專利名稱：：丙型肝炎病毒ns3/ns4a絲氨酸蛋白酶的抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的丙型肝炎病毒(“HCV”)蛋白酶抑制劑，包含一種或多種所述抑制劑的藥用組合物，制備所述抑制劑的方法，和所述抑制劑用于治療丙型肝炎和相關(guān)病癥的用法。本發(fā)明另外公開了作為HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的新的大環(huán)化合物。本申請要求2003年12月11日提交的美國臨時專利申請檔案號60/528845的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
：丙型肝炎病毒(HCV)為(+)-有義單鏈核糖核酸病毒，其在非甲非乙型肝炎(NANBH)中，特別是在血液相關(guān)的NANBH(BB-NANBH)中為主要的病原體(參見國際專利申請公開WO89/04669和歐洲專利申請公開EP381216)。NANBH與其它類型的病毒誘導(dǎo)型肝病，如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、δ肝炎病毒(HDV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)和埃-巴二氏病毒(EBV)，以及其它形式的肝病如酒精中毒和原發(fā)性膽汁肝硬化不同。最近，已經(jīng)鑒定、克隆和表達(dá)了多肽加工和病毒復(fù)制所必需的HCV蛋白酶(參見例如，美國專利5,712,145)。這個約3000個氨基酸的多蛋白包含從N端到C端的核殼蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)和若干非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3為約68千道爾頓(kda)的蛋白質(zhì)，由HCV基因組的約1893個核苷酸編碼并且具有兩個不同的結(jié)構(gòu)域(a)絲氨酸蛋白酶域，其包括約200個N端氨基酸；和(b)在蛋白的C端的RNA-依賴性腺苷三磷酸酶(ATPase)域。由于蛋白序列、總的立體結(jié)構(gòu)和催化機(jī)制上的相似性，NS3蛋白酶被認(rèn)為是胰凝乳蛋白酶家族的成員。其它胰凝乳蛋白酶樣酶為彈性蛋白酶、Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCVNS3絲氨酸蛋白酶負(fù)責(zé)NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處的多肽(多蛋白)的蛋白質(zhì)水解并因此負(fù)責(zé)在病毒復(fù)制過程中生成四種病毒蛋白。這使得HCVNS3絲氨酸蛋白酶成為抗病毒化學(xué)療法的有吸引力的目標(biāo)。本發(fā)明的化合物可以抑制這種蛋白酶。它們還可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。已經(jīng)確定，作為約6kda多肽的NS4a蛋白質(zhì)為NS3的絲氨酸蛋白酶活性的輔因子。NS3/NS4a接合處因NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的自動斷裂在分子內(nèi)發(fā)生(即，順式)，而其它斷裂位點(diǎn)在分子間進(jìn)行(即，反式)。對HCV蛋白酶的自然斷裂位點(diǎn)的分析顯示，在P1存在半胱氨酸，在P1′存在絲氨酸，并且這些殘基在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處嚴(yán)格保存。NS3/NS4a接合處在P1處包含蘇氨酸，在P1′處包含絲氨酸。在NS3/NS4a的Cys→Thr取代被假定是造成下述必要條件的原因，即，在該接合處進(jìn)行的cis加工的必要條件而不是反式加工的必要條件。參見例如，Pizzi等人的(1994)Proc.Nati.Acad.Sci(USA)91888-892；Failla等人的(1996)Folding&Design135-42。NS3/NS4a斷裂位點(diǎn)還比其它位點(diǎn)更能夠耐受突變發(fā)生。參見例如Kollykhalov等人的(1994)J.Virol.687525-7533。還發(fā)現(xiàn)斷裂位點(diǎn)上游區(qū)域中的酸性殘基是有效斷裂所需要的。參見例如，Komoda等人的(1994)J.Virol.687351-7357。已經(jīng)被報導(dǎo)的HCV蛋白酶抑制劑包括抗氧化劑(參見國際專利申請公開WO98/14181)、某些肽和肽類似物(參見國際專利申請申請公開WO98/17679；Landro等人的(1997)Biochem.，369340-9348；Ingallinella等人的(1998)Biochem.，378906-8914；Llinàs-Brunet等人的(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.，81713-1718)；基于70個氨基酸多肽水蛭抑制劑c的抑制劑(Martin等人的(1998)Biochem.，3711459-11468)；選自人胰分泌型胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)和微抗體清單(minibodyrepertoires)(MBip)的抑制劑親合性(Dimasi等人的(1997)J.Virol.，717461-7469)；cVHE2(“載運(yùn)的(camelized)”可變域抗體片段)(Martin等人的(1997)ProteinEng.，10607-614)；和α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等人(1997)J.Hepat.，2742-28)。最近公開了設(shè)計用于選擇性地破壞丙型肝炎病毒RNA的核酶(參見，BioWorldToday，9(217)4(1998年11月10日))。還參考1998年4月30日公開的PCT公開WO98/17679(VertexPharmaceuticalIncorporated)；1998年5月28日公開的WO98/22496(F.Hoffmann-LaRocheAG)；和1999年2月18日公開的WO99/07734(BoehringerIngelheimCanadaLtd.)。HCV牽涉肝的肝硬化和肝細(xì)胞癌的誘發(fā)。受到HCV感染的患者的預(yù)后目前較差。由于缺乏與HCV感染有關(guān)的免疫或免除而使HCV感染比其它形式的肝炎更難治療。目前的數(shù)據(jù)表明在肝硬化確診之后的四年存活率小于50％。診斷患有局部可切除的肝細(xì)胞癌的患者具有10-30％的五年存活率，而患有局部不可切除的肝細(xì)胞癌的患者的五年存活率小于1％。參考WO00/59929(US6,608,027，受讓人BoehringerIngelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日公開)，其公開了下式表示的肽衍生物參見A.Marchetti等人的Synlett，S1，1000-1002(1999)，其描述了作為HCVNS3蛋白酶抑制劑的雙環(huán)類似物的合成。其中公開的化合物具有下式結(jié)構(gòu)參見W.Han等人的Bioorganic&MedicinalChem.Lett，(2000)10，711-713，其描述了包含烯丙基和乙基官能團(tuán)的某些α-酮酰胺、α-酮酯、和α-二酮的制備。還參見WO00/09558(受讓人BoehringerIngelheimLimited；2000年2月24日公開)，其公開了下式表示的肽衍生物其中各組成部分的定義參見所述文獻(xiàn)。該系列的說明性化合物為還參見WO00/09543(受讓人BoehringerIngelheimLimited；2000年2月24公開)，其公開了下式表示的肽衍生物其中各組成部分的定義參見所述文獻(xiàn)。該系列的說明性化合物為還參見US6,608,027(BoehringerIngelheim，Canada)，其公開了以下類型的NS3蛋白酶抑制劑其中不同部分的定義參見所述文獻(xiàn)。當(dāng)前的對丙型肝炎的治療包括干擾素-α(INFα)，以及利巴韋林和干擾素的聯(lián)合治療。參見例如Beremguer等人的(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。這些治療具有低的持續(xù)響應(yīng)速率和時常發(fā)生副作用的缺點(diǎn)。參見例如，Hoofnagle等人的(1997)N.Engl.J.Med.336347。目前，對于HCV感染沒有疫苗。進(jìn)一步參考2001年10月11日公開的WO01/74768(受讓人VertexPharmaceuticalsInc)，其公開了以下通式表示的某些化合物(R的定義參見該文獻(xiàn))作為丙型肝炎病毒的NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑在前述WO01/74768中公開的具體化合物具有下式結(jié)構(gòu)還參見WO02/18369(EliLillyandCompany)，其公開了蛋白酶抑制劑。其中公開的說明性化合物具有以下結(jié)構(gòu)還參見WO03/006490(VertexPharmaceutical)，其公開了橋接的雙環(huán)蛋白酶抑制劑。其中公開的說明性化合物具有以下結(jié)構(gòu)PCT公開WO01/77113；WO01/081325；WO02/08198；WO02/08256；WO02/08187；WO02/08244；WO02/48172；WO02/08251和2002年1月18日提交的待決的美國專利申請10/052,386公開了作為丙型肝炎病毒的NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的多種類型的肽和/或其它化合物。另外，2003年9月26日提交的待決的美國專利申請60/506,637、2003年8月26日提交的60/497,749、和2003年11月20日提交的60/------(代理人案號1NO6122)公開了多種類型的蛋白酶抑制劑。這些申請的公開內(nèi)容都被并入本文作為參考。需要用于HCV感染的新的處理法和治療法。需要可用于治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的化合物。需要可用于治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。需要使用本文提供的化合物調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶類、特別是HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的活性的方法。需要使用本文提供的化合物調(diào)節(jié)HCV多肽的加工的方法。
發(fā)明內(nèi)容前述的WO02/08244出版物廣泛地公開了若干種化合物。申請人發(fā)現(xiàn)，特定類型的化合物令人驚訝地表現(xiàn)出良好的HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制活性。因此，在其許多實(shí)施方案中，本發(fā)明提供新的類別的HCV蛋白酶抑制劑、包含一種或多種該化合物的藥用組合物、制備包括一種或多種這種化合物的藥物制劑的方法、和使用一種或多種這種化合物或一種或多種這種制劑治療或預(yù)防HCV或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀的方法。還提供調(diào)節(jié)HCV多肽與HCV蛋白酶相互作用的方法。在本文提供的化合物中，優(yōu)選抑制HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的化合物。因此，本發(fā)明公開了一種化合物，或所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、或外外消旋物，或所述化合物的可藥用鹽、溶劑合物、或酯，所述化合物具有式I中所示的一般結(jié)構(gòu)式I其中R1為H、OR8、NR9R10、或CHR9R10，其中R8、R9和R10可相同或不同，各自獨(dú)立地選自H、烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、環(huán)烷基-、芳烷基-、和雜芳烷基；E和J可相同或不同，各自獨(dú)立地選自R、OR、NHR、NRR7、SR、鹵代、和S(O2)R，或者E和J可彼此直接連接以形成3-8元環(huán)烷基、或3-8元雜環(huán)基部分；Z為N(H)、N(R)、或O，條件是當(dāng)Z為O時，G存在或不存在，并且如果當(dāng)Z為O而G存在時，則G為C(＝O)；G可存在或不存在，并且如果G存在，則G為C(＝O)或S(O2)，并且當(dāng)G不存在時，Z與Y直接連接；Y選自R、R7、R2、R3、R4和R5可相同或不同，各自獨(dú)立地選自H、烷基-、烯基-、炔基-、環(huán)烷基-、雜烷基-、雜環(huán)基-、芳基-、雜芳基-、(環(huán)烷基)烷基-、(雜環(huán)基)烷基-、芳基-烷基-、和雜芳基-烷基-，其中每個所述的雜烷基、雜芳基和雜環(huán)基獨(dú)立地具有1-6個氧、氮、硫、或磷原子；其中每個所述的烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基部分可未被取代或任選地獨(dú)立地被一個或多個選自以下的部分取代烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、鹵代、羥基、硫代(thio)、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酸酯、脲、酮、醛、氰基、硝基、氨磺?；?sulfonamido)、亞砜、砜、磺酰脲、酰肼、和異羥肟酸酯。式I表示的化合物，單獨(dú)地或與本文公開的一種或多種其它另外的適當(dāng)?shù)乃幬锝M合，可用于治療疾病，諸如例如HCV、HIV、(AIDS或獲得性免疫缺損綜合癥)、和相關(guān)病癥，以及用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性、預(yù)防HCV、或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。所述的調(diào)節(jié)、治療、預(yù)防或改善可使用本發(fā)明的化合物以及包括這種化合物的藥用組合物或制劑進(jìn)行。不限于理論，認(rèn)為HCV蛋白酶可為NS3或NS4a蛋白酶。本發(fā)明的化合物可以抑制這些蛋白酶。它們還可以調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。詳細(xì)說明在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式1表示的化合物或其可藥用鹽、溶劑合物、或酯，其中各個部分如上定義。在另一個實(shí)施方案中，R1為NR9R10，其中R9為H，R10為H或R14，其中R14為烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基-、烷基-雜芳基-、芳基-烷基-、烯基、炔基、或雜芳基-烷基-。在另一個實(shí)施方案中，R14選自以下在另一個實(shí)施方案中，R2選自以下部分在另一個實(shí)施方案中，R3選自以下其中R31為OH或O-烷基；和R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。在另一個實(shí)施方案中，R3選自以下在另一個實(shí)施方案中，下式表示的部分選自以下其中Y31選自O(shè)R、NHR和NRR7和Y32選自以下在另一個實(shí)施方案中，Z為NH。在另一個實(shí)施方案中，Z為N(R)。在另一個實(shí)施方案中，Z為O；當(dāng)Z為O時，則G可存在或不存在，并且如果當(dāng)Z為O而G存在時，則G為C(＝O)。在另一個實(shí)施方案中，G存在并且G為C(＝O)或S(O2)。在另一個實(shí)施方案中，G不存在。在另一個實(shí)施方案中，Y選自以下在另一個實(shí)施方案中，下式表示的部分選自以下通常，部分和上的含箭頭的符號表示該部分對如式I中所示的母體結(jié)構(gòu)各個位置的連接點(diǎn)。本發(fā)明的另一個實(shí)施方案公開了表1中的一些本發(fā)明的式I化合物。在表I中還公開了一些本發(fā)明的化合物的NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制活性(以納摩爾表示的Ki*)。表I如上述和本公開內(nèi)容中使用的，除非另外說明，以下術(shù)語應(yīng)理解為具有以下含義“患者”包括人類和動物。“哺乳動物”是指人類和其它哺乳動物。“烷基”是指可為直鏈或支鏈并且在鏈中包括約1到約20個碳原子的脂肪族烴基。優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1到約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中包含約1到約6個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接于直鏈的烷基鏈?！暗图壨榛笔侵冈阪溨芯哂屑s1到約6個碳原子的基團(tuán)，所述鏈可為直鏈或支鏈的。術(shù)語“取代的烷基”是指該烷基可被一個或多個取代基取代，取代基可相同或不同，每個取代基獨(dú)立地選自鹵代、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。適當(dāng)?shù)耐榛姆窍拗菩岳影谆?、乙基、正丙基、異丙基、和叔丁基。“烯基”是指包含至少一個碳-碳雙鍵并且可為直鏈或支鏈并且在鏈中包括約2到約15個碳原子的脂肪族烴基。優(yōu)選的烯基在鏈中具有約2到約12個碳原子；更優(yōu)選在鏈中具有約2到約6個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接于直鏈的烯基鏈?！暗图壪┗笔侵冈阪溨芯哂屑s2到約6個碳原子，所述鏈可為直鏈或支鏈的。術(shù)語“被取代的烯基”是指烯基可被一個或多個取代基取代，取代基可相同或不同，每個取代基獨(dú)立地選自鹵代，烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。適當(dāng)?shù)南┗姆窍拗菩岳影ㄒ蚁┗?、丙烯基、正丁烯基?-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基和癸烯基。“炔基”是指包含至少一個碳-碳三鍵并且可為直鏈或支鏈并且在鏈中包括約2到約15個碳原子的脂肪族烴基。優(yōu)選的炔基在鏈中具有約2到約12個碳原子；更優(yōu)選在鏈中具有約2到約4個碳原子。支鏈?zhǔn)侵敢粋€或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接于直鏈的炔基鏈?！暗图壢不笔侵冈阪溨芯哂屑s2到約6個碳原子，所述鏈可為直鏈或支鏈的。適當(dāng)?shù)娜不姆窍拗菩岳影ㄒ胰不?、丙炔基?-丁炔基和3-甲基丁炔基。術(shù)語“被取代的炔基”是指炔基可被一個或多個取代基取代，取代基可相同或不同，每個取代基獨(dú)立地選自烷基、芳基和環(huán)烷基。“芳基”是指包括約6到約14個碳原子，優(yōu)選約6到約10個碳原子的芳香族的單環(huán)或多環(huán)環(huán)系統(tǒng)。芳基可任選地被一個或多個“環(huán)系統(tǒng)取代基”取代，所述取代基可相同或不同，并且其定義如本文所述。適當(dāng)?shù)姆蓟姆窍拗菩岳影ū交洼粱?。“雜芳基”是指包括約5到約14個環(huán)原子，優(yōu)選約5到約10個環(huán)原子的芳香族的單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其中一個或多個環(huán)原子為不同于碳的元素，如氮、氧或硫，其為單獨(dú)或組合的形式。優(yōu)選的雜芳基包含約5到約6個環(huán)原子?！半s芳基”可任選地被一個或多個“環(huán)系統(tǒng)取代基”取代，所述取代基可相同或不同，并且其定義如本文所述。雜芳基根名前面的前綴氮雜、氧雜或硫雜是指分別存在至少一個作為環(huán)原子的氮、氧或硫原子。雜芳基的氮原子可任選地被氧化為相應(yīng)的N-氧化物。適當(dāng)?shù)碾s芳基的非限制性例子包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、異唑基、異噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮雜萘基、羥吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、吖吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并吖吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語“雜芳基”還指部分飽和的雜芳基部分，諸如例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。“芳烷基”或“芳基烷基”是指芳基-烷基-基團(tuán)，其中芳基和烷基的定義如前所述。優(yōu)選的芳烷基包含低級烷基。適當(dāng)?shù)姆纪榛姆窍拗菩岳影ㄆS基、2-苯基乙基、和萘基甲基。對母體部分的結(jié)合通過烷基實(shí)現(xiàn)。“烷基芳基”是指烷基-芳基-基團(tuán)，其中烷基和芳基的定義如前所述。優(yōu)選的烷基芳基包含低級烷基。適當(dāng)?shù)耐榛蓟姆窍拗菩岳訛榧妆交δ阁w部分的結(jié)合通過芳基實(shí)現(xiàn)?！碍h(huán)烷基”是指包括約3到約10個碳原子，優(yōu)選約5到約10個碳原子的非芳香族的單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)包含約5到約7個環(huán)原子。環(huán)烷基可任選地被一個或多個“環(huán)系統(tǒng)取代基”取代，所述取代基可相同或不同，并且其定義如上文所述。適當(dāng)?shù)膯苇h(huán)環(huán)烷基的非限制性例子包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。適當(dāng)?shù)亩喹h(huán)環(huán)烷基的非限制性例子包括1-萘烷基、降冰片基、金剛烷基等，以及部分飽和基團(tuán)，諸如例如，茚滿基、四氫萘基等?！胞u素”或“鹵代”是指氟、氯、溴、或碘。優(yōu)選氟、氯和溴?！碍h(huán)系統(tǒng)取代基”是指連接于芳香族或非芳香族環(huán)系統(tǒng)的取代基，例如其置換環(huán)系統(tǒng)上的可得到的氫。環(huán)系統(tǒng)取代基可相同或不同，各自獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷基芳基、雜芳烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基、烷基雜芳基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、?；?、芳酰基、鹵代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳基氧羰基、芳烷氧羰基、烷基磺酰基、芳基磺?；㈦s芳基磺?；?、烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可相同或不同并且獨(dú)立地選自氫、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基。“環(huán)系統(tǒng)取代基”也可指單一部分，其同時置換環(huán)系統(tǒng)上兩個相鄰碳原子上的兩個可得到的氫(每個碳上一個H)。這種部分的例子為亞甲二氧基、亞乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成以下部分，諸如例如“雜環(huán)基”是指包括約3到約10個環(huán)原子，優(yōu)選約5到約10個環(huán)原子的非芳香族飽和的單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其中環(huán)系統(tǒng)中的一個或多個原子為不同于碳的元素，如氮、氧或硫，其以單獨(dú)或組合的形式。在環(huán)系統(tǒng)中不存在相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包含約5到約6個環(huán)原子。雜環(huán)基根名前面的前綴氮雜、氧雜或硫雜是指分別存在至少一個作為環(huán)原子的氮、氧或硫原子。雜環(huán)基中的任何-NH可以被保護(hù)形式存在，諸如例如，作為-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基團(tuán)等；這種保護(hù)也被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分?！半s環(huán)基”可任選地被一個或多個“環(huán)系統(tǒng)取代基”取代，所述取代基可相同或不同，并且其定義如本文所述。雜環(huán)基的氮或硫原子可任選地被氧化為相應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。適當(dāng)?shù)膯苇h(huán)雜環(huán)基環(huán)的非限制性例子包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑烷基、1，4-二氧雜環(huán)己基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等。需要指出的是，在本發(fā)明的含雜原子的環(huán)系統(tǒng)中，在與N、O或S鄰接的碳原子上沒有羥基，以及在與另一個雜原子鄰接的碳原子上沒有N或S基團(tuán)。因此，例如在以下環(huán)中沒有-OH直接連接于標(biāo)記為2和5的碳上。需要指出的是，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，互變異構(gòu)形式，諸如例如以下部分被認(rèn)為是等價的“炔基烷基”是指炔基-烷基-基團(tuán)，其中炔基和烷基的定義如前所述。優(yōu)選的炔基烷基包含低級炔基和低級烷基。對母體部分的結(jié)合通過烷基實(shí)現(xiàn)。適當(dāng)?shù)娜不榛姆窍拗菩岳影ū不谆??！半s芳烷基”是指雜芳基-烷基-基團(tuán)，其中雜芳基和烷基的定義如前所述。優(yōu)選的雜芳烷基包含低級烷基。適當(dāng)?shù)碾s芳烷基的非限制性例子包括吡啶基甲基、和喹啉-3-基甲基。對母體部分的結(jié)合通過烷基實(shí)現(xiàn)?！傲u基烷基”是指HO-烷基-基團(tuán)，其中烷基的定義如前定義的。優(yōu)選的羥基烷基包含低級烷基。適當(dāng)?shù)牧u基烷基的非限制性例子包括羥基甲基和2-羥基乙基?！磅；笔侵窰-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-基團(tuán)，其中各個基團(tuán)的定義如前所述。對母體部分的結(jié)合通過羰基實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選的?；图壨榛?。適當(dāng)?shù)孽；姆窍拗菩岳影柞；⒁阴；捅；！胺减；笔侵阜蓟?C(O)-基團(tuán)，其中芳基的定義如前所述。對母體部分的結(jié)合通過羰基實(shí)現(xiàn)。適當(dāng)?shù)姆减；姆窍拗菩岳影ū郊柞；?-萘甲?；！巴檠趸笔侵竿榛?O-基團(tuán)，其中烷基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)耐檠趸姆窍拗菩岳影籽趸?、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基。對母體部分的結(jié)合通過醚氧實(shí)現(xiàn)?！胺佳趸笔侵阜蓟?O-基團(tuán)，其中芳基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)姆佳趸姆窍拗菩岳影ū窖趸洼裂趸?。對母體部分的結(jié)合通過醚氧實(shí)現(xiàn)?！胺纪檠趸笔侵阜纪榛?O-基團(tuán)，其中芳烷基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)姆纪檠趸姆窍拗菩岳影ㄆS氧基和1-或2-萘基甲氧基。對母體部分的結(jié)合通過醚氧實(shí)現(xiàn)。“烷硫基”是指烷基-S-基團(tuán)，其中烷基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)耐榱蚧姆窍拗菩岳影琢蚧鸵伊蚧?。對母體部分的結(jié)合通過硫?qū)崿F(xiàn)?！胺剂蚧笔侵阜蓟?S-基團(tuán)，其中芳基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)姆剂蚧姆窍拗菩岳影ū搅蚧洼亮蚧?。對母體部分的結(jié)合通過硫?qū)崿F(xiàn)?！胺纪榱蚧笔侵阜纪榛?S-基團(tuán)，其中芳烷基的定義如前所述。適當(dāng)?shù)姆纪榱蚧姆窍拗菩岳訛楸郊琢蚧?。對母體部分的結(jié)合通過硫?qū)崿F(xiàn)?！巴檠豸驶笔侵竿榛?O-C(O)-基團(tuán)。適當(dāng)?shù)耐檠豸驶姆窍拗菩岳影籽豸驶鸵已豸驶?。對母體部分的結(jié)合通過羰基實(shí)習(xí)?！胺蓟豸驶笔侵阜蓟?O-C(O)-基團(tuán)。適當(dāng)?shù)姆蓟豸驶姆窍拗菩岳影ū窖豸驶洼裂豸驶?。對母體部分的結(jié)合通過羰基實(shí)現(xiàn)?！胺纪檠豸驶笔侵阜纪榛?O-C(O)-基團(tuán)。適當(dāng)?shù)姆纪檠豸驶姆窍拗菩岳訛槠S氧羰基。對母體部分的結(jié)合通過羰基實(shí)現(xiàn)?！巴榛酋；笔侵竿榛?S(O2)-基團(tuán)。優(yōu)選的基團(tuán)為其中烷基為低級烷基的那些。對母體部分的結(jié)合通過磺?；鶎?shí)現(xiàn)?！胺蓟酋；笔侵阜蓟?S(O2)-基團(tuán)。對母體部分的結(jié)合通過磺酰基實(shí)現(xiàn)。術(shù)語“取代的”是指指定原子上的一個和多個氫被選自所示基團(tuán)的基團(tuán)代替，條件是不超過指定原子在現(xiàn)有環(huán)境下的正?；蟽r，并且取代產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。取代基和/或變量的組合只有在這種組合產(chǎn)生穩(wěn)定化合物時才是允許的?！胺€(wěn)定化合物”或“穩(wěn)定結(jié)構(gòu)”是指化合物足夠堅牢，而能夠經(jīng)歷從反應(yīng)混合物分離為有用的純度、和配制為有效的治療藥劑。當(dāng)表示取代基、化合物、組合藥物等的數(shù)目時，術(shù)語“一個或多個”或“至少一個”是指根據(jù)上下文關(guān)系而存在的或加入的至少一個、和最多為化學(xué)和物理上可允許的最大數(shù)目的取代基、化合物、組合藥物等。這種技術(shù)和知識為本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知。術(shù)語“任選地被取代”是指被具體的基團(tuán)、基或部分非必要地取代。用于化合物的術(shù)語“分離的”或“分離形式的”是指化合物從其合成過程或天然來源或組合狀態(tài)被分離之后所述化合物的物理狀態(tài)。用于化合物的術(shù)語“純的”或“純形式的”是指從本文所述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的純化方法純化后獲得的所述化合物的物理狀態(tài)，其純度足以由本文所述的或本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)進(jìn)行表征。需要指出的是，在本文的正文、圖解、實(shí)施例和表中的具有不飽和化學(xué)價的任何雜原子被認(rèn)為具有一個或多個氫原子以滿足該化學(xué)價。當(dāng)化合物中的官能團(tuán)被表述為“被保護(hù)”時，是指該基團(tuán)處在被修飾的形式，用于當(dāng)化合物經(jīng)歷反應(yīng)時排除在保護(hù)位點(diǎn)處不希望有的副反應(yīng)。適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基被本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解并且將通過標(biāo)準(zhǔn)教科書諸如例如T.W.Greene等人的ProtectiveGroupsinorganicSynthesis(1991)，Wiley，NewYork了解。當(dāng)任何變量(如，芳基、雜環(huán)、R2等)在任何組成部分或式I中出現(xiàn)不止一次時，其在各個情況中的定義獨(dú)立于其在其它情況中的定義。如本文中使用的，術(shù)語“組合物”是指包括含指定量的指定成分的產(chǎn)物，以及包括由指定量的指定成分的組合直接或間接得到的任何產(chǎn)物。本文中還考慮了本發(fā)明的化合物的前體藥物和溶劑合物。如本文中使用的，術(shù)語“前體藥物”是指作為藥物前身的化合物，當(dāng)對被試者給藥時，該化合物通過代謝或化學(xué)過程經(jīng)歷化學(xué)轉(zhuǎn)化，從而得到式1的化合物或其鹽和/或溶劑合物。關(guān)于前體藥物的討論在T.Higuchi和V.Stella的Pro-drugsasNovelDeliverySystems(1987)，14oftheA.C.S.SymposiumSeries和在BioreversibleCarriersinDrugDesign，(1987)，EdwardB.Rocheed.，AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress中提供，兩者都被并入本文作為參考?！叭軇┖衔铩笔侵副景l(fā)明的化合物與一個或多個溶劑分子的物理締合體。這種物理締合涉及不同程度的離子鍵和共價鍵，包括氫鍵。在某些情況中，溶劑合物能夠分離，例如當(dāng)一個或多個溶劑分子被結(jié)合到結(jié)晶固體的晶格中時。“溶劑合物”包括溶液相和可分離的溶劑合物。適當(dāng)?shù)娜軇┖衔锏姆窍拗菩岳影ㄒ掖蓟?、甲醇化物等?！八衔铩睘槠渲腥軇┓肿訛镠2O的溶劑合物?！坝行Я俊被颉爸委熡行Я俊币庠诿枋鲇行б种艭DK并從而產(chǎn)生所需的治療、改善、抑制、或預(yù)防作用的本發(fā)明的化合物或組合物的量。式1的化合物可以形成鹽，該鹽也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除非另外說明，在本文中提及式1化合物時應(yīng)理解為還包括其鹽的形式。如本文中使用的，術(shù)語“鹽”表示與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸鹽(acidicsalt)，以及與無機(jī)堿和/或有機(jī)堿形成的堿鹽(basicsalt)。另外，當(dāng)式1的化合物同時包含堿性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)和酸性部分(例如但不限于羧酸)時，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)并且該兩性離子也包括在本文所用的術(shù)語“鹽”的范圍內(nèi)。優(yōu)選藥學(xué)可接受的(即，無毒的、生理學(xué)可接受的)鹽，但是也可使用其它的鹽。式1化合物的鹽的形成可通過例如將式1的化合物與一定量(如等當(dāng)量)的酸或堿在例如其中鹽能夠沉淀的介質(zhì)中反應(yīng)、或在水介質(zhì)中反應(yīng)隨后冷凍干燥而進(jìn)行。示例性的酸加成鹽包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽等。另外，通常被認(rèn)為適合于從堿性的藥用化合物形成藥用鹽的酸在例如P.Stahl等人的CamilleG.(eds.)HandbookofPharmaceuticalSalts.Properties，SelectionandUse.(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等人的JoumalofPharmaceuticalSciences(1977)66(1)1-19；P.Gould的InternationalJ.ofPharmaceutics(1986)33201-217；Anderson等人的ThePracticeofMedicinalChemistry(1996)，AcademicPress，NewYork；和在TheOrangeBook(Food&DrugAdministration，Washington，D.C.ontheirwebsite)中討論。這些公開內(nèi)容都被并入本文作為參考。示例性的堿鹽包括銨鹽；堿金屬鹽，如鈉、鋰、和鉀鹽；堿土金屬鹽，如鈣和鎂鹽；與有機(jī)堿(例如，有機(jī)胺)如二環(huán)己基胺、叔丁胺的鹽；和與氨基酸如精氨酸、賴氨酸等的鹽。堿性的含氮基團(tuán)可被試劑如低級鹵代烷(如甲基、乙基、和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、二烷基硫酸酯(如硫酸的二甲酯、二乙酯、和二丁酯)、長鏈鹵化物(如癸烷基、十二烷基、和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳鹵代烷(如芐基和苯乙基的溴化物)及其它試劑季銨化。所有這些酸鹽和堿鹽都被認(rèn)為是處在本發(fā)明范圍內(nèi)的可藥用鹽，并且對于本發(fā)明而言，所有的酸鹽和堿鹽都被認(rèn)為是與相應(yīng)的游離形式的化合物等價。本發(fā)明化合物的可藥用酯包括以下類型(1)通過羥基的酯化得到的羧酸酯，其中酯基的羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或支鏈的烷基(如乙基、正丙基、叔丁基、或正丁基)、烷氧基烷基(如甲氧基甲基)、芳烷基(如芐基)、芳氧基烷基(如苯氧基甲基)、芳基(如苯基，其任選地被例如鹵素、C1-4烷基、或C1-4烷氧基或氨基取代)；(2)磺酸酯，如烷基磺酰基或芳烷基磺?；?如甲磺酰基)；(3)氨基酸的酯(例如，L-纈氨酰基或L-異亮氨?；?；(4)膦酸酯和(5)單、二或三磷酸的酯。磷酸酯可通過例如C1-20醇或其活性衍生物進(jìn)一步酯化，或被2，3-二(C6-24)酰基甘油進(jìn)一步酯化。式1的化合物及其鹽、溶劑合物和前體藥物可以其互變異構(gòu)形式存在(例如作為酰胺或亞氨醚的形式)。所有這些互變異構(gòu)形式都被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。本發(fā)明化合物的所有立體異構(gòu)體(如幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等)(包括該化合物的鹽、溶劑合物、和前體藥物，以及前體藥物的鹽和溶劑合物的立體異構(gòu)體)，如可能由于不同取代基上的不對稱碳而存在的那些，包括對映異構(gòu)形式(其甚至可能在沒有不對稱碳的情況下存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，如位置異構(gòu)體(諸如例如，4-吡啶基和3-吡啶基)。本發(fā)明化合物的個體立體異構(gòu)體可為例如基本上不含其它異構(gòu)體的形式，或可作為例如外消旋物的混合形式或與所有其它立體異構(gòu)體、或其它選擇的立體異構(gòu)體混合的形式。本發(fā)明的手性中心可具有由IUPAC1974Recommendations定義的S或R構(gòu)型。術(shù)語“鹽”、“溶劑合物”、“前體藥物”等的使用同樣適用于本發(fā)明化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋物或前體藥物的鹽、溶劑合物和前體藥物。式1的化合物及其鹽、溶劑合物和前體藥物可作為其多晶型物的形式存在。式I化合物的多晶型物形式，以及式I化合物的鹽、溶劑合物和前體藥物的多晶型物形式都被包括在本發(fā)明中。所有的上述一種或多種多晶型物形式都是本發(fā)明的一部分。應(yīng)該理解，式1的化合物用于本文所討論的治療應(yīng)用的實(shí)用性適用于每種化合物本身、或適用于在隨后段落中所述的一種或多種式1的化合物的一種或多種組合。相同的理解還適用于包括這樣一種或多種化合物的藥用組合物和牽涉這樣一種或多種化合物的治療方法。本發(fā)明的化合物可具有藥理學(xué)性質(zhì)；特別地，式1的化合物可為HCV蛋白酶的抑制劑，可以是每種化合物自身，或者，可以是一種或多種式1化合物與選自式1的一種或多種化合物的組合?；衔锟捎糜谥委熂膊?，諸如例如HCV、HIV、(AIDS，獲得性免疫缺陷綜合癥)、和相關(guān)病癥，以及用于調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性，預(yù)防HCV，或改善丙型肝炎的一種或多種癥狀。式1的化合物可用于生產(chǎn)用于治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的藥物，例如，該方法包括使式1的化合物與可藥用載體密切接觸。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包括本發(fā)明的一種或多種化合物作為活性組分的藥用組合物。藥用組合物通常另外包含至少一種可藥用載體稀釋劑、賦形劑或載體(在本文中統(tǒng)稱為載體材料)。由于它們的HCV抑制活性，這種藥用組合物在治療丙型肝炎和相關(guān)病癥中具有實(shí)用性。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了制備包括本發(fā)明的化合物作為活性組分的藥用組合物的方法。在本發(fā)明的藥用組合物和方法中，典型地將活性組分以與適當(dāng)載體材料的混合物的形式給藥，載體材料根據(jù)預(yù)期給藥形式進(jìn)行適當(dāng)?shù)剡x擇，所述給藥形式即口服片劑、膠囊(固體填充型、半固體填充型或液體填充型)、用于重構(gòu)的粉末劑、口服凝膠劑、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿劑、懸浮液等，并與常規(guī)的藥學(xué)實(shí)踐一致。例如，對于以片劑或膠囊形式的口服給藥，可以將活性藥物組分與任何口服無毒性的可藥用惰性載體組合，所述載體如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露醇、乙醇(液體形式)等。此外，當(dāng)期望或需要時，還可能將適當(dāng)?shù)恼澈蟿?、潤滑劑、崩解劑和著色劑混合到混合物中。粉末劑和片劑可包括約5到約95％的本發(fā)明的組合物。適當(dāng)?shù)恼澈蟿┌ǖ矸?、明膠、天然糖類、玉米甜味劑、天然和合成的膠類如阿拉伯膠、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟。在潤滑劑中，用于這些劑型的可提及硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。如果適合的話也可包括甜味劑和調(diào)味劑及防腐劑。上述的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑等，在以下更詳細(xì)地討論。另外，本發(fā)明的組合物可以配制為持續(xù)釋放形式，以提供任何的一種或多種組分或活性組分的速率受控釋放，以使治療作用即HCV抑制活性等達(dá)最優(yōu)化。用于持續(xù)釋放的適當(dāng)?shù)膭┬桶ň哂胁煌澜馑俾实膶拥亩鄬悠?layeredtables)或受控釋放聚合物基質(zhì)，該基質(zhì)滲入活性組分并成形為含有這種滲入的或囊封的多孔性聚合物基質(zhì)的片劑或膠囊。液態(tài)制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。例如可提及，水或水-丙二醇溶液用于非腸道注射，或添加甜味劑和慰撫劑(pacifier)用于口服溶液、懸浮液和乳液。液態(tài)制劑也可包括用于鼻內(nèi)給藥的溶液。適合于吸入的氣霧劑制劑可包括溶液和粉末形式固體劑，它們可與可藥用載體如情性壓縮氣體如氮?dú)饨M合。為了制備栓劑，首先將低熔點(diǎn)蠟如脂肪酸甘油酯如可可脂的混合物熔化，然后通過攪拌或類似的混合使活性組分均一分散在其中。然后將熔融的均一混合物傾倒在適宜大小的模具中，使其冷卻并從而固化。還包括用于在即將使用時轉(zhuǎn)換為用于口服或非腸道給藥的液態(tài)制劑的固態(tài)制劑。這種液態(tài)制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。本發(fā)明的化合物也可經(jīng)皮遞送。經(jīng)皮組合物可為霜劑、洗劑、氣霧劑和/或乳劑的形式，并且可能包括在本領(lǐng)域中用于此目的而常規(guī)使用的基質(zhì)型或儲庫型透皮貼片中。本發(fā)明的化合物也可口服、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)或皮下給藥。本發(fā)明的化合物也可包含單元劑型的制劑。在這種劑型中，制劑被細(xì)分為包含適當(dāng)量(如實(shí)現(xiàn)所需目的有效量)的活性組分的適當(dāng)大小的單元劑量。在單元劑量的制劑中，本發(fā)明的活性組合物的量通?？刹煌?、或根據(jù)特定應(yīng)用有所調(diào)節(jié)，為約1.0毫克到約1,000毫克，優(yōu)選約1.0到約950毫克，更優(yōu)選約1.0到約500毫克，并且典型地約1到約250毫克。采用的實(shí)際劑量可隨著患者的年齡、性別、體重和待治療狀況的嚴(yán)重程度的不同而不同。這種技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知。通常，包含活性組分的人用口服劑型可以每天給藥1或2次。給藥量和給藥頻率根據(jù)主治臨床醫(yī)師的判斷進(jìn)行調(diào)節(jié)。用于口服給藥的通常建議的日劑量給藥方案可為以單次或多次的形式每天給藥約1.0毫克到約1,000毫克。一些有用的術(shù)語描述如下膠囊—是指由甲基纖維素、聚乙烯醇、或變性明膠或淀粉制成的用于保持或裝有含活性組分的組合物的特定容器或外殼。硬殼膠囊典型地由相對較高膠凝強(qiáng)度的骨架和豬皮明膠的共混物構(gòu)成。膠囊本身可包含少量的染料、霧濁劑(opaquingagent)、增塑劑和防腐劑。片劑—是指包含活性組分與適當(dāng)稀釋劑的壓制或模制而成的固體劑型。片劑可通過壓縮混合物或顆粒制備，所述顆粒通過濕法造粒、干法造?；蛲ㄟ^壓縮獲得?？诜z—是指活性組分分散或溶解在親水型的半固體基質(zhì)中。用于重構(gòu)的粉末是指可懸浮在水或果汁中的包含活性組分和適當(dāng)稀釋劑的粉末共混物。稀釋劑—是指通常構(gòu)成組合物或劑型的主要部分的物質(zhì)。適當(dāng)?shù)南♂寗┌ㄌ穷悾缛樘?、蔗糖、甘露醇和山梨醇；來源于小麥、玉米、水稻、和馬鈴薯的淀粉；和纖維素類，如微晶纖維素。組合物中稀釋劑的量可為總組合物的約10到約90重量％，優(yōu)選約25到約75重量％，更優(yōu)選約30到約60重量％，更優(yōu)選約12到約60重量％。崩解劑—是指被加到組合物中以幫助其分裂(崩解)并釋放藥物的材料。適當(dāng)?shù)谋澜鈩┌ǖ矸?；“冷水可溶的”改性淀粉如羧甲基淀粉鈉；天然和合成的膠類，如刺槐豆膠、刺梧桐樹膠、瓜爾膠、黃著膠和瓊脂；纖維素衍生物，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；海藻酸類，如海藻酸和海藻酸鈉；粘土，如膨潤土；和泡騰混合物。組合物中崩解劑的量可為組合物的約2到約15重量％，更優(yōu)選約4到約10重量％。粘合劑—是指將粉末結(jié)合或“膠合”在一起并通過形成顆粒使它們具有內(nèi)聚性的物質(zhì)，因此充當(dāng)制劑中的“粘著劑”。粘合劑增加已經(jīng)在稀釋劑或增量劑中得到的內(nèi)聚強(qiáng)度。適當(dāng)?shù)恼澈蟿┌ㄌ穷悾缯崽?；來源于小麥、玉米、水稻和馬鈴薯的淀粉；天然的膠類，如阿拉伯膠、明膠和黃著膠；海藻的衍生物，如海藻酸、海藻酸鈉、和海藻酸銨鈣；纖維素材料，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉及羥丙甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；和無機(jī)物，如硅酸鎂鋁。組合物中粘合劑的量可為組合物的約2到約20重量％，更優(yōu)選約3到約10重量％，更優(yōu)選約3到約6重量％。潤滑劑—是指被加入到劑型中通過減少摩擦或磨損使得片劑、顆粒等在壓縮后從模具或模頭釋放的物質(zhì)。適當(dāng)?shù)臐櫥瑒┌ń饘儆仓猁}，如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點(diǎn)的蠟；和水溶性潤滑劑，如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇、和d’1-亮氨酸。潤滑劑通常在壓縮前的最后一個步驟被加入，因?yàn)樗鼈儽仨毚嬖谟陬w粒的表面上以及存在于顆粒與壓片機(jī)部件之間。組合物中潤滑劑的量可為組合物的約0.2到約5重量％，更優(yōu)選約0.5到約2重量％，更優(yōu)選約0.3到約1.5重量％。助流劑(glident)—防止結(jié)塊并改善顆粒流動特性使得流動平滑和均勻的物質(zhì)。適當(dāng)?shù)闹鲃┌ǘ趸韬突＝M合物中助流劑的量可為總組合物的約0.1％到約5重量％，優(yōu)選約0.5到約2重量％。著色劑—為組合物或劑型提供顏色的賦形劑。這種賦形劑可以包括食品級染料以及被吸附到適當(dāng)?shù)奈絼┤缯惩粱蜓趸X上的食品級染料。著色劑的量可為組合物的約0.1到約5重量％，優(yōu)選約0.1到約1重量％。生物利用度—是指，與標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ障啾?，活性藥物組分或治療部分從給藥劑型被吸收到體循環(huán)中的速率和程度。制備片劑的常規(guī)方法是公知的。這種方法包括干法(如直接壓片法，和壓縮由壓縮產(chǎn)生的顆粒)、或濕法或其它具體過程。用于生產(chǎn)其它給藥劑型諸如例如膠囊、栓劑等的常規(guī)方法也是公知的。本發(fā)明的另一個實(shí)施方案公開了上述公開的本發(fā)明的化合物或藥用組合物用于治療疾病諸如例如丙型肝炎等的應(yīng)用。該方法包括對患有這種疾病和需要這種治療的患者給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物或藥用組合物。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可用于以單一治療模式或以聯(lián)合治療(如二元聯(lián)合、三元聯(lián)合等)模式治療人的HCV，聯(lián)合治療諸如例如與抗病毒劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑的聯(lián)合治療。這類抗病毒劑和/或免疫調(diào)節(jié)劑的例子包括利巴韋林(得自Schering-PloughCorporation，Madison，NewJersey)和LevovirinTM(得自ICNPharmaceuticals，CostaMesa，California)、VP50406TM(得自Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS14803TM(得自ISISPharmaceuticals，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(得自RibozymePharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX497TM(得自VertexPharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、ThymosinTM(得自SciClonePharmaceuticals，SanMateo，California)、MaxamineTM(MaximPharmaceuticals，SanDiego，California)、嗎替麥考酚酯(得自Hoffman-LaRoche，Nutley，NewJersey)、干擾素(諸如例如干擾素-α、PEG-干擾素α結(jié)合物)等?！癙EG-干擾素α結(jié)合物”為共價結(jié)合于PEG分子的干擾素α分子。示例性的PEG-干擾素α結(jié)合物包括PEG化(Pegylated)干擾素α-2a(如，在商品名PegasysTM下銷售的)的形式的干擾素α-2a(RoferonTM，得自HoffmanLa-Roche，Nutley，NewJersey)、PEG化干擾素α-2b(如，在商品名PEG-IntronTM下銷售的)的形式的干擾素α-2b(introTM，得自Schering-PloughCorporation)，干擾素α-2c(BeroforAlphaTM，得自BoehringerIngelheim，Ingelheim，Germany)、或通過測定天然存在的干擾素α的共有序列所定義的組合干擾素(consensusinterferon)(InfergenTM，得自Amgen，ThousandOaks，California)。如前所述，本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的互變異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、對映異構(gòu)體和其它立體異構(gòu)體。因此，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的，一些本發(fā)明的化合物可存在有適當(dāng)?shù)耐之悩?gòu)形式。這種變化也被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明的另一個實(shí)施方案公開了本文公開的化合物的生產(chǎn)方法?；衔锟赏ㄟ^本領(lǐng)域中已知的多種技術(shù)制備。示例性的方法在以下反應(yīng)圖解中說明。不應(yīng)將這些示例性說明看作是對權(quán)利要求中所定義的本發(fā)明范圍的限制。替代性機(jī)理路線和類似結(jié)構(gòu)對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。應(yīng)該理解，雖然以下示例性的圖解描述了本發(fā)明的一些代表性化合物的制備，但是天然和非天然氨基酸兩者中任一種的適當(dāng)替換都將形成基于這種替換的所需化合物。這種變化也被考慮為在本發(fā)明的范圍內(nèi)。對于如下所述的過程，使用了以下縮寫THF四氫呋喃DMFN，N-二甲基甲酰胺EtOAc乙酸乙酯AcOH乙酸HOOBt3-羥基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCI1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽NMMN-甲基嗎啉ADDDP1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶DEAD偶氮二甲酸二乙酯MeOH甲醇EtOH乙醇Et2O乙醚DMSO二甲基亞砜HOBtN-羥基苯并三唑PyBrOP溴代-三吡咯烷基六氟磷酸鹽DCM二氯甲烷DCC1，3-二環(huán)己基碳二亞胺TEMPO2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基Phg苯基甘氨酸Chg環(huán)己基甘氨酸Bn芐基Bz1芐基Et乙基Ph苯基iBoc異丁氧羰基iPr異丙基tBu或But叔丁基Boc叔丁氧羰基Cbz芐氧羰基Cp環(huán)戊二烯基Ts對甲苯磺?；鵐e甲基HATUO-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸鹽DMAP4-N，N-二甲氨基吡啶BOP苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸酯PCC氯鉻酸吡啶KHMDS六甲基二甲硅烷基疊氮化鉀或雙(三甲基甲硅烷基氨基)鉀NaHMDS六甲基二甲硅烷基疊氮化鈉或雙(三甲基甲硅烷基氨基)鈉LiHMDS六甲基二甲硅烷基疊氮化鋰或雙(三甲基甲硅烷基氨基)鋰10％Pd/C10％的碳載鈀(以重量計)制備例1步驟A將吡嗪羧酸1a(3g)在150mL無水二氯甲烷和150mL無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，6.03g)處理。少量多次加入L-環(huán)己基甘氨酸鹽酸鹽1b(1.2eq，6.03g)。然后，滴加N-甲基嗎啉(4eq，10mL，d0.920)。使反應(yīng)混合物逐漸地回溫到室溫并攪拌20小時。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于500mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(100mL)、1NHCl水溶液(100mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)、和鹽水(100mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；5∶95到3∶7)，得到產(chǎn)物，為白色固體。步驟B將甲酯1c(6.5g)在270mL的THF/MeOH/水為1∶1∶1的混合物中的溶液冷卻到0℃并用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，2.45g)處理。攪拌混合物并通過TLC(丙酮/己烷；2∶8)監(jiān)控。當(dāng)所有的起始原料已經(jīng)耗盡時，將反應(yīng)混合物用100mL的1NHCl水溶液處理并將混合物旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。加入二氯甲烷(250mL)并分層。水層用二氯甲烷提取(3×80mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到產(chǎn)物，為白色固體。步驟C根據(jù)R.Zhang和J.S.Madalengoitia(J.Org.Chem.1999，64，330)的方法制備氨基酯1e，不同之處在于，通過被Boc保護(hù)的氨基酸與甲醇-HCl(還采用含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷用于脫保護(hù))反應(yīng)使Boc基團(tuán)斷裂。(注釋在報導(dǎo)的合成的變體中，硫內(nèi)鹽被替換為相應(yīng)的磷內(nèi)鹽)。步驟D將Boc-tert-Leu1f(Fluka，5.0g，21.6mmol)在無水CH2Cl2/DMF(50mL，1∶1)中的溶液冷卻到0℃并用胺鹽酸鹽1f(5.3g，25.7mmol)、NMM(6.5g，64.8mmol)和BOP試劑(11.6g，25.7mmol)處理。將反應(yīng)在室溫下攪拌24小時，用HCl水溶液(1M)稀釋并用CH2Cl2提取。合并的有機(jī)層用1MHCl水溶液、飽和NaHCO3、鹽水洗，干燥(MgSO4)，過濾并真空濃縮和通過色譜法純化(SiO2，丙酮/己烷1∶5)，得到1g，為無色固體。步驟E將甲酯1g(4.0g，10.46mmol)溶解于含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷中并將溶液在室溫攪拌3小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮以得到胺鹽酸鹽1h，其不經(jīng)純化使用。步驟F將酸1d(100mg)在5mL無水二氯甲烷和5mL無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，202mg)處理。加入胺鹽酸鹽1h(1.2eq，146mg)。然后，再滴加N-甲基嗎啉(4eq，0.17mL，d0.920)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌過夜。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于80mL乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到4∶6)，得到產(chǎn)物1i，為白色固體。步驟G將甲酯1i(180mg)在9mL的THF/MeOH/水為1∶1∶1的混合物中的溶液冷卻到0℃并用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，35mg)處理。攪拌混合物并通過TLC(丙酮/己烷；3∶7)監(jiān)控。當(dāng)所有的起始原料已經(jīng)耗盡時，將反應(yīng)混合物用50mL的1NHCl水溶液處理并將混合物旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。加入二氯甲烷(80mL)并分層。水層用二氯甲烷提取(3×50mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到產(chǎn)物1j，為白色固體。步驟H將酸1k(2g)在100mL的無水二氯甲烷和5mL的DMF中的溶液用N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.1eq，986mg)、BOP試劑(1.1eq，4.47g)、和N-甲基嗎啉(3.3eq，3.3mL，d0.920)以所述順序處理。將混合物加熱到50℃過夜。將反應(yīng)混合物濃縮到其體積一半的量并用400mL乙酸乙酯稀釋。有機(jī)層用水(80mL)、1MHCl水溶液(80mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(80mL)和鹽水(80mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；5∶95到3∶7)，得到產(chǎn)物1l，為透明的油狀物。步驟I將酰胺1l(2.2g)在100mL無水THF中的溶液冷卻到℃。滴加氫化鋁鋰溶液(1.3eq)。在5分鐘之后除去冷卻浴并使混合物回溫到室溫。TLC分析(乙酸乙酯/己烷；2∶8)表明所有的起始原料已經(jīng)耗盡。通過滴加飽和硫酸氫鈉水溶液小心地淬滅過量的LAH?；旌衔镉?00mL的乙醚稀釋并少量多次加入飽和硫酸氫鈉水溶液直到沉淀出白色固體。將混合物通過硅藻土過濾并將濾液用50mL鹽水洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度乙酸乙酯/己烷；5∶95到4∶6)，得到產(chǎn)物1m，為無色的油狀物。步驟J將醛1m(1.8g)在100mL無水二氯甲烷中的溶液用異腈(1.1eq，680mg)和乙酸(2eq，1.02mL，d1.0149)處理。將混合物攪拌過夜。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物在硅膠上色譜分離(梯度乙酸乙酯/己烷；2∶8到6∶4)，得到產(chǎn)物1n，為白色固體。步驟K將乙酸酯1o(1.6g)在60mLTHF/MeOH/水為1∶1∶1的混合物中的溶液用氫氧化鋰一水合物處理并攪拌約1小時，直到通過TLC分析(乙酸乙酯/己烷；1∶1)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物用二氯甲烷(150mL)稀釋。分層并將水層用30mL的飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋并用二氯甲烷提取(3×80mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到產(chǎn)物1p，為白色固體。步驟L將被N-Boc保護(hù)的胺1p(1.5g)溶解于20mL含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷中。將反應(yīng)混合物攪拌約1小時，直到所有的起始原料已經(jīng)耗盡。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)，得到產(chǎn)物1q，為白色固體。步驟M將酸1j(50mg)在2mL的無水二氯甲烷和2mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，52mg)處理。加入胺鹽酸鹽1q(1.2eq，26mg)。然后，再加入N-甲基嗎啉(4eq，0.042mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌過夜。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于80mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。產(chǎn)物1r不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟N將醇1r(65mg)在5mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(Dess-Martinperiodinane)(3eq，121mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)處理并攪拌15分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×20mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到5∶5)，得到產(chǎn)物1，為白色固體。HRMS(FAB)C36H54N7O6[M+H]的計算值680.4136；實(shí)測值680.4131。制備例2步驟A向4-戊炔-1-醇2a(4.15g；Aldrich)的溶液中加入戴斯-馬丁過碘烷(30.25g；Aldrich)并將得到的混合物攪拌45分鐘，然后加入(叔丁氧羰基亞甲基)三苯正膦(26.75g；Aldrich)。將得到的深色反應(yīng)攪拌過夜，用乙酸乙酯稀釋，用亞硫酸鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、水、鹽水洗并干燥。減壓除去揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物通過硅膠柱色譜法純化，使用含1％乙酸乙酯的己烷作為洗脫液，得到所需的化合物2b(3.92g)。還得到一些不純的級分，此時將其放在一旁。步驟B使用在正丙醇(20mL；Aldrich))中的烯2b(1.9g)、在正丙醇(40mL)中的氨基甲酸芐酯(4.95g；Aldrich)、在水(79ml)中的NaOH(1.29g)、次氯酸叔丁酯(3.7ml)、在正丙醇(37.5ml)中的(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)和鋨酸鉀脫水物(0.1544g；Aldrich)，過程如Angew.Chem.Int.Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，第2813-7頁中所述，得到粗產(chǎn)物，其通過硅膠柱色譜法純化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)洗脫，得到所需的氨基醇2c(1.37g，37％)，為白色固體。步驟C向酯2c(0.700g)中加入含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷(20ml；Aldrich)并將得到的混合物在室溫靜置過夜。減壓除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到酸2d(0.621g)，為白色固體。步驟D在室溫下將BOP試劑(3.65g；Sigma)加入到羧酸2d(2.00g)和烯丙胺(0.616ml)的二氯甲烷(20ml)溶液中，隨后加入三乙胺(3.45ml)，并將得到的混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物在EtOAc和10％HCl水溶液之間分配。分離有機(jī)相，用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗，干燥(硫酸鎂)。粗反應(yīng)產(chǎn)物通過硅膠柱色譜法純化，使用(EtOAc∶己烷；70∶30)作為洗脫液，得到所需的酰胺2e(1.73g)，為粘稠的黃色油狀物。步驟E將N-Cbz胺2e(85.8mg)在5mL的三氟乙酸/甲硫醚為4∶1的混合物中的溶液在室溫下攪拌約3小時。減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)。將產(chǎn)物2f置于高真空下約3小時，并且不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟F將酸1j(50mg)在2mL的無水二氯甲烷2mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，72mg)處理。加入在二氯甲烷中的胺鹽2f(1.3eq，72mg)。然后，再加入N-甲基嗎啉(4eq，0.042mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于80mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。產(chǎn)物2g不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟G將羥基酰胺2g(67mg)在5mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，123mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)處理并攪拌15分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×20mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到4∶6)，得到產(chǎn)物2，為白色固體。HRMS(FAB)C34H52N7O6[M+H]的計算值690.3979；實(shí)測值690.3995。制備例3步驟A將被N-Boc保護(hù)的胺3a(3g)溶解于60mL的含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷溶液中。混合物在室溫下攪拌，直到通過TLC(乙酸乙酯/己烷；6∶4)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。在2小時之后，減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)，得到產(chǎn)物3b(2.4g，98％)，為白色固體，其不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將酸1j(150mg)在3mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，155mg)處理。加入胺鹽酸鹽3b(88mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.13mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(8mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物3c(210mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟C將羥基酰胺3c(214mg)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，371mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到45∶55)，得到產(chǎn)物3，為半固體，將其溶解于2mL的二氯甲烷和10mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物3，為白色固體(150mg，兩步收率為70％)。HRMS(FAB)C36H51F3N7O6[M+H]的計算值734.3853；實(shí)測值734.3850。制備例4步驟A將酸1j(150mg)在3mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，155mg)處理。加入胺鹽酸鹽4a(71mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.13mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(8mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物4b(190mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺4b(199mg)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，371mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘。混合物用二氯甲烷提取(3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到4∶6)，得到產(chǎn)物4，為半固體，將其溶解于2mL的二氯甲烷和10mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物4，(150mg，兩步收率為76％)，為白色固體。HRMS(FAB)C36H54N7O6[M+H]的計算值680.4136；實(shí)測值680.4165。制備例5步驟A將酸1j(150mg)在3mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，155mg)處理。加入胺鹽酸鹽5a(76mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.13mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(8mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物5b(200mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺5b(202mg)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，371mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到45∶55)，得到產(chǎn)物5，為半固體，將其溶解于2mL的二氯甲烷和10mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物5，(170mg，兩步收率為84％)，為白色固體。HRMS(FAB)C37H56N7O6[M+H]的計算值694.4292；實(shí)測值694.4294。制備例6步驟A將酸1j(150mg)在3mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，155mg)處理。加入胺鹽酸鹽6a(80mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.13mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(8mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物6b(205mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺6b(206mg)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，371mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到45∶55)，得到產(chǎn)物6，為半固體，將其溶解于2mL的二氯甲烷和10mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物6，(169mg，兩步收率為82％)，為白色固體。HRMS(FAB)C38H56N7O6[M+H]的計算值706.4292；實(shí)測值706.4280。制備例7步驟A將酸1j(80mg)在3mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，83mg)處理。加入胺鹽酸鹽7a(1.1eq，40mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.07mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(10mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(8mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物7b(105mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺7b(108mg)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(3eq，198mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到45∶55)，得到產(chǎn)物7，為半固體，將其溶解于2mL的二氯甲烷和10mL的己烷中。減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物7，(86mg，兩步收率為80％)，為白色固體。HRMS(FAB)C39H54N7O6[M+H]的計算值692.4136；實(shí)測值692.4145。制備例8步驟A將吡啶甲酸8a(1.0g)在50mL的無水二氯甲烷和50mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，4.3g)處理。加入環(huán)己基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(1.1eq，1.85克)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，3.6mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于500mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(100mL)、1NHCl水溶液(100mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)、和鹽水(100mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；5∶95到35∶65)，得到產(chǎn)物8c(1.9g，85％)，為透明的半固體。步驟B將甲酯8c(1.9g)在THF/MeOH/H2O(100∶100∶50)中的溶液在0℃下用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，2.82g)處理。反應(yīng)混合物被攪拌，直到通過TLC分析(丙酮/己烷；15∶85)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。反應(yīng)混合物用100mL的1NHCl水溶液處理(混合物的pH變?yōu)榧s1)并且減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)。殘余物用二氯甲烷提取(3×100mL)。將合并的有機(jī)提取液用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物8d(1.6g，90％)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟C將酸8d(235mg)在10mL的無水DMF和10mL的二氯甲烷中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，480mg)處理。加入胺鹽1h(1.1eq，300mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.4mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于100mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(20mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；5∶95到4∶6)，得到產(chǎn)物8e(440mg，93％)。步驟D將甲酯8e(440mg)在30mL的THF/MeOH/H2O混合物(1∶1∶1)中的溶液在0℃下用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，88mg)處理。反應(yīng)混合物被攪拌，直到通過TLC(丙酮/己烷；3∶7)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。反應(yīng)混合物用20mL的1NHCl水溶液處理(混合物的pH變?yōu)榧s1)并且減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)。殘余物用二氯甲烷提取(3×60mL)。將合并的有機(jī)提取液用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物8f(419mg，98％)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟E將酸8f(80mg)在2mL的無水二氯甲烷和1mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，83mg)處理。加入胺鹽1g(1.1eq，38mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.07mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物8g(105mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟F將羥基酰胺8g(0.156mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.3eq，152mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到45∶55)，得到產(chǎn)物8，為固體，將其溶解于0.5mL的二氯甲烷和5mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物8，(59mg，兩步收率為56％)，為白色固體。HRMS(FAB)C37H55N6O6[M+H]的計算值679.4183；實(shí)測值679.4191。制備例9步驟A將酸8f(80mg)在2mL的無水二氯甲烷和1mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，83mg)處理。加入胺鹽4a(1.1eq，38mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.07mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物9a(105mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺9a(0.156mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.3eq，152mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到4∶6)，得到產(chǎn)物9，為固體，將其溶解于0.5mL的二氯甲烷和5mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物9，(68mg，兩步收率為64％)，為白色固體。HRMS(FAB)C37H55N6O6[M+H]的計算值679.4183；實(shí)測值679.4181。制備例10步驟A將酸8f(80mg)在2mL的無水二氯甲烷和1mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，83mg)處理。加入胺鹽5a(1.1eq，41mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.07mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物10a(105mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺10a(0.156mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.3eq，152mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到4∶6)，得到產(chǎn)物10，為固體，將其溶解于0.5mL的二氯甲烷和5mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物10，(68mg，兩步收率為63％)，為白色固體。HRMS(FAB)C38H57N6O6[M+H]的計算值693.4340；實(shí)測值693.4310。制備例11步驟A將N-Boc-環(huán)己基-甘氨酸11a(916mg)在20mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，1.89g)處理。加入在30mL無水二氯甲烷中的胺鹽1h(1.1eq，1.2g)隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，1.55mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于250mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(100mL)、1NHCl水溶液(50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)、和鹽水(50mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；5∶95到25∶75)，得到產(chǎn)物11b(1.65g，89％)，為白色固體。步驟B將甲酯11b(1.64mg)在60mL的THF/MeOH/H2O混合物(1∶1∶1)中的溶液在0℃下用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，330mg)處理。除去冷卻浴并將反應(yīng)混合物攪拌，直到通過TLC(丙酮/己烷；3∶7)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。反應(yīng)混合物用50mL的1NHCl水溶液處理(混合物的pH變?yōu)榧s1)并且減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)。殘余物用二氯甲烷提取(3×100mL)。將合并的有機(jī)提取液用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。得到產(chǎn)物11c，為白色固體(1.61g，98％)，其不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟C將酸11c(248mg)在10mL的無水二氯甲烷和5mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，120mg)處理。加入胺鹽1g(1.1eq，120mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.22mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于150mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(40mL)、1NHCl水溶液(20mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)、和鹽水(20mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物11d(330mg)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟D將羥基酰胺11d(0.489mmol)在20mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.3eq，152mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到4∶6)，得到產(chǎn)物11e，為固體，將其溶解于1mL的二氯甲烷和8mL的己烷中，減壓除去溶劑，得到產(chǎn)物11e，(280mg，兩步收率為85％)，為白色固體。HRMS(FAB)C36H60N5O7[M+H]的計算值674.4492；實(shí)測值674.4507。制備例12步驟A將被N-Boc保護(hù)的胺11(80mg)溶解于5mL甲酸中。將得到的溶液在室溫下攪拌，直到通過TLC(丙酮/己烷；3∶7)測定所有的起始原料已經(jīng)耗盡。在4小時之后，減壓除去揮發(fā)性物質(zhì)，并將殘余物置于高真空下。沒有對產(chǎn)物12a(70mg，98％)進(jìn)行進(jìn)一步的純化。步驟B將胺鹽12a(0.118mmol)溶解于5mL的無水二氯甲烷中并冷卻到0℃。加入N-甲基嗎啉(2.5eq，0.032mL，d0.920)，隨后加入在2mL無水二氯甲烷中的新戊酸酐(1.2eq，0.028mL，d0.910)。將混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。反應(yīng)混合物用50mL二氯甲烷稀釋。溶液用10mL的1MHCl水溶液、10mL的飽和碳酸氫鈉水溶液、和10mL的鹽水洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到1∶1)，得到產(chǎn)物12(28mg，36％)，為白色固體。HRMS(FAB)C36H60N5O6[M+H]的計算值658.4543；實(shí)測值658.4558。制備例13步驟A將酸1d(90mg)在5mL的無水二氯甲烷和3mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，180mg)處理。加入胺鹽酸鹽13a(1.0eq，128mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.15mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于80mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(15mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL)、和鹽水(15mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；1∶9到4∶6)，得到產(chǎn)物13b(160mg，80％)，為白色固體。步驟B將甲酯13b(160mg)溶解于15mL的THF/甲醇/水為1∶1∶1的混合物中并在0℃用氫氧化鋰一水合物(2.5eq，28mg)處理。使反應(yīng)混合物逐漸地升溫最高到室溫并攪拌2小時直到所有的起始原料已經(jīng)耗盡。加入1MHCl水溶液(30mL)并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)。殘余物用二氯甲烷提取(3×30mL)。將合并的有機(jī)提取液用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物13c(150mg，98％)不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟C將酸13c(75mg)在4mL的無水二氯甲烷和2mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，69mg)處理。加入胺鹽酸鹽7a(1.2eq，37mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.06mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物13d不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟D將羥基酰胺13d(0.130mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.0eq，110mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到5∶5)，得到產(chǎn)物13(69mg，兩步收率為70％)，為白色固體。HRMS(FAB)C42H54N7O6[M+H]的計算值752.4136；實(shí)測值752.4122。制備例14步驟A將酸13c(75mg)在4mL的無水二氯甲烷和2mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，69mg)處理。加入胺鹽酸鹽4a(1.2eq，35mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.06mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物14a不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺14a(0.130mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.0eq，110mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔镉?M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘?；旌衔镉枚燃淄樘崛?3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到5∶5)，得到產(chǎn)物14(66mg，兩步收率為69％)，為白色固體。HRMS(FAB)C41H54N7O6[M+H]的計算值740.4136；實(shí)測值740.4146。制備例15步驟A將被N-Boc保護(hù)的胺11溶解于5mL的含4MHCl的二氧雜環(huán)己烷溶液中。將得到的溶液在室溫下攪拌約45分鐘。減壓除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)，得到產(chǎn)物15a(60mg，98％)，為白色固體。沒有對產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化。步驟B將煙酸15b(12mg)在1mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，54mg)處理。加入在3mL無水二氯甲烷中的胺鹽酸鹽15a(1.0eq，62mg)隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.05mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到1∶1)，得到產(chǎn)物15(16mg，23％)，為白色固體。HRMS(FAB)C37H55N6O6[M+H]的計算值679.4183；實(shí)測值679.4193。制備例16步驟A將酸1j(80mg)在2mL的無水二氯甲烷和2mL的無水DMF中的溶液在0℃攪拌并用HATU(1.4eq，83mg)處理。加入胺鹽酸鹽16a(1.2eq，40mg)，隨后加入N-甲基嗎啉(4eq，0.07mL，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度為0-25℃)。真空除去所有的揮發(fā)性物質(zhì)并將殘余物溶解于50mL的乙酸乙酯中。有機(jī)層用水(20mL)、1NHCl水溶液(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)、和鹽水(10mL)洗。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮。粗產(chǎn)物16b不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。步驟B將羥基酰胺16b(0.155mmol)在10mL的無水二氯甲烷中的溶液用戴斯-馬丁過碘烷(2.0eq，131mg)處理。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。混合物用1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理并攪拌5分鐘。再加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)并繼續(xù)攪拌另外的10分鐘。混合物用二氯甲烷提取(3×30mL)。將合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘余物在硅膠上色譜分離(梯度丙酮/己烷；2∶8到5∶5)，得到產(chǎn)物16(55mg，兩步收率為51％)，為白色固體。HRMS(FAB)C37H56N7O6[M+H]的計算值694.4292；實(shí)測值694.4310。本發(fā)明涉及新的HCV蛋白酶抑制劑。該實(shí)用性可以通過它們抑制HCVNS2/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力得以證明。用于這種證明的一般過程在以下體外試驗(yàn)中詳述。HCV蛋白酶抑制活性試驗(yàn)分光光度試驗(yàn)對本發(fā)明化合物的HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度試驗(yàn)根據(jù)由R.Zhang等人的AnalyticalBiochemistry，270(1999)268-275所述的過程進(jìn)行，其公開內(nèi)容被并入本文作為參考。基于發(fā)色酯底物的蛋白水解的試驗(yàn)適合于HCVNS3蛋白酶活性的連續(xù)監(jiān)測。底物來自NS5A-NS5B結(jié)合序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P側(cè)，其C端的羧基被四個不同的發(fā)色醇(3-或4-硝基酚、7-羥基-4-甲基香豆素、或4-苯基偶氮苯酚)中的一種酯化。以下說明的是這些新的分光光度酯底物的合成、表征和關(guān)于高通量篩選的應(yīng)用，以及HCVNS3蛋白酶抑制劑的詳細(xì)的動力學(xué)評價。材料和方法材料用于試驗(yàn)相關(guān)緩沖液的化學(xué)試劑得自SigmaChemicalCompany(St.Louis，Missouri)。用于肽合成的試劑得自AldrichChemicals，Novabiochem(SanDiego，California)、AppliedBiosystems(FosterCity，California)和PerseptiveBiosystems(Framingham，Massachusetts)。肽為手動合成或在自動ABI型431A合成儀(得自AppliedBiosystems)上合成。LAMBDA12型UV/VIS分光計得自PerkinElmer(Norwalk，Connecticut)，96孔UV板得自Corning(Corning，NewYork)。預(yù)熱模塊得自USAScientific(Ocala，F(xiàn)lorida)，96孔板渦旋器得自LablineInstruments(MelrosePark，Illinois)。具有單色儀的SpectramaxPlus微量滴定板讀數(shù)器得自MolecularDevices(Sunnyvale，California)。酶的制備使用早已公開的方法(D.L.Sali等人，Biochemistry，37(1998)3392-3401)制備重組雜二聚體HCVNS3/NS4A蛋白酶(品系1a)。蛋白質(zhì)濃度通過Biorad染色方法測定，該方法使用預(yù)先用氨基酸分析進(jìn)行定量的重組HCV蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)物。在試驗(yàn)開始之前，使用BioradBio-SpinP-6預(yù)填充柱將酶儲存緩沖液(50mM磷酸鈉pH8.0、300mMNaCl、10％甘油、0.05％十二烷基麥芽糖苷和10mMDTT)交換為試驗(yàn)緩沖液(25mMMOPSpH6.5、300mMNaCl、10％甘油、0.05％十二烷基麥芽糖苷、5μMEDTA、和5μMDTT)。底物的合成和純化底物的合成如R.Zhang等人，(同上文獻(xiàn))的報導(dǎo)進(jìn)行并且通過使用一般性草案(K.Barlos等人，Int.J.Pept.ProteinRes.，37(1991)，513-520)將Fmoc-Nva-OH錨定在2-氯三苯甲基氯樹脂上開始。隨后使用Fmoc化學(xué)法對肽進(jìn)行組裝，手動或在自動ABI型431肽合成儀上進(jìn)行。通過使用在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)進(jìn)行30分鐘、或通過在DCM中的2％三氟乙酸(TFA)進(jìn)行10分鐘，將N-乙酰化的并且被完全保護(hù)的肽片段從樹脂上斷裂。將合并的濾液和DCM洗液共沸蒸發(fā)(或反復(fù)地用Na2CO3水溶液提取)，以除去斷裂時使用的酸。將DCM相用Na2SO4干燥并蒸發(fā)。使用標(biāo)準(zhǔn)的酸-醇偶聯(lián)方法組裝酯底物(K.Holmber等人，ActaChem.Scand.，B33(1979)410-412)。將肽片段溶解于無水吡啶(30-60mg/ml)中，向其中加入10摩爾當(dāng)量的發(fā)色團(tuán)和催化量(0.1eq.)的對甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，3eq.)以引發(fā)偶聯(lián)反應(yīng)。通過HPLC監(jiān)控產(chǎn)物形成，發(fā)現(xiàn)在室溫下反應(yīng)12-72小時之后完成。將吡啶溶劑在真空下蒸發(fā)并且通過與甲苯共沸蒸發(fā)被進(jìn)一步除去。使用在DCM中的95％TFA進(jìn)行肽酯脫保護(hù)兩個小時并用無水乙醚提取三次以除去過量的發(fā)色團(tuán)。將脫保護(hù)的底物通過在C3或C8柱上的反相HPLC進(jìn)行純化，使用30％到60％乙腈梯度(使用六倍柱體積)。HPLC純化之后的總回收率為約20-30％。分子質(zhì)量可以通過電噴霧離子化質(zhì)譜法證實(shí)。將底物以干粉形式儲存在干燥條件下。底物和產(chǎn)物的光譜底物和相應(yīng)的發(fā)色團(tuán)產(chǎn)物的光譜在pH6.5的試驗(yàn)緩沖液中獲得。使用多次稀釋在1-cm比色杯中在最佳的非峰波長(對于3-Np和HMC為340nm，對于PAP為370nm，對于4-Np為400nm)測定消光系數(shù)。最佳的非峰波長定義為在底物和產(chǎn)物之間的吸光度得到最大分?jǐn)?shù)差的波長(產(chǎn)物OD-底物OD)/底物OD)。蛋白酶試驗(yàn)在30℃下在96孔微量滴定板中使用200μl反應(yīng)混合物進(jìn)行HCV蛋白酶試驗(yàn)。優(yōu)化NS3/NS4A雜二聚體的試驗(yàn)緩沖液條件(25mMMOPSpH6.5、300mMNaCl、10％甘油、0.05％十二烷基麥芽糖苷、5μMEDTA和5μMDTT)(D.L.Sali等人，同上文獻(xiàn))。典型地，將緩沖液、底物和抑制劑的150μl混合物置于孔中(DMSO的最終濃度≤4％v/v)并將其在30℃下預(yù)培養(yǎng)約3分鐘。然后使用50μl在試驗(yàn)緩沖液中的預(yù)熱蛋白酶(12nM，30℃)引發(fā)反應(yīng)(最終體積200μl)。在試驗(yàn)過程中(60分鐘)使用裝備有單色儀的SpectromaxPlus微量滴定板讀數(shù)器監(jiān)控板在適當(dāng)波長(3-Np和HMC為340nm，PAP為370nm，和4-Np為400nm)的吸光度變化(從使用截止濾光片的板讀數(shù)器得到可接受的結(jié)果)。在適當(dāng)?shù)牟ㄩL下相對于沒有酶的空白(作為無酶水解對照物)監(jiān)控Nva和發(fā)色團(tuán)之間酯鍵的蛋白水解斷裂。在30倍底物濃度范圍(～6-200μM)進(jìn)行底物動力學(xué)參數(shù)的評價。使用線性回歸測定初始速度，并且通過使用非線性回歸分析(MacCurveFit1.1，K.Raner)將數(shù)據(jù)擬合到米門方程式中得到動力學(xué)常數(shù)。假定酶具有完全活性時計算轉(zhuǎn)換數(shù)(kcat)。抑制劑和鈍化劑的評價根據(jù)以下用于競爭性抑制動力學(xué)的改進(jìn)米門方程式，通過將vo/vj對抑制劑濃度([I]0)繪圖，用實(shí)驗(yàn)方法測定在固定濃度的酶和底物條件下競爭性抑制劑Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常數(shù)(Kj)vo/vj＝1+[I]0/(Kj(1+[S]0/Km))，其中vo為未受抑制的初速度，vj為在任何給定的抑制劑濃度([I]0)的抑制劑存在下的初速度，和[S]0為使用的底物濃度。將得到的數(shù)據(jù)使用線性回歸進(jìn)行擬合并使用得到的斜率1/(Kj(1+[S]0/Km)計算Kj*值。如此得到的本發(fā)明的一些化合物的Ki*值如表2和表3中所示。表2范圍A≤100nM；B＞100nM≤1000nM；C＞1000nM。表3雖然已經(jīng)結(jié)合上述具體的實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但是其許多替代、改進(jìn)和其它變更對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。所有的這些替代、改進(jìn)和變更都落入本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)和范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.一種化合物，或所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、或外消旋物，或所述化合物的可藥用鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有式I所示的一般結(jié)構(gòu)式I其中R1為H、OR8、NR9R10、或CHR9R10，其中R8、R9和R10可相同或不同，各自獨(dú)立地選自H、烷基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、環(huán)烷基-、芳烷基-、和雜芳烷基；E和J可相同或不同，各自獨(dú)立地選自R、OR、NHR、NRR7、SR、鹵代、和S(O2)R，或者E和J可彼此直接連接以形成3-8元環(huán)烷基、或3-8元雜環(huán)基部分；Z為N(H)、N(R)、或O，條件是當(dāng)Z為O時，G存在或不存在，并且如果當(dāng)Z為O而G存在時，則G為C(＝O)；G可存在或不存在，并且如果G存在，則G為C(＝O)或S(O2)，并且當(dāng)G不存在時，Z與Y直接連接；Y選自R、R7、R2、R3、R4和R5可相同或不同，各自獨(dú)立地選自H、烷基-、烯基-、炔基-、環(huán)烷基-、雜烷基-、雜環(huán)基-、芳基-、雜芳基-、(環(huán)烷基)烷基-、(雜環(huán)基)烷基-、芳基-烷基-、和雜芳基-烷基-，其中每個所述的雜烷基、雜芳基和雜環(huán)基獨(dú)立地具有1-6個氧、氮、硫、或磷原子；其中每個所述的烷基、雜烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基部分可未被取代或任選地獨(dú)立地被一個或多個選自以下的部分取代烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、鹵代、羥基、硫代、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰胺基、酯、羧酸、氨基甲酸酯、脲、酮、醛、氰基、硝基、氨磺?；?、亞砜、砜、磺酰脲、酰肼、和異羥肟酸酯。2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NR9R10，R9為H，R10為H或R14，其中R14為烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基-、烷基-雜芳基-、芳基-烷基-、烯基、炔基、或雜芳基-烷基-。3.權(quán)利要求2的化合物，其中R14選自以下4.權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自以下部分5.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自以下其中R31為OH或O-烷基；和R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。6.權(quán)利要求5的化合物，其中R3選自以下7.權(quán)利要求1的化合物，其中選自以下其中Y31選自O(shè)R、NHR和NRR7，和Y32選自以下8.權(quán)利要求1的化合物，其中Z為NH。9.權(quán)利要求1的化合物，其中Z為N(R)。10.權(quán)利要求1的化合物，其中Z為O，G存在或不存在，并且如果G存在，則G為C(＝O)。11.權(quán)利要求1的化合物，其中G存在并且為C(＝O)或S(O2)。12.權(quán)利要求1的化合物，其中Y選自以下13.權(quán)利要求1的化合物，其中選自以下14.權(quán)利要求1的化合物，其中G不存在。15.一種包括至少一種權(quán)利要求1的化合物作為活性組分的藥用組合物。16.權(quán)利要求15的藥用組合物，其用于治療與HCV有關(guān)的病癥。17.權(quán)利要求15的藥用組合物，其另外包括至少一種可藥用載體。18.權(quán)利要求17的藥用組合物，其另外包含至少一種抗病毒劑。19.權(quán)利要求18的藥用組合物，其還另外包含至少一種干擾素。20.權(quán)利要求19的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒劑為利巴韋林，并且所述至少一種干擾素為α-干擾素或PEG化干擾素。21.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的方法，所述方法包括對需要這種治療的患者給藥藥用組合物，所述藥用組合物包括治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物。22.權(quán)利要求21的方法，其中所述給藥為口服或皮下給藥。23.權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥物中的應(yīng)用。24.一種制備用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物的方法，所述方法包括將至少一種權(quán)利要求1的化合物與至少一種可藥用載體密切接觸。25.一種表現(xiàn)出HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、或外消旋物，或所述化合物的可藥用鹽、溶劑合物或酯，所述化合物為選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物26.一種化合物，或所述化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、或外消旋物，或所述化合物的可藥用鹽、溶劑合物或酯，所述化合物選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物27.一種用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物，所述組合物包括治療有效量的一種或多種權(quán)利要求26的化合物和可藥用載體。28.權(quán)利要求27的藥用組合物，其另外包含至少一種抗病毒劑。29.權(quán)利要求28的藥用組合物，其還另外包含至少一種干擾素或PEG-干擾素α結(jié)合物。30.權(quán)利要求29的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒劑為利巴韋林，并且所述至少一種干擾素為α-干擾素或PEG化干擾素。31.一種治療丙型肝炎病毒相關(guān)病癥的方法，包括給藥有效量的一種或多種權(quán)利要求26的化合物。32.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性的方法，包括使HCV蛋白酶與一種或多種權(quán)利要求26的化合物接觸。33.一種治療、預(yù)防、或改善丙型肝炎(HCV)的一種或多種癥狀的方法，包括給藥治療有效量的一種或多種權(quán)利要求26的化合物。34.權(quán)利要求33的方法，其中HCV蛋白酶為NS3/NS4a蛋白酶。35.權(quán)利要求33的方法，其中一種和多種化合物抑制HCVNS3/NS4a蛋白酶。36.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工的方法，包括在其中所述多肽被加工的條件下使包含HCV多肽的組合物與一種或多種權(quán)利要求26的化合物接觸。37.一種以純形式存在的權(quán)利要求1的化合物。全文摘要本發(fā)明公開了具有HCV蛋白酶抑制活性的新的化合物以及制備所述化合物的方法。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了包括所述化合物的藥用組合物以及它們用于治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的方法。文檔編號A61P31/12GK1890215SQ200480036793公開日2007年1月3日申請日期2004年12月9日優(yōu)先權(quán)日2003年12月11日發(fā)明者F·維拉奎斯,S·范卡卓曼,F·G·恩裘洛吉,A·亞拉沙潘申請人:先靈公司