專利名稱：作為alk5和/或alk4抑制劑的2－吡啶基取代的咪唑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及2-吡啶基取代的咪唑，它們是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)I型受體(ALK5)和/或活化素(activin)I型受體(ALK4)的抑制劑，本發(fā)明還涉及它們的制備方法和它們?cè)卺t(yī)藥中的用途，具體用于治療和預(yù)防由這些受體介導(dǎo)的疾病狀態(tài)。
背景技術(shù)：
TGF-β表示蛋白質(zhì)家族TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3，它們是細(xì)胞增殖與分化、傷口愈合、細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生和免疫抑制的多效調(diào)控劑。這種超家族的其他成員包括活化素、抑制素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、生長(zhǎng)與分化因子和米勒(Müllerian)抑制物。
TGF-β1通過(guò)兩種高保守性單跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)，即I型(ALK5)和II型TGF-β受體。一旦配體誘發(fā)低聚化，II型受體過(guò)度磷酸化ALK5 GS區(qū)中的絲氨酸/蘇氨酸殘基，通過(guò)創(chuàng)建Smad蛋白的結(jié)合位點(diǎn)引起ALK5的活化?；罨腁LK5繼而磷酸化C-末端SSXS-基序處的Smad2和Smad3蛋白，從而導(dǎo)致它們從受體中離解，并且與Smad4生成異數(shù)復(fù)合體。Smad復(fù)合體易位于核，與特異性DNA-結(jié)合性輔因子和輔調(diào)控劑裝配，最終活化細(xì)胞外基質(zhì)組分和基質(zhì)-降解性蛋白酶抑制劑的轉(zhuǎn)錄。
活化素轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的方式與TGF-β相似?；罨嘏c絲氨酸/蘇氨酸激酶、活化素II型受體(ActRIIB)結(jié)合，活化的II型受體過(guò)度磷酸化ALK4 GS區(qū)中的絲氨酸/蘇氨酸殘基?；罨腁LK4繼而磷酸化Smad2和Smad3。隨后與Smad4生成異-Samd復(fù)合體，導(dǎo)致活化素-誘導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。
大量實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物研究證明了TGF-β的腎小球表達(dá)與纖維化之間的關(guān)聯(lián)，包括增殖性腎小球性腎炎的Thy-1大鼠模型、兔抗-GBM腎小球性腎炎和局灶性節(jié)段性腎小球硬化的5/6腎切除大鼠模型，最近已有評(píng)述(例如，Bitzer，M.et al.，Kidney Blood Press.Res.211-12(1998))。TGF-β的中和抗體改進(jìn)Thy-1腎炎模型中的腎小球組織學(xué)(例如，Border，W.A.et al.，Nature 346371-374(1990))。
高血糖條件增加鼠近側(cè)小管細(xì)胞和人腎小球膜細(xì)胞中的TGF-βmRNA和蛋白質(zhì)合成(例如，Wahab，N.A.et al.，Biochem.J.316985-992(1996)；Rocco，M.V.et al.，Kidney Int.41107-114(1992))。伴有早期腎疾病的糖尿病患者顯示TGF-βmRNA和蛋白質(zhì)在腎小球內(nèi)的蓄積增加(例如，Yoshioka，K.et al.，Lab.Invest.68154-163(1993))。在患有慢性腎間質(zhì)性纖維化的腎臟中，標(biāo)志是小管基底膜增厚和間質(zhì)腔擴(kuò)大，以及以膠原I、III、V、VII和纖連蛋白增加為特征的間質(zhì)性纖維化(例如，Eddy，A.A.，J.Am.Soc.Nephrol.72495-2508(1996))。
TGF-β基因表達(dá)和蛋白質(zhì)產(chǎn)生在多種肺纖維化動(dòng)物模型中都增加了，包括博萊霉素、二氧化硅、石棉和輻射(例如，Phan，S.H.andKunkel，S.L.，Exp.Lung Res.1829-43(1992)；Williams，A.0.et al.，Am.J.Pathol.1421831-1840(1993)；Rube，C.E.et al.，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.471033-1042(2000))。在人肺纖維化疾病中觀察到來(lái)自自發(fā)性肺纖維化的相鄰組織切片中TGF-β1蛋白和膠原基因表達(dá)有一致性增加(例如，Broekelmann，T.J.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA886642-6646(1991))。已有文獻(xiàn)記載肉樣瘤病、塵肺病、石棉沉著病和輻射-誘發(fā)的纖維化患者中的TGF-β產(chǎn)生增加(例如，Khalil，N.et al.，Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol.14131-138(1996)；Jagirdar，J.et al.，Environ.Health Perspect.1051197-1203(1997))?？?TGF-β抗體和TGF-β-可溶性受體能夠部分地抑制博萊霉素-誘發(fā)的肺纖維化嚙齒動(dòng)物模型中的纖維化(例如，Giri，S.N.et al.，Thorax48959-966(1993)；Wang，Q.et al.，Thorax54805-812(1999))。煙霧已經(jīng)成為能夠?qū)е滦獾兰膊±^之以慢性阻塞性肺疾病(COPD)的最重要因素之一(例如，Wright，J.M.et al.，Am.Rev.Respir.Dis.146240-262(1992))。COPD是一種緩慢進(jìn)展的和不可逆的疾患，以氣道阻塞的功能性異常為特征。TGF-β已被假設(shè)參與在慢性氣道炎性疾患、例如COPD中見到的氣道再造(例如，Takizawa，H.Int.J.Mol.Med.1367-378(1998)；Ning，W.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 10114895-14900(2004))。
肝星形細(xì)胞(HSC)是肝纖維化中細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的主要來(lái)源。通過(guò)TGF-β1的作用，活化的肝星形細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)明顯增加(例如，F(xiàn)riedman，S.L.，Prog.Liver Dis.14101-130(1996)；Pietrangelo，A.，Semin.Liver Dis.1613-30(1996))。過(guò)度表達(dá)肝中TGF-β1的轉(zhuǎn)基因小鼠形成肝纖維化以及肝外病變，例如腎纖維化(例如，Sanderson，N.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA922572-2576(1995))。
TGF-β1及其受體在受損血管和纖維增殖性血管損傷中被過(guò)度表達(dá)，引起細(xì)胞外基質(zhì)的過(guò)度產(chǎn)生(例如，Saltis，J.et al.，Clin.Exp.Pharmacol.Physiol.23193-200(1996)；McCaffrey，T.A.etal.，J.Clin.Invest.962667-2675(1995))。
抗-TGF-β抗體在大鼠中減少瘢痕形成，改進(jìn)新生真皮的細(xì)胞體系結(jié)構(gòu)(例如，Shah，M.，J.Cell.Sci.108985-1002(1995))，在兔中改進(jìn)角膜傷口的愈合(例如，Moller-Pedersen，T.，Curt.EyeRes.17736-747(1998))，并且在大鼠中加速胃潰瘍的傷口愈合(例如，Ernst，H.，Gut39172-175(1996))。
輻射性纖維化是正常人體組織中治療性或意外過(guò)度暴露于輻射的常見后果。TGF-β1在輻射性纖維化的引發(fā)、發(fā)展和持續(xù)中扮演核心角色，最近已有評(píng)述(例如，Martin，M.et al.，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.47277-290(2000))。
器官移植在很多情形中并發(fā)有慢性排斥，就有些器官而言，例如腎臟，它是移植物損失的主要方式。在人類患者中，肺和腎移植物的慢性排斥與TGF-β在組織內(nèi)表達(dá)增加有關(guān)(例如，El-Gamel，A.et al.，Eur.J.Cardiothora c.Surg.13424-430(1998)；Shihab，F(xiàn).S.et al.，J.Am.Soc.Nephrol.6286-294(1995))。
TGF-β在腹膜粘連中有牽連(例如，Saed，G.M.et al.，WoundRepair Regeneration7504-510(1999))。ALK 5和/或ALK4抑制劑能夠預(yù)防腹膜和皮下纖維化粘連。
在各種癌癥的晚期，腫瘤細(xì)胞和腫瘤內(nèi)基質(zhì)細(xì)胞一般過(guò)度表達(dá)TGF-β。這引起血管生成與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的刺激、免疫系統(tǒng)的抑制和腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用增加(例如，Hojo，M.et al.，Nature397530-534(1999))。所以，腫瘤細(xì)胞變得更有侵襲性，轉(zhuǎn)移至遠(yuǎn)側(cè)器官(例如，Maehara，Y.et al.，J.Clin.Oncol.17607-614(1999)；Picon，A.et al.，Cancer Epidemiol.Biomarkers Prev.7497-504(1998))。
纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)是組織型纖溶酶原激活物和尿激酶型纖溶酶原激活物的主要生理抑制劑。PAI-1水平升高與血栓形成和血管疾病有關(guān)，提示了高血漿PAI-1可能通過(guò)破壞纖維蛋白溶解與凝固之間的天然平衡而促進(jìn)凝固性過(guò)高狀態(tài)(例如，Vaughan，D.E.，J.Invest.Med.46370-376(1998))。已知TGF-β刺激PAI-1的表達(dá)(例如，Dennler，S.et al.，EMBO J.173091-3100(1998))。
因此，用TGF-β信號(hào)傳遞途徑抑制劑抑制PAI-1的產(chǎn)生能夠提供一種新穎的纖維蛋白溶解療法。
活化素信號(hào)傳遞和活化素的過(guò)度表達(dá)與下列疾病有聯(lián)系牽涉細(xì)胞外基質(zhì)蓄積與纖維化的病理疾患(例如，Matsuse，T.et al.，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.1317-24(1995)；Inoue，S.et al.，Biochem.Biophys.Res.Comm.205441-448(1994)；Matsuse，T.et al.，Am.J.Pathol.148707-713(1996)；De Bleser et al.，Hepatology26905-912(1997)；Pawlowski，J.E.，et al.，J.Clin.Invest.100639-648(1997)；Sugiyama，M.et al.，Gastroenterology114550-558(1998)；Munz，B.et al.，EMBO J.185205-5215(1999))、炎性反應(yīng)(例如，Rosendahl，A.et al.，Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.2560-68(2001)、惡病質(zhì)或消瘦(Matzuk，M.M.et al.，Proc.Natl.Acd.Sci.USA918817-8821(1994)；Coerver，K.A.et al.，Mol.Endocrinol.10534-543(1996)；Cipriano，S.C.et al.，Endocrinology1412319-2327(2000))、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或病理反應(yīng)(例如，Logan，A.et al.，Eur.J.Neurosci.112367-2374(1999)；Logan，A.et al.，Exp.Neurol.159504-510(1999)；Masliah，E.et al.，Neurochem.Int.39393-400(2001)；De Groot，C.J.A.et al.，J.Neuropathol.Exp.Neurol.58174-187(1999)；John，G.R.et al.，Nat.Med.81115-1121(2002))和高血壓(例如，Dahly，A.J.et al.，Am.J.Physiol.Regul.Integr.Comp.Physiol.283R757-767(2002))。研究顯示，TGF-β和活化素能夠協(xié)同作用，誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生(例如，Sugiyama，M.et al.，Gastroenterology114；550-558(1998))。
因此，顯然用本發(fā)明優(yōu)選的化合物抑制Smad2和Smad3的ALK5和/或ALK4磷酸化能夠治療和預(yù)防牽涉這些信號(hào)傳遞途徑的疾患。
WO00/61576和US2003/0149277A1公開了三芳基咪唑衍生物和它們作為ALK5抑制劑的用途。WO 01/62756 A1公開了吡啶基咪唑衍生物和它們作為ALK5抑制劑的用途。WO 02/055077 A1公開了咪唑基環(huán)狀縮醛衍生物作為ALK5抑制劑的用途。另外，WO 03/087304 A2公開了三取代的雜芳基和它們作為ALK5和/或ALK4抑制劑的用途。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已驚人地發(fā)現(xiàn)，一類2-吡啶基取代的咪唑充當(dāng)有效的ALK5和/或ALK4選擇性抑制劑，因此可用于治療和預(yù)防由ALK5和/或ALK4介導(dǎo)的各種疾病狀態(tài)，例如腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、狼瘡性腎炎、高血壓-誘發(fā)的腎病、腎間質(zhì)性纖維化、由藥物暴露并發(fā)癥所致腎纖維化、與HIV有關(guān)的腎病、移植物壞死病、各種病因的肝纖維化、可歸因于感染的肝功能障礙、酒精-誘發(fā)的肝炎、膽管樹疾患、肺纖維化、急性肺損傷、成人呼吸窘迫綜合征、自發(fā)性肺纖維化、慢性阻塞性肺疾病、由感染性或毒性因子引起的肺纖維化、梗塞后心纖維化、充血性心力衰竭、膨脹性心肌病、心肌炎、血管狹窄、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、眼部瘢痕形成、角膜瘢痕形成、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、發(fā)生在由創(chuàng)傷或手術(shù)傷口所致傷口愈合期間的過(guò)多性或肥厚性真皮瘢痕或瘢痕瘤形成、腹膜與皮下粘連、硬皮病、纖維硬化、進(jìn)行性全身硬化、皮膚肌炎、多肌炎、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、潰瘍、神經(jīng)功能減低、男性勃起功能障礙、阿爾茨海默氏病、雷諾氏綜合征、纖維化癌癥、腫瘤轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)、輻射-誘發(fā)的纖維化、和血栓形成。
在本發(fā)明的實(shí)施方式中，提供了式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是可選被取代的萘基、蒽基或苯基，取代基選自鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、-O-(CH2)n-Ph、-S-(CH2)n-Ph、氰基、苯基和CO2R，其中R是H或C1-6烷基，n是0、1、2或3；或者R1是與5-7元的芳族或非芳族環(huán)稠合的苯基或吡啶基，其中所述環(huán)可選地含有至多三個(gè)獨(dú)立選自N、O和S的雜原子，該稠合的苯基或吡啶基可以進(jìn)一步可選地被鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、氰基、苯基或＝O取代；R2是H、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、苯基、C1-6鹵代烷基、NH2、NH(CH2)n-Ph、NH-C1-6烷基、鹵代基、CN、NO2、CONHR或SO2NHR，其中R是H或C1-6烷基，n是0、1、2或3；R3是H、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、-(CH2)p-NO2、-(CH2)p-NR4R5、-(CH2)p-CHO、-(CH2)p-CONHOH、-(CH2)p-CN、-(CH2)p-CO2H、-(CH2)p-CO2R4、-(CH2)p-CONR4R5、-(CH2)p-四唑、-(CH2)p-COR4、-(CH2)q-(OR6)2、-(CH2)p-OR4、-(CH2)p-CH＝CH-CN、-(CH2)p-CH＝CH-CO2H、-(CH2)p-CH＝CH-CO2R4、-(CH2)p-CH＝CH-CONR4R5、-(CH2)p-NHCOR4、-(CH2)p-NHCO2R4、-(CH2)p-CONHSO2R4、-(CH2)p-NHSO2R4或-(CH2)p-CH＝CH-四唑；R4和R5獨(dú)立地是H或C1-6烷基；R6是C1-6烷基；p是0、1、2、3或4；q是1、2、3或4；X是C1-10亞烷基、C2-10亞烯基或C2-10亞炔基；A1和A2之一是N，另一個(gè)是NR7；且R7是H、OH、C1-6烷基或C3-7環(huán)烷基。
本文所用的由式(I)虛線所指示的雙鍵代表落入本發(fā)明范圍的化合物的可能的互變異構(gòu)環(huán)形式，雙鍵與未取代的氮連接。
優(yōu)選地，R1是可選被取代的萘基或苯基。更優(yōu)選地，R1是可選被取代的苯基，取代基選自鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和苯基；或者R1是與5-7元的芳族或非芳族環(huán)稠合的苯基，其中所述環(huán)可選地含有至多兩個(gè)獨(dú)立選自N、O和S的雜原子，稠合的苯基或吡啶基可以進(jìn)一步可選地被鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基或＝0取代。例如，R1代表苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基、2，3-二氫苯并[1，4]二烯基、苯并唑基、苯并噻唑基、苯并[1，2，5]二唑基、苯并[1，2，5]噻二唑基、喹喔啉基、二氫苯并呋喃基、苯并咪唑基、C1-6苯并咪唑基、[1，2，4]三唑并[1，5-α]吡啶基、苯并[1，4]嗪基-3-酮，苯并唑基-2-酮或苯并[1，4]嗪基。
優(yōu)選地，R2不是H。當(dāng)R2不是H時(shí)，它優(yōu)選地位于吡啶基環(huán)氮的鄰位。R2優(yōu)選地是C1-4烷基。
優(yōu)選地，R3是-(CH2)p-CONHOH、-(CH2)p-CN、-(CH2)p-CO2H、-(CH2)p-CONR4R5或-(CH2)p-四唑。
優(yōu)選地，R4和R5獨(dú)立地是H或C1-3烷基。
優(yōu)選地，p是0、1或2。
優(yōu)選地，X是C1-6亞烷基。
優(yōu)選地，A1和A2之一是N，另一個(gè)是NR7，其中R7是H。
可以提到的具體本發(fā)明化合物包括如下及其藥學(xué)上可接受的鹽4-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；4-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；3-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-(2-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)芐腈；4-(2-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)芐腈；4-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)苯甲酰胺；4-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；
3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺。
本發(fā)明化合物通常是小的有機(jī)分子(非肽小分子)，大小一般小于約1,000道爾頓。優(yōu)選的非肽小分子的分子量小于約750道爾頓，更優(yōu)選小于約500道爾頓，進(jìn)而更優(yōu)選小于約300道爾頓。
式(I)化合物也可以以“前體藥物”形式應(yīng)用，它被設(shè)計(jì)成在對(duì)受治療者給藥時(shí)釋放式(I)化合物。前體藥物設(shè)計(jì)是本領(lǐng)域熟知的，依賴于式(I)化合物所含有的取代基。例如，含有羥基的取代基能夠與載體偶聯(lián)，所述載體使該化合物在生物學(xué)上無(wú)活性，直至被內(nèi)源性酶除去，或者例如被靶向于受治療者中特定受體或位置的酶所除去。
在屬性上為酸性的式(I)化合物(例如具有羧基或酚羥基)能夠生成藥學(xué)上可接受的鹽，例如鈉、鉀、鈣或金鹽。在本發(fā)明的范圍內(nèi)還有與藥學(xué)上可接受的胺生成的鹽，例如氨、烷基胺、羥基烷基胺和N-甲基葡糖胺。式(I)化合物可以用酸處理，生成酸加成鹽。這類酸的實(shí)施例包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、甲磺酸、磷酸、對(duì)-溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、抗壞血酸、馬來(lái)酸、乙酸和本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其他礦物和有機(jī)酸。酸加成鹽可以制備如下，將式(I)化合物的游離堿形式用足量酸(例如鹽酸)處理，生成酸加成鹽(例如鹽酸鹽)。酸加成鹽可以通過(guò)下列方式轉(zhuǎn)化回其游離堿形式將鹽用適合的稀堿水溶液(例如氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氨)處理。
有些本發(fā)明化合物可以從溶劑中結(jié)晶或重結(jié)晶，例如水性和有機(jī)溶劑。在這類情況下可以生成溶劑化物。本發(fā)明在其范圍內(nèi)包括化學(xué)計(jì)量的溶劑化物，包括水合物以及含有可變量水的化合物，可以借助冷凍干燥等過(guò)程生成。
式(I)化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心，因而可能存在對(duì)映體或非對(duì)映體。所要理解的是，本發(fā)明包括式(I)化合物的混合物和分開的單個(gè)異構(gòu)體。此外，含有烯基的某些式(I)化合物可以存在順式-或反式-異構(gòu)體。在每種情形中，本發(fā)明包括混合物和分開的單個(gè)異構(gòu)體。
式(I)化合物也可以存在互變異構(gòu)形式，本發(fā)明包括混合物和其分開的單個(gè)互變體。
在本發(fā)明中還包括適合于生物研究的式(I)化合物的放射性標(biāo)記衍生物。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基”表示含有1-10個(gè)(例如1-6個(gè)或1-4個(gè))碳原子的飽和脂族烴基團(tuán)。烷基可以是直鏈或支鏈的。烷基的實(shí)施例包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正庚基和2-乙基己基。烷基可以可選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如烷氧基、環(huán)烷氧基、氨基、硝基、羧基、氰基、鹵代基、羥基、磺基或巰基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“亞烷基”表示含有1-10個(gè)(例如1-6個(gè)或1-4個(gè))碳原子的飽和脂族烴基團(tuán)。亞烷基可以是直鏈或支鏈的。亞烷基的實(shí)施例包括但不限于亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞異丙基、亞丁基、亞異丁基、亞仲丁基、亞叔丁基、亞正戊基、亞正庚基和2-乙基亞己基。亞烷基可以可選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如烷氧基、環(huán)烷氧基、氨基、硝基、羧基、氰基、鹵代基、羥基、磺基或巰基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“亞烯基”表示含有2-10個(gè)(例如2-6個(gè)或2-4個(gè))碳原子和至少一條雙鍵的脂族碳基團(tuán)。象亞烷基一樣，亞烯基可以是直鏈或支鏈的。亞烯基的實(shí)施例包括但不限于亞烯丙基、亞異戊二烯基、2-亞丁烯基和2-亞己烯基。亞烯基可以可選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳基烷氧基、氨基、硝基、羧基、氰基、鹵代基、羥基、磺基、巰基、烷硫基、烷基亞磺?；⑼榛酋；?、氨基羰基、烷基碳酰氨基、環(huán)烷基碳酰氨基、環(huán)烷基烷基碳酰氨基、芳基碳酰氨基、芳烷基碳酰氨基、雜環(huán)烷基碳酰氨基、雜環(huán)烷基烷基碳酰氨基、雜芳基碳酰氨基、雜芳烷基碳酰氨基、脲、硫脲、氨磺?；⒘蝓０?、烷氧基羰基或烷基碳酰氧基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“亞炔基”表示含有2-10個(gè)(例如2-6個(gè)或2-4個(gè))碳原子和至少一條叁鍵的脂族碳基團(tuán)。亞炔基可以是直鏈或支鏈的。亞炔基的實(shí)施例包括但不限于亞炔丙基和亞丁炔基。亞炔基可以可選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，例如烷氧基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、芳烷氧基、雜芳基烷氧基、氨基、硝基、羧基、氰基、鹵代基、羥基、磺基、巰基、烷硫基、烷基亞磺?；?、烷基磺?；?、氨基羰基、烷基碳酰氨基、環(huán)烷基碳酰氨基、環(huán)烷基烷基碳酰氨基、芳基碳酰氨基、芳烷基碳酰氨基、雜環(huán)烷基碳酰氨基、雜環(huán)烷基烷基碳酰氨基、雜芳基碳酰氨基、雜芳烷基碳酰氨基、脲、硫脲、氨磺?；⒘蝓０贰⑼檠趸驶蛲榛减Ｑ趸?。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”表示3-10個(gè)(例如4-8個(gè))碳原子的脂族碳環(huán)。環(huán)烷基的實(shí)施例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、金剛烷基、降冰片基、立方烷基、八氫茚基、十氫萘基、二環(huán)[3.2.1]辛基、二環(huán)[2.2.2]辛基、二環(huán)[3.3.1]壬基和二環(huán)[3.2.3]壬基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”表示烷基-O-，其中“烷基”已有前文定義。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“鹵代烷基”表示含有一個(gè)或多個(gè)鹵原子的烷基。鹵代烷基的實(shí)施例包括氟甲基、氯甲基、溴甲基和三氟甲基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵代基”表示氟、氯、溴或碘。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“ALK5和/或ALK4抑制劑”表示除了抑制性Smad、例如Smad6和Smad7以外的化合物，它選擇性抑制ALK5和/或ALK4受體，優(yōu)先于p38或II型受體。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“ALK5-和/或ALK4-介導(dǎo)的疾病狀態(tài)”表示任何受ALK5和/或ALK4介導(dǎo)(或調(diào)控)的疾病狀態(tài)，例如受TGF-β和/或活化素信號(hào)傳遞途徑中Smad2和Smad3磷酸化的抑制所調(diào)控的疾病。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“潰瘍”用于包括但不限于糖尿病性潰瘍、慢性潰瘍、胃潰瘍和十二指腸潰瘍。
式(I)化合物可以借助大量已知方法從商業(yè)上可獲得或已知的原料制備。如果原料不可從商業(yè)來(lái)源獲得，可以借助本領(lǐng)域已知的工藝制備它們。
流程1 在一種方法中，按照流程1制備式(I)化合物，其中A1是N，且A2是NH，或者A1是NH，且A2是N。具體而言，將可選被取代的2-甲基吡啶(II)用堿去質(zhì)子化，所述堿例如LDA或LiHMDS，然后與R1COOR8(III)(其中R8是C1-6烷基)、R1COCl(IV)或R1-取代的羧酸甲氧基-甲基-酰胺(V)反應(yīng)，生成酮(VI)。甲氧基-甲基-酰胺(V)可以如下制備使相應(yīng)的酰氯(IV)與N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽反應(yīng)。酮(VI)可以用HBr的DMSO溶液氧化為二酮(VII)。然后這種二酮(VII)可以與適當(dāng)取代的醛(VIII)或被保護(hù)的醛衍生物在乙酸銨的存在下縮合，得到式(I)化合物。R1、R2、R3和X已有如上定義。醛(VIII)可以按照WO02/096875A1和Liquid Crystals 10273-287(1991)所述方法制備?；蛘撸梢詫⑼?VI)用亞硝酸鈉的HCl或乙酸溶液處理，得到α-酮基-肟(IX)，后者然后可以與適當(dāng)取代的醛(VIII)或被保護(hù)的醛衍生物在乙酸銨的存在下縮合，得到N-羥基咪唑。用亞磷酸三乙酯處理之，得到式(I)化合物。
在另一種方法中，式(I)化合物中的R3是-(CH2)p-CN或-(CH2)p-CH＝CH-CN，它可以被進(jìn)一步官能化生成式(I)化合物，如流程2所述。R1、R2、X和P已有如上定義，R4和R5獨(dú)立地是H或C1-6烷基。
流程2 所得由式(I)-(IX)代表的本發(fā)明化合物可以借助適當(dāng)?shù)某Ｒ?guī)方法分離和純化，例如柱色譜和重結(jié)晶。
本發(fā)明化合物可以借助任意適合的途徑給藥，例如口服、口腔、舌下、直腸、陰道、鼻、局部或腸胃外(包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下和冠脈內(nèi))給藥。
本發(fā)明的外用制劑可以為例如軟膏、霜?jiǎng)┗蛳磩?、眼用軟膏和眼用或耳用滴劑、浸滲敷料和氣霧劑，并且可以含有適當(dāng)?shù)某Ｒ?guī)添加劑，例如防腐劑、幫助藥物滲透的溶劑和軟膏與霜?jiǎng)┲械能浕瘎?br> 制劑也可以含有可相容的常規(guī)載體，例如霜?jiǎng)┗蜍浉嗷|(zhì)和用于洗劑的乙醇或油醇。這類載體可以占制劑的約1％直至約98％。更通常地，它們將構(gòu)成制劑的多達(dá)約80％。
關(guān)于在上述疾患的治療或預(yù)防性處置中對(duì)人給藥，式(I)化合物的口服、口腔或舌下劑量一般將在50-5000mg每天的范圍內(nèi)，就普通成年患者(70kg)而言。因而就典型的成年患者而言，單個(gè)藥片或膠囊在適合的藥學(xué)上可接受的介質(zhì)或載體中含有25-500mg活性化合物，每天一次或多次以單一或多重劑量給藥。根據(jù)需要，腸胃外給藥劑量通常將在25-250mg每單一劑量的范圍內(nèi)。在實(shí)踐中，醫(yī)師將確定實(shí)際的服藥方案，它將最適合于個(gè)體患者，并且將因特定患者的年齡、體重和反應(yīng)而異。上述劑量是平均情況的示例，但是也能存在個(gè)別情形，其中可能適用更高或更低的劑量范圍，這也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
就人類用途而言，式(I)化合物可以被單獨(dú)給藥，但是一般將混合有藥物載體給藥，根據(jù)預(yù)定給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐選擇載體。例如，化合物可以被口服、口腔或舌下給藥，劑型為片劑，含有賦形劑，例如淀粉或乳糖，或者劑型為膠囊或卵狀體，單獨(dú)或混合有賦形劑，或者劑型為酏劑或混懸液，含有矯味劑或著色劑。這類液體制劑可以用藥學(xué)上可接受的添加劑制備，例如懸浮劑(例如甲基纖維素，半合成甘油酯，例如witepsol，或甘油酯混合物，例如杏仁油與PEG-6酯的混合物或PEG-8與辛酸/癸酸甘油酯的混合物)?；衔镆部梢员荒c胃外注射，例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下或冠脈內(nèi)。就腸胃外給藥而言，化合物最好采用無(wú)菌水溶液的形式，其中可以含有其他物質(zhì)，例如鹽，或者單糖，例如甘露糖醇或葡萄糖，使溶液與血液等滲。
因而，本發(fā)明在另一方面提供藥物組合物，包含式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，以及藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明也提供用于治療的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或者含有任一實(shí)體的藥物組合物。
本發(fā)明進(jìn)一步提供式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或者含有任一實(shí)體的藥物組合物制備藥物的用途，該藥物用于治療哺乳動(dòng)物由ALK5和/或ALK4受體介導(dǎo)的疾病。
ALK5-和/或ALK4-介導(dǎo)的疾病狀態(tài)包括但不限于腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、狼瘡性腎炎、高血壓-誘發(fā)的腎病、腎間質(zhì)性纖維化、由藥物暴露并發(fā)癥所致腎纖維化、與HIV有關(guān)的腎病、移植物壞死病、各種病因的肝纖維化、可歸因于感染的肝功能障礙、酒精-誘發(fā)的肝炎、膽管樹疾患、肺纖維化、急性肺損傷、成人呼吸窘迫綜合征、自發(fā)性肺纖維化、慢性阻塞性肺疾病、由感染性或毒性因子引起的肺纖維化、梗塞后心纖維化、充血性心力衰竭、膨脹性心肌病、心肌炎、血管狹窄、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、眼部瘢痕形成、角膜瘢痕形成、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、發(fā)生在由創(chuàng)傷或手術(shù)傷口所致傷口愈合期間的過(guò)多性或肥厚性真皮瘢痕或瘢痕瘤形成、腹膜與皮下粘連、硬皮病、纖維硬化、進(jìn)行性全身硬化、皮膚肌炎、多肌炎、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、潰瘍、神經(jīng)功能減低、男性勃起功能障礙、阿爾茨海默氏病、雷諾氏綜合征、纖維化癌癥、腫瘤轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)、輻射-誘發(fā)的纖維化、和血栓形成。
本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制哺乳動(dòng)物TGF-β和/或活化素信號(hào)傳遞途徑的方法，例如抑制Smad2或Smad3被ALK5和/或ALK4磷酸化。
本發(fā)明進(jìn)一步提供減少哺乳動(dòng)物過(guò)量細(xì)胞外基質(zhì)蓄積的方法，該方法抑制TGF-β和/或活化素信號(hào)傳遞途徑，例如抑制Smad2或Smad3被ALK5和/或ALK4磷酸化。
本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制哺乳動(dòng)物腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的方法，該方法抑制TGF-β信號(hào)傳遞途徑。
本發(fā)明進(jìn)一步提供治療哺乳動(dòng)物由TGF-β過(guò)度表達(dá)介導(dǎo)的癌癥的方法，該方法抑制TGF-β信號(hào)傳遞途徑。


本發(fā)明的上述方面和其他特征將在下列說(shuō)明中加以解釋，并且結(jié)合附圖，其中圖1顯示實(shí)施例6、9、10、13和31對(duì)HepG2細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的SBE-Luc報(bào)道基因活性的影響。
圖2顯示實(shí)施例41對(duì)HepG2細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的SBE-Luc報(bào)道基因活性的影響。
圖3顯示實(shí)施例41對(duì)HepG2細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的3TP-Lux報(bào)道基因活性的影響。
圖4顯示實(shí)施例41對(duì)HepG2細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的PAI-1啟動(dòng)子-Luc報(bào)道基因活性的影響。
圖5顯示實(shí)施例41對(duì)HaCaT人角化細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的PAI-1表達(dá)的影響。
圖6顯示實(shí)施例41對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的Smad2和Smad3磷酸化的影響。
圖7A和7B顯示實(shí)施例41對(duì)膽管結(jié)扎大鼠肝纖維化的影響。
表1顯示實(shí)施例1-61的結(jié)構(gòu)和1HNMR與MS光譜數(shù)據(jù)。且圖8顯示實(shí)施例41體外對(duì)蛋白激酶活性的影響。
具體實(shí)施例方式
下列實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，它們不應(yīng)被視為限制權(quán)利要求所述發(fā)明的范圍。在實(shí)施例中，電子噴霧電離質(zhì)譜(ESI-MS)是在Q-Tof2質(zhì)譜計(jì)(Micromass，Manchester，UK)上獲得的。
操作實(shí)施例13-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(實(shí)施例5)的制備 向攪拌著的1-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙烷-1，2-二酮(50mg，0.19mmol)(按照WO01/62756A1所述方法制備)的AcOH(3mL)溶液加入3-(甲?；谆?芐腈(28mg，0.19mmol)(按照WO 02/096875 A1所述方法制備)和NH4OAc(86mg，1.11mmol)，將混合物在120℃下加熱3h。冷卻反應(yīng)混合物，在0℃下用28％NH4OH調(diào)節(jié)pH至pH7-8，反應(yīng)混合物用CH2Cl2(10mL)萃取。將CH2Cl2溶液用水(5mL)和鹽水(5mL)洗滌，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH和CH2Cl2的混合物(1∶19(v/v))作為洗脫劑，得到26mg(36％)3-((4-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈，為固體。MS(ESI)m/z 395.13(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.52(s，1H)，7.46(m，1H)，7.40(t，1H)，7.33(d，1H)，7.32-7.26(m，2H)，7.09-7.04(m，2H)，6.90(d，1H)，6.82(d，1H)，5.96(s，2H)，4.10(s，2H)，2.38(s，3H)。
操作實(shí)施例23-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺(實(shí)施例6)的制備 在室溫下，向攪拌著的3-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(70mg，0.17mmol)的EtOH(4mL)溶液加入30％H2O2(0.59mmol)和6N NaOH(0.04mmol)溶液。將混合物升溫至50-60℃，攪拌3h，向其中加入1N HCl溶液，以在0℃下調(diào)節(jié)至pH7-8。在減壓下蒸發(fā)除去乙醇溶劑，將殘余物溶于CH2Cl2(30mL)。將CH2Cl2溶液用水(15mL)和鹽水(15mL)洗滌，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2的混合物(1∶9(v/v))作為洗脫劑，得到23mg(33％)3-((4-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺，為固體。MS(ESI)m/z 413.11(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.59(s，1H)，7.52(d，1H)，7.37(dd，1H)，7.24(m，2H)，7.15(t，1H)，7.01(重疊，1H)，7.00(s，1H)，6.88(d，1H)，6.75(d，1H)，6.70(br s，1H)，6.02(br s，1H)，5.92(s，2H)，4.00(s，2H)，2.34(s，3H)。
操作實(shí)施例34-((1(3)-羥基-5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(實(shí)施例30)的制備 向攪拌著的1-(6-甲基吡啶-2-基)-2-(喹喔啉-6-基)乙烷-1，2-二酮1-肟(67mg，0.23mmol)(按照WO01/62756A1所述方法制備)的叔丁基甲基醚(2.5mL)溶液加入4-(甲?；谆?芐腈(101mg，0.69mmol)(按照WO02/096875A1所述方法制備)和NH4OAc(89mg，1.15mmol)的MeOH(1.2mL)溶液，將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。在0℃下用飽和NaHCO3溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的pH至pH7-8。使反應(yīng)混合物在CH2Cl2(40mL)與水(40mL)之間分配。水層用CH2Cl2反復(fù)萃取(3×15mL)。合并CH2Cl2溶液，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2的混合物(1∶30，然后1∶19(v/v))作為洗脫劑，得到38mg(40％)4-((1(3)-羥基-5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈，為固體。MS(ESI)m/z 419.23(MH+)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.86(m，2H)，8.35(d，1H)，8.17(d，1H)，8.06(dd，1H)，7.62(m，2H)，7.56(m，2H)，7.52(t，1H)，7.36(d，1H)，7.06(d，1H)，4.31(s，2H)，2.61(s，3H)。
操作實(shí)施例44-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺(實(shí)施例31)的制備 在室溫下，向攪拌著的4-((1(3)-羥基-5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(264mg，0.631mmol)在EtOH(16mL)與DMSO(4mL)混合物中的溶液加入30％H2O2(6.62mmol)和6N NaOH(0.47mmol)溶液。將混合物升溫至50-60℃，攪拌過(guò)夜，向其中加入1NHCl溶液，以在0℃下調(diào)節(jié)至pH7-8。在減壓下蒸發(fā)除去乙醇溶劑，使殘余物在CH2Cl2(30mL)與H2O(50mL)之間分配。水層用NaCl飽和，用CH2Cl2萃取(3×30mL)。合并CH2Cl2溶液，用鹽水(30mL)洗滌，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)。將殘余物溶于無(wú)水DMF(20mL)，用亞磷酸三乙酯(2.39mmol)處理。將混合物在110℃下加熱3天，冷卻至室溫，在減壓下蒸發(fā)至干。使反應(yīng)混合物在CH2Cl2(30mL)與水(50mL)之間分配，水層用CH2Cl2萃取(2×30mL)。合并CH2Cl2溶液，用飽和NaHCO3溶液(40mL)和鹽水(50mL)洗滌，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶9，然后1∶5(v/v))作為洗脫劑，得到96mg(36％)4-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺，為固體。MS(ESI)m/z 421.14(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ12.01(br s，1H)，8.83(m，2H)，8.38(s，1H)，8.15(dd，2H)，7.55(d，2H)，7.42(dd，1H)，7.33(d，1H)，7.21(d，2H)，6.95(d，1H)，6.62(br s，1H)，5.83(br s，1H)，4.13(s，2H)，2.29(s，3H)。
操作實(shí)施例54-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺(實(shí)施例48)的制備 在室溫下，向攪拌著的4-(2-(1，3二氧雜環(huán)戊烷-2-基)乙基)芐腈(1.50g，7.34mmol)(按照Kelly，S.M.，Liquid Crystals10273-287(1991)所述方法制備)的MeOH(50mL)溶液加入30％H2O2(25.70mmol)和6N NaOH(7.34mmol)溶液。將混合物升溫至50-60℃，攪拌2h，向其中加入1NHCl溶液，以在0℃下調(diào)節(jié)至pH7-8。在減壓下蒸發(fā)除去MeOH溶劑，殘余物用CH2Cl2萃取(3×30mL)。將CH2Cl2溶液用鹽水(30mL)洗滌，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶19，然后1∶9(v/v))作為洗脫劑，得到1.58g(97％)4-(2-(1，3二氧雜環(huán)戊烷-2-基)乙基)苯甲酰胺，為固體。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(dd，2H)，7.29(d，2H)，6.01(br s，1H)，5.71(br s，1H)，4.89(t，1H)，3.99(m，2H)，3.88(m，2H)，2.80(m，2H)，1.99(m，2H)。
在室溫下，向攪拌著的4-(2-(1，3二氧雜環(huán)戊烷-2-基)乙基)苯甲酰胺(0.50g，2.26mmol)的THF(22mL)溶液加入1NHCl溶液(20mL)。將混合物在80-90℃下加熱1h，冷卻至室溫。用NaCl飽和后，反應(yīng)混合物用CHCl3反復(fù)萃取(5×20mL)。合并CHCl3溶液，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)，得到0.40g(98％)4-(2-甲?；一?苯甲酰胺，為固體，無(wú)需進(jìn)一步純化即可用于下一步。1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ9.82(t，1H)，7.74(m，2H)，7.27(m，2H)，6.14(brs，1H)，6.03(br s，1H)，3.01(m，2H)，2.81(m，2H)。
向攪拌著的1-(6-甲基吡啶-2-基)-2-(喹喔啉-6-基)乙烷-1，2-二酮(1.05g，3.79mmol)(按照WO02/055077A1所述方法制備)在叔丁基甲基醚(35mL)與MeOH(25mL)混合物中的溶液加入4-(2-甲?；一?苯甲酰胺(1.00g，5.69mmol)和NH4OAc(1.46g，18.95mmol)，將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。在0℃下用飽和NaHCO3溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的pH至pH7-8。除去溶劑后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2萃取(3×25mL)，將CH2Cl2溶液干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶19，然后1∶9(v/v))作為洗脫劑，得到1.08g(66％)4-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基苯甲酰胺，為固體。MS(ESI)m/z435.19。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.82(m，2H)，8.36(s，1H)，8.09(d，2H)，7.64(d，2H)，7.43(t，1H)，7.32(d，1H)，7.17(d，2H)，6.99(d，1H)，6.58(br s，1H)，6.09(br s，1H)，3.06(s，4H)，2.45(s，3H)。
操作實(shí)施例64-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)芐腈(實(shí)施例13)的制備 向攪拌著的1-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-2-(6-甲基吡啶-2-基)乙烷-1，2-二酮(230mg，0.86mmol)的AcOH(8mL)溶液加入4-(3-甲?；?芐腈(156mg，0.90mmol)(按照Kelly，S.M.，Liquid Crystals10273-287(1991)所述方法制備)和NH4OAc(396mg，5.14mmol)，將混合物在120℃下加熱3h。冷卻反應(yīng)混合物，在0℃下用28％NH4OH調(diào)節(jié)pH至pH7-8，反應(yīng)混合物用CH2Cl2萃取(3×30mL)。合并CH2Cl2溶液，干燥(無(wú)水Na2SO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶30，然后1∶19(v/v))作為洗脫劑，得到130mg(36％)4-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)芐腈，為固體。MS(ESI)m/z 423.14。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.63(br s，1H)，7.51(d，2H)，7.42(dd，1H)，7.30(d，1H)，7.24(d，2H)，7.10-7.04(m，2H)，6.93(d，1H)，6.82(d，1H)，5.98(s，2H)，2.74(m，4H)，2.47(s，3H)，2.07(m，2H)。
操作實(shí)施例73-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(實(shí)施例40)的制備 向1-(6-甲基吡啶-2-基)-2-(喹喔啉-6-基)乙烷-1，2-二酮(40.0g，144.26mmol)(按照WO02/055077A1所述方法制備)在叔丁基甲基醚(350mL)與MeOH(350mL)混合物中的溶液加入3-(甲?；谆?芐腈(23.03g，158.69mmol)(按照WO02/096875A1所述方法制備)的叔丁基甲基醚(350mL)溶液和NH4OAc(111.00g，1.44mol)的MeOH(350mL)溶液，將混合物在45℃下攪拌過(guò)夜。在0℃下用飽和NaHCO3溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的pH至pH7-8。除去溶劑后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2萃取(3×800mL)，將CH2Cl2溶液干燥(無(wú)水MgSO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶19，然后1∶9(v/v))作為洗脫劑，得到28.98g(50％，粗化合物)3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈，為固體。MS(ESI)m/z 403.14(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.84(m，2H)，8.39(s，1H)，8.15(s，2H)，7.56(s，1H)，7.46(m，3H)，7.37(d，1H)，7.32(t，1H)，6.99(d，1H)，4.17(s，2H)，2.37(s，3H)。
操作實(shí)施例 83-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺(實(shí)施例41)的制備 向攪拌著的3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈(28.98g，72.58mmol)的EtOH(250mL)溶液加入30％H2O2(4.85mL，39.92mmol)和1N NaOH(250mL)。將混合物升溫至40℃達(dá)30min，然后向其中加入30％H2O2(4.85mL，39.92mmol)。30min后，在0℃下向反應(yīng)混合物加入1NHCl，以調(diào)節(jié)pH7-8。除去溶劑后，殘余物用CH2Cl2反復(fù)萃取(3×450mL)。合并CH2Cl2溶液，干燥(無(wú)水MgSO4)，過(guò)濾，在減壓下蒸發(fā)至干。殘余物經(jīng)過(guò)硅膠MPLC純化，使用MeOH與CH2Cl2(1∶9，然后1∶5(v/v))作為洗脫劑，得到18.49g(61％)3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺，為固體。MS(ESI)m/z 421.23(MH+)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.79(s，2H)，8.34(s，1H)，8.06(s，2H)，7.71(s，1H)，7.55(d，1H)，7.41(t，1H)，7.34(d，1H)，7.29(d，1H)，7.19(t，1H)，6.96(d，1H)，6.83(brs，1H)，6.30(br s，1H)，4.13(s，2H)，2.36(s，3H)。
操作實(shí)施例93-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽(實(shí)施例58)的制備 將3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺(5.0g，11.89mmol)溶于無(wú)水CH2Cl2(40mL)，通過(guò)玻璃濾器過(guò)濾，用無(wú)水CH2Cl2(20mL)洗滌。將CH2Cl2溶液冷卻至0℃，向其中加入1.0M HCl的Et2O溶液(18mL，18mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15min，在減壓下蒸發(fā)至干，經(jīng)P2O5干燥過(guò)夜，得到5.25g(97％)3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺鹽酸鹽，為淡黃色粉末。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.03(s，2H)，8.48(d，1H)，8.19(d，1H)，8.11(m，1H)，8.06(d，1H)，8.04(d，1H)，7.83(m，1H)，7.80(t，1H)，7.74(m，1H)，7.48(m，2H)，7.45(br s，1H)，7.38(d，1H)，4.54(s，2H)，2.54(s，3H)。
操作實(shí)施例103-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺硫酸鹽(實(shí)施例59)的制備 向攪拌著的3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-
基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺(50mg，0.12mmol)的無(wú)水CH2Cl2(2mL)溶液加入10％H2SO4的EtOH溶液(80μL，0.14mmol)，將混合物在室溫下攪拌15min。將反應(yīng)混合物加入到MeOH(1mL)中，然后倒入無(wú)水Et2O(15mL)中。過(guò)濾收集所沉淀的固體，經(jīng)P2O5干燥過(guò)夜，得到54mg(88％)3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺硫酸鹽，為淡黃色粉末。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.03(s，2H)，8.41(d，1H)，8.22(d，1H)，8.01-7.88(m，3H)，7.83(m，1H)，7.79(t，1H)，7.62(d，1H)，7.49(t，1H)，7.44(br s，1H)，7.39(d，1H)，7.35(d，1H)，4.45(s，2H)，2.58(s，3H)。
按照類似于上述操作實(shí)施例1-10所述方式制備下表1化合物。在表1中包括這些化合物的質(zhì)譜數(shù)據(jù)。
表1
















生物學(xué)數(shù)據(jù)利用下列測(cè)定法可以評(píng)估本發(fā)明化合物的生物學(xué)活性評(píng)價(jià)Smad3的ALK5激酶磷酸化的抑制作用的無(wú)細(xì)胞測(cè)定法使用Invitrogen BacNBlue桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)His-標(biāo)記的組成型活性ALK5(T204D)和Smad3完整蛋白。用QiagenNi-NTA樹脂柱純化經(jīng)過(guò)表達(dá)的蛋白質(zhì)。將經(jīng)過(guò)純化的Smad3蛋白200ng與100μL 0.1M碳酸氫鈉涂覆緩沖液混合，通過(guò)吸移涂在Flash-Plates內(nèi)。蓋住平板，在4℃下溫育16小時(shí)。然后將平板用200μL涂覆緩沖液洗滌3次，在室溫下用1％BSA的PBS溶液封閉1小時(shí)。將經(jīng)過(guò)純化的ALK5蛋白100ng與100μL反應(yīng)緩沖液混合，后者含有20mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、1mM CaCl2、1mM DTT、1μM ATP和2μCiγ-32p-ATP，和1μL不同濃度的每種供試式(I)化合物的100％DMSO溶液。然后，測(cè)定開始于向經(jīng)過(guò)Smad3-涂覆的Flash-Plates加入ALK5反應(yīng)混合物，繼之以在30℃下溫育3小時(shí)。溫育后，除去測(cè)定緩沖液，用200μL 10mM焦磷酸鈉溶液洗滌3次。然后將Flash-Plates風(fēng)干，在Packard TopCount上計(jì)數(shù)。
式(I)化合物通常顯示出小于10μM的IC50值；有些顯示出小于1μM的IC50值；有些甚至顯示出小于50nM的IC50值。
評(píng)價(jià)Smad3的ALK4激酶磷酸化的抑制作用的無(wú)細(xì)胞測(cè)定法可以按照與上述ALK5抑制作用所述相似的方式測(cè)定Smad3的ALK4激酶磷酸化被供試式(I)化合物所抑制，除了使用相似的His-標(biāo)記的ALK4代替His-標(biāo)記的組成型活性ALK5以外。
式(I)化合物通常顯示出小于10μM的IC50值；有些顯示出小于1μM的IC50值。
評(píng)價(jià)TGF-β信號(hào)傳遞的細(xì)胞抑制作用的測(cè)定法通過(guò)測(cè)量抑制HepG2細(xì)胞中TGF-β1-誘導(dǎo)的Smad結(jié)合元件-熒光素酶(SBE-Luc)報(bào)道基因活性和PAI-1-熒光素酶(p3TP-Lux)報(bào)道基因活性的能力，測(cè)定式(I)化合物的生物活性。將HepG2細(xì)胞用生長(zhǎng)在DMEM培養(yǎng)基中的SBE-Luc報(bào)道基因構(gòu)件或p3TP-Lux報(bào)道基因構(gòu)件瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，所述培養(yǎng)基含有10％FBS、青霉素100U/mL、鏈霉素100μg/mL、L-谷氨酰胺2mM、丙酮酸鈉1mM和非必需氨基酸。然后將經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞按照2.5×104細(xì)胞/孔的濃度平板接種在96孔平板中，在37℃5％CO2溫育器中，在含有0.5％FBS的培養(yǎng)基中饑餓3-6小時(shí)。然后在有或沒(méi)有供試式(I)化合物的存在下用5ng/mL TGF-β1配體的含1％的DMSO饑餓培養(yǎng)基溶液刺激細(xì)胞，在37℃5％CO2溫育器中溫育24小時(shí)。洗去培養(yǎng)基，利用熒光素酶測(cè)定系統(tǒng)(Promega)測(cè)定細(xì)胞溶解產(chǎn)物中的熒光素酶活性。
式(I)化合物通常表現(xiàn)小于10μM的IC50值；有些表現(xiàn)小于1μM的IC50值；有些甚至表現(xiàn)小于50nM的IC50值。
權(quán)利要求
1.式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1是可選被取代的萘基、蒽基或苯基，取代基選自鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、-O-(CH2)n-Ph、-S-(CH2)n-Ph、氰基、苯基和CO2R，其中R是H或C1-6烷基，n是0、1、2或3；或者R1是與5-7元的芳族或非芳族環(huán)稠合的苯基或吡啶基，其中所述環(huán)可選地含有至多三個(gè)獨(dú)立選自N、O和S的雜原子，該稠合的苯基或吡啶基可以進(jìn)一步可選地被鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、氰基、苯基或＝O取代；R2是H、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、苯基、C1-6鹵代烷基、NH2、NH(CH2)n-Ph、NH-C1-6烷基、鹵代基、CN、NO2、CONHR或SO2NHR，其中R是H或C1-6烷基，且n是0、1、2或3；R3是H、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、-(CH2)p-NO2、-(CH2)p-NR4R5、-(CH2)p-CHO、-(CH2)p-CONHOH、-(CH2)p-CN、-(CH2)p-CO2H、-(CH2)p-CO2R4、-(CH2)p-CONR4R5、-(CH2)p-四唑、-(CH2)p-COR4、-(CH2)q-(OR6)2、-(CH2)p-OR4、-(CH2)p-CH＝CH-CN、-(CH2)p-CH＝CH-CO2H、-(CH2)p-CH＝CH-CO2R4、-(CH2)p-CH＝CH-CONR4R5、-(CH2)p-NHCOR4、-(CH2)p-NHCO2R4、-(CH2)p-CONHSO2R4、-(CH2)p-NHSO2R4或-(CH2)p-CH＝CH-四唑；R4和R5獨(dú)立地是H或C1-6烷基；R6是C1-6烷基；p是0、1、2、3或4；q是1、2、3或4；X是C1-10亞烷基、C2-10亞烯基或C2-10亞炔基；A1和A2之一是N，另一個(gè)是NR7；且R7是H、OH、C1-6烷基或C3-7環(huán)烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是可選被取代的苯基，取代基選自鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和苯基；或者R1是與5-7元的芳族或非芳族環(huán)稠合的苯基，其中所述環(huán)可選地含有至多兩個(gè)獨(dú)立選自N、O和S的雜原子，稠合的苯基或吡啶基可以進(jìn)一步可選地被鹵代基、OH、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基或＝O取代；R2不是H，并且位于吡啶基環(huán)氮的鄰位；R3是-(CH2)p-CONHOH、-(CH2)p-CN、-(CH2)p-CO2H、-(CH2)p-CONR4R5或-(CH2)p-四唑；R4和R5獨(dú)立地是H或C1-3烷基；p是0、1或2；X是C1-6亞烷基；且A1和A2之一是N，另一個(gè)是NR7，其中R7是H。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自下組4-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；4-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；3-((4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-(2-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)芐腈；4-(2-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)芐腈；4-(3-(4-(苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-5-(6-甲基吡啶-2-基)-1(3)H-咪唑-2-基)丙基)苯甲酰胺；4-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-((5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)芐腈；3-((5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；3-((5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)甲基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；4-(2-(5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-乙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-正丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-異丙基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺；3-(2-(5-(6-正丁基吡啶-2-基)-4-(喹喔啉-6-基)-1(3)H-咪唑-2-基)乙基)苯甲酰胺，及其藥學(xué)上可接受的鹽。
4.藥物組合物，包含如權(quán)利要求1所要求保護(hù)的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物和藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。
5.抑制哺乳動(dòng)物TGF-β或活化素信號(hào)傳遞途徑或此二者的方法，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
6.減少哺乳動(dòng)物過(guò)量細(xì)胞外基質(zhì)蓄積的方法，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
7.抑制哺乳動(dòng)物腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的方法，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
8.通過(guò)抑制哺乳動(dòng)物TGF-β信號(hào)傳遞途徑而治療由TGF-β的過(guò)度表達(dá)介導(dǎo)的癌癥的方法，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
9.治療選自下組的疾病的方法腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、狼瘡性腎炎、高血壓-誘發(fā)的腎病、腎間質(zhì)性纖維化、由藥物暴露并發(fā)癥所致腎纖維化、與HIV有關(guān)的腎病、移植物壞死病、各種病因的肝纖維化、可歸因于感染的肝功能障礙、酒精-誘發(fā)的肝炎、膽管樹疾患、肺纖維化、急性肺損傷、成人呼吸窘迫綜合征、自發(fā)性肺纖維化、慢性阻塞性肺疾病、由感染性或毒性因子引起的肺纖維化、梗塞后心纖維化、充血性心力衰竭、膨脹性心肌病、心肌炎、血管狹窄、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化、眼部瘢痕形成、角膜瘢痕形成、增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病、發(fā)生在由創(chuàng)傷或手術(shù)傷口所致傷口愈合期間的過(guò)多性或肥厚性真皮瘢痕或瘢痕瘤形成、腹膜與皮下粘連、硬皮病、纖維硬化、進(jìn)行性全身硬化、皮膚肌炎、多肌炎、關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、潰瘍、神經(jīng)功能減低、男性勃起功能障礙、阿爾茨海默氏病、雷諾氏綜合征、纖維化癌癥、腫瘤轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)、輻射-誘發(fā)的纖維化、任何其中纖維化是主要組分的疾病、和血栓形成，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
10.權(quán)利要求8的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
11.權(quán)利要求9的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
12.權(quán)利要求10的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
13.權(quán)利要求11的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
14.權(quán)利要求2的化合物，其中R2是C1-4烷基。
15.權(quán)利要求1的化合物的前體藥物，它在對(duì)哺乳動(dòng)物給藥時(shí)釋放權(quán)利要求1的化合物。
16.權(quán)利要求15的前體藥物，它是含有與載體鍵合的羥基的權(quán)利要求1化合物，所述載體使權(quán)利要求1化合物無(wú)活性，直至被內(nèi)源性除去。
17.權(quán)利要求1的化合物，它含有一個(gè)或多個(gè)手性中心。
18.權(quán)利要求17的化合物，它是對(duì)映體。
19.權(quán)利要求17的化合物，它是非對(duì)映體。
20.抑制哺乳動(dòng)物血栓形成的方法，包括對(duì)需要這類治療的哺乳動(dòng)物給予治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述哺乳動(dòng)物是人。
全文摘要
本發(fā)明涉及2－吡啶基取代的咪唑，它們是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子－β(TGF－β)I型受體(ALK5)和/或活化素I型受體(ALK4)的抑制劑，還涉及它們的制備方法和它們?cè)卺t(yī)藥中的用途，具體用于治療和預(yù)防由這些受體介導(dǎo)的疾病狀態(tài)。
文檔編號(hào)A61K31/4178GK1972921SQ200480043365
公開日2007年5月30日 申請(qǐng)日期2004年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月21日
發(fā)明者崔俊憲, 金大起, 方英株, 金薰?jié)? 趙一相, 樸明順, 安永載 申請(qǐng)人:引頭基因組有限公司, Sk化學(xué)株式會(huì)社, 梨花女子大學(xué)校產(chǎn)學(xué)協(xié)力團(tuán)