專利名稱：作為raf激酶抑制劑的2－氨基嘧啶衍生物的制作方法
概述本發(fā)明涉及某些化合物抑制RAF激酶、即在MAP激酶信號通路中發(fā)揮作用的絲氨酸/蘇氨酸激酶的發(fā)現(xiàn)，涉及所述化合物用于治療疾病的用途，所述疾病以MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征，例如增殖性疾病如某些癌癥。
背景細胞通過使用各種信號轉(zhuǎn)導通路將其細胞外環(huán)境的各個方面?zhèn)鬟f給細胞核。這些信號中的許多信號是通過蛋白激酶進行傳遞的，所述蛋白激酶通過磷酸基團的轉(zhuǎn)移激活各種因子。通過抑制適當?shù)募っ富钚灾袛嘈盘栟D(zhuǎn)導可能具有臨床益處，這已經(jīng)用伊馬替尼證明，伊馬替尼是bcr-abl激酶的抑制劑，其以商標名GLEEVEC(在美國)或GLIVEC以其甲磺酸鹽形式被上市銷售。
MAP激酶信號通路是本領(lǐng)域公知的生長因子將它們的增殖信號從細胞外環(huán)境傳遞到細胞核的通路之一。生長因子激活位于細胞表面的跨膜受體，該跨膜受體轉(zhuǎn)而又引發(fā)級聯(lián)反應，由此RAS被激活并將RAF激酶募集至細胞膜，在細胞膜上RAF激酶被激活并轉(zhuǎn)而激活MEK激酶，然后MEK激酶激活ERK激酶。激活的ERK激酶可以移動至細胞核，在細胞核中其激活各種基因轉(zhuǎn)錄因子。該通路的異?？蓪е禄蜣D(zhuǎn)錄、細胞生長的改變并通過負性調(diào)節(jié)細胞凋亡和傳遞增殖與血管生成信號而促進腫瘤生成。已經(jīng)證明RAF激酶抑制劑可阻斷通過MAP激酶信號通路的信號轉(zhuǎn)導。
已知RAF激酶家族有三個成員，被稱為C-RAF(也稱作RAF-1)、B-RAF和A-RAF。據(jù)報道，B-RAF激酶通常被人癌癥的多種體細胞點突變之一所激活，包括59％受試的黑素瘤細胞系。參見，Davies，H.等，Nature417，949-954(2002)。本發(fā)明涉及一類可有效抑制一種或多種RAF激酶家族成員的化合物的發(fā)現(xiàn)。
所述化合物的RAF激酶抑制性質(zhì)使得它們可用作治療劑，用于治療以MAP激酶信號通路異常為特征的增殖性疾病，特別是許多以RAF激酶過量表達或RAF激酶的激活突變?yōu)樘卣鞯陌┌Y，例如具有突變的B-RAF的黑素瘤，尤其是其中突變的B-RAF為V599E突變體的黑素瘤。本發(fā)明還提供了用所述化合物治療其它以MAP激酶信號通路異常為特征的病癥、特別是其中B-RAF突變的病癥、例如具有突變的B-RAF的良性痣(Nevimoles)的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及式(I)化合物和治療患者的方法，所述患者患有以通過MAP激酶通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的式(I)化合物。
本發(fā)明的化合物是式(I)所描述的化合物 其中R1為苯基或雜芳基；R2為苯基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
在本

發(fā)明內(nèi)容
的上下文中，除非另外說明，否則本文中用于描述式(I)化合物的通用術(shù)語具有以下含義。
當提及取代基例如烷基、烷氧基、烷基胺、烷硫基等時，術(shù)語“低級”表示具有至多7個且包括最大值7個、尤其是1至至多4個且包括最大值4個碳原子的基團，所述基團是無支鏈的或被支化一次或多次。
低級烷基、低級烷氧基、單-或二-低級烷基氨基、低級烷硫基和其它帶有烷基部分的取代基中的烷基部分尤其是C1-C4烷基，例如正丁基、仲丁基、叔丁基、正丙基、異丙基、甲基或乙基。除非另外指明，否則所述的烷基取代基是未取代的或被鹵素、羥基、硝基、氰基、低級烷氧基、C3-C7環(huán)烷基、氨基或單-或二-低級烷基氨基所取代。
鹵素-低級烷基、鹵素-低級烷氧基、鹵素-低級烷硫基等是指具有烷基部分、其中烷基部分被鹵素單取代至完全取代的取代基。鹵素-低級烷基、鹵素-低級烷氧基、鹵素-低級烷硫基等包括在取代的低級烷基、取代的低級烷氧基、取代的低級烷硫基等之內(nèi)。
鹵素尤其是氟、氯、溴或碘，更尤其是氟、氯或溴，特別是氟。
任何所提及的復數(shù)形式的化合物、鹽等總是應理解為也包括一種化合物、一種鹽等。
苯基一般是未取代的苯基或被1-5個、優(yōu)選1或2個取代基取代的苯基。適當?shù)娜〈ǖ幌抻诎被?、?或二-低級烷基取代的氨基(其中低級烷基取代基可以是未取代的或進一步被如上對烷基所列出的那些取代基所取代)、鹵素、低級烷基、取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、取代的低級烷氧基、硝基、氰基、巰基、低級烷硫基、鹵素-低級烷硫基、雜環(huán)基、雜芳基、雜環(huán)基烷基、雜芳基烷基、低級烷?；被柞；蚇-單-或N，N-二-低級烷基取代的氨基甲?；渲械图壨榛〈梢允俏慈〈幕虮贿M一步取代。
為苯基的R1尤其是未取代的苯基或被一個或多個取代基、優(yōu)選至多三個、尤其是一個取代基取代的苯基。對R1苯基而言尤其重要的取代基包括氨基、單-或二-低級烷基氨基(其中烷基是未取代的或被取代的)、鹵素、低級烷基、取代的低級烷基、羥基、低級烷氧基、取代的低級烷氧基、硝基、氰基、巰基、低級烷硫基和取代的低級烷硫基。
為苯基的R1尤其是未取代的苯基或被一個或兩個相同或不同的取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵素，尤其是氟或氯；低級烷基，尤其是甲基、乙基、丙基或叔丁基；鹵素-低級烷基，尤其是三氟甲基；羥基；低級烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，例如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；更尤其是被一個取代基取代的苯基，所述取代基選自未取代的或取代的低級烷基，尤其是甲基、鹵素-低級烷基，例如三氟甲基、未取代的或取代的低級烷氧基，尤其是甲氧基和鹵素-低級烷氧基，尤其是三氟甲氧基。
在一個實施方案中，取代基位于與嘧啶環(huán)鍵合位置的間位或?qū)ξ弧?br> 重要的R1苯基包括未取代的苯基和低級烷氧基取代的苯基，尤其是其中低級烷氧基取代基位于與嘧啶環(huán)鍵合位置的間位或?qū)ξ坏娜〈谋交?br> 為苯基的R2一般是未取代的苯環(huán)或優(yōu)選地被一個或多個取代基、優(yōu)選至多三個、尤其是一個或兩個取代基取代的苯環(huán)。取代基尤其是氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基(其中烷基是未取代的或被進一步取代，尤其是被鹵素或低級烷氧基取代)、鹵素、未取代的或取代的低級烷基、未取代的或取代的低級烷氧基、羥基、硝基、氰基、低級烷?；?、氨基甲?；?、N-單-或N，N-二-低級烷基取代的氨基甲?；€基、低級烷硫基和鹵素-低級烷硫基。
為苯基的R2優(yōu)選為被一個或兩個相同或不同的取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵素，尤其是氟或氯；單-或二-低級烷基取代的氨基，尤其是二甲基氨基或二乙基氨基；低級烷基，尤其是甲基或乙基；鹵素-低級烷基，尤其是二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或1，1，2，2-四氟乙基；低級烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，尤其是二氟甲氧基、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；低級烷硫基，例如甲硫基；鹵素-低級烷硫基，例如二氟甲硫基、三氟甲硫基、2，2，2-三氟乙硫基或1，1，2，2-四氟乙硫基。
為苯基的R2更尤其是被一個或兩個相同或不同的取代基取代的苯基，所述取代基選自未取代的或鹵素取代的低級烷基、未取代的或鹵素取代的低級烷氧基、未取代的或鹵素取代的低級烷硫基和鹵素，尤其是氟或氯。
R2尤其是三氟甲基苯基，特別是3-三氟甲基苯基。
優(yōu)選地，R2苯基在氨基羰基連接位置的間位被取代。
雜芳基尤其是包含1至3個選自N、O和S的雜原子的5至7元芳族環(huán)。雜芳基是未取代的或被一個或多個、尤其是一個至三個、例如一個相同或不同的取代基所取代。雜芳基上的重要取代基是那些選自以下的取代基鹵素，例如氟或氯；單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素、羥基、硝基、氰基、低級烷氧基、C3-C7環(huán)烷基、雜環(huán)基或雜芳基取代；低級烷基，例如甲基或乙基；鹵素-低級烷基，例如三氟甲基；低級烷氧基，例如甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，例如三氟甲氧基；低級烷硫基，例如甲硫基；鹵素-低級烷硫基，例如三氟甲硫基；雜芳基；雜芳基-低級亞烷基；雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級亞烷基。
雜芳基-低級亞烷基和雜環(huán)基-低級亞烷基是式het-C1-C4-亞烷基-的取代基，其中het為雜芳基或雜環(huán)基。
為雜芳基的R1尤其是噻唑基、吡嗪基、嘧啶基或吡啶基，尤其是2-噻唑基、2-吡嗪基、5-嘧啶基或3-吡啶基。
優(yōu)選地，為雜芳基的R1是吡啶基，尤其是3-吡啶基，更特別是6-取代的-3-吡啶基。
雜環(huán)基尤其是具有1或2個選自氮、氧和硫的雜原子的五元或六元非芳族環(huán)，該雜環(huán)可以是完全或部分飽和的，且是未取代的或被取代的，尤其是被未取代的或取代的低級烷基所取代。雜環(huán)基包括嗎啉代、硫嗎啉代、哌啶基、哌嗪基等。
鹽尤其是式I化合物的可藥用的酸加成鹽。這類鹽是例如通過具有堿性氮原子的式I化合物形成的，例如酸加成鹽，優(yōu)選與有機或無機酸形成的酸加成鹽，尤其是可藥用鹽。合適的無機酸有例如氫鹵酸如鹽酸、硫酸或磷酸。合適的有機酸有例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、羥基乙酸、乳酸、2-羥基丁酸、葡糖酸、葡庚糖酸(glucosemonocarboxylic acid)、富馬酸、丁二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、葡糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸，例如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰氨基乙酸、N-乙酰基天冬酰胺、N-乙?；腚装彼?、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸絲氨酸、2-或3-甘油磷酸、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、環(huán)己烷甲酸、苯甲酸、水楊酸、1-或3-羥基萘-2-甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水楊酸、鄰苯二甲酸、苯基乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲烷-或乙烷-磺酸、2-羥基乙烷磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-環(huán)己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸，或其它有機質(zhì)子酸，例如抗壞血酸。
對于分離或純化，還可能使用不可藥用的鹽，例如苦味酸鹽或高氯酸鹽。只有可藥用的鹽或游離化合物(任選地以藥物組合物的形式)可在治療上使用，因此它們是優(yōu)選的。
考慮到游離形式與其鹽形式(還包括那些可以用作中間體的鹽，例如在新化合物的純化或它們的鑒定中用作中間體的鹽)的新化合物之間的密切關(guān)系，當適當和合適時，上下文中任何提及的游離化合物也應理解為包括相應的鹽。
式I化合物的一個重要實施方案是那些其中R1選自苯基、噻唑基、吡嗪基、嘧啶基或吡啶基的化合物；尤其是那些其中R2為鹵素-苯基(被鹵素取代的苯基)、鹵素-低級烷基苯基、鹵素-低級烷氧基苯基或鹵素-低級烷硫基苯基的化合物；最特別地是那些其中鹵素-低級烷基苯基、鹵素-低級烷氧基苯基或鹵素-低級烷硫基苯基取代基的烷基部分是被氟單取代的至完全取代的，例如2-氟乙基、三氟甲基或五氟乙基。
本發(fā)明的一個重要實施方案是式II的化合物
其中n為0、1或2；A1、A2和A3為C，或A1和A2為C且A3為N，或A1和A3為N且A2為C，或A1為C且A2和A3為N；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；?、氨基甲酰基、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6和/或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
當R3為被在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代的低級烷基時，該低級烷基鍵合在雜芳基或雜環(huán)基的環(huán)碳上，例如3-(4-吡啶基)丙基或4-哌啶基甲基。
當R5-R8為在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基時，氨基氮直接鍵合在雜芳基或雜環(huán)基的環(huán)碳上，例如當-NR5R6為4-吡啶基氨基或4-哌啶基氨基時。
至少一個R4取代基優(yōu)選地位于羰基的間位。
R4取代基尤其選自鹵素，尤其是氟或氯，最特別是氟；單-或二-低級烷基取代的氨基，尤其是二甲基氨基或二乙基氨基；低級烷基，尤其是甲基或乙基；鹵素-低級烷基，尤其是二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或1，1，2，2-四氟乙基；低級烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，尤其是二氟甲氧基、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基和1，1，2，2-四氟乙氧基；低級烷硫基，例如甲硫基；鹵素-低級烷硫基，例如二氟甲硫基、三氟甲硫基、2，2，2-三氟乙硫基或1，1，2，2-四氟乙硫基。
R4尤其是一個或兩個相同或不同的取代基，所述取代基選自未取代的或鹵素取代的低級烷基、未取代的或鹵素取代的低級烷氧基、未取代的或鹵素取代的低級烷硫基和鹵素，尤其是氟或氯。
本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案是式(III)的化合物 其中n為0、1或2；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；?、氨基甲?；-單-或N，N--二-取代的氨基甲?；?、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
在式III的化合物中，重要的實施方案包括那些其中R4為鹵素-低級烷基例如三氟甲基、鹵素-低級烷氧基例如三氟甲氧基或鹵素-低級烷硫基例如三氟甲硫基的化合物，尤其是那些其中一個R4取代基相對于羰基鍵合位置位于3-位的化合物。在一個尤其重要的實施方案中，R4取代基選自3-三氟甲基、3-三氟甲氧基和3-三氟甲硫基，尤其是3-三氟甲基。
式III化合物的其它重要的實施方案包括那些其中R3為-NR5R6且R5和R6之一為被-NR7R8取代的低級烷基且R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基的化合物；尤其是其中雜芳基或雜環(huán)基選自嗎啉代、硫嗎啉代、哌嗪基、哌啶基和吡啶基的化合物。
式III化合物的其它重要的實施方案包括那些其中-NR5R6為雜芳基或雜環(huán)基、尤其是哌嗪基、4-甲基哌嗪基、哌啶基、4-羥基哌啶基、嗎啉代和硫嗎啉代的化合物。
式III化合物的其它重要的實施方案包括那些其中R8為低級烷基或被羥基或低級烷氧基取代的低級烷基、尤其是甲氧基或乙氧基的化合物；例如那些其中R3為2-甲氧基乙氧基、3-甲氧基丙氧基、3-乙氧基丙氧基、3-甲氧基丙硫基或2-羥基丙硫基的化合物。
式III化合物的其它重要的實施方案包括那些其中R8為雜芳基或雜環(huán)基的化合物，例如那些其中R3為3-吡啶基氧基或1-甲基-哌啶-4-基氧基的化合物。
在式III化合物的一個特別優(yōu)選的實施方案中，R3取代基位于其所連接的吡啶環(huán)的6-位。因此，本發(fā)明尤其包括式(IIIa)的化合物 其中的取代基和優(yōu)選含義與以上式III化合物中所給出的相同。
在另一個特別優(yōu)選的實施方案中，R3取代基位于其所連接的吡啶環(huán)的6-位，且R4取代基連接在苯環(huán)的3-位。因此，本發(fā)明尤其包括式(IIIb)的化合物 其中的取代基和優(yōu)選含義與以上式III化合物中所給出的相同。
本發(fā)明的另一個重要的實施方案包括式IV的化合物 其中n為0、1或2；R3為氫、-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；?、氨基甲酰基、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；?、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其可藥用的鹽。
在式(IV)的化合物中，至少一個R4取代基優(yōu)選地位于苯環(huán)上羰基的間位。R4優(yōu)選為低級烷基，尤其是甲基或乙基；鹵素-低級烷基，尤其是二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或1，1，2，2-四氟乙基；低級烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，尤其是二氟甲氧基、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基和1，1，2，2-四氟乙氧基；低級烷硫基，例如甲硫基；鹵素-低級烷硫基，例如二氟甲硫基、三氟甲硫基、2，2，2-三氟乙硫基或1，1，2，2-四氟乙硫基。
在式IV化合物的一個重要的實施方案中，R3為低級烷基，優(yōu)選為位于哌嗪環(huán)3-位的低級烷基。
本發(fā)明還涉及式(V)的化合物 其中n為0、1或2；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷酰基、氨基甲?；-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；?、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其可藥用的鹽。
在式(V)的化合物中，至少一個R4取代基優(yōu)選位于苯環(huán)上羰基的間位。R4優(yōu)選為低級烷基，尤其是甲基或乙基；鹵素-低級烷基，尤其是二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基或1，1，2，2-四氟乙基；低級烷氧基，尤其是甲氧基或乙氧基；鹵素-低級烷氧基，尤其是二氟甲氧基、三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基和1，1，2，2-四氟乙氧基；低級烷硫基，例如甲硫基；鹵素-低級烷硫基，例如二氟甲硫基、三氟甲硫基、2，2，2-三氟乙硫基或1，1，2，2-四氟乙硫基。
在式(V)化合物的一個重要的實施方案中，R3為低級烷基或低級烷氧基，尤其是其中取代基位于嘧啶環(huán)連接位置的間位或?qū)ξ弧?br> 所述患者為患有以通過MAP激酶通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的哺乳動物，一般為人。這可以采用例如蛋白質(zhì)印跡分析或免疫組織化學等方法通過針對通路成員的激活狀特定抗體來測定。這樣的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
一般而言，以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病是增殖性疾病，特別是以RAF激酶活性增加為特征的癌癥，例如其中過量表達野生型B-或C-RAF激酶或表達激活的突變型RAF激酶例如突變型B-RAF激酶的癌癥。其中已經(jīng)檢測到突變的RAF激酶的癌癥包括黑素瘤、結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腺癌、肉瘤、乳腺癌和肝癌。突變的B-RAF激酶尤其普遍存在于許多黑素瘤中。
根據(jù)本發(fā)明，可以由患者獲取患病組織的樣品，例如作為活組織檢查或切除術(shù)的結(jié)果，并對樣品進行檢驗以確定該組織是否產(chǎn)生突變型RAF激酶、例如突變型B-RAF激酶或者過量表達野生型RAF激酶、例如野生型B-或C-RAF激酶。如果該檢驗顯示在患病組織中產(chǎn)生突變型RAF激酶或過量產(chǎn)生RAF激酶，則通過向患者施用抑制RAF-有效量的本文所述的RAF抑制劑化合物對患者進行治療。
但是，如果級聯(lián)中的另一個激酶是通路中過量信號轉(zhuǎn)導的原因，則也可能用抑制RAF激酶的化合物下調(diào)MAP激酶信號通路。因此，本發(fā)明還涉及以MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的治療，所述的過量信號轉(zhuǎn)導歸因于RAF激酶的激活突變或過量表達以外的原因。
組織樣品是通過本領(lǐng)域眾所周知的方法進行檢驗的。例如，通過等位基因特異性PCR、DHPLC、質(zhì)譜法檢測B-RAF突變，通過免疫組織化學、免疫熒光法或蛋白質(zhì)印跡分析檢測野生型B-或C-RAF的過量表達。檢測B-RAF突變的一種特別有用的方法是實施例D1中所述的基于聚合酶鏈反應的方法。類似的方法被用于確定級聯(lián)中的其它激酶是否突變或過量表達。
本發(fā)明的一個特別重要的方面涉及治療黑素瘤的方法，其包括(a)對來自患者的黑素瘤組織進行檢驗以確定黑素瘤組織是否表達突變型RAF激酶或過量表達野生型RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過量表達野生型RAF激酶或表達激活的突變型B-RAF激酶，用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治療患者。
該實施方案的一個重要方面涉及治療黑素瘤的方法，其包括(a)對來自患者的黑素瘤組織進行檢驗以確定黑素瘤組織是否過量表達B-RAF激酶或C-RAF激酶活性和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織過量表達B-RAF激酶或C-RAF激酶活性，用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治療患者。
該實施方案的另一個重要方面涉及治療黑素瘤的方法，其包括(a)對來自患者的黑素瘤組織進行檢驗以確定黑素瘤組織是否表達突變型B-RAF激酶和(b)如果發(fā)現(xiàn)黑素瘤組織表達突變型B-RAF激酶，用抑制RAF激酶有效量的本文所述的抑制RAF的化合物治療患者。
一般而言，B-RAF激酶突變是所引用的Davies等的文章中所述的那些突變中的一種。這些突變總結(jié)于表1中。
表1

因此，本發(fā)明特別涉及治療以激活的突變型B-RAF激酶為特征的疾病的方法，其包括在來自患者的組織樣品中檢測B-RAF激酶基因或蛋白質(zhì)的突變和用有效的抑制B-RAF激酶的化合物、尤其是本文所述的化合物治療患者。
本發(fā)明的一個重要方面包括那些其中突變型B-RAF激酶表現(xiàn)出表1中所述的突變、尤其是V599E突變的例子。
本發(fā)明的一個特別重要的方面包括那些其中疾病為黑素瘤和突變型B-RAF激酶表現(xiàn)出表1中所述的突變、尤其是V599E突變的例子。
因此，本發(fā)明包括治療以突變型B-RAF激酶為特征的疾病的方法，其包括在來自患者的組織樣品中檢測選自G1388A、G1388T、G1394C、G1394A、G1394T、G1403C、G1403A、G1753A、T1782G、G1783C、C1786G、T1787G、T1796A和TG1796-97AT的B-RAF激酶基因的突變或RAF激酶蛋白的相應的突變和用本文所述的有效的抑制B-RAF激酶的化合物治療患者。
本發(fā)明還涉及抑制RAF激酶的方法，其包括使RAF激酶與式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物接觸。優(yōu)選地，RAF激酶是B-或C-RAF激酶，或突變型RAF激酶，尤其是突變型B-RAF激酶，特別是V599E突變體。
RAF激酶可以被分離或處于細胞環(huán)境中。
式I化合物(或其N-氧化物)具有如上所述的有價值的藥理學性質(zhì)。
本發(fā)明的化合物可以單獨施用或與其它抗癌藥組合施用，例如抑制腫瘤血管生成的化合物，例如蛋白酶抑制劑、表皮生長因子受體激酶抑制劑、血管內(nèi)皮生長因子受體激酶抑制劑等；細胞毒性藥物，例如抗代謝物，如嘌呤和嘧啶類似物抗代謝物；抗有絲分裂藥如微管穩(wěn)定藥和抗有絲分裂生物堿；鉑配位復合物；抗腫瘤抗生素；烷化劑，例如氮芥和亞硝基脲；內(nèi)分泌物，例如腎上腺類皮質(zhì)激素類、雄激素類、抗雄激素類、雌激素類、抗雌激素類、芳香酶抑制劑、促性腺激素釋放激素激動劑和促生長素抑制素類似物，以及靶向于被過量表達和/或在其它方面與腫瘤細胞中被上調(diào)的特定代謝通路有關(guān)的酶或受體的化合物，例如ATP和GTP磷酸二酯酶抑制劑、蛋白激酶抑制劑，例如絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸激酶抑制劑，例如Abelson蛋白酪氨酸激酶和各種生長因子、它們的受體和其激酶抑制劑，例如表皮生長因子受體激酶抑制劑、血管內(nèi)皮生長因子受體激酶抑制劑、成纖維細胞生長因子抑制劑、胰島素樣生長因子受體抑制劑和血小板源生長因子受體激酶抑制劑等；甲硫氨酸氨基肽酶抑制劑、蛋白酶體抑制劑、環(huán)加氧酶抑制劑，例如環(huán)加氧酶-1或-2抑制劑，和組蛋白脫乙?；敢种苿?br> 本發(fā)明的化合物還可以與放射療法、免疫療法、手術(shù)治療或其組合一起施用。用于在腫瘤減輕或甚至化學預防治療后維持患者狀態(tài)的治療(例如在危險中的患者的情況)也是可能的。
本發(fā)明的化合物不僅用于(預防性地和優(yōu)選治療性地)治療人，而且用于治療其它溫血動物，例如商業(yè)上有用的溫血動物，例如嚙齒類動物，如小鼠、兔或大鼠，或豚鼠。
一般而言，本發(fā)明還涉及式I化合物(或其N-氧化物)在抑制RAF激酶活性中的用途。
本發(fā)明的化合物優(yōu)選作為活性成分在藥物組合物中被施用。優(yōu)選的是這樣的藥物組合物，其適合施用于患有以MAP激酶信號通路異常為特征的疾病、尤其是腫瘤疾病、最特別是黑素瘤的溫血動物，尤其是人或商業(yè)上有用的哺乳動物，其包含抑制RAF激酶、特別是突變型RAF激酶有效量的式I化合物(或其N-氧化物)或其可藥用的鹽(當存在成鹽基團時)以及至少一種可藥用的載體。
還優(yōu)選這樣的藥物組合物，其用于在需要這類治療、尤其是患有所述疾病的溫血動物、尤其是人或商業(yè)上有用的哺乳動物中預防性地或尤其是治療性地治療腫瘤疾病或其它增殖性疾病，其包含預防或尤其是治療所述疾病有效量的新的式I化合物(或其N-氧化物)或其可藥用的鹽作為活性成分。
藥物組合物包含約1％至約95％的活性成分，單劑量形式的劑型優(yōu)選包含約20％至約90％的活性成分，非單劑量形式的劑型優(yōu)選包含約5％至約20％的活性成分。單位劑量形式有例如糖衣丸、片劑、安瓿、小瓶、栓劑或膠囊劑。其它劑型有例如軟膏劑、乳膏劑、糊劑、泡沫劑(foam)、酊劑、唇膏、滴劑、噴霧劑、分散體等。例子有包含約0.05g至約1.0g活性成分的膠囊劑。
本發(fā)明的藥物組合物以本身已知的方法制備，例如通過常規(guī)的混合、制粒、成型、溶解或凍干方法制備。
優(yōu)選使用活性成分的溶液，另外還可使用混懸液或分散體，尤其是等張的水溶液、分散體或混懸液，例如在僅含有活性物質(zhì)或含有活性物質(zhì)與載體例如甘露醇的凍干組合物的情況下，這些劑型可以在使用前制備。藥物組合物可以被滅菌和/或包含賦形劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑和/或乳化劑、增溶劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑，并以本身已知的方法制備，例如通過常規(guī)的溶解或凍干方法制備。所述的溶液或混懸液可以包含增粘物質(zhì)例如羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明膠或增溶劑例如Tween 80[聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯；ICIAmericas，Inc，USA的商標名]。
在油中的混懸液包含常規(guī)用于注射目的的植物油、合成油或半合成油作為油性組分?？商峒暗娜缬绕涫且后w脂肪酸酯，其包含具有8至22個、尤其是12至22個碳原子的長鏈脂肪酸作為酸組分，例如月桂酸、十三烷酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸或相應的不飽和酸，例如油酸、反油酸、芥酸、巴西烯酸或亞油酸，任選地加入抗氧化劑，例如維生素E、β-胡蘿卜素或3，5-二-叔丁基-4-羥基甲苯。這些脂肪酸酯的醇組分具有最多6個碳原子，為單-或多-元醇，例如單-、二-或三-元醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇或它們的異構(gòu)體，但是尤其是乙二醇和甘油。因此，可以提及的脂肪酸酯的例子有油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、“Labrafil M 2375”(聚氧乙烯甘油三油酸酯，來自Gattefossé，巴黎)、“Labrafil M 1944CS”(通過杏仁油醇解制備的不飽和的聚乙二醇化的甘油酯，由甘油酯和聚乙二醇酯組成；Gattefossé，法國)、“Labrasol”(通過TCM醇解制備的飽和的聚乙二醇化的甘油酯，由甘油酯和聚乙二醇酯組成；Gattefossé，法國)和/或“Miglyol812”(具有C8至C12鏈長的飽和脂肪酸的甘油三酯，來自Hiils AG，德國)，但是尤其是植物油，例如棉子油、杏仁油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、豆油和更尤其是花生油。
注射組合物的制備在無菌條件下以常規(guī)方法進行，將其引入到例如安瓿或小瓶中和容器的密封也是在無菌條件下以常規(guī)方法進行的。
用于口服施用的藥物組合物可以例如通過以下方法獲得將活性成分與一種或多種固體載體混合，將得到的混合物制粒，如果合適，將混合物或顆粒加工(如果需要，酌情加入另外的賦形劑)成片劑或糖衣丸的芯。
合適的載體尤其是填充劑，例如糖如乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇、纖維素制品和/或磷酸鈣例如磷酸三鈣或磷酸氫鈣，還有粘合劑，例如淀粉如玉米、小麥、米或馬鈴薯淀粉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，和/或如果需要，崩解劑，例如以上提到的淀粉，還有羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。另外的賦形劑尤其是流動性調(diào)節(jié)劑和潤滑劑，例如硅酸、滑石粉、硬脂酸或其鹽，例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，和/或聚乙二醇或其衍生物。
糖衣丸芯可以具有合適的包衣，任選腸溶衣，尤其是使用濃糖溶液，所述濃糖溶液可以含有阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦，或使用在合適有機溶劑或溶劑混合物中的包衣溶液，或者對于腸溶衣的制備，使用合適的纖維素制品的溶液，例如醋酸纖維素鄰苯二甲酸酯或羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯?？梢韵蚱瑒┗蛱且峦璋轮屑尤胫珓┗蛏兀鐬榱髓b別目的或為了顯示活性成分的不同劑量。
用于口服施用的藥物組合物還有硬明膠膠囊和由明膠和增塑劑例如甘油或山梨醇組成的軟密封膠囊。硬明膠膠囊可以含有顆粒形式的活性成分，例如混合有填充劑如玉米淀粉、粘合劑和/或助流劑如滑石粉或硬脂酸鎂以及任選地穩(wěn)定劑的顆粒形式的活性成分。在軟膠囊中，活性成分優(yōu)選溶解或混懸在合適的液體賦形劑中，例如脂肪油、石蠟油或液體聚乙二醇或者乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯，同樣可以加入穩(wěn)定劑和清潔劑，例如聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯類的清潔劑。
合適的可直腸施用的藥物組合物有例如栓劑，其由活性成分與栓劑基質(zhì)的混合物組成。合適的栓劑基質(zhì)有例如天然或合成的甘油三酯、鏈烷烴、聚乙二醇或高級鏈烷醇。
對于胃腸外施用，尤其適合的是水溶性形式、例如水溶性鹽形式的活性成分的水性溶液，或水性注射混懸液，其包含增粘物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇和/或葡聚糖，以及如果需要，還含有穩(wěn)定劑。任選地與賦形劑一起的活性成分也可以是凍干物的形式，其可以在胃腸外施用前通過加入合適的溶劑被制成溶液。
用于例如胃腸外施用的溶液也可以以輸液形式被使用。
優(yōu)選的防腐劑有例如抗氧化劑如抗壞血酸或殺微生物劑如山梨酸或苯甲酸。
本發(fā)明尤其涉及一種治療病理狀態(tài)之一的程序或方法，所述病理狀態(tài)以MAP激酶信號通路異常為特征，尤其是對抑制RAF激酶有響應的疾病，尤其是相應的腫瘤疾病。式I化合物(或其N-氧化物)可以以其本身或以藥物組合物的形式被預防性地或治療性地施用于需要這類治療的溫血動物例如人，優(yōu)選用量為對抗所述疾病的有效量，所述化合物尤其是以藥物組合物的形式被應用。在體重約70kg的情況下，本發(fā)明化合物所施用的日劑量為約0.1g至約5g，優(yōu)選約0.5g至約2g。
在每種特定情況下所用的優(yōu)選的劑量、組合物和藥物制劑(藥物)的制備如上所述。
本發(fā)明的化合物是利用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法根據(jù)如下所述的通用反應流程圖制備的。
步驟1 將I和II的混合物加熱至85℃。在攪拌過夜后，將混合物首先在空氣中冷卻，然后在冰/水浴中冷卻并過濾。將得到的固體用乙醚充分洗滌并干燥，得到III。
共同中間體VII的制備 將阮內(nèi)鎳加入到脫氣的VI在甲醇(100mL)中的溶液中并用氫氣(60psi.)覆蓋。將混合物振搖過夜并過濾。在真空下濃縮，得到VII，為棕色固體。
III和VII的反應 在約85℃加熱下將III和IV溶解在2-丙醇中。在攪拌24小時后，將混合物冷卻并過濾。將得到的固體用乙醚充分洗滌并干燥，得到V。
最終步驟在標準條件下使V與適當取代的苯甲酸或苯甲酰鹵反應，得到最終的苯甲酰胺。
本發(fā)明還涉及式VII和VIII的化合物，它們是用于制備式(I)、ll、II、III、III(a)、III(b)、IV和V化合物的中間體。
可供選擇的合成流程圖可供選擇的合成流程圖公開了一種共同中間體的合成，所述中間體用于制備其中R4為3-三氟甲基的式III的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員具有替換各種起始原料以制備本發(fā)明化合物的能力。
本發(fā)明還涉及式8的化合物，其是用于制備式III、III(a)和III(b)化合物的中間體。
以下實施例用于舉例說明本發(fā)明，但不限制其范圍。
實施例1N-[4-甲基-3-(4-噻唑-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-噻唑-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.17g，0.60mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.12g，0.63mmol)、BOP(0.32g，0.72mmol)和DIEA(0.4mL，2.16mmol)的混合物在2.5mL DMF中于室溫、氮氣氛下攪拌過夜。在攪拌17.5小時后，向沉淀中加入20mL去離子水。將產(chǎn)物和混合物在室溫下攪拌45分鐘。然后將其通過布氏漏斗過濾，用10.0mLCH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用10.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.11g N-[4-甲基-3-(4-噻唑-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.41(s，1H)，9.17(s，1H)，8.64(d，1H，J＝5.05Hz)，8.29(br m，1H)，8.26(d，1H，J＝7.88Hz)，8.06(d，1H，J＝3.15Hz)，7.96(br m，1H)，7.94(d，1H，J＝3.16Hz)，7.91(1H，d，J＝2.27Hz)，7.77(t，1H，J＝7.88Hz)，7.56(dd，1H，J1＝8.35Hz，J2＝2.45Hz)，7.39(d，1H，J＝4.39Hz)，7.24(d，1H，J＝8.79Hz)，2.22(s，3H)。API-MS m/z 456.1([M+H]+，計算值456.1) 實施例2N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.36g，1.30mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.26g，1.36mmol)、BOP(0.69g，1.56mmol)和DIEA(0.8mL，4.68mmol)的混合物在5.0mL DMF中于室溫、氮氣氛下攪拌過夜。向得到的沉淀中加入50mL去離子水。將混合物在室溫下攪拌45分鐘，然后通過布氏漏斗過濾，用25.0mL CH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用25.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.41g N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為淺黃色固體。1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.45(s，1H)，9.49(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.63(d，1H，J＝5.39Hz)，8.31(br m，1H)，8.28(d，1H，J＝8.08Hz)，8.16(d，1H，J＝2.37Hz)，7.96(d，1H，J＝8.08Hz)，7.79(t，1H，J＝8.08Hz)，7.63(d，1H，J＝4.87Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.67Hz，J2＝2.17Hz)，7.26(d，1H，J＝7.59Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 451.1([M+H]+，計算值451.1)
實施例3N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-(1，1，2，2-四氟-乙氧基)-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-(1，1，2，2-四氟-乙氧基)-苯甲酸(0.50g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.14mmol)的混合物在10.0mL DMF中于室溫下攪拌20小時。向得到的沉淀中加入50mL去離子水。將得到的混懸液在室溫下攪拌45分鐘。然后將混合物通過布氏漏斗過濾，用20.0mLCH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用20.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.71g N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-(1，1，2，2-四氟-乙氧基)-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.36(s，1H)，9.49(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.62(d，2H，J＝5.13Hz)，8.15(br m，1H)，7.99(d，2H，J＝8.33Hz)，7.86(br m，1H)，7.65(m，2H)，7.51(m，2H)，7.25(d，1H，J＝8.4Hz)，6.86(t，1H，J＝52.4Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 499.4([M+H]+，計算值499.4)
實施例43-二氟甲氧基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-(2，2-二氟-乙氧基)-苯甲酸(0.39g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.14mmol)的混合物在10.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL去離子水。將得到的混懸液在室溫下攪拌45分鐘。然后將其通過布氏漏斗過濾，用20.0mL CH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用20.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.79g 3-3-二氟甲氧基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.29(s，1H)，9.47(s，1H)，9.09(s，1H)，8.79(s，1H)，8.61(d，1H，J1＝5.45Hz，J2＝1.82Hz)，8.14(m，1H)，7.85(d，1H，J＝7.61Hz)，7.64-7.56(m，2H)，7.51-7.46(m，1H)，7.40(dd，1H，J1＝7.62Hz，J2＝2.77Hz)，7.33(t，1H，J＝74.2Hz)，7.24(d，1H，J＝8.32Hz)，2.25(s，3H)。API-MS m/z 449.3([M+H]+，計算值449.4) 實施例53-二甲基氨基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-二甲基氨基-苯甲酸(0.34g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.14mmol)的混合物在10.0mL DMF中于室溫下攪拌20小時。向沉淀中加入50mL去離子水。將得到的混懸液在室溫下攪拌45分鐘。然后將其通過布氏漏斗過濾，用20.0mL CH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用20.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.64g 3-二甲基氨基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，為灰白色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.09(s，1H)，9.47(s，1H)，9.07(s，1H)，8.79(s，1H)，8.61(d，1H，J＝5.45Hz，)，8.14(m，1H)，7.62(d，1H，J＝5.52Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.47Hz，J2＝2.31Hz)，7.31(dd，1H，J＝8.08Hz，J＝8.08Hz)，7.24(m，2H)，7.21(m，1H)，6.92(dd，1H，J1＝8.48Hz，J2＝2.31Hz)，2.97(s，6H)，2.25(s，3H)。
API-MS m/z 426.1([M+H]+，計算值426.2) 實施例6N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)3-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯甲酸(0.46g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.14mmol)的混合物在10.0mL DMF中于室溫下攪拌20小時。向沉淀中加入50mL去離子水。將得到的混懸液在室溫下攪拌45分鐘。然后將其通過布氏漏斗過濾，用25.0mL CH3OH研磨，攪拌15分鐘，再次過濾，用25.0mL CH3OH洗滌并干燥。得到0.63g N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.21(s，1H)，9.48(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.62(d，1H，J＝4.82Hz)，8.15(br m，1H)，7.63(m，3H)，7.50(m，2H)，7.29(dd，1H，J1＝8.05Hz，J2＝2.15Hz)，7.24(d，1H，J＝8.58Hz)，4.86(q，2H，J＝8.8Hz)，2.25(s，3H)。
API-MS m/z 481.3([M+H]+，計算值481.1) 實施例7N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲硫基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-三氟甲硫基-苯甲酸(0.46g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.20mmol)的混合物在6.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將產(chǎn)物和混合物在室溫下攪拌1小時，然后通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨45分鐘并干燥。得到0.78g N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲硫基-苯甲酰胺，為黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.40(s，1H)，9.48(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.62(d，1H，J＝5.38Hz)，8.30(br m，1H)，8.20(d，1H，J＝7.68Hz)，8.15(m，1H)，7.94(d，1H，J＝7.68Hz)，7.72(t，1H，J＝8.06Hz)，7.63(d，1H，J＝5.38Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.44Hz，J2＝2.29Hz)，7.25(d，1H，J＝8.44Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 483.1([M+H]+，計算值483.1)
實施例8N-{3-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基]-4-甲基-苯-1，3-二胺(0.29g，0.95mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.19g，0.99mmol)、BOP(0.50g，1.14mmol)和DIEA(0.6mL，3.42mmol)的混合物在5.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將產(chǎn)物和混合物在室溫下攪拌1小時，然后通過布氏漏斗過濾，風干，用6.0mL CH3OH研磨45分鐘并干燥。得到0.38gN-{3-[4-(4-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.43(s，1H)，8.40(d，2H，J＝5.21Hz)，8.31(s，1H)，8.28(d，1H，J＝7.89Hz)，8.13(s，1H)，8.11(m，2H，br)，7.96(d，1H，J＝8.35Hz)，7.79(t，1H，J＝7.72Hz)，7.50(d，1H，J＝8.20Hz)，7.28(d，1H，J＝5.21Hz)，7.23(d，1H，J＝8.35Hz)，7.02(d，1H，J＝8.99Hz)，3.81(s，3H)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 479.2([M+H]+，計算值479.2)
實施例9N-[4-甲基-3-(4-苯基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-苯基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.50g，1.81mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.36g，1.90mmol)、BOP(0.96g，2.17mmol)和DIEA(1.25mL，6.51mmol)的混合物在6.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將產(chǎn)物和混合物在室溫下攪拌1小時，然后通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨45分鐘并干燥。得到0.27g黃色固體。將該產(chǎn)物再次用5.0mL CH3OH研磨1小時，過濾并干燥。得到0.12gN-[4-甲基-3-(4-苯基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.43(s，1H)，8.90(s，1H)，8.48(d，1H，J＝4.94Hz)，8.30(m，1H)，8.27(d，1H，J＝7.40Hz)，8.13-8.16(m，2H)，8.09(d，1H，J＝2.19)，7.97(d，1H，J＝7.11Hz)，7.79(t，1H，J＝7.66Hz)，7.48-7.52(m，2H)，7.36(d，1H，J＝5.47Hz)，7.24(d，1H，J＝8.20Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 449.3([M+H]+，計算值449.4)
實施例10N-{3-[4-(3-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4-(3-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基]-4-甲基-苯-1，3-二胺(0.40g，1.30mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.26g，1.36mmol)、BOP(0.69g，1.56mmol)和DIEA(0.8mL，4.68mmol)的混合物在5.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將混合物在室溫下攪拌1小時。然后將其通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨45分鐘并干燥。得到0.34gN-{3-[4-(3-甲氧基-苯基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為灰白色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.43(s，1H)，8.90(s，1H)，8.48(d，1H，J＝4.94Hz)，8.30(m，1H)，8.27(d，1H，J＝8.40Hz)，8.11(m，1H)，7.97(d，1H，J＝7.39Hz)，7.79(t，1H，J＝8.02Hz)，7.71-7.67(br m，2H)，7.51(dd，1H，J1＝8.41Hz，J2＝2.00Hz)，7.40(t，1H，J＝8.20Hz)，7.36(d，1H，J＝5.21Hz)，7.07(d，1H，J1＝8.40Hz，J2＝2.40Hz)，3.74(s，3H)，2.26(s，3H)。API-MS m/z 479.2([M+H]+，計算值479.2) 實施例113-二乙基氨基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-二乙基氨基-苯甲酸(0.48g，2.08mmol)、HCl、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.7mL，9.50mmol)的混合物在6.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將得到的混懸液在室溫下攪拌1小時。然后將反應混合物通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨1小時并干燥。得到0.87g 3-二乙基氨基-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.07(s，1H)，9.50(s，1H)，9.07(s，1H)，8.78(s，2H)，8.62(d，1H，J＝4.78Hz)，8.17(m，1H)，7.62(d，1H，J＝5.76Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.19Hz，J2＝2.16Hz)，7.29-7.21(br m，2H)，7.17-7.11(br m，2H)，6.84(dd，1H，J1＝7.8Hz，J2＝2.44Hz)，3.39(q，4H，J＝5.99Hz)，2.25(s，3H)，1.11(t，6H，J＝6.99Hz)。
API-MS m/z 454.1([M+H]+，計算值454.2) 實施例12N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲氧基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-三氟甲氧基-苯甲酸(0.43g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.20mmol)的混合物在6.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將混合物在室溫下攪拌1小時。然后將混合物通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨45分鐘并干燥。得到0.91g N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲氧基-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.37(s，1H)，9.49(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.62(d，1H，J＝5.24Hz)，8.16(m，1H)，8.03(d，1H，J＝8.09)，7.93(br s，1H)，7.69(t，1H，J＝8.02Hz)，7.63(d，1H，5.15Hz)，7.60(br d，1H，J＝8.48Hz)，7.50(dd，1H，J1＝8.17Hz，J2＝2.12Hz)，7.25(d，1H，J＝8.48Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 467.2([M+H]+，計算值467.1) 實施例13N-{3-[4-(3-乙基-吡嗪-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4-(3-乙基-吡嗪-2-基)-嘧啶-2-基]-4-甲基-苯-1，3-二胺(0.25g，0.82mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.16g，0.86mmol)、BOP(0.43g，0.98mmol)和DIEA(0.5mL，2.95mmol)的混合物在3.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入50mL水。將得到的混懸液在室溫下攪拌1小時。然后將其通過布氏漏斗過濾，風干，用2.0mL CH3OH研磨1小時并干燥。得到0.18g N-{3-[4-(3-乙基-吡嗪-2-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為灰白色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.40(s，1H)，9.05(s，1H)，8.64(d，1H，J＝2.34Hz)，8.56(m，2H)，8.28(m，1H)，8.25(d，1H，J＝8.47Hz)，7.96(d，1H，J＝8.09Hz)，7.87(d，1H，J＝2.30Hz)，7.78(t，1H，J＝7.36Hz)，7.53(dd，1H，J1＝8.82Hz，J2＝2.30Hz)，7.23(m，2H)，2.97(q，2H，J＝5.8Hz)，2.22(s，3H)，1.01(t，3H，J＝8.7Hz)。
API-MS m/z 479.5([M+H]+，計算值479.5)
實施例14N-(4-甲基-3-{4-[6-(3-嗎啉-4-基-丙基氨基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(500mg，1.03mmol)在5mL 3-嗎啉-4-基-丙胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。過濾收集黃色沉淀，用二氯甲烷和乙醚研磨并在真空下干燥。得到白色固體(275mg，產(chǎn)率45.2％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.43(s，1H)，9.40(s，1H)，8.76(d，J＝2.26Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.32(d，J＝5.27Hz，1H)，8.27(d，J＝9.80，2H)，8.10(d，J＝2.26，1H)，8.07(m，1H)，7.96(d，J＝7.9Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.47(dd，J＝2.02，8.29Hz，1H)，7.21(d，J＝13.19Hz，1H)，7.20(s，1H)，7.12(t，J＝5.27Hz，1H)，6.50(d，J＝9.04Hz，1H)，3.57-3.54(m，4H)，3.35-3.25(m，2H)，2.40-2.25(m，6H)，2.23(s，3H)，1.68(m，2H)API-MS m/z 592.3([M+H]+，計算值592.3)
實施例15N-(4-甲基-3-{4-[6-(吡啶-4-基氨基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺在室溫下將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)和吡啶-4-基胺(0.5g，5.3mmol)溶解在1mL DMSO中，然后加熱至110℃并攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀，用二氯甲烷和甲醇研磨，在真空下干燥。得到白色固體(8.5mg，產(chǎn)率15.2％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.49(s，1H)，9.33(d，J＝2.26Hz，1H)，9.10(s，1H)，8.91(d，J＝7.54Hz，2H)，8.875-8.80(m，3H)，8.59(d，J＝4.90，1H)，8.29(d，J＝7.9Hz，2H)，8.15(d，J＝1.88Hz，1H)，8.08(d，J＝8.67Hz，1H)，7.97(t，J＝7.53Hz，1H)，7.79(t，J＝7.54Hz，1H)，7.56(d，J＝5.27Hz，1H)，7.49(dd，J＝8.29，1.88Hz，1H)，7.25(d，J＝8.29Hz，1H)，7.02(d，J＝7.91Hz，2H)，2.23(s，3H)。
API-MS m/z 542.4([M+H]+，計算值542.5) 實施例163-二氟甲氧基-N-(3-{4-[6-(2-羥基-乙基氨基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-二氟甲氧基-苯甲酰胺(160mg，0.331mmol)在2ml 2-氨基-乙醇中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋并用乙酸乙酯萃取。濃縮合并的有機相。將深色殘余物用二氯甲烷和乙醚的混合物和甲醇研磨并在真空下干燥。得到淡黃色固體(66mg，產(chǎn)率39.3％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.31(s，1H)，8.75(d，J＝2.26Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.32(d，J＝5.65Hz，1H)，8.09(dd，J＝9.61，2.64Hz，2H)，7.86(d，J＝7.91Hz，1H)，7.65-7.55(m，1H)，7.45(ddd，J＝27.97，8.01，1.79Hz，1H)，7.38(m，1H)，7.23-7.12(m，3H)，6.56(d，J＝8.67Hz，1H)，4.80(t，J＝4.71Hz，1H)，4.15(q，J＝5.27Hz，1H)，3.53(q，J＝5.77Hz，2H)，3.16(d，J＝5.27Hz，1H)，2.21(s，3H)API-MS m/z 507.2([M+H]+，計算值507.2) 實施例17N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基]-4，N*1*-二甲基-苯-1，3-二胺(1.34g，4.298mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.8575g，4.51mmol)、BOP(2.28g，5.16mmol)溶解在10mL DMF中。然后將DIEA(2.8ml，15.47mmol)加入到上述混合物中，將混合物在室溫下攪拌過夜。用水稀釋該深色反應混合物。將沉淀用水、飽和碳酸鈉、水和冷甲醇洗滌。得到的產(chǎn)物為黃色固體(1.66g，產(chǎn)率80％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，9.13(d，J＝2.26Hz，1H)，9.05(s，1H)，8.57-8.50(m，2H)，8.28(d，J＝11.68Hz，2H)，8.10(d，J＝1.89Hz，1H)，7.97(d，7.91Hz，1H)，7.79(t，J＝7.91Hz，1H)，7.66(d，J＝8.29Hz，1H)，7.51-7.42(m，2H)，7.24(d，J＝8.29Hz，1H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 484.37，486.45([M+H]+，[(M+2)+H]+，計算值483.12，486.12)
實施例18N-{3-[4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4-(6-二甲基氨基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基]-4-甲基-苯-1，3-二胺(0.2g，0.6242mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.1246g，0.655mmol)、BOP(0.331g，0.749mmol)溶解在5mL DMF中。加入DIEA(0.4mL，2.247mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。用水稀釋該深色反應混合物。將沉淀進行硅膠色譜法處理，用80％乙酸乙酯己烷洗脫。得到的產(chǎn)物為黃色固體(180mg，產(chǎn)率61％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.86(d，J＝2.26Hz，1H)，8.72(s，1H)，8.34(d，J＝5.27Hz，1H)，8.28(d，J＝9.42Hz，2H)，8.21(dd，J＝9.04，2.26Hz，1H)，8.09(d，J＝2.26Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.10，2.07Hz，1H)，7.28-7.19(m，2H)，6.68(d，J＝9.04Hz，1H)，3.09(s，6H)，2.23(s，3H)API-MS m/z，493.5([M+H]+，計算值493.5) 實施例19N-(3-{4-[6-(2-甲氧基-乙氧基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺在室溫下將NaH(90.9mg，2.27mmol，60％)加入到2-甲氧基-乙醇(78.6mg，1.033mmol)的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，之后加入N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.1033mmol)。將反應混合物進一步在室溫下再攪拌4小時。將反應混合物用水稀釋并過濾沉淀，得到白色固體(64mg，100％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.95-8.85(m，2H)，8.55-8.35(m，2H)，8.30-8.24(m，2H)，8.10(s，1H)，7.97(d，J＝7.92Hz，1H)，7.79(t，J＝7.54Hz，1H)，7.45(d，J＝8.29Hz，1H)，7.36(d，J＝4.90Hz，1H)，7.23(d，J＝8.29Hz，1H)，6.93(d，J＝8.67Hz，1H)，4.43(t，J＝4.52Hz，2H)，3.66(t，J＝4.52Hz，2H)，3.29(s，3H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 524.5([M+H]+，計算值524.5) 實施例20N-(4-甲基-3-{4-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1g 1-甲基-哌嗪中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋，通過過濾收集黃色沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(55mg，產(chǎn)率97.2％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.95-8.85(m，2H)，8.55-8.35(m，2H)，8.30-8.24(m，2H)，8.10(s，1H)，7.97(d，J＝7.92Hz，1H)，7.79(t，J＝7.54Hz，1H)，7.45(d，J＝8.29Hz，1H)，7.36(d，J＝4.90Hz，1H)，7.23(d，J＝8.29Hz，1H)，6.93(d，J＝8.67Hz，1H)，4.43(t，J＝4.52Hz，2H)，3.66(t，J＝4.52Hz，2H)，3.29(s，3H)，2.23(s，3H)
API-MS m/z 524.5([M+H]+，計算值524.5) 實施例21N-{4-甲基-3-[4-(6-甲基氨基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在2ml甲胺(2M，在THF中)中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋，通過過濾收集黃色沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(31mg，產(chǎn)率63％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.78(d，J＝2.26Hz，1H)，8.70(s，1H)，8.35-8.24(m，3H)，8.15-8.05(m，2H)，7.97(d，J＝1.87Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.10，2.07Hz，1H)，7.24-7.18(m，2H)，7.10-7.00(m，1H)，6.49(d，J＝8.67Hz，1H)，2.81(d，J＝4.52Hz，3H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 479.2([M+H]+，計算值479.2) 實施例22N-{3-[4-(6-環(huán)丙基氨基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml環(huán)丙基胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀，在乙醚中重結(jié)晶。在真空下干燥后，得到白色固體(6mg，產(chǎn)率11.5％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.78(d，J＝2.26Hz，1H)，8.70(s，1H)，8.35-8.24(m，3H)，8.19(dd，J＝8.85，2.45Hz，1H)，8.08(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.10，1.70Hz，1H)，7.33(d，J＝2.26Hz，1H)，7.50-7.40(m，2H)，6.63(d，J＝8.67Hz，1H)，2.60-2.53(m，1H)，2.23(s，3H)，0.76-0.68(m，2H)，0.48-0.40(m，2H)API-MS m/z 505.3([M+H]+，計算值505.2) 實施例23N-{3-[4-(6-環(huán)戊基氨基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml環(huán)戊基胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀，在乙醚中重結(jié)晶。在真空下干燥后，得到白色固體(27mg，產(chǎn)率49.2％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.76(d，J＝2.26Hz，1H)，8.67(s，1H)，8.36-8.24(m，3H)，8.13-8.04(m，2H)，7.97(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.28，1.88Hz，1H)，7.25-7.15(m，2H)，7.11-7.04(m，1H)，6.48(d，J＝9.04Hz，1H)，4.21-4.05(m，1H)，2.23(s，3H)，2.00-1.85(m，2H)，1.75-1.35(m，6H)
API-MS m/z 533.3([M+H]+，計算值533.2) 實施例24N-{4-甲基-3-[4-(6-硫嗎啉-4-基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml硫嗎啉中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋并通過過濾收集沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(50mg，產(chǎn)率87.9％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.87(d，J＝2.26Hz，1H)，8.76(s，1H)，8.36(d，J＝5.27Hz，1H)，8.32-8.20(m，3H)，8.07(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.16Hz，1H)，7.78(t，J＝7.91Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.10，2.07Hz，1H)，7.28-7.18(m，2H)，7.11-7.04(m，1H)，6.91(d，J＝9.04Hz，1H)，4.25-3.94(m，4H)，2.65-2.56(m，4H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 551.5([M+H]+，計算值551.3) 實施例25N-{4-甲基-3-[4-(6-嗎啉-4-基-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml嗎啉中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋并通過過濾收集沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(46mg，產(chǎn)率83.3％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.89(d，J＝1.88Hz，1H)，8.77(s，1H)，8.36(d，J＝5.27Hz，1H)，8.32-8.20(m，3H)，8.08(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.53Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.29，2.26Hz，1H)，7.28-7.18(m，2H)，6.90(d，J＝8.67Hz，1H)，3.75-3.65(m，4H)，3.60-3.5(m，4H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 535.5([M+H]+，計算值535.3) 實施例26N-{3-[4-(4-羥基-3，4，5，6-四氫-2H-[1，2′]聯(lián)吡啶-5′-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml哌啶-4-醇中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋并通過過濾收集沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(54mg，產(chǎn)率98.4％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.86(d，J＝1.88Hz，1H)，8.73(s，1H)，8.43-8.18(m，4H)，8.10(s，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.53Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.47，0.94Hz，1H)，7.28-7.18(m，2H)，6.90(d，J＝9.04Hz，1H)，4.75-4.69(m，1H)，4.15-4.00(m，2H)，3.79-3.66(m，1H)，3.29-3.15(m，2H)，2.23(s，3H)，1.84-1.71(m，2H)，1.42-1.20(m，2H)；API-MS m/z 549.5([M+H]+，計算值549.3)
實施例27N-(3-{4-[6-(3-二乙基氧基-丙基氨基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml N*1*，N*1*-二乙基-丙烷-1，3-二胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋并通過過濾收集沉淀。在真空下干燥后，得到白色固體(80mg，產(chǎn)率100％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.50(s，1H)，8.76(d，J＝1.88Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.32-8.25(m，3H)，8.13-8.05(m，2H)，7.96(d，J＝7.53Hz，1H)，7.78(t，J＝8.10Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.10，1.70Hz，1H)，7.25-7.18(m，2H)，6.50(d，J＝9.04Hz，1H)，3.33-3.23(m，2H)，2.5-2.35(m，6H)，2.23(s，3H)，1.03-0.85(m，6H)；API-MS m/z 578.6([M+H]+，計算值578.4) 實施例28N-[4-甲基-3-(4-{6-[(吡啶-4-基甲基)-氨基]-吡啶-3-基}-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1mL C-吡啶-4-基-甲胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀并用乙醚洗滌。在真空下干燥后，得到白色固體(30mg，產(chǎn)率52.4％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.42(s，1H)，8.73(d，J＝1.88Hz，1H)，8.70(s，1H)，8.46(d，J＝6.03Hz，2H)，8.32(d，J＝5.27Hz，1H)，8.31-8.23(m，2H)，8.13(dd，J＝8.67，2.26Hz，1H)，8.05(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.82-7.69(m，2H)，7.46(dd，J＝8.29，2.26Hz，1H)，7.28(d，J＝5.65，2H)，7.24-7.15(m，2H)，6.61(d，J＝8.67Hz，1H)，4.57(d，J＝5.65Hz，2H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 556.5([M+H]+，計算值556.5) 實施例29N-(3-{4-[6-(2-甲氧基-乙基氨基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml 2-甲氧基-乙胺中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋，通過過濾收集沉淀并用乙醚洗滌。在真空下干燥后，得到黃色固體(65mg，產(chǎn)率66.9％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.42(s，1H)，8.76(d，J＝2.26Hz，1H)，8.69(s，1H)，8.35-8.25(m，3H)，8.13-8.05(m，2H)，7.96(d，J＝7.96Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.10，2.07Hz，1H)，7.25-7.13(m，3H)，6.56(d，J＝9.04Hz，1H)，3.48-3.43(m，4H)，3.26(s，3H)，3.17(d，J＝5.27Hz，2H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 523.5([M+H]+，計算值523.5)
實施例30N-(3-{4-[6-(2-羥基-丙硫基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-4-甲基-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺在室溫下將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)在1ml 1-巰基-丙-2-醇中于碳酸鉀存在下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀并用乙醚洗滌。在真空下干燥后，得到固體(11mg，產(chǎn)率20％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，9.12(d，J＝2.26Hz，1H)，8.94(s，1H)，8.47(d，J＝5.27Hz，1H)，8.35-8.25(m，3H)，8.08(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.28，1.88Hz，1H)，7.45-7.35(m，2H)，7.23(d，J＝8.28Hz，1H)，4.99(br，1H)，3.90-3.80(m，1H)，3.22(d，J＝6.02Hz，2H)，2.23(s，3H)，1.14(d，J＝6.02Hz，3H)API-MS m/z 540.4([M+H]+，計算值540.5) 實施例31N-(4-甲基-3-{4-[6-(吡啶-3-基氧基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.103mmol)、吡啶-3-醇(98.7mg，1.03mmol)、18-冠-6(20mg)、KOH(56mg)在1ml甲苯中于110℃下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋。通過過濾收集沉淀，用制備-TLC(100％乙酸乙酯)進一步純化。在真空下干燥后，得到白色固體(11.3mg，產(chǎn)率26.2％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.92(s，1H)，8.86(d，J＝2.26Hz，1H)，8.59(dd，J＝8.67，2.64Hz，1H)，8.53-8.45(m，3H)，8.30-8.22(m，2H)，8.08(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.69(dq，J＝8.38，1.38Hz，1H)，7.53-7.44(m，2H)，7.37(d，J＝5.27Hz，1H)，7.27-7.20(m，2H)，2.23(s，3H)API-MS m/z 543.3([M+H]+，計算值543.3) 實施例32N-(4-甲基-3-{4-[6-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-吡啶-3-基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-3-三氟甲基-苯甲酰胺在室溫下將NaH(90.9mg，2.27mmol，60％)加入到1-甲基-哌啶-4-醇(119mg，1.033mmol)在2mL DMF中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘，之后加入N-{3-[4-(6-氯-吡啶-3-基)-嘧啶-2-基氨基]-4-甲基-苯基}-3-三氟甲基-苯甲酰胺(50mg，0.1033mmol)。將反應混合物進一步在室溫下攪拌過夜。將反應混合物用水稀釋，過濾得到沉淀，將其用制備TLC(60％乙酸乙酯/己烷)進一步純化。在真空下干燥后，得到固體產(chǎn)物(50mg，產(chǎn)率86.3％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δ(ppm)10.44(s，1H)，8.90(d，J＝2.26Hz，1H)，8.88(s，1H)，8.46(d，J＝5.27Hz，1H)，8.39(dd，J＝8.85，2.45Hz，1H)，8.48-8.24(m，2H)，8.11(d，J＝1.88Hz，1H)，7.96(d，J＝7.91Hz，1H)，7.78(t，J＝7.72Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.28，1.88Hz，1H)，7.34(d，J＝5.27Hz，1H)，7.23(d，J＝8.29Hz，1H)，6.87(d，J＝8.67Hz，1H)，5.1-5.0(m，1H)，2.71-2.59(m，2H)，2.23(s，3H)，2.21(s，3H)，2.3-2.1(m，2H)，2.02-1.91(m，2H)，1.75-1.59(m，2H)API-MS m/z 563.4([M+H]+，計算值563.5) 實施例33N-[3-([4，5’]聯(lián)嘧啶-2-基氨基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺將N*3*-[4，5’]聯(lián)嘧啶-2-基-4-甲基-苯-1，3-二胺(0.23g，0.83mmol)、3-三氟甲基-苯甲酸(0.16g，0.87mmol)、BOP(0.44g，1.00mmol)和DIEA(0.5mL，3.00mmol)的混合物在3.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入40ml水。將得到的混懸液在室溫下攪拌1小時。然后將其通過布氏漏斗過濾，用5.0mL CH3OH研磨兩次并干燥。得到棕色固體。
將溶液通過快速色譜法純化，用1∶5 EtOAc∶己烷→1∶1EtOAc∶己烷洗脫。在真空下除去溶劑。得到0.14g N-[3-([4，5’]聯(lián)嘧啶-2-基氨基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺，為黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.50(s，1H)，9.40(s，1H)，9.18(s，1H)，9.05(d，1H，J＝3.78Hz)，8.71(d，1H，J＝4.16Hz)，8.46-8.27(m，3H)，8.17(s，1H)，8.00(d，1H，J＝7.14Hz)，7.83(dd，1H，J＝6.7Hz)，7.75(d，1H，J＝3.96Hz)，7.64-7.43(m，2H)，7.36-7.20(m，1H)，2.29(s，3H)。
API-MS m/z 451.2([M+H]+，計算值451.1)
實施例343-氟-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺將4-甲基-N*3*-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基)-苯-1，3-二胺(0.55g，1.98mmol)、3-氟-5-三氟甲基-苯甲酸(0.43g，2.08mmol)、BOP(1.05g，2.38mmol)和DIEA(1.25mL，7.20mmol)的混合物在9.0mL DMF中于室溫下攪拌過夜。向沉淀中加入25ml水。將得到的混懸液在室溫下攪拌1小時。然后將其通過布氏漏斗過濾，風干，用10.0mL CH3OH研磨1小時并干燥。得到0.80g 3-氟-N-[4-甲基-3-(4-吡嗪-2-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺，為淺黃色固體。
1H NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)10.49(s，1H)，9.49(s，1H)，9.10(s，1H)，8.79(s，2H)，8.62(d，2H，J＝4.81Hz)，8.10-8.20(m，3H)，7.96(d，1H，J＝8.66Hz)，7.63(d，1H，J＝4.78Hz)，7.48(dd，1H，J1＝8.46Hz，J2＝2.05Hz)，7.26(d，1H，J＝8.09Hz)，2.26(s，3H)。
API-MS m/z 469.1([M+H]+，計算值469.1)
生物學活性使用桿狀病毒表達系統(tǒng)純化來自昆蟲細胞的人序列的活性B-Raf、C-Raf和V599E B-Raf蛋白質(zhì)。在用IκB-α包被并且用Superblock封閉的96-孔微量培養(yǎng)板上試驗Raf抑制作用。使用磷酸-IκB-α特異性抗體(CellSignaling#9246)、抗小鼠IgG堿性磷酸酶綴合的二級抗體(Pierce#31320)和堿性磷酸酶底物ATTOPHOS(Promega，#S101)檢測IκB-α在絲氨酸36處的磷酸化。
實施例1-34的化合物中的每一種均以0.01至0.7微摩爾/升的IC50抑制野生型C-RAF和/或以0.04至1.5微摩爾/升的IC50抑制野生型B-RAF和/或以0.006至1.6微摩爾/升的IC50抑制突變型B-RAF(V599E)。
實施例D1檢測在人B-Raf基因中T1796A突變。
檢測引物GATTTTGGTCTAGCTACAGA第二引物GACTTTCTAGTAACTCAGCAG使用GENELUTE哺乳動物基因組DNA試劑盒(Sigma cat#G1N 350)從來自黑素瘤細胞系的人細胞分離基因組DNA。PCR反應使用來自Roche的PCR Core試劑盒(cat#1578 553)以50微升的總體積在PCR機(MJResearch，Model PTC100)上進行。PCR反應混合物含有5微升10X反應緩沖液、1微升10mM dNTPs、100-1000ng模板DNA、0.5微升Taq聚合酶(2.5-5單位)、1微升每種引物的31uM貯備液。
PCR條件如下95℃3分鐘 72℃10分鐘4℃
在擴增后，將8微升PCR反應混合物與2微升核酸樣品加樣緩沖液[BioRad cat#161-0767]混合。將10微升樣品加在1.5％瓊脂糖[GIBCO-BRL cat#15510-027]凝膠上，該凝膠含有0.3ug/ml溴化乙錠[Pierce cat#17898]。將分子量標準[來自Invitrogen cat#10380-012的100bp DNA梯]加到相鄰的泳道中。通過在TAE緩沖液(0.04M Tris-乙酸，0.01M EDTA.0.02M冰醋酸pH8.4)[Roche cat#1666690]中進行電泳分離DNA。電泳條件為120伏特30-40分鐘。在分離后，將凝膠暴露于紫外光，在AlphaImager2000記錄系統(tǒng)上照相。
一般而言，在凝膠中檢測到兩個條帶。較快遷移的條帶移動至100bp標志物之前，其代表引物。從T1796A突變體特異性PCR擴增得到的DNA預計大小為152bp，預計遷移到100bp標準和200bp標準之間。通過序列測定來確證PCR擴增產(chǎn)物。存在PCR擴增產(chǎn)物證明在模板DNA中存在T1796A突變。不存在PCR擴增產(chǎn)物表明在組織樣品中不存在突變。
通過該方法利用下表中適用于各突變的檢測引物和第二引物檢測了其它B-RAF突變



權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 其中R1為苯基或雜芳基；且R2為苯基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
2.式I的化合物，其中R1選自苯基、噻唑基、吡嗪基、嘧啶基或吡啶基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R2為至少在3-位被以下基團取代的苯基鹵素，單-或二-低級烷基取代的氨基；低級烷基；鹵素-低級烷基；低級烷氧基；鹵素-低級烷氧基；低級烷硫基；或鹵素-低級烷硫基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中R2為至少在3-位被氟、鹵素-低級烷基、鹵素-低級烷氧基或鹵素-低級烷硫基取代的苯基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為苯基、2-噻唑基、2-吡嗪基、5-嘧啶基或3-吡啶基。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R2為至少在3-位被氟、鹵素-低級烷基、鹵素-低級烷氧基或鹵素-低級烷硫基取代的苯基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其為式II的化合物 其中n為0、1或2；A1、A2和A3為C，或A1和A2為C且A3為N，或A1和A3為N且A2為C，或A1為C且A2和A3為N；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；被柞；-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；€基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R2為至少在3-位被以下基團取代的苯基鹵素，單-或二-低級烷基取代的氨基；低級烷基；鹵素-低級烷基；低級烷氧基；鹵素-低級烷氧基；低級烷硫基；或鹵素-低級烷硫基。
9.權(quán)利要求1的化合物，其為式(III)的化合物 其中n為0、1或2；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷酰基、氨基甲?；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；?、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其N-氧化物或可藥用的鹽。
10.權(quán)利要求9的化合物，其中R4為鹵素，單-或二-低級烷基取代的氨基；低級烷基；鹵素-低級烷基；低級烷氧基；鹵素-低級烷氧基；低級烷硫基；或鹵素-低級烷硫基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中R4為苯基鹵素-低級烷基、鹵素-低級烷氧基或鹵素-低級烷硫基。
12.權(quán)利要求9的化合物，其中R4為三氟甲基。
13.權(quán)利要求9的化合物，其中R3為-NR5R6，R5和R6之一為被-NR7R8取代的低級烷基，且R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中雜芳基或雜環(huán)基選自嗎啉代、硫嗎啉代、哌嗪基、哌啶基和吡啶基。
15.權(quán)利要求的化合物，其中-NR5R6為雜芳基或雜環(huán)基。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中-NR5R6為選自哌嗪基、4-甲基哌嗪基、哌啶基、4-羥基哌啶基、嗎啉代和硫嗎啉代的雜芳基或雜環(huán)基。
17.權(quán)利要求9的化合物，其中R8為低級烷基、被羥基或低級烷氧基取代的低級烷基或者雜芳基或雜環(huán)基。
18.權(quán)利要求9的化合物，其為式(IIIa)的化合物
19.權(quán)利要求9的化合物，其為式IIIb的化合物
20.權(quán)利要求7的化合物，其為式IV的化合物 其中n為0、1或2；R3為氫、-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；?、氨基甲酰基、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲酰基、巰基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其可藥用的鹽。
21.權(quán)利要求20的化合物，其中R4為鹵素，單-或二-低級烷基取代的氨基；低級烷基；鹵素-低級烷基；低級烷氧基；鹵素-低級烷氧基；低級烷硫基；或鹵素-低級烷硫基。
22.權(quán)利要求21的化合物，其中至少一個R4取代基相對于羰基在間位。
23.權(quán)利要求7的化合物，其為式(V)的化合物 其中n為0、1或2；R3為-NR5R6、鹵素、-O-R8、-S-R8或低級烷基，其是未取代的或被鹵素、羥基、低級烷氧基、-NR7R8或在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基取代；R4為氨基、單-或二-低級烷基取代的氨基，其中烷基是未取代的或被鹵素或低級烷氧基取代；鹵素、低級烷基、鹵素-低級烷基、低級烷氧基、鹵素-低級烷氧基、羥基、低級烷?；被柞；?、N-單-或N，N-二-取代的氨基甲?；€基、低級烷硫基或鹵素-低級烷硫基；R5、R6、R7和R8獨立地為氫、在環(huán)碳上連接的雜芳基或雜環(huán)基、低級烷基、C3-C8環(huán)烷基、C3-C8環(huán)烷基-低級亞烷基、被羥基、低級烷氧基、雜芳基、雜環(huán)基、氨基、單-或二-低級烷基氨基取代的低級烷基，或者R5和R6或R7和R8與氮一起形成雜芳基或雜環(huán)基；R8為雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基-低級亞烷基、雜環(huán)基-低級亞烷基、低級烷基或被羥基、低級烷氧基或-NR7R8取代的低級烷基；或者其可藥用的鹽。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中R4為鹵素，單-或二-低級烷基取代的氨基；低級烷基；鹵素-低級烷基；低級烷氧基；鹵素-低級烷氧基；低級烷硫基；或鹵素-低級烷硫基。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中至少一個R4取代基相對于羰基在間位。
26.治療患有以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的患者的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求1的式(I)化合物。
27.治療患有以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的患者的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求7的式(II)化合物。
28.治療患有以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的患者的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求9的式(III)化合物。
29.治療患有以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的患者的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求20的式(IV)化合物。
30.治療患有以通過MAP激酶信號通路的過量信號轉(zhuǎn)導為特征的疾病的患者的方法，該方法包括向患者施用抑制RAF激酶有效量的權(quán)利要求23的式(V)化合物。
31.制備式(I)化合物或者其N-氧化物或可藥用鹽的方法 其中R1為苯基或雜芳基；且R2為苯基；該方法包括按照以下流程圖通過使式VI化合物與式VII化合物反應制備式VIII化合物
32.式VII的化合物
33.式VIII的化合物 其中R1為苯基或雜芳基。
34.下式的化合物
全文摘要
本申請公開了抑制Raf激酶的式(I)的化合物(見圖)其中R
文檔編號A61P35/00GK1805748SQ200480016328
公開日2006年7月19日 申請日期2004年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月13日
發(fā)明者D·B·巴特, T·M·拉姆齊, M·L·薩比奧 申請人:諾瓦提斯公司