專利名稱：清瘟噴霧劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及防治流感等上呼吸道感染的中藥制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
每年冬春季都是上呼吸道感染性疾病的多發(fā)期，其中包括病毒細(xì)菌引起的普通感冒、咽喉炎、流行性感冒等，尤其流感對社會影響較大，能引起疾病的流行，使人們的身心健康受到極大的威脅?，F(xiàn)在除用流感疫苗預(yù)防外，別無其他防治手段，特別是能直接消殺上呼吸道流感病毒的中草藥純化的噴霧制劑更為少見。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種有效防治流感等上呼吸道感染的中藥組合物，并提供了該組合物的制備和質(zhì)檢方法。根據(jù)中藥藥理學(xué)和中藥免疫學(xué)的理論，藥物組分的用量進(jìn)行了大量的實驗總結(jié)得出各組分在下述范圍有較好的療效甘草0.5-2.5份、黃芪0.5-3.0份、細(xì)辛0.25-1.0份、乳香0.5-1.75份、丹參0.5-2.5份、當(dāng)歸0.5-2.0份、赤芍0.2-0.5份、紅花0.2-1.0份、蒼術(shù)0.25-1.75份。
優(yōu)選為甘草1.5份、黃芪0.5份、細(xì)辛0.5份、乳香1.0份、丹參0.5份、當(dāng)歸0.5份、赤芍0.2份、紅花0.5份、蒼術(shù)0.5份噴霧劑制備方法由下列組成1.各味中藥材飲片需達(dá)中國藥典2000版一部標(biāo)準(zhǔn)。
2.按配方稱取中藥飲片加10倍水煮沸3-4小時，去沉渣收上清液。
3.按量加乙醇，乙醇最終濃度為70％，然后去雜質(zhì)。
4.收上清，減壓蒸發(fā)去乙醇。
5.用不同孔徑纖維膜澄清除菌，加無菌蒸餾水配成要求的藥液濃度，裝瓶分裝成噴霧劑或口服液抗流感病毒效力及無菌檢查1.用雞胚EID50法檢測該批制品殺流感病毒(甲1型，乙型)的效力，滅病毒指數(shù)達(dá)106EID50以上為合格，達(dá)不到要求廢棄。
2.按生物制品常規(guī)抽檢樣品進(jìn)行無菌試驗，無菌試驗應(yīng)合格。以上二項檢查合格后，制品可進(jìn)行分包裝。
本發(fā)明的中藥制劑對流感病毒(甲1型，乙型)均有極強(qiáng)的殺滅作用，40％草藥濃度能抑制病毒指數(shù)高達(dá)106EID50以上，同時對上呼吸道細(xì)菌也有抑制作用。在感冒初期如鼻塞、流鼻涕及咽喉腫痛時，是上呼吸道病毒和致病細(xì)菌在上呼吸道局部感染增殖期。用本品噴灑在局部，能很快殺滅局部的病毒及細(xì)菌，使其不能繼續(xù)增殖蔓延，也控制了病毒向其他健康人傳播，病人癥狀也同時消失，很快達(dá)到痊愈，起到治病和防病的雙重作用。目前國內(nèi)外尚無對流感病毒有如此強(qiáng)殺滅作用的中藥制劑。本發(fā)明為控制流感等上呼吸道感染提供一種新型中藥制劑，使用方便，效果可靠，無任何毒副作用。
具體實施方案下面結(jié)合實施例對本發(fā)明通過以下試驗進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗包括本發(fā)明藥物(以下簡稱清瘟靈)的藥效、藥理、毒理檢查和臨床療效觀察。
清瘟靈噴霧劑的制備1.稱取甘草15克、黃芪5克、細(xì)辛5克、乳香10克、丹參5克、當(dāng)歸5克、赤芍2克、蒼術(shù)5克等飲片備用。
2.置于提取罐中加10倍量水，煎煮三小時時間，去渣取上清，加入乙醇到70％，去雜質(zhì)進(jìn)行純化，再去沉淀收上清，減壓蒸發(fā)去乙醇，得藥液經(jīng)0.45u孔徑纖維素膜澄清后，加熱滅菌，即得澄清透明藥液。加無菌蒸餾水配成40％的藥液，藥液呈棕黃色透明液體，無菌分裝噴霧瓶中，每瓶10-20ml.
3.分裝前做抗病毒試驗測定生物活性，抗流感病毒指數(shù)達(dá)不到要求，藥液廢棄。
清瘟靈噴霧劑抗流感病毒試驗1.試驗材料1)本發(fā)明藥物“清瘟靈噴霧劑”三批(04-1、04-2、04-3)，藥液濃度為40％(生藥W/V)2)甲1型流感病毒株A1/NEW CALEDONIA-中國藥品生物制品檢定所提供3)乙型流感病毒株B/SHANG DONG-中國藥品生物制品檢定所提供4)11日齡雞胚-長春生物制品研究所提供5)1％雞血球混懸液2.試驗方法1)以藥液為稀釋液，按10倍連續(xù)稀釋法分別稀釋甲1型和乙型流感病毒，即為藥液與病毒混合液，放室溫40分鐘，然后按常規(guī)將混合液接種在雞胚尿囊腔中，37℃孵育三日，再放4℃冷胚，次日取每胚尿液與1％雞血球混懸液做血凝集試驗，血凝陽性者證明有病毒增殖，陰性即證明病毒被藥液殺死，無病毒繁殖。同時做單純病毒對照，計算滅活病毒量(滅活病毒量EID50＝單純病毒對照EID50-藥液加病毒混合液EID50，即為0.2ml藥液可滅活病毒的EID50數(shù))2)按2倍連續(xù)稀釋法將清瘟靈噴霧劑稀釋成不同濃度的藥液，與200個EID50甲1型病毒混合，室溫作用40分鐘，按上述方法進(jìn)行血凝試驗測其對病毒的滅活作用，然后計算清瘟靈噴霧劑藥液的EC50(半數(shù)有效濃度)和EC90(90％有效濃度)。
3.試驗結(jié)果1)清瘟靈噴霧劑對雞胚無任何毒性作用。結(jié)果見表1。
表1 清瘟靈噴霧劑對雞胚的毒性作用

2)清瘟靈噴霧劑藥液對甲1型流感病毒的滅活作用，毒株為A1/NEWCALEDONIA，對甲1型流感病毒的滅活作用均在106EID50以上。滅活結(jié)果見表2。
表2 清瘟靈噴霧劑藥液對甲1型流感病毒的滅活作用

※分母為每次接種胚數(shù)，分子為尿液血凝陽性數(shù)，“-”代表未做。
3)清瘟靈噴霧劑藥液對乙型流感病毒的滅活作用，毒株為B/SHANG DONG，對乙型流感病毒的滅活作用均在105.5EID50以上。滅活結(jié)果見表3。
表3 清瘟靈噴霧劑藥液對乙型流感病毒的滅活作用

※分母為每次接種胚數(shù)，分子為尿液血凝陽性數(shù)，“-”代表未做。
4)不同濃度的清瘟靈噴霧劑藥液對200個甲1型流感病毒測滅活作用，計算EC50(半數(shù)有效濃度)為37.1mg/ml。EC90(90％有效濃度)為77.7mg/ml。結(jié)果見表4。
表4 清瘟靈噴霧劑藥液測定EC50和EC90劑量(抗甲1型流感病毒)
清瘟靈噴霧劑抗細(xì)菌試驗1.試驗材料1)清瘟靈噴霧劑三批(04-1，04-2，04-3)藥液濃度為40％(生藥W/V)。
2)嗜血性流感桿菌、金黃色葡萄球菌、A型溶血鏈球菌等，菌種均由中國藥品生物制品檢定所提供。
3)適于不同菌種的培養(yǎng)基，自備。
4)平皿。
5)不銹鋼管，內(nèi)徑為6.0mm，高10mm。
6)氨芐青霉素，華北制藥廠產(chǎn)品。
2.試驗方法1)菌懸液的制備取嗜血性流感桿菌、金黃色葡萄球菌、A型溶血鏈球菌等24小時培養(yǎng)物，混懸于生理鹽水中備用。
2)雙碟的制備取直徑為90mm的平皿，加20ml適宜培養(yǎng)基，均勻鋪于碟底，另取適量培養(yǎng)基加熱融化，冷卻到50℃后加適量菌液，搖勻，每碟加入5ml，均勻攤布做為菌層，待冷卻后，每碟中等距安放不銹鋼管(內(nèi)徑6.0mm，高10mm)蓋上平皿蓋備用。
3)每個不銹鋼管中加入待檢藥液150ul，只加入150ul生理鹽水的鋼管充陰性對照，加入不同濃度的氨芐青霉素150ul充陽性對照，將試驗平皿放37℃培養(yǎng)24小時后，判定結(jié)果，出現(xiàn)抑菌環(huán)即視為有抑菌作用。
3.試驗結(jié)果清瘟靈噴霧劑藥液對嗜血性流感桿菌、金黃色葡萄球菌、A型溶血鏈球菌均表現(xiàn)有抑菌作用。上述三種細(xì)菌均為上呼吸道常見的致病菌，尤其嗜血性流感桿菌是流腦的主要病原體，抑菌環(huán)可達(dá)到10mm以上，結(jié)果見表。
表

※“-”代表無抑菌環(huán)出現(xiàn)。
清瘟靈噴霧劑在小鼠體內(nèi)抗流感病毒試驗以嗜鼠肺流感病毒FM1株(中國疾病控制中心病毒所提供)感染小白鼠，用清瘟靈噴霧劑口服4天，然后觀察14天，計算死亡率。用注射干擾素做陽性對照，其結(jié)果顯示本品的死亡率低于干擾素(干擾素是公認(rèn)的抗病毒藥物之一)，也就是說本品抗流感病毒的效果優(yōu)于干擾素。
清瘟靈噴霧劑的毒理作用本品對雞胚無毒性(結(jié)果見試驗例1)，對小鼠也無毒性，用小鼠做急性毒性試驗，靜脈給藥相當(dāng)于0.5g生藥/kg，沒有毒性?？诜o藥相當(dāng)于200g生藥/kg的最大劑量仍未見毒性。對大白鼠每日給藥4次連續(xù)給藥一周以上，口腔、鼻黏膜等上呼吸道黏膜未見紅腫，經(jīng)病理學(xué)檢測與空白對照一致，無任何病理組織學(xué)改變。
清瘟靈噴霧劑對上呼吸道感染患者的治療效果觀察。
20名男女感冒患者，年齡6-71歲，用本品向咽喉部、鼻腔噴藥，每天3-4次，每次3-5噴以上，一般2天后，患者的鼻塞、流鼻涕、咽喉腫痛等癥狀消失，2-3天后痊愈。
清瘟靈噴霧劑治療口腔潰瘍的效果觀察。
10名男女口腔潰瘍、牙齦腫痛患者，用棉棒沾上本品涂抹患部，每天3-4次，2天后痊愈。
權(quán)利要求
1.清瘟噴霧劑及其制備方法，其特征在于主要是由下列重量份的原料藥組成甘草0.5-2.5份、黃芪0.5-3.0份、細(xì)辛0.25-1.0份、乳香0.5-1.75份、丹參0.5-2.5份、當(dāng)歸0.5-2.0份、赤芍0.2-0.5份、紅花0.2-1.0份、蒼術(shù)0.25-1.75份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于所述原料藥的優(yōu)選量為甘草1.5份、黃芪0.5份、細(xì)辛0.5份、乳香1.0份、丹參0.5份、當(dāng)歸0.5份、赤芍0.2份、紅花0.5份、蒼術(shù)0.5份。
3.根據(jù)權(quán)利1所述藥物的制備方法，其特征在于包括下列步驟1)各味中藥材飲片需達(dá)中國藥典2000版一部標(biāo)準(zhǔn)；2)按配方稱取中藥飲片加10倍水煮沸3-4小時，去沉渣收上清液；3)按量加乙醇，乙醇最終濃度為70％，然后去雜；。4)收上清，減壓蒸發(fā)去乙醇；5)用不同孔徑纖維膜澄清除菌，加無菌蒸餾水配成要求的藥液濃度，分裝成噴霧劑或口服液。
全文摘要
清瘟噴霧劑是防治流感等上呼吸道感染的中草藥制劑，其主要由甘草、黃芪、細(xì)辛、乳香、丹參、當(dāng)歸、赤芍、紅花、蒼術(shù)按一定重量配比制備而成。藥品對流感病毒(甲1型、乙型)具有極強(qiáng)的殺滅作用，抑制病毒指數(shù)高達(dá)10
文檔編號A61P31/12GK1864713SQ20051001678
公開日2006年11月22日 申請日期2005年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月16日
發(fā)明者劉東升 申請人:劉東升