括胰島破壞導致的糖尿病和糖尿病的炎癥結(jié)果)；自身免疫損傷(包括多發(fā)性硬化、Guillam Barre綜合征、重癥肌無力)；肥胖；與組織灌注不足和炎癥相關(guān)的心血管病癥(例如粥樣斑、動脈粥樣硬化、中風、缺血-再灌注損傷、跛行、脊髓損傷、充血性心力衰竭、血管炎、出血性休克、蛛網(wǎng)膜下出血引起的血管痙攣、腦血管意外引起的血管痙攣、胸膜炎、心包炎、糖尿病的心血管并發(fā)癥)；缺血-再灌注損傷、缺血和伴發(fā)性炎癥、血管成形術(shù)和炎性動脈瘤引起的再狹窄；癲癇、神經(jīng)變性(包括阿爾茨海默氏病)、肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(特別是運動員痛性痙攣)、關(guān)節(jié)炎(例如類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、痛風性關(guān)節(jié)炎)、纖維化(例如肺部、皮膚和肝臟纖維化)、多發(fā)性硬化、敗血癥、膿毒性休克、腦炎、感染性關(guān)節(jié)炎、雅里施-赫克斯海默反應(yīng)、帶狀皰疹、中毒性休克、腦型瘧、Lyme′s病、內(nèi)毒性休克、革蘭氏陰性休克、出血性休克、肝炎(由組織損傷或病毒感染引起)、深部靜脈血栓形成、痛風；與呼吸困難相關(guān)的疾病(例如慢性阻滯性肺病、氣道阻滯和阻塞、支氣管收縮、肺血管收縮、呼吸障礙、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺肉瘤病、囊性纖維化、肺動脈高壓、肺血管收縮、肺氣腫、支氣管變態(tài)反應(yīng)和/或炎癥、哮喘、花粉熱、鼻炎、春季結(jié)膜炎以及成人呼吸窘迫綜合征)；與皮膚發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括銀屑病、濕疹、潰瘍、接觸性皮炎)；與腸發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱、過敏性腸綜合征、炎性腸病)；HIV(特別是HIV感染)、腦型瘧、細菌性腦膜炎、TNF-增強的HIV復制、AZT和DDI活性的TNF抑制、骨質(zhì)疏松以及其它骨吸收疾病、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、子宮內(nèi)膜異位引起的不育、感染引起的發(fā)熱和肌痛、繼發(fā)于癌的惡病質(zhì)、繼發(fā)于感染或惡性腫瘤的惡病質(zhì)、繼發(fā)于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質(zhì)、與AIDS相關(guān)的并發(fā)癥(ARC)、瘢痕瘤形成、瘢痕組織形成、兩性霉素B治療引起的不良作用、白介素-2治療引起的不良作用、OKT3治療引起的不良作用、或者GM-CSF治療引起的不良作用、以及其它通過過度抗炎細胞(包括嗜中性粒細胞、嗜曙紅細胞、巨嗜細胞和T-細胞)活性介導的病癥。
已知持續(xù)的低水平炎癥與肥胖有關(guān)(在存在和不存在胰島素耐受性和II型糖尿病中)(Browning等人(2004)Metabolism 53，899-903，Inflammatory markers elevated in blood of obese women；Mangge等人(2004)Exp Clin Endocrinol diabetes 112，378-382，Juvenileobesity correlates with serum inflammatory marker C-reactiveprotein；Maachi等人Int J Obes Relat Metab Disord.2004 28，993-997，Systemic low grade inflammation in obese people)。其中可能的原因在于脂肪細胞分泌了促炎癥反應(yīng)的TNF-α和白介素1和6。
尤其優(yōu)選本發(fā)明化合物是腺苷A2A和/或A3受體的選擇性激動劑，這是因為據(jù)信這類化合物具有強抗炎活性。腺苷A2A和/或A3受體的選擇性激動劑是指可以在低于(優(yōu)選千分之一至五分之一)活化腺苷A1受體所需濃度的濃度下活化腺苷A2A和/或A3受體的激動劑。此外，由于A1受體具有促炎癥活性，因此預(yù)期這樣可以將對A2A和/或A3受體具有選擇性的化合物的上述活性降至最低。
應(yīng)該理解的是，所有可通過激動腺苷A2A和/或A3受體而得到預(yù)防或改善的病癥都可以利用式(I)-(VII)化合物進行預(yù)防、治療或緩解。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)-(VII)化合物用于制備預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A和/或A3受體而得到改善或預(yù)防的病癥的藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明，還提供了預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A和/或A3受體而得到改善或預(yù)防的病癥的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用式(I)-(VII)化合物。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以方便地測定使用式(I)-(VII)化合物進行預(yù)防、治療或緩解的病癥是否通過腺苷A2A和/或A3受體發(fā)揮作用。例如，通過在有或沒有腺苷A2A和/或A3受體選擇性拮抗劑的情況下，將化合物在患有上述病癥的動物模型中的效果進行對照，可以實現(xiàn)上述目的。如果化合物在存在拮抗劑的情形下的效果相對于化合物在不存在拮抗劑的情形下的效果而言有所降低或者缺乏，則可以認為該化合物通過腺苷A2A和/或A3受體發(fā)揮療效。腺苷A2A和A3受體的拮抗劑是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的(參見例如Ongini等人，F(xiàn)armaco.2001年1-2月；56(1-2)87-90；Muller，Curr Top Med Chem.2003；3(4)445-62)。
或者，也可以使用借助腺苷A2A受體敲除小鼠(Ohta A和Sitkovsky M，Nature 2001；414916-20)。例如，將化合物對于具有上述病癥的小鼠的效果與其對具有相應(yīng)癥狀的腺苷A2A敲除小鼠的效果進行對照。如果該化合物僅僅是在具有腺苷A2A受體的小鼠中有效，則可以認為該化合物通過腺苷A2A受體發(fā)揮療效。
本發(fā)明化合物(即式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物)據(jù)信在低劑量下比其它腺苷受體激動劑更有效的多。因此，預(yù)期本發(fā)明化合物可以有效地按照所出現(xiàn)副作用的可能性和嚴重程度被降低、或者觀察不到副作用的劑量給藥。相對于僅僅具有抗炎活性的大部分其它腺苷受體激動劑而言，本發(fā)明化合物在觀察到嚴重副作用的相同濃度下具有明顯優(yōu)勢。
二者擇一地或者另外地，相對于其它腺苷受體激動劑而言，本發(fā)明化合物出現(xiàn)副作用的可能性和嚴重程度均有所降低。
另外還據(jù)信本發(fā)明化合物(即式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物)還可以有效地用作改善疾病的抗風濕藥物(DMARD)，特別是用于預(yù)防、治療或緩解類風濕性關(guān)節(jié)炎、以及可能的其它關(guān)節(jié)病例如骨關(guān)節(jié)炎。
用于治療類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的藥物可以分成兩類有助于緩解RA癥狀的藥物；有助于改善疾病的藥物。有助于緩解RA癥狀的藥物包括在受影響關(guān)節(jié)處緩解疼痛和減輕炎癥的非甾體類抗炎藥物(NSAIDs)、緩解疼痛但不延緩關(guān)節(jié)損傷或減輕炎癥的止痛劑(例如撲熱息痛和麻醉性疼痛藥物)、以及作為抗炎癥藥物的皮質(zhì)激素。
DMARD有助于改善RA癥狀(例如關(guān)節(jié)腫脹和觸痛)，還有助于延緩由RA引起的關(guān)節(jié)損傷的進展。因此，盡管不能治愈RA，但是DMARD有助于延緩RA的進展。過去DMARD通常被用于治療使用NSAID治療失敗后的RA。然而，現(xiàn)在DMARD開始在RA階段早期使用，這是因為研究表明早期使用DMARD進行干預(yù)可以獲得重要優(yōu)勢。DMARDs和NSAID通?；ハ嗦?lián)合使用。
臨床研究結(jié)果顯示，現(xiàn)有的DMARDs延緩了RA的進展。治療開始6個月之后，骨與軟骨損傷的比例開始在患者關(guān)節(jié)中變緩。1年之后，患者表現(xiàn)為關(guān)節(jié)損傷出現(xiàn)極其輕微的進展，2年之后，X-射線顯示接受研究的患者在治療的第二年出現(xiàn)新?lián)p傷的關(guān)節(jié)。
已知DMARD的實例包括柳氮磺吡啶、青霉胺、氯喹、羥氯喹、金(以金諾芬形式肌內(nèi)注射或者口服)、甲氨蝶呤、環(huán)孢菌素、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺、來氟米特。最近已經(jīng)開發(fā)出可以抑制腫瘤壞死因子α(TNF-α)的生物學DMARD。其實例之一是Humira，該藥物被指出可用于降低征兆和癥狀，以及抑制具有輕度至重度活性RA的成人(其對一種或多種DMARD響應(yīng)不充分)中的結(jié)構(gòu)性損傷。Humira是一種抗-TNF-α抗體。
大部分已知的DMARD可以引起嚴重的副作用。因此希望獲得具有最小副作用的新DMARD。
下面的實施例13示出了海綿核苷在U937人巨噬細胞中減少佛波醇誘導的TNF-α釋放的能力。在此基礎(chǔ)之上，據(jù)信海綿核苷以及式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)的相關(guān)化合物也具有DMARD活性。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物用于制備延緩關(guān)節(jié)病進展的藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明另外還提供了延緩關(guān)節(jié)病進展的方法，所述方法包括向有該需要的對象施用式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物。
優(yōu)選RA的進展被延緩，特別是由RA引起的關(guān)節(jié)損傷的進展被延緩。
本發(fā)明化合物可以在RA期間的任何階段施用。本發(fā)明化合物可以與一種或多種NSAID或者其它的DMARD聯(lián)合給藥。
本發(fā)明化合物據(jù)信可以有效地用作DMARD，甚至當按照預(yù)期所獲得的血漿濃度遠遠低于已知能夠活化腺苷受體的血漿濃度的劑量施用時也有效。在該劑量下，據(jù)信所述化合物不會引起與施用更高劑量海綿核苷或其它腺苷受體激動劑相關(guān)的明顯副作用。
使用本發(fā)明化合物作為DMARD的一個特殊優(yōu)勢在于其口服有效，相反，抗TNF-α抗體必須注射給藥。
另外還應(yīng)該理解的是，式(I)-(VII)化合物可以有效地預(yù)防、治療或緩解1型或2型糖尿病的大血管和微血管并發(fā)癥(包括視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病)、或者由缺血(糖尿病或其它)或動脈粥樣硬化(糖尿病或其它)引起的血管損傷。
根據(jù)本發(fā)明提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物用于制備預(yù)防、治療、或緩解1型或2型糖尿病的大血管或微血管并發(fā)癥、視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病、或者由缺血或動脈粥樣硬化引起的血管損傷的藥物的用途。
根據(jù)本發(fā)明還提供了預(yù)防、治療或緩解1型或2型糖尿病的大血管或微血管并發(fā)癥、視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病、或者由缺血或動脈粥樣硬化引起的血管損傷的方法，所述方法包括向有該需要的對象施用式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物。
優(yōu)選的式(VII)化合物是2-甲氧基腺苷(即海綿核苷)、2-乙氧基腺苷和2-丁氧基腺苷。
式(I)-(VII)化合物據(jù)信可以有效地預(yù)防、治療或緩解1型或2型糖尿病的大血管和微血管并發(fā)癥，包括視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病，或者由缺血或動脈粥樣硬化(糖尿病或其它)引起的血管損傷，甚至當按照預(yù)期所獲得的血漿濃度遠遠低于已知能夠活化腺苷受體的血漿濃度的劑量施用時也有效。在該劑量下，據(jù)信所述化合物不會引起與施用更高劑量海綿核苷或其它腺苷受體激動劑相關(guān)的明顯副作用。
式(I)-(VII)化合物據(jù)信可以有效地促進傷口愈合。根據(jù)本發(fā)明，提供了式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物用于制備促進傷口愈合的藥物的用途。根據(jù)本發(fā)明還提供了促進對象中傷口愈合的方法，所述方法包括向該對象施用式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物。
向?qū)ο笫┯檬?I)-(VII)化合物的用量優(yōu)選能夠保證所得到的血漿濃度峰值低于該化合物對腺苷受體的EC50值(優(yōu)選在pH 7.4下)。
應(yīng)該理解的是，化合物的EC50值對于不同腺苷受體(即A1、A2A、A2B、A3腺苷受體)而言可能是不同的。所施用化合物的用量應(yīng)當相對于該化合物對不同受體的最低EC50值進行計算。
因此，向?qū)ο笫┯没衔锏挠昧繎?yīng)當保證所得到的血漿濃度峰值低于該化合物對不同腺苷受體的最低EC50值。
優(yōu)選化合物的血漿濃度峰值為最低EC50值的千分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至三分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或者十分之一至五分之一)。
優(yōu)選所施用化合物的用量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在該化合物對腺苷受體的最低EC50值的千分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或者十分之一至五分之一)。
優(yōu)選所施用的用量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在該化合物在pH 7.4下對腺苷受體的EC50值的千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一之間。
為了避免疑問，本文中將化合物的EC50值定義為化合物所激發(fā)的受體響應(yīng)為基線受體響應(yīng)和最大受體響應(yīng)之間的中間值的濃度(使用例如劑量-響應(yīng)曲線測得)。
所述EC50值應(yīng)當在標準條件(緩沖至pH 7.4的平衡鹽溶液)下測量。關(guān)于使用離體膜、細胞和組織進行EC50的測量，這可以在pH為7.4的緩沖鹽溶液(例如細胞培養(yǎng)基)中進行，例如Daly等人，(Pharmacol.(1993)46，91-100)、或者優(yōu)選Tilburg等人(J.Med.Chem.(2002)45，91-100)中的緩沖鹽溶液。通過在正常健康的動物中、或者甚至在正常健康動物在正常狀況(即氧合血液、或氧合等滲溶媒，同樣緩沖至pH 7.4)下灌注的組織中測量由腺苷受體介導的響應(yīng)，也可以測得EC50。
或者，所施用本發(fā)明化合物的用量可以為所導致的血漿濃度峰值低于該化合物對腺苷受體的最低或最高Kd值(即低于該化合物對A1、A2A、A2B和A3腺苷受體的最低或最高Kd值)的用量。
優(yōu)選該化合物的血漿濃度峰值為最低或最高Kd值的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至三分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。
優(yōu)選所施用化合物的用量所得到的血漿濃度在至少1小時的時間段內(nèi)保持在該化合物對腺苷受體的Kd值的千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一之間，更優(yōu)選在千分之一至二十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一之間。
優(yōu)選所施用化合物的用量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在該化合物對腺苷受體的最低或最高Kd值的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或五十分之一至三分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。
化合物對各受體的Kd值應(yīng)當在標準條件下測得，使用衍生于內(nèi)源性表達這些受體的組織或細胞、或者來自轉(zhuǎn)染有編碼腺苷受體基因的DNA載體的細胞的腺苷受體來源作為質(zhì)膜?；蛘?，也可以使用表達有腺苷受體的全細胞制品。針對不同受體所選擇的標記配體(例如放射標記的)應(yīng)當在緩沖(pH 7.4)鹽溶液中使用(參見例如Tilburg等人，J.Med.Chem.(2002)45，420-429)，從而測得化合物對各受體的結(jié)合親和力以及Kd。
或者，所施用本發(fā)明化合物的用量為在與作為該化合物給藥對象的同物種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最小用量(或劑量)的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至三分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。優(yōu)選給藥量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在引起上述副作用的所述化合物最低用量的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。
優(yōu)選給藥量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在引起上述副作用的最低劑量的千分之一至二分之一、或千分之一至二十分之一、或百分之一或五十分之一至二分之一、或百分之一或者五十分之一至五分之一之間。
或者，所施用本發(fā)明化合物的用量為在與作為該化合物給藥對象的同物種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低血漿濃度的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至三分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。優(yōu)選所用用量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在引起上述副作用的化合物最低血漿濃度的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。
優(yōu)選所用用量所得到的血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)保持在引起上述副作用的最低血漿濃度的千分之一至二分之一、或千分之一至二十分之一、或百分之一或五十分之一至二分之一、或百分之一或者五十分之一至五分之一之間。
本發(fā)明化合物的適宜劑量將取決于待治療對象的年齡、性別、體重、和狀況、化合物的效力(例如其對于腺苷受體的EC50值)、半衰期、機體吸收情況、以及給藥途徑等。當然，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以方便地確定適宜的劑量。
確定適宜劑量的一種適宜方法是在化合物的EC50值或其左右評價其對于腺苷受體(優(yōu)選對其具有最大親和力的受體)的心血管變化(例如通過心電圖和血壓監(jiān)測)，從而確定最大耐受劑量。然后預(yù)期治療有效劑量為該最大耐受劑量的萬分之一至二分之一(或者萬分之一至五分之一、或萬分之一至二十分之一、或萬分之一至百分之一、或萬分之一至千分之一、或千分之一至二分之一、或千分之一至五分之一、或千分之一至二十分之一、或五十分之一至十分之一、或百分之一至二分之一、或百分之一至五分之一、或五十分之一至二分之一、或五十分之一至三分之一、或五十分之一至五分之一、或十分之一至二分之一、或十分之一至五分之一)。
下面的實施例31示出了對于海綿核苷而言，其劑量在人體中應(yīng)當小于28mg。該劑量所得到的血漿濃度介于0.5-0.9μM之間(接近于在pH 7.4下對腺苷A2A受體的Kd，見下文)。根據(jù)上述結(jié)果，海綿核苷的優(yōu)選劑量范圍為0.03-0.3mg/kg。
海綿核苷在患有關(guān)節(jié)炎的大鼠輔劑模型中具有最大止痛減輕作用的最低血漿濃度為0.06μM，這遠遠低于海綿核苷對腺苷A2A受體的EC50，后者為大約1μM。在人中獲得最大血漿濃度的優(yōu)選劑量范圍為0.005-0.5μM，這明顯低于通過作用于該受體預(yù)期獲得止痛或抗炎活性的劑量。
或者，本發(fā)明化合物的適宜治療濃度預(yù)期為腺苷受體(該化合物對其具有最大親和力的受體)在pH 5.5下的Ki的大約10-20倍。因此，對于海綿核苷而言，要求其為15-30nM，而使用pH 7.4下的Ki的話，該濃度預(yù)期要求為20-30μM。
預(yù)期所施用本發(fā)明化合物的用量應(yīng)當為0.001-15mg/kg。所述用量可以低于6mg/kg。該用量可以為至少0.001、0.01、0.1或0.2mg/kg。所述用量可以低于0.1或0.01mg/kg。優(yōu)選范圍為0.001-10、0.001-5、0.001-2、0.001-1、0.001-0.1、0.001-0.01、0.01-15、0.01-10、0.01-5、0.01-2、0.01-1、0.1-10、0.1-5、0.1-2、0.1-1、0.1-0.5、0.1-0.4、0.2-15、0.2-10、0.2-5、0.2-2、0.2-1.2、0.2-1、0.6-1.2mg/kg。
對于人(例如70kg的對象)而言，優(yōu)選劑量低于420mg，優(yōu)選低于28mg，更優(yōu)選低于21mg，優(yōu)選為至少0.07、0.1、0.7或0.8mg，更優(yōu)選為至少3.5或7mg。更優(yōu)選為7-70mg、14-70mg或3.5-21mg。
據(jù)信上述具體劑量顯著低于(至多低大約1000倍)根據(jù)該化合物對基于腺苷A2A受體的EC50值預(yù)期具有止痛或抗炎活性所需要的劑量。
上述優(yōu)選的劑量范圍目標在于使所生成的血漿濃度達到該化合物對于對其具有最大親和力的腺苷受體的EC50值的百分之一至二分之一左右。
本發(fā)明化合物可以與也可以不與其它的治療劑一起施用，其它治療劑例如止痛劑或抗炎劑(如阿片類、甾類、NSAID、大麻素類、速激肽調(diào)節(jié)劑或緩激肽調(diào)節(jié)劑)或抗痛覺過敏藥(如加巴噴丁、普加巴林、大麻素類、鈣鈉或鈣通道調(diào)節(jié)劑、抗癲癇藥或者抗抑郁劑)或者DMARD。
一般來說，本發(fā)明化合物可以按照已知方式以任何適宜的劑量形式、通過適當?shù)耐緩浇o藥。本發(fā)明化合物優(yōu)選通過口服、非腸道、舌下、經(jīng)皮、鞘內(nèi)或經(jīng)粘膜給藥。其它適宜途徑包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、吸入和局部給藥。所施用藥物在口服時的用量通常高于在靜脈內(nèi)給藥時的用量。
應(yīng)該理解的是，本發(fā)明化合物可以與生理學上可接受的載體、賦型劑或稀釋劑一起給藥。
為了將治療上有效的血漿濃度保持延長的時間，可以將本發(fā)明化合物摻入緩釋制劑中。
例如用于口服給藥的適宜組合物包括其中含有液體例如注射用液體的固體單元劑型，例如片劑、膠囊劑、小瓶和安瓿，其中將活性劑通過已知方式，利用生理學上可接受的賦型劑、稀釋劑或載體配制。適宜的稀釋劑和載體是已知的，包括例如與適宜的粘合劑混合的乳糖和滑石。
本發(fā)明化合物(即式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)化合物)的單元劑量通常含有至多500mg(例如1-500mg、或者(優(yōu)選)5-500mg)活性劑。優(yōu)選活性劑為含有活性劑和生理學上可接受載體、賦型劑或稀釋劑的藥物組合物。優(yōu)選的劑量范圍(即活性成分在單元劑量中的優(yōu)選含量)為0.001-10、0.001-5、0.001-2、0.001-1、0.001-0.1、0.001-0.01、0.01-15、0.01-10、0.01-5、0.01-2、0.01-1、0.1-10、0.1-5、0.1-2、0.1-1、0.1-0.5、0.1-0.4、0.2-15、0.2-10、0.2-5、0.2-2、0.2-1.2、0.2-1、0.5-1、0.6-1.2，通常為大約0.2或0.6mg活性劑/kg對象(人)?；钚詣┑膬?yōu)選用量為小于420mg，優(yōu)選小于28mg，更優(yōu)選小于21mg，優(yōu)選為至少0.07、0.1、0.7或0.8mg，更優(yōu)選為至少3.5或7mg。最優(yōu)選為7-70mg、或14-70mg、3.5-21mg、0.07-0.7mg或0.7-7mg。在上述范圍內(nèi)，據(jù)信基本上可以獲得有效的治療，同時不會導致伴發(fā)性血壓降低(例如不超過10％)和/或補償性心率提高。
本發(fā)明化合物的單元劑型進一步可以含有一種或多種其它治療劑，例如止痛劑、抗炎劑、抗痛覺過敏劑或者DMARD。
優(yōu)選本發(fā)明化合物按照每天2或3次的頻率給藥。
本發(fā)明化合物還可以作為用于鑒定更有效的藥物、或者具有進一步降低了的副作用的藥物的基礎(chǔ)。
可藥用鹽的實例是與形成生理學上可接受陰離子的酸形成的有機加成鹽，例如甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、蘋果酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、α-酮戊二酸鹽以及α-甘油磷酸鹽。還可以形成適宜的無機鹽，包括鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、碳酸氫鹽和碳酸鹽。
可藥用鹽可以利用本領(lǐng)域熟知的標準步驟制得，例如通過將全堿性的化合物例如胺與適宜的酸反應(yīng)，得到生理學上可接受的陰離子。還可以制得羧酸的堿金屬(例如鈉、鉀、或鋰)或堿土金屬(例如鈣)鹽。
根據(jù)本發(fā)明的式(VII)化合物用于制備預(yù)防、治療、或緩解缺血性疼痛的藥物的用途、或者通過施用式(I)化合物預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛的方法排除了預(yù)防、治療或緩解由于缺血性發(fā)作例如心肌梗塞、中風之后的再灌注引起的器官損傷導致的疼痛。
根據(jù)本發(fā)明的式(VII)化合物用于制備預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛的藥物的用途排除了使用2-丙氧基腺苷、2-異丙氧基腺苷、3′脫氧2甲氧基腺苷或者3′脫氧2乙氧基腺苷。
根據(jù)通過施用式(I)化合物預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛的方法排除了使用2-丙氧基腺苷、2-異丙氧基腺苷、3′脫氧2甲氧基腺苷或者3′脫氧2乙氧基腺苷。
式(I)化合物排除了2-苯氨基腺苷(編號26化合物)、2-乙氨基腺苷(編號20化合物)、2-環(huán)己基氨基腺苷(編號30化合物)、2-(4-甲氧基苯氨基)腺苷(編號27化合物)、2-苯氧基腺苷(編號6化合物)、或者2-(β-羥乙氧基)-腺苷(編號34化合物)， 在下面的實施例中參照附圖對本發(fā)明實施方案進行描述，其中

圖1示出了海綿核苷(0.6mg/kg p.o.)對A正常大鼠的血壓；B心率的影響； 圖2示出了施用海綿核苷后血漿濃度隨時間的變化； 圖3示出了海綿核苷(0.6mg/kg p.o.)對于由角叉菜膠誘導的痛覺過敏的抗痛覺過敏作用。A時間過程(*p＜0.05，**p＜0.01對溶媒(Sidak′s)，p＞0.05對BL，5小時，海綿核苷和IND(Dunnett′s))；B抗痛覺過敏效果的劑量依賴性； 圖4示出了海綿核苷(0.6mg/kg p.o.)在神經(jīng)性疼痛的慢性收縮性損傷模型中的抗痛覺過敏作用(*p＜0.05，**p＜0.01對溶媒(ANOVASidak′s))； 圖5示出了海綿核苷(0.6mg/kg p.o.)在存在和不存在納洛酮的神經(jīng)性疼痛的慢性收縮性損傷模型中的效力； 圖6示出了海綿核苷和加巴噴丁在神經(jīng)性疼痛的慢性收縮性損傷模型中的疊加作用； 圖7示出了海綿核苷在人巨噬細胞系U937細胞中對于由LPS誘導的TNF-α釋放的影響；以及 圖8示出了海綿核苷在不影響血壓的濃度下(62.4和624μg/kgi.p.)可以抑制由角叉菜膠(CGN)誘導的炎癥，且其效力與吲哚美辛(3mg/kg，po)相當。
在下面的實施例中給出了優(yōu)選的本發(fā)明化合物的結(jié)果。各化合物的Ki值在pH 5.5和pH 7.4下給出。為了計算得到上述值，在22℃下、存在2nM[3H]-CGS21680、1單位/ml腺苷脫氨酶和濃度漸增的待研究化合物的情況下，將大鼠紋狀體膜培養(yǎng)90分鐘，然后過濾并進行液體閃爍計數(shù)。
實施例1
當X＝OH時 當X＝H時 實施例2
實施例3
實施例4
實施例5
實施例6
實施例7 圖1海綿核苷(0.624mg/kg p.o.)對血壓或心率沒有明顯作用。將可植入生物遙測裝置置于每組6只大鼠的腹腔中。裝置的壓力導管插入腹主動脈中，兩只電極埋藏在處于前導(lead)II位的皮膚下(腹腔左側(cè)/右肩)。各大鼠置于位于用來采集數(shù)據(jù)的放射感受器(DSI)上方的各自的籠中。A血壓；B心率。
實施例8 海綿核苷對腺苷受體的EC50值(在pH7.4下測量)為900ng/ml(3μM)。圖2示出了以0.6mg/kg向大鼠施用海綿核苷后血漿濃度隨時間的變化。從中可以看出，血漿濃度持續(xù)超過3小時保持在EC50值的2％以上。當血漿濃度峰值介于體外所測得EC50值的1％-30％之間時，觀察到抗痛覺過敏效果(無血壓變化)。如果血漿濃度峰值達到EC50值，則發(fā)現(xiàn)血壓出現(xiàn)顯著降低，且持續(xù)4小時。
實施例9 圖3A.海綿核苷(0.624mg/kg p.o.)抑制了由角叉菜膠(CGN)誘導的熱痛覺過敏(CITH)，且其效力與吲哚美辛(3mg/kg，po)相當。B.給藥3小時后對海綿核苷的濃度響應(yīng)關(guān)系。向右后爪施用角叉菜膠(2％，10微升)。在接受治療和未接受治療的后爪周圍放置熱源，顯示出它們的撤爪潛伏期存在差異。按照與角叉菜膠相同的時間施用海綿核苷。
實施例10 圖4海綿核苷(0.624mg/kg p.o.)抑制了由大鼠坐骨神經(jīng)慢性收縮性損傷引起的熱痛覺過敏。在麻醉作用下，坐骨神經(jīng)顯示在右腿中，將四根寬松的絲線纏繞在神經(jīng)束周圍。在大約2周后，通過左右爪撤爪潛伏期之間的差異來判斷在經(jīng)過手術(shù)的大鼠腿中是否形成了熱痛覺過敏。發(fā)現(xiàn)撤爪潛伏期之間的差異有所減少，這表明施用海綿核苷減輕了痛覺過敏。海綿核苷與卡馬西平(CBZ，100mg/kg s.c.)一樣或者更加有效。
實施例11 圖5在有和沒有納洛酮(1mg/kg s.c.)存在下，海綿核苷(1.2mg/kg p.o.)抑制了由大鼠坐骨神經(jīng)慢性收縮性損傷引起的靜態(tài)異常性疼痛。在麻醉作用下，坐骨神經(jīng)顯示在右腿中，將四根寬松的絲線纏繞在神經(jīng)束周圍。在大約2周后，通過左右爪撤爪閾值之間的差異來判斷在經(jīng)過治療的大鼠腿中是否形成了靜態(tài)異常性疼痛。發(fā)現(xiàn)撤爪閾值(PWT)在有和沒有納洛酮存在下均有所提高，這表明施用海綿核苷減輕了痛覺過敏。Veh溶媒。
實施例12 圖6海綿核苷和加巴噴丁抑制了由大鼠坐骨神經(jīng)慢性收縮性損傷引起的靜態(tài)異常性疼痛。施用如圖所示的分成不同部分的海綿核苷和加巴噴丁(p.o.)。所施用的總劑量顯示在橫軸上，撤爪閾值(PWT)顯示在縱軸上。如果兩種化合物的活性是疊加的話(*)，則示出了預(yù)期的抗痛覺過敏活性(由單獨采用各藥劑獲得的劑量響應(yīng)曲線得到)。所觀察到的活性用(■)表示。顯然所觀察到的活性與由疊加預(yù)期得到的活性之間無顯著差異。
實施例13 將人巨噬細胞系U937細胞以500,000細胞/ml生長在懸浮液中，然后滴定于48孔板中，用20ng/ml PMA處理后培養(yǎng)8小時。細胞粘著在孔底，洗滌后在使用之前恢復36小時?？装逵煤＞d核苷濃縮物預(yù)培養(yǎng)，10分鐘后加入100ng/ml LPS以刺激TNF生成。3小時后，使用熒光標記的ELISA試劑盒分析細胞上清液中的TNF-α。顯示結(jié)果(對抗海綿核苷濃縮物抑制TNF-α釋放)的圖如圖7所示。結(jié)果表明，海綿核苷抑制了LPS誘導的TNF釋放，并且這種抑制作用對腺苷受體抑制劑敏感。
實施例14 化合物2和32的制備
流程圖1 向腺苷(1eq)的吡啶溶液中加入苯甲酰氯(7eq)，所得到的溶液在80℃下回流4小時。真空除去溶劑，殘余物溶解于EtOAc中，用NaHCO3水溶液、鹽水和水洗滌，有機相用MgSO4干燥。由二氯甲烷(DCM)/EtOH結(jié)晶得到為白色固體的五苯甲?；佘?。
向四甲基硝酸銨(TMAN)(1.5eq)的DCM溶液中加入三氟乙酸酐(TFAA)(1.5eq)，所得到的溶液在室溫下攪拌1小時。混合物冷卻至0℃，加入五苯甲?；佘?1eq)的DCM溶液。所得到的溶液在4小時內(nèi)溫熱至室溫。然后溶液用NaHCO3水溶液、鹽水和水洗滌(x3)，有機相用MgSO4干燥。由DCM/EtOH結(jié)晶，得到為淺黃色固體的五苯甲?；?2-硝基-腺苷。
向醇ROH(R＝CH2CHF2(2)或CH2環(huán)戊基(32))(1.5eq)的THF溶液中加入NaH(1.5eq)，所得到的混懸液攪拌1小時。所得到的溶液加入至五苯甲?；?2-硝基-腺苷(1eq)的THF溶液中，繼續(xù)攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于MeOH中。然后加入NaOMe(4eq)，所得到的混懸液攪拌4小時后，用檸檬酸水溶液猝滅。真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-烷氧基衍生物。
實施例15 化合物3和35的制備
流程圖2 向肌苷(1eq)和DMAP(0.1eq)的MeCN混懸液中加入Et3N(3.8eq)和乙酸酐(3.5eq)，所得到的混合物攪拌1小時。然后加入MeOH，繼續(xù)攪拌15分鐘。隨后真空除去溶劑，產(chǎn)物用異丙醇研制。所得到的固體過濾后，用異丙醇洗滌得到三乙酰氧基肌苷。
向三乙酰氧基肌苷(1eq)的CHCl3溶液中加入DMF(3eq)和亞硫酰氯(3eq)，所得到的溶液回流16小時。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于DCM中，用NaHCO3和鹽水洗滌，有機相用MgSO4干燥，得到三乙酰氧基-6-氯腺苷。
向四甲基硝酸銨(TMAN)(1.5eq)的DCM溶液中加入三氟乙酸酐(TFAA)(1.5eq)，所得到的溶液在室溫下攪拌1小時。混合物冷卻至0℃，加入三乙酰氧基-6-氯-腺苷(1eq)的DCM溶液。所得到的溶液在2.5小時內(nèi)溫熱至室溫。溶液隨后用NaHCO3水溶液、鹽水和水洗滌(x 3)，有機相用MgSO4干燥。由DCM/EtOH結(jié)晶，得到為淺黃色固體的三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷，將其用水和EtOH洗滌。
向醇ROH(R＝CH2環(huán)丙基(3)或2，2，3，3-四氟環(huán)丁烷(35))(1.5eq)的THF溶液中加入NaH(1.5eq)，所得到的混懸液攪拌15分鐘。所得到的溶液然后加入至三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷(1eq)的THF溶液中，繼續(xù)攪拌2-6小時。隨后真空除去溶劑，加入EtOH和NH3水溶液，所得到的溶液在80℃的密閉試管中加熱16小時。混合物冷卻后，真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-烷氧基衍生物。
實施例16 化合物7-18的制備
流程圖3 向苯酚ArOH(Ar＝4-氰基苯基(7)或3-苯基-苯基(8)或2，5-二氟苯基(9)或2，4-二氟苯基(10)或3，4-二氟苯基(11)或2，3，5-三氟苯基(12)或3-甲基，4-氟苯基(13)或2-甲基苯基(14)或3-溴苯基(15)或4-甲基苯基(16)或5-茚滿基(17)或者3-異丙基苯基(18))(1.5eq)的THF溶液中加入KOtBu(1.5eq)，所得到的混懸液攪拌30分鐘。所得到的溶液加入至五苯甲?；?2-硝基-腺苷(參見流程圖1)(1eq)的THF溶液中，繼續(xù)攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于MeOH中。隨后加入NaOMe(4eq)，所得到的混懸液攪拌4小時后，用檸檬酸水溶液猝滅。真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-芳氧基衍生物。
實施例17 化合物22-25和31的制備
流程圖4 將2-氯腺苷在純胺RR′NH(RR′N＝NH-(R)-仲丁基(22)或NH-(S)-仲丁基(23)或NH-正己基(24)或NH-外-降冰片烷(25)或N(Me)異戊基(31))中的溶液在190℃下微波加熱30分鐘或者在40-100℃下加熱16小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-氨基烷基衍生物。
實施例18 化合物33的制備
流程圖5 向2-氯-腺苷(1eq)的DMSO溶液中加入NaSEt(1.3eq)，所得到的溶液在80℃下加熱20小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-乙硫基-腺苷。
向2-乙硫基-腺苷的MeCN/H2O(1∶1)溶液中加入間氯過苯甲酸(mCPBA)(3eq)，繼續(xù)攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到33。
實施例19 化合物37的制備
流程圖6 將2-碘-腺苷(1eq)、ArB(OH)2(Ar＝3，5-二甲基苯基)(1eq)、Pd(PPh3)4(0.1eq)、Cs2CO3(2.2eq)和Et3N(2.2eq)在PhMe/EtOH(2∶1)中的溶液在110℃下加熱16小時?；鞈乙弘S后進行過濾，濾液真空濃縮后，通過反相柱色譜法純化，得到37。
實施例20 化合物40的制備
流程圖7 向3′-脫氧-腺苷(1eq)的吡啶溶液中加入苯甲酰氯(6eq)，所得到的溶液在65℃下回流4小時。真空除去溶劑，殘余物溶解于EtOAc中，用水(x3)和鹽水洗滌，有機相用MgSO4干燥。使用硅膠色譜法純化，得到3′-脫氧-四苯甲?；佘铡?br> 向TMAN(1.5eq)的DCM溶液中加入TFAA(1.5eq)，所得到的溶液在室溫下攪拌1小時。混合物冷卻至0℃，加入3′-脫氧四苯甲?；佘?1eq)的DCM溶液。所得到的溶液在16小時內(nèi)溫熱至室溫。溶液隨后用水(x3)和鹽水洗滌，有機相用MgSO4干燥，得到3′-脫氧-四苯甲?；?2-硝基-腺苷。
向正己醇(2eq)的THF溶液中加入NaH(2.1eq)，所得到的混懸液攪拌30分鐘。所得到的溶液加入至3′-脫氧-四苯甲酰基-2-硝基-腺苷(1eq)的THF溶液中，繼續(xù)攪拌1周。然后真空除去溶劑，殘余物通過硅膠柱色譜法純化。向上述物質(zhì)的THF溶液中加入NH3水溶液，所得到的混懸液攪拌12小時。真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到40。
實施例21 化合物44、45和47的制備

流程圖8 向6-氯腺苷(1eq)的MeOH或DMSO溶液中加入胺RR′NH(RR′N＝N(Me)CH2(3-溴苯基)(44)或N(Me)CH2(3-三氟甲基苯基)(45)或者N(Me)CH2CH2OMe(47))(3-5eq)，所得到的溶液攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到6-二烷氨基衍生物。
實施例22 化合物48的制備
流程圖9 向環(huán)戊基甲基醇(1.5eq)的THF溶液中加入NaH(1.5eq)，所得到的混懸液攪拌1小時。所得到的溶液加入至三乙酰氧基-6-氯-腺苷(參見流程圖2)(1eq)的THF溶液中，繼續(xù)攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于MeOH中。隨后加入NaOMe(4eq)，所得到的混懸液攪拌4小時后，用檸檬酸水溶液猝滅。真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到6-烷氧基衍生物。
實施例23 化合物51和52的制備
流程圖10 在0℃下，向6-氯-腺苷的丙酮混懸液中加入HClO4，繼續(xù)攪拌2小時。然后加入NH3水溶液，溶液真空濃縮。溶液冷卻至-20℃，收集所得到的白色沉淀2’，3’-亞異丙基-6-氯-腺苷，然后用丙酮洗滌。
將KOH(2.5eq)和KMnO4(2.5eq)加入至2’，3’-亞異丙基-6-氯-腺苷(1eq)的水混懸液中，繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)混合物然后用過氧化氫猝滅，濃縮并冷卻至-20℃。所得到的沉淀收集后，用水洗滌得到2’，3’-O-亞異丙基-6-氯-腺苷-5’-羧酸。
向2’，3’-O-亞異丙基-6-氯-腺苷-5’-羧酸(1eq)的DMSO溶液中加入RNH2(R＝Me(51)或異戊基(52))(2eq)，所得到的溶液攪拌16小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到相應(yīng)的2’，3’-O-亞異丙基-6-烷氨基-腺苷-5’-羧酸。
將2’，3’-O-亞異丙基-6-烷氨基-腺苷-5’-羧酸(1eq)、Mukiyama′s試劑(1.2eq)、異丙胺(1.5eq)和Et3N(2.5eq)在DMF中的溶液攪拌6小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化。用三氟乙酸(TFA)/水(2∶1)處理2小時，然后真空除去溶劑，通過反相柱色譜法純化，得到標題產(chǎn)物。
實施例24 化合物53的制備
流程圖11 在0℃下，向2-甲氧基-腺苷的丙酮混懸液中加入HClO4，繼續(xù)攪拌2小時。然后加入NH3水溶液，真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2’，3’-O-亞異丙基-2-甲氧基-腺苷。
將KOH(2.5eq)和KMnO4(2.5eq)加入至2’，3’-O-亞異丙基-2-甲氧基-腺苷(1eq)的水混懸液中，繼續(xù)攪拌2小時。再加入KOH(0.2eq)和KMnO4(0.2eq)，并繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)混合物然后用過氧化氫猝滅，濃縮并冷卻至-20℃。所得到的沉淀收集后用水洗滌，得到2’，3’-O-亞異丙基-2-甲氧基-腺苷-5’-羧酸。
將2’，3’-O-亞異丙基-2-甲氧基-腺苷-5’-羧酸(1eq)、Mukiyama′s試劑(1.2eq)、苯胺(1.5eq)和Et3N(2.5eq)在DMF中的溶液攪拌6小時。然后加入DMSO/水(1∶1)，所得到的白色固體過濾。將該固體溶解于TFA/水(2∶1)中，繼續(xù)攪拌5小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到53。
實施例25 化合物54的制備
流程圖12 在0℃下，向2-氯-腺苷的丙酮溶液中加入HClO4，繼續(xù)攪拌2小時。然后加入NH3水溶液，溶液真空濃縮。溶液冷卻至-20℃，收集所得到的白色沉淀2’，3’-O-亞異丙基-2-氯-腺苷，用丙酮洗滌。
將KOH(2.5eq)和KMnO4(2.5eq)加入至2’，3’-O-亞異丙基-2-氯-腺苷(1eq)的水混懸液中，繼續(xù)攪拌4小時。反應(yīng)混合物然后用過氧化氫猝滅，濃縮并冷卻至-20℃。所得到的沉淀收集后用水洗滌，得到2’，3’-O-亞異丙基-2-氯-腺苷-5’-羧酸。
將2’，3’-O-亞異丙基-2-氯-腺苷-5’-羧酸(1eq)在凈正己胺中的溶液在100℃的密閉試管加熱24小時。真空除去溶劑后，通過反相柱色譜法純化，得到淺棕色固體(1eq)，將其溶解于0℃的DMF中。向該溶液中加入正丁胺(4eq)、DIPEA(2.1eq)和HBTU(1eq)，繼續(xù)在0℃下攪拌4小時。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于EtOAc中，用0.2N HCl、NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，MgSO4干燥，得到黃色油狀物。
將該油狀物溶解于TFA/水(2∶1)中，繼續(xù)攪拌2小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到54。
實施例26 化合物55的制備
流程圖13 在0℃下，向腺苷的丙酮混懸液中加入HClO4，繼續(xù)攪拌2小時。然后加入NH3水溶液，溶液真空濃縮。溶液冷卻至-20℃后，收集所得到的白色沉淀2’，3’-O-亞異丙基-腺苷，用丙酮洗滌。
在氬氣保護下，向2’，3’-O-亞異丙基-腺苷(1eq)和三苯基膦(1eq)和鄰苯二甲酰亞胺(1.03eq)在THF中的溶液中加入偶氮二羧酸二乙基酯(1eq)，混合物攪拌10小時。所得到的沉淀收集后，用二乙醚洗滌。向該固體(1eq)的EtOH溶液中加入肼(15eq)，溶液回流2小時，然后冷卻至室溫。所得到的沉淀過濾后，溶解于水中，調(diào)節(jié)pH至4。沉淀過濾后，濾液調(diào)節(jié)至pH 10，用氯仿萃取，MgSO4干燥，得到2’，3’-O-亞異丙基-5’-氨基腺苷。
在0℃下，向丁酸(1eq)的DMF溶液中加入DIPEA(1.2eq)和TBTU(1eq)，繼續(xù)攪拌5分鐘。然后以DMF的溶液形式加入2’，3’-O-亞異丙基-5’-氨基腺苷(1eq)，所得到溶液攪拌3小時。粗產(chǎn)物隨后用DCM萃取，水(x3)洗滌，MgSO4干燥。
用TFA/水(2∶1)處理2小時后，接著真空除去溶劑，通過反相柱色譜法純化，得到55。
實施例27 化合物56的制備
流程圖14 向2’，3’-O-亞異丙基-5’-氨基-腺苷(參見流程圖13)(1eq)的DCM溶液中加入異氰酸乙酯(1.2eq)，繼續(xù)攪拌16小時。然后加入聚胺樹脂，過濾后濾液真空濃縮。通過反相柱色譜法純化。
將所得到的固體溶解于TFA/水(2∶1)中，繼續(xù)攪拌3小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到56。
實施例28 化合物57的制備
流程圖15 向三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷(參見流程圖2)(1eq)的THF溶液中加入二甲胺(2eq)，繼續(xù)攪拌4小時。然后加入環(huán)己胺(1eq)，所得到的溶液在85℃下加熱2天。然后真空除去溶劑，殘余物溶解于MeOH中。然后加入NaOMe(1eq)，所得到的混懸液攪拌16小時。真空除去溶劑后，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到57。
實施例29 化合物58的制備
流程圖16 向三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷(參見流程圖2)(1eq)的DMF溶液中加入芐胺(1eq)和Et3N(1.5eq)，繼續(xù)攪拌10分鐘。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，然后溶解于MeOH中。隨后加入NaOMe(2eq)，所得到的溶液攪拌4小時。真空除去溶劑后，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到58。
實施例30 化合物59-61的制備
流程圖17 向2-氯腺苷(1eq)在1M NaOAc水溶液(緩沖至pH 4)中的溶液中加入溴(1.2eq)，所得到的溶液在室溫下攪拌16小時。反應(yīng)混合物然后用NaHSO3水溶液猝滅，調(diào)節(jié)至pH 7并冷卻至4℃。所得到的沉淀2-氯-8-溴-腺苷收集后，用水洗滌并干燥。
將2-氯-8-溴-腺苷(1eq)在HMDS和二烷中的溶液在110℃下回流8小時。然后真空除去溶劑，加入甲苯后，再次真空除去溶劑。殘余物溶解于N-甲基吡咯烷酮(NMP)中，加入Pd(PPh 3)4(0.04eq)和SnMe4(2eq)，所得到的混懸液在110℃下加熱16小時。溶液冷卻后，真空除去溶劑。殘余物溶解于EtOAc中，用水洗滌，有機相用MgSO4干燥。向所得到的油狀物的MeOH溶液中加入K2CO3，所得到的混懸液攪拌4小時。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到2-氯-8-甲基腺苷。
將2-氯-8-甲基腺苷的凈胺RNH2(R＝環(huán)己基(59)或環(huán)戊基(60)或者正己基(61))溶液在190℃下微波加熱30分鐘。然后真空除去溶劑，殘余物通過反相柱色譜法純化，得到8-甲基-2-氨基烷基衍生物。
實施例31 在單獨口服給藥后的5或6位人志愿者中測量海綿核苷的血漿濃度。使用12導聯(lián)ECG測量心動過速。大鼠中的最低有效止痛血漿濃度為0.025μM，這提示人中的最低有效劑量應(yīng)該為大約0.8mg，該劑量可以獲得大約持續(xù)1.5小時超過0.025μM的血漿濃度。
實施例32 在不影響血壓的濃度下，海綿核苷(62.4和624μg/kg i.p.)抑制了角叉菜膠(CGN)誘導的炎癥，且具有與吲哚美辛(3mg/kg，po)相當?shù)男Я?。向大鼠的右后爪施用角叉菜膠(2％，10微升)，通過plethysomometry測量爪體積。按照與角叉菜膠相同的時間施用海綿核苷。結(jié)果如圖8所示。海綿核苷與吲哚美辛(Indo，3mg/kg p.o.)一樣有效。
權(quán)利要求
1.用作藥物的下述通式化合物、或其可藥用鹽
其中
(I)當X＝OH，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝H時，R1是C5-C6烷氧基、OCH2環(huán)丙基、OCH2環(huán)戊基、O-(2，2，3，3-四氟-環(huán)丁基)、苯氧基、被取代的苯氧基、OCH2CH2OH、或OCH2CHF2、(5-茚滿基)氧基、C1、C2、C5或C6烷氨基、(R)或(S)-仲丁氨基、C5或C6環(huán)烷氨基、外降冰片烷氨基、(N-甲基、N-異戊氨基)、苯氨基、具有甲氧基或氟取代基的苯氨基、C2砜基、C7烷基、氰基、CONH2基團、或者3，5-二甲基苯基；或
當X＝H，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝H時，R1是正己氧基；或
(II)當X＝OH，R1＝H，R5＝CH2OH，R6＝H時，R2是NMe2、N-(2-異戊烯基)、哌嗪基、(N-Me、N-芐基)、(N-Me、N-CH2Ph(3-Br))、(N-Me、N-CH2Ph(3-CF3))或(N-Me、N-(2-甲氧基乙基))、或者OCH2環(huán)戊基；或
(III)當X＝OH，R5＝CONHR3，R6＝H時
R1是H，R3是異丙基，且R2是NH2或甲基氨基(NHMe)或異戊基(CH2CH2CHMe2)；或
R1是H，R3是H，且R2是NH2；或
R1是OMe，R3是Ph，且R2是NH2；或者
R1是NHCH2CH2CH2CH2CH2Me，R3是CH2CH2CH2Me，且R2是NH2；或
(IV)當X＝OH，R1＝H，R2＝NH2，R5＝CH2NHCOR4，R6＝H時，R4是正丙基或NHCH2CH3；或
(V)當X＝OH，R5＝CH2OH，R6＝H
R2是NMe2時，R1是NH環(huán)己基；或
R2是NH芐基時，R1是OMe；或者
(VI)當X＝OH，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝Me時，R1是NH環(huán)己基、NH環(huán)戊基或NH正己基。
2.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物、或其可藥用鹽，其中當X是OH，R2是NH2，R5是CH2OH，且R6是H時，R1是被4-腈、4-甲基、3-苯基、3-溴、3-異丙基、2-甲基、2，4-二氟、2，5-二氟、3，4-二氟、2，3，5-三氟、或者(3-甲基、4-氟)取代的苯氧基。
3.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物或其可藥用鹽，所述化合物具有如實施例1-6中任意一個所述的結(jié)構(gòu)。
4.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求3的化合物或其可藥用鹽，所述化合物具有相應(yīng)于如實施例1-6中所述的編號2、3、7-19、22-25、28、31-33或者35-60化合物中任意一個的結(jié)構(gòu)。
5.用作藥物的根據(jù)權(quán)利要求3的化合物或其可藥用鹽，所述化合物具有相應(yīng)于如實施例1-6中所述的編號2、3、7-18、22-25、31-33、35、37、40、44、45、47、48或者51-60化合物中任意一個的結(jié)構(gòu)。
6.如前述權(quán)利要求中任意一項所述的化合物、或者式(VII)化合物的可藥用鹽用于制備預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A受體而得到改善或預(yù)防的病理病癥的藥物的用途
其中R是C1-4烷氧基，且X是H或OH。
7.如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物用于制備預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A受體而得到改善或預(yù)防的病理病癥的藥物的用途，所述病癥排除疼痛、癌癥、炎癥、自身免疫疾病、缺血-再灌注損傷、癲癇、敗血癥、膿毒性休克、神經(jīng)變性(包括阿爾茨海默氏病)、肌肉疲勞以及肌肉痛性痙攣。
8.如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物的可藥用鹽用于制備預(yù)防、治療或緩解疼痛的藥物的用途。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中所述疼痛是痛覺過敏。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的用途，其中所述痛覺過敏是神經(jīng)性疼痛。
11.根據(jù)權(quán)利要求8-10中任意一項的用途，用于預(yù)防、治療或緩解與癌癥相關(guān)的疼痛、胰痛、骨盆/會陰疼痛、與HIV感染相關(guān)的疼痛、慢性神經(jīng)性疼痛、下腰痛、背部手術(shù)失敗疼痛、背痛、術(shù)后痛、物理創(chuàng)傷后疼痛、心痛、胸痛、骨盆疼痛/PID、關(guān)節(jié)痛、頸痛、腸痛、幻肢痛、產(chǎn)科疼痛、急性帶狀皰疹疼痛、急性胰腺炎破裂疼痛，或者用于預(yù)防、治療或緩解由糖尿病性神經(jīng)病、多發(fā)性神經(jīng)病、纖維肌痛、肌筋膜痛綜合征、骨關(guān)節(jié)炎、皰疹后神經(jīng)痛、類風濕性關(guān)節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛/腰神經(jīng)根病、脊柱狹窄、顳頜關(guān)節(jié)病癥、三叉神經(jīng)痛、腎絞痛、痛經(jīng)/子宮內(nèi)膜異位引起或者與其相關(guān)的神經(jīng)性或其它疼痛。
12.根據(jù)權(quán)利要求9的用途，其中所述痛覺過敏是炎性疼痛。
13.根據(jù)權(quán)利要求8、9或12中任意一項的用途，其中所述疼痛由炎癥或免疫疾病引起或與其相關(guān)，或者為合并的炎性、自身免疫性和神經(jīng)病性組織損傷的結(jié)果。
14.根據(jù)權(quán)利要求8、9、12或13中任意一項的用途，用于預(yù)防、治療或緩解腸痛、與癌癥相關(guān)的疼痛、背痛、術(shù)后痛，或者用于預(yù)防、治療或緩解由類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、痛風性關(guān)節(jié)炎、癌癥、HIV、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺肉瘤病、骨吸收疾病、再灌注損傷、自身免疫損傷、移植物對宿主的排斥、同種異體移植物排斥、感染引起的發(fā)熱和肌痛、纖維肌痛、與AIDS相關(guān)的并發(fā)癥(ARC)、瘢痕瘤形成、瘢痕組織形成、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱、過敏性腸綜合征、骨質(zhì)疏松、腦型瘧和細菌性腦膜炎引起或者與其相關(guān)的炎性或其它疼痛。
15.根據(jù)權(quán)利要求8的用途、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物的用途，用于制備預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛的藥物。
16.根據(jù)權(quán)利要求8或15的用途，用于制備預(yù)防、治療或緩解與冠狀動脈疾病、外周動脈疾病、左心室肥大、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心臟機能不足、運動耐量、慢性心力衰竭、心律失常、心律紊亂、syncopy、動脈硬化、輕度慢性心力衰竭、心絞痛、Prinzmetal′s(變種)絞痛、穩(wěn)定型心絞痛、運動誘導的心絞痛、心臟旁路再閉合、間歇性跛行(動脈硬化oblitterens)、動脈炎、舒張期功能障礙、收縮期功能障礙、動脈粥樣硬化、缺血后/再灌注損傷、糖尿病(I型或II型)、血栓栓塞、出血事件、或者由缺氧誘導的神經(jīng)細胞損傷引起的神經(jīng)性或炎性疼痛相關(guān)的疼痛的藥物。
17.如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽用于制備預(yù)防、治療或緩解1型和2型糖尿病的大血管或微血管并發(fā)癥、視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病、或者由缺血或動脈粥樣硬化引起的血管損傷的藥物的用途。
18.如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述式(VII)化合物的可藥用鹽用于制備預(yù)防、治療或緩解炎癥的藥物的用途。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的用途，用于預(yù)防、治療或緩解由下述疾病引起或者與其相關(guān)的炎癥癌癥(例如白血球過多癥、淋巴瘤、癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、肝細胞癌、腎癌、黑素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌以及前列腺轉(zhuǎn)移癌等)；自身免疫疾病(例如器官移植排斥、紅斑狼瘡、移植物對宿主的排斥、同種異體移植物排斥、多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病包括胰島破壞導致的糖尿病和糖尿病的炎癥結(jié)果)；自身免疫損傷(包括多發(fā)性硬化、Guillam Barre綜合征、重癥肌無力)；肥胖；與組織灌注不足和炎癥相關(guān)的心血管病癥(例如粥樣斑、動脈粥樣硬化、中風、缺血-再灌注損傷、跛行、充血性心力衰竭、血管炎、出血性休克、蛛網(wǎng)膜下出血引起的血管痙攣、腦血管意外引起的血管痙攣、胸膜炎、心包炎、糖尿病的心血管并發(fā)癥)；缺血-再灌注損傷、缺血和伴發(fā)性炎癥、血管成形術(shù)和炎性動脈瘤引起的再狹窄；癲癇、神經(jīng)變性(包括阿爾茨海默氏病)、肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(特別是運動員痛性痙攣)、關(guān)節(jié)炎(例如類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、痛風性關(guān)節(jié)炎)、纖維化(例如肺部、皮膚和肝臟纖維化)、敗血癥、膿毒性休克、腦炎、感染性關(guān)節(jié)炎、雅里施-赫克斯海默反應(yīng)、帶狀皰疹、中毒性休克、腦型瘧、Lyme′s病、內(nèi)毒性休克、革蘭氏陰性休克、出血性休克、肝炎(由組織損傷或病毒感染引起)、深部靜脈血栓形成、痛風；與呼吸困難相關(guān)的疾病(例如慢性阻滯性肺病、氣道阻滯和阻塞、支氣管收縮、肺血管收縮、呼吸障礙、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺肉瘤病、囊性纖維化、肺動脈高壓、肺血管收縮、肺氣腫、支氣管變態(tài)反應(yīng)和/或炎癥、哮喘、花粉熱、鼻炎、春季結(jié)膜炎以及成人呼吸窘迫綜合征)；與皮膚發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括銀屑病、濕疹、潰瘍、接觸性皮炎)；與腸發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱、過敏性腸綜合征、炎性腸病)；HIV(特別是HIV感染)、細菌性腦膜炎、TNF-增強的HIV復制、AZT和DDI活性的TNF抑制、骨質(zhì)疏松以及其它骨吸收疾病、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、子宮內(nèi)膜異位引起的不育、感染引起的發(fā)熱和肌痛、繼發(fā)于癌的惡病質(zhì)、繼發(fā)于感染或惡性腫瘤的惡病質(zhì)、繼發(fā)于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質(zhì)、與AIDS相關(guān)的并發(fā)征(ARC)、瘢痕瘤形成、瘢痕組織形成、兩性霉素B治療引起的不良作用、白介素-2治療引起的不良作用、OKT3治療引起的不良作用、或者GM-CSF治療引起的不良作用、以及其它通過過度抗炎細胞(包括嗜中性粒細胞、嗜曙紅細胞、巨嗜細胞和T-細胞)活性介導的病癥。
20.如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽用于制備延緩關(guān)節(jié)病進展的調(diào)節(jié)疾病的抗風濕性藥物(DMARD)的用途。
21.根據(jù)權(quán)利要求的20的用途，用于制備延緩類風濕性關(guān)節(jié)炎的DMARD。
22.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中在向?qū)ο蠼o藥后，所用劑量得到的化合物血漿濃度峰值低于該化合物在pH 7.4下對腺苷受體的EC50值。
23.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中所用劑量為在與作為所述化合物給藥對象的同物種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低劑量的千分之一至五分之一。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的用途，其中所述劑量為引起所述副作用的最低劑量的百分之一至五分之一。
25.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中在向?qū)ο蠼o藥后，所用劑量得到的化合物血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)，在作為與所述化合物給藥對象的同物種的動物中，保持在引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低劑量的千分之一至二分之一之間。
26.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中所用劑量小于0.4mg/kg。
27.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中所用劑量為至少0.003mg/kg。
28.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的用途，其中所用劑量為0.01-0.1mg/kg。
29.具有相應(yīng)于如實施例1-6中所述的化合物編號2、3、7-18、22-25、31-33、35、37、40、44、45、47、48或者51-60中任意一個結(jié)構(gòu)的化合物，或其藥學上可接受的鹽。
30.預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A受體而得到預(yù)防或改善的病理病癥的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述式(VII)化合物的可藥用鹽。
31.預(yù)防、治療或緩解可通過激動腺苷A2A受體而得到預(yù)防或改善的病理病癥的方法，所述病癥排除疼痛、癌癥、炎癥、自身免疫疾病、缺血-再灌注損傷、癲癇、敗血癥、膿毒性休克、神經(jīng)變性(包括阿爾茨海默氏病)、肌肉疲勞以及肌肉痛性痙攣，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物。
32.預(yù)防、治療或緩解疼痛的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述式(VII)化合物的可藥用鹽。
33.預(yù)防、治療或緩解缺血性疼痛的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的方法，其用于預(yù)防、治療或緩解與冠狀動脈疾病、外周動脈疾病、左心室肥大、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心臟機能不足、運動耐量、慢性心力衰竭、心律失常、心律紊亂、syncopy、動脈硬化、輕度慢性心力衰竭、心絞痛、Prinzmetal′s(變種)絞痛、穩(wěn)定型心絞痛、運動誘導的心絞痛、心臟旁路再閉合、間歇性跛行(動脈硬化oblitterens)、動脈炎、舒張期功能障礙、收縮期功能障礙、動脈粥樣硬化、缺血后/再灌注損傷、糖尿病(I型或II型)、血栓栓塞、出血事件或者由缺氧誘導的神經(jīng)細胞損傷引起的神經(jīng)性或炎性疼痛相關(guān)的缺血性疼痛。
35.預(yù)防、治療或緩解炎癥的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述式(VII)化合物的可藥用鹽。
36.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其用于預(yù)防、治療或緩解由下述疾病引起或者與其相關(guān)的炎癥癌癥(例如白血球過多癥、淋巴瘤、癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、肝細胞癌、腎癌、黑素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌以及前列腺轉(zhuǎn)移癌等)；自身免疫疾病(例如器官移植排斥、紅斑狼瘡、移植物對宿主的排斥、同種異體移植物排斥、多發(fā)性硬化、類風濕性關(guān)節(jié)炎、I型糖尿病包括胰島破壞導致的糖尿病和糖尿病的炎癥結(jié)果)；自身免疫損傷(包括多發(fā)性硬化、Guillam Barre綜合征、重癥肌無力)；肥胖；與組織灌注不足和炎癥相關(guān)的心血管病癥(例如粥樣斑、動脈粥樣硬化、中風、缺血-再灌注損傷、跛行、充血性心力衰竭、血管炎、出血性休克、蛛網(wǎng)膜下出血引起的血管痙攣、腦血管意外引起的血管痙攣、胸膜炎、心包炎、糖尿病的心血管并發(fā)癥)；缺血-再灌注損傷、缺血和伴發(fā)性炎癥、血管成形術(shù)和炎性動脈瘤引起的再狹窄；癲癇、神經(jīng)變性(包括阿爾茨海默氏病)、肌肉疲勞或肌肉痛性痙攣(特別是運動員痛性痙攣)、關(guān)節(jié)炎(例如類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性脊椎炎、痛風性關(guān)節(jié)炎)、纖維化(例如肺部、皮膚和肝臟纖維化)、敗血癥、膿毒性休克、腦炎、感染性關(guān)節(jié)炎、雅里施-赫克斯海默反應(yīng)、帶狀皰疹、中毒性休克、腦型瘧、Lyme′s病、內(nèi)毒性休克、革蘭氏陰性休克、出血性休克、肝炎(由組織損傷或病毒感染引起)、深部靜脈血栓形成、痛風；與呼吸困難相關(guān)的疾病(例如慢性阻滯性肺病、氣道阻滯和阻塞、支氣管收縮、肺血管收縮、呼吸障礙、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺肉瘤病、囊性纖維化、肺動脈高壓、肺血管收縮、肺氣腫、支氣管變態(tài)反應(yīng)和/或炎癥、哮喘、花粉熱、鼻炎、春季結(jié)膜炎以及成人呼吸窘迫綜合征)；與皮膚發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括銀屑病、濕疹、潰瘍、接觸性皮炎)；與腸發(fā)炎相關(guān)的病癥(包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和發(fā)熱、過敏性腸綜合征、炎性腸病)；HIV(特別是HIV感染)、細菌性腦膜炎、TNF-增強的HIV復制、AZT和DDI活性的TNF抑制、骨質(zhì)疏松以及其它骨吸收疾病、骨關(guān)節(jié)炎、類風濕性關(guān)節(jié)炎、子宮內(nèi)膜異位引起的不育、感染引起的發(fā)熱和肌痛、繼發(fā)于癌的惡病質(zhì)、繼發(fā)于感染或惡性腫瘤的惡病質(zhì)、繼發(fā)于獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的惡病質(zhì)、與AIDS相關(guān)的并發(fā)癥(ARC)、瘢痕瘤形成、瘢痕組織形成、兩性霉素B治療引起的不良作用、白介素-2治療引起的不良作用、OKT3治療引起的不良作用、或者GM-CSF治療引起的不良作用、以及其它通過過度抗炎細胞(包括嗜中性粒細胞、嗜曙紅細胞、巨嗜細胞和T-細胞)活性介導的病癥。
37.預(yù)防、治療或緩解1型和2型糖尿病的大血管或微血管并發(fā)癥、視網(wǎng)膜病變、腎病、自主神經(jīng)病、或者由缺血或動脈粥樣硬化引起的血管損傷的方法，所述方法包括向需要該預(yù)防、治療或緩解的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽。
38.延緩關(guān)節(jié)病進展的方法，所述方法包括向有該需要的對象施用如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽作為調(diào)節(jié)疾病的抗風濕性藥物(DMARD)。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，所述方法用于延緩類風濕性關(guān)節(jié)炎的進展。
40.根據(jù)權(quán)利要求30-39中任意一項的方法，其中所施用化合物的劑量得到的化合物血漿濃度峰值低于該化合物在pH 7.4下對腺苷受體的EC50值。
41.根據(jù)權(quán)利要求30-40中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物量使得該化合物在所述對象中的血漿濃度峰值為該化合物對腺苷受體的最低EC50值的萬分之一至二分之一。
42.根據(jù)權(quán)利要求30-41中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物量使得該化合物在超過1小時的時間段內(nèi)，在所述對象中的血漿濃度保持在該化合物對腺苷受體的最低EC50值的萬分之一至二分之一之間。
43.根據(jù)權(quán)利要求30-42中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物用量使得該化合物在所述對象中的血漿濃度峰值為該化合物對腺苷受體的最低Kd值的萬分之一至二分之一。
44.根據(jù)權(quán)利要求30-43中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物量使得該化合物在超過1小時的時間段內(nèi)，在所述對象中的血漿濃度保持在該化合物對腺苷受體的最低Kd值的萬分之一至二分之一之間。
45.根據(jù)權(quán)利要求30-44中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物量為在與作為所述化合物給藥對象的同物種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低用量的萬分之一至二分之一。
46.根據(jù)權(quán)利要求30-45中任意一項的方法，其中施用該化合物的劑量為在與作為所述化合物給藥對象的同物種的動物中引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低劑量的千分之一至二分之一。
47.根據(jù)權(quán)利要求46的方法，其中所述劑量為引起所述副作用的最低劑量的百分之一至二分之一。
48.根據(jù)權(quán)利要求30-47中任意一項的方法，其中向該對象施用的化合物量得到的化合物血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)，在與作為所述化合物給藥對象的同物種的動物中，保持在引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低血漿濃度的萬分之一至二分之一之間。
49.根據(jù)權(quán)利要求30-48中任意一項的方法，其中施用的化合物劑量得到的化合物血漿濃度在超過1小時的時間段內(nèi)，在作為所述化合物給藥對象的同物種的動物中，保持在引起心動過緩、低血壓或心動過速副作用的所述化合物最低劑量的百分之一至二分之一之間。
50.根據(jù)權(quán)利要求30-49中任意一項的方法，其中施用的化合物劑量小于0.4mg/kg。
51.根據(jù)權(quán)利要求30-50中任意一項的方法，其中施用的化合物劑量為0.001-0.4mg/kg。
52.根據(jù)權(quán)利要求30-51中任意一項的方法，其中施用的化合物劑量為至少0.003mg/kg。
53.根據(jù)權(quán)利要求30-52中任意一項的方法，其中施用的化合物劑量為0.01-0.1mg/kg。
54.根據(jù)權(quán)利要求30-53中任意一項的方法，其中所述化合物通過口服、非腸道、舌下、經(jīng)皮、鞘內(nèi)、經(jīng)粘膜、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、局部或者吸入給藥。
55.根據(jù)權(quán)利要求30-54中任意一項的方法，其中所述化合物按照每天2或3次的頻率給藥。
56.根據(jù)權(quán)利要求30-55中任意一項的方法，其中所述對象是人。
57.根據(jù)權(quán)利要求20或21的用途、或者根據(jù)權(quán)利要求38或39的方法，其中所述化合物是海綿核苷或其可藥用鹽。
58.單位劑量形式的藥物組合物，其中含有至多500mg如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物以及生理學上可接受的載體、賦型劑或稀釋劑。
59.單位劑量形式的藥物組合物，其中含有至多500mg如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物、或者如權(quán)利要求6所述的式(VII)化合物或其可藥用鹽、NSAID或DMARD、以及生理學上可接受的載體、賦型劑或稀釋劑。
60.制備如實施例1所述編號2或32化合物的方法，所述方法包括將五苯甲酰基-2-硝基-腺苷與ROH反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到編號2或32化合物，其中R＝CH2CHF2或CH2環(huán)戊基。
61.制備如實施例1所述編號3或35化合物的方法，所述方法包括將三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷與ROH反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到編號3或35化合物，其中R＝CH2環(huán)丙基或2，2，3，3-四氟環(huán)丁烷。
62.制備如實施例1所述編號7-18化合物中任意一個的方法，所述方法包括將五苯甲?；?2-硝基-腺苷與ArOH反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到編號7-18化合物中的任意一個，其中Ar＝4-氰基苯基、3-苯基-苯基、2，5-二氟苯基、2，4-二氟苯基、3，4-二氟苯基、2，3，5-三氟苯基、3-甲基，4-氟苯基、2-甲基苯基、3-溴苯基、4-甲基苯基、5-茚滿基或者3-異丙基苯基。
63.制備如實施例1所述編號22-25或31化合物中任意一個的方法，所述方法包括將2-氯腺苷與RR′NH反應(yīng)，得到編號22-25或31化合物中的任意一個，其中RR′N＝NH-(R)-仲丁基、NH-(S)-仲丁基、NH-正己基、NH-外-降冰片烷基或者N(Me)異戊基。
64.制備如實施例1所述化合物編號33的方法，所述方法包括將2-氯-腺苷與NaSEt反應(yīng)，得到2-乙硫基-腺苷，然后由2-乙硫基-腺苷得到編號33化合物。
65.制備如實施例1所述編號37化合物的方法，所述方法包括將2-碘-腺苷與ArB(OH)2反應(yīng)，其中Ar＝3，5-二甲基苯基。
66.制備如實施例1所述編號40化合物的方法，所述方法包括將3′-脫氧-四苯甲酰基-2-硝基-腺苷與正己醇反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到編號40化合物。
67.制備如實施例2所述編號44、45、或47化合物的方法，所述方法包括將6-氯-腺苷與RR′NH反應(yīng)，其中RR′N＝N(Me)CH2(3-溴苯基)、N(Me)CH2(3-三氟甲基苯基)或N(Me)CH2CH2OMe。
68.制備如實施例2所述編號48化合物的方法，所述方法包括將三乙酰氧基-6-氯-腺苷與環(huán)戊基甲基醇反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到編號48化合物。
69.制備如實施例3所述編號51或52化合物的方法，所述方法包括將下式的2′，3′-O-亞異丙基-6-烷氨基-腺苷-5’-羧酸
其中R＝Me或異戊基；
與異丙胺反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物的縮酮基團脫保護得到編號51或52化合物。
70.制備如實施例3所述編號53化合物的方法，所述方法包括將2′，3′-O-亞異丙基-2-甲氧基-腺苷-5’-羧酸與苯胺反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物的縮酮基脫保護得到編號53化合物。
71.制備如實施例3所述編號54化合物的方法，所述方法包括將2′，3′-O-亞異丙基-2-氯-腺苷-5’-羧酸與正己胺反應(yīng)，所得反應(yīng)產(chǎn)物與正丁胺反應(yīng)，然后用正丁胺使該反應(yīng)產(chǎn)物的縮酮基脫保護得到編號54化合物。
72.制備如實施例4所述編號55化合物的方法，所述方法包括將2′，3′-O-亞異丙基-5’-氨基-腺苷與丁酸反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物的縮酮基脫保護得到編號55化合物。
73.制備如實施例4所述編號56化合物的方法，所述方法包括將2′，3′-O-亞異丙基-5’-氨基-腺苷與異氰酸乙酯反應(yīng)，然后使該反應(yīng)產(chǎn)物的縮酮基脫保護得到編號56化合物。
74.制備如實施例5所述編號57化合物的方法，所述方法包括將三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷與二甲胺反應(yīng)，所得反應(yīng)產(chǎn)物與環(huán)己胺反應(yīng)，然后用環(huán)己胺使該反應(yīng)產(chǎn)物脫保護得到化合物57。
75.制備如實施例5所述編號58化合物的方法，所述方法包括將三乙酰氧基-6-氯-2-硝基-腺苷與芐胺反應(yīng)，所得反應(yīng)產(chǎn)物與甲醇鹽陰離子反應(yīng)，然后使保護基團脫保護得到化合物58。
76.制備如實施例6所述編號59-61化合物中任意一個的方法，所述方法包括將2-氯-8-甲基-腺苷與RNH2反應(yīng)，其中R是環(huán)己基、環(huán)戊基或正己基，得到編號59、60或61化合物。
全文摘要
本發(fā)明描述了通式(A)化合物作為藥物、特別是作為用于治療疼痛或炎癥的藥物的用途，其中(I)當X＝OH，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝H時，R1是C5－C6烷氧基、OCH2環(huán)丙基、O－(2，2，3，3－四氟－環(huán)丁基)、苯氧基、被取代的苯氧基、OCH2CH2OH、或OCH2CHF2、(5－茚滿基)氧基、C1、C2、C5或C6烷氨基、(R)或(S)－仲丁氨基、C5或C6環(huán)烷氨基、外降冰片烷氨基、(N－甲基、N－異戊氨基)、苯氨基、具有甲氧基或氟取代基的苯氨基、C2磺基、C2烷基、氰基、CONH2基團、或者3，5－二甲基苯基；或當X＝H，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝H時，R1是正己氧基；或(II)當X＝OH，R1＝H，R5＝CH2OH，R6＝H時，R2是NMe2、N－(2－異戊烯基)、哌嗪基、(N－Me、N－芐基)、(N－Me、N－CH2Ph(3－Br))、(N－Me、N－CH2Ph(3－CF3))、或(N－Me、N－(2－甲氧基乙基))、或者OCH2環(huán)戊基；或(III)當X＝OH，R5＝CONHR3，R6＝H時R1是H，R3是異丙基，且R2是NH2或甲基氨基(NHMe)或異戊基(CH2CH2CHMe2)；或R1是H，R3是H，且R2是NH2；或R1是OMe，R3是Ph，且R2是NH2；或者R1是NHCH2CH2CH2CH2CH2Me，R3是CH2CH2CH2Me，且R2是NH2；或(IV)當X＝OH，R1＝H，R2＝NH2，R5＝CH2NHCOR4，R6＝H時，R4是正丙基或NHCH2CH3；或(V)當X＝OH，R5＝CH2OH，R6＝HR2是NMe2時，R1是NH環(huán)己基；或R2是NH芐基時，R1是OMe；或者(VI)當X＝OH，R2＝NH2，R5＝CH2OH，R6＝Me時，R1是NH環(huán)己基或NH環(huán)戊基。
文檔編號A61P29/00GK1946732SQ200580007119
公開日2007年4月11日 申請日期2005年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月5日
發(fā)明者M·普里查德, J·奧茨曼, E·薩沃里, G·布朗 申請人:劍橋生物工藝有限公司